Utjecaj stimulacije electroacupuncture na Zusanli acupoint (ST36) na želučane pokretljivosti: moguće kroz PKC i MAPK signalnog prijenosa pathways

učinak stimulacije electroacupuncture na Zusanli acupoint (ST36) na želučane pokretljivosti: moguće kroz PKC i MAPK putevima prijenosa signala
Sažetak
pozadini pregled Electroacupuncture (EA) stimulacija je pokazano da imaju veliki terapeutski potencija u liječenju poremećaja gastrointestinalnog motiliteta. Međutim, nema dokaza je pojasnio mehanizme koji pridonose učincima EA stimulacije na Zusanli acupoint (ST.36). Ova studija je osmišljen kako bi istražili regulativni učinak EA stimulacije na ST.36 na želučane pokretljivosti i istražiti njezine moguće mehanizme
Metode pregled Trideset Sprague-Dawley su nasumce podijeljeni u tri skupine:. Na ST.36 grupa, koja nije acupoint skupina i kontrolna skupina. EA stimulacija je bio postavljen na 2 Hz, kontinuirani način, a 1 V tijekom 30 min. Učestalost i prosječna maksimalna amplituda želučane pokretljivosti mjereni su elektrogastrografija. Protein kinaze C (PKC) i mitogenski aktivirane protein kinaze (MAPK) signalnih putova određene su u stvarnom vremenu polimeraza lančane reakcije. Caldesmon (CAD) i ekspresije calponin (CAP) proteina u želučanog antruma su otkrivena na Western blot. Kompjuteriziranu Video sustav za obradu koristi za procjenu morfoloških promjena u stanicama glatkih mišića (SMCs) iz želučanog antruma. Pregled Rezultati
EA stimulacije na ST.36 imali dvostruki učinak na učestalost i prosječna maksimalna amplituda. Osim toga, EA stimulacija na ST.36 regulira ekspresiju nekih gena u PKC i MAPK signalnih puteva, a to reguliran ekspresiju CAD i kapom proteina. EA serumu inducirane SMC kontraktilnost. Promocija želučane pokretljivosti mogu korelirati s up-regulaciji MAPK6 (ERK3), MAPK13 i prostaglandin-endoperoksid sintaze 2 (PTGS2) ekspresije gena i down-regulacije kolagena tipa I, alfa 1 (COL1A1) gena i CAD i Cap ekspresija proteina. Inhibicija želučane pokretljivosti mogu korelirati s down-regulacije tipa receptora za interleukin-1, 2 (IL1R2) i metaloproteinaza 9 (MMP9) gena Matrix, i up-regulaciji CAD i kapom ekspresija proteina pregled. Zaključci
EA stimulacija na ST.36 regulirano pokretljivosti želuca, a posljedice su i promoviranje i zabranjivanje u štakora. Mogući mehanizmi mogu korelirati s PKC i MAPK putevima prijenosa signala. Pregled Ključne riječi pregled Electroacupuncture Zusanli pokretljivosti želuca PKC MAPK Pozadina pregled pokretljivosti želuca je jedno od najkritičnijih fizioloških funkcija ljudskim crijevima. Bez koordiniranog pokretljivosti, probava i apsorpcija hranjivih tvari u prehrani ne može se održati. Regulacija gastrointestinalnog motiliteta je složen i uključuje kontrakciju glatkih mišićnih stanica (SMCs). Kontrakcija SMCs prvenstveno je regulirano prolaznih promjena intracelularne Ca 2 + koncentracija [1]. Postoje dvije glavne staze uključene u ovaj mehanizam, naime, RhoA-Rho kinaze i protein kinaze C (PKC) put [2]. Calponin (CAP), uredan in vitro pregled supstrata za signalizaciju proteina po PKC [3], izravno komunicira s PKC [4]. Caldesmon (CAD) je aktin i miozin vezni protein koji postoji u dvije izoforme, koje nastaju alternativnim spajanjem [5]. Postoji veći broj dokaza za sekundarni put u regulaciji glatkih mišića odnosno PKC ovisan, i ovaj put može biti posredovana sa kapom i CAD aktivacije [6-9]. Mitogen-aktivirane protein kinaze (MAPK), signalne putove također su uključene u SMC kontrakcije [10]. Postoje tri glavne skupine jasno regulirane MAPK koje dovode do promijenjenog gena. Ekstracelularne signalne srodnih kinaza 1 i 2 (ERK1 /2), c-jun terminalne kinaze (JNK) i p38 MAPK poznati su da imaju važnu ulogu u intracelularne signalizacije odgovora na podražaj [11]. Osim toga, Cap može olakšati ERK-ovisnu signalizaciju, čime igra značajnu ulogu u regulaciji SMC kontrakcije [12].
