Background VerfÜgung
Gastric Kriibs ass eent vun de meescht genannten malignant Krankheeten weltwäit. Schwellen- Beweiser huet gewisen, datt microRNAs (miRNAs) mat entholl Entwécklung an Werdegang verbonne sinn. Eis virdrun Etuden hunn dat H. pylori VerfÜgung Krankheet konnt de verännert Ausdrock vu Mir-30b an gastric epithelial Zellen ze induce. Allerdéngs ass, wéineg iwwert d'Potential Roll vum Mir-30b an gastric Kriibs bekannt. VerfÜgung Method VerfÜgung Mir den Ausdrock vun Mir-30b an gastric Kriibs Zell Linnen a mënschlech gastric Kriibs Stoffer analyséiert. Mir iwwerpréift den Effet vum Mir-30b mimics op der apoptosis vun gastric Kriibs Zellen kënschtlech duerch onkontrolléiert cytometry (FCM) an caspase-3/7 Aktivitéit assays. Sauna Maus xenograft Modell gouf benotzt, fir festzestellen, ob Mir-30b ass zu tumorigenesis vun gastric Kriibs Équipe. D'Zil vum Mir-30b war vun Bioinformatik Analyse, luciferase assay a Western blot identifizéiert. Endlech hu mir d'Korrelatioun Analyse tëscht Mir-30b an hir Zil- Ausdrock vun gastric Kriibs gesuergt. VerfÜgung Resultater VerfÜgung Mir-30b huet bedeitend erof-reglementéiert gastric Kriibs Zellen a mënschlech Stoffer gastric Kriibs. Ugewannt Ausdrock vu Mir-30b gefördert der apoptosis vun gastric Kriibs Zellen kënschtlech, a Mir-30b hätt vill tumorigenicity vun gastric Kriibs inhibit vun der apoptosis Undeel vu Kriibs Zellen zu VIVO waarden. Desweideren, plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) gouf als potentiell Zil vum Mir-30b identifizéiert, an Mir-30b Niveau war inversely mat PAI-1 Ausdrock vun gastric Kriibs soll. Zousätzlech, silencing vun PAI-1 konnt den Effet vum Mir-30b overexpression op apoptosis Regulatioun vun Kriibs Zellen ze phenocopy, an overexpression vun PAI-1 konnt den Effet vun der Promotioun Zell apoptosis vum Mir-30b opgeléist, déi besot PAI-1 ass potenziell zu Mir-30b-entschlof apoptosis op Kriibs Zellen Équipe. VerfÜgung Conclusioun VerfÜgung Mir-30b kann zu gastric Kriibs als Roman entholl suppressor Gentherapie Funktioun vun gezielt PAI-1 a Regulatioun der apoptosis vun Kriibs Zellen. Mir-30b kéint als potentiell uweist an therapeutesch Zil- géint gastric Kriibs déngen VerfÜgung Fro:. Zhu E-D, Li N, Li B-S, Li W, Zhang W-J, Mao X-H, et al. (2014) Mir-30b, Down-reglementéiert Gastric Cancer, förderen Apoptosis an Hien entholl Wuesstem vun gezielt Plasminogen Activator Inhibitor-1. PLoS NËMMEN 9 (8): e106049. Doi: 10.1371 /journal.pone.0106049 VerfÜgung Redakter: Gerolama Condorelli, Federico II Universitéit vun Neapel, Italien, Italien VerfÜgung Arnaque: 7. Mee 2014; Akzeptéiert: 28 Juli, 2014; Publizéiert: 29. August 2014 zu Copyright: © 2014 Zhu et al. Dëst ass eng oppen-Zougang Artikel ënnert de Bedingunge vun der Lizenz BY Creative Commons verdeelt, déi bereet benotzen Genehmegungen, Distributioun, an Reproduktioun vun all mëttelgrouss, gëtt d'Original Auteur an d'Quell Kaiser sinn VerfÜgung Data Disponibilitéit:. D' Auteuren confirméieren datt all Daten d'Conclusiounen si voll sinn ouni Restriktioun Basisdaten. All Daten sinn bannent de Pabeier a seng Ennerstëtzung Informatiounen Fichieren VerfÜgung Funding:. Dës Aarbecht vun National Natural Science Foundation of China (Nr 81202310), Wëssenschaftlech Innovation Research Foundation vun Drëtte Military Medical Uni ënnerstëtzt gouf (Nr 2009XQN20). D'funders hu keng Roll am Etude Design, Daten Kollektioun an Analyse, Décisioun, oder Virbereedung vun der mëttelalterlech Handschrëft ze publizéieren VerfÜgung Wettsträit Interessen:.. D'Auteuren hunn deklaréiert, datt keng Competitioun Interessen existéieren VerfÜgung Gastric Kriibs bewierkt ronn 738.000 Doudesfäll weltwäit pro Joer, an et gouf als drëtt Virwaat Ursaach vum Kriibs-Zesummenhang Doud Männer [1] unerkannt. Fréi Diagnos a Behandlung hun fir laangfristeg Iwwerliewe a gutt hätt excellent Erwaardungen gefouert hierkommen d'Perspektive fir Patiente mat fortgeschratt gastric Kriibs aarm bleift. Wéi aner Cancers, ass d'Entwécklung vun gastric Kriibs geduecht multifactorial gin. Helicobacter pylori (H. Pylori) VerfÜgung Krankheet ass eng wichteg Iwwerleeung vun gastric Kriibs gin unerkannt [2]. Obwuel vill genetesch a epigenetic Ännerungen hunn zu gastric Kriibs gemellt ginn, de molekulare Mechanismus der Entwécklung vun gastric Kriibs Basisdaten bleift onkloer. VerfÜgung microRNAs (miRNAs) si kleng Net-coding RNAs datt posttranscriptionally Gentherapie Ausdrock regléieren. Mature miRNAs kann zu 3 'UTRs vun Zil- bewosst mRNA am Tour ausléisen mRNA ofgeschnidden oder inhibition vun Iwwersetzung speziell kruet [3], [4]. miRNAs Akt als Schlëssel Legislateuren an enger grousser Villfalt vu biologesche Prozesser, dorënner Entwécklung, Zell dat, apoptosis, ukuerbelt, an Signal transduction [5], [6]. Et ass bewisen ass, dass 50% vun miRNAs dacks um Kriibs-verbonne Frankräich Regiounen oder an fragil Siten etabléiert sinn [7]. Wiisst Beweiser huet gewisen, datt aberrant miRNAs Ausdrock mat verschiddenen Mënsch Cancers deemolegt Weltbild a beweist datt miRNAs als oncogenes oder entholl-suppressor Genen Funktioun kënnen [8] - [10]. Kuerzem, enger grousser Zuel vun dereguléierte miRNAs dorënner Mir-106b-25 Stärekoup, Mir-21, Mir-218, Mir-7, a Mir-335 als modulators vun Zell Wuesstem identifizéiert ginn, apoptosis, Migratioun, oder Invasioun an gastric Kriibs Entwécklung [11] - [15]. Dës Conclusiounen proposéiere der miRNAs vläicht eng wichteg Roll bei der pathogenesis vun gastric Kriibs Leeschtung. VerfÜgung Eis virdrun Etuden hunn dat H. pylori VerfÜgung Krankheet konnt de verännert Ausdrock vun miRNAs zu gastric epithelial Zellen dorënner Mir-155, Mir-146a an Mir-30b an induce, kann miRNAs Funktioun als Roman negativ Reglementatioun ze-Sënn labber H. pylori VerfÜgung -induced inflammation [16], [17]. Desweideren, hien huet mir dat Mir-146a Potential Roll an der Entwécklung vun gastric Kriibs vun der Verbreedung an apoptosis vun gastric Kriibs Zellen modulating [18] spille kann. Beispill, mir hunn och Mir-30b konnt de autophagy Prozess während H regléieren. pylori VerfÜgung Wonn erëm, doduerch zu der Persistenz vun H matmaacht. pylori VerfÜgung Aids [19]. Mä d'Roll vum Mir-30b an gastric Kriibs ass nach gréisstendeels onbekannt. VerfÜgung Plasminogen activator inhibitor 1 (PAI-1) ass den Haaptgrond serine protease inhibitor vun Otemschwieregkeeten-Typ (t-PA) an urokinase-Typ ( U-PA) plasminogen activator an dofir spillt eng wichteg Roll an der plasminogen-plasmin System [20]. Virdrun Studien hunn illustréiert PAI-1 aarmséileg prognostic Faktor an e puer gemeinsam erhéijen ass, an ass mat Kriibs Invasioun an Metastasen verbonne [21]. Kuerzem, hunn ville Gruppe och fonnt dass PAI-1 entholl Wuesstem duerch inhibition vun Zell apoptosis Promotioun kann. Zum Beispill, zousätzlech vun enger stabiler Wildwest-Typ PAI-1 fir d'mënschlech Aarbecht Kriibs Zell Linn PC-3, de Mënsch promyelocytic Leukämie Zell Linn HL-60 an och Net-tumoural Zellen, an engem groussen inhibition vun apoptosis schéinen [22] . Wann subcutaneously an Sauna Mais heijen mat PAI-1 murine fibrosarcoma Zellen overexpressing, goufen d'erhéijen séier etabléiert, iwwerdeems PAI-1 erhéijen Zellen e Trupen tumorigenicity haten [23]. Aner Rapport gewisen, datt, genetesch a pharmacological inhibition vun PAI-1 zu Mënsch entholl Zell Linnen (HT-1080, A549, HCT-116, an MDA-MB-231) fräi spontan apoptosis, a Spannen, implanted PAI-1 knockdown HT- 1080 Zellen ze PAI-1 Knockout Mais schéinen ofgeholl tumorigenesis an allem Iwwerliewe Verglach mat Kontroll Mais [24]. Dës Studien déi wichteg Beweiser datt PAI-1 enormen engem Schutzpatrounin Roll géint entholl Zell apoptosis. VerfÜgung An aktuell Etude, mir fonnt, datt Mir-30b huet bedeitend erof-reglementéiert gastric Kriibs Zellen an entholl Stoffer. Ectopic Ausdrock vu Mir-30b konnt de apoptosis vun gastric Kriibs Zell kënschtlech förderen, a Mir-30b vill tumorigenicity vun gastric Cancers an Sauna Maus xenograft Modell inhibit konnt. Desweideren, PAI-1 ass als potentiell Ziler vun Mir-30b identifizéiert, an Mir-30b kann apoptosis induce an entholl Wuesstem oofgesinn vun den Ausdrock vun PAI-1 