effetto gastroprotettiva di carrubo (Ceratonia siliqua L.) contro l'etanolo stress ossidativo indotto nel ratto

effetto gastroprotettiva di carrubo (Ceratonia siliqua
L.) contro l'etanolo stress ossidativo indotto nel ratto
Abstract
sfondo
Abbiamo puntato nel presente studio, di indagare l'effetto gastroprotettori di carrube estratto acquoso ( CPAE) su etanolo stress ossidativo indotto nei ratti così come il meccanismo implicato
Metodi
adulti ratti maschi Wistar sono stati utilizzati e suddivisi in sei gruppi di dieci ciascuna:. controllo, EtOH (80% v /v, 4 g /kg di peso corporeo
), EtOH 80% + varie dosi di CPAE (500, 1000 e 2000 mg /kg, peso corporeo
) e EtOH + famotidina (10 mg /kg, PO) gli animali sono stati perorally (po
) pre-trattati con CPAE durante 15 giorni e intossicati con una singola somministrazione orale di EtOH (4 g /kg di peso corporeo
) per due ore.
Risultati
l'analisi colorimetrica hanno dimostrato che il CPAE mostrato un importanza in vitro
attività antiossidante contro i radicali ABTS e DPPH. Abbiamo scoperto che CPAE pretrattamento in vivo
, protetti contro i cambiamenti macroscopici e istologici EtOH indotta indotte nella mucosa dello stomaco. amministrazione estratto di carruba anche protetta contro volume di alcol-indotta diminuzione succo gastrico. Ancora più importante, abbiamo dimostrato che CPAE neutralizzata EtOH indotta lipoperossidazione gastrico, ha invertito la diminuzione di gruppi sulfidrilici (SH) un perossido di idrogeno ( 2O 2 H) i livelli, e ha impedito l'esaurimento dell'attività enzimatica antiossidante di superossido dismutasi (SOD), catalasi (CAT) e glutatione perossidasi (GPx).
conclusioni
Questi risultati suggeriscono che CPAE esercitato un potenziale effetto gastro-protettivo contro EtOH stress ossidativo indotto nei ratti, dovuto in parte, alla sua proprietà antiossidanti.
Parole
baccelli ulcera gastrica carruba ossidativo capacità antiossidante lo stress Rat Sfondo
In disturbi gastrointestinali, ulcera è una malattia comune con più eziologie. Questa malattia, caratterizzata da un danno della mucosa, è prevalentemente causata da Helicobacter pylori
, antiaggreganti come l'acido acetilsalicilico [1], farmaci anti-infiammatori non steroidei (FANS), come i bifosfonati orali, cloruro di potassio, i farmaci immunosoppressori [2, 3 ], gli inibitori del reuptake della serotonina [4], il fumo di sigaretta e il consumo di alcol [5]. La fisiopatologia dell'ulcera gastrica è generalmente concentrata sulla squilibrio tra fattori aggressivi e protettivi nello stomaco, come la secrezione di acido-pepsina barriera della mucosa, secrezione di muco, il flusso di sangue, la rigenerazione cellulare, prostaglandine e fattori di crescita epidermico [6]. lesioni gastriche etanolo-indotta si riferisce principalmente alla forte infiltrazione nel sub-mucosa che promuove la formazione di specie reattive dell'ossigeno (ROS), diminuzione di muco, la deplezione di gruppi sulfidrilici e diminuzione del flusso sanguigno, con conseguente danno della mucosa gastrica [7]. ROS soprattutto idrossile gioco radicale ruolo importante nel causare danno ossidativo della mucosa in tutti i tipi di ulcere [8]. Per determinare il possibile meccanismo attraverso il quale le sostanze possono agire per promuovere gastroprotezione, diversi antiossidanti molecole come la quercetina [9] e la curcumina [10] sono stati precedentemente studiati
. Carrubo (Ceratonia siliqua L.
