Stomach Health > Mo. Gesondheet >  > Stomach Knowledges > Fuerschunge

Interleukin-23A mat entholl Wuesstem zu Helicobacter-pylori-Zesummenhang Mënsch gastric cancer

Interleukin-23A verbonnen ass mat entholl Wuesstem zu Helicobacter-pylori VerfÜgung -related Mënsch gastric Kriibs VerfÜgung méiglech VerfÜgung Background VerfÜgung Interleukin verbonnen ass ( IL) -23 ass ee vun de gléckleche demagogesch cytokines identifizéiert, an inflammation bekannt ass och zu der Entwécklung vun gastric Kriibs (GC) Zesummenhang ze sinn. D'Roll vun IL-23 zu gastric Kriibs, ass awer, haaptsächlech bekannt. Am Moment studéieren, ze propagéieren mir den Ausdrock a méiglech Roll vun IL-23A mënschlechen GC. VerfÜgung Method VerfÜgung Den Ausdrock vun IL-23A an IL-17a mënschlechen GC Stoffer war vun immunohistochemistry sech, an der Relatioun tëscht IL-23A Ausdrock a Krankheete Charakteristiken vun GC propagéieren war. D'serum Konzentratioun vun IL-23A an IL-17a war och vun Elisa getest. D'Quell a Roll vun IL-23A am GC studéiert kënschtlech VerfÜgung vun Flowcytometry, MTS (Owen senger reagent) assay a Western blot. VerfÜgung Resultater VerfÜgung IL-23A, IL-23 receptor (IL-23R) an IL-17a huet all Mënsch GC Stoffer overexpressed, an de Niveau vun IL-23A war gutt soll mat IL-17a am GC Stoffer wéi och zu Patient d'serum. Macrophages an GC Zellen waren d'Haaptgrënn Quell vun IL-23A secretion op Stimulatioun vum H. pylori VerfÜgung lysate. Doriwwer eraus, hunn mir dass IL-23A Prolifératioun vu GC Zell Linnen via IL-17a /IL-17 receptor neien (IL-17RA) /nuklear Faktor-κB (NF-κB) gefördert sécher. VerfÜgung Konklusiounen VerfÜgung Déi héich Ausdrock vun IL-23A ass mam GC assoziéiert. IL-23A kann duerch Pinguin de secretion vun IL-17a zu entholl microenvironment GC Zellen Wuesstem gefördert. Eis Resultater hindeit, datt d'serum Konzentratioun vun IL-23A eng gutt uweist vun aarme Medeziner hätt am GC Patienten ass. VerfÜgung Schlësselwieder VerfÜgung Interleukin-23A Interleukin-17a Nuclear Faktor-κB Gastric Kriibs Background VerfÜgung IL-23A ass engem subunit vun der heterodimeric cytokine, IL-23 vum Accord mat der aner subunit, p40 (IL-12). Et ass bekannt, datt IL-23A vun macrophages an dendritic Zellen ausgedréckt an secreted ass. IL-23 kann Signal Better gëtt reduzéiert a activator vun Transkriptiouns 4 (STAT4) duerch IL-23R op der Membran vun e puer Zorte vun immun Zellen verdeelt, dorënner T Zellen, natierlech Killer (NK) Zellen, monocytes an dendritic Zellen aktivéieren. An IL-23 bedeelegt immun Äntwerte vun auslänneschen Substanzen Erkenntnesser a Géigner de Kierper géint Wonn an Krankheet [1], [2]. VerfÜgung IL-23A an der demagogesch Äntwert duerch Spur Matrixentgasung metalloprotease 9 Équipe ass, waarden angiogenesis a Reduzéierung CD8 + T Zellen einfach [3], [4]. Vun schaffen zesumme mat IL-6 an transforméiert Wuesstem