repressing. Eis Conclusiounen hindeit datt Mir-30b als Gentherapie Roman entholl suppressor zu gastric Kriibs Funktioun kënnen an engem Potential Therapie Zil fir gastric Kriibs kann. VerfÜgung IFLA- breakpoint VerfÜgung All vum Déier Experiment vun den Déieren ethneschen an hun Comité vun der Drëtte Military Medical University guttgeheescht. All Déier Agrëff war ënner Natrium pentobarbital Anästhesie gesuergt, an all Efforten gemaach goufen Leed ze minimiséieren. D'Etude sensibiliséieren Otemschwieregkeeten uplanzen war vun der Ethik Kritik Verwaltungsrot bei Drëtte Military Medical Universitéit ugeholl, an schrëftlech informéiert Averständnes war vun all Patienten virun Participatioun kritt. VerfÜgung Ray uplanzen VerfÜgung Am Ganzen, gastric Kriibs Stoffer an bascht Net-entholl Stoffer sech vu Patienten mat der Primärschoul gastric Kriibs amgaang radikal gastrectomy am Südwesten Spidol, Drëtte Military Medical University, China, an der clinicopathologic Charakteristiken vun gastric Kriibs Patiente kritt si am Table 1. No chirurgesch Entféierung zesummegefaasst, goufen Stoffer gefruer direkt an flëssegem Stéckstoff a bei -80 ° C gespäichert. D'Etude gouf vun der Ethik review Verwaltungsrot bei Drëtte Military Medical Universitéit ugeholl, an Awëllegung war vun all Patienten virun Participatioun kritt. VerfÜgung Zell Linnen an Zell Kultur VerfÜgung All Linnen Zell an dëser Etude benotzt kritt huet vu Shanghai Type Kultur Collection vun Chinese Akademie vun de Wëssenschaften (Shanghai, China), war de Mënsch gastric Kriibs Zell Linnen AGS an Ham d'F12 cultured (Hyclone) mëttelfristeg mat 10% an et Bovine serum (FBS), aner gastric Kriibs Zell Linnen MKN45 , HGC-27, BGC-823, SGC-7901 a mënschlech embryonal Nier (HEK) 293 Zellen zu DMEM (Hyclone) mat 10% FBS cultured waren, waren se all an engem humidified incubator mat 5% CO haten 2 op 37 ° C wéi virdru beschriwwen. VerfÜgung Chemeschen RT-Hinnen alleguer VerfÜgung Total RNS war mat Trizol reagent (Invitrogen) ofgebaut, gefollegt vun engem ëmgekéierte Transkriptiouns benotzt TaqMan miRNA assays (Ambion), mat U6 kleng nuklear RNS wéi eng intern normalized Referenz. qRT-Hinnen alleguer Reaktioune sech mat de folgende Punkten gesuergt: 95 ° C fir 2 min duerno vun 40 Zykle vun 95 ° C fir 15 s an 60 ° C fir 30 ass. qRT-Hinnen alleguer Analysë fir de mRNA vun PAI-1 gesuergt huet andems PrimeScript RT-Hinnen alleguer Trikoten (Takara), wéi déi folgend Parameteren: 95 ° C fir 30 den Schluss vum 40. Zykle vun 95 ° C fir 5 ass, 60 ° C fir 5 ass a 72 ° C fir 30 ass. D'mRNA Niveau vun β-actin war wéi eng intern Kontroll benotzt. De Message vun primers benotzt ginn an Table dës 2. VerfÜgung Northern blot VerfÜgung Small-Stad RNAs war d'mirVana RNS Isolatioun Kit (Ambion) isoléiert benotzt. Dräi Puer Medeziner Echantillon waren zoufälleg aus de 21 Patienten fir spéider Northern blot Analyse an dëse Match gaangen. Nërdlechen blot war laut der Norm Prozedur standing wéi virdrun descried [17]. Den DNA oligonucleotide antisense Ämter benotzt Mir-30b an U6 snRNA sech ze entdecken wéi follegt zesummen: Mir-30b (5'- AGCTGAGTGTAGGATGTTTACA-3 ") an U6 (5'-ATATGGAACGCTTCACGAATT-3) VerfÜgung Zell transfection. VerfÜgung Mir-30b mimics, Jacquerie Mir-Kontroll, chemesch geännert Mir-30b duplex (agomir), geännert chemesch Jacquerie Mir-Kontroll, PAI-1 siRNA, oder siRNA negativ Kontroll goufen aus GenePharma (Shanghai GenePharma Co kaaft . Ltd., China). PAI-1 (Serpine1) Mënscherechter cDNA ORF Klon gouf aus Origene (Origene Technologies, Peking, China) kaaft. Transfections sech no de Protokoll d'Produktioun benotzt Lipofectamine 2000 (Invitrogen) gesuergt. VerfÜgung Zell apoptosis assay vum FCM VerfÜgung SGC-7901 oder HGC-27 Zellen sech op enger gëeegenter zu 12-gutt zappen rakommen Dicht an der 24 h zu 30% confluency ugebaut. Dunn huet Zellen mat Mir-30b mimics transfected oder Mir-Kontroll, an déi mëttelfristeg war fir 48 h mat serum-gratis DMEM ersat. Fir Co-transfection Experimenter mat Mir-30b an PAI-1 ausdrécken Vecteure, SGC-7901 Zellen sech mat Mir-Kontroll oder