Akupunktura, koji je bio korišten tisućama godina u Kini, sve više se koristi u cijelom svijetu za upravljanje razne bolesti [13]. Smatra se da je stimulacija na acupoint može izravno utjecati na relevantne organe i postići efekt akupunktura terapije. EA je kombinirani postupak koji stimulira acupoint sa električnom stimulacijom, umjesto s ručnim manipulacijama igle. Brojne studije su ocijenili učinke i mehanizme EA na želučane pokretljivosti [14-20]. Na temelju dokaza iz tih studija, EA stimulacija je pokazano da imaju veliki terapeutski potencija u liječenju poremećaja gastrointestinalnog motiliteta. Zusanli (ST.36) je jedan od najčešće korištenih akupunkturne točke za gastrointestinalnih bolesti. Prema teoriji tradicionalne kineske medicine (TCM), postoji veza između ST.36 i funkciju probavnog trakta. Do danas, međutim, nema dokaza je pojasnio točne mehanizme koji pridonose učincima EA stimulacije.
Stoga, ispitujući morfološke promjene i myoelectrical aktivnosti, istraživanje imalo za procjenu regulativni učinak EA stimulacije na ST.36 acupoint na želučane pokretljivosti u štakora i istražiti njegove moguće mehanizme, pregled Methods
Životinje i reagensi pregled trideset odraslih muških štakora Sprague-Dawley (SD) štakora težine 180-220 g su bili držani u 12-satnom svijetlim mrak ciklusom kod 25 ± 2 ° C i 60% vlage, uz slobodan pristup hrani i vodi. SD štakori su kupljeni od pokusnoj životinji Centar Vojnomedicinsku Sveučilišta Četvrte. Svi pokusi na životinjama su izvedena u skladu s institucionalnim smjernicama Vojnomedicinsku Sveučilišta Četvrte za njegu i korištenje laboratorijskih životinja. Odobrenje protokolu studije koji je dobiven od strane Etičkog povjerenstva za istraživanja na životinjama, četvrti Vojnomedicinsku University, Kina. Životinje su nasumično podijeljene u tri skupine:. The ST.36 skupina, koja nije acupoint skupina i kontrolna skupina pregled Kolagenaza II, inhibitor tripsina, ditiotreitol alkohola šećera, goveđi serumski albumin, kalcij, bez fosfatni pufer saline (PBS ), glutaraldehid i Trypan blue su nabavljeni od Sigma Chemical Co. Ukupna RNA Extraction Kit, eksponent III reverzne transkriptaze i SuperArray PCR glavne smjese su kupljeni od Invitrogen Co. anti-kozji, anti-miš, a protu-zečjim antitijelima su kupljen iz Šangaja Kangcheng bio-Engineering Co pregled EA postupka stimulacije
ST.36 se nalazi oko 5 mm lateralno na fibule stražnjih udova, dok ne-acupoint se nalazi na stražnje šape uz samu ST.36 otvorena 5 mm [21]. Iglice su umetnute 5 mm duboko u mišićima sloj odabranog acupoint i bili stimulirani EA na 2 Hz i 2 V pomoću električne stimulator (G6805-2A; Shanghai Huayi medicinski instrument Factory, Šangaj, Kina). Svaki stimulacija trajala 20 minuta na kontinuirani način, a stimulacija je provedena 1 puta /dan tijekom 5 dana. Štakori u kontrolnoj skupini su podvrgnuti samo imobilizacije bez stimulacije za 30 minuta u isto vrijeme svaki dan.
