Stomach Health > želudac Zdravlje >  > Gastric Cancer > Rak želuca

PLoS ONE: rak želuca Exosomes okidač Diferencijacija pupčana vrpca Izvedena mczcnhimnog matičnih stanica karcinoma-povezanih fibroblasta kroz TGF-ß /Smad Put

Sažetak pregled

Pozadina pregled

mczcnhimnog matične stanice (MSC) promicati rast tumora, diferenciraju u fibroblasti karcinoma povezanih s (CAFs) i skladao mikroklima tumora. Međutim, mehanizmi odgovorni za tranziciju MSC-u CAFs nisu dobro razumjeli. Exosomes regulira stanične aktivnosti posredovanjem stanica-stanica komunikacije. U ovoj studiji željeli smo istražiti je li nastali iz stanice exosomes raka su uključeni u regulaciju diferencijacije ljudskih pupčane MSC moždine porijekla (hucMSCs) na CAFs. Pregled

Metodologija /glavne nalaze

prvi je pokazao da je rak želuca nastali iz stanice exosomes inducira ekspresiju biljega OS RH u hucMSCs. Zatim smo pokazali da je rak želuca nastali iz stanice exosomes stimulira fosforilaciju Smad-2 u hucMSCs. Nadalje je potvrdio da inhibitor kinaze TGF-β receptora 1 oslabljeni fosforilacija Smad-2 i OS RH izraz marker u hucMSCs nakon izlaganja raka želuca izvedena iz stanica exosomes. Pregled

Zaključak /Značaj pregled

Naši rezultati ukazuju na da želučane stanice raka pokreću diferencijaciju hucMSCs na CAFs prijenosom exosomes posredovane TGF-ß i TGF-ß /aktivacije Smad puta, što može predstavljati mehanizam roman za MSC da CAFs prijelaza u karcinom pregled

Izvor.: gu J, Qian H, Shen L, Zhang X, Zhu W, Huang L, et al. (2012) rak želuca Exosomes okidač Diferencijacija pupčana vrpca Izvedena mczcnhimnog matičnih stanica karcinoma-povezanih fibroblasta kroz TGF-ß /Smad puta. PLoS ONE 7 (12): e52465. doi: 10,1371 /journal.pone.0052465 pregled

Urednik: Rajeev Samant, Sveučilište Alabama u Birminghamu, Sjedinjene Američke Države Netlogu

Primljeno: 30. lipnja 2012; Prihvaćeno: 13. studeni 2012; Objavljeno: 20. prosinca 2012 pregled

Copyright: © 2012 Gu i sur. Ovo je otvorenog pristupa članak distribuirati pod uvjetima Creative Commons Imenovanje License, koja omogućuje neograničeno korištenje, distribuciju i reprodukciju u bilo kojem mediju, pod uvjetom da je izvorni autor i izvor su zaslužan

financiranja. Ovo djelo je podržan od strane velikih istraživačkih plana Nacionalne zaklade prirodoslovni Kine (Darovnica br. 91129718), Nacionalna Natural Science Foundation of China (Grant br. 81071421, 31140063), Jiangsu Province znanstvena i tehnološka popratni program (Grant br. BE2010703 ), 333 projekta Jiangsu provinciji (Darovnica br. 2009055) i Sci-Tech inovacije tima i talenata Sveučilišta Jiangsu (Darovnica br. 2008-018-02). U financijeri nisu imali ulogu u studiju dizajna, prikupljanja i analize podataka, Odluka o objavi, ili pripremu rukopisa pregled

U konkurenciji interese.. Autori su izjavili da ne postoje suprotstavljeni interesi pregled

Uvod pregled

Tumorske stanice počnu oblikovati njihove okoline u ranoj fazi malignih progresije [1]. Opširna izvješća su pokazala rasprostranjenog interakcije između tumora mikro okolinu i stanice raka, koje su kritične za tumorigenezi i progresiju tumora [2], [3]. Tumor mikrookoliš može izazvati reverzibilne promjene u fenotipu stanica raka i olakšavanja metastatskog širenja [4], a promjene tumora mikrookoliš i dramatično utjecati na djelotvornost terapije karcinoma. Tumor mikrookoliš se sastoji od različitih tipova stanica, uključujući fibroblasti karcinom povezan s (CAFs), infiltracije imunih stanica, krvi i limfni vaskularnih mreža i mezenhimalne matičnih stanica (MSC) [4], [5]. Pregled

