PLoS One: Caveolin-1 expressziós szintje a rákkal összefüggő fibroblasztok jósolja eredmény Gyomor Cancer

absztrakt katalógusa

Célok katalógusa

A megváltozott expresszióját epitheliális vagy stroma Caveolin-1 (Cav-1) figyelhető meg a különféle típusú humán rákok. Azonban a klinikai jelentősége Cav-1 expresszió gyomorrák (GC) még jórészt ismeretlen. Jelen tanulmány célja, hogy feltárja a klinikopatológiai jelentőségét és prognosztikai értéke a tumoros sejtek és rákkal összefüggő fibroblasztok (CAF) Cav-1 GC. Katalógusa

módszerek és eredmények katalógusa

kvantumpontok immunfluoreszcens festéseket végeztünk hogy megvizsgálja a kifejezés Cav-1, 20 esetben a gyomorhurut nélkül intestinalis metaplasia (IM), 20 esetben gyomorhurut IM és 286 esetben a GC. Pozitív árak epithelialis Cav-1 gyomorhurut nélkül IM, IM gyomorhurut és GC csökkenő tendenciát mutatott ( P katalógusa = 0,012). Alacsony kifejezése Cav-1 CAF de nem tumorsejtek volt független előrejelzője rossz prognózissal GC betegek ( P katalógusa = 0,034 és 0,005 volt a betegségmentes túlélés és a teljes túlélés). Cav-1-szint tumorsejtek és CAF nem mutatott szignifikáns összefüggést klasszikus klinikopatológiai jellemzői. Katalógusa

Következtetések katalógusa

elvesztése epithelialis Cav-1 elősegítheti a malignus progresszió és az alacsony CAF Cav-1-szint hírnök rosszabb kimenetele GC beteg, ami arra utal, CAF Cav-1 alkalmas lehet a terápiás célt, és hasznos prognosztikai markere GC. katalógusa

Citation: Zhao X, Y Ő, Gao J, Fan L, Li Z, Yang G, et al. (2013) Caveolin-1 expressziós szintje a rákkal összefüggő fibroblasztok jósolja eredménye gyomorrákban. PLoS ONE 8 (3): e59102. doi: 10,1371 /journal.pone.0059102 katalógusa

Szerkesztő: DunFa Peng, Vanderbilt University Medical Center, Amerikai Egyesült Államok katalógusa

Beérkezett: december 6, 2012; Elfogadva: február 11, 2013; Megjelent: március 19, 2013 katalógusa

Copyright: © 2013 Zhao et al. Ez egy nyílt hozzáférésű cikk feltételei szerint terjeszthető a Creative Commons Nevezd meg! Licenc, amely engedélyezi a korlátlan használatát, a forgalmazás és a reprodukció bármilyen adathordozón, feltéve, hogy az eredeti szerző és a forrás jóváírásra. Katalógusa

Forrás: Ez a munka támogatta az Országos Egyetemi innovációs Projekt Kína (NO. 111048670) és a Nemzeti Természettudományi Alapítvány Kína (NO. 30900652). A finanszírozók nem volt szerepe a tanulmány tervezés, adatgyűjtés és elemzés, döntés, hogy közzéteszi, vagy a készítmény a kézirat. "A legfrissebb

Érdekütközés: Guilin Fanpu Biotechnology Co., Ltd. adta technológiai támogatást TMA építése. Nincsenek szabadalmak, a fejlesztés alatt álló, illetve a forgalmazott termékek nyilatkozni. Ez nem változtat a szerzők betartása minden PLoS One politikák adatok megosztása és anyagok. Katalógusa

Bevezető katalógusa

Mint a normál szövetekben, a daganatok állnak két különálló, de az interaktív terek, a parenchyma és a stroma. A tumorok, a tumorsejtek maguk parenchyma, míg a stroma elegyét foglalja magában az extracelluláris mátrix (ECM) elemek és nem-rosszindulatú sejtek, mint például a rák kapcsolódó fibroblasztok (CAF-eket), vaszkuláris endoteliális sejtek és az immunrendszer és a gyulladásos sejtekben [1], [2], [3]. Az utóbbi években, a mély hatások A tumor sztróma a növekedés és metasztázis különböző típusú daganatok már széles körben tisztázott [2], [3]. Tumorsejtek kiválthatja a lerakódás egy reaktív stroma tartalmazó aktivált CAF-ek, immun- és gyulladásos sejtek, ECM elemeket, amelyek kedveznek invázió és metasztázis a rákos megbetegedések [2], [3]. Emellett, bár a határozott szerepét a fehérjék molekuláris áthallás között a tumor és stromális sejt továbbra is tisztázatlanok, megváltozott expressziója stromális fehérjéket már nyilvánul újszerű biomarkerek különböző típusú humán rákok, beleértve a mell [4], [5], [6] [7], a prosztatában [8], orrgarat [9] és a bazálsejtes rák. [10] katalógusa

