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PLOS ONE: altos níveis de aminoácidos aromáticos no suco gástrico durante os estágios iniciais de câncer gástrico Progression

Abstract

Fundo

câncer gástrico em estágio inicial é geralmente assintomática e pode ser facilmente perdida facilmente por gastroscopia convencional. Atualmente, não há biomarcadores úteis para a detecção precoce do câncer gástrico, e é urgentemente necessária a identificação de biomarcadores.

Métodos

O suco gástrico foi obtido a partir de 185 indivíduos que foram divididos em três grupos : doenças não neoplásicas gástrica (NGD), câncer gástrico avançado e câncer gástrico precoce (EGC). Os níveis de aminoácidos aromáticos no suco gástrico foram quantificados por cromatografia líquida de alto desempenho.

Resultados

Os valores medianos (25 a percentil 75) de tirosina, fenilalanina e triptofano na gástrica suco foram de 3,8 (1,7-7,5) mg /ml, 5,3 (2,3-9,9) mg /ml e 1,0 (0,4-2,8) mg /ml em NGD; 19,4 (5,8-72,4) ug /ml, 24,6 (11,5-73,7) ug /mL e 8,3 (2,1-28,0) ig /ml em EGC. Foram observados níveis mais elevados de tirosina, fenilalanina e triptofano no suco gástrico em indivíduos de grupos EGC comparados aos do grupo NGD (NGD vs EGC, P
< 0,0001). Para a detecção de EGC, as áreas sob a curva ROC (AUC) de cada biomarcador foram os seguintes: tirosina, 0.790 [intervalo de confiança de 95% (CI), 0,703-0,877]; fenilalanina, (IC 95%, 0,750-0,911) 0,831; e triptofano, 0,819 (IC de 95%, 0,739-0,900). A sensibilidade e especificidade de fenilalanina foram 75,5% e 81,4%, respectivamente, para a detecção de EGC. A análise de regressão logística múltipla mostraram que altos níveis de aminoácidos aromáticos no suco gástrico foram associados com câncer gástrico (coeficientes beta ajustados variaram 1,801-4,414, P Art < 0,001).

conclusão

os níveis aumentados de tirosina, fenilalanina e triptofano em amostras de suco gástrico foram detectados na fase precoce da carcinogénese gástrica. Assim, tirosina, fenilalanina e triptofano em suco gástrico pode ser utilizado como biomarcador para a detecção precoce do cancro gástrico. Uma análise de suco gástrico é um método eficiente, econômica e conveniente para a triagem de desenvolvimento de câncer gástrico precoce na população em geral

Citation:. Deng K, Lin S, Zhou L, Li Y, Chen M, Wang Y, et ai. (2012) Níveis elevados de aminoácidos aromáticos no suco gástrico durante os estágios iniciais de câncer gástrico progressão. PLoS ONE 7 (11): e49434. doi: 10.1371 /journal.pone.0049434

editor: Alejandro H. Corvalan, Pontificia Universidad Catolica de Chile, Faculdade de Medicina, Chile

Recebido: 27 Abril de 2012; Aceito: 07 de outubro de 2012; Publicação: 13 de novembro de 2012

Direitos de autor: © 2012 Deng et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Financiamento:. Esta pesquisa foi apoiada pela National Science Foundation Natural da China [número de Grant: 3097415] (URL: http://www.nsfc.gov.cn/e_nsfc/desktop/zn/0101.htm). Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito

CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

o câncer gástrico é o segundo tipo de câncer mais comum no Leste da Ásia, e o prognóstico dos pacientes com câncer gástrico é pobre, como resultado da detecção tardia [1], [2], [3]. Até à data, sobrevivência do cancro de estômago e qualidade de vida do paciente só é melhorado dramaticamente se o câncer é diagnosticado precocemente [4]. Infelizmente, menos de 5% dos casos iniciais de cancro gástrico são detectadas e diagnosticadas prontamente [5].