) è una lenta crescita albero sempre verde coltivato per anni nei paesi del Mediterraneo. Il frutto carruba, marrone pod 10-25 cm di lunghezza, contiene molte sostanze bioattive come carboidrati dolce, fibre alimentari, tannini e polifenoli [11]. Molti degli effetti benefici per la salute associati al consumo di alimenti ricchi di fenolici sono essenzialmente a causa delle loro attività antiossidante [12, 13]. Per l'estratto di carruba, questa proprietà è stata precedentemente riportata in in vivo
e in vitro
[14, 15]. Recentemente, abbiamo e altri scoperto che tunisino estratto di foglie di carruba presenta alcuni effetti migliorativi nei confronti di alcol o CCl 4-indotta danno ossidativo nei ratti tessuti [16, 17]. Inoltre, la fibra carruba presentano elevata capacità antiossidante determinata con la prova antiradicalica DPPH, cioè, superiore a molti altri alimenti ricchi di polifenoli, come mirtilli, uva o vino rosso [18, 19].
Pertanto, il presente studio è stato progettato per valutare il ruolo gastroprotettivi putativo del estratto acquoso di carrube (CPAE) (15 giorni) contro lo stress ossidativo indotto da esposizione etanolo acuta e il meccanismo coinvolto in tale protezione.
Metodi
Etica dichiarazione
i permessi necessari per gli studi sul campo e la raccolta di carrube campioni sono stati ottenuti dal Ministero dell'Agricoltura in Tunisia e identificato dalla signora Mouhiba Ben-Naceur, professore di tassonomia in Higher Istituto di Biotecnologie di Beja, Tunisia. I provini Voucher sono stati depositati presso l'erbario dell'Istituto Superiore di Biotecnologie di Beja e anche presso il Dipartimento di Scienze Biologiche, Facoltà di Scienze, Tunisia.
Preparazione dell'estratto di carruba
Le carrube maturi sono stati raccolti dalla regione di Tabarka (Nord-Ovest della Tunisia) nel mese di ottobre 2013. in breve, il materiale vegetale è stato poi essiccato in un incubatore a 50 ° C per 72 ore e in polvere in un frullatore elettrico (Moulinex Ovatio 2, FR). miscela di polvere contenente pasta di carruba (90%) e semi (10%) è stato sciolto in acqua bidistillata e filtrata attraverso un colino (maglia 0.5 mm). Infine, l'estratto acquoso carrube è stato immediatamente utilizzato per in vitro
e in vivo
esperimenti.
Attività dei radicali liberi-scavenging su DPPH
La capacità antiossidante dell'estratto acquoso di carrube è stata effettuata utilizzando 2,2-difenil-1-picrylhydrazyl (DPPH) L'attività radical-scavenging come precedentemente descritto da Grzegorczyk et al. [20]. Brevemente, sono stati aggiunti 1 ml di 0,1 mM soluzione metanolica di DPPH varie concentrazioni di CPAE (20, 50, 100, 150, e 200 mg /ml) e incubate a 27 ° C durante 30 min. La densità ottica del campione è stato quantificato a 517 nm. DPPH attività radical-scavenging (RSA), espresso in percentuale, è stato stimato utilizzando la seguente formula: $$ \\mathrm{R}\\mathrm{S}\\mathrm{A}\\left(\\%\ ight)=\\frac{{{{}^A}_{\\mathrm{DPPH}}}^{-}\\left({{}^{A_{\\mathrm{sample}}}}^{-{A}_{\\mathrm{control}}}\ ight)}{{}^{A_{\\mathrm{DPPH}}}}\\times 100 Acido ascorbico $$ è stato usato come una molecola di riferimento nella stessa concentrazione come estratto test.
Tutte le analisi sono state eseguite in triplicato. La concentrazione di efficacia 50 (CE 50) il valore è stato determinato come la concentrazione (in mg /ml) del composto necessario per pulire il 50% del DPPH radicali.