Mir-30b mimics transfected, an dann mat PAI-1 Mënscherechter cDNA ORF Klon Vecteure (ugi wéi PAI-1) oder eidel Vecteure 24 h drop. 24 h der Vecteure transfection, war déi mëttel- mat serum-gratis DMEM fir aner 24 h ersat. Endlech, goufen d'Zellen ze apoptosis Analyse applizéiert. Fir FCM Analyse, eng Annexin V-FITC Apoptosis Detektioun Kit ech (BD Pharmingen) benotzt gouf, dann duerch onkontrolléiert cytometry (BD FACSCantoTM II) analyséiert. VerfÜgung Caspase-Glo 3/7 Assay VerfÜgung der Aktivitéit vun caspase-3/7 gouf mat der caspase-Glo 3/7 Assay (Promega) fonnt. Artikel 100 μl vun Caspase-Glo 3/7 reagent zu wäiss-walled 96-gutt zappen, verbannen Inhalter vun Wells Mix, an incubate dann de Wells bei Raumtemperatur fir 30 min. D'luminescence war mat der GloMax-96 Microplate Luminometer (Promega) fonnt. VerfÜgung Tumorigenicity assays an Sauna Mais VerfÜgung De Mais an dësem Experimenter benotzt goufen ënner bestëmmten pathogen-gratis Konditiounen haten. Liewensfäeg Mir-30b mimics- an Mir-Kontroll-transfected SGC-7901 Zellen (1 × 10 TUNEL staining VerfÜgung D'erhéijen sech op 26 Deeg gesammelt, an zu 10% formaldehyde Léisung fix, duerno zu paraffin Ënnerbewosstsinn. Rubriken (5 μm Déck), datt mat hematoxylin an eosin deparaffinized an rehydrated huet geschriwwen hätt. Apoptotic entholl Zellen sech Kierchefënster duerch an situ Uschloss deoxynucleotidyltransferase-mediated dUTP Nick Enn Etikette (TUNEL) Method mat enger vun situ Zell Doud erkennen Kit (Staang; Roche kinnt Co.). Negativ Kontroll war zu der selwechter staining fir TUNEL ouni TdT ënnerworf. Biller waren andems microscope gesammelt mat × 200 Vergréisserung. VerfÜgung Bau vun plasmids VerfÜgung De Bau vun verschiddenen luciferase Rapport vectors fir Mir-30b Zil war wéi virdrun beschriwwen standing [16], [26] , an der bauen Mann- Som Regioun mat sech als eng Kontroll entsteet. De Message vun oligonucleotides benotzt ginn an Table 2. VerfÜgung Luciferase assay an GFP Repressioun Experimenter dës VerfÜgung HEK-293 Zellen am 96-gutt Plack op 5.000 Zellen pro gutt Dag virun transfection rakommen goufen. D'Zellen sech mat all Liichtkäfer luciferase reporter Vecteure transfected, Kontroll Vecteure Renilla luciferase, Praxis-TkLanguage (Promega), a Mir-30b mimics oder Mir-Kontroll (GenePharma). D'luciferase assay war andems der duebel luciferase reporter assay System (Promega) gesuergt. VerfÜgung Fir GFP Repressioun Experimenter, HEK-293 Zellen op 1 × 10 Western blot VerfÜgung Traité Zellen sech mat Äis-kal PBS zou an dann vun enger Zell lysis gefiermt lysed (Pierce). No centrifugation bei 12.000 Ziichter fir 15 min bei 4 ° C, gouf d'FAQ Konzentratioun vun BCA FAQ assay Kit (Pierce) gemooss. Zell FAQ lysates sech zu 12% SDS denatured polyacrylamide gelies getrennt an duerno op engem polyvinylidene difluoride Membran transferéiert. D'Schläimhait sech mat 5% nonfat dréchen Mëllech an Tris-gefiermt Salins, pH 7.4 blockéiert, wouvun 0,05% Tween 20, an huet mat der Primärschoul antibodies fir PAI-1 (1:1000, Abcam) an β-actin incubated (1:1000 Santa Cruz,) bei 4 ° C Iwwernuechtung bzw.. Schläimhait sech mat horseradish peroxidase-conjugated Secondaire antibodies (1:5000, Santa Cruz) laut den Hiersteller d'Instruktioune gewäsch a incubated. D'FAQ vun Interessi visualized war mat ECL Western blotting Realitéiten (Pierce) an Chemidoc XRS gelies Dokumentatioun System (BioRad). VerfÜgung statistique Analyse VerfÜgung D'Resultater sinn ausdrécke well heeschen ± normale deviation (Fils) vun op d'mannst dräi onofhängeg Experimenter. Student d't Test war d'Differenzen tëscht Gruppen ze analyséieren applizéiert. Der Relatioun tëscht der Mir-30b Niveau an PAI-1expression war mat Pearson d'Korrelatioun analyséiert. Statistesch Analyse huet mat SPSS Software (Versioun 17.) gesuergt. Statistique Ënnerscheeder waren däitlech deklaréiert op P VerfÜgung &Si besteet; 0,05 Niveau. 0,05 (*), P VerfÜgung &Si besteet;; statistesch relevant Daten ginn duerch Stärecher ( P VerfÜgung &Si besteet uginn. 