Faktor-β1, IL-23 kann der dat vun CD4 + granzt T Zellen ze Th17 Zellen förderen, wou ee vun de gutt akzeptéiert T zielt Zell subsets ass [5] - [ ,,,0],7]. Th17 Zellen secrete proinflammatory cytokine IL-17a datt stimuléiert d'Produktioun vun aneren proinflammatory Molekülle wéi IL-1β Th17 Äntwert induce kann, IL-6, entholl necrosis Faktor-α (TNF-α) an chemokines geplatzt inflammation. Et ass confirméiert datt IL-17 war enk mat GC verbonne [8], [9]. A Nepgen-grouss association Etude huet opgedeckt, datt -197G > A polymorphism um Positioun -197 zu der IL-17 Promoteur Regioun vill GC Risiko vun der Bevëlkerung [10], [11], während fräi Meenungsäusserung vun IL-17 grouss war an Patienten mat GC fonnt. IL-17 ass och an de Werdegang vun GC Équipe vun angiogenesis an der entholl microenvironment Spur [12]. Desweideren, an en Deel entschlof bestänneg inflammation vun IL-17 kënnen ze gastric mucosal wirklech droen, esou de Risiko vun GC Erhéijung [9], [11], [13] VerfÜgung. Am Verglach zu deem vun IL-17a, d'Studien iwwer d'Roll vun IL-23A zu Mënsch GC sinn suivéiert gréisstendeels. Am Moment studéieren, mir dem Wëllen vun IL-23A am GC propagéieren, a seng Krankheete Bedeitung a méiglech Mechanismus sech Équipe. VerfÜgung Resultater VerfÜgung IL-23A, IL-23R an IL-17a sinn exzessiv mënschlechen GC
fir den Ausdrock vun IL-23A an den entspriechende Logbicher Molekülle an mënschlechen GC, 141 paraffin-Ënnerbewosstsinn Stoffer ermëttelen sech fir d'Expressioun an d'Verdeelung vun IL-23A, IL-23R an IL-17a immunohistochemistry benotzt studéiert. Éischt, observéiert mir dass IL-23A, IL-23R an IL-17a all wiesentlech zu Mënsch GC Verglach zu normal Kontrollen overexpressed goufen. Obwuel et an der normal gastric Glands a liicht positiv zu infiltrating demagogesch Zellen, IL-23A war zu infiltrating demagogesch Zellen a Kriibs Zellen zu Kriibs Stoffer (Dorënner 1A) op engem héijen Niveau fonnt undetectable war. IL-23R war zu infiltrating demagogesch Zellen zu souwuel Kriibs an normal Stoffer, mä den Ausdrock Niveau an Verhältnis sech vill méi héich zu Kriibs Stoffer (Dorënner 1B) exklusiv ausgedréckt. IL-17a war haaptsächlech am communal demagogesch Zellen am GC (Dorënner 1c) läit. Mir propagéieren nächst der Relatioun tëscht Ausdrock vun IL-23A a verschidde Krankheete Charakteristiken, an fonnt dass den Niveau vun IL-23A mat H. pylori VerfÜgung Wonn an entholl Belaaschtung (Table 1) assoziéiert gouf. Figur 1 Expression an Verdeelung vun IL-23A, IL-23R an IL-17a zu Mënsch GC an normal gastric Otemschwieregkeeten. (A) Expression an Verdeelung vun IL-23A war souwuel zu Mënsch GC vun immunohistochemistry analyséiert an normal gastric Otemschwieregkeeten. Duerchschnëtt integréiert optesch Dicht war vun Image-Pro Plus Versioun 5.0 évaluéiert fir all Rutsch vun analyséiert fënnef Felder vun Vue kritt. (B) Expression, Distributioun an der Moyenne integréiert optesch Dicht vun IL-23R. (C) Expression, Distributioun an der Moyenne integréiert optesch Dicht vun IL-17a. ** P VerfÜgung &Si besteet; 0,01. VerfÜgung Table 1 Séminairen Charakteristiken vun 141 GC Patienten VerfÜgung Patienten- DEMOGRAPHIQUES