A caveolin gén három tagja van: CAV1 katalógusa, CAV2
és CAV3 katalógusa, proteineket kódoló caveolin-1 (CAV-1), caveolin-2 és caveolin-3, illetve [11]. CAV1
kromoszómán helyezkedik el 7 (locus 7q31.1), és tartalmaz három exont (35, 165 és 324 bp) és a két intront (1,5 és 32 kb) [11]. CA V-1 alkotja a fő szerkezeti összetevője Caveolák, melyek lombik alakú hólyagos invaginations a plazma membrán [12], [13]. Különféle receptorok és jelátviteli molekulák lokalizálódik a caveolák és negatívan szabályozza Cav-1 révén állványzat területen. Emellett, CA V-1 közvetlen kölcsönhatásba lép a kétrétegű a koleszterin és szfingolipid belül Caveolin ezért befolyásolják a lipid homeosztázisban és a közlekedés [12], [13]. A rákos megbetegedések, ez egyre inkább egyértelmű, hogy a CAV-1 szerepet játszik a szabályozó többszörös rákhoz kapcsolódó folyamatokat, kezdve a celluláris transzformáció, a tumor növekedését, invázió és metasztázis, a multidrog rezisztencia és az angiogenezist [14]. Cav-1 mutat rekesz-függő szerepet daganatok. Az epithelialis rekesz, Cav-1 hatását pozitívan és negatívan egyaránt a daganat fejlődését. A tumor sztróma, különösen a CAF-ek, az alacsony expressziós CAV-1 protein jósolja kedvezőtlen kimenetele mell- és prosztatarák [4], [5], [6], [8], [12], [15]. Mindazonáltal, klinikai értékek CAV-1 GC marad nem teljesen világos. Alapuló előzetes kutatások azt hipotézist, hogy a szerepek CAV-1 epiteliális és stroma különböző lehet, szerepei epithelialis Cav-1 bizonytalan, de alacsony expressziója CAV-1 CAF-ek május elősegíti GC progresszió és korrelál a kedvezőtlen kimenetelét GC betegek .

közötti kapcsolat tisztázása Cav-1 és GC progresszió vagy elnyomás, elemeztük kifejezetten mindkét kötőszöveti és hámsejtek kifejezése Cav-1 szövetekben szakaszok keresztül haladó kvantumpontok (QDS) -alapú immunfluoreszcenciás hisztokémia (QDS-IHC), hogy már kifejlesztett korábbi tanulmányok és amelyeket széles körben akkreditált és laboratóriumokban használt [16], [17], [18], [19], [20], [21], [22 ]. Fluoreszkáló félvezető Nanokristály QDS egy új osztályát multifunkcionális szervetlen fluorofórok, hogy sok részesülő tulajdonságokkal, mint például a keskeny emissziós sáv csúcsok, hullámhossz azok fluoreszcencia erősen függ azok méretű és különböző QD színeket lehet egyidejűleg gerjesztve egyetlen fényforrással minimális spektrális átfedő [16], [17], [18], [19], [20], [21], [22]. Ezek a tulajdonságok teszik QDS rendkívül hasznos multiplex molekuláris képalkotás immunofluorescens [21], [23]. A fejlett több cél címkézésére technológiája QDS-IHC engedélyezve pontos elemzése CAV-1 expressziót CAF-ek, szimultán kimutatása alfa-simaizom aktin (α-SMA), amely a marker a CAF-ek és a CAV-1 proteint.