CAFs su ključne odrednice u malignu progresiju rasta raka, vaskularizacije i metastaze. CAFs koje izražavaju fibroblasta aktivirajući protein (FAP) i a-glatka mišića aktin (α-SMA) mogao stvoriti niša za stanice raka i promicati njihovu pokretljivost [6], [7]. Doista, CAFs podvrgnuti procesu diferencijacije induciranu tumorskih stanica i razvija invazivna i selice sposobnosti [8], [9]. Pregled

mezenhimalnog matične stanice multipotentnih stanice koje se mogu izdvojiti iz raznih tkiva, uključujući kost srž, masno tkivo, sinovijum, skeletnih mišića, jetre, krv iz pupkovine, posteljica i pupčana vrpca [10] - [13]. MSC mogu biti inducirane da diferenciraju u adipocite osteocite, hondrocita i miocita, zbog njihove sposobnosti i regenerativnog kapaciteta multipotentnim [14]. MSC dom i preživjeti na mjestima upale i ozljede, kao što su tumori, što pridonosi formiranju tumorom strome [15]. Istraživanja su potvrdila da MSC može razlikovati u miofibroblasta, fibroblasti karcinoma povezane, fibrocita ili pericita pod uvjetima tumora mikro okolinu [6], [16], [17]. U našim ranijim istraživanjima, pokazali smo da je MSC koštane srži i njihove izvedene exosomes može potaknuti rast tumora [18], [19]. Međutim, mehanizam odgovoran za ovaj efekt ostaje nepoznanica. Pregled

Tumorske stanice u interakciju s tumora mikrookoliša interakcije stanica-stanica i parakrinih mehanizama, kao što proizvodi niz faktora rasta, hemokina i matrix potrošni enzimi koji pospješuju proliferacija i invazija tumora [20]. Osim poznatim mehanizmima, novi mehanizam da tumorske stanice mogu aktivno otpustiti exosomes se pojavljuje. Exosomes imaju poseban sastav re fl ecting svoje podrijetlo, a može prenijeti ne samo membranske komponente, ali i nukleinske kiseline između različitih stanica [21], [22], s naglaskom na njihovu ulogu u međustanične komunikacije [23]. Gomilaju dokazi pokazuju doprinos exosomes na staničnoj način komunikacije, što dovodi do međustanične prijenos molekula [24]. Iako je regulatorna uloga exosomes u imunološkom sustavu i njihova primjena kao cjepivo u imunoterapije raka obećava [25] - [28]., Ishod sljedeće interakcije između exosomes raka i stanice strome nije dobro razumio pregled

Maligni stanice se vratiti MSCS na CAFs koje pridonose promicanju progresije tumora je potaknuo istragu o mogućim mehanizmima za njegovu tranziciju. Studije su pokazale da je najmanje 20% CAFs potječu iz koštane srži i odvode se od mezenhimalnih matičnih stanica u mišjim modelima u fl ammation induciranog želučanog raka [16]. Mi smo pretpostavili da su stanice raka komuniciralo MSC kroz oslobađanje exosomes i prijenos proteina, dakle induciraju diferencijaciju MSC-u CAFs. U trenutnoj studiji, pokazali smo da MSC stekla fenotip OS RH nakon izlaganja raka izvedeni exosomes i diferencijaciju MSC-u CAFs bio povezan s aktivacijom TGF-ß /Smad signalnog puta.

