Peritoneal Metastasen ass den heefegsten Typ vun Terrain zu Patiente mat gastric Kriibs (GC) an ass am Zesummenhang mat aarmséileg hätt. Peritoneal lavage Zytologie, déi de Risiko vun peritoneal Metastasen ze diskutéieren, huet héich Empfindlechkeet. Hei, évaluéieren mir de diagnostic Potential vun exosomal miRNA Profiler an peritoneal Flesseggassystem fir d'Cepheid vun peritoneal Weiderleede vun GC. Total RNS war vun exosomes isoléiert aus sechs gastric malignant ascites (MA) Echantillonen, 24 peritoneal lavage Flesseggassystem (PLF) Echantillonen, a Kultur supernatants (CM) vun zwee Mënsch gastric carcinoma Zell Linnen Quecksëlwer dat fir peritoneal Metastasen an hirem Potential ënnerscheeden. Ausdrock vun exosomal miRNAs war mat Agilent Mënscherechter miRNA microarrays a grouss ëmgedréint Transkriptiouns polymerase Kette Reaktioun (qRT-Hinnen alleguer) bewäert. D'microarray Analyse uginn engem niddregen Verännerlechkeet vun der Zuel an Signal Intensitéit vun miRNAs ënnert d'Echantillonen fonnt. An der sechs MA Flëssegkeeten, Mir-21 zougedréckt a dem héchste Signal Intensitéit. Mir identifizéiert fënnef miRNAs (Mir-1225-5p, Mir-320c, Mir-1202, Mir-1207-5p, a Mir-4270) mat héije Ausdrock vun MA Echantillonen, déi PLF vun serosa-invasiv GC, an der CM vun engem héichgradeg metastatic GC Zell Linn; schéngen dës Kandidat miRNA Aarten ze peritoneal Weiderleede Zesummenhang ze sinn. Ënnerscheed Ausdrock vu Mir-21, Mir-320c, a Mir-1225-5p an der PLF validéiert war vun serosa-invasiv an Net-invasiv GC vun qRT-Hinnen alleguer an Mir-21 an Mir-1225-5p sech bestätegt gin assoziéiert mat serosal Invasioun an GC. PLF kann den Ausdrock vun exosomal miRNAs zu Profil benotzt ginn. Eis Conclusiounen hindeit datt Mir-21 an Mir-1225-5p kann als biomarkers vun peritoneal Terrain no curative GC resection déngen, also e Roman Approche ze fréi Diagnos vun peritoneal Weiderleede vun GC suergt VerfÜgung
Fro:. Tokuhisa M, Ichikawa Y, Kosaka N, Ochiya T, Yashiro M, Hirakawa K, et al. (2015) Exosomal miRNAs aus Peritoneum Lavage Flesseggassystem als D'Prognostic Biomarkers vun Peritoneal Metastasen zu Gastric Cancer. PLoS NËMMEN 10 (7): e0130472. Doi: 10.1371 /journal.pone.0130472 VerfÜgung
Redakter: Soheil S. Dadras, Universitéit vun Connecticut Gesondheet Center, USA VerfÜgung
Arnaque: 1 Februar 2015; Akzeptéiert: 20 Mee, 2015; Publizéiert: 24. Juli 2015 zu
Copyright: © 2015 Tokuhisa et al. Dëst ass eng oppen Zougang Artikel ënnert de Bedingunge vun der Lizenz CC BY verdeelt, déi bereet benotzen Genehmegungen, Distributioun, an Reproduktioun vun all mëttelgrouss, gëtt si vum original Auteur an d'Quell Kaiser VerfÜgung
Data Disponibilitéit: All Daten bannent de Pabeier sinn VerfÜgung
funding:.. d'Auteuren hu keng Ënnerstëtzung oder Fonge fir Rapport VerfÜgung
Wettsträit Interessen:. d'Auteuren hunn deklaréiert, datt keng Competitioun Interessen existéieren VerfÜgung