IL-23 positive
IL-23 negativ
Pvaluea
zu Age, y (Gamme) VerfÜgung 59 (32-85) VerfÜgung ND VerfÜgung ND VerfÜgung Sex VerfÜgung 0,730 VerfÜgung Männlech VerfÜgung 89 zu 45 VerfÜgung 44 VerfÜgung Weiblech VerfÜgung 52 zu 28 zu 24 VerfÜgung Main Standuert VerfÜgung 0,613 VerfÜgung U VerfÜgung 74 zu 36 zu 38 VerfÜgung ML 67 VerfÜgung VerfÜgung 29 zu 38 VerfÜgung Gréisst, cm (Gamme) VerfÜgung 0.028b VerfÜgung > 5 zur VerfÜgung 97 zu 74 zu 23 VerfÜgung &Si besteet; 5 zur VerfÜgung 44 VerfÜgung 25 zu 19 VerfÜgung Déift vun Invasioun VerfÜgung 0,519 VerfÜgung T1 /T2 VerfÜgung 88 zu 24 zu 14 VerfÜgung T3 /T4 VerfÜgung 53 zu 29 VerfÜgung 24 VerfÜgung Lauren Klassifikatioun VerfÜgung 0,372 VerfÜgung Intestinal VerfÜgung 94 zu 45 zu 49 VerfÜgung Firwat VerfÜgung 47 zu 27 zu 20 VerfÜgung Lymph Node Metastasen VerfÜgung 0,401 VerfÜgung positiv VerfÜgung 69 zu 37 zu 32 VerfÜgung Negativ VerfÜgung 72 zu 33 zu 39 VerfÜgung H.pylori VerfÜgung Wonn VerfÜgung &Si besteet; 0.0001c VerfÜgung positiv VerfÜgung 84 zu 74 zu 10 VerfÜgung Negativ VerfÜgung 57 zu 28 zu 29 VerfÜgung Etapp VerfÜgung 0,215 VerfÜgung ech
32 zu 16 zu 16 VerfÜgung II VerfÜgung 45 zu 23 zu 22 VerfÜgung III VerfÜgung 43 zu 20 zu 23 VerfÜgung IV VerfÜgung 21 VerfÜgung 10 zu 11 VerfÜgung ND = net alles aχ2 Test
BP VerfÜgung &Si besteet.. 0,05 VerfÜgung CP VerfÜgung &Si besteet. 0,01. VerfÜgung IL-23A mat IL-17a secretion zu Mënsch GC zu rezenten Etuden gewisen hunn, datt secretion vun IL-23A war ee vun den Faktore zu normal Th17 Zell dat soll ass. Mir gefrot ob IL-23A och mat Th17 Zell am GC verbonne war. Tatsächlech coincided nik IL-23A Ausdrock mat fräi Meenungsäusserung vun IL-17a (Dorënner 2A). Fir de weideren Relatioun tëschent hinnen beschen, mir quantitated den Ausdrock vun zwou cytokines bannent IHC staining vun GC Patienten an Teamchef IL-23A Ausdrock vill mat IL-17a Ausdrock duerch eng linear Korrelatioun Test (r 2 = 0.7148 soll war, P VerfÜgung &Si besteet; 0.001) (Dorënner 2B). Figur 2 IL-23A ass mat IL-17a secretion zu Mënsch GC soll. (A) D'Korrelatioun tëscht IL-23A an IL-17a zu Kriibs Stoffer vun GC Patienten war vun Immunohistochemistry propagéieren. (B) D'Korrelatioun tëscht IL-23A an IL-17a bannent IHC staining vun GC Patienten déi linear Korrelatioun Test Rampen war. VerfÜgung Serum IL-23A Konzentratioun ass eng Luucht vun aarme hätt am GC Patienten VerfÜgung Béid IL-23A an IL-17a kann an d'Blutt secreted ginn, also, mir Hypothes, datt de Niveau vun IL-23A an IL-17a an der serum vun GC Kranken oder gesond Kontrollen kann duerch Elisa als biomarkers alles ginn. Mir fonnt éischt de Niveau