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Una popolazione mista di Helicobacter pylori, Helicobacter bizzozeronii e "Helicobacter heilmannii" nella mucosa gastrica di un gatto domestico

Una popolazione mista di Helicobacter pylori, Helicobacter bizzozeronii
e "Helicobacter heilmannii
" nella mucosa gastrica di un gatto domestico
Abstract
sfondo
La presenza di Helicobacter
all'interno della mucosa gastrica è responsabile per la produzione patologia in molte specie animali, incluso l'uomo. Dal momento che gli esseri umani hanno dimostrato di nutrire molte delle stesse specie batteriche come carnivori domestici, preoccupazione per il loro potenziale zoonosi è in crescita. Helicobacter pylori
, una classe 1 agente cancerogeno responsabile di casi di gastrite e cancro gastrico negli esseri umani, produce una patologia simile in animali carnivori da compagnia ed è considerato un esempio di anthroponosis. Il caso qui presentato si riferisce ad una di 13 anni di razza mista sterilizzati gatta visto a necroscopia.
Risultati
campioni di stomaco sono stati analizzati per la presenza di Helicobacter
spp. per la citologia, istopatologia e PCR. Lieve atrofia della mucosa è stata osservata nel fondo e antro, mentre linfoplasmacellulari infiltra dove indicato nella lamina propria della antro. Helicobacter sono stati osservati -come organismi nel corpus e antro, occupando ghiandole mucosa gastrica e di superficie
. E 'stato possibile individuare Helicobacter
spp., H. pylori
, H. heilmannii
e H. bizzozeronii
nel fondo, corpus e antro mediante PCR, mentre nel antro campioni di PCR sono risultati positivi per H. pylori
.
Conclusioni
La femmina sterilizzata in fase di studio potrebbero rappresentare sia una popolazione ancora non-descritto di gatti domestici infettati da H. pylori
o un caso di anthroponosis.
Parole
Feline Helicobacter
Zoonosi gastrite PCR istopatologia risultati
Sfondo
Helicobacter pylori
è un grammo negativo, ureasi positivi, batteri spirale classificata dall'Organizzazione mondiale della sanità come cancerogeno di classe 1 come la sua relazione con gastrite umano e cancro gastrico è stata affermata [1]. La maggior parte delle 32 specie descritte finora sono microrganismi enterici di mammiferi, mentre 12 specie sono abitanti gastrici. Quattro specie sono ormai considerati come comune nella mucosa gastrica di carnivori domestici, Helicobacter felis
, Helicobacter
bizzozeronii, Helicobacter Salomonis
, "Helicobacter heilmannii"
tipi 1, 2 e 4 [2, 3], mentre il ruolo di
H. amabilis 'come un organismo gastrica primario rimane discutibile. Anche se il ruolo patogenetico di queste specie nella gastrite e /o cancro gastrico deve ancora essere fermamente stabilito in animali domestici [4, 5], felini sembrano essere molto più sensibili quindi canini [6]. fibrosi gastriche e atrofia sono stati collegati a
infezione da H. felis nei gatti [7], mentre la presenza di follicoli linfoidi e l'infiammazione sono stati legati alla Helicobacter
spp. e "H. heilmannii "senso lato
colonizzazione [8, 9].