anyagok és módszerek katalógusa

a betegek és a nyomon követés katalógusa

Mivel az idő korlátozott volt, és néhány beteg a kórházból, így nehéz, hogy írásbeli hozzájárulása szükséges. Felhívtuk az egyes betegek, magyarázta a tanulmány használt tudományos cserék csak volt, és nem káros az egészségre, és nem tartalmazott a személyes adatokat. Amikor hívott, közjegyző jelen volt, és megkaptuk a mobiltelefon rövid üzenet, amelyhez szükséges a betegek, akik beleegyeznek a tanulmány, hogy elküldi nekünk. Ha a beteg meghalt, van engedélye az ő jogi képviselője. Végül kapott szóbeli hozzájárulás az összes 300 beteg. Összesen 340 formalin-fixált, paraffinba ágyazott szövetekből nyerték diagnosztizált betegek közötti időszakban 2005 júliusától 2012 februárjáig, köztük 300 GC, 20 gastritis nélkül intestinalis metaplasia (IM) szövetek és 20 gyomorhurut IM szövetekben. A gyomorhurut nélkül IM és IM mintákat származnak adenocarcinoma paracancerous szövetekben. Soros szakasz megerősítette nem tumorszövet találtak ezekben a mintákban. A mintákat gyűjtöttünk a levéltár a Pathológiai Intézet, Zhongnan Kórház Wuhan Egyetem (Hubei, P. R. Kína). A szövettani diagnózis és minőségű differenciálás szerint volt meghatározva a World Health Organization (WHO) kritériumok GC. Minden GC mintákat osztályozása az UICC TNM osztályozás (2009). Két fórumon tanúsított patológusok (Yang GF és Fan LF) megerősítette a szövettani jellemzői ezeket a mintákat. 326 mintákat sikeresen megőrizte a további elemzés; Közben 14 GC mintákat vesznek el a dia alatt immunfestést. Klinikopatológiai faktorok GC betegek táblázatban felsorolt ​​1. 247 GC betegeknél nem volt elegendő szövet elemzéshez a tumorsejtek és a rákhoz kapcsolódó fibroblaszt Cav-1 immunfestés. Mindezek a 300 beteget kezeltek reszekcióra vagy citoreduktív műtéten GC, beadása előtt a kemoterápia vagy sugárkezelés. Ez a tanulmány által jóváhagyott Institute Research Orvosi Etikai Bizottságának School of Basic Medical Science, Wuhan Egyetem. Katalógusa

követése kezdődött napján műtét és végül 2012. augusztus A fennmaradó 286 GC szöveteket a betegek 257 beiratkozott a nyomon követés csoportban és 116 beteg, akik sikeresen elérte az öt éves követési vagy halt meg, mert a GC vontak be a túlélési elemzés. A betegek, akik nem érték el az öt éves követése és meghalt egyéb betegségek miatt, vagy váratlan események, kizárták a túlélési tanulmány. A medián követési a 116 beteg 62 (tartomány: 1-85) hónap volt. A teljes túlélés definíció az intervallum napjától műtét halálra. A betegségmentes túlélés definíció szerint az intervallum napjától műtét visszatéréséig. Diagnózis a kiújulás alapján az alábbi kritériumoknak: a helyi kiújulás talált endoszkópos biopszia vagy relaparotomy; metasztázis radiológiai, ultrahangos vagy citológiai vizsgálat. katalógusa

Tissue microarray Cégkatalógus Építőipar

Két szöveti microarray (TMA) épültek. Minden készlet tartalmaz 5 TMA amelyek szerelt 340 példány. A legreprezentatívabb tumor területek kerültek meghatározásra hematoxylin- és eozin festések és fel vannak tüntetve a dián. Ahogy mi elkészítettük a TMA és a microarray rendszer eszköz volt azonos a korábbi tanulmány [24], [25]. Mint korábban tanulmányok nem számoltak intratumorális heterogenitása Cav-1 expresszió GC és a megvalósíthatósági kísérletek azt mutatták, hogy az egyik fő per tumor TMA illetve nagy mutatott jó összhangot [26], [27], [28], ezért a tesztelés kísérlet, az egyik mag mintát vettünk minden esetben. Röviden, az egyik mag a 1,5 mm átmérőjű vettünk minden mintából és beiktatjuk üres "recipiens" paraffin blokkokat; Ezek a blokkok vágtuk szakaszok (4 um vastagságú) és használt QDS-IHC analízis. katalógusa

QDS alapú Immunfluoreszcenciás Hisztokémia katalógusa

Cav-1 immunreaktivitás kimutatható volt egy készlet TMA. Az antitestek, QDS konjugált sztreptavidinnel szondák (QDS-SA), 605 nm-es emissziós hullámhosszon és a kapcsolódó reagensek a CA V-1 kimutatási ugyanazok voltak, mint korábban [16], az alábbi főbb eljárások: deparaffinizing → antigén-visszanyerés → blokkoló → primer antitesttel Cav -1 (Cell Signaling Technology, Beverly, MA) → mosás és blokkolja → biotinilált IgG → mosás és blokkolja → 605 nm-QDS-SA → mosás → szerelés és a megfigyelés. A kapott jel a címkézési sejtek tártak segítségével Olympus BX51 fluoreszcens mikroszkópia (CCD DP72). A QDS jel volt célspecifikus, a vörös és fotostabil. Autofluoreszcenciája szöveti háttér zöld volt. Mivel Cav-1 normálisan lokalizálódik az endoteliális sejtekben a vérerek [27], [29], hogy a vizsgált minden TMA, akkor lehet szolgált belső pozitív és minőség-ellenőrzés QDS-IHC. TBS helyett Cav-1 elsődleges antitesttel szolgáltak negatív kontrollként. Katalógusa

