PLoS ONE: Omvendt Sammenheng mellom mikroRNA-145 og FSCN1 Påvirker Gastric Cancer migrasjon og invasjon

Abstract

microRNAs (Mirs) spiller viktige roller i å modulere genekspresjon under prosessene i tumorigenesis og tumor utvikling. Tidligere studier har funnet at MIR-145 er nedregulert i magen neoplasma og er relatert til tumor migrering og invasjon. Men både den molekylære mekanismen og funksjon av MIR-145 i magekreft fortsatt uklare. Denne studien er den første demonstrasjonen av den betydelige nedregulering av MIR-145 uttrykk i infiltrerende magekreft i forhold til å utvide magekreft. I tillegg korrelasjon analyser avslørte sterk invers korrelasjon mellom MIR-145 og FSCN1 uttrykk nivåer i infiltrerende magekreft. Videre viste vi at MIR-145 direkte rettet mot FSCN1 og undertrykker celle migrasjon og invasjon i magekreft. Knocking ned uttrykket av FSCN1 førte til undertrykkelse av migrasjon og invasjon i magekreftceller, og re-uttrykke FSCN1 i MIR-145-overekspresjon celler reversert deres migrasjon og invasjon defekter. Dermed konkluderte vi med at MIR-145 regulerer celle migrasjon og invasjon i magekreft først og fremst ved direkte rettet mot FSCN1

Citation. Chen JJ, Cai Wy, Liu XW, Luo Qc, Chen G, Huang Wf, et al . (2015) Omvendt Sammenheng mellom mikroRNA-145 og FSCN1 Påvirker Gastric Cancer migrasjon og invasjon. PLoS ONE 10 (5): e0126890. doi: 10,1371 /journal.pone.0126890

Academic Redaktør: Chengfeng Yang, Michigan State University, USA

mottatt: 14 januar 2015; Godkjent: 08.04.2015; Publisert: May 26, 2015

Copyright: © 2015 Chen et al. Dette er en åpen tilgang artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution License, som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt den opprinnelige forfatteren og kilden krediteres

Data Tilgjengelighet: All relevant data er i avisen og dens saksdokumenter filer

Finansiering:. 1. National Natural Science Foundation of China (Grant nr 81172283) JCC (http://www.nsfc.gov.cn/). Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet. 2. Science Foundation i Fujian-provinsen Natural (Grant No. 2012D037) JCC (http://xmgl.fjkjt.gov.cn/). Finansiører hadde ingen rolle i studiedesign, datainnsamling og analyse, beslutning om å publisere, eller utarbeidelse av manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklært at ingen konkurrerende interesser eksisterer

Innledning

Magekreft kreft~~POS=HEADCOMP har en av de høyeste dødsrater for ondartede svulster i verden [1]. Forbedret medisinsk teknologi kan forbedre utfallet av magekreft. Men fortsatt magekreft den nest vanligste årsaken til kreftrelaterte dødsfall [2], som er forårsaket av svulst invasjon og metastasering. Sammen, invasjon og metastase dannelse av en fremgangsmåte hvor maligne tumorceller overføre fra en primær område til andre områder og deretter danne svulster i et fjerntliggende område gjennom lymfesystemet kanal, blodkar eller kroppshulrom [3]. Derfor avklare de molekylære mekanismene som er involvert i utvikling og invasivitet av magekreft er nødvendig.