Endoscopy seguido por biópsia patológico é agora o método preferido para detectar o cancro gástrico precoce (EGC). No entanto, EGC é perdida frequentemente durante gastroscopia por causa de uma lesão menor pode ser facilmente esquecido, biópsia de forma inadequada, ou interpretado incorretamente por patologistas [6], [7]. EGC é largamente assintomático antes do aparecimento de sintomas graves, e uma investigação endoscópica com base em sintomas graves atrasa sempre a detecção do cancro do estômago. rastreio de base populacional podem facilitar a detecção precoce e diagnóstico de câncer gástrico. No entanto, tanto a falta de endoscopists experientes e o desconforto do paciente associado com o processo de reduzir a aplicação do presente método como um instrumento de rastreio para EGC.

biomarcadores menos invasiva e mais eficientes são necessários para a detecção de massa por EGC triagem. A corrente de pepsinogénio biomarcadores, antigénio carcinoembrionário (CEA), e antigénio de carbohidrato 19-9 (CA19-9), não são suficientes para predizer com precisão o cancro gástrico numa fase precoce [8], [9], [10].

é bem estabelecido que alterações metabólicas ocorrem antes das alterações morfológicas significativas em tecido maligno [11]. Uma quantidade substancial de informações sobre o estado metabólico do epitélio gástrico está contido no suco gástrico. Portanto, o suco gástrico pode ser utilizado para estabelecer um teste de diagnóstico e identificar biomarcadores valiosos e eficientes para o rastreio EGC. Nos estudos anteriores, nós estabelecemos a análise do espectro de fluorescência do suco gástrico [12], [13], [14] e identificados três biomarcadores de fluorescência (aminoácidos aromáticos em suco gástrico) [15] que pode ser usado para distinguir gástrico avançado cancro (AGC) de doenças benignas. No entanto, ainda é incerto se estes biomarcadores podem diferenciar entre EGC e doenças benignas. Este estudo foi realizado para testar a hipótese de que os biomarcadores suco gástrico têm valor triagem diagnóstica na detecção de EGC.

Métodos

Declaração de Ética

O comitê de ética da Universidade de Pequim Saúde Centro de ciência aprovou este estudo de pesquisa. consentimento informado por escrito foi obtido de todos os participantes, e toda a investigação clínica foi realizada de acordo com os princípios expressos na Declaração de Helsinki.

Amostra Coleção

As amostras foram coletadas nas salas de endoscopia de Peking University Hospital Terceiro. Todas as amostras de pacientes obtidos para este estudo foram histologicamente confirmado por biópsia da mucosa e /ou patologia pós-operatório de dezembro de 2008 a julho de 2012. Depois de uma noite de jejum, os pacientes foram submetidos a gastroscopia. As amostras de suco gástrico que estavam livres de resíduos de alimentos bruta, bile e sangue foram coletadas. As amostras foram separadas em alíquotas de 2 ml e imediatamente armazenados a -80 ° C para análise subsequente. Warthin-Starry (WS) coloração foi utilizado para detectar a Helicobacter pylori
estado de infecção em todos os espécimes (O antro gástrico foi um dos locais de biópsia e o número total de locais de biópsia foi mais do que dois).

Participantes

amostras de suco gástrico foram obtidos de 49 pacientes com EGC (6 casos foram incluídos em uma publicação anterior [15]). Houve 26 casos de carcinoma focal e 23 casos de displasia severa que poderiam ser classificados como EGC [16]. Além das amostras de suco gástrico isoladas a partir de pacientes com EGC, amostras de 70 pacientes com doença gástrica não neoplásicas (NGD) que foram submetidos a um procedimento de endoscopia ambulatório durante o mesmo período, foram utilizados como um grupo de controlo para comparação. O grupo de controlo continha 47 pacientes com gastrite superficial crônica, 18 pacientes com gastrite atrófica crônica, e 5 pacientes com úlceras pépticas. Além disso, amostras de suco gástrico foram coletadas aleatoriamente a partir de 66 pacientes com AGC (Tabela 1). Não houve alterações significativas observadas nos testes de função renal e hepática pré-endoscópicos dos indivíduos recrutados. A maioria dos pacientes com câncer gástrico recrutados não tinham sido previamente diagnosticado, e nenhum dos pacientes apresentaram desnutrição significativa (performance status Kamofsky, KPS > 90).

