Dynaaminen ilmaus CEACAM7 vuonna esiasteleesioita mahalaukun syöpä ja sen ennusteen arvioinnissa yhdessä CEA

Dynamic ilmaus CEACAM7 vuonna esiasteleesioita mahalaukun syöpä ja sen ennusteen arvioinnissa yhdessä CEA
tiivistelmä
tausta
merkitys syöpä -antigeeni liittyvät solunkiinnitysmolekyyli 7 (CEACAM7) ilmentyminen mahakarsinoo- ja syövän esiasteita ja sen korrelaatio CEA ilme on harvoin aiemmin tutkittu. Tool menetelmät
CEACAM7 ja CEA ilmentymistä havaittiin immunohistokemiallisesti peräkkäisissä osissa 345 henkilöillä, joilla mahalaukun syöpä ja syövän esiasteita. Laser confocal analyysi suoritettiin määrittämään CEACAM7 ja CEA lokalisointi. Korrelaatio CEACAM7 ja CEA ilmaisutapoja kliinis parametrit analysoitiin tilastollisesti.
Tulokset
CEACAM7 ilmaisu korreloi pathologic luokittelu (P = 0,006), Lauren luokittelu (P = 0,023), ja CEA lauseke (Spearman R = 0,605, P < 0,001) mahakarsinoo-. CEACAM7 yhteistyössä paikallistaa CEA pääasiassa solukalvon syöpäsolujen. CEA ilmentyminen korreloi imusolmuke etäpesäke (P = 0,031). CEACAM7 ja CEA ilmaisun kasvoi vähitellen esiasteleesioita mahalaukun karsinoomat. Yhdistelmä CEACAM7 ja CEA ilmentyminen määritettiin itsenäisesti ennusta potilaiden mahalaukun syöpä mukaan monimuuttujamenetelmin (P = 0,001).
Johtopäätökset
CEACAM7 ilmentyminen korreloi kasvaimen erilaistumiseen ja CEA ilmaisun mahakarsinoo-. CEACAM7 ja CEA ilmaisun voivat synergistisesti edistää mahasyövän. Yhdistetty CEACAM7 ja CEA ilmaisun analyysi voi olla hyödyllinen postoperatiivisen ennustaja potilaille, joilla on mahalaukun syöpä.
Avainsanat
CEACAM7 mahakarsinoo- esiasteleesioita ennustetta CEA Taustaa
syvällinen tuntemus genotyyppisen ja ilmiasun mahakarsinooman ja syövän esiaste on erittäin tärkeää estää niiden kehitystä, rajoittamalla niiden etenemistä ylempään palkkaluokkaan kasvain kun he kehittävät ja tarjoavat prognostisia tietoa. Mahakarsinoomat on yleensä jaettu suoliston-tyypin ja hajanainen-tyyppiä Lauren [1]. Suoliston-tyyppinen syöpä ajateltiin näyttää pääasiassa suoliston fenotyyppi, koska se edeltää precancerous vaiheessa, tunnettu siitä, että peräkkäiset vaiheet atrofisen gastriitin, suoliston metaplasia, intraepiteliaalinen neoplasia (GIN), ja intramucosal karsinooma [2, 3]. GIN on tunnustettu tärkeäksi precancerous vaurio, ja luokitellaan joko korkean tai matalan grade mukaan sekä Wienin [4] ja WHO: n [5] luokituksia. On raportoitu, että vallitseva histologinen tyyppi voi vaihtua eriytetty sen eriytymättömiä tyyppiä kuin kasvainten edistystä [6]. Ohkura, et al kertoi myös, että histologinen monimuotoisuus lisääntynyt, kun mahakarsinoomat kasvoi tai tunkeutuneet submukoosassa [7]. Viimeaikainen edistys molekyylibiologiassa on osoittanut, että fenotyyppinen monimuotoisuus kasvainten liittyy vastaavaan monimuotoisuutta geenin ilmentymisen [8-10]. Muutokset ilmentyminen kasvaimen erityisten biologisten merkkiaineiden syövän esiasteita ja eri eriytetty mahakarsinoomat voi auttaa meitä ymmärtämään muutosta histologiseen heterogeenisuus ja taustalla molekyylitason mekanismi.