QDS alapú Double immunfluoreszcensen katalógusa

Régebben egy készlet TMA a Cav-1 /α-SMA kolokalizációját kimutatott QDS -alapú kettős immunfluoreszcens technológia szerint a gyártó utasításai (Wuhan Jiayuan kvantum pontok Co., Ltd.). Minden hígítási lépéseket (antitestek és QDS) végeztük tartalmazó TBS 2% szarvasmarha szérum albumint (BSA, Sigma, St. Louis, MO, USA). Antigén-visszanyerés végeztünk citromsav (10 mM, pH = 6,0) 95 ° C-on 10 percen keresztül, majd hűtés közben 30 min. TMA először inkubáltuk 2% BSA-pufferben 37 ° C-on 30 percig, majd 4 ° C hőmérsékleten egy éjszakán át nyúl anti-CA V-1 poliklonális antitest és egér anti-α-SMA monoklonális antitest (1:300 hígítás, ABCAM, Cambridge, MA), annak érdekében, hogy antitest-kötések. Ezután TMA háromszor mostuk TBS-T (0,5% Tween TBS) 5 percen minden egyes alkalommal, és inkubáljuk biotinilezett kecske anti-egér IgG-t (1:400 hígítás, Jackson Immuno, West Grove, PA) 37 ° C-on 30 percig keverjük. A QDS konjugáció, az antitest-kötő TMA inkubáltuk 2% BSA-pufferben 37 ° C-on 10 percig, inkubáljuk QDS (525 nm) konjugált sztreptavidinnel (1:200, Wuhan Jiayuan kvantum pontok Co., Ltd.) és QDS (605 nm) konjugált kecske anti-nyúl IgG-t (1:100, Wuhan Jiayuan kvantum pontok Co., Ltd.) 50 percig, háromszor öblítjük TBS-T-5 percig minden egyes. Végül, a TMA-vel lezártuk 90% glicerin (Sigma). Az immunfluoreszcens jelet figyeltünk meg tolómérő a multispektrális mikroszkópos képalkotó rendszerek (Caliper Life Sciences). Mivel a immunfluoreszcens jelét egyetlen címkézés és a kettős jelölési csattant CCD DP72 és multispektrális mikroszkópos képalkotó rendszerek rendre mi kalibrált eredmények a két eszköz összehasonlíthatósága érdekében ezeket a kísérleteket. Pozitív jel α-SMA zöld volt, és Cav-1 piros volt. CA V-1 expresszió endoteliális sejtekben a vérerek [27], [29], α-SMA expresszió erek és az ismert pozitív szövet tekintik a pozitív kontrollok. TBS kettő helyett primer antitestek, mint negatív kontrollok, csak mutatja autofluoreszcenciája jel. Katalógusa

pontozása Immunfluoreszcens Eredmények katalógusa

A kiértékelés két patológusok (Yang GF és Fan LF) egyidejűleg ugyanazon displayer , akik függetlenek, és tudták, hogy a klinikai tanulmány. A pontszámok a két patológusok összehasonlították, és minden eltérő pontszámokat újraértékeli átértékelodését festett szövetmintát a két patológusok, hogy konszenzust pontszámot. A módszertan pontozás CA V-1-festődés a tumorsejtek és CAF-ek azonosak voltak. Pontszámokat határoztuk kombinálásával az aránya a pozitívan festődő sejtek és a festődés intenzitása. A metszeteket először beolvassák alacsony teljesítmény. Ezután a sejteket öt reprezentatív területein minden mintából nagy nagyítással (200 ×) megszámoltuk a Cav-1-festett daganatsejtek vagy CAF. A terület a pozitív (AP) osztályozzák a sejteket az alábbiak szerint: 0 (nincs pozitív terület vagy pozitív terület < 5%), 1 (pozitív terület 5-25%), 2 (pozitív terület 26-50%), 3 ( pozitív terület 51-75%) és 4 (pozitív terület > 75%). Cav-1 intenzitású festést (IS) a számértéket eredményezte pontok: 0 (negatív: nincs pozitív jel), 1 (gyenge: világos vagy sötét piros jel) és a 2. (erős: fényes piros jelzés). Expressziós szintjét Cav-1 alapján számítottuk a teljes pontszám, mint a következő egyenletet: intenzitás eloszlás (ID) = AP × IS. Katalógusa