Materijali i metode pregled dobiveni

stanična kultura pregled

ljudske pupčane vrpce MSC kao što je prethodno opisano [12], [29]. Svježe pupčane vrpce su prikupljeni iz informiran, pristanak majke i obraditi u roku od 6 sati. Kabeli su isprane dva puta s fosfatom-puferiranom fiziološkom otopinom (PBS) u penicilina i streptomicina, a zatim su uklonjeni moždine plovila. Isprane žice izrezana su u komade od 1-3 mm 2 veličine i lebdio u DMEM koji sadrži 10% FBS (Invitrogen, USA), 1% penicilin i streptomicin. Komadi kabela su zatim inkubirane na 37 ° C u vlažnom zraku s 5% CO 2, a medij je mijenjan svaka 3 dana nakon početka uzgajanja. Kada je dobro razvijene kolonije fibroblasta, kao što su stanice dostignu 80% konfluentnosti, kulture su tripsinizirane i prenijeta u nove bocama za daljnji razvoj. Karakteristike izoliranih hucMSCs uključujući morfološke pojave, površinskih antigena, diferencijacije potencijala i ekspresije gena su istraživali kako je prethodno opisano [12]. Svi eksperiment protokoli su odobreni od strane Etičkog povjerenstva Sveučilišta Jiangsu. U hucMSCs iz prolaza 2 odabrani su za eksperimente. Ljudska želučane stanice raka (SGC7901 i HGC27) kupljeni su od Cell Bank, Odbor Collection Type Culture (Kineska akademija znanosti). Želučani epitelne stanice (GES-1) su kupljeni od Cwbiotech društvo, a održava se u DMEM s dodatkom 10% FBS.

Exosome izolacije i pročišćavanja

SGC7901, HGC27 i želučanih epitelnih stanica (Ges-1 ) izvedeni exosomes su izolirani i pročišćen kao što je ranije opisano [30], [31]. Ukratko, stanice su uzgojene u DMEM uz dodatak 10% exosome-osiromašenog fetalnog goveđeg seruma. Fetalni goveđi exosomes uklonjene su preko noći centrifugiranjem na 100,000 g tijekom 16 sati pomoću tip 90 Ti fiksne Angel rotor (Optima L-90k, Beckman Coulter). Supernatanti iz konfluentnih kultura (3-5 dana) su centrifugirani na 2000 g tijekom 20 minuta da bi se uklonile stanice i ostaci. I pročišćeni supernatant se koncentrira ultrafiltracijom preko 100 kDa MWCO šupljim vlaknima membranu (Millipore) na 1000 g tijekom 30 min. Koncentrirani supernatant prebaci se u epruvete za centrifugu (Beckman) i underlayed 30% saharozi /D 2O gustoće jastuk (5 ml) koji tvori vidljivu interfaznu i ultracentrifugiran na 100,000 g i 4 ° C kroz 1 h u SW-32Ti swinging-sić rotor (Optima L-90k, Beckman Coulter). Tada oba exosomes jastuci saharoza gustoće (frakcija 3) prikupljene iz ultracentrifugi cijevi dno i nonbanded frakcije (frakcija 6 i 7), koji sadrže nonmembrane proteinskog kompleksa prikupljeni za upotrebu kao exosomes kontrola (E-kontrola) su skupljene i isprane tri puta kroz 100-kDa minijaturne šupljih vlakana uloška (Millipore) na 1000 g tijekom 30 minuta, kao što je gore opisano. Sadržaj proteina mjeren je pomoću BCA assay kit (Pierce). A exosomes sterilizirano kroz filter 0,22 um kapsule (Millipore) i pohranjena na -70 ° C do upotrebe [30]. Pregled

elektronska mikroskopija pregled

Kap exosomes (20 ul), dobiven nakon diferencijalnog centrifugiranjem je pipetirano formvar rešetke atoma obloženih i ostavi da stoji tijekom 1 minute na sobnoj temperaturi. Nakon uklanjanja viška tekućine komadom filtera, uzorak je označena s 2% (w /v) phosphotungstic kiseline (pH 6.8) tijekom 5 min i suši na zraku u električnoj električnom žaruljom i analizira s transmisijskim elektronskim mikroskopom (FEI Tecnai 12, Philips). pregled

exosomes Označavanje i internalizacija pregled

SGC7901 stanice dobivene exosomes i exosomes kontrola su označene s CM-Dil (crveno) u skladu s uputama proizvođača (Invitrogen). Exosomes iz GES-1 stanice su korištene kao kontrola stanica. Označeni exosome Suspenzija je filtrirana sa 100 kDa MWCO membranama od šupljih vlakana (Millipore) i protočnim se koristi kao nevezani kontrole bojila. HucMSCs (1 × 10 4 /jamici) su nasađene na 12-jažične ploče koje sadrže lamela i inkubira na 37 ° C s obilježenim exosomes (800 ug /ml) tijekom 4 sata prije žetve. Pregled