E 'stato suggerito che, gli esseri umani in modo simile a H. pylori
infetti, la presenza di H. heilmannii
potrebbe svolgere un ruolo nella alimentare felina linfoma [10]. Ci sono diverse ragioni per la crescente preoccupazione per quanto riguarda il potenziale zoonotico di questi batteri [11]. In primo luogo, gli esseri umani hanno dimostrato di nutrire specie diverse da H. pylori
con conseguenze patologiche; in secondo luogo, è stata trovata nessuna fonte ambientale per questi batteri; infine, studi epidemiologici hanno dimostrato un legame tra il contatto animale e infezioni [12]. Anche se H. pylori
produce patologia simile in animali carnivori da compagnia e negli esseri umani, questa specie deve ancora essere trovato nelle normali popolazioni carnivori domestici [13, 14], rendendo questi casi buoni esempi di anthroponosis [4, 6, 13]. Tuttavia, Buczolits et al. [15] hanno identificato due sequenze da Helicobacter
-come organismi 100% identico a H. pylori
nella mucosa gastrica di canini, ri-accendere il dibattito sul ruolo dei carnivori da compagnia nella trasmissione di questo batterio per gli esseri umani. Il presente lavoro descrive la presenza di H. pylori
in una popolazione mista di Helicobacter
specie nella mucosa gastrica di un gatto a pelo corto domestico. Presentazione
Caso
A 13 anni di razza mista sterilizzati gatta con una storia di tumori mammari e versamento pleurico, eutanasia su richiesta dei proprietari, è stato presentato per la necroscopia al Dipartimento di Patologia della Facoltà di Medicina veterinaria, Università di Lisbona. Lo stomaco è stato aperto lungo la grande curvatura, è stata eseguita la citologia pennello e quattro biopsie a tutto spessore in cui ottenuti dal fondo, corpus e antro per istopatologia e analisi PCR. citologie Brush dove ottenuti utilizzando sterili, singoli cicli uso inoculazione e colorati con May-Grünwald-Giemsa. Una biopsia da ogni regione gastrica è stato conservato in formalina al 10% per l'elaborazione istologico. Un campione combinato, che comprende un campione da ogni regione, e le restanti biopsie delle tre regioni sono stati tenuti congelato a -80 ° C, fino a quando l'estrazione del DNA con Qiagen DNeasy® Blood & amp; Tissue Kit, secondo le istruzioni del produttore. Le reazioni PCR per Helicobacter
spp.
, H. pylori
, H. felis
, H. heilmannii
, H. bizzozeronii
, H. Salomonis
e H. bilis
sono stati eseguiti come precedentemente descritto [3, 7, 16-19], utilizzando FidelTaq ™ MasterMix (USB® Prodotti - Affymetrix, Inc.). ceppi di riferimento H. pylori
CCUG 17874 T, H. felis
ATCC 49179, H. bizzozeronii
CCUG 35045, H. Salomonis
CCUG 37845, H. amabilis
ATCC 51630 e H. heilmannii
DNA (gentilmente fornito dal Prof. KW Simpson) sono stati utilizzati come controlli positivi. Le biopsie per istopatologia sono stati incastonati in blocchi di paraffina, elaborati e colorati con ematossilina e eosina e con Giemsa. Commercio basato sugli standard mondiale Piccolo veterinaria Associazione istopatologici [20], è stata osservata lieve atrofia della mucosa nel fondo e antro, mentre moderata infiltrati linfoplasmacellulari sono stati notati nella lamina propria della antro. Helicobacter sono stati osservati -come organismi nel corpus e antro, occupando ghiandole mucosa gastrica e di superficie (Figura 1A), dove la colonizzazione è stata classificata come lieve
. Spazzola la citologia è stata positiva nel fondo e corpus (Figura 1B), ma negativo nel antro. PCR effettuata utilizzando DNA estratto dal campione combinato è positivo per Helicobacter
spp., H. pylori
, H. heilmannii
e H. bizzozeronii
, originario di 1200 bp, 298 bp, 580 -BP e ampliconi 420-bp, rispettivamente (Figura 2). Quando la prova singolarmente, le tre regioni sono stati positivi per Helicobacter
spp.
, H. heilmannii
e H. bizzozeronii
, mentre solo l'antro è stato positivo per H. pylori
. Figura 1 batteri a spirale, in coerenza con Helicobacter spp. trovato nello stomaco (A) nella mucosa superficie. 1000x. Giemsa. (B) e spazzola di citologia della regione fondo. 1000x. May-Grünwald-Giemsa. (fotografie originale).
Figura 2 reazioni PCR. scala molecolare in corsia 1 e 14 (Hyperladder II ™ Bioline); controlli negativi in ​​corsia 2, 5, 8 e 11; controlli positivi di Helicobacter
spp. (Corsia 3 usando H. felis
ATCC 49179), H. pylori
(corsia 6), H. heilmannii
di tipo 2 (corsia 9), H. bizzozeronii
(420-bp, corsia 12); I risultati dei campioni H.
spp (1.200-bp, corsia 4), H. pylori
(298-bp, corsia 7), H. heilmannii
(580-bp, corsia 10) e H. bizzozeronii
(420-bp, corsia 13).