Karsinoembryonaalisesta antigeeni (CEA) perheen geenien on osoitettu ilmaistava erilaisia ​​epiteelin johdettujen kasvainten [11], ja niiden toiminnallinen vapauttaminen on osoitettu edistää etäpesäkkeiden eläinmalleissa [12]. Yksi erityinen CEA-geeniperheen jäsen, CEA soluadheesiomolekyylille-7 (CEACAM-7), säätelee normaali solujen erilaistumista [11]. Vapauttaminen CEACAM-7 ilmentyminen on osoitettu tapahtuvan varhaisen ja peräsuolen kasvaimen synnyssä; pieneni CEACAM-7 ilmentyminen osoitettiin adenoomien, hyperplastic polyypit, ja poikkeava crypt pesäkkeitä [11, 13]. CEA, toinen jäsen karsinoembryonisen antigeeni perhe edustaa tuumorimarkkeri käytetty laajalti hoidossa peräsuolen syöpä [14-16]. Lisääntynyt CEA tasot olivat ensimmäiset tunnistettu indikaattori uusiutuva sairaus 81% [17] ja 89% [18] paksusuolisyövän potilaille. Sekä suoliliepeen ja reuna-tasot CEA olivat korkeammat kasvainten laskimoiden osallistuminen, suuri halkaisija, ja pitkälle edennyt kolorektaalisyöpää [19]. Lisääntynyt CEA-arvot on myös raportoitu muita epiteelin pahanlaatuisten kasvainten, kuten rinta-, keuhko-, ja haiman [20].
Toistaiseksi vain vähän tietoa on saatavilla CEACAM7 ilmaisun mahalaukun hyvänlaatuinen ja neoplastisia vaurioita. Yksi tutkimus raportoi, että CEACAM7 mRNA tasot säädellään ylöspäin syöpä- mahalaukun epiteelisolujen [21]. Kuitenkin merkitys CEA ja CEACAM7 ilmentymistä syövän esiasteita mahalaukun karsinooma on huonosti ymmärretty. Lisäksi suhde CEACAM7 ja CEA on epäselvä, mutta ne kuuluvat samaan CEACAM perheen.
Tässä tutkimuksessa tutkimme korrelaatio CEACAM7 ja CEA ilmaisun, ja niiden suhdetta eri kliinis mahalaukun karsinooma, mukaan lukien potilaan eloonjääminen. Vertasimme ekspressiomalleja CEACAM7 ja CEA systemaattisesti normaalissa limakalvo, krooninen atrofinen gastriitti, intraepiteliaalisten neoplasia (GIN), ja karsinoomien mahan kanssa peräkkäisen kudoksen mikrosiru (TMA) kohdat. Tietääksemme tämä on ensimmäinen immunohistokemiallinen tutkimus CEACAM7 ilmaisun mahakarsinoo- ja syövän esiasteita. Tool Menetelmät
Potilaat
Tutkimukseen osallistui 345 potilasta, joista 145 potilaalla on mahasyöpä joille tehtiin ensisijaisesti kirurginen resektio vuodesta 2006 ja 2009 Xijing sairaalan Forth Military Medical University (Xi'an, Kiina), 100 potilasta, joilla epiteelinsisäisen kasvaimet (55 matala-asteinen ja 45 korkea-asteen), 50 potilasta, joilla on krooninen atrofinen gastriitti, ja 50 potilasta, joilla oli normaali mahan limakalvon . 200 potilasta, joilla hyvänlaatuinen ja syövän esiaste oli saanut mahan endoskooppinen tarkastus ja koepala vuosien 2008 ja 2010. Xijing sairaalassa. Kaikki diagnooseja, kuten erilaistuminen tila, tehtiin perustuen patologian ja genetiikan kasvaimet Ruuansulatuskanavan kolmella patologit [22]. GIN on luokiteltu joko korkean tai matalan grade mukaan sekä Wienin [4] luokituksia. Seuranta suoritettiin 145 potilaalla on mahasyöpä hengissä analyysiä. Nämä potilaalle tehtiin subtotaalinen gastrectomy D2 imusolmukedissektiossa at Xijing sairaalassa vuodesta 2006 vuoteen 2009. Keski-ikä oli 56,4 vuotta (vaihteluväli 32-74 vuotta). Kaikki potilaat saivat leikkauksen jälkeisen kemoterapiaa käyttäen fluorourasiili-pohjainen hoito. Ei potilaat saivat ennen leikkausta kemoterapiaa tai koki sädehoitoa. Seuranta tehtiin potilailla alkaen leikkaus kunnes joko kuolin- tai 30 maaliskuu 2011, jolloin seurannan ajan pituus vaihtelee 5-67 kuukautta (keskiarvo, 31 kuukautta). Niissä tapauksissa hävisi seuranta tai jotka kuolivat muun syyn kuin mahasyövän pidettiin sensuroitiin tiedot analysointiin eloonjäämisaste. Kaikissa tapauksissa, tietoinen suostumus saatiin käyttöön resekoituun kasvaimen yksilöitä. Tutkimus hyväksyi Moraalinen ja eettinen komitea Xijing sairaalan Forth Military Medical University.