I 1977, Ming klassifisert mage karsinomer i ekspanderende og infiltrerende typer basert på deres vekst og invasivitet mønstre [4]. Disse typene er lett gjenkjennelig histologisk. Ekspanderende karsinomer dyrke en masse og ved ekspansjon resulterer i dannelse av adskilte tumorknuter, mens infiltrerende karsinomer har tumorceller som invaderer individuelt [5]. Av de to typene av magekreft, er infiltrerende magekreft mer invasive enn å utvide magekreft. En slik klassifisering gir dermed en referanse for å skille magekreft prøver klinisk og muliggjør detaljerte studier om de molekylære mekanismene for magekreft.

microRNAs (Mirs) spiller viktige roller i mange biologiske prosesser, herunder kreft prosesser, ved direkte hemme ekspresjon av mål-mRNA gjennom ulike molekylære mekanismer [6, 7]. I tillegg Mirs gjennomgå avvikende regulering i løpet av karsinogenese og kan virke som enten onkogener eller tumor-suppressorer [7]. Nyere studier har vist at mange Mirs påvirker spredning og invasjonen i magekreft. MIR-21 er oppregulert i magekreft og fremmer tumor spredning og invasjonen i magekreft ved å målrette PTEN [8]. I kontrast er MIR-145 nedregulert i human magekreft [9]. Videre har forskning vist at MIR-145 kan undertrykke celle migrasjon og invasjon ved å hemme N-cadherin protein oversettelse i magekreftceller [10]. Imidlertid Kamikihara et al [11] har oppdaget uttrykket nivåer av N-cadherin i 146 pasienter med magekreft ved immunhistokjemi, og resultatene viste at bare 31 pasienter (21%) hadde N-cadherin-positive uttrykk. Derfor kan noen andre molekylære mekanismer for MIR-145 regulere cellemigrering og invasjon i magekreft.

FSCN1 er et 55-kDa actin-bindende protein som er forbundet med filopodia og aktin-baserte fremspring formasjon, og den fremmer celle motilitet, migrering og invasjon [12, 13]. FSCN1 uttrykk er fraværende eller lav i normal epitel, men FSCN1 er overuttrykt i mange karsinom, inkludert tykktarms adenomer, epitelial eggstokkreft og esophageal plateepitelkarsinom [14-16]. Videre har en rekke studier indikerte at håndheves FSCN1 uttrykk øker spredning og invasjonen av eggstokkreft og magekreftceller [17, 18].

Nyere studier har funnet at MIR-145 fungerer som en tumor suppressor og at MIR-145 overekspresjon undertrykker migrasjon og invasjon i prostatakreft og blærekreft ved å målrette FSCN1 [19, 20]. I tillegg undertrykker MIR-145 magekreft celle migrasjon og invasjon ved å målrette N-cadherin. Imidlertid er positivt uttrykk frekvensen av N-cadherin i magekreft vev er bare 21% [10, 11]. Derfor bestemme nøkkelen målet genet av MIR-145 i regulering av magekreft invasjon er nødvendig.

I denne studien, må vi først fant ut at Mir-145 uttrykk ble bemerkelsesverdig nedregulert i infiltrerende magekreft i forhold til det i å utvide magekreft. Videre vi gitt bevis for at MIR-145 trykt celle migrasjon og invasjon i magekreft først og fremst ved direkte rettet mot FSCN1, som fremhevet rollen MIR-145 og FSCN1 i reguleringen av magekreft ondartede fenotyper.

Materialer og metoder

kliniske prøver

Alle kliniske prøver ble samlet inn med informert samtykke fra pasienter som gjennomgikk gastrektomi på Zhongshan Hospital of Xiamen University i Xiamen (Fujian-provinsen i Kina) fra juni 2012 til oktober 2013 . til sammen 160 par av innsamlede kliniske prøver inkludert 80 uklassifiserte magekreft prøver, 40 infiltrerende magekreft prøver og 40 voksende mage kreftprøver. Svulsten patologisk typen ble bekreftet av patologi undersøkelse, og de matchet normal mage slimhinner ble samlet inn fra mer enn 5 cm unna svulster.

Etikk uttalelse

De studieprotokoller var i samsvar med etiske retningslinjer Helsinkideklarasjonen (1975), og ble godkjent av Medical Ethics Committee (nr 20081012) Zhongshan Hospital of Xiamen University i Xiamen (Fujian-provinsen i Kina). Vi innhentet skriftlig samtykke uttalelser fra alle deltakerne i denne studien.