imunofluoroscentih pregled

HucMSCs su fiksirane u 4% paraformaldehidom tijekom 10 minuta. Označene stanice su pripremljeni za fluorescentnu mikroskopiju od po mobilizacija 3 minute s 0,1% Triton-X100, blokirani s 5% BSA i inkubirane sa mišjim monoklonskim anti-β-aktin antitijelo preko noći, nakon čega slijedi inkubiranje s Cy2-označenog anti-zečjeg IgG sekundarna protutijela na 37 ° C tijekom 45 min (Jackson ImmunoResearch). Jezgre su prebrojane s DAPI. Konfokalnom slike se uzastopno se dobija TCS SP5 II sustava (Leica) [32]. Pregled

CAF Diferencijacija pregled

HucMSCs su nasađene u ploče sa 6 jažica (5 × 10 3 /i) , Dvanaest sati nakon nanošenja, hucMSCs su tretirani s exosomes (800 ug /mL) da se aktiviraju diferencijaciju OS RH u prisutnosti ili odsutnosti TGF-β receptor 1 inhibitora kinaze SD208 (Sigma) ili rekombinantni humani TGF-P (5 ng /ml; sigma). Medij je promijenjen svakih 3 dana 14 dana. Stanice su zatim sakupljene i pripremljeni za Western hibridizacija i kvantitativne PCR analizom. Pregled

Western blotting pregled

stanice su skupljene i lizirane s RIPA puferom (10 mM Tris, pH 7,4, 150 mM NaCl, 1 mM EGTA, 0,1% SDS, 1 mM NaF, 1 mM Na 3VO 4, 1 mM PMSF, 1 mg /ml aprotinina, 1 mg /mL leupeptin). Alikvoti sadrže identične količine proteina razdvojeni, a zatim prenese u metanol prethodno aktivirati PVDF membrane (Millipore, USA). Nakon sekvencijalnog inkubacije sa primarnog i sekundarnog antitijela, signal je vizualizirati pomoću HRP supstrat (Millipore, USA) i analizirani pomoću MD slika kvant softvera. Izvori i faktori razrjeđenja primarnih antitijela su: zečjeg poliklonskog anti-CD9 (1:1000, Bioworld), anti-CD81 (1:1000, Epitomics), anti-TGF-β (1:1000, Bioworld), anti-FAP ( 1:1000, Abcam) mišjeg monoklonskog anti-α-SMA (1:1000, Santa Cruz), anti-VEGF (1:1000, Santa Cruz) i anti-vimentin (1:2000, Santa Cruz), anti-N -cadherin (1:1,000, Bioworld), anti-E-kadherin (1:500, TDU) i mišje monoklonsko anti-GAPDH, (1:5000, Kangcheng) pregled

kvantitativni RT-PCR pregled

Ukupna RNA se ekstrahira sa TRIZOL reagensom (na Invitrogen) i cDNA sintetiziran uporabom reverzne transkripcije kita (Toyobo, Japan), u skladu s uputama proizvođača. Klice su proizvedeni Invitrogen Company (Shanghai, Kina). U realnom vremenu RT-PCR za otkrivanje promjena FAP, a-SMA, N-kadherina i IL-6 gen ekspresije (rotor-Gene 6000, Australija). Na naknadu za varijacije u ulaznoj RNA i učinkovitosti reverzne transkripcije, endogeni "pospremanja" gen (β-aktin) je također kvantificira da se normalizirali rezultate. Svi uzorci su tri puta, a sve reakcije se ponovi 3 puta nezavisno kako bi se osigurala ponovljivost. Pregled

testa migracije pregled

HucMSCs (8 × 10 4 u 200 ul) se suspendira u serumu -free medij prebaci se u gornji odjeljak i 500 ul medija bez seruma (SFM) koji sadrži 800 ug /mL exosomes u prisutnosti ili odsutnosti TGF-β receptor 1 kinaze SD208 (2 uM) doda se u dnu Transwell® (Corning). Nakon kulture na 37 ° C tijekom 6 sati, stanice gornja membrana osuše pamučnom krpom. One stanice koje su migrirale kroz membrane su fiksirane s 4% paraformaldehidom i obojeni Kristal violet bojom. Stanice su promatrane pod mikroskopom i najmanje 10 područja stanica su analizirani za svaku skupinu. Pregled