Kudossiruina
kudosten mahakarsinooman tai syövän esiasteita tehtiin kudokseen mikroriveissä by Tissue Microarrayer (Beecher Instruments, Silver Spring, USA ™), menetelmän mukaisesti ja Kononen et al [23]. Lyhyesti, ydin kudosnäytteistä (halkaisija 2 mm) otettiin yksittäisistä parafinoidut kudoksissa (luovuttaja lohkoa) ja järjestetty uusi vastaanottaja parafiiniblokkiin (kudoksen array lohko) käyttäen trephine laitetta. Värjäytymisen tulokset eri aloilla näissä kudoksen array lohkojen osoitti erinomaista sopimusta. Yksi ydin valittiin kulloinkin analysoitavaksi. Me on määritelty riittävän tapauksessa kasvain, joka käytössä 10% ytimen pinta-ala.
Ensisijainen vasta immunohistokemiaa
Hiiren anti-ihmisen CEACAM7 vasta-aine [BAC2] (ab26281) ja kanin anti-humaani CEA-vasta-aineen (ab-15157 ) oli kaikki hankittiin Abcam plc. (Cambridge, UK).
Immunohistokemia
Immunohistokemia suoritettiin 4-lm-paksu, rutiininomaisesti käsitelty, parafiinileikkeillä sarjassa. Lyhyesti, kun paistaminen paneelin 60 ° C: ssa tunti, parafiiniin, formaliinilla kiinteä kudosnäytteet parafiini ksyleenillä ja nesteytyksestä kautta kaltevuus etanolia upottamalla. Endogeeninen peroksidaasiaktiivisuus pysäytettiin 3% (tilavuus /tilavuus) vetyperoksidia metanolissa 10 minuutin ajan, mitä seurasi kolme 3 minuutin pesulla fosfaattipuskuroidulla suolaliuoksella (PBS). Tätä seuraa vaihe, antigeenin haku. Objektilasit upotettiin 0,01 mol /l sitraattipuskuria (pH 6,0) ja sijoitettiin mikroaaltouunissa 30 minuutin ajan. Pesun jälkeen 0,01 mol /l fosfaattipuskuroitua suolaliuosta (PBS, pH 7,4), leikkeet blokattiin sitten 10% (tilavuus /tilavuus) normaalia vuohen seerumilla PBS: ssä 30 minuuttia, mitä seurasi inkubaatio kosteassa kammiossa 4 yön yli primaarisen vasta-aineen CEACAM7 (1: 100, ab26281, Abcam) tai CEA 01:10, ab-15157, Abcam) laimennettuna PBS: ään, joka sisälsi 1% (paino /tilavuus) naudan seerumin albumiinia (BSA). Negatiiviset kontrollit tehtiin korvaamalla primaarinen vasta-aine, jossa esi-immuuni hiiren seerumin. Kolmen 3 minuutin pesulla PBS: llä, leikkeet käsiteltiin toisen anti-hiiri-vasta-ainetta (PV-6002, Santa Cruz) 30 minuutin ajan huoneenlämpötilassa, minkä jälkeen vielä kolme 3 minuutin pesua PBS: llä. Reaktiotuote visualisoitiin diaminobentsidiini (DAB, ZLI-9032, ZSGB. Peking, Kiina) huoneenlämpötilassa 2 minuuttia. Oltuaan vastavärjättiin Harris hematoksyliinillä (ZLI-9039, ZSGB. Peking, Kiina) 3 min, ja huuhdottiin vesijohtovedellä, leikkeet välittömästi kuivattu peräkkäisillä upottamalla kaltevuus etanolin ja ksyleenin, ja asennettu pernount ja peitinlaseja. Kuvat saatiin valomikroskoopilla (Olympus BX51, Olympus, Japani) varustettu DP70 digitaalikameralla.
Arviointi Värjäys
arviointia varten solujen värjäytymisen, leikkeet tutkittiin kaksi riippumatonta patologia ilman aiempaa tietoa kliinis tilan yksilöitä. Expression of CEACAM7 ja CEA arvioitu suhde positiivisia soluja per näyte (R) ja värjäyksen voimakkuuden (I). Suhde positiivisia soluja per yksilö pisteytettiin 0 värjäykseen < 1%, 1 värjäykseen 2-25%, 2 värjäykseen 26-50%, 3 värjäykseen 51-75%, ja 4 värjäys > 75% soluista tutkittiin. Intensiteetti luokiteltiin seuraavasti: 0, ei signaalia; 1, heikko; 2, kohtalainen; ja 3, vahva värjäytyminen. Kokonaispistemäärä (R x I) 0-12 lopulta laskettiin ja luokiteltiin negatiiviseksi (-score: 0-2) ja positiivisen (+, 3-12).