vun béiden cytokines wéi 213 ± 75 PG /ml fir IL-23A an 286 ± 101 PG /ml fir IL-17a zu 50 gesond Persounen (Dorënner 3A a B). D'serum Niveau vun béiden cytokines sech als 517 ± 247 PG /ml fir IL-23A an 422 ± 284 PG /ml fir IL-17a (Dorënner 3A an B) bedeitend an GC Patiente méi. An der linear Korrelatioun vun serum Konzentratioun tëscht IL-23A an IL-17a war och am GC Patienten (r 2 = 0.5841, P VerfÜgung &Si besteet; 0.001) gesinn (Dorënner 3C). D'loung vun gesond Kontrollen war no der 95% Vertraue nolauschterer (CI) kritt, deen 285 PG /ml fir IL-23A war. Laut der loung, huet de GC Patienten agedeelt IL-23A héich an IL-23A niddereg subsets. Fir hir Medeziner hätt tëschent deenen zwee subsets vun GC Patienten, serum IL-23A Ausdrock war vergläichen iwwerpréift der Kaplan-Meier Method benotzt. Mir hu fonnt, datt IL-23A Niveau (> 285 PG /ml) huet däitlech mat méi allgemeng Iwwerliewe (OS) assoziéiert [P VerfÜgung = 0,027, iwwerschloen Verhältnis (SH) 2.246, 95% CI: 1.212-4.160] (Dorënner 3D). Figur 3 Serum IL-23A Konzentratioun wéi eng Luucht vun aarme hätt am GC Patienten. (A) Serum Konzentratioun vun IL-23A am GC Patienten a gesond Kontrollen. (B) Serum Konzentratioun vun IL-17a am GC Patienten a gesond Kontrollen. (C) D'Korrelatioun tëscht IL-23A an IL-17a zu serum vun GC Patienten war vun linear Korrelatioun Test Rampen. (D) De Kaplan-Meier Kéiren fir OS vun GC Patienten mat verschiddene Ausdrock vun IL-23A. VerfÜgung IL-23A kann duerch macrophages an GC Zellen secreted ginn VerfÜgung Immunohistochemical staining zougedréckt datt IL-23A Iwwerfloss an Multiple ausgedréckt huet Zell Zorten, dorënner T Zellen, macrophages an GC Zellen (dorënner 1A). Fir d'wouhier IL-23A iwwerpréifen, Rampen mir IL-23A Ausdrock an eng kënschtlech VerfÜgung Stimulatioun System benotzt H. pylori VerfÜgung lysate wéi d'cytokine-Pinguin Agent, deen op enger viregter observation baséiert datt H. pylori
huet ee sécherlech inducer fir d'secretion vun IL-23A. An T Zellen, war IL-23A secretion gehumpelt op Stimulatioun fräi mat H. pylori VerfÜgung lysate (Dorënner 4A). An macrophages, fräi d'Zuel vun IL-23A-positiv Zellen vun 1.15 ± 0,18% op 13,21 ± 6,21% (Dorënner 4B). Iwwerdeems zu GC Zell Linnen, IL-23A-positiv SGC-7901 Zellen vun 2,64 ± 1,12% op 13,11 ± 3,12% geklomm, an IL-23A positive MKN45 Zellen vun 1.16 ± 0,46% bis 17.55 ± 5,42% (Dorënner 4C) fräi. Am Allgemengen, zougedréckt macrophages an GC Zellen H. pylori VerfÜgung lysate-entschlof Stimulatioun vun IL-23A secretion (Dorënner 4D). Figur 4 IL-23A ass vun macrophages an GC Zellen secreted. (A) Den Ausdrock vun IL-23A a Zell Uewerfläch Bewaacher CD3 sech duerch Flowcytometry am T Zellen mat ënnerschiddlech Behandlung fonnt. (B) Den Ausdrock vun IL-23A a Zell Uewerfläch Bewaacher CD14 sech duerch Flowcytometry zu macrophages mat ënnerschiddlech Behandlung fonnt. (C) Den Ausdrock vun IL-23A war vun FCS zu SGC-7901 fonnt an MKN45 behandelt Zellen mat H. pylori VerfÜgung lysate. (D) D'Verhältnis vun IL-23A positive Zellen am T Zellen, macrophages an GC Zell Linnen. VerfÜgung IL-23A ënnerstëtzt Iwwerliewe vun GC Zellen duerch IL-17a /IL-17RA /nuklear Faktor (NF) -κB sécher