Exemplo de Tratamento

As amostras congeladas foram descongeladas à temperatura ambiente e centrifugadas a 14000 rpm durante 20 minutos a 4 ° C. O precipitado foi removido, e a camada superior foi recuperado e temporariamente armazenadas a 4 ° C durante a experiência seguinte. As amostras foram contados de forma aleatória. O experimentador desconhecia o diagnóstico dos pacientes recrutados para o estudo.

quantificação de proteínas totais no suco gástrico

Para quantificar o teor de proteína, 100 ul de sobrenadante suco gástrico foi recuperado e imediatamente diluiu-se com 900 ul de tampão 0,15 M de fosfato (pH 7,3) para ajustar o pH. O conteúdo de proteína total no suco gástrico foi medida utilizando um kit de ensaio de proteína BCA (ácido bicinconínico) (Pequim Colin Biotech Co. Ltd., Pequim, China) de acordo com o protocolo do fabricante. Se a concentração da proteína estava fora da gama de trabalho do ensaio (20-2000 ug /ml), a amostra foi ainda diluída e novamente analisadas.

quantitativa do sistema

aminoácidos aromáticos na gástrica amostras de suco foram quantificados usando um detector de fluorescência em conjunto com a HPLC [17], [18], e o sistema quantitativo estabelecido anteriormente [15], foi aplicado neste estudo. Um filtro de HPLC de entrada, um Diamonsil (2) C18 (3 um, 250 x 4,6 mm) coluna analítica (Dikma Technologies, Pequim, China) e um sistema de cromatografia líquida de série Agilent 1100 (Agilent Technologies, Waldbronn, Alemanha) foram utilizados neste estude. O sistema consistia de uma unidade de vácuo solvente desgaseificação, quatro bombas de gradiente de solvente, um injector automático de amostras com temperatura regulável, um termostato de coluna e um detector de fluorescência 3D (FLD). software ChemStation foi utilizado para quantificar a quantidade de aminoácidos aromáticos nas amostras de suco gástrico. Antes da análise por HPLC de fase reversa, o sobrenadante suco gástrico foi filtrada através de um filtro de 0,45 um de HPLC. Os aminoácidos aromáticos no suco gástrico foram separados durante a HPLC numa coluna analítica C18 utilizando 0,05% (v /v) de ácido trifluoroacético /água (qualidade HPLC; Dikma Technologies) como solvente A e acetonitrilo puro (grau HPLC; Merck, Darmstadt, Alemanha) B modificadores de fase móvel como solvente em um sistema de gradiente de eluição linear. Depois de uma lavagem da agulha, as amostras foram injectadas num volume de 20-100 ul de volume de injecção. O procedimento de HPLC e as condições experimentais para cada uma das amostras estão listadas na Tabela 2.

Aminoácido aromático Quantificação

e soluções padrão de controlo de qualidade que continham concentrações equivalentes de L-tirosina, L-fenilalanina e L triptofano (99%, Alfa Aesar, Ward Hill, MA, EUA) foram preparadas em concentrações de 0,5, 1,0, 2,0, 5,0, 10,0, 15,0, 18,0 e 20,0 ug /ml para estabelecer as curvas de calibração. Os padrões foram armazenados a -80 ° C. alíquotas de vinte microlitros de DDH 2O (solução de controlo em branco) e as amostras padrão e de controlo de qualidade foram utilizados para estabelecer e verificar as curvas de calibração antes do ensaio os três aminoácidos aromáticos nas amostras de suco gástrico. Se os níveis de tirosina, fenilalanina e /ou triptofano estavam fora do intervalo de medição, as amostras foram novamente analisadas depois de alterar o volume de injecção (20-100 ul). Se a concentração da amostra era indetectável após várias tentativas de análise, foi atribuída uma pontuação de zero.