A cutoff érték magas és alacsony expressziót határoztuk meg a vevő működési karakterisztika ( ROC) analízis a tekintetben, hogy a teljes túlélés. Az optimális érzékenysége és specificitása a ROC görbe teljes túlélés állapot, 1,5 definiáltuk az optimális cutoff a Cav-1 immunofluorescens pontszámot CAF (egy azonosítót pontszám ≥1.5 meghatározott magas expressziója és ID pontszám < 1,5 jelzett alacsony kifejezés) 3,5 definiáltuk az optimális cutoff a Cav-1 immunofluorescens pontszámot tumorsejtek (egy azonosítót pontszám ≥3.5 meghatározott magas expressziója és ID pontszám < 3,5 jelzett alacsony kifejezés). katalógusa

Statisztikai elemzés katalógusa

SPSS 17.0 szoftver (Chicago, IL, USA) elvégezni az összes statisztikai elemzések. Friedman tesztet használtuk, hogy elemezze a különbség CAV-1 eredeti pontszámok a különböző gyomor elváltozások. ROC görbe analízist végeztünk, hogy meghatározza a töréspont a magas vagy alacsony Cav-1-szint és értékeli a prediktív értéke Cav-1 expresszió a teljes túlélés. A χ2 tesztet vagy Fisher-féle egzakt tesztet használják, hogy elemezzék az összefüggést a klinikopatológiai paraméterek és Cav-1 expresszió. Spearman korrelációs tesztet végeztünk, hogy elemezze a szövetség között Cav-1 expressziót a tumorsejtek és CAF. A teljes túlélés és a betegség túlélési arány kiszámításához a Kaplan-Meier-módszerrel, és összehasonlítottuk a hosszú-rank teszt. A többváltozós elemzés segítségével Cox regressziós modellt alkalmaztunk, hogy teszteljék a független prognózis értékeket. Kétkarú P katalógusa -értékei < 0,05 statisztikailag szignifikánsnak tekintettük. Katalógusa

Eredmények katalógusa

kifejezése Cav-1 különböző gyomorlézió katalógusa

A lokalizáció és kifejezése Cav-1 gyomorhurut nélkül IM, gyomorhurut IM és GC értékelték QDS-IHC a Cav-1 poliklonális antitest. Az erős intenzitású fánk alakú pozitív jel Cav-1 a tumorstroma volt a belső ellenőrzési endothelialis kifejezés (1A.). Gyomorhurut nélkül IM szövetekben negatív Cav-1 jel elsősorban a felszíni nyálkahártya sejtek (1A.) És pozitív jel elsősorban a bázis és nyakát fundus mirigy sejtek (ábra. 1C). Ebben gyomorhurut IM szövetekben, bizonyos esetekben nem mutattak Cav-1 eloszlás (ábra. 1E), és néhány mutatott pozitív Cav-1-festés a felszívó sejt és serleg cellája metaplasticus mirigyek (ábra. 1 g). Expression CAV-1 immunreaktivitás elsősorban megfigyelhető a sejtmembránon (ábra. 1 liter) és a citoplazmában. A szabványos jel pontozás volt ábra mutatja. 1I-K és a reprezentatív példákkal CAV-1 expressziót GC arra mutatott ábra. 2. kolokalizációját Cav-1 és α-SMA fehérje kimutatható volt QDS alapú kettős immunfluoreszcensen a GC, és elemezzük multispektrális képalkotó rendszerek, hogy pontosan meg lehessen határozni Cav-1 expresszió CAF (3.). Az elosztó a jel Cav-1 fibroblasztok véletlenszerű és nincs kapcsolatban a Cav-1 állapotát tumorsejteket. Katalógusa

A 2. táblázat foglalja össze az eredeti pontszámok Cav-1 expresszió gyomorhurut nélkül IM, gyomorhurut IM és a GC. Hám rekesz, 30% (20/06) a gyomorhurut nélkül IM, 55% (11/20) gyomorhurut IM, 75% (15/20) GC pontozták 0, bemutatva Cav-1 fehérje expressziós szint fokozatosan csökken . Friedman teszt megmutatta, hogy a különbség a Cav-1-festés közötti pontszámot gastritis nélkül IM, gyomorhurut IM és GC statisztikailag szignifikáns volt ( P katalógusa = 0,012). Katalógusa

A korreláció kifejezése Cav-1 között tumorsejtek és CAF

korrelációja tumorsejtek és CAF a Cav-1 expresszió is elemezték. Amint a 3. táblázatban látható, többek között 226 esetben alacsony CA V-1expression tumorsejtekben, 121 (53,5%) esetben mutatott alacsony expressziója CAV-1 CAF-ek (2A.), És azok között 21 esetben a magas CA V-1 expresszióját tumorsejtekben, 9 (42,9%) esetben jelenik magas CA V-1 expresszió CAF-ek (ábra. 2C). A többi 117cases kimutatta eltérő az expressziós állapotát tumorsejt és CAF-ek (ábra. 2E és G). Szignifikáns összefüggést nem alakult közötti tumorsejtek és CAF Cav-1 expresszió (r = -0,20, P katalógusa = 0,751). Katalógusa