fir d'Wierkung vun IL-23A op entholl Wuesstem, e Co-Kultur assay kënschtlech VerfÜgung ermëttelen war geheescht. Éischt, fonnt mir dass IL-23A keen groussen Effet op Zell Prolifératioun hu wou den GC Linnen SGC-7901 an MKN45 mat mënschlechen recombinant IL-23A direkt behandelt goufen. Mir fonnt nächst datt et keen groussen Effet op entholl Zell SGC-7901 war oder MKN45 Wuesstem Co-cultured mat granzt T lymphocytes an der Präsenz vun IL-23A. un der Co-Kultur System war awer, war de groussen Zell-Wuesstem-Spur Effet gesinn wann entweder macrophages oder H. pylori VerfÜgung lysate notéiert. Wa béid macrophages an H. pylori VerfÜgung derbäi waren, den Effet ass synergistic (Dorënner 5A a B). Figur 5 IL-23A ënnerstëtzt Iwwerliewe vun GC Zell Linnen duerch IL-17a /IL-17RA /NF-κB sécher. (A) D'Zell Nuetsvolen vun SGC-7901 mat der Behandlung iwwerpréift huet. (B) D'Zell Nuetsvolen vun MKN45 mat der Behandlung iwwerpréift huet. (C) D'Konzentratioun vun IL-17a an der Zell Kultur mëttel- vun SGC-7901 an MKN45 sech duerch Elisa alles. ** P VerfÜgung &Si besteet; 0,01. (D) Den Ausdrock vun IL-17RA an IL-23R zu souwuel MKN45 an SGC-7901. (E) Den Ausdrock vun p-IkBa, IkBa an CyclinD1 zu souwuel MKN45 an SGC-7901. VerfÜgung Mir propagéieren de méiglech Mechanismus der Associatioun tëscht IL-17a an IL-23A opgebaut ass. Konzentratioun vun IL-17a an der Kultur mëttelfristeg war, bestëmmt an do war keen groussen Ënnerscheed, wann GC Zellen mat IL-23A eleng oder IL-23A plus T lymphocytes behandelt goufen. Allerdéngs, fräi secretion vun IL-17a wann entweder H. pylori VerfÜgung lysate oder macrophages derbäi war (Dorënner 5C). Aktivatioun vun NF-κB sécher war och iwwerpréift, an den Ausdrock vun zwou IL-17RA an IL-23R war an zwou SGC-7901 an MKN45 Zellen fonnt, relativ staark Ausdrock vun IL-17RA a bal keen Ausdrock vun IL-23R sech identifizéiert (Well 5D). Phosphorylated IκBα an cyclinD1, d'Produite vun NF-κB sécher, eropzesetzen souwuel zu SGC-7901 an MKN45 Zellen zesumme mat fräi Präsenz vun IL-17a (Dorënner 5E). IL-23A war aus béide macrophages an GC Zellen secreted a gefördert Kriibs Prolifératioun duerch IL-17a /IL-17RA /NF-κB sécher. VerfÜgung Diskussioun VerfÜgung GC de véiert stäerkste gemeinsam Kriibs ass an der zweeter Virwaat Ursaach vum Kriibs -related Doud weltwäit. Ënnert verschiddene histological Zorte, ass intestinal-Typ GC Toast mat H.Pylori VerfÜgung Wonn verbonnen, a seng natierlech ass vun Fouss gastritis, chronescher gastritis, gastric atrophy, intestinal metaplasia charakteriséiert, an endlech, Équipe vun GC [10].