TGF-β Neutralizacija pregled

HucMSCs su tretirani s tumorskim exosomes (800 ug /mL) i pokreću diferencijacija CAF u prisutnosti ili odsutnosti TGF-β antitijelo (R &D). Prije eksperimenata, anti-TGF-β antitijelo (20 ug /mL) je inkubiran s exosomes na 37 ° C tijekom 2 sata. Pregled

Statistička analiza pregled

Svi podaci su izraženi kao prosjek ± SD. SPSS software je upotrijebljen za analizu podataka. Sredstva za različite grupe za tretman uspoređene su dvosmjerna ANOVA testa ili t-test. P < 0,05 smatrana je statistički značajna pregled

Rezultati pregled

Exosomes Karakterizacija i internalizacija pregled

izolirani smo i identificirali exosomes temeljiti na jedinstvenoj veličini i gustoći.. Kao što je prikazano na slici. 1A-a, a exosomes imao karakteristične tanjur kao oblik ograničena je lipidnom dvosloju promjera u rasponu od 40 do 100 nm. Potvrdili smo u izobilju izraz exosomal oznakama CD9 i CD81 u našim izoliranim exosomes pomoću Western blot (sl. 1a-b). Nakon naše prethodne studije, humane kralježnice izvedeni MSC pripremljeni su i karakterizirani (podaci nisu prikazani). Da bi istražili internalizaciju exosomes po hucMSCs, označen smo exosomes s CM-Dil. Kao što je prikazano na slici 1B, SGC7901 stanice dobivene exosomes se internalizira i akumulira u hucMSCs nakon inkubacije tijekom 4 sata, a exosomes kontrola pokazala značajan učinak. U usporedbi s SGC7901 skupinom, manje GES-1 izvedeni exosomes su uzeti od hucMSCs. Pregled

tumor-derivirani Exosomes promovirati hucMSCs Diferencijacija u CAFs pregled

Mi smo pretpostavili da tumor potječe exosomes mogao inducirati diferencijaciju hucMSCs do CAFs in vitro pregled. CAFs je definirana kao povećana ekspresija proteina za FAP i α-SMA proteina. HucMSCs jednoslojna se kultivira u mediju koji sadrži 800 ug /ml SGC7901 exosomes i Ges-1 exosomes. Kvantitativni RT-PCR analiza pokazala je da je SGC7901 exosomes ali ne i GES-1-exosomes promovira izražaj biljega OS RH u MSC-u 36 sati (sl. 2a) i 14 d (sl. 2b) nakon indukcije, respektivno. U odnosu na netretiranoj skupini tumora exosomes liječenje rezultiralo povećanjem FAP, a-SMA, N-kadherina i razine proteina vimentin (Sl. 2C). Zajedno, ovi rezultati ukazuju na to da hucMSCs proći diferencijaciju OS RH, kao odgovor na tumor exosomes izloženost. Pregled

Tumor-izvedeni Exosomes promovirati hucMSCs Migracija pregled

Kako analizirati je li migracijski sposobnost hucMSCs bio je pod utjecajem tumorskih exosomes, hucMSCs su uzgojene u transjažice i inducirane migrirati tumorske exosomes. Kao što je prikazano na slikama 3A i 3B, 6 sati nakon inkubacije, tumorske exosomes promovira migraciju hucMSCs efikasnija od normalne stanične izvedeni exosomes. Također smo pokazali da je povećana migracija hucMSCs tumorske exosomes bio blokiran istovremenog tretmana s TGF-β R1 inhibitora, SD208. Osim toga, ispitan je učinak SGC7901 exosomes o migraciji hucMSCs pomoću ogrebotine testa. Rezultati su bili u skladu s onom transjažična testa migracije, pokazujući smanjenu udaljenosti jaz u tumorskoj skupine exosome tretirane (Sl. S1). Uzeti zajedno, ovi rezultati pokazuju da tumorske exosomes može promicati migraciju hucMSCs In vitro pregled. Pregled

