Stomach Health > Maag Gezondheid >  > Q and A > maag vraag

RNA-sequencing biedt nieuwe inzichten in het microbioom

Onderzoekers van de Universiteit van Chicago hebben een revolutionaire strategie bedacht om de activiteit van het darmmicrobioom te bestuderen - met behulp van high-throughput-sequencing van tRNA.

Alpha Tauri 3D-graphics | Shutterstock

Door wetenschappers te helpen begrijpen hoe tRNA dynamisch verandert binnen microbiomen, de nieuwe sequentiestrategie zal veel beter inzicht geven in hoe microbiomen die in de natuur worden aangetroffen, reageren op omgevingsveranderingen zoals temperatuurvariatie of veranderingen in de beschikbaarheid van voedingsstoffen.

Het werk is het eerste van verschillende projecten van UChicago, gefinancierd door de Keck Foundation, die zich richten op microbiomen.

Microbiomen zijn tegenwoordig een gebied van intensief onderzoek, vanwege hun fundamentele en brede rol in gezondheid en ziekte.

Het team, onder leiding van professoren Tao Pan en A. Murat Eren, ontwikkelde nieuwe tools gericht op het bestuderen van transfer-RNA (tRNA) in de darmmicrobiomen van muizen. De huidige studie rapporteerde hoe tRNA-sequencing werd toegepast op monsters uit het darmmicrobioom van muizen die een vetrijk of vetarm dieet volgden.

Het gebruikte nieuw ontwikkelde software en rekenhulpmiddelen om een ​​bibliotheek van tRNA-moleculen uit de muizendarmmonsters te genereren.

De bacteriën waaruit deze tRNA-moleculen kwamen, werden vervolgens geïdentificeerd. Eindelijk, bepaalde post-transcriptionele modificaties die in het tRNA optraden, werden gedetecteerd en gemeten.

Dr. Pan was verantwoordelijk voor de ontwikkeling van de tRNA-sequencingtools, terwijl Eren werkte aan de rekenplatforms die bedoeld zijn om deze tools meer algemeen beschikbaar te maken.

tRNA-sequencing is een hulpmiddel van onschatbare waarde om op een kosteneffectieve manier grote hoeveelheden gegevens te verkrijgen, om een ​​diepere verkenning van de activiteit van microbiomen bij mensen of in hun omgeving mogelijk te maken.

Bacteriële tRNA-moleculen worden verfijnd voor hun specifieke functie door post-transcriptionele modificaties te introduceren, waarvan er gemiddeld acht per tRNA-molecuul zijn.

De tools die in dit project worden gebruikt, zijn in staat om twee wijzigingen in een high-throughput sequencing- en analyseworkflow te detecteren. Bovendien, het kan de mate waarin deze wijziging aanwezig is schalen op een schaal van 0 tot 100 op elk van de gewijzigde locaties.

Een van de modificaties heet m1A en bleek te zijn verhoogd in de darmmicrobiomen van muizen op een vetrijk dieet. Dit is een historische ontdekking, het is de allereerste keer dat dergelijke veranderingen kunnen worden gedetecteerd op het niveau van modificatie van tRNA, in welk microbioom dan ook.

De wetenschappers geven toe dat ze niet weten wat de aanwezigheid van de m1A-modificaties eigenlijk betekent voor het microbioom. In zekere zin, ze volgen het biologische proces achteruit om de betekenis van dergelijke wijzigingen te ontdekken.

Het is bekend dat m1A de synthese mogelijk maakt van sommige eiwitten die soms in hogere niveaus aanwezig zijn in de ingewanden van muizen die een vetrijk dieet krijgen. Echter, het is niet duidelijk of de gevonden verschillen in de niveaus van de m1A-modificatie deel uitmaken van de reactie van de muis op dit dieet, of als de reeds bestaande modificatie slechts werd geactiveerd om de eiwitproductie te verhogen.

In de afgelopen twintig jaar, veel ontwikkelingen hebben plaatsgevonden in de moleculaire technologie en berekening. Ondanks dit, de onderzoekers merken op dat deze vooruitgang ons slechts oppervlakkige kennis heeft gebracht van microbiële levensprocessen en hoe ze omgaan met hun omgeving.

Het voordeel van de nieuwe tRNA-sequencingtechnologie is het vermogen om zowel een snelle als een relatief goedkope methode te bieden om te onderzoeken hoe vertaling in de kern werkt.

Dit zou mogelijk veel meer inzicht kunnen geven in hoe microben reageren na kleine veranderingen in de omgeving, vooral degenen die moeilijk te beoordelen zijn met traditionele methoden.

In aanvulling, het gebruik van deze tools zorgt voor meer kennis van de RNA-structuur en -functie, evenals van epigenetische veranderingen in RNA, in het snelgroeiende gebied van microbioomstudies.

De auteurs kijken uit naar een meer uitgebreide en snelle ontwikkeling van de tRNA-sequencingstrategie die ze hebben gepionierd.

Er zijn een aantal manieren om microbioomactiviteiten te onderzoeken, maar niets is sneller en levert meer datavolume op dan sequencing. Hier hebben we een nieuwe methode ontwikkeld die de activiteit van het microbioom rapporteert via tRNA en dit doet met een hoge doorvoer. Dat is echt de waarde."

Professor Tao Pan, Hoofd onderzoeker

Het onderzoek is vandaag gepubliceerd in Natuurcommunicatie .