déi genee Ursaache vun GC sinn onbekannt, awer eng Rei vu Facteuren, kann de Risiko vun der Krankheet, dorënner Geschlecht, der Rass, Genetik, Geographie, Blutt Typ, fortgeschratt Alter, Famill Geschicht Erhéijung, an H.pylori VerfÜgung Wonn vun de Moo. H. pylori VerfÜgung der Doropshin vun de Mo. infects a chronescher inflammation an ulcers bewierkt. Déi detailléiert molekulare Weeër responsabel fir d'Stimulatioun vun H. pylori VerfÜgung sinn nach net komplett bekannt [14] -. [16] puer Studien VerfÜgung hunn eng immun effector Molekülle vum H. pylori VerfÜgung gemellt, wéi CagA . CagA gefördert Ausdrock vun der proinflammatory chemokines IL-8, CXC-chemokine ligand 2 (och als macrophage demagogesch FAQ bekannt) an der antimicrobial peptide Mënsch β-defensin-2 duerch Aktivatioun vun NF-κB sécher [17]. Aner Studien hunn bekannt ginn dass CagA an epithelial Zellen vun Pinguin héije Niveau vun IL-8 Personal vu bestëmmte H. pylori VerfÜgung analyséieren, begleet vun Aféierungs- vun enger demagogesch Äntwert [16], translocated [18], [19]. Ras-ofhängeg kinases, extracellular Signal-reegelen kinase (Erk) 1 an ERK2, sinn och vun CagA-ausgeléist tyrosine phosphorylation ageschalt, fir Aktivatioun vun der Transkriptiouns Virwaat Faktoren NF-κB, activator FAQ-1, a schlussendlech, IL-8 Produktioun vum Provider Zellen [9]. VerfÜgung De Mechanismus Hausnummeren HP Wonn an Th17 Äntwert net komplett opgeléist gouf. Verschiddener vun der cytokines wéi IL-1β an IL-21 huet sech gemellt, verbonne ginn. Lee et al. Teamchef HP Wonn bestänneg HP-spezifesch Th17 Zellen induce kann, amplaz aner immun Zellen, datt och zu secrete IL-17a beschriwwe goufen. Ausserdeem, war och IL-1β erneieren nik, an neutralization vun IL-1β reduzéiert der HP-spezifesch IL-17a Äntwert, eng funktionell association tëscht IL-1β an der bestänneg Th17 Äntwert proposéiert [20]. Aner Grupp sot och, dass IL-21 reguléieren Th1 an Th17 effector Äntwerte während chronescher H. pylori Wonn an enger STAT1- an STAT3-ofhängeg Manéier, also eng grouss Roll gespillt kontroléieren H. pylori Wonn an gastritis [21]. VerfÜgung Mir confirméiert datt IL-23A aus GC Zellen an macrophages secreted war. Mir hu fonnt, datt serum Niveau vun IL-23A eng Luucht vun aarme hätt am GC Patienten war, a sengem Ausdrock war ze entholl Volumen a H.pylori VerfÜgung Wonn dinn. Eis Resultater annoncéiert och dass IL-23A op d'Prolifératioun vu Kriibs Zellen keen direkten Effekt huet. Allerdéngs huet et dem entholl microenvironment Afloss vun secretion vun IL-17a waarden, déi e Pionéier cytokine vun Th17 Zellen ass. Zu der Konklusioun, fonnt mir dass IL-23A eng potentiell index a Zil fir Diagnos a Behandlung vun GC gin konnt. VerfÜgung Konklusiounen VerfÜgung zu Conclusioun, huet dës Etude, datt d'héich Ausdrock vun IL-23A mam GC verbonnen ass. IL-23A kann de secretion vun IL-17a aktivéieren IL-17a /IL-17RA /NF-κB sécher an entholl microenvironment induce. Serum IL-23A Konzentratioun ass eng Luucht vun aarme hätt am GC Patienten an IL-23A gëtt e Potential index a Zil fir Diagnos a Behandlung vun GC gin. VerfÜgung spontan a Methoden VerfÜgung kennen VerfÜgung Déi heiteg Etude 141 