Tumor-izvedeni Exosomes Aktiviranje Smad2 /3 i p38 u hucMSCs pregled

TGF β je pokazala da bude prisutan na površini exosomes [33] i kritična za razlikovanje OS RH. Zatim smo istraživali da li TGF-β put je bio odgovoran za izazivanje MSC prelaska na CAFs strane tumorskih exosomes. Prvo smo pokazali prisutnost TGF-P u tumorskim exosomes (Sl. 4A). U usporedbi s tumorskim exosomes, normalne stanice izvedene exosomes pokazali nižu razinu TGF-β izražavanja. Za procjenu da li je razlikovanje hucMSCs da CAFs povezana s aktivacijom TGF-β puta, ispitali smo status fosforiliranog Smad 2/3 nakon tumora exosomes tretman. Rezultati su pokazali da Smad 2/3 fosforilacija povećan je tumor exosomes na 15 min nakon tretmana i dostigle najvišu razinu u 60 min nakon tretmana, dok su ukupni Smad 2/3 razina proteina nisu bili pogođeni. Također smo utvrdili razinu Fosforilirana p38 i otkrili da fosforilacija p38 također povećana tumorske exosomes (Sl. 4B). Za razliku od toga, GES-1 izvedeni exosomes nije mogao aktivirati Smad2 /3 i p38 (Sl. 4C). Uzeti zajedno, ovi rezultati pokazuju da tumorske exosomes specijalizirane za aktiviranje Smad2 /3 i p38 u hucMSCs. Pregled

TGF-beta puteve inhibicije Blokovi Tumor Exosomes izazvanog Smad2 /3 i p38 Aktiviranje pregled

Kako bi se dokazalo da li aktivacija Smad2 /3 i p38 je specifična za TGF-beta signalizacija potaknuta tumorskih exosomes, blokirani smo TGF-beta signalne putove s TGF-ß R1inhibitor i otkriti razine fosforilirane Smad2 /3 i p38. Kao što je prikazano na slici. 5A, povećana fosforilacija Smad2 /3 i p38 tumor sljedećem exosomes tretman je obrnuta pomoću TGF-β R1 inhibitora SD208, na način ovisan o dozi. Kako bi dodatno pokazali TGF-ß od tumora exosomes da aktivira hucMSCs, neutralizira smo TGF-ß u tumorskim exosomes korištenjem anti-TGF-ß antitijela. U skladu s rezultatima TGF-ß R1 inhibitora, povećana fosforilacija Smad2 /3 i p38 u hucMSCs također su poništena od strane TGF-beta antitijela (sl. 5b). Rezimirajući, ovi podaci pokazuju da TGF-β iz tumora exosomes interakciju s TGF-P receptora na hucMSCs, što dovodi do aktivacije sekvencijalnim Smad2 /3 i p38 u hucMSCs.

TGF-β Pathway Inhibition obrće tumora Exosomes induciranu hucMSCs diferencijacija na CAFs pregled

kako bi se dokazalo TGF-β /TGF-β R1 interakcija je odgovorna za diferencijaciju hucMSCs na CAFs izazvanih tumora exosomes, blokirani smo TGF-ß signalizaciju s SD208 i TGF-ß neutralizacije antitijela slijede tumora exosomes tretman. Kao što je prikazano na slikama 6A-a, liječenje SD208 (2 uM) tijekom 14 dana, snažno reverzne tumor exosomes-induciranu ekspresiju markera OS RH uključujući FAP, a-SMA, N-kadherina i vimentin u hucMSCs. Mi također potvrdio ovaj efekt pomoću exosomes iz HGC-27 želučanih stanica raka (Sl. 6a-b). Osim toga, tretman s anti-TGF-beta antitijela je dovelo do slične učinke na onaj u TGF-β R1 inhibitora (Sl. 6B). Ukratko, ovi podaci pokazuju da tumorske exosomes posreduju diferencijaciju hucMSCs na CAFs kroz aktivaciju TGF-ß /Smad signalnog puta. Pregled

