Background VerfÜgung
2-Zénk-glycoprotein 1 (AZGP1) ass eng multidisziplinärem FAQ datt op ville bedeelegt wichteg Fonctioun an der mënschleche Kierper, dorënner fertilization, immunoregulation an Lipid Mobiliséierung. Kuerzem, gouf et dës datt AZGP1 och zu carcinogenesis an entholl dat Équipe ass. An dëser Etude, ze propagéieren mir den Ausdrock Niveauen a prognostic Wäert vun AZGP1 am primäre gastric Cancers. VerfÜgung
Method an Resultater VerfÜgung
Mir den Ausdrock vun AZGP1 zu 35 iwwerpréift vläit kriibserreegend a bascht noncancerous gastric mucosa reagéiert Stoffer déi real-Zäit grouss RT-Hinnen alleguer (qRT-Hinnen alleguer) a westlech blotting. Ausserdeem, analyséiert mir AZGP1 Ausdrock vun 248 Patienten, déi tëscht 2005 resection Prozeduren mécht an 2007 immunohistochemistry benotzt. D'Bezéiungen tëscht der AZGP1 Ausdrock Niveauen, d'clinicopathological Faktoren, an Patient Iwwerliewe sech ze propagéieren. AZGP1 Ausdrock war um bedeitend reduzéiert souwuel d'mRNA ( P VerfÜgung = 0.023) an FAQ Niveauen ( P VerfÜgung = 0.019) zu Echantillon entholl Otemschwieregkeeten, am Verglach mat Ausdrock vun reagéiert bascht Net-entholl Otemschwieregkeeten Echantillon . D'immunohistochemical staining Donnéeë gewisen, datt AZGP1 Ausdrock wiesentlech zu 52,8% (131/248) vun gastric adenocarcinoma Fäll ofgeholl huet. Clinicopathological Analyse gewisen, datt de reduzéierten Ausdrock vun AZGP1 vill mat entholl Standuert soll war ( P VerfÜgung = 0.011), histological Schouljoër ( P VerfÜgung = 0.005) an T Etapp ( P Konklusiounen Eis Etude seet, datt AZGP1 als Kandidat entholl suppressor déngen kéinten an e Potential prognostic uweist zu gastric carcinogenesis VerfÜgung Fro:. Huang Cy, Zhao JJ, LV L, Chen Yb, Li Yf, Jiang s, et al. (2013) ofgeholl Expression vun AZGP1 mat Poor hätt an primär Gastric Cancer Associéierten Ass. PLoS NËMMEN 8 (7): e69155. Doi: 10.1371 /journal.pone.0069155 VerfÜgung Redakter: Alfons Navarro, Universitéit vu Barcelona, Spuenien VerfÜgung Arnaque: Mäerz 5, 2013; Akzeptéiert: 5 Juni 2013; Publizéiert: 23. Juli 2013 zu Copyright: © 2013 Huang et al. Dëst ass eng oppen-Zougang Artikel ënnert de Bedingunge vun der Lizenz BY Creative Commons verdeelt, déi bereet benotzen Genehmegungen, Distributioun, an Reproduktioun vun all mëttelgrouss, gëtt d'Original Auteur an d'Quell Kaiser sinn VerfÜgung Funding:. Dës Aarbecht war vun Promotioun Fund vum Ministère vun der Education of China (20100171110084) ënnerstëtzt. D'funders hu keng Roll am Etude Design, Daten Kollektioun an Analyse, Décisioun, oder Virbereedung vun der mëttelalterlech Handschrëft ze publizéieren VerfÜgung Wettsträit Interessen:.. D'Auteuren hunn deklaréiert, datt keng Competitioun Interessen existéieren VerfÜgung Gastric Kriibs ass déi zweet Équipe gemeinsam Ursaach vum Kriibs-Zesummenhang veruerteelt weltwäit, mat 988.000 neie Fäll an 736.000 Doudesfäll pro Joer [1] - [2]. An China, war gastric Kriibs d'drëtt meescht genannten Kriibs 2005 mat 0,4 Milliounen nei Fäll an 0.3 Milliounen Doudesfäll gin virausgesot ginn [3]. D'Behandlung vun gastric Kriibs ëmfaasst eng Kombinatioun vun Agrëff, Chimiotherapie goen, an