Cellelinjer

De MGC-803 og SGC-7901 menneskelige magekreftcellelinjer ble kjøpt fra Institute of Cell Biology (Shanghai , Kina, http://www.cellbank.org.cn). Den 293T humane embryonale nyrecellelinje ble oppnådd fra American Type Culture Collection (ATCC, MD, USA). MGC-803 og SGC-7901 celler ble opprettholdt i RPMI-1640 medium, mens 293T celler ble opprettholdt i DMEM. Alle medier inneholdt 10% føtalt bovint serum (FBS), 100 U /ml penicillin og 100 ug /ml streptomycin (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA).

Luciferase reporter analysen

Celler ble transfektert med luciferase-rapportørgener, β-galaktosidase (β-gal) og MIR-145 etterligner eller MIR-145 inhibitor (Guangzhou RiboBio) under anvendelse av Lipofectamine 2000 transfeksjon reagens (Invitrogen). Luciferase-aktivitet ble målt ved 48 timer etter transfeksjon og transfeksjonseffektiviteten ble normalisert til intern β-gal-aktivitet.

RNA-ekstrahering og RT-qPCR

Total RNA ble ekstrahert ved bruk av TRIzol reagens (Invitrogen ) og revers-transkribert med M-MuLV revers transkriptase (Qiagen) for å fremstille cDNA i henhold til produsentens protokoll. Real-time PCR ble utført ved hjelp SYBR Green-basert gjenkjenning i en Rotor-Gene 6000 instrument (Corbett Life Science) i henhold til produsentens instruksjoner og bruk av primerpar oppført i tabell 1. MIR-145 og U6 primere ble hentet fra Qiagen. GAPDH eller U6 endogen kontroll ble anvendt som en indre standard, og resultatene ble beregnet ved anvendelse av △△ CT (hvor CT er grensesyklus) metode.

Plasmid anleggs

primerne anvendt for konstruksjonen av luciferase reportere og plasmider er oppført i Tabell 1. den humane FSCN1 3 'utranslatert region (UTR) ble amplifisert fra MGC-803-cDNA ved PCR-amplifisering med LA Taq DNA polymerase (Takara) og klonet nedstrøms for luciferase koding sekvensen i pMIR-RAPPORT (Ambion) vektor på SacI og Mlul restriksjonssetene (Promega) for å konstruere den menneskelige FSCN1-3'UTR-luciferase reporter. Mutasjoner ble innført i Mir-bindingssteder ved hjelp av en QuikChange Mutagenese Kit (TransGen). For MIR-145 og FSCN1 ekspresjonsplasmider, ble sekvenser amplifisert ved PCR og klonet inn i Spel /NheI områder og XbaI /Ndel-områder, henholdsvis, av den PLV-cs.4.0-basic vektor (Promega). For FSCN1 forstyrrelser plasmidet, ble to par sekvenser glødet og subklonet inn PLKO.1 henhold til produsentens protokoll.

Lentiviral produksjon og transfeksjon

HEK293T celler ble sådd på en seks-brønns innsats ved 24 timer før transfeksjon. Ekspresjonsplasmidet MIR-145, FSCN1 shRNA plasmid eller FSCN1 ekspresjon plasmid ble deretter ko-transfektert med plasmider emballasje (PHR og pCMV-VSV-G) ved anvendelse av Lipofectamine 2000 transfeksjon reagens (Invitrogen). Virale supernatanter ble samlet opp etter 48 timer etter transfeksjon, sentrifugert ved 3000 g i 15 minutter, og filtrert gjennom 0,45 um filter (Millipore). Virale titere ble bestemt ved transdusering av HeLa-celler ved serielle fortynninger og analysere GFP ekspresjon ved hjelp av flow cytometri. MGC-803 celler eller 7901 celler ved 50-70% konfluens ble infisert med virus-supernatanter inneholdende 10 mg /ml polybren i 24 timer. Friskt medium ble deretter tilsatt til de infiserte celler, noe som senere ble valgt med puromycin.