MicroRNAs (miRNAs) si kleng (19-23 nucleotides) Net-coding RNAs datt Funktioun als Post-transcriptional Reglementatioun vun der Gentherapie Ausdrock a wichteg Roll an der Kontroll vun villen biologesche Prozesser Leeschtung, dorënner Zell dat, Prolifératioun, an apoptosis [1]. MiRNAs gewiescht oncogenic oder entholl-suppressing Aktivitéit ze hunn gewisen, an dereguléierte Ausdrock vu ville miRNA Arten huet zu puer Cancers nogewise gouf, potentiell Applikatioun vun miRNAs als biomarkers vun Kriibs Werdegang an Metastasen [2-5] suggeréiert. VerfÜgung
miRNAs sinn zu secretory microvesicles (zB exosomes, apoptotic Gremien, an Environnement microvesicles), déi Schëld miRNAs aus ofgeschnidden vun RNAse an déngen als Gefierer fir miRNA secretion an extracellular Raum a kierperleche Flëssegkeeten gewéckelt. Exosomes si kleng membranous vesicles datt zu bewosst immun Äntwerte agebonne ginn; Ee, kuerzem huet et evident ginn, datt exosomes substantiell Montanten vun RNS enthalen a kënnen zu immun-onofhängeg reglementaresche Mechanismen Équipe ginn. Et ass elo etabléiert, datt exosomes intercellular Transfert vun miRNAs Leeschtunge kann, also an miRNA-baséiert sécher Mechanismen zousätzlechen [6]. Héichen Niveau vun miRNA-haltege exosomes hunn och an de Plasma vun Kriibs Patiente wéi an datt vun gesond Persounen [7] nogewise gouf, suggeréiert datt exosome-baséiert miRNA secretion zu Kriibs Entwécklung bedeelegt ass. Analyse vun aberrant miRNA Ausdrock vun der serum, Spaut, faeces, an Pipi huet fir fréi ze erkennen B-Zell lymphoma, a mëndlech, intestinal, an BBC Cancers [8-11]. VerfÜgung
Gastric Kriibs agestallt ginn (GC) ass déi zweet Équipe gemeinsam Ursaach vum Kriibs-Zesummenhang Doud weltwäit [12]. D'peritoneum ass den heefegsten Site vun Metastasen an um Terrain vun GC, an malignant ascites (MA), déi peritoneal Verbreedung vu Kriibs Zellen ëmmer, hutt mat aarmséileg hätt assoziéiert gouf. Moment, do sinn keng verléisslech dacks fir d'Entwécklung vun malignant peritoneal ascites am GC Patienten. MiRNA-haltege exosomes vertrieden engem Roman Mechanismus vun intercellular sécher an kann Abléck an der Ëmwelt nozeginn datt Kriibs Verbreedung vun der peritoneum Genehmegungen [13]. VerfÜgung
An dëser Etude, goufen exosomes vum MA isoléiert an der intraoperative Flesseggassystem peritoneal lavage (PLF) Echantillon vun GC Patiente kritt, an der Kultur mëttelfristeg (CM) vun héichgradeg invasiv peritoneal Zell Linnen, an miRNAs sech dann aus dëse Echantillon ofgebaut. D'Qualitéit vun der Quecksëlwer exosomal miRNAs an der Konstanz vun miRNA Ausdrock Musteren waren ubelaangt. MiRNA Ausdrock Profiler vun MA, PLF, an Echantillon CM sech Verglach an Kandidat miRNAs zu peritoneal Weiderleede vun GC dinn huet identifizéiert. VerfÜgung
kennen VerfÜgung
All Kranken oder hir Dépositaire schrëftlech informéiert Zoustëmmung gëtt. D'Etude gouf vun der Ethik Comité vun Yokohama City University Hospital (Ministär Nr A110127001) abruecht. VerfÜgung