Attività dei radicali liberi-scavenging su ABTS
Il capacità antiossidante dell'estratto acquoso carrube sono stati valutati utilizzando i 2,2'-Azino-bis [acido 3-ethylbenzthiazoline-6-solfonico] (ABTS) metodo [21]. In breve, 1 ml di estratto diluito è stato aggiunto al 3 ml di soluzione radicale 7 mM ABTS (ABTS • +) ed è stata mantenuta al buio a temperatura ambiente per 60 min. L'assorbanza è stata misurata a 734 nm. La capacità scavenging è stato calcolato come ((1 - Ab /A0) × 100%) (Ab e A0 sono l'assorbanza dei campioni nonché l'ABTS • + soluzione a 734 nm
Animali e trattamento adulti sani ratti maschi Wistar (del peso di 220-250 g; ospitato cinque per gabbia) e topi maschio adulto svizzero Albino (del peso di circa 25 g; ospitato dieci per gabbia) sono stati acquistati dalla Società delle industrie farmaceutiche della Tunisia (SIPHAT, Ben-Arours , TN). protocolli sperimentali sono stati approvati con le linee guida del Comitato Etico della Facoltà di Scienze di Tunisi, in Tunisia. il test è stato eseguito in conformità alla direttiva 2000/32 /CE e la OECD Guideline 474 [22]. Essi sono stati forniti con cibo standard (pellet normale dieta-Badr Utique-TN) e acqua ad libitum
e mantenuti in stabulario a temperatura controllata (22 ± 2 ° C) con un ciclo luce-buio di 12 ore. I ratti sono stati divisi nella metà una dozzina di gruppi. Gruppo 1 e 2 sono stati serviti come controlli e avevano bidistillata acqua (5 ml /kg, peso corporeo
, po
). Gruppi 3, 4 e 5 sono stati pre-trattati con varie dosi di CPAE (500, 1000 e 2000 mg /kg, bwpo
), mentre il gruppo 6 era pre-trattati rispettivamente con famotidina (10 mg /kg, bwpo
) per 15 giorni. I ratti sono stati tenuti a digiuno per 24 ore prima che l'ultima somministrazione di CPAE o di molecole di riferimento. Dopo 60 min, ogni animale, ad eccezione del gruppo 1, ricevuto EtOH (4 g /kg, b.w.
) per somministrazione orale. Due ore più tardi, i ratti sono stati sacrificati.
Studio Tossicità acuta
Il carrube estratto acquoso nel range di dosaggio di 0,05, 0,1, 0,5, 1, 2, 5, 10 e 200 g /kg per via orale è stato somministrato a diversi gruppi di topi (n
= 10). Gli animali sono stati esaminati ogni 30 min per 4 ore e poi, occasionalmente per ulteriore periodo di 8 h. 24 ore dopo, la mortalità è stata registrata. I topi sono stati osservati anche per altri segni di tossicità, come la coordinazione motoria, riflesso di raddrizzamento e cambiamenti respiratori
. Valutazione del danno della mucosa gastrica
Lo stomaco di ogni animale è stato rimosso e aperto lungo la sua grande curvatura. Il tessuto è stato gentilmente risciacquato in NaCl 0,9%. Le lesioni della mucosa gastrica sono state macroscopicamente esaminati e le fotografie di erosioni emorragiche sono state acquisite con una fotocamera digitale fotometrici Quantix. indici ulcera stati calcolati come la somma delle lunghezze delle intere lesioni gastriche (in mm 2) [23]. Due, osservatori in cieco indipendenti effettuate le misurazioni di lunghezza della lesione.
Determinazione del volume di succo gastrico
succo gastrico è stato raccolto e centrifugato a 3000 g per 5 minuti per rimuovere materiali insolubili. Il surnatante è stato dopo aver misurato utilizzando tubi di laurea [24].
Analisi istopatologica
Subito dopo il sacrificio, piccoli pezzi di stomaco sono state raccolte e lavata con soluzione salina ghiacciata. frammenti di tessuto sono stati poi fissati in una soluzione di formalina tamponata neutra al 10%, inclusi in paraffina e utilizzato per l'esame istopatologico. 5 micron sezioni spesse sono stati tagliati, deparaffinate, idratati e colorate con ematossilina e eosina (HE). Le sezioni gastriche sono stati esaminati in modo cieco in tutti i trattamenti [25].