Métodos Estatísticos

Quando uma distribuição normal aceitável foi alcançado, os dados foram expressos como os meios ± SD (desvio padrão), e as comparações entre os grupos foram feitas usando o teste ANOVA one-way. Quando uma distribuição normal aceitável não foi alcançado, os dados foram expressos como medianas (25 a percentil 75). Testes de Kruskal-Wallis seguido pelo teste de comparações múltiplas post hoc (nível de significância de Bonferroni-corrigido de 0,05 /3 = 0,017) de Dunn foram usadas para determinar as diferenças entre os três grupos. O teste de Dunn Kruskal-Wallis e foram realizadas utilizando Minitab (versão 16, Minitab Company, State College, PA) com o macro KrusMC.MAC (obtido no site da Minitab). O teste de Mann-Whitney foi utilizado apenas para comparações entre os dois grupos. Um teste do qui-quadrado foi utilizado para estimar a associação entre duas variáveis ​​binárias. A correlação de Pearson foi escolhido para analisar a associação entre variáveis. Uma correlação parcial foi usada para analisar a associação entre os níveis de aminoácidos aromáticos e o diagnóstico clínico, o que resultou na remoção de um conjunto de variáveis ​​controladoras. A curva ROC (ROC) e as áreas sob a curva (AUC) da ROC foram aplicados para avaliar a validade dos biomarcadores e identificar os valores de corte otimizados. Todos os outros testes estatísticos foram em frente e verso, com P Art < 0,05 definidos como estatisticamente significativo. Modelos de regressão logística foram utilizados para calcular os coeficientes beta e P valores
para cada fator /covariável. Todos os cálculos foram realizados com o Excel 2003 (Microsoft Corporation, Seattle, WA, EUA), e testes estatísticos foram calculados usando SPSS versão 15.0 (SPSS, Chicago, IL, EUA), SAS 8.1 software (SAS Institute Inc., Cary, NC) e PASS 2008 pacote de software (NCSS, Kaysville, UT)

Resultados

características clínicas dos pacientes

Este estudo continha 185 pacientes divididos em 3 grupos:. 70 pacientes NGD , 66 pacientes AGC e 49 pacientes EGC. Não houve diferenças significativas na ocorrência de infecções por Helicobacter pylori
(6 casos) perdeu entre os três subgrupos. A idade e sexo variaram entre os três subgrupos ( P = 0,049
e P
= 0,023) (Tabela 1).

Proteína total no suco gástrico

a mediana (25 a percentil 75) os valores do conteúdo de proteína total nas amostras de suco gástrico foram como se segue: NGD, 1,5 (0,9-2,4) mg /ml; AGC, 3,3 (2,3-5,1) mg /ml; e CGA, 2,8 (1,6-3,7) mg /ml (Tabela 3). Um aumento no conteúdo de proteína total foi observada em amostras de suco gástrico de grupos AGC e EGC em relação à do grupo NGD (teste de Dunn, AGC vs NGD, P
< 0,0001; EGC vs. NGD, P
< 0,0001) (Tabela 1). Não houve diferença no conteúdo de proteína total, entre o grupo e o grupo AGC CGA (testes de Dunn, P
= 0,044, que é maior do que o nível de significância de 0,017) (Tabela 3).