MA a intraoperative PLF Echantillon waren aus GC Patienten mat der clinicopathological Beméien an Table virgestallt gesammelt 1. All Patienten virdrun schonn mam GC vun histopathological Analys Fro Echantillon aus der Primärschoul lesions geholl diagnostizéiert, a sechs MA Patiente schonn fir d'Präsenz vun ascites vun postwendend misse berechnen tomography (Kosovo) Scanner diagnostizéiert. Ascites sech och vun Zytologie analyséieren an all sech als positive fir malignancy vun pathologists confirméiert; déi reschtlech MA Echantillon waren fir miRNA Isolatioun benotzt. PLF war intraoperatively aus 24 GC Patienten (Table 1) gesammelt. No laparotomy, 100 ml vun normal Salins war an der pouch vun Douglas dann a Waasser peritoneal lavage war virun chirurgesch resection vun der entholl gesammelt. PLF war vun Zytologie a benotzt fir miRNA Isolatioun analyséiert. Vun der 24. PLF Echantillonen, huet sechs assayed benotzt miRNA microarray a 18 ware vun qPCR analyséiert. VerfÜgung
Zell Kultur VerfÜgung
D'OCUM-2M Zell Linn aus enger Primärschoul entholl vun scirrhous gastric carcinoma gegrënnt gouf an der OCUM-2MD3 Zell Linn war vun OCUM-2M Zellen mat engem héije Potenzial fir peritoneal Weiderleede vun Sauna Mais [14] ofgeleet. D'Zellen sech cultured zu Dulbecco d'geännert Eagle d'mëttel- (DMEM; Life Technologies, Grand Island, NY) ergänzt mat 10% Hëtzt-inactivated An et Bovine serum (FBS) an Antibiotike-antimycotic bei 37 ° C an engem 5% CO 2 incubator. Ze kréien Zell CM, OCUM-2M an OCUM-2MD3 Zellen sech dräimol mat serum-gratis DMEM mat Antibiotike-antimycotic an incubated an der selwechter mëttelfristeg fir 48 h nà gewäsch. VerfÜgung Isolatioun vun exosomes VerfÜgung Echantillon fir exosome Isolatioun sech virdrun ëmschriwwen bereet [15]. Ewechzehuelen grouss Zell Deelchen an Zell Protokoll, MA, PLF, an CM sech op 2.000 × centrifuged g VerfÜgung fir 15 min bei 4 ° C an Filter duerch eng 0.22-μm filter (Millipore, Billerica, MA). D'supernatant war bei -80 ° C gespäichert bis fir miRNA Extraktioun néideg. VerfÜgung exosomes Fir Manéier Echantillon bei 110.000 × centrifuged waren g VerfÜgung fir 70 min bei 4 ° C. D'exosome PELLET war mat 11 ml vun phosphate-gefiermt Salins (PBS) an centrifuged nees zou ëmschriwwen. D'PELLET war fir RNS Extraktioun benotzt. VerfÜgung Total RNS erauszéien a Analyse VerfÜgung Total RNS aus exosomes ofgebaut gouf en miRNeasy Mini Kit (QIAGEN, Hilden, Däitschland) benotzt no den Instruktioune vum Fabrikant an huet dann bis néideg weider Analyse bei -80 ° C gespäichert. VerfÜgung D'Qualitéit, Konzentratioun, an Gréisst vun insgesamt exosomal RNS évaluéieren sech eng Agilent Bioanalyzer 2100 (Agilent Technologies, Foster City, CA) benotzt. Virum der Analyse, war total RNS bereet en Agilent RNS 6000 Pico Kit benotzt (Agilent Technologies) no de Protokoll d'Hiersteller. VerfÜgung MiRNA microarray VerfÜgung ofgebaut MiRNAs vun de sechs MA, sechs PLF, an zwee CM Echantillon waren benotzt Agilent Mënscherechter miRNA Microarrays (Agilent Technologies) analyséieren, déi sëlwer 1.226 Mënsch miRNAs an 146 mënschlech Haren miRNAs. Fir miRNA erkennen, war 100 NG RNS Fortgeschratten an hybridised de Mënscherechter miRNA Microarray Kit benotzt (Rel 16,0; Agilent Technologies) no de Protokoll d'Hiersteller (miRNA Komplett Etikette an Hyb Kit fir miRNA Microarray System). Hybridisation Signaler sech mat engem DNA Microarray Scanner G2505C (Agilent Technologies) an der gescannt Biller fonnt goufen mat der Agilent Spillfilmer Extraktioun Software analyséiert (v. 10.7.3.1). Donnéeën Analyse huet mat Agilent GeneSpring GX Software v gesuergt. 