Misurazione perossidazione lipidica
gastrica perossidazione lipidica mucosa è stata determinata mediante misurazione MDA secondo il metodo di riscaldamento double [26]. Brevemente, aliquote da omogenati mucosa gastrica sono stati mescolati con acido tricloroacetico BHT-soluzione (TCA) contenente 1% BHT (w /v
) sciolti in 20% TCA (w /v
) e centrifugati a 1000 × g
per 5 minuti a 4 ° C. Supernatante è stata mescolata con una soluzione contenente (0,5 N HCl, 120 mM TBA tamponato in 26 mM Tris) e poi riscaldata a 80 ° C per 10 min. Dopo raffreddamento, l'assorbanza del cromoforo risultante è stata determinata a 532 nm. livelli di MDA sono stati determinati utilizzando un coefficiente di estinzione per complesso MDA-TBA di 1,56 × 10 5 M -1 · cm -1.
misura gruppo Thiol
La concentrazione totale di tiolo gruppi (-SH) è stata effettuata secondo il metodo di Ellman [27]. Brevemente, aliquote da mucosa gastrica sono stati mescolati con 100 ml di 10% SDS e 800 ml di 10 mM tampone fosfato (pH 8), e la densità ottica è stata misurata a 412 nm (A 0). Dopo aver aggiunto 100 ml di 5,5'-dithiobis- (acido 2-nitrobenzoico) (DTNB), la miscela di reazione è stata incubata a 37 ° C durante 60 min e un nuovo valore (A 1) è stato determinato. La concentrazione di gruppi tiolici è stato calcolato da A 1 a A 0 sottrazione utilizzando un coefficiente di estinzione molare del 13,6 × 10 3 M -1 · cm -1. I risultati sono stati espressi come nmol di gruppi tiolo per
mg di proteina. Determinazione
H2O2
La mucosa gastrica H livello 2O 2 è stata eseguita secondo Dingeon et al. [28]. Brevemente, il perossido di idrogeno reagisce con p-idrossibenzoico e 4 aminoantipirina in presenza di perossidasi porta alla formazione di chinoneimina che ha un colore rosa rilevato a 505 nm.
Saggi di attività enzimatica antiossidanti
L'attività di SOD è stato determinato utilizzando saggi di epinefrina modificati [29]. A pH alcalino, anione superossido O 2 - provoca l'autossidazione di adrenalina a adenochrome; mentre in competizione con questa reazione, SOD diminuito la formazione adenochrome. Una unità di SOD è definita come la quantità di estratto che inibisce il tasso di adenochrome formazione del 50%. estratto enzimatico è stato aggiunto in 2 ml di miscela di reazione contenente 10 ml di bovini catalasi (0,4 U /ml), 20 microlitri epinefrina (5 mg /ml) e 62,5 mM sodio carbonato /bicarbonato di tampone pH 10.2. Le variazioni di assorbanza sono stati registrati a 480 nm.
L'attività di CAT è stata valutata misurando la velocità iniziale di H 2O 2 scomparsa a 240 nm [30]. La miscela di reazione conteneva 33 mm H 2O 2 in 50 mM tampone fosfato pH 7,0 e l'attività di CAT è stato calcolato utilizzando il coefficiente di estinzione di 40 mm -1 cm -1 per H 2O 2.
l'attività di GPx è stato quantificato dalla procedura di Flohe e Günzler [31]. Brevemente, 1 ml di miscela di reazione contenente 0,2 mL di gastrica surnatante mucosa, 0,2 ml di tampone fosfato 0,1 M pH 7,4, 0,2 mL di GSH (4 mM) e 0,4 ml di H 2O 2 (5 mM) è stata incubata a 37 ° C per 1 min e la reazione è stata bloccata con l'aggiunta di 0,5 mL TCA (5%, w /v). Dopo centrifugazione a 1500 g per 5 min
, aliquota (0,2 mL) dal surnatante è stato combinato con 0,5 ml di tampone fosfato 0,1 M pH 7,4 e 0,5 mL DTNB (10 mM) e l'assorbanza è stata letta a 412 nm. L'attività di GPx stata espressa come nmoli di GSH consumato /min /mg di proteina.