Immunofluoresenssi ja laser konfokaali skannaus
paistamisen jälkeen paneelissa 60 ° C: ssa tunnin, kohdat poistettiin parafiini ksyleenillä ja nesteytyksestä kautta kaltevuus etanolia upottamalla. Tätä seuraa vaihe, antigeenin haku. Objektilasit upotettiin 0,01 mol /l sitraattipuskuria (pH 6,0) ja sijoitettiin mikroaaltouunissa 30 minuutin ajan. Pesun jälkeen 0,01 mol /l fosfaattipuskuroitua suolaliuosta (PBS, pH 7,4), näytteitä inkuboitiin estopuskurilla (5% normaalia vuohen seerumia, 1% naudan seerumin albumiinia ja 0,1% Triton X-100), yhden tunnin ajan huonelämpötila. Näytteet inkuboitiin sitten primaaristen vasta-aineiden laimennettuna blokkauspuskuriin 4 ° C: ssa yön yli, minkä jälkeen 3 kertaa PBS-liuoksessa kulloinkin 10 minuuttia. Lopuksi näytteet värjättiin sekundaarisia vasta-aineita laimennettuna blokkauspuskuriin 30 minuuttia, mitä seurasi 3 pesua PBS: llä. Peitelaseja asennettu diat Prolong mikroskooppipreparaatin haalistumista estävää (Invitrogen). Vasta-aineet, joita käytetään immunovärjäyksellä ovat hiiren anti-CEACAM7 (1: 100, ab26281, Abcam), kanin anti-CEA (01:10, ab-15157, Abcam), toisen vasta-aineita käytettiin vuohen anti-hiiri-IgG Alexa 549 (1: 300 , Invitrogen), vuohen anti-kani IgG Alexa 488 (1: 300, Invitrogen), DAPI (1: 1000, Molecular Probes). Vieressä normaaleissa kudoksissa käytettiin negatiivisina kontrolleina (20 mm: n päässä syöpäkudoksessa). Immunovärjättiin kudokset visualisoitiin ja kuvat otettiin kiinni käyttämällä FlUOVIEW (FVLIOi, OLYMPUS.
Tilastollinen analyysi
Kaikki tilastolliset analyysit suoritettiin käyttäen IBM SPSS 19.0 ohjelmistolla. Mittaustiedot analysoitiin Studentin t tai yksisuuntainen ANOVA testi, kun taas kategorinen data tutkittiin käyttämällä theχ2 tai epäparametrisia testi. Eloonjäämiskäyrät arvioitiin käyttämällä Kaplan-Meier menetelmällä, ja log-rank-testiä käytettiin laskemiseen eroja käyrien. Monimuuttuja-analyysi käyttämällä Coxin suhteellisten riskien regressiomallia suoritettiin arvioimaan prognostisia arvot proteiinin ilmentymisen. Korrelaatiokerroin välillä ilmentymisen CEACAM7 ja CEA arvioitiin käyttäen Spearmanin korrelaatiota menetelmällä. tilastollinen merkitsevyys asetettiin arvoon P < 0,05.
tulokset
Co-ilmentymisen CEACAM7 ja CEA mahalaukun karsinooma
Immunohistokemia suoritettiin peräkkäistä leikettä 145 mahakarsinoomat käyttäen joko anti-CEACAM7 tai anti-CEA-vasta-ainetta (kuvio 1). Immunohistokemiallinen analyysi osoittaa, että 100 145 (69,0%) näytteet luokiteltiin CEACAM7-negatiivinen (kuvio 1A), ja 45 145 (31,0%) näytteet luokiteltiin CEACAM7-positiivisia (kuvio 1C, 1E). CEACAM7 ilmentyminen oli yhtäpitävä CEA ilmaisua 80,0% (116 145) mahalaukun karsinooma tapauksista (Spearman R = 0,605, P < 0,001). CEACAM7 ja CEA kaksinkertainen positiivisuus havaittiin 40 tapauksessa, double-negatiivisuus havaittiin 76 tapauksessa, ja 29 tapausta havaittiin olevan joko CEACAM7-positiivisia tai CEA-positiivisia vain. Ilmaisu korrelaatiokerroin arvioitiin käyttäen Spearmanin menetelmällä. Spearman R-arvo oli 0,605 (P < 0,001), mikä osoittaa läheinen korrelaatio CEACAM7 ja CEA ilmaisun mahakarsinoomat. Koska se on hankalaa ja tarpeetonta tarkistaa lokalisoinnin kahden antigeenin immunofluoresenssilla kaikissa 40 karsinooma kudoksissa, jotka ovat positiivisia sekä CEACAM7 ja CEA, tutkimme niiden sijaintia seitsemässä kudosleikkeiden, jotka valittiin satunnaisesti 40 syöpäkudosten kohdat. Laser konfokaalimikroskopialla analyysi osoitti, että ne yhteistyössä lokalisoitu kalvo ja solulimassa syöpäsolujen (kuvio 2A, B, C, D). Kuva 1 Co-ilmentymä CEACAM7 ja CEA mahakarsinoomat. A & B, Negative värjäytymistä CEACAM7 (A) ja CEA (D) on hyvin eriytetty mahakarsinoo-. C &D, CEACAM7 (C) ja CEA (D) värjäys oli negatiivinen hyvin eriytetty alue (syöpäsolut vaihteli rauhasen kaltainen muoto) ja positiivinen huonosti eriytetty alue (ruskea väri) on mahalaukun syöpä. E & F, positiivinen värjäytymistä CEACAM7 (E) ja CEA (F) huonosti eriytetty mahakarsinoo-. A & B, C &D, ja E & F ovat vierekkäin leikesarjojen, vastaavasti. (DAB kromogeenina, vastavärjätään Harris hematoksyliinillä, 50X).