Cell migrering og invasjon assay

celler (3x10 ^{5) ble sådd ut på 8,0 um porestørrelse Boyden kamre (Transwell, Corning Life Sciences, Acton, MA, USA) enten belagt med 10 mikrogram av Matrigel (BD Biovitenskap, Bedford, MA, USA) per brønn (for invasjon analyser) eller venstre ubestrøket (for migrasjonsanalyser) i serum-fri medium inneholdende 10 g /l bovint serum albumin. Medium inneholdende 10% FBS tjente som en kjemoattraktant i det nedre kammer. Ikke-invaderende celler ble fjernet med bomullspinner etter 36 h (for invasjon analyser) eller 20 h (for migrasjon analyser). Invaderte celler ble farget med hematoksylin (HE) og telles. Dataene er presentert som gjennomsnitt ± SD fra tre individuelle eksperimenter}

Western blotting

Proteiner ble ekstrahert med erytrocytt-lyseringsbuffer (ELB;. 50 mM Tris, 140 mM NaCl, 0,5% NP- 40 og 100 mM NaF (pH 7,6)) inneholdende 1 mM fenylmetansulfonylfluorid (PMSF, Sigma-Aldrich, USA). Hver prøve ble separert på en 10% SDS-PAGE-gel og deretter overført til polyvinylidendifluorid (PVDF) membraner. Membranene ble blokkert med 5% melk og inkubert med primært kanin-anti-humant FSCN1 antistoff (1: 3000; Cell Signaling Technology, USA) eller muse-anti-humant GAPDH (1: 5000; Sigma-Aldrich) antistoff over natten ved 4 ° C . Membranene ble deretter inkubert med det passende pepperrot peroksidase (HRP) -konjugert sekundære antistoffer (Thermo Fisher Scientific). Båndene ble utviklet ved hjelp av en forbedret chemiluminescence (ECL) system (Amersham Biosciences, Buckinghamshire, UK). GAPDH-protein ble anvendt som en kontroll lasting.

Statistisk analyse

Data er uttrykt som gjennomsnitt ± SD. Statistisk signifikans ble analysert med t-test. Korrelasjonen mellom MIR-145 nivåer og FSCN1 mRNA /protein uttrykk nivåer i humane mage kreft ble beregnet ved Spearman korrelasjon. Alle statistiske analyser ble beregnet ved hjelp GraphPad Prism statistikkprogram (GraphPad Software). P
< 0,05 ble ansett som statistisk signifikant (NS, ikke signifikant; * P
< 0,05; ** P
< 0,01; *** P
. < 0,001)

Resultater

Sterk inverse forholdet mellom uttrykket av MIR-145 og dens antatte målet, FSCN1, i menneskelig infiltrerende typen magekreft

Vi brukte TargetScan database (http://www.targetscan.org) for å identifisere de 3 'UTR av bestemte geografiske mRNA fra Mir-145 som kan regulere migrasjon og invasjon av mage kreftceller. Av alle forutsagte mRNA, valgt vi FSCN1, som tidligere har vært implisert i tumor migrering og invasjon. FSCN1 også har høyt konserverte sekvensene ved 3'-UTR som er komplementære til de frø sekvensen MIR-145.

Først undersøkte vi hvorvidt sammenhengen av MIR-145 og FSCN1 kan være av klinisk betydning ved å måle ekspresjonen av MIR-145 og FSCN1 mRNA /protein nivåer i normal /svulst paret prøver fra 80 pasienter med magekreft. Den statistiske analysen viste en signifikant invers korrelasjon mellom uttrykket av MIR-145 og uttrykk for FSCN1 mRNA /protein på 80 parene av kliniske prøver (Fig 1A og 1B).