Analisi statistica
I dati sono stati analizzati mediante analisi della varianza ad una via (ANOVA) e sono stati espressi come media ± errore standard della media (SEM). I dati sono rappresentativi di 10 esperimenti indipendenti. Tutti i test statistici erano a due code, e un valore di p
di 0,05 o meno è stato considerato significativo
. Risultati
acuta per via orale di CPAE
Nello studio di tossicità acuta per via orale, né un comportamento anomalo, né la mortalità era rilevato durante il periodo di osservazione. Pertanto, il valore LD50 è superiore a 20 g /kg b.w. per l'estratto acquoso di carrube.
in vitro DPPH e ABTS attività antiradicalica
Diverse concentrazioni comprese 0-200 mg /ml di CPAE sono stati testati per la loro attività antiossidante in vitro diverse
modelli. Abbiamo trovato che l'attività radical-scavenging di CPAE contro DPPH e ABTS radicali aumentato significativamente in modo dose-dipendente. La CE 50 valori calcolati dal grafico hanno dimostrato che la RSA di CPAE (CE 50 = 228,22 ± 5,27 mg /ml e 184,41 ± 3,95 mg /ml, rispettivamente, per DPPH e ABTS attività radical-scavenging) è apparso simile a quella dell'acido ascorbico (CE 50 = 190,47 ± 1.2 e 174.13 ± 0,9 mg /mL) molecola di riferimento, come ben noto (Tabella 1) .table 1 EC50 valori di DPPH e radical-scavenging baccelli attività carruba estratto acquoso ABTS (CPAE ). EC50: l'effettiva concentrazione del campione che può diminuire o DPPH concentrazione ABTS del 50%
EC50 di DPPH attività dei radicali-scavenging (mg /ml)
EC50 di ABTS attività dei radicali-scavenging (mcg /ml)
CPAE
228,22 ± 5,27
184,41 ± 3.95
acido ascorbico
190,47 ± 1.2
174.13 ± 0,9
effetto del CPAE su EtOH-indotta acuta lesioni gastriche macroscopica e variazione di volume
L'esame macroscopico della mucosa gastrica è mostrato in fig. 1. Come previsto, l'amministrazione EtOH esposti lesioni, tra cui emorragie e iperemia. CPAE e il trattamento famotidina hanno mostrato una diminuzione dose-dipendente in tutti i segni tossici macroscopici rispetto al gruppo trattato EtOH. Inoltre, l'analisi quantitativa ha mostrato che l'estratto di carruba o riferimento molecola pre-trattamento in modo significativo e dose-dipendente ridotto l'indice ulcera, protetta contro la diminuzione del volume succo gastrico, e migliorato la percentuale protezione delle lesioni indotte dalla somministrazione EtOH (Tabella 2). Figura. 1 effetto subacuta di baccelli caob estratto acquoso (CPAE) e famotidina (FAM) sui cambiamenti macroscopici indotti da etanolo (EtOH) nei ratti. Gli animali sono stati pre-trattati con varie dosi di CPAE (500, 1000 e 2000 mg /kg, peso corporeo, po
), FAM (10 mg /kg, peso corporeo, po
) o acqua distillata-bi, sfidati con una singola somministrazione orale di EtOH (4 g /kg di peso corporeo, po
) o NaCl 9 ‰ per due ore. A: controllo; B: EtOH; C: EtOH + CPAE-500; D: EtOH + CPAE-1000; e: muco ulcera: EtOH + CPAE-2000 e F: EtOH + FAM)