Bestrahlungen. Mä bal 60% vun de betraffene Patienten Loosst gastric Kriibs no engem curative resection gehalen oder no enger curative resection mat Perquisitiounen adjuvant Therapie [4]. Gastric Kriibs ass eng heterogen Krankheet zu souwuel Histologie a Sarah; dohier, ass Patient Resultat schwéier mat klassesche histological Klassifikatiounen virauszesoen. Gastric carcinogenesis ass eng multifactorial an multistep Prozess datt oncogenes an inactivating entholl suppressor Genen vun verschiddenen Etappe vun gastric Kriibs Werdegang implizéiert activating. Kuerzem, mat gastric Kriibs verbonne puer nei oncogenes an entholl suppressor Genen hunn identifizéiert ginn. Dofir ass et wichteg klinesch efficace nei Ziler fir d'fréi Diagnos an efficace Behandlung vun gastric Kriibs ze fannen. VerfÜgung AZGP1 (2-Zénk-glycoprotein 1, Zn-alpha 2-glycoprotein) ass e 41 kDa soluble FAQ mat engem groussen histocompatibility -like komplex-1 (MHC-1) Bausubstanz fantastesch an, an dat war vun Ufank identifizéiert an sidd an mënschlechen serum 1961 [5]. Der Gentherapie fir AZGP1, unerkannten der chromosome 7q22.1 duerch unisse hybridization karyotyping, ass aus véier exons an dräi introns [6], [7]. Benotzt immunohistochemical Studien, huet et fonnt gouf, datt AZGP1 haaptsächlech zu epithelial Zellen vun der Broscht ausgedréckt ass, d'Aarbecht, d'Liewer an diversen anere gastrointestinal Organer [8]. An Linn mat hirer Produktioun vun secretory epithelial Zellen, ass AZGP1 zu enger Rei vu kierperleche Flëssegkeeten fonnt [9], [10], [11]. VerfÜgung AZGP1 ass engem multidisziplinärem FAQ datt op ville wichtege Funktiounen am bedeelegt mënschleche Kierper, dorënner fertilization [11], immunoregulation [12] an Lipid Mobiliséierung [13], [14], [15]. AZGP1 ass och mat Kriibs cachexia assoziéiert. AZGP1 huet en héije Niveau vun Aminosaier-Seier Haaptrei homology mat entholl-ofgeleet Lipid-Mobiliséierungsinstrument Faktor [14], an an enger Maus Modell vun AZGP1-produzéiert erhéijen, AZGP1 stimuléiert lipolysis zu adipocytes zu cachexia Virwaat [16]. Kuerzem, gouf et dës datt AZGP1 och zu carcinogenesis an entholl dat Équipe ass. Protein an mRNA Ausdrock assays hunn eng Relatioun tëscht der AZGP1 Niveauen an der histologic Schouljoer vun Broscht Kriibs erhéijen [17], [18] gewisen. Desweideren, proposéiere vill Studien dass AZGP1 e Potential serum Bewaacher vun Aarbecht Kriibs ass [9], [19]. Ausserdeem gouf et datt AZGP1 Akten als Roman entholl suppressor zu pancreatic Kriibs [20] gewisen. Allerdéngs, esou wäit de Ausdrock Status vun AZGP1 an prognostic Wäert vun dëser FAQ am primäre gastric Cancers hunn net gemellt goufen. VerfÜgung An dëser Etude, mir der AZGP1 Ausdrock Niveau vun gastric Cancers andems real-Zäit grouss RT analyséiert -PCR (qRT-Hinnen alleguer), westlech blotting an immunohistochemistry. Ausserdeem, identifizéiert mir d'Relatioun tëscht AZGP1 Ausdrock an der clinicopathological Charakteristike vun gastric Kriibs, a mir der prognostic Wäert vun AZGP1 Ausdrock fir d'Post-resection Iwwerliewe vun gastric Kriibs Patienten bewäert. VerfÜgung AZGP1 mRNA Expression analyséiert mat qRT-Hinnen alleguer