Ming klassifisert mage karsinom i ekspanderende typen og infiltrerende typen basert på vekst og invasivitet mønstre, og eksisterer en sammenheng mellom Ming klassifisering og klinisk prognose [5]. Derfor, ble 40 infiltrerende magekreft prøver og 40 ekspanderende magekreft prøver valgt som antydet med representative HE farging (figur 2A). I denne klassifiseringen, celler av en voksende carcinoma, i kraft av sin begrensede trengende kraft, aggregat og produsere en omskrevet masse i form av polypoid og ulcerende lesjoner. I kontrast, celler av infiltrerende karsinom spre seg perifert og i stor grad, og en tumormasse danner ikke. Vi testet uttrykket av MIR-145 og FSCN1 mRNA i magekreft i forhold til tilstøtende normal mageslimhinnen ved real-time PCR. MIR-145 ble bemerkelsesverdig nedregulert i infiltrerende magekreft i forhold til å utvide magekreft, mens uttrykket av FSCN1 mRNA var bemerkelsesverdig oppregulert (Fig 2B). Vi valgte 10 infiltrerende magekreft prøver og 10 voksende mage kreftprøver sammen med sine tilstøtende normalt vev til å analysere uttrykk ved qPCR og western blotting. De samlede ekspresjonsnivåene av MIR-145 var lavere, spesielt i de infiltrerende magekreft sammenliknet med de tilstøtende normale mageslimhinnen. I motsetning til dette, de samlede mRNA /proteinnivåer FSCN1 var høyere i den infiltrerende magekreft (figur 2C). Derfor uttrykket av MIR-145 og dens antatte målet FSCN1 hadde en sterk invers forhold i menneskelig infiltrerende typen magekreft, og dermed tyder på at en avgjørende rolle MIR-145 og FSCN1 er i magekreft invasjon.

MIR -145 rettet direkte FSCN1 i magekreftceller

for å finne ut om MIR-145 regulerer uttrykket av FSCN1 i magekreftceller, må vi først oppregulert nivået av MIR-145 i magekreft MGC-803 celler ved hjelp et lentivirus-basert vektor. Vi utførte qPCR, som avslørte at MIR-145 overekspresjon signifikant nedregulert mRNA nivået av FSCN1 (Fig 3A) og vestlige blot eksperimenter bekreftet at proteinnivået FSCN1 ble også undertrykt i MIR-145-overekspresjon celler (fig 3B ). Motsatt, knockdown av MIR-145 nivåer ved hjelp av en MIR-145 inhibitor førte til en signifikant indusert FSCN1 mRNA /protein uttrykk i både SGC-7901 og MGC-803 celler (figur 3C). Vi ga en ildflue luciferase reporter vektor som inneholder FSCN1 3 'UTR og deretter co-transfektert MGC-803 celler med Mir-145 etterligner eller en MIR-145 inhibitor å undersøke om FSCN1 er et direkte mål på MIR-145. Lysatene ble analysert for luciferaseaktiviteten 24 timer etter transfeksjon. Den luciferase assay viste at Mir-145 etterligner resulterte i en tilnærmet 55% reduksjon i aktivitet, mens MIR-145 inhibitor økt luciferase aktiviteten med 62% i MGC-803 celler sammenlignet med MIR-negativ kontroll (figur 3D). Videre muterte vi tre store putative MIR-145 gjenkjenningselementer (mres) i FSCN1 3 'UTR via QuikChange mutagenese for anvendelse i luciferase-analysen (figur 3D). Resultatene viste at de regulatoriske virkningene av Mir-145 etterligner eller MIR-145 inhibitor ble primært avskaffet, som bekreftet at taushet effekter av MIR-145 på FSCN1 ble avskaffet ved avbrudd av Mir-MRE interaksjoner (Fig 3D). Kollektivt, disse studiene gitt overbevisende bevis for at FSCN1 er et direkte mål på MIR-145 i mage kreftceller.

undertrykkelse av FSCN1 er nødvendig for MIR-145 til å hemme migrasjon og invasjon av magekreftceller