quantitativa Sistema

Como se mostra no cromatograma de fluorescência (Figura 1), os três aminoácidos aromáticos foram completamente separadas. Os tempos de retenção para cada um dos três aminoácidos foram as seguintes: tirosina, 8 min; fenilalanina, 12 min; e triptofano, 16 min. A curva de calibração, a linearidade de trabalho e gamas foram os seguintes: tirosina, Y = 0.32X + 1,30, R 2 = 0,9999, 0,5-20,0 ug /ml; fenilalanina, Y = 7.15X + 1,03, R 2 = 0,9999, 0,5-20,0 ug /ml; e triptofano, Y = 0,25x + 3,01, R 2 = 0,9999, 0,5-20,0 ug /ml. As recuperações de tirosina, fenilalanina e triptofano foram 100,5 ± 2,7%, 101,3% ± 3,4 e 99,6 ± 1,6%, respectivamente. As precisões de tirosina, fenilalanina e triptofano foram de 100,1 ± 0,5%, 100,0% ± 1,8 e 98,7 ± 1,5%, respectivamente. Este sistema experimental era estável e fiável para a quantificação de aminoácidos aromáticos no suco gástrico.

Aromatic Aminoácidos Ensaio

A mediana (25 a percentil 75) valores de tirosina, fenilalanina e triptofano foram 3,8 (1,7-7,5) mg /ml, 5,3 (2,3-9,9) mg /ml e 1,0 (0,4-2,8) mg /ml nas amostras NGD; 18,3 (6,4-52,3) ug /ml, 25,7 (11,1-76,1) ug /mL e 4,7 (2,5-20,3) ig /ml nas amostras de AGC; e 19,4 (5,8-72,4) ug /ml, 24,6 (11,5-73,7) ug /mL e 8,3 (2,1-28,0) ig /ml nas amostras EGC (Tabela 3). Os níveis de aminoácidos aromáticos no suco gástrico foi significativamente diferente entre os grupos NGD, AGC e EGC (teste de Kruskal-Wallis, tirosina χ 2 = 49,847, fenilalanina χ 2 = 62,397, triptofano χ 2 = 52,846, todos P Art < 0,0001). Os níveis de tirosina, fenilalanina e triptofano foram significativamente aumentados no suco gástrico obtidos a partir de ambos os grupos e AGC CGA comparados com aqueles do grupo NGD (teste de Dunn, AGC vs NGD, tudo P
< 0,0001; EGC vs. NGD, todo P Art < 0,0001) (Tabela 3 e Figura 2). Após o ajuste para os efeitos dos níveis de proteína totais no suco gástrico, associações significativas ainda existia entre os níveis de aminoácidos aromáticos e o diagnóstico clínico (correlação parcial, AGC vs. NGD: tirosina, R = 0,334, P
< 0,001; fenilalanina, R = 0,257, P Art < 0,001; e triptofano, R = 0,312, P Art < 0,001; EGC vs. NGD: tirosina, R = 0,378 , P Art < 0,001; fenilalanina, R = 0,392, P Art < 0,001; e triptofano, R = 0,380, P Art < 0,001). Não houve diferenças significativas nos níveis de tirosina, fenilalanina e triptofano entre as amostras de suco gástrico AGC e EGC (teste de Dunn, P
= 0,811, P
= 0,781 e P
= 0,691, respectivamente) (Tabela 3). Este resultado foi consistente com os resultados anteriores [15], que indicou que não existem associações entre Helicobacter pylori
infecção e os níveis de aminoácidos aromáticos em suco gástrico (teste de Mann-Whitney U, tirosina, P
= 0,871; fenilalanina, P
= 0,742;. triptofano, P
= 0,913)