Elektrogastrografija pregled elektrogastrografija se nanosi pomoću višekanalnog Fiziološki Primanje signala i sustava za obradu (mod RM-6280) nakon posljednjeg stimulacija na peti dan. Nakon 12-satnog gladovanja (s slobodan pristup vodi) i 6 sati bez pića, štakori su anestezirani intraperitonealno (i.p.) s 10% uretanom u dozi od 1 g /kg tjelesne, a zatim imobilizirane. Prva elektroda pričvršćena na rep, i vođeni elektrode su bile implantirane na površinu seroznog želuca 0,3 - 0,5 cm iznad pylorus. Elektrode su bili pokriveni 37 ° C normalne fiziološke gaze, povezan sa žicom. Eksperimentalni parametri korišteni su kako slijedi:. Frekvencija 400 Hz, filter 10 Hz, brzina skeniranja 2s /podjela, osjetljivost 25 mV, vremenska konstanta istosmjerne struje, a osciloskop vrijeme snimanja 1 sat [18] pregled, u stvarnom vremenu lanca polimeraze reakcija (PCR) analiza pregled Nakon zadnje stimulacije EA, štakori su žrtvovani. Za kontrolnu skupinu i ne-acupoint grupe, jedan štakor slučajno izabran respektivno. Za EA skupine, prvo smo ga podijeliti u EA promicanje grupi i EA inhibirajući skupinu prema rezultatima elektrogastrografija. A onda, tu su štakori nasumično su odabrane iz obje skupine. Antruma želuca tkiva (iz piloričkog 0.8 - 1 cm) izrezana su u komade koji su približno 0,3 cm x 0,5 cm u veličini i odmah smješteni u -70 ° C tekućem dušiku. Uzoraka ukupne RNA je ekstrahirana pomoću Trizol iz različitih skupina u skladu s uputama proizvođača. Kvaliteta RNA bila je određena spektrofotometrijski na temelju omjera A260 /A280. Uzorci RNK su provjereni za integritet 18S i 28S RNA elektroforezom na gelu. Ukupna RNA (1.5 ug) je korištena za generiranje prvog lanca cDNA s eksponentima III reverzne transkriptaze (1 ul) s izoliranom RNA. Real-time PCR reakcije su proizvedeni upotrebom SuperArray PCR Master Mix (Kat. Br PA-112) koji je sadržavao PKC i MAPK puta signalnog gene. Razrijeđena cDNA (102 ul) se doda u svaki otvor odgovara PCR čip. Tada su PCR čipovi su bili smješteni u realnom vremenu PCR instrument za PCR reakciju. Uvjeti biciklističke bili su kako slijedi: 95 ° C kroz 10 min, 60 ° C za 15 s i 60 ° C tijekom 1 min (40 ciklusa). Razlike u ekspresiji gena, izražena kao višestruki promjena izračunate su pomoću 2 -ΔΔCt metoda.
Western mrlje od CAD i kapom
CAD i kapom proteina razinama su detektirani Western blot. Nakon tretmana s EA, štakori su žrtvovani. Štakori su fiksni, a zatim incizije koži abdomena i peritoneumu. Utrobe bili izloženi, a središnji 1/3 želuca tijelo je izrezati u male komadiće koji su bili oko 0,3 cm x 0,5 cm u veličini. Dijelovi su odmah pohraniti na -70 ° C u tekućem dušiku. Ukratko, stanične ekstrakte (30 ug) iz gornjeg 1/3 sredini želuca tijela su odvojena natrij dodecil sulfatom-poliakrilamid gel elektroforeze (SDS-PAGE), te preneseni na nitroceluloznue membrane. Filteri su blokirane s Tris-puferiranoj slanoj otopini (TBS) /5% mlijeka, nakon čega slijedi inkubacija sa poliklonalnim antitijelima protiv kardiovaskularnih bolesti (1: 3000 razrjeđenje), poklopac (1: 3000 razrjeđenje) i beta-aktina (1: 10000). Nakon membrane su isprane su inkubirani sa sekundarnim peroksidaza-konjugiranog antitijela razrijeđenog 1: 5000 u TBS-u sa 0,01% Tween 20. Sustav za detekciju protutijela upotrebe te membrane su izloženi rendgenskom filmu, prema uputama proizvođača. pregled pripravak serum pregled serum je dobiven kao što je prethodno opisano u modifikaciji [22]. Nakon zadnje stimulacije sa EA, svi štakori su žrtvovani. Zatim se 6 ml krvi je bio uzet iz karotidne svakog štakora. Krv je držana još 1 sat, a tada je centrifugirana na 3000 rpm tijekom 15 min. Serum se prikupi, filtrira radi uklanjanja bakterija, i 1,5 ml je pakiran u cijev EP, koja je pohranjena na -70 ° C u tekućem dušiku. Pregled Učinci EA seruma na SMC kontraktilnost pregled pet normalnih SD štakori bili anestezirane ip sa 10% uretanom u dozi od 1 g /kg tjelesne težine. Nakon što je anesteziraju, koža abdomena i peritoneuma su urezani, a unutarnji organi su bili izloženi. Cijeli želudac je izrezana i želučanom antrumu tkiva su izolirani i odmah stavljena u zasićenoj kisikom PBS s penicilinom (100 U /ml) i streptomicina (100 ug /ml) pri 4 ° C. Nakon isprati, tkiva su preneseni u zasićenu kisika HEPES, širenje i pričvršćene na ploči silikagela s fino igle. Sloj za sluznicu se pažljivo odstrani, izlažući kružni sluznicu koji je zakvačena na 9 - 10 mišića trake (1 mm x 4 mm), smještene u Tyrodeove otopine, i čuva na 4 ° C u hladnjaku oko 15 minuta. Mišića trake se probavlja u 1% tip kolagenaze II, 0,05% inhibitor tripsina, 0,05% ditiotreitol alkohola šećera i 0,2% albumina iz goveđeg seruma enzima u vodenoj kupelji 25 min na 36 ° C. Nakon probave, smjesa se ispere s enzimom bez HEPES, inkubira 30 minuta i filtrira s mrežicom 200 ekrana skupljati slobodna, pojedinačna želučane SMCs. Sposobnost stanica za život izmjerena je tripan blue test. Žive stanice su bile više od 95%, u gustoći od 10 6 stanica /ml.