VerfÜgung D'transcriptional Niveau vun AZGP1 sech mat qRT-Hinnen alleguer assays sech mat 35 Puer resected uplanzen (entholl Otemschwieregkeeten Echantillon iwwereneestëmmen bascht Net-entholl Otemschwieregkeeten Echantillon) aus gastric Kriibs Patienten. D'AZGP1 mRNA Niveau sech zu 28 (80%) entholl Otemschwieregkeeten Echantillon am Verglach mat der stemmt bascht Net-entholl Otemschwieregkeeten Echantillon ( P VerfÜgung = 0,023, well 1). VerfÜgung AZGP1 Expression analyséiert bedeitend reduzéiert vun Western Blotting VerfÜgung d'AZGP1 FAQ Niveauen an der resected gastric Kriibs Echantillon waren déi westlech blotting alles. D'Resultater weisen eng Band fir AZGP1 um 41 kDa, an de Montant vun AZGP1 FAQ präsent war vun densitometry an Héicht gemooss. Konsequent mat der qRT-Hinnen alleguer Resultater, war vun 25 (71.4%) vun der gastric entholl Stoffer Verglach mat der stemmt bascht Net-entholl Stoffer ( P VerfÜgung = 0,019, Dorënner 2A) eng Ofsenkung vun AZGP1 Ausdrock observéiert. Eight Puer Vertrieder gastric entholl Stoffer an der stemmt bascht Net-entholl Stoffer sech an Dorënner 2B gewisen. VerfÜgung Immunohistochemical Analys vun AZGP1 Expression zu Gastric Cancer Ray Echantillonen an hirer Bezéiung mat der Clinicopathological BIG VerfÜgung fir de molekulare biologescher Conclusiounen an ermëttelen der clinicopathological der prognostic Rollen vun AZGP1 Ausdrock ze confirméieren, standing mir immunohistochemical Analyse zu 248 paraffin-Ënnerbewosstsinn gastric Kriibs Sektiounen. De positiven Ausdrock vun AZGP1 war dem Zytoplasma (Dorënner S1) en der. Vun der 248 gastric Kriibs Echantillonen, 117 (47.2%) zougedréckt héich AZGP1 Ausdrock (AZGP1 ++ oder AZGP1 +++), wobäi de Rescht 131 Fäll (52.8%) ugewisen niddereg AZGP1 Ausdrock (AZGP1- oder AZGP1 +) (Well 3, Table 1). Normal gastric Stoffer zougedréckt stäerkst AZGP1 positive staining (Dorënner 3A). VerfÜgung op d'Kategorien Opgrond dass mir an der afore ernimmt Methoden definéiert, d'Donnéeë gewisen, datt d'niddereg Ausdrock vun AZGP1 vill mat entholl Standuert soll war ( P VerfÜgung = 0.011), histological Schouljoër ( P VerfÜgung = 0.005) an T Etapp ( P VerfÜgung = 0.008), mee net mat Alter, Geschlecht, entholl Gréisst, radikal resection , nodal Status (N Etapp) oder Metastasen Status (M Etapp). D'micrographs sinn zu Well dës 3. VerfÜgung Korrelatioun tëscht AZGP1 Expression Baséierend op Immunohistochemistry an Patienten- traureg VerfÜgung D'Steiren Iwwerliewe Zäit vun der 248 gastric Kriibs Patienten 45 Méint war (Rei 2-89 Méint) . Déi gesamt Iwwerliewe Taux an 5-Joer Iwwerliewe Taux sech an héich AZGP1 Ausdrock Grupp wéi déi niddreg Ausdrock Grupp [64,2% vs. 49,5% (globale Iwwerliewe Taux) a 65,1% vs. 50,4% (5-Joer Iwwerliewe Taux) däitlech verbessert, respektiv, P VerfÜgung = 0,009, Dorënner 4]. VerfÜgung Univariate an multivariate Analysen VerfÜgung Univariate an multivariate Analysë gesuergt huet den Impakt vun AZGP1 Ausdrock an aner clinicopathological Parameteren op ze vergläichen Iwwregens hätt. Baséierend op engem univariate Analyse datt all 248 Patienten mat abegraff, goufen 8 Faktoren fonnt statistesch relevant