Kuva 2 kolokalisaation CEACAM7 ja CEA kudoksessa mahakarsinooman (Laser konfokaalimikroskopia analyysin edustavaa osaa). Positiivinen lauseke CEACAM7 (A, punainen) tai CEA (B, vihreä) on kalvo ja solulimassa syöpäsolujen (punainen). C, yhdistetyn kuvan ilman tumavärjäystä; koekspressio CEACAM7 ja CEA havaitaan (keltainen). D, yhdistetyn kuvan kanssa tuma värjätään DAPI (sininen). (200X).
Korrelaatio CEACAM7 ja CEA ilmaisutapoja kliinis mahalaukun karsinooma
suhde CEACAM7 ja CEA ilmaisun ja eri kliinis ominaisuuksia mahakarsinoomat on yhteenveto taulukossa 1. CEACAM7 oli useammin ilmaistu huonosti eriytetty kasvaimet kuin hyvin ja kohtuullisesti erilaistunut mahakarsinoomat (41,3% vs. 20,0%, P = 0,006). CEACAM7 positiivisuus oli merkittävästi korkeampi diffuusi-tyypin mahakarsinoomat kuin suoliston-tyypin mahakarsinoomat, (39,7% vs. 22,2%, P = 0,023). CEA ilme korreloi merkitsevästi imusolmuke etäpesäke (P = 0,031) .table 1 Korrelaatio CEACAM 7 ja CEA ilmaisutapoja kliinis ominaisuuksiin mahakarsinooman.
muuttujat
CEACAM 7
P arvo
CEA
P-arvo

Negatiivinen
(n = 100)
Positiivinen
(n = 45)

Negatiivinen
(n = 81)
Positiivinen
(n = 64)

Sukupuoli
Male
74(67.3%)
36(32.7%)
0.437
58(52.7%)
52(47.3%)
0.178
Female
26(74.3%)
9 (25,7%)
23 (65,7%)
12 (34,3%) B Ikä (vuotta) B (keskiarvoja ± SD) B 59,8 ± 10,4
58,1 ± 13,3
0,608
60,3 ± 9,4
58,9 ± 12,9
0,512
sijainti kasvain
Ylä
12 (60,0%) B 8 (40,0%) B 0,601
9 (45,0%)
11 (55,0%)
0,544
Lähi
49 (69,0%)
22 (31,0%)
40 (56,3%)
31 ( 43,7%) B alempi
39 (72,2%)
15 (27,8%)
32 (59,3%)
22 (40,7%) B Histologia †
Well ja Moderate
56(80.0%)
14(20.0%)
0.006
43(61.4%)
27(38.6%)
0.741
Undifferentiated
44(58.7%)
31(41.3%)
38 (50,7%)
37 (49,3%) B Lauren luokittelu
Intestinal
56(77.8%)
16(22.2%)
0.023
39(54.2%)
33(45.8%)
0.683
Diffuse
44(60.3%)
29(39.7%)
42 (57,5%)
31 (42,5%) B syvyys kasvain
T1-T2
28 (75,7%)
9 (24,3%) B 0,307
20 ( 54,1%)
17 (45,9%) B 0,797
T3-T4
72 (66,7%)
36 (33,3%)
61 (56,5%)
47 ( 43,5%) B etäpesäke
Negative
59(72.8%)
22(27.2%)
0.257
37(67.3%)
18(32.7%)
0.031
Positive
41(64.1%)
23(35.9%)
44 (48,9%)
46 (51,1%) B Lymfaattiset invaasio
Negative
44(75.9%)
14(24.1%)
0.143
35(60.3%)
23(39.7%)
0.375
Positive
56(64.4%)
31(35.6%)
46 (52,9%)
41 (47,1%)
Laskimoiden invaasio
Negative
52(70.3%)
22(29.7%)
0.729
43(58.1%)
31(41.9%)
0.578
Positive
48(67.6%)
23(32.4%)
38 (53,5%)
33 (46,5%) B kasvain vaihe
I- II
40 (62,5%)
24 (37,5%) B 0,135
34 (53,1 %)
30 (46,9%)
0,555
III IV
60 (74,1%)
21 (25,9%)
47 (58,0%)
34 (42,0 %) B HUOM: Pearson n X2 koe tehtiin saada P-arvo, paitsi että Ages verrattiin Studentin-T testi. † Hyvin = hyvin eriytetty karsinooma; kohtuullisesti = kohtuullisesti erilaistunut karsinooma; eriytymättömiä = huonosti eriytetty syöpä, sinettisormus cell carcinoma tai mucinous karsinooma.