0.01 (**) VerfÜgung ofgeholl mir-30b Ausdrock vun mënschlecher gastric Kriibs Zell Linnen an GC Otemschwieregkeeten Echantillon VerfÜgung d'Roll vum mir-30b an der pathogenesis vun gastric Kriibs fir erauszefannen, analyséiert mir de Bord-30b Niveau vun verschiddenen Zellen gastric Kriibs, dorënner HGC-27, AGS, BGC-823 an SGC-7901. als zu Dorënner 1A, den Ausdrock vum Mir-30b gewise gouf vill zu véier Zell Zeilen iwwer reegelen-Verglach mat engem Pool vu fënnef Net-entholl gastric Stoffer ( P VerfÜgung &Si besteet;.. 0.01) VerfÜgung Den Ausdrock vun Mir-30b weider an 21 vläit GC iwwerpréift war an bascht Net-entholl gastric Stoffer duerch TaqMan grouss real-Zäit Hinnen alleguer (qRT-Hinnen alleguer) wéi dës an d 'Figur 1B, gouf de Verloscht vun Mir-30b an 18 vun 21 Patiente (85.7%) am Verglach mat den entspriechende Net-entholl Stoffer fonnt. Weideren huet d'luucht Diagramm dass Mir-30b an gastric Kriibs Echantillon bedeitend erof-gereegelt gouf versus normal gastric mucosa, mat enger Moyenne 6.28-fantastesch erofgoen ( P VerfÜgung = 0.002) (Dorënner 1c). Fir den Ausdrock Donnéeën Qualifikatiounen vun qRT-Hinnen alleguer validéieren, 3 vun all 21 Puer Echantillon ausgewielt goufen konnt den Niveau vum Mir-30b benotzt Northern eben ze bestëmmen. Mir hunn och de konsequent ofgeholl Ausdrock vu Mir-30b an gastric Kriibs Verglach mat Net-entholl gastric Stoffer (Dorënner 1D). Dës Resultater hindeit, datt de Bord-30b Ausdrock gëtt dacks verwandelt-reglementéiert gastric Kriibs a vläicht an der Entwécklung vun gastric Kriibs Équipe. VerfÜgung Overexpression vum Mir-30b erhéigt de apoptosis vun gastric Kriibs Zellen VerfÜgung ee vun de Pionéier vum Kriibs ass seng Fähegkeet apoptosis [27] zu flüchten, sou iwwerpréift mir den Effet vum mir-30b op apoptosis gastric Kriibs Zellen. SGC-7901 oder HGC-27 Zellen sech mat Mir-30b mimics transfected oder Jacquerie Mir-Kontroll, an d'Validitéit vun Mir-30b ectopic Ausdrock war vun qRT-Hinnen alleguer (Dorënner 2A) confirméiert. Dann den Effet vum Mir-30b op apoptosis vun SGC-7901 oder HGC-27 Zellen war vun Flux cytometry (FCM) Analyse an caspase-3/7 Aktivitéit assays bewäert. Als zu Dorënner 2B an 2C gewisen, hunn mir den Undeel vun apoptotic Zellen war zu SGC-7901 oder HGC-27 Zellen mat Mir-30b mimics transfected vill fräi Verglach mat Mir-Kontroll-transfected Zellen (16.08% versus Mir-30b tumorigenicity Hien an ënnerstëtzt Zell apoptosis zu VIVO VerfÜgung weider Fir erauszefannen, ob Mir-30b ass zu tumorigenesis vun gastric Kriibs wollten, war Sauna Maus xenograft Modell benotzt. Well mir dat Mir-30b fonnt eng méi wichteg Roll gespillt an Spur SGC-7901 Zellen apoptosis wéi HGC-27 Zellen kënschtlech, beschen mir d'Roll vum Mir-30b an tumorigenesis vun gastric Kriibs benotzt SGC-7901 Zellen. Mir-control- an Mir-30b-tranfected SGC-7901 Zellen sech subcutaneously an entweder posterior Säit vun der selwechter Sauna Mais heijen. De Mais sech fir 4 Wochen fir Observatioun vun xenograft Wuesstem gefollegt. Et war déi Aféierung vum Mir-30b an SGC-7901 Zellen Nerve engem däitleche Minus an der Gréisst vun entholl Volumen (Dorënner 3A an 3B) fonnt, an aus Mir-30b ofgeleet erhéijen behandelt SGC-7901 Zellen lues mat der Kontroll Verglach gewuess Grupp während der ganzer Wuesstem Period entholl (Dorënner 3C, lénks Rot). Wann erhéijen gesammelt goufen, ofgeleet der Moyenne Volume vun erhéijen aus der Grupp Mir-30b mimics war nëmmen 27,87% vun deem vun der Raumstatioun-Kontroll Grupp (Dorënner 3C, riets erschéngt, P VerfÜgung &Si besteet; 0.01). D'erhéijen op 26 Deeg aus zwou Säiten vun der posterior Säit vun der selwechter Maus, apoptosis zu situ recoltéiert huet sech duerch TUNEL gemooss. Als zu Dorënner 3D, Sektiounen aus Mir-30b mimics entholl dës xenografts vill méi TUNEL-positiv Zellen Schatzkummer behandelt. Dës Resultater ugeholl staark dass Aféierung vum Mir-30b konnt duerch Spur apoptosis vun Kriibs Zellen gastric Kriibs Wuesstem inhibit. VerfÜgung PAI-1 ass e Kandidat Zil- Gentherapie vum Mir-30b VerfÜgung Fir weider der Bewäert Funktioun vum mir-30b, ass et wichteg, dat Provider mRNAs vum mir-30b regulariséiert ginn