11.0.2. (Logbuch 2 Transformatioun). Baseline Transformatioun war net gesuergt. VerfÜgung D'Qualitéit vun miRNA Extraktioun analyséiert gouf no der Verännerlechkeet vun der Zuel vun microarray-fonnt miRNA Arten, Signal Intensitéit, an der Korrelatioun vun miRNA Ausdrock ënnert Echantillon no ± Fils ze mengen, souguer gemaach vun Variant (CV), an Korrelatioun souguer gemaach ginn (CC). VerfÜgung selektionéiert vun peritoneal Metastasen-spezifesch miRNAs VerfÜgung Den Ausdrock Profiler vun exosomal miRNAs analyséiert goufen miRNAs déieren, datt fir GC peritoneal spezifesch sinn Weiderleede benotzt dëse Schrëtt-verstänneg Approche. Schrëtt 1: miRNA Profiler an der CM vun der héichgradeg metastatic peritoneal OCUM-2MD3 Zellen sech mat deene vun den Elteren Net-metastatic OCUM-2M Zellen Verglach, an differentially ausgedréckt miRNAs (mengen fantastesch-Ännerung, > 2) sech ausgewielt <. br> Step 2: sechs PLF Echantillonen an zwou Gruppen séiert sech: T4 (n = 4) an T1-T3 (n = 2), no Kriibs Etapp vun entholl Gréisst Annex (UICC-AJCC, 7 Step 3:. Der gewielter miRNAs déi gemeinsam décidéiert fir zwee Schrëtt an déi sech am MA sech weider Filter no Signal Intensitéit ausgedréckt. Déi mat Intensitéit Wäerter vu méi wéi Logbuch 2 10 an MA a PLF sech als Kandidat miRNAs Zesummenhang mat peritoneal Investitiounen ausgewielt; Mir-21 zougedréckt a dem héchste Moyenne Signal Intensitéit ënnert MA Echantillon. Den Ënnerscheed Ausdrock vun miRNA ausgewielt Arten am 3. Etappe war an déi reschtlech 18 PLF Echantillon vun qRT-Hinnen alleguer gestäerkt. VerfÜgung Chemeschen Analyse vun peritoneal Metastasen-spezifesch miRNA Ausdrock vun qRT-Hinnen alleguer VerfÜgung TaqMan microRNA assays (Life Technologies) waren d'famill Ausdrock Niveau vun Mir-21 (assay ID. 000397), Mir-320c (assay ID. 241053_mat), Mir-1225-5p (assay ID. 002764), a Mir-16 bis ofgedonkelt benotzt (assay ID. 000391). Ëmgekéierte Transkriptiouns war mat der TaqMan miRNA RT Kit (Life Technologies) ënnert dëse Konditiounen gesuergt: 30 min bei 16 ° C, 30 min bei 42 ° C an 5 min bei 85 ° C. Hinnen alleguer war am 96-gutt Placke mat den 7500 Real Time Hinnen alleguer System (Life Technologies) gemaacht; all Reaktioune waren am triplicate gesuergt. Den Ausdrock Niveau vun Zil- miRNAs sech un déi vum Mir-16 normalized, déi als stably ausgedréckt Kontroll benotzt gouf [17]. Wann eis microarray Donnéeën vun exosomal miRNA zu malignant ascites Echantillonen analyséiert, presentéiert Mir-16 klengste souguer gemaach vun Variant (CV = 4%) ënnert der intern Standarden Kandidat, dorënner Mir-638 (CV = 8%), loosse-7A (CV = 8%), an 142-3p (CV = 23%). VerfÜgung zu statistique Analyse Lafend Verännerlechen sech am Verglach mat