Associatiounen mat globale Iwwerliewe ze hunn. Dës Analyse huet folgende Faktoren an allem: entholl Standuert, entholl Gréisst, histological Schouljoer, AZGP1 Ausdrock Niveauen, TNM Etapp (7. Editioun TNM Klassifikatioun) an ob oder net eng radikal resection war gesuergt (Table 2). All 8 Facteure sech zu engem multivariate Cox proportional Risikoe Modell agebaut fir d'Effete vun der covariates ze ajustéieren. Baséierend op dësem Modell, d'entholl Standuert, AZGP1 Ausdrock Niveauen, T Etapp an N Etapp vun der entholl sech als onofhängeg prognostic Faktoren (Table 2) confirméiert. VerfÜgung Gastric Kriibs bleift ee vun déi enorm mënschlech malignancies. Och mat Fortschrëtter vun Diagnos an Therapie, ass de Iwwregens hätt fir gastric Kriibs nach net dat gielt [1], [21]. D'Medeziner Resultat vun gastric Kriibs hänkt op enger Serie vun entholl Charakteristiken, wéi entholl Wuesstem, dat, Invasioun an fernen Metastasen, déi vun enger Rei vu Logbicher Genen reglementéiert ginn. Dofir, ass et allgemeng als déi genetesch hire Restaurant op der Aktivatioun vun oncogenes Haaptfiguren an der inactivation vun entholl suppressors enge Grënn vun Kriibs pathogenesis sinn. Déi mi gewannen vun oncogenes a Verloscht vun entholl suppressors déi néideg Fundament fir d'Etapp-schlau Werdegang vun zolidd erhéijen aus Initiatioun fir Transformatioun an entholl Werdegang [22], [23], [24]. Virdrun, huet AZGP1 ze besëtzen entholl suppressive Eegeschafte vun Broscht Kriibs, Aarbecht Kriibs, pancreatic Kriibs an e puer aner malignant erhéijen [17], [20], [25] gemellt ginn; Ee der Roll vun AZGP1 am primäre gastric Kriibs ass nach net bewäert ginn. Eis Étude uginn, datt AZGP1 Ausdrock vill souwuel d'mRNA an FAQ Niveauen am entholl Otemschwieregkeeten Echantillon reduzéiert huet, am Verglach mat Ausdrock vun reagéiert bascht Net-entholl Otemschwieregkeeten Echantillon. Konsequent mat eis ze studéieren, Brysk MM et al. och bewisen, dass d'AZGP1 Niveauen an normal mëndlech Stoffer héich si wéi am Elysée erhéijen [26]. Gagnon S et al. och bewisen, datt AZGP1 zu benign hyperplastic Glands zu 91,1% vun Fäll präsent war awer an nëmmen 40,7% (schlecht ënnerscheet Komponent) zu 48,5% (och ënnerscheet Komponent) vun prostatic adenocarcinomas an nëmmen 8% vun Investitiounen [27]. Dës Etude Resultater Ënnerstëtzung der Hypothes, datt AZGP1 als entholl suppressor zu puer Cancers déngen kann. VerfÜgung weider Fir dës Reduktioun vun AZGP1 Ausdrock am primäre gastric Kriibs validéieren, mir standing immunohistochemical Analyse mat enger Kanéngchen anti-hAZGP1 antibody. Mir observéiert ënneschten Ausdrock vun AZGP1 immunostaining zu proximal oder total gastric Kriibs Verglach mat fernen gastric Kriibs Stoffer. Verschidde Studie berichten bewisen dass proximal gastric Kriibs Patienten hunn eng schlecht Iwwerliewe wéi wäit gastric Kriibs Patienten [28]. Dës Donnéeë ugeholl, datt d'niddereg Ausdrock vun AZGP1 zu gastric Kriibs ass mat méi malignant phenotypes assoziéiert. Ausserdeem entdeckt mir dass Ausdrock vun AZGP1 ofgeholl mat wéineg ënnerscheet adenocarcinomas (G3 vs. G1 /G2) assoziéiert gouf, beweist dass AZGP1 der dat vun gastric