Magekreft kreft~~POS=HEADCOMP MGC-803 og SGC-7901 celler ble stabilt transfektert med to forskjellige FSCN1 shRNAs å hemme FSCN1 å bedre forstå den potensielle rolle FSCN1 i MIR-145-mediert tumor migrasjon og invasjon. Interferens effektivitet av FSCN1 shRNAs ble bekreftet ved western blot-analyse (figur 4A og 4B). De transwell analyseresultatene viste at evnen til celler til å migrere og invadere var sterkt undertrykket etter banket ned ekspresjonen av FSCN1 i MGC-803 og SGC-7901-celler sammenlignet med negativ kontroll-celler (figur 4C og 4D), og dermed tyder på en vesentlig rolle av FSCN1 i disse prosessene.

MIR-145 er kjent for å undertrykke migrering og invasjon av mange krefttyper, inkludert magekreft [10, 19, 21]. Som forventet, håndhevet uttrykk for MIR-145 resulterte i betydelig redusert migrasjon og invasjon priser MGC-803 og SGC-7901 celler. Videre samtidig re-uttrykk for FSCN1 kompromittert Mir-145-undertrykt celle migrasjon og invasjon evne nesten helt i begge MIR-145-transfekterte MGC-803 og SGC-7901 celler (figur 5A og 5B). Omvendt, brukte vi FSCN1 shRNA å hemme FSCN1 uttrykk i MIR-145 inhibitor-transfektert MGC-803 og SGC-7901 celler. Knockdown av FSCN1 fullstendig reversert MIR-145-inhibitor-mediert aktivering av cellemigrering og invasjon, således som tyder den essensielle rolle FSCN1 i denne prosessen (fig 5C og 5D). Kollektivt, resultatene ovenfor viser at undertrykkelsen av FSCN1 er nødvendig for MIR-145 til å hemme migrasjon og invasjon av mage kreftceller.

Diskusjoner

Dereguleringen av Mirs har vært innblandet i en rekke kreft hos mennesker, inkludert menneskelige magekreft. Imidlertid, de molekylære mekanismer som Mirs modulerer fremgangs karsinogenese og oppførselen av kreftceller er enda ikke blitt definert. Differensiell MIR ekspresjon i tumorer sammenlignet med deres tilstøtende normale vev eller mellom grupper av tumorprøver med en gunstig eller dårlig klinisk resultat er blitt brukt til å generere MIR signaturer med potensiell prognostisk og /eller prediktiv verdi i visse krefttyper. Likevel, involvering av de abnorme uttrykt Mirs i human magekreft forblir stort sett uutforsket. Tidligere studier har rapportert at MIR-145 er nedregulert i ulike menneskelige kreftformer, herunder brystkreft, lungekreft og magekreft [9, 22, 23]. Lu et al [24] fant at MIR-145 fungerer som en tumor suppressor og mål to onkogener, nemlig ANGPT2 og NEDD9, i nyrecellekreft. En annen studie har vist at MIR-145 undertrykker celle migrasjon og invasjon ved å hemme N-cadherin protein oversettelse i magekreftceller [10]. Men Kamikihara et al [11] fant at bare 21% mage kreftpasienter har N-cadherin-positive uttrykk som analyseres ved immunhistokjemi. Derfor er en alternativ molekylære mekanismen bak MIR-145 er involvert i regulering av celle migrasjon og invasjon av magekreft.