Student d' t VerfÜgung Azeton. Wann néideg, de t VerfÜgung Azeton huet geännert ze ongläich variances vergläichen. D'Differenz tëscht Diskussioun Verännerlechen war mat Fisher d'exakt Test bewäert. Korrelatioun tëschent zwee Verännerlechen war mat Pearson Korrelatioun souguer gemaach ginn évaluéiert. Differenzen sech statistesch relevant um P &Si besteet considéréiert; 0,05. Statistique analyséiert goufen benotzt SPSS 21,0 Software fir Windows (IBM, Armonk, NY) gehaal. VerfÜgung Chemeschen Analyse vun ofgebaut exosomal RNS VerfÜgung Total RNS aus exosomes ofgebaut gouf isoléiert vun MA, intraoperative PLF, an Zell CM. D'Steiren Konzentratioun vun der Quecksëlwer exosomal RNS war 4,4 Dummeldéng /μL (rangéiert vun 1.2 bis 6.1 Dummeldéng /μL) fir MA an 6.4 Dummeldéng /μL (vu 1,7 op 16,4 Dummeldéng /μL) fir PLF. Electropherograms réischt e groussen Undeel vu klenge RNS Arten presentéieren an all CM a Krankheete Echantillonen, iwwerdeems keng oder wéineg kontaminéierte mat 18S an 28s ribosomal RNS (kee z'ënnerscheedde Moundalpen am entspriechende molekulare Gewiicht) observéiert gouf (Lalumi 1). VerfÜgung Performance vum miRNA microarrays VerfÜgung den Ausdrock vun exosomal miRNA microarrays vun all Grupp vun Echantillon fir Test, iwwerpréift mir d'Zuel vun fonnt miRNAs, Géck vun Signal Intensitéit, d'Zuel vun Toast ageholl miRNAs, an der Korrelatioun vun miRNA Ausdrock ënnert d'Gruppen. D'Zuel vun miRNA Arten vun all Grupp vun microarray nogewise ass zu Lalumi 2. Am sechs MA a sechs PLF Echantillon gewisen, mengen dës Nummeren 490.1 (Fils = 42,3; CV = 8,6%) an 367.5 (Fils = 13,4; CV = 3.6%), bzw.. An all Grupp, huet d'Verännerlechkeet vun der Zuel vun fonnt miRNAs ënnert Echantillon niddereg VerfÜgung Signal Intensitéit Verdeelung vun all Grupp an Lalumi 3 virgestallt ass. dëst weist d'Filteren Signaler un der 25 normalized, 50, 75, an 90 D'Zuele vun miRNAs gemeinsam ënnert d'Echantillonen am MA, PLF, an CM Gruppe waren 327, 263, an 354 Obschonn dës, respektiv, huet 194 fir déi dräi Gruppen (Lalumi 4). VerfÜgung Table 2 der Korrelatioun vun miRNA Ausdrock tëscht all zwou Echantillon weist. Déi héchsten an den ënneschten CC Wäerter waren 0,94 an 0,68, respektiv; der Moyenne CC vun all Echantillon war 0.79 (CV = 8,86%). An MA, PLF, an CM Gruppen, déi duerchschnëttlech CC Wäerter waren 0,85, 0,88 an 0,90, respektiv an d'Verännerlechkeet am Ausdrock Profiler fir all Grupp niddreg war. VerfÜgung selektionéiert vum Kandidat ze peritoneal Weiderleede Zesummenhang miRNAs VerfÜgung fir Datum, hu keng Daten sinn schonn op der Ausdrock Profiler vun exosomal miRNAs verbonne mat peritoneal anzebezéien, well vun der Bestellung fannen vun normal ascitic Flëssegkeeten géint déi d'MA Ausdrock Profiler ze vergläichen. Mir ausgewielt ze peritoneal Weiderleede Zesummenhang miRNAs e Schrëtt-verstänneg Approche benotzt. D'Zuel vun miRNAs Toast am Echantillon sechs MA Arc war 327. Schréck 1 an 2, 140 an 118 Metastasen-spezifesch miRNAs waren am CM an PLF Gruppen ausgewielt, bzw.. Vun deenen 327, 140 an 118 miRNAs, goufen