Izolirane SMCs su nasumično podijeljeni u normalnom serumu skupine ST.36 seruma skupina, i ne-acupoint seruma grupe. SMCs suspenzije (50 ul) u gustoći od 1,0 × 10 6 stanica /ml, su stavljeni u pločice s 96 jamica. Svaki uzorak je serum inaktiviran nakon 30 min u vodenoj kupelji C 56 ° C, a zatim je razrijeđena 1: 2 s HEPES. Seruma (50 ul) iz različitih skupina podrazumijevaju se doda SMCs, pomiješa se s pipetom 30 s, te su fiksirane s 30 ul 2,5% glutaraldehida. Duljina stanica je ocijenjena s kompjutorizirane Video sustav za obradu (DP2-BSW), koje se koristi za izračunavanje postotka skupljanja. Postotak stanica skupljanje = (dužina stanica prije tretmana - dužine stanica nakon tretmana) /. Duljina stanica prije tretmana × 100%
Statistička analiza pregled Podaci su izraženi kao srednja vrijednost ± S.D. Jednosmjerna analiza varijance slijedi Bonferroni je testom višestruke usporedbe je primijenjen s SPSS 10,0 softvera. U ΔCt vrijednosti dobivene iz realnom vremenu PCR, koji su korišteni za izračunavanje razlike višestruki broj promjena (ovdje izražen kao postotak kontrole), također su korišteni za statističku analizu. P-vrijednost pregled < 0,05 ili preklopiv promjene > 2. definirano je kao statistički značajna za sve analize. | Rezultati
Učinci EA na želučane pokretljivosti
EA na ST.36 je značajne promjene u apsolutnom iznosu prosječne vršne amplitude i frekvencije u odnosu na kontrolu ili non-acupoint skupine (P pregled < 0,01). Nasuprot tome, EA na ne-acupoint nije izazvala značajne promjene u želučanom pokretljivosti u usporedbi s kontrolnom skupinom (dodatne datoteke 1: Slika S1). Dvije vrste želučanih motornih uzoraka uočene su za ST.36 grupi u 10 štakora testiran u skladu s prosječnim vrhuncu: štakori s pozitivnim prosječnom vrha su bili suđeni na promicanje uzorak, a štakori s negativnim prosječnim vrha su bili suđeni na promociji uzorak. Rezultati su pokazali 5 (50,0%), štakori su pokazali ST.36 promovira uzorak i 5 (50.0%) štakori pokazali ST.36 zabranjivanje uzorak. U štakora s uzorkom ST.36 promicanja, prosječni signal amplitude i frekvencije vrijednosti bile 47.13 ± 0.44 i 0.19 ± 0,06, respektivno. U štakora s ST.36 zabranjivanje uzorak, prosječni signal amplitude i frekvencije vrijednosti bile -43.41 ± 0,62 i 0,17 ± 0,03, respektivno. (Dodatna datoteka 2: Tablica S1) pregled Učinci EA na PKC i MAPK signalnih putova
EA na ST.36 znatno regulira ekspresiju nekih gena u PKC i MAPK signalizacije. Tablica 1 prikazuje rezultate od analize mikropolja skupine ST.36 promovira (u odnosu na kontrolnu skupinu). Izraz mnogih gena je povećano nakon EA stimulacije, uključujući ERK3, MAPK13, IL1R1, PRKCA i PTGS2. Drugi geni su pokazali smanjenje ekspresije nakon EA stimulacije, uključujući IL1R2. Tablica 2 nabraja rezultate analize mikropolja na ST.36 inhibiciju skupine (u odnosu na kontrolnu skupinu). Izraz gen IL1R2 i MMP9 su smanjeni nakon EA stimulation.Table 1 Gene promjena usporedbom EA promicanje skupinu s kontrolnom skupinom pregled signala put
Gene
sajtove
EA /kontrola (fold promjene)
EA /kontrola (preklopite gore ili prema dolje regulacije)
MAPK pregled MAPK6 (ERK3)
D02
2.39