Dynaaminen ilmaus CEACAM7 ja CEA normaalissa limakalvolla ja syövän esiasteita
tulokset CEACAM7 ja CEA ilmentymistä normaalissa limakalvolla ja syövän esiasteita oli koottu taulukkoon 2. Positivity for CEACAM7 ekspressio havaittiin kroonisen atrofisen gastriitin (12%, 6/50), huonolaatuisen Gin (29,1%, 16/55), ja korkea-asteen Gin (28,9%, 13/45). CEACAM7 ilmentymistä ei havaittu normaalissa limakalvon (0/50). Positiivisuutta CEACAM7 ilmaisun huono laatu Gin oli huomattavasti korkeampi kuin kroonisen atrofisen gastriitin (P = 0,032), ja CEACAM7 oli useammin ilmaistu atrofinen krooninen gastriitti kuin normaalissa mahalaukun limakalvon (P = 0,012), mutta ei ollut merkittävää eroa CEACAM7 ilmaisu välillä huonolaatuisen GIN ja korkea-asteen Gin (P = 0,982). CEA positiivisuus havaittiin normaaleissa limakalvo (6%, 3/50), krooninen atrofinen gastriitti (8%, 4/50), huonolaatuisen Gin (57,1%, 13/55), ja korkea-asteen Gin (60%; 20/45). CEA positiivisuus huonolaatuisia GIN oli huomattavasti korkeampi kuin kroonisen atrofisen gastriitin (P = 0,030), mutta oli alhaisempi kuin korkealaatuista GIN (P = 0,028). Ei ollut mitään merkittävää eroa CEA positiivisuuden välillä normaalin limakalvon ja krooninen atrofinen gastriitti (P ​​= 0,500). CEACAM7 ekspressio paikallistettiin luminaalipinnalla kroonisen atrofisen gastriitin ja Gin (kuvio 3C, E, ja 3G), ei immunoreaktion havaittu normaalissa limakalvon (kuvio 3A). CEA paikallistettiin luminaalipinnalla normaalin limakalvon krooninen atrofinen gastriitti, matala-asteista GIN, ja korkea-asteen Gin (kuvio 3B, D, F, ja 3H), kun taas sekä CEA ja CEACAM7 ilmentyminen paikallistettiin koko pinnalle mahan syöpäsoluja (kuva 3I ja 3J) Taulukko 2 välinen suhde CEACAM7 ja CEA ilmaisutapoja eri mahalaukun kudosten
kudokset

N
CEACAM7


CEA


negatiivinen
Positiivinen
P-arvo *
Negative
Positiivinen
P-arvo *
Normaali limakalvon
50
50 (100%) B 0 (0%) B 0,0121
47 (94%) B-3 (6%) B NS4
Krooninen atrofinen gastriitti
50
44 (88,0%)
6 (12,0%) B 0,0322
46 (92%) B-4 (8%) B 0,0305
Low grade GIN
55
39 (70,9%)
16 (29,1%) B NS3
42 (76,4%)
13 (23,6%) B 0,0286
Luja GIN
45
32 (71,1%)
13 (28,9%)
25 (55,6%)
20 (44,4%) B * χ2 testi. N-tapausten määrä, GIN-mahalaukun intraepiteliaalisten neoplasia. NS-merkityksetön (P > 0,05). 1 Verrattuna normaaliin limakalvo, CEACAM7 positiivisuus oli merkitsevästi korkeampi krooninen atrofinen gastriitti (P ​​= 0,012); 2 verrattuna krooninen atrofinen gastriitti, CEACAM7 oli useammin ilmaistu Low grade Gin (P = 0,032); 3There ollut merkitsevää eroa CEACAM7 ilmaisun välillä Matala-asteisia GIN ja korkea laatu Gin (P = 0,982); 4There ollut merkittävää eroa CEA ilmaisun välillä normaalin limakalvon ja krooninen atrofinen gastriitti (P ​​= 0,500); 5Compared on krooninen atrofinen gastriitti, CEA oli useammin ilmaistu Heikompilaatuinen Gin (P = 0,030); 6 Verrattuna Low grade GIN, CEA oli useammin ilmaistu Luja Gin (P = 0,028).
Kuvio 3 Eri ekspressiomalleja CEACAM7 ja CEA mahalaukun ei-neoplastisia vaurioita ja mahakarsinoomat. Peräkkäistä leikettä käytettiin analyysiä varten. Ei immunoreaktion varten CEACAM7 havaittiin normaalissa limakalvon (A). CEACAM7 paikallistettiin apikaalisella pinnalla kroonisen atrofisen gastriitin (C), huono laatu GIN (E) ja korkea laatu GIN (G). CEA paikallistettiin apikaalisella luminaalipinnalla normaalin limakalvon (B), krooninen atrofinen gastriitti (D), huonolaatuisen GIN (F), ja korkea-asteen GIN (H). Molemmat CEACAM7 (I) ja CEA (J) paikallistettiin koko pinnalle mahalaukun syöpäsoluja. (DAB kromogeenina, vastavärjätään Harris hematoksyliinillä, 200X).