fënnef miRNAs als Kandidaten Zesummenhang mat peritoneal Publikatioun (Lalumi 5) ausgewielt. Zwee vun hinnen (Mir-1225-5p an Mir-320c) an Mir-21 mat der héchster Signal Intensitéit ënnert der MA-spezifesch miRNAs sech sou differentially ausgedréckt an 18 PLF Echantillon validéiert, mat qPCR (Table 3). VerfÜgung Validatioun vum Kandidat miRNA Ausdrock vun qPCR VerfÜgung uechtzéng PLF Echantillonen an zwou Gruppen ënnerdeelt goufen no der metastatic Etapp, T4 (perforéierte serosa, n = 9) an T1-T3 (subserosa oder manner, n = 9), an den Ausdrock vum Mir-21, Mir-320c, a Mir-1225-5p war vun qRT-Hinnen alleguer analyséiert. Figebam 5 weist, datt de Niveau vum Mir-21 an Mir-1225-5p zu T4-Etapp GC Patienten vill zu deenen Verglach fräi waren an T1-T3 Patienten (Mir-21, P = 0,027, an Mir-1225-5p, P = 0,008; Lalumi 5). Den Ënnerscheed zu Mir-320c Ausdrock tëscht zwee Patient Gruppe war Net-relevant (P = 0,928, Lalumi 6). VerfÜgung Next, déi Korrelatioun tëscht miRNA Niveauen a Krankheete Hannergrond vun GC Patienten war iwwerpréift (Table 4). Mir-21 an Mir-1225-5p Ausdrock war wiesentlech méi héich an Patienten mat T4-Etapp Kriibs wéi dat zu T1-T3-Etapp Patienten (P = 0.015). Nee bedeitendst Korrelatioun war tëscht miRNA Ausdrock an aner Krankheete Parameteren fonnt. VerfÜgung An dëser Etude, mir, fir d'éischte Kéier propagéieren, déi miRNA Inhalt vun exosomes vum MA a PLF vun GC isoléiert Patienten. Eis Etude weist dass exosomal miRNAs kann konsequent aus MA a PLF an datt miRNA Ausdrock Profiler kënnen de Status vun peritoneum am GC Patienten weg ofgebaut ginn. VerfÜgung D'Iwwregens hätt vun GC mat serosal Invasioun aarm bleift och no R0 resection, well vun den héijen Taux vun Terrain, besonnesch peritoneal Investitiounen (PM) [18]. PM zu GC ass déi komplizéiert Typ vun Terrain, well et schwiereg ass, wéi och fir depressiv ze virauszesoen. Obwuel ascites déi gemeinsam PM Zuel ass, entwéckelen vill GC Patienten mat PM nët ascites. Ënnert der Imaging-baséiert diagnostic Methoden, ass Héich-Vitesse Spiralgalaxien CT fir de Bilan vun preoperative Stadium vun GC an Post-therapeutesch Suivi oft benotzt; awer, am Fall vun PM seng diagnostic Genauegkeet ass mëttelméisseg, haaptsächlech wéinst héich Empfindlechkeet [19]. Benotzt PET-CT fir PM Diagnos am GC ass och kontrovers, wéi et gemellt gouf, datt FDG-PET aarmséileg Sensibilitéit fir ze erkennen PM zu GC [20] huet. PLF huet d'nächst Ziel fir d'Diagnos an Cepheid vun PM zu GC ginn. Cytological Ënnersiche vun intraoperatively gesammelt PLF ass fir d'Cepheid vun peritoneal Terrain benotzt [21] an ass fir GC Stadium an Japan benotzt [22]. Allerdéngs hunn e puer Enquêteuren gemellt dass PLF Zytologie net d'Sensibilitéit fir de Cepheid an erkennen PM [21] néideg heescht Collectioun, an hunn d'Benotzung vun molekulare diagnostic Methoden, wéi RT-Hinnen alleguer, fir d'Detectioun vum Mikro-Investitiounen proposéiert an PLF. An engem multicentre mèi studéieren, mRNA Ausdrock vun de Genen Zeechesaatz carcinoembryonic antigen (CEA) an cytokeratin 20 (CK-20), évaluéiert vun RT-Hinnen alleguer, huet nëtzlech fir d'Cepheid vun globale Iwwerliewe a PM zu GC zu Onrecht [23] . Allerdéngs ass de Nodeel vun mRNA-baséiert diagnostic Methoden déi héich degradability vun mRNA am Laf vun chirurgesch Prozeduren. VerfÜgung Am Géigesaz, zouenen miRNAs zu exosomes bleiwe stabil a kann am Kierper Flëssegkeeten, wéi serum, Plasma ugebonnen , Spaut, Pipi, Mammemëllech, an Tréinen, fir laang Zäitspann [24, 25]; exosomes hun och vun MA zu spillt Kriibs [26]. VerfÜgung Fir de beschte vun eisem Wëssen isoléiert ass, et ass kee Rapport iwwert exosomal aus der PLF vun GC Patienten isoléiert miRNAs. Levänen et al. exosomes aus bronchoalveolar lavage Flesseggassystem gesammelt an analyséiert exosomal miRNA Ausdrock Allergiker-Zesummenhang miRNA Arten [27] ze entdecken. Liu et al. confirméiert, datt als uweist vun cervical Kriibs benotzt ginn [28] isoléiert exosomes aus cervicovaginal lavage Flesseggassystem enthale héich Niveaue vu Mir-21, deen. Hei, mir den Ausdrock Profiler vun exosomal miRNAs an der PLF vun GC Patienten vun miRNA microarray Technologie fir Kandidat analyséiert diagnostic miRNA biomarkers fir d'Cepheid vun Metastasen am GC z'identifizéieren. VerfÜgung An eiser Enquête, déi éischt Géigespiller zougemaach an der grouss Isolatioun vun exosomal miRNA aus PLF. Weber et al. miRNA Ausdrock vun 12 kierperleche Flëssegkeeten évaluéiert an Untersuchungshaft, datt de ganzen RNS Konzentratioun vun peritoneal Flesseggassystem 775 μg /L war [25], déi dat manner war, wéi mir aus MA a PLF-4,400 an 6.400 μg /L, respektiv De Grond fir d'kritt Ënnerscheed kann d'Méthodologie fir d'Isolatioun vun insgesamt RNS, well Weber et al benotzt ginn. direkt RNS aus peritoneal Flesseggassystem ofgebaut, wobäi mir exosomes éischt isoléiert an dann benotzt dëse fir RNS erauszéien. Analyse vun der Qualitéit vun RNS aus PLF isoléiert bewisen en Iwwerfloss vun kleng (&Si besteet; 200 NG) RNS Arten am CM an MA. Et huet kee z'ënnerscheedde 18S an 28s ribosomal RNS Moundalpen der Virbereedung, beweist d'Feele vu kontaminéierte mat intracellular RNS. VerfÜgung Den zweete Problem an de Grëff ze studéieren Équipe Konstanz vun der Qualitéit vun der exosomal miRNAs begéint isoléiert. An eiser Etude, observéiert mir niddereg Verännerlechkeet vun der Zuel vun fonnt miRNA Aarten an miRNA Signal Intensitéit, an engem héich Korrelatioun vun miRNA Ausdrock ënnert dem Echantillon vun all Grupp. Déi heeschen Zuelen vum Magnéitfeld miRNAs zu MA a PLF waren 490 a 367, déi mat der Zuel vun miRNAs am Accord war (397) virdrun zu peritoneal Flesseggassystem fonnt [25]. VerfÜgung PLF an MA Echantillon zougedréckt niddereg Verännerlechkeet an Signal Intensitéit (CV = 3,87% fir d'50 D'miRNA Ausdrock Profiller ware analyséiert miRNAs spezifesch fir peritoneal Metastasen ze wielen. Mir-21 zougedréckt héich Ausdrock vun Patienten mat T4-Etapp carcinoma wéi an deene vun der T1-T3 Grupp. Fabbri et al. confirméiert, datt Mir-21 an Mir-29a zu Kriibs-Hit exosomes entholl Wuesstem betraff an Diffusioun vun verbindlech