2.39
MAPK
MAPK13
D10
2.86
2.86
PKC
IL1R1
F08
2.18
2.18
PKC
PRKCA
G01
2.40
2.40
PKC
PTGS2
G02
2.72
2.72
PKC
IL1R2
F09
0.26
-3.85
Preklopni promjene (2-ΔΔCt) je normalizirana ekspresiju gena (2-ΔCt) u test uzorku podijeljen normaliziranu ekspresiju gena (2-ΔCt) u kontrolnom uzorku. Fold-propis predstavlja rezultate višestruki broj promjena u biološki smislen način. Fold-promjena vrijednosti veće od jedan ukazuju na positive- ili naviše, a fold-regulacija jednaka je višestruki broj promjena. Fold-promjena vrijednosti manje od jedan ukazuju negativan ili dolje regulacije, a fold-regulacija je negativna inverzna višestruki broj promjena.
Tablica 2 gen promjenu uspoređujući inhibitorni grupu EA s kontrolnom skupinom pregled putu signala
pregled Gene
web stranice
EA /kontrola (Fold promjenu)
EA /kontrola (Fold gore ili down-regulation)

PKC
IL1R2
F09
0.24
-4.26
PKC
MMP9
F11
0.21
-4.68
Fold-promjene (2-ΔΔCt) je normalizirana ekspresije gena (2-ΔCt) u uzorku za ispitivanje podijeljena s normalizirani ekspresije gena (2-ΔCt) u kontrolnom uzorku. Sjedeća propis predstavlja rezultate višestruki broj promjena u biološki smislen način. fold-promjena vrijednosti veće od jedan ukazuju na positive- ili naviše, a fold-regulacija jednaka je višestruki broj promjena. višestruki broj promjena vrijednosti manje od jedan ukazuju negativan ili dolje regulacije i poklopac -Regulacija je negativna inverzna višestruki broj promjena. pregled Tablica 3 navodi rezultata iz analize microarray grupe ST.36 promicanje (u odnosu na ne-acupoint skupini). je povećana ekspresija gena COL1A1 nakon EA stimulacije. ekspresija IL1R2 i SERPINE1 gena su smanjeni nakon EA stimulacije. Tablica 4 prikazuje rezultate analize microarray od ST.36 zabranjivanje grupu (u odnosu na ne-acupoint skupini). Mnogi od gena pokazala smanjen izraz nakon EA stimulacije, uključujući ERK3, JNK3, p38bMAPK, MAPK13, p38MAPK, ERK1, FGF2, IL1R1, IL1R2, myc, PRKCA i PTGS2 gena. Izraz od COL1A1 gena je povećano nakon EA stimulation.Table 3 Gene promjena u odnosu EA promovira grupe s ne-acupoint grupe pregled putu signala
Gene
sajtove pregled
EA /Non-acupoint (fold promjene)
EA /Non-acupoint (Fold gore ili down-regulation)

PKC
COL1A1
F05
3.60
3.60
PKC
IL1R2
F09
0.39
-2.54
PKC
SERPINE1
G04
0.48
-2.07
Fold-promjene (2-ΔΔCt) je normalizirana ekspresije gena (2-ΔCt) u uzorku za ispitivanje podijeljena s normalizirani ekspresije gena (2-ΔCt) u kontrolnom uzorku. Sjedeća propis predstavlja rezultate višestruki broj promjena u biološki smislen način. fold-promjena vrijednosti veće od jedan ukazuju na positive- ili naviše, a fold-regulacija jednaka je višestruki broj promjena. višestruki broj promjena vrijednosti manje od jedan ukazuju negativan ili dolje regulacije i poklopac -Regulacija je negativna inverzna višestruki broj promjena. pregled Tablica 4. promjene gena uspoređujući inhibitorni grupu EA sa non-acupoint grupe pregled putu signala
Gene
sajtove

EE /Non-acupoint (kauč promjenu)
EE /Non-acupoint (preklopite gore ili prema dolje regulacije)
MAPK
MAPK6 (ERK3) pregled, D02 pregled 0,18 pregled -5,67 pregled MAPK pregled MAPK10 (JNK3) pregled D07 pregled 0,42 pregled -2,40 pregled MAPK pregled MAPK11 (p38bMAPK) pregled D08