Validade do Aromatic Aminoácidos para Detecção de AGC e EGC

na análise da curva ROC para distinguir entre AGC e NGD, as áreas sob as curvas (AUC) para tirosina, fenilalanina, triptofano e proteína total foram 0.824 [95% de intervalo de confiança (IC), 0,753-0,895, P Art < 0,001], 0,858 (IC 95%, 0,794-0,922, P Art < 0,001), CI 0,818 (95%, 0,747-0,889, P <
; 0,001) e 0,803 (IC de 95%, 0,728-,878, P
< 0,001), respectivamente (Figura 3A e a Tabela 4). De acordo com a análise da curva ROC para distinguir entre EGC e NGD, as AUCs para tirosina, fenilalanina, triptofano e proteína total foram 0.790 (95% CI, 0,703-0,877, P
< 0,001), 0,831 (95 CI%, 0,750-0,911, P Art < 0,001), CI 0,819 (95%, ,739-,900, P Art < 0,001) e 0,719 (IC 95%, ,623-,814 , P
< 0,001), respectivamente (Figura 3B e Quadro 4). Os valores de corte otimizados para distinguir AGC ou EGC da NGD foram escolhidos através da determinação dos montantes máximos de sensibilidade e especificidade das curvas ROC (Tabela 4). Depois de seleccionar os valores optimizados, a sensibilidade, a especificidade e a precisão necessária para distinguir entre AGC e NGD foram os seguintes: tirosina, 83,3%, 68,6% e 75,7%; fenilalanina, 81,8%, 75,7% e 78,7%; triptofano, 84,8%, 68,6% e 76,5%; e proteína total, 75,8%, 74,3% e 75,0%. Depois de seleccionar os valores optimizados, a sensibilidade, a especificidade e a precisão necessária para distinguir entre EGC e NGD foram os seguintes: tirosina, 75,5%, 71,4% e 73,1%; fenilalanina, 75,5%, 81,4% e 79,0%; triptofano, 61,2%, 97,1% e 82,4%; e proteína total, 59,2%, 81,4% e 72,3% (Tabela 4). Depois de seleccionar os valores optimizados relatados no nosso estudo anterior [12], [15], a sensibilidade, a especificidade e a precisão na detecção de EGC foram os seguintes: tirosina, 51,0%, 94,3% e 76,5%; fenilalanina, 79,6%, 74,3% e 76,5%; triptofano, 61,2%, 94,3% e 80,7%; e proteína total, 83,7%, 62,9% e 71,4%. Utilizando um valor optimizado diferente, obtiveram-se resultados semelhantes. Usando uma combinação de tirosina, fenilalanina e triptofano não melhorou de forma significativa a detecção de AGC CGA ou porque as concentrações dos três aminoácidos aromáticos nas amostras de suco gástrico estavam estreitamente relacionados entre si (tirosina-fenilalanina, R = 0,871; tirosina triptofano, R = 0,941; fenilalanina-triptofano, R = 0,840, P
. < 0,001 para cada)

análise de regressão logística

na análise de regressão logística, o foi avaliada associação entre os níveis de aminoácidos aromáticos no suco gástrico e EGC. As análises de regressão logística univariadas foram realizados para avaliar os valores preditivos dos biomarcadores candidatos para a detecção de EGC. Nestas análises univariadas, os coeficientes beta (SE) de idade, sexo, Status Helicobacter pylori
, proteína e níveis elevados de aminoácidos aromáticos em suco gástrico foram calculados. Quatro variáveis ​​(idade e tirosina elevada, fenilalanina e níveis de triptofano em suco gástrico) teve um P Art < 0,05 e foram identificados usando análise de regressão logística múltipla (Tabela 5). Porque havia colinearidades entre tirosina, fenilalanina e triptofano (todos P > 0,8), avaliou-se a relação entre os níveis de tirosina, fenilalanina ou triptofano e EGC em três modelos separados e estima os coeficientes ajustada em cada modelo. Os níveis elevados destes aminoácidos aromáticos no suco gástrico foram associados com EGC (tirosina: ajustado coeficiente β 1.801, SE 0,527; fenilalanina: ajustado coeficiente β 2,555, SE 0,586; triptofano: ajustado coeficiente β 4,414, SE 0,945) (Tabela 5 ). Assim, os níveis elevados de aminoácidos aromáticos no suco gástrico podem ser marcadores independentes para a detecção de EGC.