Survival Analysis
Yhden vuoden ja kolmen vuoden eloonjäämisluvut olivat 92,0% ja 54,1%, vastaavasti, CEACAM7 ja CEA kaksinkertainen negatiivista potilasta, 98,3% ja 45,1%, vastaavasti, CEACAM 7 ja CEA yhden positiivisen (joko CEACAM7 positiivinen tai CEA positiivinen) potilaista ja 64,0% ja 8,5% varten CEACAM7 ja CEA kaksinkertainen positiivisten potilaiden. Merkitsevää eroa ei havaittu eloonjäämisaste kaksinkertaisen negatiivisen ja double-positiivisilla potilailla (kuva 4, P = 0,001). Ei kuitenkaan havaittu merkittävää eroa välillä double-negatiivinen ja single-positiivisilla potilailla (kuva 4, P = 0,391). Monimuuttuja-analyysi osoitti, että kaksinkertaisen positiivisuutta CEACAM7 ja CEA lauseke (P = 0,004) ja kasvaimen vaihe (P = 0,001) olivat tekijät itsenäisesti yhteydessä heikompaan potilaan ennusteeseen (taulukko 3). Kuva 4 Kaplan-Meier -käyrät postoperatiivisen selviytymisen. Keskimääräinen elinaika potilailla, joilla on CEACAM7 ja CEA kaksinkertainen positiivisuus oli lyhyempi kuin potilailla, joilla on kaksinkertainen kielteinen (log-rank-testi: p = 0,001). Mutta ei ollut merkittävää eroa eloonjäämisajan mediaanin joilla oli yhden-positiivisuus ja tupla-negatiivisuuden (P = 0,391).
Taulukko 3 Monimuuttuja-analyysi perustuu Coxin suhteellisten riskien mallia
Muuttuva
riskisuhde (95%
luottamusväli)
P-arvo
Kasvain vaiheen III, IV vs I, II
2.240 ( 1,501-3,343) B 0,001
CEACAM7 (+) CEA (+) vs. CEACAM7 (-) CEA (-) B 1,545 (1,153-2,069) B 0,004
keskustelu
CEA yksi käyttökelpoinen kasvaimen merkkiaineita karsinooman [24], ja sen ilmentyminen havaittiin korreloivan kliinis-, kuten laskimoiden osallistuminen, suurempi halkaisija, ja pitkälle edennyt paksusuolen karsinoomien [25, 26]. Paksusuolen syöpä, CEA on voimistunut, mutta CEACAM7 kerrottiin vaimentua [11], on mielenkiintoista, että ne molemmat yliaktiivista mahasyövän, ja koekspressoidusta useimmissa kudoksissa. viittaa siihen, että CEACAM7 voi pelata erilaisia ​​rooleja eri syöpiä. Kuten CEACAM7 ilmentyminen havaittiin läheisesti korreloivat CEA ilmaisua mahakarsinoo- tässä tutkimuksessa, Tarkistimme vastaavuutta eri kliinis-, ja totesi, että CEACAM7 ilmentyminen oli yleisempää huonosti eriytetty mahakarsinoomat kuin hyvin ja kohtalaisesti eriytetty karsinoomat (P = 0,006), ja myös korreloi Laurenin luokituksen (P = 0,023). On raportoitu, että vallitseva histologinen tyyppi voi vaihtua eriytetty sen eriytymättömiä tyyppiä kuin kasvainten edistystä [6], Ohkura, et al [17] myös, että histologinen monimuotoisuus lisääntyy mahakarsinoomat kasvaa tai hyökätä submukoosasta. Niinpä arveltu, että CEACAM7 voitaisiin edistää aggressiivisuutta ja etenemisen mahakarsinooman kautta säädellään kasvain solujen erilaistumista, ja tämä vaatii lisätutkimuksia.