0,39 pregled -2,58 pregled MAPK pregled MAPK13 pregled D10 pregled 0,28 pregled -3,58 pregled MAPK pregled MAPK3 (ERK1) pregled G11 pregled 0,26 pregled -3,83 pregled MAPK pregled MAPK14 (p38MAPK)
D11
0.47
-2.13
PKC
FGF2
F07
0.37
-2.67
PKC
IL1R1
F08
0.30
-3.31
PKC
IL1R2
F09
0.36
-2.81
PKC
MMP9
F11
0.22
-4.48
PKC
MYC
F12
0.39
-2.59
PKC
PRKCA
G01
0.23
-4.27
PKC
PTGS2
G02
0.19
-5.36
PKC
COL1A1
F05
4.81
4.81
Fold-promjene (2-ΔΔCt) je normalizirana ekspresije gena (2-ΔCt) u uzorku za ispitivanje podijeljena s normalizirani ekspresije gena (2-ΔCt) u kontrolnom uzorku. Sjedeća propis predstavlja rezultate višestruki broj promjena u biološki smislen način. fold-promjena vrijednosti veće od jedan ukazuju na positive- ili naviše, a fold-regulacija jednaka je višestruki broj promjena. višestruki broj promjena vrijednosti manje od jedan ukazuju negativan ili dolje regulacije i poklopac -Regulacija je negativna inverzna višestruki broj promjena. pregled Učinci EA na CAD i kapom ekspresije proteina
stimulacije s EE značajno povećao CAD i kapom ekspresiju proteina u ST.36 zabranjivanje skupini u usporedbi s ne-acupoint skupina, dok stimulacija s EA znatno smanjio CAD i kapom ekspresije proteina u ST.36 promicanju skupinu u usporedbi s ne-acupoint skupine (Slika 1A, B, C, D). Slika 1 prikazuje djelovanje EA stimulacije na Caldesmon (CAD) i Calponin (CAP) razina proteina. A. Ekspresija Caldesmon razini proteina pomoću Western blot-a. razina proteina B. Denzitometrijska analiza Caldesmon normalizirani P-aktin; C. Ekspresija Calponin razina proteina pomoću Western blot; D Denzitometrijska analiza Calponin razina proteina normalizirani p-aktin. CAD: Caldesmon; Cap: calponin; 1: non-acupoint skupina; 2-4: EA inhibirajući skupina; 5-7: EA promicanje skupinu. * P < 0,05 compard ne-acupoint skupine pregled učinaka EA seruma na SMC kontraktibilnosti
Kao što je prikazano na dodatne datoteke 3: Sl. S2 i dodatne datoteke 4: Tablica S2, morfologija stanica uočeno je pod svjetlosnim mikroskopom nakon tretmana s različitim vrste seruma. Nije bilo razlike u dužini stanica prije dodatka seruma (p > 0,05). ST.36 serumu povećava SMC kontraktilnost (60,22 ± 3,84 um) u usporedbi s kontrolnom seruma (96,02 ± 6,24 um) ili ne-acupoint seruma (97,33 ± 6,97 m). Postotak kontrakcije je 41% nakon stimulacije s ST.36 serumu, a kontrakcijski postotak bio 7% i 10% nakon stimulacije s bilo ne-acupoint serumu ili kontrolnog seruma, redom. Pregled Rasprava
ovom istraživanju pokazali da EA stimulacija na ST.36 imao regulativni učinak na želučanu pokretljivost kod štakora koji je bio ili nadražajni ili inhibitorni. Stimulirajuće djelovanje EA može djelovati kroz PKC i MAPK signalnih puteva.
Učinci EA na želučane pokretljivosti su opsežno studirao u obje životinje i ljudi zbog dostupnosti elektrogastrografija. Poznato je da želučana myoelectrical aktivnost sastoji sporih valova i šiljaka. Šiljci su izravno povezane s pojavom kontrakcija. Sporo valovi ne izazvati gastrointestinalne kontraktilnost, ali oni određuju maksimalnu frekvenciju želučanih kontrakcija.