Kriibs induce kann. Des Resultater sinn konsequent mat der Experienz vun Diez et al. [17], [18], deen eng Associatioun tëscht héich AZGP1 Ausdrock an héijen Niveauen, dat am Broscht Kriibs beschriwwen. Ähnlech bruet hunn fir Aarbecht Kriibs [19], Broscht Kriibs an pancreatic Kriibs gemellt [26] verluecht. Ausserdeem, nogewise mir datt de niddereg Ausdrock vun AZGP1 mat fortgeschratt T Etapp verbonne war. Dës Resultater implizit datt d'niddereg Ausdrock vun AZGP1 kéint entholl Wuesstem förderen. An Aklang mat eiser Etude, Irmak S et al. ugeholl, datt AZGP1 zu der Entwécklung vun iwwerflächlech BBC Kriibs a seng Transformatioun zu engem invasiv phenotype [29] Zesummenhang ass. Dës Conclusiounen kollektiv weg eng wichteg Roll fir AZGP1 am dat a Wuesstem vun gastric Kriibs. VerfÜgung deems de Kaplan-Meier Iwwerliewe Analyse, Kranken an eiser Etude mat niddereg AZGP1 Ausdrock haten eng wiesentlech méi allgemeng Iwwerliewe wéi déi mat héich Ausdrock Niveauen. Univariate Analysë weisen, datt d'Verréngerung Ausdrock vun AZGP1 zu Stoffer gastric Kriibs vill mat de globale Iwwerliewe Taux an de 5-Joer Iwwerliewe Taux verbonne war. Multivariate Analyse bewisen, dass AZGP1 Ausdrock, zesumme mat e puer traditionell prognostic Facteure wéi entholl Standuert, T Etapp an N Etapp, sech onofhängeg Risiko Facteuren an hätt vun gastric Kriibs Patienten. Dës Resultater ugeholl datt AZGP1 als nei Estimatioun vun hätt an gastric Kriibs Patienten no chirurgesch resection déngen kéinten. VerfÜgung D'molekulare Mechanisme vun AZGP1 d'entholl suppressive Eegeschafte sinn nach onkloer. AZGP1 gehéiert zu der macroglobulin Famill, eng ural an evolutionarily konservativen Link vun der immun System. Zorin NA et al. ugeholl, datt d'inhibition vun Aktivitéit-mediated fir verbindlech hydrolases mécht entholl Invasioun méiglech [30] de Pouvoir vun macroglobulins. An der selwechter Zäit, eng iwwerschësseg vun macroglobulin /hydrolase investéiert kann apoptosis [31] aktivéieren. Hien N et al. confirméiert datt AZGP1 cyclin-ofhängeg kinase, wat fir Regulatioun der G2-M Transitioun, eng Quote-limitéieren Schrëtt an der Zell Zyklus och-verwandelt reguléieren responsabel ass. Dëst deit drophin, datt AZGP1 spillt indirekt eng Roll entholl Werdegang [32] zu stéiert. AZGP1 war als entholl suppressor zu pancreatic Kriibs vun Kong B. et al proposéiert. Hir Studien virgeschlo, dass d'AZGP1 Gentherapie vun inhibiting TGF-b-mediated Erk sécher [20] mesenchymal-ze-epithelial transdifferentiation induces. Déi funktionell Roll an Mechanisme vun AZGP1 zu gastric Kriibs brauch weider Enquête. VerfÜgung An Conclusioun, mir éischt dem Wëllen Niveauen a prognostic Wäert vun AZGP1 am primäre gastric Cancers an dëser Etude propagéieren. Eis Etude Resultater ugeholl datt AZGP1 als Kandidat entholl suppressor an prognostic uweist am primäre gastric Cancers déngen kéinten an e Potential Zil fir therapeutesch Interventioun ginn; Ee, Équipe der molekulare Mechanismussen an d'Regulatioun vun AZGP1 zu gastric Kriibs misst weider Enquête. VerfÜgung IFLA- breakpoint VerfÜgung Dëst Fuerschung vun der Ethik Comité ofgeseent gouf vun Sun Yat-sen University