ze bestëmmen. An eiser leschter Etude, iwwerpréift mir de mRNA Ausdrock Profil an fënnef Puer Primärschoul entholl Stoffer vun gastric Kriibs Patienten a reagéiert Net-entholl Stoffer microarray benotzt. Guer, fonnt mir 303 upregulated Genen (fantastesch änneren > 2, P VerfÜgung &Si besteet; 0,05) an gastric Kriibs Stoffer Verglach mat Net-entholl Stoffer (Donnéeën net gewisen). der downregulated Ausdrock vu Mir-30b an gastric Kriibs que, do hu mer op der Lëscht vun Genen Ausstralung fräi a ausgewielt d'Top 30 fräi Genen vun gastric Kriibs, dann alles ob déi Genen huet potentiell Ziler vum Mir-30b andems der Cepheid sind weisen , TargetScan. Spannen, fonnt mir dass PAI-1 Gentherapie, déi zu microarray upregulated war (3.83 fantastesch, P VerfÜgung = 0.04) kéint en eventuellen Zil- Gentherapie vum Mir-30b (Dorënner 4A) ginn. Fir direkt Adress ob Mir-30b an der 3'-UTR vun der Zil- mRNAs Photo'en, gebaut mir de luciferase Rapport vectors datt d'putative Mir-30b bindend Siten bannent 3'-UTR enthalen. Als zu Dorënner 4B gewisen, observéiert mir eng schéi Reduktioun vun luciferase Aktivitéit ( P VerfÜgung &Si besteet; 0.01) no contransfection vun luciferase Rapport vectors an Mir-30b mimics. Am Géigesaz, war keng Ännerung vun luciferase vun Zellen mat der Mann- 3'-UTR gesond transfected observéiert. Dëst Resultat war duerno vun GFP Repressioun Experimenter bestätegt. Als zu Dorënner 4C an 4D gewisen, war GFP fluorescence bedeitend an Zellen mat GFP Rapport vectors mat verbindlechen Siten an Mir-30b mimics transfected reduzéiert, wobäi et keen war mat Mann- Vecteure an Mir-30b mimics transfected Ännerung vun GFP fluorescence an Zellen. Ausserdeem, overexpression vum Mir-30b an AGS an HGC-27 Zellen schéinen am Ugrëff-Regulatioun vun de FAQ Niveau vun PAI-1 (Dorënner 4E). Geholl zesummen, proposéiere virun Donnéeën datt PAI-1 e Potential Zil vum Mir-30b ass, a Mir-30b kéint verwandelt-regléieren der Zil- FAQ. VerfÜgung ëmgedréit, et gesäit Korrelatioun tëscht Mir-30b an PAI-1 Ausdrock vun gastric Kriibs Stoffer a Kriibs Zell Linnen VerfÜgung sou dass Mir-30b ass zu gastric Kriibs verwandelt-reegelen, an et gemellt gouf, datt PAI-1 FAQ zu gastric Kriibs Stoffer ass ganz héich ass wéi an de net-entholl Stoffer [ ,,,0],28], standing mir d'Korrelatioun Analyse tëscht mir-30b an PAI-1 Ausdrock vun gastric Kriibs Zell Linnen an gastric Kriibs Stoffer. Als zu Dorënner 5A erop gewisen, war PAI-1 FAQ Niveau vun AGS Zell ënnert de fënnef gastric Zell Linnen déi niddregsten. Am Géigesaz, gouf Mir-30b Niveau der héchster zu AGS, am Verglach mat anere Zell Linnen (Dorënner 5A ënnen). Duerno, iwwerpréift mir PAI-1 an Mir-30b Ausdrock vun 21 baut vun gastric Kriibs an bascht Net-entholl Stoffer. Mir hunn erausfonnt, datt 81% (17/21) vun gastric Cancers ugewisen héich PAI-1 mRNA Verglach mat normal Stoffer. Am Géigesaz, gouf Mir-30b Toast verwandelt-reglementéiert 18 vun 21 erhéijen. Benotzt Pearson d'Korrelatioun Analyse, observéiert mer e wesentleche ëmgedréit, et gesäit Korrelatioun tëscht Mir-30b an PAI-1 mRNA (Dorënner 5B, R VerfÜgung = -0,6475, P VerfÜgung = 0.0123). Virun Resultater hindeit, datt Mir-30b Ausdrock inversely mat PAI-1 Ausdrock vun gastric Kriibs soll ass, an PAI-1 Ausdrock vun gastric Kriibs gestäerkt hätt e Resultat vun reduzéiert Mir-30b Ausdrock gin. VerfÜgung PAI-1 ass potenziell mir-30b-entschlof apoptosis VerfÜgung Équipe vun fir weider z'ënnersichen ob PAI-1 zu mir-30b-gefördert apoptosis Équipe ass, mir éischt wann d'silencing vun PAI-1 Ausdrock getest vläicht de ähnlechen apoptosis-Fördere Effet wéi Mir-30b overexpression. SGC-7901 Zellen mat PAI-1 siRNA oder negativ Kontroll RNS (NC) transfected sech fir 48 h, wéi zu Dorënner 6A, déi mRNA Niveau vun PAI-1 gewisen kann vill vun senger siRNA reduzéiert ginn. Duerno, ugewisen PAI-1 siRNA iwwersinn, Erhéijunge vun de apoptotic Taux vun SGC-7901 Zellen (Dorënner 6B, 6C), am Verglach mat Mir-Kontroll. Gëlt, war PAI-1 siRNA konnt den Effet vum Mir-30b overexpression op apoptosis Regulatioun vun Kriibs Zell (Dorënner 6B, 6C) zu phenocopy. Ee