Conclusioni
La presenza di una Helicobacter
popolazione mista è stata descritta in precedenza in biopsie gastriche felini [21]. La nostra scoperta di una lieve atrofia della mucosa è coerente con altri studi [6, 22]; tuttavia Simpson et al. [7] cambiamenti nell'architettura della mucosa gastrica con la presenza di H. felis
collegato, una specie non trovati in questo cat. H. heilmannii
ha dimostrato di alterare l'architettura gastrica, ma attraverso la proliferazione epiteliale e linfoide iperplasia follicolare [9], non si atrofizzano. È possibile tuttavia che la presenza di H. pylori Comprare e H. bizzozeronii
alterato la capacità patogeno H. heilmannii
come descritto per infezioni miste di H. bizzozeroniiI /H. felis
[11]. Il fatto che il fondo e antro sono state le regioni più colpite è coerente con altri risultati [8] e, sebbene non caratteristica, la presenza di infiammazione nel antro è simile a quello trovato in felini sperimentalmente infettati con H. pylori
[ ,,,0],21].
il verificarsi di H. pylori
nella mucosa gastrica dei felini è stato riportato solo in un particolare allevatore commerciale [23], ma non nelle popolazioni randagi e domestici [13, 14, 24]. La femmina sterilizzata sotto studio potrebbe rappresentare sia una popolazione ancora non-descritto di gatti domestici infettati da H. pylori
o un caso di anthroponosis, come ipotizzato da alcuni autori [4, 5, 13]. Considerando la capacità H. pylori
s 'per sopravvivere in acqua [25] e la tendenza per mantenere i gatti esterni interni /in Portogallo, la colonizzazione di questo animale attraverso una fonte di acqua contaminata deve essere considerato. Non è stato possibile determinare se umani co-abitanti erano H. pylori
positivo o se l'animale ha avuto accesso all'esterno.
La presenza di H. heilmannii
nei gatti è stato collegato a varie alterazioni nella mucosa gastrica [9] e il linfoma alimentare [10]. Jergens et al. [22] hanno dimostrato che il trattamento porta al miglioramento dei segni clinici gastrite e la clearance batterica, anche se i segni istologici di gastrite rimangono, che suggerisce una relazione causale simile a quello visto in H. pylori
esseri umani infetti [16]. Tuttavia, altri studi non possano evidenziare tale rapporto, altri fattori come l'effetto di infezioni miste e la possibilità di virulenza dipendente, devono essere considerati. La presenza di una infezione mista di H. heilmannii Comprare e H. pylori
, come si trova in questo gatto, potrebbe spiegare lo sviluppo della patologia in alcuni animali e non in altri infettati solo con H. heilmannii
. Dato
modello di distribuzione focale di H. pylori [6], la piccola dimensione del campione normalmente ottenuti attraverso l'endoscopia e anche la biopsia [21] può spiegare l'alto tasso di risultati negativi per H. pylori
.
Il ruolo svolto da Helicobacter
nella gastrite felino, associato o meno con linfoma, rimane controverso. Diversi fattori, come le specie di Helicobacter
presente, la virulenza del ceppo, e la predisposizione genetica dell'animale, dovrebbe esaminare ulteriormente al fine di comprendere meglio la loro relazione con la malattia clinica.
Abbreviazioni
PCR:
reazione a catena della polimerasi

DNA:
acido desossiribonucleico

Bp:
coppie di basi .
Dichiarazioni
Ringraziamenti
Gli autori desiderano ringraziare CIISA /FMV per il loro sostegno finanziario (Progetto Pest-OE /AGR /U10276 /2014, finanziato dalla FCT), il professor Kenneth W. Simpson per il tipo di donazione H. heilmannii
DNA usato come controllo positivo per la PCR, professoressa Maria Conceição Peleteiro per la sua consulenza di esperti, così come e Tec. Sandra Carvalho per la sua assistenza con l'istopatologia e Tec. Carla Carneiro per la sua assistenza nel laboratorio di batteriologia.
Autori fascicoli presentati originali per
di seguito sono riportati i link ai file degli autori originali inviati per le immagini. 'file originale per la figura 1 13620_2014_80_MOESM2_ESM.tif Autori 13620_2014_80_MOESM1_ESM.tif autori file originale per la figura 2 interessi in competizione
Gli autori dichiarano di non avere interessi in gioco.
contributi degli autori
RCT identificato il paziente, raccolti i campioni gastrici ed eseguito la citologia pennello. RCT e MO eseguiti i processi di laboratorio che hanno permesso il trattamento dei campioni per le analisi PCR. HP ha eseguito l'istopatologia. RCT e CLV sono stati coinvolti in acquisizione dati, l'analisi e l'interpretazione e la stesura del manoscritto. MMREN è stato coinvolto nella revisione del manoscritto, contribuendo al suo contenuto intellettuale. Tutti gli autori hanno letto e approvato il manoscritto finale.

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