abegraff Patienten mat GC deen Agrëff vun 2008 bis 2013 op der Kunshan Leit d'Spidol, Kunshan, Jiangsu an Kunshan Hospital laizistesch zu Nanjing Universitéit vu chinesescher Medezin mécht. Dokumentéiert Awëllegung fir Gentherapie Ausdrock Analyse vun all Stoffer war vun all Patienten virewech ze gesin kritt. Dës Etude gouf vun der lokaler IFLA- Comité vun Kunshan Leit d'Spidol abruecht. Histological subtype no Lauren d'Klassifikatioun [22] war vun zwee pathologists der Iwwerpréiwung vun entholl Rubriken alles. Follow-up Date goufen vun all GC Patienten sinn, déi bei 3 évaluéieren waren, 6,12 Méint an dann all 6 Méint fir 5 Joer oder bis Doud. VerfÜgung Immunohistochemistry VerfÜgung All Stoffer goufen ofgegruewen an fix zu 4% paraformaldehyde Nuecht op 4 ° C, dann Filteren an um 5 μm deck sectioned. Sectioned drënner duerch immunohistochemistry fir IL-23A, IL-23R an IL-17a (Santa Cruz Déi), gefollegt vun incubation mat Première antibody bei 37 ° C fir 30 min an Reaktioun mat botzt reagent fir 5-10 min waren Kierchefënster. D'drënner waren fir microscopic Ënnersichung mat neutral ersetzen Descher. Zellen mat brong intracellular granules (Zytoplasma oder Keimzell) sech als positiv Kierchefënster gin. VerfÜgung Elisa VerfÜgung Konzentratioun vun IL-23A an IL-17a zu serum vun GC Patienten a gesond Kandidate waren kommerziell sinn Sandwich Elisa Trikoten gemooss benotzt ( eBioscience). VerfÜgung Stimulatioun vun IL-23A kënschtlech VerfÜgung T Zellen an macrophage war vun Randerscheinung Blutt mononuclear Zellen isoléiert duerch Isolatioun Kit mat Zellen an monocyte ze T bzw. (Miltenyi Biotec). T Zellen an macrophages plus GC Zell Linnen (MKN45 an SGC-7901 goufen aus ATCC kaaft) goufen haten eng kënschtlech VerfÜgung a stimuléiert vun Helicobacter pylori VerfÜgung lysate (NCTC 11637, CagA + an VacA +) an duerch intracellular cytokine staining analyséiert . Fir intracellular cytokine staining, goufen T Zellen bei 37 ° C fir 5 Stonnen mat engem Leukocyte Activatiounscode Cocktail (BD Pharmingen) stimuléiert. Ausserdeem, goufen T Zellen, macrophages an GC Zell Linnen Kierchefënster mat Uewerfläch lues, fix, an permeabilized mat IntraPre Reagent (Beckman Coulter), an endlech mat intracellular lues Kierchefënster. Date goufen op FACSVantage SE Qualifikatiounen a mat CellQuest Software analyséiert. Fluorochrome-conjugated mAbs géint IL-23A sech aus BD Pharmingen kaaft (Cat. 562468). VerfÜgung Flowcytometry VerfÜgung Fir intracellular cytokine staining, goufen Zellen bei 37 ° C stimuléiert fir 5 Stonnen mat engem Leukocyte Activatiounscode Cocktail (BD Pharmingen) . Zellen sech dann mat Uewerfläch lues, fix, an permeabilized mat IntraPre Reagent (Beckman Coulter), an endlech Kierchefënster mat intracellular lues Kierchefënster. Date goufen op FACSVantage SE Qualifikatiounen a mat CellQuest Software analyséiert. Fluorochrome-conjugated monoclonal antibodies (mAbs) géint IL-23A, zerwéiert CD3 wéi Lakonien fir T Zellen an CD14 Bëschbesëtzer lues fir monocyte an macrophage sech aus BD Pharmingen kaaft. VerfÜgung MTS assay VerfÜgung Cultured Zellen op enger Dicht plated sech vun 6 × 10 3 Zellen /och zu engem 