Najčešće koristi acupoint u liječenju gastrointestinalnih poremećaja je ST.36. To se obično vjeruje da akupunktura može vršiti promociju i inhibirajući učinak na gastrointestinalni motilitet, ovisno o stimulirane acupoint. U ljudi, što je pokazano da stimulacija EA u ST.36 imao dvojno djelovanje na želučanu peristaltike koji su ili facilitaciji ili inhibitorni [15, 23]. Iako su pacijenti koji pate od bolesti probavnog sustava koristi od primjene akupunkture na ST.36, ali točan molekularni mehanizmi su i dalje nejasni. U pasa, EA na ST.36 povećao regularnost želučanih sporih valova [24, 25]. U svjesnih štakora, EA stimulacija na ST.36 izazvana dual posljedice, koje su bile moderiranju ili inhibitorni, na želučane pokretljivosti [26, 27]. Daljnja studija je pokazala da je stimulirajući učinak posredovan preko kolinergičkih putova, a inhibicijski učinak je neovisan o simpatičkog puta [28]. Opća teorija akupunkture medicini se zasniva na konceptu Yin i Yang, i akupunktura se vjeruje da mijenjati neravnoteže između Yin i Yang. Učinci akupunkture na ravnotežu Yin i Yang mogli biti posredovani interakcijom neurotransmisiji GABA i glutamata moždanog debla,
U ovom radu, EA stimulacije ST.36 bio učinkovit u regulaciji pokretljivosti želuca, što je pokazano od znatnog povećanja vršne amplitude i frekvencije. Osim toga, nedostatak takve reakcije kada je provedeno isto stimulacije na ne-acupoint je indikativna specifičnosti tom smislu. Prema vršne amplitude i frekvencije, ST.36 grupa je dalje podijeljena na promiču i inhibitornih uzoraka, budući da EA je pokazao dvostruki učinak. Kako bi se dodatno istražiti mehanizme kojima EA reguliraju pokretljivosti želuca, izolirani smo SMCs iz želuca i promatrati učinak ST.36 seruma na SMC kontraktilnost korištenjem serološke farmakološke metode ispitivanja. Rezultati su pokazali da ST.36 serumu značajno porastao SMC kontraktilnost; . Dok djelovanja izazvana normalnog ili ne-acupoint serumu nisu očiti
Nedavna istraživanja sugerira da su i učinci EA stimulacije posredovana opioidnog sustavu [29] ili preko svoje stimulirajući učinak na aktivnost vagalnog [30]; Međutim, točni mehanizmi po kojima EA utječe pokretljivosti želuca ne razumije u potpunosti. Prethodni rezultati također pokazuju da su PKC razine porasla nakon stimulacije s EA [31]. Stoga, odabrali smo PKC i MAPK putova kao mete za posredovanje stimulacijskih učinaka EE na želučane pokretljivosti. Štoviše, kapu i CAD mogu igrati ulogu u regulaciji gastrointestinalnog motiliteta u fiziološkim i patološkim prilagodbe. Up-regulacije ZPP-a i CAD izražavanja inhibirana gastrointestinalni motilitet i down-regulacije ZPP-a i CAD izražavanja promovira gastrointestinalni motilitet [32, 33]. ERK1 /2, član obitelji MAPK, pokazalo se da igraju značajnu ulogu u regulaciji glatkih mišića [34]. Prema našim microarray rezultate, promicanje želučane pokretljivosti mogu korelirati s up-regulaciji MAPK6 (ERK3), MAPK13 i izražavanja PTGS2 gena, i down-regulacije COL1A1 ekspresije gena. Inhibicija želučane pokretljivosti mogu korelirati s down-regulacije IL1R2 i izražavanja MMP9 gena. Western hibridizacija pokazali up-regulaciji CAD i kapom ekspresije proteina inhibiran pokretljivosti želuca, dok se regulacija CAD i kapom ekspresije proteina promovira pokretljivosti želuca. Ovi rezultati pokazuju da CAD i poklopac mogu igrati ulogu u regulaciji gastrointestinalnog motiliteta tijekom fizioloških i patoloških adaptaciju. Pregled Bilo je nekih ograničenja u ovom istraživanju koje treba spomenuti. Prvo, nismo istražili da li su inhibitori PKC i MAPK mogao utjecati ili blokirati regulatorni učinak EA stimulacije ST.36 na želučane pokretljivosti. Daljnja istraživanja će biti potrebno istražiti utjecaje PKC i MAPK inhibitora. Drugo, budući istraživanja će se usmjeriti na potpuno razumijevanje uloge svake promjene u ekspresiji gena po propisu želučane pokretljivosti.