klinikai jelentősége Cav-1 expresszió daganatsejtek és CAF a GC

Minden 286 GC mintákat elemzés céljára elérhető CAV-1 immunfestés tumorsejtekben és 247 (86,4%) esetben elegendő szövetek elemzéséhez CAV-1 immunfestéssel CAF-eket. 3. táblázat foglalja össze a korreláció tumorsejtek vagy CAF a Cav-1 expresszió és a klasszikus klinikopatológiai paraméterek GC, mint az életkor, a nem, a T-stádium és a nyirokcsomó státusz egyváltozós elemzés. Azonban nincs szignifikáns összefüggést találtak. Katalógusa

Továbbá vizsgáltuk a prognosztikai Cav-1 expresszió tumorsejtek és CAF. Kaplan-Meier analízis és log-rank teszt azt mutatta, hogy az alacsony expressziója Cav-1 CAF helyett tumorsejtek megjósolt rossz túlélést. A teljes túlélés középértéke alacsony CAF Cav-1 expresszió alcsoportban 73,0 hónap volt (95% CI, 55,589-90,411), míg a nyomon követési időköz, a magas CAF Cav-1 expresszió alcsoport volt számított túlélési aránya körülbelül 0,8 (ábra . 4A). Ábrán látható. 4B, alacsony expressziója Cav-1 CAF is megjósolta korai kiújulás GC betegeknél. A 4C és D jelezte, hogy a tumorsejtek Cav-1 állapot nem volt szignifikáns korrelációt mutat a teljes túlélés és betegségmentes túlélés ( P katalógusa = 0,178 és 0,104-kal). Sőt, az összesített 5 éves túlélési arány a betegek, akiknek a daganata mutatott magas CAF Cav-1 expresszió volt 75,5% (95% CI, 0,642-0,868), míg már csak 57,4% (95% CI, 0,456-0,692) alacsony CAF Cav-1 csoport ( P katalógusa = 0,053). katalógusa

az egyváltozós elemzés szerint TNM, T-stádium, nyirokcsomó státusz és CAF Cav-1-szint találtak szignifikáns összefüggést a betegség túlélés GC betegek ( p
= 0,001, 0,003, 0,010 és 0,029, illetve; 4. táblázat). TNM, T-stádium és CAF Cav-1 szint szignifikánsan korrelált a teljes túlélés ( P katalógusa = 0,012, 0,006, 0,013 és rendre; 4. táblázat). Annak meghatározására, hogy a CAF-ek Cav-1 expresszió független előrejelzője GC betegek kiújulás és a túlélés, a többváltozós analízist Cox regressziós modellben, valamint az életkor, a T besorolás, TNM és más tumor tulajdonságait. Ismét Cav-1-szint CAF-ben önállóan és szignifikáns összefüggést a GC betegek kiújulás és eredményét ( P katalógusa = 0,034 és 0,005, illetve, 4. táblázat). Éppen ellenkezőleg, a tumorsejtek CA V-1-szint nem prognosztizálható GC beteg kiújulás és a túlélés a szimultán modellben (4. táblázat).

A halál prediktív értéke CAV-1 küszöbértékek tumorsejtekben és CAF-ek elemeztük is. Amint azt mutatta, az 5. ábrán a CAV-1-szint CAF-ek előrejelzett halál jó teljesítményét; A görbe alatti terület volt 0,627 (95% CI: 0,515-0,738; P katalógusa = 0,032). Mivel Cav-1-szint daganatos sejtek nem megjósolni halállal, a görbe alatti terület a 0,551 (95% CI: 0,438-0,664; P katalógusa = 0,393). Katalógusa

Vita

Itt azt jelentette, hogy a CAV-1 immunreaktivitás főleg megfigyelhető a sejtmembránon és a citoplazmában. Gyomorhurut nélkül IM szövetek, Cav-1 jel túlnyomórészt kimutatható a bázis és nyakát fundus mirigy sejtekből. Ebben gyomorhurut IM szövetekben Cav-1-festés elsősorban elhelyezi a felszívó sejt és serleg cellája metaplasticus mirigyek. Ez az eredmény korrelációt mutat a másik tanulmány, amely elemezte CA V-1 a gyomor szöveti keresztül immunhisztokémia [27]. CA V-1 expresszió fokozatosan csökken a progresszió a GC és az expressziós szint in CAF-ek helyett a tumor sejtek bizonyos mértékben jósolja kiújulás és a túlélés GC betegeknél.