Cancer Center, a schrëftlech informéiert Averständnes war vun all Patient an der Etude Équipe kritt. VerfÜgung Mënscherechter Ray Sample den a Ganzen 35 vläit kriibserreegend iwwereneestëmmen bascht noncancerous gastric mucosa Stoffer aus gastric Kriibs Patienten gesammelt goufen amgaang gastrectomy um Sonn Yat-sen University Cancer Center vun 2010 bis 2011. an der chirurgesch resection, déi frësch Stoffer sech direkt an RNAlater (Ambion Galaxy, USA) Beweegung ze vermeiden RNS ofgeschnidden, bei 4 ° C gespäichert Iwwernuechtung en- Pénétratioun vun RNAlater an der Otemschwieregkeeten ze erlaben an dann bei -80 ° C gefruer bis den RNS an FAQ Extraktioun gesuergt huet. Aner 248 paraffin-Ënnerbewosstsinn Primärschoul gastric carcinoma Echantillonen, déi tëscht 2005 an 2007 gesammelt goufen hu sech aus der Sonn Yat-sen University Cancer Center kritt. Keen vun dësen Patienten hu radiotherapy Chimiotherapie virewech ze gesin kritt. D'histopathological Aart a Etapp vun der gastric Kriibs sech no der Critèren vun der Klassifikatioun Weltgesondheetsorganisatioun sech an der TNM Etapp vun der Unioun fir International Cancer Control geplangt. VerfÜgung Reduktioun vun Total RNS a Real-Zäit Chemeschen RT-Hinnen alleguer VerfÜgung Total RNS ofgebaut gouf benotzt TRIzol (Invitrogen, Karlsbad, Kalifornien, USA) no de Protokoll d'Hiersteller. D'total RNS Konzentratioun gouf duerch Miessunge absorbance bei 260 nm mat engem Nanotechnike DROP spectrophotometer (ND-1000, Thermo Wëssenschaftlech, USA) évaluéieren. Ëmgekéierte Transkriptiouns (RT) den éischten-staarkt vun cDNA zu synthesize war mat standing 2 μg vun insgesamt RNS behandelt mat M-MLV ëmgedréint transcriptase (Promega, USA) laut den Hiersteller d'Recommandatiounen. AZGP1 vir: déi doraus resultéierend cDNA war da bis grouss RT-Hinnen alleguer real-Zäit fir eng Evaluatioun vun der famill mRNA Niveau vun AZGP1 an GAPDH (glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, wéi eng intern Kontroll) mat der folgender primers ënnerworf 5'-GGAAGCAGGACAGCCAACTT -3 ", an ëmgedréint: 5'-TTATTCTCGATCTCACAACCAAAC-3"; GAPDH vir: 5'-CTCCTCCTGTTCGACAGTCAGC-3 ", an ëmgedréint: 5'-CCCAATACGACCAAATCCGTT-3". Gene-spezifesch amplification war standing eng Abi 7900HT real-Zäit Hinnen alleguer System benotzt (Life Technologies, Karlsbad, Kalifornien, USA) mat enger 15-μl Hinnen alleguer Mix mat 0,5 μl vun cDNA, 7.5 μl vun 2 × SYBR Green Meeschtesch Mëschung (Invitrogen, Karlsbad, Kalifornien, USA), a 200 nm vun de passenden oligonucleotide primers. De Mix war bei 95 ° C (10 min) virgehëtzten an dann op 95 ° C (30 sec) an 60 ° C (1 min) fir 45 Zykle Kick. Der Resolutioun rop war fir 15 sec op 95 ° C gemooss, 60 ° C fir 15 sec a 95 ° C fir 15 sec. Der CT (loung Zyklus) Wäert vun all Prouf war mat der Instrument d'Software (SDS 2,3) aus dem loung Zykle berechent, an der famill Ausdrock vun AZGP1 mRNA war de GAPDH Wäert normalized. D'Date goufen mat de Komparativ loung Zyklus analyséiert (2 Western Blotting Analys VerfÜgung d'homogenized gastric Kriibs Echantillonen, dorënner entholl an nontumor Stoffer, sech an Ripa lysed lysis Prellbock, an der lysates sech