Zaključci pregled Ukratko, naši rezultati pokazuju da EA stimulacija na ST.36 regulirano pokretljivosti želuca. EA stimulacija na ST.36 vrši dvostruki učinak na želučanu pokretljivosti koji su bili ili nadražajni ili inhibitorni. Osim toga, reguliranje želučane pokretljivosti može korelirati sa PKC i MAPK putevima prijenosa signala. Pregled Bilješke
Qi Yang, Yan-Dong Xie doprinijeli jednako na taj posao. Pregled deklaracija
Zahvale
ovo istraživanje je podržan od strane potpore iz Nacionalne zaklade prirodoslovni Kine (br 30801487)
Elektronski dopunski materijal pregled 12906_2013_1722_MOESM1_ESM.doc Dodatni file 1:. Slika S1: Učinci EA stimulacije na želučane pokretljivosti. Pokretljivosti želuca je mjerena elektrogastrografija. A. Kontrola, B. ST.36, C. Non-acupoint. Stimulacija s EA na ST.36 povećao prosječni signal amplitude i frekvencije. Želučani valovi pokazala dvostruke promjene u ST.36 skupini u usporedbi s kontrolom ili ne-acupoint grupe. Vrijednosti su izražene kao srednja vrijednost ± S.D. (N pregled = 10). * P izvoznici < 0,05, ** p izvoznici < 0.01 vs Netlogu. kontrolna skupina. #p izvoznici < 0,05, ## p izvoznici < 0.01 vs pregled ne-acupoint skupina. (DOC 1 MB) 12906_2013_1722_MOESM2_ESM.doc Dodatna datoteka 2: Tablica S1: Učinci EA na želučanu myoelectrical aktivnosti. ST.36 grupa je dalje podijeljena na EA promicanja i EA inhibirajući grupa prema želučane valova. Vrijednosti su izražene kao srednja vrijednost ± S.D (n pregled = 5). (DOC 26 KB) 12906_2013_1722_MOESM3_ESM.doc Dodatna datoteka 3: Slika S2: Učinci EA stimulacije na želučanu SMC kontraktilnost. Morfologija stanice je promatrana pomoću svjetlosnog mikroskopa (× 200 ×). Duljina stanica i postotak kontrakcije je mjerena s računalom Image Analysis sustava. O. SMCs; A. SMCs + kontrolnog seruma; B. SMCs + ST.36 serumu; C. SMCs + ne-acupoint serumu. (DOC 1 MB) 12906_2013_1722_MOESM4_ESM.doc Dodatne datoteke 4: Tablica S2: Učinci seruma na SMC kontraktilnost. Kako ocjenjuje kompjutorizirane Video sustav za obradu, Zusanli serum rezultiralo značajnim kontraktilnost u SMCs. Rezultati su izraženi kao srednja vrijednost ± S.D (n = 10) pregled. * P izvoznici < 0,05 ** p izvoznici < 0.01 vs pregled Kontrolna skupina u serumu. #p izvoznici < 0,05, ## p izvoznici < 0.01 vs pregled ne-acupoint serumu. (DOC 28 KB) autora originalnih dostavljeni datoteke za slike
Ispod su linkovi na autora izvornika dostavljenih datoteka za slike. 12906_2013_1722_MOESM5_ESM.tiff autora izvorna datoteka za Slika 1 suprotstavljenih interesa
Autori izjavljuju da nemaju konkurentne interese.
Autora doprinosa
QY provodi molekularne genetičke studije, sudjelovao je u poravnanju sekvenci i sastavio rukopis. YDX, MXZ, BiH provodi se imunoloških analiza. CZ, HYLi, RZ je sudjelovao u usklađivanju sekvenci. MQ, YXH sudjelovao u izradi studije i izveo statističke analize. JJW zamišljen istraživanja, te je sudjelovao u svom dizajnu i koordinaciju i pomogao izraditi rukopis. Svi autori pročitali i odobrili konačnu rukopis. Pregled

• Jednofazni kirurški popravak dišnih želučane fistule nakon esophagectomy
• Proučavanje antimikrobnog djelovanja, akutnu toksičnost i citozaštitnu učinka polyherbal ekstrakta u štakora etanol-HCl modelu čir na želucu