Discussão

Em nossos estudos anteriores, observou-se aumento da fluorescência de suco gástrico no AGC e identificou três biomarcadores de fluorescência para o rastreio de cancro avançado gástrica [12], [15]. Se estes biomarcadores potenciais são úteis para a detecção precoce do cancro gástrico é incerto. Na nossa investigação actual, nós testamos a validade do uso de aminoácidos aromáticos no suco gástrico para o diagnóstico da EGC. Os nossos resultados mostram que os níveis elevados de aminoácidos aromáticos estão presentes no suco gástrico a partir de pacientes com EGC em comparação com pacientes NGD. Assim, níveis elevados de aminoácidos aromáticos no suco gástrico pode ser valiosa para a detecção precoce da EGC.

Por causa do tamanho da amostra thesmall, foram realizadas análises de energia para o teste de Kruskal-Wallis e ROC AUC. Para nosso conhecimento, as fórmulas ou procedimentos para determinar o tamanho da amostra necessária para testar as diferenças em locais de várias amostras usando métodos não paramétricos são muito mais complicados [19], e nenhum método de cálculo poder ou tamanho da amostra está disponível atualmente em relação à hipótese alternativa genérica para o teste de Kruskal-Wallis [20]. Lachenbruch e Clements sugeriu que o teste de Kruskal-Wallis pode ter maior poder do que o F-teste, quando as distribuições da população não são normais. Alegaram que, em comparação com o F-teste, o teste de Kruskal-Wallis foi mais firme contra partidas do pressuposto da igualdade de variância [21]. Assim, usando o poder do teste F para aproximar o poder do teste de Kruskal-Wallis pode fornecer um pobre limite inferior para distribuições normais. Após uma transformação no ranking, as potências centesimais (1 - β erro) foram calculados utilizando o teste F (ANOVA), conforme implementado no SAS 8.1. Todos os poderes imediatas são mais do que 0,99. Assim, pode-se concluir de forma fiável que os níveis de proteína total e os aminoácidos aromáticos em suco gástrico são significativamente diferentes entre NGD, e AGC CGA. análises de energia para as curvas ROC foram realizadas utilizando PASS software de 2008. Nenhum dos poderes foi inferior a 0,99. Portanto, é aceitável a concluir que os níveis elevados de aminoácidos aromáticos no suco gástrico podem ser preditores valiosos para AGC ou EGC.

O aumento da produção de aminoácidos aromáticos em EGC corresponde aos resultados de um estudo anterior [15] e é consistente com os relatórios iniciais em outras doenças malignas (sangue [22], pulmão [23], [24], [25], de mama [23], [24], bexiga [26], etc.). Especula-se que as seguintes razões podem explicar este fenómeno. Primeiro, as células tumorais necessitam de aminoácidos aromáticos suficientes para acumular nos focos de cancro para satisfazer as necessidades acentuadamente aumentados para a síntese de proteínas para suportar o crescimento rápido. A expressão elevada de transportadores de aminoácidos (tais como L-tipo de transportador de aminoácidos 1) em vários tumores [27], [28], [29], [30], [31], [32], [33], [34], [35] tem sido relatada em muitos estudos. transportadores de aminoácidos podem melhorar o transporte de aminoácidos e acumulam aminoácidos aromáticos próximos focos cancro. A infiltração de aminoácidos aromáticos excessivas podem aumentar significativamente no suco gástrico em comparação com NGD EGC. Em segundo lugar, o metabolismo anormal nas células cancerosas que precedem as mudanças visíveis na carcinogênese do estômago [11]. Sabe-se que as anormalidades do transporte de aminoácidos e metabolismo de uma região cancerosa ocorrem frequentemente na fase precoce do cancro gástrico. O suco gástrico, que é gerado pelo epitélio gástrico, contém uma quantidade substancial de informação sobre o estado metabólico do epitélio. Portanto, a informação obtida a partir da análise do suco gástrico podem ser úteis na separação de biomarcadores para a detecção precoce do cancro gástrico. Finalmente, as metaloproteinases de matriz (MMPs), que são enzimas que degradam a matriz extracelular e membrana basal, desempenham um papel na fase precoce da tumorigénese [36], [37], [38], [39], [40]. A sobre-expressão e a actividade das MMPs acelera a degradação da matriz extracelular e membrana basal. A degradação da matriz gera aminoácidos aromáticos no suco gástrico que envolve as células de tumor. Além disso, os aminoácidos aromáticos sangue pode facilmente penetrar a membrana basal prejudicada e epitélios de focos de carcinoma e aumentar os níveis de aminoácidos em suco gástrico. Essas causas podem explicar o aumento significativo de aminoácidos aromáticos em suco gástrico de pacientes EGC.