Roles CAV-1 fehérje tumor fejlődés tumor-függő és rekesz-függő [12], [30]. CAV-1 gén lokalizálódik lokusz D7S522 emberi kromoszóma 7q31.1, ami gyakran törölt bizonyos típusú daganatok [11]. Továbbá a CAV-1 szerepet játszik a Caveolin állványzat domén és indukálhat gátlása citokin receptor jelátvitel [14], ami arra utal, a tumor szuppresszor szerepe CAV-1. A tumor elősegítő aktivitását CAV-1 már széles körben megerősítette gondosan detektálásával expressziós szintek és a klinikai értékek fajta rákos megbetegedések, mint például a nyelv pikkelyes sejt karcinóma, a nyelőcső pikkelyes sejtes karcinóma, húgyhólyag átmeneti sejt karcinóma, nazofaringeális karcinóma és a nyak pikkelyes sejtes karcinóma [16], [31], [32], [33], [34]. CA V-1-nek a különböző szerepeket a tumorsejtekben és stromális sejteket. Például, a mell- és prosztatarák, elvesztése stromális CA V-1, de nem tumorsejtek Cav-1 hírnöke rossz prognózissal [6], [8], [12], [14], jelezve a rekesz-függő szerepei Cav- 1.

Eredményeink azt mutatták, hogy a CAV-1 expressziós szintje a hámban sejtek fokozatosan csökkent a malignus progresszió GC. Hasonló eredményeket kaptunk az eredmények egy másik tanulmányban [26] vizsgálja Cav-1-expresszió az IM és GC, ami Cav-1 lehet tekinteni, mint egy tumorszuppresszor a fejlesztés a GC. Továbbá mindkét tumorsejtek és CAF-ek CA V-1 fehérje expressziós státus nem korrelált a tipikus klinikopatológiai paraméterek, mint például a T-stádium, TNM és Lauren besorolás. Ez ellentétben volt a másik vizsgálatban [26], amely azt mutatta, hogy az alacsony expressziója tumorsejtek CA V-1 fehérjét korrelált magas T stádium, TNM és nyirokcsomó-metasztázis. A különbség oka lehet, hogy az értékelés módszere: értékeltük a festési megszorozzuk az intenzitás és aránya festett sejtek és meghatározták a töréspont, hogy már az optimális érzékenysége és specificitása a ROC görbe alapján teljes túlélés állapotát; míg a másik csak kutatás a százalékos immunpozitív sejtek értékeltük, és a küszöb pozitív vagy negatív nem ismertették. Emellett a nagyobb minta esetén a vizsgálatunk befolyásolta az eredményeket is. Katalógusa

CAF között az egyik alapvető összetevője tumorstroma, fontos funkciókat indukáló lerakódását ECM szabályozó epitheliális differenciálódás és gyulladásos választ, és kölcsönhatásban áll hajszálér által szekretáló mátrix metalloproteinázok és a vaszkuláris endoteliális növekedési faktor [35]. Mivel Cav-1 fehérje a szükséges szerkezeti eleme Caveolák, megváltozott expressziója Cav-1 fehérje CAF hatással lenne a különböző kóros folyamatok, és így elősegíti a tumor fejlődését. Loss CAV-1 fehérje CAF-ek elősegíti a aktiválását CAF-ek keresztül aktiváló TGF-β útvonal, ezért megkönnyíti a tumor mikrokörnyezetében átalakítás és a tumor fejlődését [12]. Ugyanakkor egy másik tanulmány a Cell katalógusa számolt ellentétes funkciója CAF Cav-1 fehérje stroma Cav-1 kedvez tumor invázió és metasztázis erővel függő építészeti szabályozás a mikrokörnyezet [36]. Ezért a szerepe a CAF Cav-1 továbbra is bizonytalan. Az itt közölt eredmények igazolták független prognosztikai előrejelzője GC bevonásával CAV-1 expressziós szintje a CAF-eket. Alacsony kifejezése Cav-1 CAF de nem tumorsejtek függetlenül prognosztizált korai kiújulás és a rossz túlélési GC betegeknél. ROC analízis jelezte a halál előrejelzésére értéke alacsony Cav-1 CAF-eket. Az eredmények hallgatólagos tumor gátló szerepe CAF Cav-1 fehérje volt, és egybevág azzal a megfigyeléssel mell- és prosztatarák, amely rávilágított arra, hogy elvesztése stroma Cav-1 hírnöke rossz prognózist jelent [8], [12], [15]. Továbbá, a mellrák, egyértelmű, hogy a fejlődés a rák, a tumor mikrokörnyezetében válik hipoxiás és rosszul táplálkozás rést, stimuláló autofágia CAF-eket. Ezután a rendellenes aktivált autofágia degradálja Cav-1 CAF. Persze, hogy hasonló mechanizmusok léteznek GC igényel in vitro vizsgálatok katalógusa.