Koska suoliston-tyyppinen syöpä ajatellaan edeltää precancerous vaihe ominaista peräkkäiset vaiheet atrofisen gastriitti, suoliston metaplasia, Gin, ja intramucosal karsinooma, olisi suuri merkitys selventää dynaaminen ilmaus CEACAM7 ja CEA normaali mahan limakalvoa, krooninen atrofinen gastriitti, Gin, ja mahalaukun karsinooma. Huomasimme, että verrattuna mahalaukun normaali limakalvo, CEACAM7 ilmentyminen oli merkittävästi lisääntynyt kroonisen atrofisen gastriitin ja kaikki muut vauriot, ja CEA ilmentyminen lisääntyi merkitsevästi giniä ja mahalaukun syöpä. Nämä tulokset osoittavat, että CEACAM7 voi olla merkitystä mahasyövän jo varhaisessa vaiheessa, erityisesti krooninen atrofinen gastriitti vaiheessa. Lisäksi CEA voivat tehdä yhteistyötä CEACAM7 klo giniä vaiheessa. Vastaa meidän tuloksia, CEA hiiret osoittivat massiivisesti suurennettu colons käsittää jatkuvan mosaiikki vaikean liikakasvun, dysplasia, ja sahalaitaiset adenomatoottisen morfologia, mikä viittaa siihen, että säätely ylöspäin CEA voisi olla väline askel ihmisen syövän etenemisessä [27]. Näyttää siltä, ​​että säätely ylöspäin CEACAM7 tai CEA ilmentyminen voi olla varhainen molekyyli- tapahtuma kasvainten synnyssä, ja molemmat proteiinit voitaisiin käyttää seulonta biomarkkereita on syövän esiasteita tunnistaa potilaat, joilla on suuri riski pahanlaatuisia muuntaminen. Sen sijaan, vähentynyt ilmentyminen CEACAM-7 on osoitettu tapahtuvan varhaisen ja peräsuolen kasvaimen synnyssä, ja vähentynyt ilmentyminen adenoomien, hyperplastinen polyypit, ja jopa poikkeava crypt foci.11,13 Vastakkaisia ​​ilmentyminen CEACAM7 mahalaukun ja paksusuolen ja peräsuolen syövän synty merkitsee sitä, että sen toiminto on yhteydessä riippuvainen.
joilla on pitkälle edennyt syöpä haluavat usein tietää, kuinka kauan he ovat jättäneet elämään [28], mutta lääkärit eivät ole varmoja on arvioida ennusteen [29]. Siksi biomarkkereita ennustetta ovat potentiaalinen keino auttaa lääkäreille potilaiden hoitoa. Viime vuosikymmenen aikana, suuri määrä proteiineja, jotka ovat oletettavasti tärkeitä syövän synnyn ja syöpäbiologian on tutkittu niiden ennusteen arvioinnissa mahasyövän, mutta yksikään ei ole osoittautunut riittävän käyttökelpoinen kliinisessä ennustaminen. On erittäin epätodennäköistä, että yhden proteiinin markkeri antaa herkkyyden ja spesifisyyden tarvitaan ennustetta. Täten painopiste on siirtynyt löytö yhdistelmien biomarkkereiden liittyvät suoraan sairausprosesseja [30]. Tässä tutkimuksessa vain kehittynyt kasvain vaiheessa ja CEACAM7 ja CEA kaksinkertainen positiivisuus tunnistettiin käyttämällä Coxin suhteellisten riskien mallia itsenäisinä ennustetekijöitä ennustajia eloonjäämisen sairastavien potilaiden resektoitavissa mahasyöpä riippumatta iästä, sukupuolesta, erilaistuminen, patologisen TNM, imusolmukkeiden etäpesäke, imusuonten ja laskimoiden invaasio potilaista.
Johtopäätökset
Tietääksemme tämä on ensimmäinen vertaileva immunohistokemiallinen tutkimus CEACAM7 ja CEA ilmaisun mahakarsinoo- ja syövän esiasteita. Kaksi proteiinit koekspressoitu ja co-lokalisoitu mahalaukun karsinooma. CEACAM7 ilmentyminen havaittiin korreloi merkitsevästi erilaistumista mahalaukun karsinooma. Ilmentyminen CEACAM7 ja CEA todettiin lisäävän vähitellen kehittämisen aikana mahalaukun syöpä. CEACAM7 ja CEA kaksinkertainen positiivisuus voi olla hyödyllinen postoperatiivisen ennustetekijöitä ennustaja potilaalla on mahasyöpä.
Julistukset
Kiitokset
työtä tuki National 973 projektin Kiinassa (No.2010CB529300, 02, 05, 06) ja National Natural Science Foundation of China (nro 81030044).
kirjoittajien alkuperäinen toimitti asiakirjat kuville
Alla linkkejä kirjoittajien alkuperäiset toimitti asiakirjat kuville. 12957_2011_914_MOESM1_ESM.tiff Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 1 12957_2011_914_MOESM2_ESM.tiff Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 2 12957_2011_914_MOESM3_ESM.tiff Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 3 12957_2011_914_MOESM4_ESM.pdf Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 4 Kilpailevat edut
Kirjoittajat ilmoittavat, että ne ei ole kilpailevia intressejä.

• Ovatko protonipumpun estäjät ensimmäinen valinta akuuttiin hoitoon mahahaavan? Meta-analyysi satunnaistetussa kliinisessä tutkimuksessa
• Samanaikainen komposiitti lisämunuaisen pheochromocytoma, useita mahalaukun stroomakasvaimet ja pseudohermaphrodism potilaalla von Recklinghausens tauti