Vertrieder Beispill vum Punkt Komplott war zu kengem 6D gewisen. Next, iwwerpréift mir och ob PAI-1 vum Mir-30b den Effet vun der Promotioun apoptosis abrogate konnt. SGC-7901 Zellen sech fir 24 h mat Mir-Kontroll oder Mir-30b mimics transfected, an duerch transfection mat PAI-1 Mënscherechter cDNA ORF Klon Vecteure (ugi wéi PAI-1) oder eidel Vecteure gefollegt. Als zu Dorënner 6E-G gewisen, schéinen de overexpressing vun PAI-1 zu iwwersinn Ennerdréckung op d'Wierkung vun Mir-30b-entschlof apoptosis. Geholl zesummen, eis Resultater hindeit, datt PAI-1 potenziell zu Mir-30b-gefördert apoptosis Équipe ass. VerfÜgung Obwuel Dereguléierung vum miRNAs huet an gastric Kriibs Stoffer an Zell Linnen observéiert ginn, déi genau molekulare Mechanismus duerch deen miRNAs de Prozess vun tumorigenesis well si ass nach net vollstänneg opgekläert. Fir Datum, huet eng Serie vun miRNAs gemellt gouf als oncogene zu der Entwécklung vun gastric Kriibs ze fonktionnéieren [29], [30], awer handele miRNAs als entholl suppressor Genen muss weider ënnersicht ginn. VerfÜgung Hei, mir Mir-30b zougedréckt war verwandelt-reglementéiert gastric Kriibs Zellen an entholl Stoffer. Eis Donnéen uginn och dass overxepression vum Mir-30b konnt de apoptosis vun gastric Kriibs Zellen kënschtlech an VIVO verbesseren, a Mir-30b gebass entholl Wuesstem vun gastric Kriibs zu VIVO zu oofgesinn. Mir zeechne weider PAI-1 als potentiell Zil vum Mir-30b, an den Ausdrock vum Mir-30b war inversely mat PAI-1 Ausdrock vun gastric Kriibs soll. Zousätzlech, PAI-1 as potenziell zu Mir-30b-entschlof apoptosis Équipe. Virun Conclusiounen proposéiere Mir-30b als Roman entholl suppressor Akt kann d'apoptosis vun Kriibs Zell am gastric Kriibs vun Regulatioun. VerfÜgung Mir-30b eent vun de Bord-30 Famill ass déi mat der Entwécklung vun villen Zorte assoziéiert ass vun Cancers. Allerdéngs ass d'Roll vum Mir-30b an tumorigenesis kontrovers. Mir-30b war gemellt ginn duerch-reglementéiert Aarbecht Kriibs [31], invasiv BBC entholl [32], anaplastic Schild Kriibs [33], esophageal Kriibs [34], an haett Kriibs [35] hierkommen verstäerkte Ausdrock vun miR- 30b war zu medulloblastoma [36] an malignant Vollek [37] identifizéiert. Ausserdeem gouf Mir-30b als eent vun onofhängege dacks fir Terrain-gratis survivals vun hepatocellular carcinoma identifizéiert [38]. Zanter Mir-30b huet entweder erop-reegelen oder op verschidden Cancers reduzéiert, konnt mir eng Conclusioun zéien, datt Mir-30b verschiddene Rollen als oncogene oder engem entholl suppressor Gentherapie zu verschiddenen Cancers spille kann. VerfÜgung An der aktueller Etude mir fonnt, datt mir-30b Ausdrock vill an gastric Kriibs Stoffer an Zell Linnen Verglach mat normal gastric Stoffer ofgeholl huet. Konsequent mat eis fannen, gouf Mir-30b fonnt aus 184 gastric Cancers an 169 Net-entholl vun microRNA vill verwandelt-ausgedréckt gin mucosae [39], an Qiao et al fonnt dass Mir-30b war verwandelt-ausgedréckt an Otemschwieregkeeten gastric Kriibs an gastric Kriibs Zell Linnen, AGS an BGC-823 Zellen [40]. Dofir, de Verloscht vum Mir-30b Ausdrock mat der pathogenesis an Werdegang vun gastric Kriibs verbonne ginn. VerfÜgung Apoptosis ass en Uerder Zell Doud Prozess, dass an Fro gestallt an agebousst Konditiounen kann existeiert. A Stéierungen vun dëser delikat Balance kann un der Entwécklung vun Kriibs [27] Féierung. Elo wéineg ass gewosst iwwer den Effet vum Mir-30b op apoptosis zu Kriibs. Déi ëmstridde Ausdrock vu Mir-30b proposéiert d'Komplexitéit vun der Funktioun vum Mir-30b. Kuerzem, Li et al [41] fonnt dass Mir-30b bedeitend an Äntwert op d'oxidative Stress Stimulatioun reduzéiert huet, a Mir-30b konnt Kënschtlech Kärspaltung a konsequent apoptosis inhibit. Am Géigendeel, gouf et dës dass Mir-30 de Self-Erneierung inhibit kann an apoptosis vun Broscht entholl-domat Zellen (BT-ICS) vun Ubc9 an ITGB3 silencing [42] induce. Virun dofir weg, datt Mir-30 ass e multifunction Gentherapie déi inhibit kann oder der apoptosis induce. Am aktuelle Rapport, fonnt mir ectopic Ausdrock vu Mir-30b konnt de apoptosis