I denne studien fikk vi bekreftet at MIR-145 er nedregulert i mage kreft vev sammen til tilstøtende normal gastrisk mucosa, som er i overensstemmelse med tidligere funn [9]. I et forsøk på å identifisere nye nedstrøms mål av MIR-145, brukte vi TargetScan databasen for å utføre screening eksperimenter. Fra flere kandidater, valgte vi FSCN1 for videre eksperimenter fordi FSCN1 har vist seg å spille en viktig rolle i tumor migrasjon og invasjon. Flere linjer av bevis tyder på at FSCN1 er den direkte nedstrøms målet på MIR-145. For det første, FSCN1 inneholder høyt konserverte sekvensene ved 3'-UTR som er komplementære til de frø sekvensen MIR-145. For det andre ble en invers korrelasjon mellom MIR-145 og FSCN1 funnet i de sammenkoblede prøver fra magekreftpasienter. Til slutt, når klassifisere kliniske prøver til å utvide type og infiltrerende typen basert på Ming klassifisering, fant vi at MIR-145 er bemerkelsesverdig nedregulert i infiltrerende magekreft i forhold til å utvide magekreft. I mellomtiden, en sterkere invers korrelasjon ble også påvist mellom MIR-145 og FSCN1 uttrykk nivåer i infiltrerende magekreft. Denne studien kaste nytt lys over sammenhengen mellom MIR-145 og FSCN1 i infiltrerende magekreft. I en tidligere studie, Lauren delt mage kreft inn i følgende to typer: intestinal type og diffuse typen [25]. Intestinal typen kreft er beskrevet som en kjerteltumor som ligner kolonkreft, og diffuse typen kreft er sammensatt av enslig eller klaser av celler uten dannelse av kjertlene. Tumortyper i Lauren og Ming klassifisering tett tilsvarer hverandre. De fleste voksende svulster har funksjoner i intestinal-type kreft, og mest infiltrerende svulstene er diffuse typen kreft [5]. Imidlertid kan et betydelig antall av mage karsinom ikke klassifiseres i intestinal type eller diffuse typen, herunder udifferensierte kreftformer som ikke infiltrerer diffust og kjertelkreft som infiltrerer diffust. I tillegg, er påvisning av tidlig magekreft ved hjelp Lauren klassifikasjon forholdsvis vanskelig fordi det tidlige stadium av diffus typen kreft, ved definisjon, ikke er diffus. Imidlertid kan Ming klassifisering løse disse problemene [5]. I Ming klassifisering, mønstre av cellefordeling klart indikerer en fundamental forskjell i deres vekstpotensial samt makt for penetrasjon og invasjon. Som infiltrerende magekreft er mer invasive enn å utvide magekreft, disse resultatene tyder på at MIR-145 og FSCN1 begge spiller viktige roller i magekreft invasjon.

Selv om flere rapporter har impliserte regulering av FSCN1 av Mirs i mange karsinom [19, 20, 26], til det beste av vår kunnskap, ingen rapport har antydet at FSCN1 er et direkte mål på MIR-145 i magekreft. I denne studien fikk vi bekreftet at MIR-145 undertrykker FSCN1 uttrykk og direkte rettet mot det 3 'UTR av FSCN1 i mage kreftceller. I tillegg har samtidig re-uttrykk for FSCN1 kompromittert Mir-145-undertrykt celle migrasjon og invasjon evne nesten helt i MIR-145-transfektert MGC-803 og SGC-7901 celler, som indikerte at undertrykkelsen av FSCN1 er nødvendig for MIR -145 til å inhibere migrering og invasjon av magekreftceller. Derfor er FSCN1 en viktig nedstrøms mål av MIR-145 i regulering av magekreft invasjon.

I sammendraget, denne studien avdekket at MIR-145 er primært nedregulert i infiltrerende magekreft og at Mir-145 uttrykk og FSCN1 uttrykk har en sterk invers korrelasjon i infiltrerende magekreft. Funksjonelt, viste vi at MIR-145 undertrykker celle migrasjon og invasjon i magekreft først og fremst ved direkte rettet mot FSCN1. Derfor gjenopprette uttrykket av MIR-145 kan utforskes som et alternativ terapeutisk strategi mot magekreft.

• PLoS ONE: Atomic Innsikt i Altered O6-metylguanin-DNA metyltransferase Protein Arkitektur i Gastric Cancer
• PLoS ONE: Helse atferd av koreanske magekreft overlevende med hypertensjon: en tilbøyelighet Analyse av KNHANES III-V (2005-2012)