Rasprava pregled

U ovom istraživanju, identificirali smo roman mehanizam kojim stanice tumora induciraju diferencijaciju MSC u CAFs. Naši podaci pokazuju da: (1) rak želuca stanice izvedene exosomes se internaliziraju hucMSCs; (2) rak želuca stanica izvedene exosomes aktiviraju hucMSCs diferencijacije u CAFs i (3) TGF-β /Smad put posreduje prijelaz hucMSCs na CAFs. Naši rezultati ukazuju na to da TGF-β u tumorskim exosomes može komunicirati s TGF-ß R1 na hucMSCs, što rezultira aktivacijom Smad puta u hucMSCs i naknadne diferencijacije hucMSCs do CAFs. Pregled

Iako je prijavljen da tumorske exosomes može poboljšati metastatskog aktivnost tumorskih stanica [34], uloga tumora exosomes u MSC još nije otkrila. Naši rezultati pokazuju da tumorske stanice mogu regulirati mobilnost MSC, sugerirajući da tumorske stanice mogu zaposliti MSC iz koštane srži ili drugih tkiva na mikro tumora po exosome posredovani mehanizam. Pregled

Izlaganje tumora exosomes povećava ekspresiju markeri OS RH u MSC, sugerirajući da je tumor exosomes izaziva isključivati ​​fenotipa s MSC-u CAFs. Iako ovo nije bio u pripremi, Cho i sur. izvijestio je da exosomes iz stanica raka dojke i jajnika mogu prouzrokovati masnog tkiva dobivenih MSC steći fiziološke i funkcionalne karakteristike tumora podržava miofibroblasta [35], [36]. Naš rad je u skladu s njihovim nalazima i dalje pokazuje da je taj proces Smad ovisna. Pregled

U trenutnoj studiji, predstavljamo dokaz da tumorske exosomes nude učinkovitu platformu za prijenos određene poruke na MSC, promicanje prijelaz MSC-OS RH. Nekoliko prethodnih istraživanja su pokazala da TGF-β je izražena raka izvedena iz stanica exosomes i ovaj oblik TGF-P je biološki aktivan u vožnji Smad ovisnu signalizaciju [33], [37]. TGF-β je ključni regulator obnove matičnih stanica i diferencijaciji [38]. Utvrdili smo prisutnost TGF-P u želučanim stanice raka dobivene exosomes potvrdila je TGF-β /TGF-β R1 interakcije posredovane aktivacije Smad2 /3 i diferencijaciju OS RH u hucMSCs. pregled

Pokazano je da MSC može potaknuti metastaza raka [4], [39]. Također su izvijestili da ljudska MSC Izvedene uvjetovani medij i exosomes poboljšanje faktora rasta vaskularnog endotela (VEGF), ekspresija u stanicama tumora i poticati tumorski rast in vivo pregled [18], [19]. Jesu li exosomes iz MSC može igrati ulogu u metastazi raka nije obratio. Primijetili smo da je MSC exosomes promicati prijelaz epitela-na-mezenhimu (EMT) u želučanih stanica raka, ali temeljni mehanizmi još treba istražiti u budućim istraživanjima. Pregled

Na kraju smo pokazali u ovom istraživanju da rak želuca stanica izvedene exosomes ima kapacitet za induciranje diferencijacije u MSC CAFs i aktivaciju TGF-beta /Smad staze tumorskih exosomes doprinosi prijelaz MSC na CAFs. Naši rezultati pružaju novi mehanizam kojim stanice tumora izazvati MSC razlikovati u tumorske stanice strome i sudjeluju u formiranju tumora okoline. Pregled

popratne podatke
Slika S1. pregled želuca rak stanica izvedene exosomes promovirati hucMSCs migracija. HucMSCs su tretirani s želučanom stanice raka (SGC7901) izvedeni exosomes (800 ug /mL). Ogrebotina polje je provedena analiza migracije sposobnost stanica. (A-c) Neliječena hucMSCs; (D-f) SGC7901-exosomes tretirane hucMSCs. Mjerilo = 50 mm pregled doi:. 10,1371 /journal.pone.0052465.s001 pregled (TIF) pregled

Other Languages