duerch centrifugation (12.000 Ziichter) bei 4 ° C fir 30 min recoltéiert. Ongeféier 20 μg FAQ Echantillon waren dann vun electrophoresis zu engem 12% Natrium dodecyl sulfate polyacrylamide gelies an transferéiert op engem polyvinylidene fluoride Schläimhait getrennt. den Net-spezifesch bindend Siten fir 60 min mat 5% Nët-Fett Mëllech No erauszesichen, goufen d'Schläimhait Nuecht op 4 ° C mat engem Kanéngchen monoclonal antibody géint AZGP1 (PTG Company, USA, bei engem 1:200 dilution) incubated. D'Schläimhait sech gewäsch dann dräimol mat TBST (Tris-gefiermt Salins mat tween-20) fir 10 min an mat der horseradish peroxidase (HRP) -conjugated Geess anti-Kanéngchen IgG antibody (Immunologie Consultants schafft, USA Komedie, bei engem 1: 2000 dilution) bei 37 ° C fir 1 Stonn. No dräi Mëtten, goufen d'Schläimhait vun engem verstäerkte chemiluminescence System (Zell sécher Technology, Danvers, Massachusetts, USA) entwéckelt. D'Band Intensitéit war vun densitometry mat der Quantitéit One Software (Bio-Rad Laboratoiren, Inc. Hercules, CA, USA) gemooss. D'FAQ Niveauen sech normalized fir datt vun GAPDH eng Maus anti-Mënsch GAPDH monoclonal antibody fonnt benotzt (Shanghai Kangchen, China, bei engem 1:10000 dilution). VerfÜgung Immunohistochemistry Analys VerfÜgung D'Otemschwieregkeeten Sektiounen sech mat dimethylbenzene an rehydrated duerch 100%, 95%, 90%, 80% an 70% Ethanol deparaffinized. No dräi Mëtten an PBS (phosphate-gefiermt Salins), waren d'drënner an antigen retrieval gefiermt wouvun 0,01 M Natrium citrate-Salz- Seier (pH = 6.0) fir 15 min an enger Schleck erëm Uewen gekacht. No mat PBS falsch, goufen d'Otemschwieregkeeten Sektiounen mat der Primärschoul antibody incubated an der drënner waren dann zu 3% peroxidase Duuscht Léisung (Invitrogen) endogenous peroxidase ze blockéieren rinsed. D'Sektiounen sech dann mat engem Kanéngchen monoclonal antibody géint AZGP1 (PTG Company, USA, bei engem 1:200 dilution) incubated bei 4 ° C Iwwernuechtung an duerno mat horseradish peroxidase (HRP) (ChemMateTM DAKO EnVisionTM Detektioun Kit) bei Raumtemperatur incubated fir 30 min. Nom Wäschen mat 3, vun PBS, war d'visualization Signal 3'-diaminobenzidine (botzt) Léisung entwéckelt, an all vun der drënner mat hematoxylin sech counterstained. Als negativ Kontrollen, goufen nieft uewendriwwer ausser ëmschriwwen Filteren dass se bei 4 ° C Iwwernuechtung incubated sech Léisung ouni d'Primärschoul antibody zu erauszesichen. VerfÜgung D'uplanzen vun dräi Observateuren (Chunyu Huang, Lin LV analyséiert goufen, a Jingjing Zhao), déi fir de Medeziner Resultater 'Patienten blinded goufen. Vigel tëscht der Observateuren sech an manner wéi 10% vun der iwwerpréift drënner, an e Konsens fonnt gouf an der weider Revisioun erreecht. D'total AZGP1 immunostaining stoung et wéi der Zomm vun der Prozent komm (de Prozentsaz vun de positiv Kierchefënster entholl Zellen) an der staining Intensitéit berechent. D'Prozent komm war als "0" (&Si besteet; 5%, negativ) Faarwen, "1" (5-25%, sporadesch), "2" (25-50%, Brennwäit), oder "3" (> 50 %, diffusen). D'staining Intensitéit gouf als "0" (kee staining) Faarwen, "1" (schwaach Kierchefënster), "2" (mëttelméisseg Kierchefënster), oder "3" (staark Kierchefënster). D'total AZGP1 immunostaining stoung gounge vun 0 bis 9. Mir der AZGP1 Ausdrock Niveauen definéiert wéi follegt: "-" fir e Goal vun 0-1, "+" fir e Goal vun 2-3, wou den niddereg Ausdrock definéiert goufen; "++" Fir e Goal vun 4-6, an "+++" fir e Goal &plain. 