96-Meter zappen an mat DMEM plus 10% an et Kallef serum (Invitrogen) haten. Zell Nuetsvolen war vun MTS assay bewäert. CellTiter 96Aqueous One Solution Reagent (Promega) war gutt zu all derbäi no der Taktik vum Fabrikant, an d'Placke sech un der incubator zréck. No 4 Stonnen, gouf duerch Miessunge der absorbance bei 490 nm sech Zell Nuetsvolen engem Computer kontrolléiert zappen-Lieser mat. VerfÜgung Western blot VerfÜgung Proteinen sech aus Zellen ofgebaut an quantitated engem FAQ assay (Bio-Rad Laboratoiren, Hercules benotzt, CA). Protein Echantillon (30 μg) waren déi SDS-PAGE fractionated an zu engem nitrocellulose Membran transferéiert. Immunoblot war antibodies géint p-IκBα, IκBα, CyclinD1 an IL-17RA (Santa Cruz Déi) benotzt duerchgefouert. an ausgesat autoradiography Film (Kodak XAR Film) VerfÜgung statistique Analys zu de Resultater als mengen ± Fils vum ausgedréckt sinn op; d'Resultater goufen mat enger chemiluminescent erkennen System (Thermo Wëssenschaftlech Pierce ECL Realitéiten westlech blot erkennen System) visualized. mannst triplicate Experimenter. Vergläicher tëschent zwou Gruppe sech mat de Mann-Whitney U VerfÜgung Test gesuergt. De Verglach vun IL-23A Ausdrock tëschent verschidde Krankheete Beméien war mat der χ analyséiert 2 Test. Korrelatioun Analyse tëscht Ausdrock vun IL-23A an IL-17a am GC Stoffer war Spearman Net-parametric Relatioun Analyse standing benotzt. Survival Kéiren sech mat der Kaplan-Meier Produit-Limite Method geschat, a groussen Ennerscheeder tëschent d 'Iwwerliewe Kéiren sech mat der Läschlëscht-Platz Test alles. P VerfÜgung &Si besteet; 0,05 war statistesch relevant als VerfÜgung Croix VerfÜgung IL-23:. VerfÜgung Interleukin-23
GC: VerfÜgung Gastric Kriibs VerfÜgung
zu IL-23R: VerfÜgung IL-23 receptor
IL-17RA: VerfÜgung IL-17 receptor subunit A

NF-κB: VerfÜgung Nuclear Faktor-κB
STAT4: VerfÜgung Signal Better gëtt reduzéiert a activator vun Transkriptiouns 4
NK: VerfÜgung Natural Mäerderer
Deklaratioune VerfÜgung Merci VerfÜgung Dës Etude vun der sozial Development Technology Projetën vun Kunshan City, China (KS1255) ënnerstëtzt huet VerfÜgung Auteuren. original deposéiert Fichieren fir Biller VerfÜgung sinn ennen d'Linken op der original deposéiert Fichieren fir Biller "Auteuren. 12935_2014_104_MOESM1_ESM.gif Auteuren 'original Datei fir Figur 1 12935_2014_104_MOESM2_ESM.gif Auteuren' original Datei fir Figur 2 12935_2014_104_MOESM3_ESM.gif Auteuren 'original Datei fir Figur 3 12935_2014_104_MOESM4_ESM.gif Auteuren' original Datei fir Figur 4 12935_2014_104_MOESM5_ESM.gif original Datei 'Auteuren fir Figur 5 konkurréiert Interessen VerfÜgung d'Auteuren erklären, datt se keng Competitioun Interessen hunn. VerfÜgung Auteuren 'Contributiounen VerfÜgung CL an komplizéiere empfaang an der Experimenter entworf. CL, léisen, JZ, léisen, QW an HP standing d'Experimenter. CL an komplizéiere standing statistesch Analyse vun all Daten. CL geschriwwen de Pabeier. All Auteurs sinn am Accord mat den Inhalt vun der mëttelalterlech Handschrëft an dëser Soumissioun. All Auteuren liesen an guttgeheescht der Finale mëttelalterlech Handschrëft. VerfÜgung

Other Languages