bis an TLRs an der Géigend immun Zellen an Pinguin engem prometastatic demagogesch Äntwert [29] activating; dëst ënnerstëtzt d'Notioun dass entholl-ofgeleet exosomes zu der premetastatic microenvironment [30, 31] bäidroen. Dëst kann dat T4 carcinoma-ofgeleet weg exosomes der premetastatic gratis Sproochenunterricht am peritoneum schafen, déi dann peritoneal Invasioun no curative resection vun GC ënnerstëtzt. VerfÜgung e Schrëtt-verstänneg Approche benotzt, mir fënnef exosomal miRNAs ausgewielt (Mir-320c , Mir-1202, Mir-1225-5p, Mir-1207-5p, a Mir-7270) a validéiert Mir-320 an miR1225-5p Ausdrock vun der PLF vun 18 CG Patienten vun qRT-Hinnen alleguer. Mir-1225-5p zougedréckt héich Ausdrock vun T4 wéi zu T1-T3 Etapp CG Patienten, confirméiert de zur microarray kritt Resultater, wobäi et keen Ënnerscheed war an Mir-320 Niveauen tëschent Patient Gruppen. Mir-1225 Ziler der polycystic Nier Krankheet Gentherapie, PKD1 VerfÜgung, déi zu autosomal dominant polycystic Nier Krankheet dacks mutated ass; also, miR1225 kann de Werdegang vun dëser Krankheet betreffen [31]. Allerdéngs bleift d'Relatioun tëscht Mir-1225 a Kriibs onkloer. Mir-21 an Mir-1225-5p vläicht e premetastatic gratis Sproochenunterricht am peritoneum fir d'Verbreedung an Siidlung vun metastasising Kriibs Zellen virbereeden an domat der curative GC resection der predisposition fir d'peritoneal Terrain uginn kann. VerfÜgung PLF noginn Informatiounen iwwert den Zoustand vun der peritoneum, wéi Ännerungen an der Populatioun vun immun Zellen an secretion vum Wuesstem Facteuren an cytokines [32, 33]. Zytologie a molekulare diagnostic assays op der Detektioun vum Kriibs Zellen baséieren, hierkommen profiling vun miRNAs zu PLF vläicht fir d'Cepheid vun engem peritoneal premetastatic phenotype am GC, zeréckgräife méi effikass präventive an curative Moossname benotzt ginn. VerfÜgung
Resultater VerfÜgung
Diskussioun VerfÜgung
Rotavirus Impfung net verbonne mam Typ 1 Diabetis mellitus Risiko
Schlamm an Duschkäpp kéint geféierlech Lungebakterien fanne Studie
Fastfood kann e Premier Täter bei Teenager Depressioun sinn
Spermmikrobiom opgedeckt mat RNA Sequencing
Organesch Äppel hunn probiotesch Eegeschaften
COVID-19:Wéi gesäit d'Krankheet aus
Studie beschreift initial Baseline gesond Darmmikrobiom Datebank an Iwwerflossprofil
Eng initial Baseline gesond Darmmikrobiom Datebank an Iwwerflossprofil gëtt beschriwwen an enger Studie verëffentlecht den 11. 2019 am Open-Access Journal PLOS ONE vum Charles Hadley King vum George W
Roman superaktivéierende Makrophag Rezeptor kéint Hyper-Entzündung a schwéiere COVID-19 erklären
Immunitéit ass eng virwëtzeg Saach. Iwwerdeems wesentlech beim Schutz vum Kierper géint invasiv Pathogenen an auslännesch Antigenen, et kann och géint de Kierper dréinen an zerstéierend immunologesch
RNA Sequencing bitt nei Abléck an de Mikrobiom
Fuerscher vun der University of Chicago sinn mat enger revolutionärer Strategie komm fir dAktivitéit vum Darmmikrobiom ze studéieren-mat High-Throughput Sequencing vun tRNA. Alpha Tauri 3