Tabella 2 effetto subacuta di carrube estratto acquoso (CPAE), famotidina (FAM) e acido ascorbico (AA) sulle variazioni quantitative macroscopici indotti da EtOH nei ratti volume, area dell'ulcera e la protezione percentuale. Gli animali sono stati pre-trattati con varie dosi di CPAE (500, 1000 e 2000 mg /kg, peso corporeo, po
), FAM (10 mg /kg, peso corporeo, po
) o acqua distillata-bi, sfidati con una singola somministrazione orale di EtOH (4 g /kg, peso corporeo, po
) o NaCl 9 ‰ per due ore
volume di Gruppo
muco (ml)
indice Ulcera ( mm2) percentuale
protezione (%)
controllo 4.3 ± 0.20
---- ----

EtOH
1.9 ± 0.3 *
86.2 ± 2.6 *
00
EtOH + CPAE-500
2.9 ± 0
67.0 ± 3.6 #
23.4
EtOH + CPAE-1000
3.4 ± 0.2 #
16,6 ± 1,4 #
79,8
EtOH + CPAE-2000
3.9 ± 0.3 #
06.4 ± 0.9 #
92,2
EtOH + FAM
3.8 ± 0.2 #
26.2 ± 3.3 #
68,1
*: p
< 0,05 rispetto al gruppo di controllo e #: p
< 0,05 rispetto al gruppo EtOH
Effetto del CPAE su EtOH indotta lesioni microscopiche gastrica
Abbiamo anche esaminato l'effetto di EtOH e CPAE su gastrica istologico della mucosa ed i risultati sono mostrati in Fig. 2. EtOH 80% indotto una lesione erosiva marcato nel tessuto gastrico. CPAE o famotidina pretrattamento notevolmente ridotto i cambiamenti istopatologici indotte da intossicazione acuta da alcol. Figura. 2 effetto subacuta di baccelli caob estratto acquoso (CPAE) e famotidina (FAM) sulle modifiche istologiche indotte da etanolo (EtOH) nei ratti. Gli animali sono stati pre-trattati con varie dosi di CPAE (500, 1000 e 2000 mg /kg, peso corporeo, po
), FAM (10 mg /kg, peso corporeo, po
) o acqua distillata-bi, sfidati con una singola somministrazione orale di EtOH (4 g /kg di peso corporeo, po
) o NaCl 9 ‰ per due ore. A: controllo; B: EtOH; C: EtOH + CPAE-500; D: EtOH + CPAE-1000; e: EtOH + CPAE-2000 e F: EtOH + FAM)
Effetto della CPAE su EtOH indotta lipoperossidazione gastrica e l'aumento di perossido di idrogeno
cuscinetto sull'effetto di EtOH e CPAE in condizione di stress ossidativo, abbiamo innanzitutto studiato la lipoperossidazione gastrica e il contenuto di perossido di idrogeno (Fig. 3a). EtOH intossicazione drasticamente aumentato il gastrica MDA e H 2O 2 piani (Fig. 3b). CPAE pretrattamento in modo significativo e dose-dipendente invertita aumento lipoperossidazione e perossido di idrogeno indotta da EtOH intossicazione. Figura. 3 effetto subacuta di baccelli caob estratto acquoso (CPAE) e famotidina (FAM) etanolo (EtOH) cambiamenti -indotta nella mucosa dello stomaco MDA una e livelli di H2O2 b nei ratti. in ratti. Gli animali sono stati pre-trattati con varie dosi di CPAE (500, 1000 e 2000 mg /kg, peso corporeo, po
), FAM (10 mg /kg, peso corporeo, po
) o acqua distillata-bi, sfidati con una singola somministrazione orale di EtOH (4 g /kg di peso corporeo, po
) o NaCl 9 ‰ per due ore. *: P
< 0,05 rispetto al gruppo di controllo e #: p
< 0,05 rispetto al gruppo EtOH
Effetto di CPAE sui gruppi -SH gastrici EtOH indotta diminuire
Abbiamo anche dimostrato che il livello gruppi tiolo è risultata significativamente ridotta nella mucosa gastrica di ratti alcol-trattata. Tuttavia CPAE (500, 1000 e 2000 mg /kg, per via orale b.w.
) o famotidina (10 mg /kg, per via orale b.w.