vun gastric Kriibs Zellen kënschtlech, an overexpression vum Mir-30b induce konnt duerch Pinguin de apoptosis vun gastric Kriibs Zellen zu VIVO vill entholl Wuesstem an Sauna Maus xenograft Modell inhibit. Virun Conclusiounen hindeit datt Mir-30b d'Potential Roll an gastric Kriibs Entwécklung spille kann duerch apoptosis vun Kriibs Spur. VerfÜgung de molekulare Mechanismus Mir-30b Basisdaten Funktioun ze wëssen, ass et wichteg, seng Zil- Gentherapie z'identifizéieren. Kuerzem, hunn e puer Roman Ziler vum Mir-30b gouf dorënner p53 bestätegt [43], Delta-wëll 4 [44], an Snail1 [45]. An eiser Etude, PAI-1was als Zil Gentherapie vum Mir-30b an gastric Kriibs identifizéiert. PAI-1 ass den Haaptuert inhibitor vun tPA an uPA, an PAI-1 kann Bleck der Aktivatioun vun plasminogen. Et ass gutt dokumentéiert, datt de Begrëff vun PAI-1 héich zu gastric Kriibs ass wéi zu Kontroll Stoffer, an PAI-1 kann als eng nei prognostic Faktor gastric Kriibs, en kuerz Iwwerliewe [28], [46], déngen [47 ]. Spannen, weist rezent Beweiser der protumorigenic Aktivitéit vun PAI-1 duerch eng antiapoptotic Funktioun kënnen [22]. Eis Etude gewisen, datt Mir-30b Ausdrock inversely mat PAI-1 Ausdrock vun gastric Kriibs Zell Linnen an entholl Stoffer, PAI-1 overexpression den Effet Krise konnten apoptosis vum Mir-30b Promotioun, an ectopic Ausdrock vu Mir-30b soll war déi ähnlech Promotion-apoptosis Effekt Verglach mat PAI-1 Ausdrock silencing. Et hindeit, datt de Bord-30b-PAI-1 Achs kënnen an d'Entwécklung vun gastric Kriibs Équipe ginn. Ee der afgerappt Passerelle ass néideg weider ënnersicht ginn. VerfÜgung D'Entwécklung vun gastric Kriibs ass déi Multi-factorial an multistage Prozess charakteriséiert, an H. pylori VerfÜgung gouf zu de féierende Ursaach vun gastric Kriibs gewisen. Rezent Rapporten vun eiser Fuerschung an aner Studien hunn de reglementaresche Roll vun miRNAs zu H ervirgehuewen. pylori VerfÜgung Wonn an verbonne Krankheeten. miRNA ass eng potentiell Bréck aus H. pylori VerfÜgung Wonn ze chronescher gastritis an gastric Kriibs [16], [48], [49]. Wat fir Mir-30b, kann et Multi-Funktioun vun H hunn. pylori VerfÜgung Wonn an H. pylori VerfÜgung -associated Krankheeten. Eis virdrun Rapport fonnt Mir-30b konnt de autophagy Prozess ze regléieren vun ATG12 an BECN1 während H gezielt. pylori VerfÜgung Wonn erëm [19].
Aféierung VerfÜgung
spontan a Methode VerfÜgung
Resultater VerfÜgung
8,25% ze SGC-7901 Zellen, an 17,83% versus VerfÜgung 10,87% ze HGC-27 Zellen). Ausserdeem, däitlech méi caspase-3/7 Aktivitéit war an SGC-7901 oder HGC-27 Zellen transfected mat Mir-30b Verglach mat Mir-Kontroll transfectants ( P VerfÜgung &Si besteet; 0,01, Dorënner 2D) fonnt. Virun Resultater opzeweisen, datt overexpression vum Mir-30b der apoptosis vun gastric Kriibs kënschtlech Promotioun kann. VerfÜgung Diskussioun VerfÜgung
Milchsäure Bakterien a Darmbakterien droen zu de gesondheetleche Virdeeler vum Roggen bäi,
Wëssenschaftler entwéckelen 3D gedréckte Pille déi Bakterien, déi am Darm fonnt goufen, probéieren
Ëmgank mat der Celiac Krankheet
Chroneschen Hust kéint mat neie Medikamenter erliichtert ginn
Eng Multi-Omics Approche fir d'Entwécklung vun Drogen géint COVID-19
Ass de Coronavirus duerch Feeën verbreet?
Penis Mikrobiom ass Reservoir fir bakteriell Vaginose-assoziéiert Bakterien
Ënnert de sexuell iwwerdriwwenen Infektiounen (STIs), bakteriell Vaginose beaflosst méi wéi 20 Prozent vun de Fraen weltwäit. DKonditioun kënnt aus der Verbreedung vu bestëmmte Bakterien an der Vagina
Bakteriophagen kéinte E. coli behandelen ouni den Darm ze beschiedegen,
nei Studie seet Fuerscher an den USA hunn eng nei Therapie entwéckelt déi eng eenzegaarteg Bakteriophage benotzt fir E. coli Infektiounen ze behandelen. DBakteriophage gouf fonnt ähnlech a senger Effe
Mikroben op der Zong kënne benotzt gi fir Bauchspeicheldrüs Kriibs ze diagnostizéieren
Fuerscher an der Zhenjiang University School of Medicine, China hu festgestallt datt Stéierungen an der mikrobieller Zesummesetzung vun der Zongbeschichtung als Biomarker fir fréi Stuf Bauchspeicheldr