Továbbá elvesztése stroma Cav-1 nagy prediktív értéke ER (+), PR (+), HER2 (+), és az úgynevezett hármas-negatív emlőrákban szenvedő betegek (ER (-) /PR (-) /HER2 (-)). ezzel párhuzamosan indított endokrin terápia nem befolyásolja annak prediktív érték, így egy új, univerzális, vagy széles körben alkalmazható az emlőrák prognosztikai [37]. GC a negyedik közös és a harmadik halálos rákot okoz a világon [38], ami még mindig hiányzik ahhoz megfelelő biomarkerek prognosztikai értékelését és a személyre szabott rákellenes kezelés. A HER2 pozitív GC beteg részesült trastuzumab kezelés azonban csak néhány beteg HER2 pozitív, például csak 19% -a GC betegnél HER2 pozitív a vizsgálatba. Napjainkban a fejlett GC negatív betegeknél HER2 még mindig szenved szegény túlélést. Így jobban azonosulnak célokat, amelyek elnyomják a GC fejlődés nagy szükség van. A leírásban bemutattuk értékeit használva stromalis fehérjék biomarkerek GC, amelyek hozzájárulhatnak a molekuláris tipizálása GC és ennek következtében a kezelés a GC, ellenőrizve az alapvető szerepeket A tumor sztróma tumor fejlődését. Sőt, a prospektív vizsgálat erősen ajánlott, hogy érvényesítse a prognosztikai értékét és vizsgálja meg a klinikai jelentősége kimutatására Cav-1 CAF. Katalógusa

Egy érdekes dolog az, hogy bár a CAF Cav-1 állapot lehet használni, mint egy prediktor , amikor a korreláció CAF Cav-1 szintek és a klasszikus klinikopatológiai paraméterek GC elemezték, szignifikáns összefüggést találtunk. Így, elősegítve a tumor invázió és metasztázis nem lehet az elsődleges mechanizmus, amellyel az elvesztése CAF-ek CA V-1 elősegíti GC fejlődését. Kemoterápia a leggyakoribb kiegészítő terápiaként, illetve ajánlott a közepes és előrehaladott stádiumban GC beteg Kínában. Kombinálva az eredmény itt látható, azt hangsúlyozta, hogy akár alacsony expressziója Cav-1 CAF korrelált kemoterápia rezisztencia jelentős probléma érdemes további vizsgálat. Katalógusa

Végül, az általunk vizsgált keresztül haladó QDS alapú kettős immunfluoreszcensen technológia, Cav-1 fehérje CAF-ben pontosan találhatók. Az ál-szín kolokalizációs képek lehetővé tette számunkra, hogy értékelje a Cav-1-szint CAF kizárólag azonban QDS-IHC és QDS alapú kettős immunfluoreszcensen technológia általában nem használják a klinikai laboratóriumokban. Immunhisztokémia a leggyakrabban gyakorolt ​​technológia a klinikai laboratóriumokban. Korábbi vizsgálatunkban nyilvánul hogy QDS-IHC módszer olyan érzékeny és specifikus, mint az IHC [22]. Ha azt szeretnénk, hogy észlelni egyidejűleg két különböző fehérjék, mint például Cav-1 és α-SMA egy csúszda, QDS alapú kettős jelölés egy új, megbízható és alternatív módszer, amellyel meg tudjuk, hogy az eredmények a lehető legpontosabb.

Következtetések katalógusa

Összefoglalva, vizsgálatban a Cav-1 expresszió a tumoros sejtek és CAF és vizsgálták ezek klinikai jelentősége GC betegeknél. Érdemes megjegyezni, hogy ez a kifejezés CAV-1 CAF-ek ahelyett, tumorsejteket különösen alkalmazható előrejelzésében korai kiújulás és szegény túlélési kilátásai GC betegek, ami arra utal, CA V-1 a CAF-ek lehetnek a jelölt terápiás célpont és hasznos prognosztikai markere GC betegek . További vizsgálatok szükségesek, hogy vizsgálja meg a mechanizmusok, amelyek a magas szintű Cav-1 CAF elnyomja GC progresszió, és esetleg fejleszteni gyógyászat célzó Cav-1. Ezenkívül további klinikai vizsgálatok elengedhetetlen lesz, hogy ellenőrizze a prognosztikus CAF Cav-1 GC és attól, hogy hozzájárulhat a személyre szabott rákellenes kezelés. Katalógusa

Köszönetnyilvánítás katalógusa

A szerzők köszönetet mondanak Dr. Kathryn a Solka, Biokémiai Tanszék, Rush University Medical Center írásához segítséget. katalógusa