) pretrattamento significativamente protetti contro questa diminuzione rispetto al gruppo EtOH (Fig. 4). Figura. 4 effetto subacuta di baccelli caob estratto acquoso (CPAE) e famotidina (FAM) etanolo (EtOH) indotta da cambiamenti nella mucosa dello stomaco gruppi sh- di livello nei ratti. in ratti. Gli animali sono stati pre-trattati con varie dosi di CPAE (500, 1000 e 2000 mg /kg, peso corporeo, po
), FAM (10 mg /kg, peso corporeo, po
) o acqua distillata-bi, sfidati con una singola somministrazione orale di EtOH (4 g /kg di peso corporeo, po
) o NaCl 9 ‰ per due ore. *: P
< 0,05 rispetto al gruppo di controllo e #: p
< 0,05 rispetto al gruppo EtOH
Effetto del CPAE su antiossidante esaurimento attività enzimatiche EtOH indotta
Abbiamo inoltre esaminato l'effetto di EtOH e CPAE sulle attività enzimi antiossidanti nella mucosa gastrica (Fig. 5). EtOH 80% significativamente aumentato mucosa dello stomaco attività enzimatiche antiossidanti SOD (A) e CAT (B), ma diminuita significativamente l'attività GPx (C). Tuttavia, pre-trattamento sub-acuta con estratto di carruba o famotidina significativamente ridotto l'aumento EtOH-indotta e una diminuzione della attività enzimatiche antiossidanti per livelli di controllo vicino con la dose più alta. Figura. 5 effetto subacuta di baccelli caob estratto acquoso (CPAE) e famotidina (FAM) etanolo (EtOH) cambiamenti -indotta nella mucosa dello stomaco attività degli enzimi antiossidanti SOD: a, b CAT e GPx C nei ratti .. nei ratti. Gli animali sono stati pre-trattati con varie dosi di CPAE (500, 1000 e 2000 mg /kg, di peso corporeo, po), FAM (10 mg /kg, di peso corporeo, po) o acqua distillata bi, impugnato con una singola somministrazione orale di EtOH (4 g /kg, peso corporeo, po
) o NaCl 9 ‰ per due ore. *: P
< 0,05 rispetto al gruppo di controllo e #: p
< 0,05 rispetto al gruppo EtOH
Discussione
Lo stomaco è un organo digestivo sensibile esposto principalmente agli agenti patogeni esogeni dalla dieta. In risposta a tali agenti patogeni, il tessuto dello stomaco produce ROS come radicale ossidrile un anione superossido, che potrebbe essere correlato allo sviluppo di disturbi organici gastrici quali gastriti, ulcere gastriche e cancro gastrico, così come disturbi funzionali come funzionale dispepsia [ ,,,0],32]. L'etanolo è considerato uno degli agenti che inducono ulcere gastriche. Gli effetti di etanolo sulla mucosa gastrica sono complicate e poliedrico che può essere associata a un disturbo nell'equilibrio tra fattori protettivi della mucosa gastrica e aggressivi [33]. Etanolo provoca ferisce nelle cellule endoteliali vascolari della mucosa gastrica e induce microcircolo perturbazione e ipossia, che collega la sovrapproduzione di radicali dell'ossigeno [34]. ROS sono prodotti all'interno del tratto gastrointestinale, ma il loro ruolo nella fisiopatologia e patogenesi della malattia non sono stato ben studiato.
Molte piante medicinali mostrano nei loro chimiche costituzione, flavonoidi, triterpenoidi e tannini, che proteggono la mucosa dello stomaco attraverso l'induzione di gastroprotettori meccanismi o in qualità di antiossidanti naturali [35-37]. I flavonoidi e tannini sono il principale gruppo di composti fenolici che agiscono come antiossidanti primari o spazzini dei radicali liberi [38].
Nostro studio fitochimico, in primo luogo, ha rivelato che la sua ricchezza polifenoli totali, flavonoidi totali e tannini condensati [14]. D'altra parte, utilizzando il DPPH e ABTS dosaggio radical-scavenging, abbiamo scoperto che CPAE presenta una elevata capacità di scavenging, anche se minore di acido ascorbico che è stato usato come una molecola di riferimento. La capacità antiossidante di carruba è principalmente legato al più alto livello di compouds fenolici in questa frazione [14]. Tuttavia, queste molecole sono la fonte principale della loro capacità di scavenging radicali liberi, come anione superossido (O 2 .) E radicale ossidrile (OH .) [39].