6, déi als héich Ausdrock definéiert goufen VerfÜgung Follow-Up VerfÜgung Déi Thes verfollegen -up war bei eis am Departement gehaal an abegraff Medeziner an Labo Examen all 3 Méint fir d'éischt 2 Joer, all 6 Méint während der drëtter zu fënneften Joer, an jäerlech fir eng zousätzlech 5 Joer oder bis Patient Doud, jee nodeems éischt Priedegt. Allgemeng Survival, déi als d'Zäit vun der Operatioun un de Patient den Doud oder de leschten Suivi, gouf als eng Moossnam vun hätt benotzt definéiert war. Et goufen iwwer 4% Patienten Suivi verluer. VerfÜgung statistique Analys VerfÜgung A vläit-Echantillon T-Test der AZGP1 mRNA Niveauen an der entholl Otemschwieregkeeten Echantillonen an d'bascht näischt ze vergläichen benotzt gouf entholl Otemschwieregkeeten Echantillon. D' χ VerfÜgung
= 0.008). Kaplan-Meier Iwwerliewe Kéiren verroden, datt de reduzéierten Ausdrock vun AZGP1 mat engem aarme hätt an gastric adenocarcinoma Patienten verbonne war ( P VerfÜgung = 0.009). Multivariate Cox Analyse identifizéiert AZGP1 Ausdrock war eng onofhängeg prognostic Faktor fir globale Iwwerliewe vun gastric adenocarcinoma Patienten (HR = 1,681, 95% CI = 1.134-2.494, P VerfÜgung = 0.011). VerfÜgung
Aféierung VerfÜgung
Resultater VerfÜgung
Diskussioun VerfÜgung
spontan a Methode VerfÜgung
Informatiounen Ennerstëtzung VerfÜgung Dorënner S1. VerfÜgung Immunohistochemical Detectioun vun der AZGP1 FAQ Ausdrock an Otemschwieregkeeten gastric Kriibs. De positiven Ausdrock vun AZGP1 war dem Zytoplasma en der VerfÜgung Doi:. 10,1371 /journal.pone.0069155.s001 VerfÜgung (TIF) VerfÜgung
Darmmikrobiom an IBD - d'Verbindung vläicht an der Diät seet Studie
Botzprodukter kënnen de Risiko fir Asthma vun der Kandheet fanne fënnt Studie
PENTAX Medical erhéicht $ 125,
Bestëmmung vun der sauerneutraliséierender Kapazitéit fir OTC Antaciden
Lungemikroben kënne hëllefen d'Resultater bei schwéier kranke virauszesoen
Studie suggeréiert eng Verbindung tëscht probiotescher Notzung an "Gehirnfogginess"
Vaginale Flëssentransplantatioun kann hëllefe fir widderhuelend bakteriell Vaginose ze behandelen
Bakteriell Vaginose ass e gemeinsamen an irksome Problem fir vill Fraen. Elo hunn dFuerscher dTransplantéierend Vaginale Flëssegkeeten vun enger gesonder Fra u Frae mat schwéierer bakterieller Vaginos
Studie beschreift initial Baseline gesond Darmmikrobiom Datebank an Iwwerflossprofil
Eng initial Baseline gesond Darmmikrobiom Datebank an Iwwerflossprofil gëtt beschriwwen an enger Studie verëffentlecht den 11. 2019 am Open-Access Journal PLOS ONE vum Charles Hadley King vum George W
Fäert net d'Kolonoskopie
Rootkanäl a Koloskopien hunn eppes gemeinsam - si gi vun der Ëffentlechkeet gefaart. Awer am Beräich vun den Zännprozeduren a routineméissegen Examen, respektiv, weder ass e grousse Deal. Bei Ogden