In vivo,
abbiamo innanzitutto dimostrato che la somministrazione di alcol ha provocato un chiaro lesioni macroscopiche, tra cui emorragie e iperemia così come i cambiamenti istopatologici come ad esempio lesioni erosive. CPAE pretrattamento significativamente invertito mucosa gastrica lesioni macro e microscopiche EtOH indotta in maniera dose-dipendente. Tuttavia, mucosa gastrica è stato precedentemente dimostrato di svolgere un ruolo fondamentale nella protezione delle barriere gastrici [40]. È la prima linea di difesa contro acido e aderisce insieme con bicarbonato secreto dalla dell'epitelio per servire come barriera contro l'auto-digestione [41]. Inoltre, gastrica mucosa è un importante fattore protettivo per la mucosa gastrica ed è in grado di agire come agente antiossidante e riducendo danno mucosale mediato da ROS [42]. Tannini potrebbero impedire lo sviluppo di ulcere sia attraverso effetti vasoconstricting, o per la loro proteine-precipitanti dove promuove la precipitazione del microproteine ​​nel sito ulcerazioni, formando uno strato impermeabile sopra il rivestimento che ostacola le secrezioni intestinali e protegge la mucosa sottostante da sostanze irritanti [43]. Inoltre, i flavonoidi hanno proprietà gastroprotettori [44] anti-ulcera e. Tuttavia, ulcera gastrica EtOH-indotta è stato precedentemente dimostrato di essere attenuato da molte piante estratti Aqeratum conyzoides
[45], Bacopa monniera e Azadirachta indica
[46], Hippocratea eccelle
[47] e Azadirachta indica
[48]. Tuttavia, per quanto ne sappiamo, il nostro rapporto è il primo a trattare con estratto di frutto di Ceratonia siliqua
(carrubo) effetto protettivo sulla ulcerazioni EtOH acuta indotta nel ratto mucosa gastrica.
Abbiamo anche dimostrato nel presente studio che EtOH intossicazione perossidazione lipidica, diminuzione dei gruppi tiolici livello, aumento del contenuto di perossido di idrogeno così come esaurimento antiossidante attività enzimatiche come la SOD, CAT e GPx. indotta da alcol acuta stress ossidativo è stato ampiamente documentato nella mucosa gastrica [49], il fegato [50], del rene [51], il cuore [52] e del cervello [53]. somministrazione di etanolo provocato ossidativo squilibrio attraverso una serie di percorsi tra cui la generazione di specie reattive dell'ossigeno [54]. Livello di perossidazione lipidica è un indicatore della generazione di ROS nel tessuto. Tuttavia, SOD converte il reattiva superossido radicale H 2O 2, che è stata aumentata nella mucosa gastrica e se non eliminato dalla CAT, può di per sé causare perossidazione lipidica dalla generazione di radicale ossidrile [55].
Ancora più importante, abbiamo dimostrato che l'estratto di carruba pretrattamento abolita acuta EtOH stress ossidativo indotto nella mucosa gastrica. Questi dati pienamente corroborata tutti precedentemente riportati in vivo
[17] e in vitro
[15] proprietà antiossidanti e anti-infiammatorie di carruba. Abbiamo inoltre dimostrato nel nostro precedente rapporto del Sebai et al. [14] che l'estratto acquoso di carrube contiene una buona quantità di polifenoli totali, flavonoidi totali e tannini condensati. Queste molecole sono la fonte primaria della capacità antiossidante di questa pianta, da scavenging radicali liberi come radicale ossidrile (OH •), che è la principale causa di perossidazione lipidica [56]. Inoltre, è noto che sulfidrili sono in parte coinvolta in citoprotezione gastrico [57] ed anche nel mantenimento dell'integrità barriera mucosale e pulire i radicali liberi formati a causa dell'azione degli agenti nocivi [58].
Conclusione
in conclusione, i nostri dati dimostrano chiaramente che CPAE esercita effetti protettivi contro ulcera etanolo acuta indotta nel ratto mucosa gastrica, in parte grazie alle sue proprietà antiossidanti
Abbreviazioni
CPAE:. baccelli
carruba estratto acquoso
Carob500:
carruba 500 mg /kg
Carob1000:
carruba 1000 mg /kg

Carob2000:
carruba 2000 mg /kg
CAT:
catalasi
GPx:
glutatione perossidasi
H2O2:
acqua ossigenata
MDA:
malondialdeide
Prot:
Proeins
SH:
gruppi sulfidrilici
SOD:
superossido dismutasi

Dichiarazioni
Ringraziamenti
il sostegno finanziario del Ministero di "Enseignement Supérieur et Recherche Scientifique" tunisino è di apprezzamento riconosciuto.
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