A fase inicial do câncer gástrico tem poucos sintomas e pode ser facilmente perdida por endoscopia convencional [6], [41]. Estes problemas reduzir a taxa de detecção precoce e tratamento eficaz para o câncer gástrico. Os níveis anormais de aminoácidos aromáticos no suco gástrico pode ser utilizado para monitorizar a ocorrência de perturbações do metabolismo dos aminoácidos e revelam transformações malignas precoces que ocorrem no estômago. Notavelmente, as nossas constatações indicam que os níveis de aminoácidos aromáticos no suco gástrico pode distinguir EGC de gastrite. Este achado introduz a possibilidade de que estes marcadores podem ser usados ​​para o rastreio em massa de cancro gástrico numa fase precoce. A medição dos níveis de aminoácidos aromáticos em amostras de suco gástrico pode ser um método eficiente, econômica, rápida e conveniente para detectar AGC ou EGC em uma população.

Apesar de aminoácidos aromáticos pode ser promissora biomarcadores para EGC, há ainda existem desvantagens associadas com esta abordagem. A utilização de procedimentos menos invasivos seria benéfico para fins de rastreio. Os sucos gástricos no nosso estudo foram aspiradas durante a endoscopia, o que limitaria severamente a aplicabilidade de avaliar biomarcadores suco gástrico para a detecção de EGC. Para aumentar o potencial de aplicação desta descoberta, podem ser introduzidos meios não endoscópicos para a amostragem de suco gástrico. Uma cápsula endogástrica [42], [43], [44] é um comprimento de 45-50 cm de fios de nylon ligado a uma cápsula continha papel absorvente. Uma cápsula pode fazer amostragem de suco gástrico mais aceitável, indolor e conveniente para os pacientes em comparação com coleção suco gástrico por endoscopia. Os níveis de aminoácidos aromáticos no suco gástrico pode ser influenciado pelo fluido e comida consumida pelo paciente. Portanto, o jejum completo em pacientes com motilidade gástrica pobres é essencial para melhorar a precisão dos ensaios de biomarcadores e detecção do câncer gástrico. Porque o tamanho da amostra deste estudo é pequeno, os estudos maiores são necessários para determinar se os aminoácidos aromáticos em suco gástrico pode ajudar na triagem de câncer gástrico em estágio inicial. Além disso, novos estudos podem identificar os valores de limite otimizados para cada marcador. Uma vez que os valores de pesquisa de diagnóstico estão identificados, novos métodos (tais como espectrometria de massa) poderia permitir a simples, rápida e de alto rendimento de detecção de aminoácidos aromáticos em suco gástrico.

Em conclusão, níveis significativamente aumentados de aromático os aminoácidos foram encontrados no suco gástrico a partir de pacientes com de fase final ou cancro gástrico-fase precoce em comparação com o grupo NGD. Uma análise de aminoácidos aromáticos podem ser um método eficaz para a detecção precoce do cancro gástrico. Se validado em um estudo em grande escala, os aminoácidos aromáticos em suco gástrico seria útil como biomarcadores para o rastreio EGC na população em geral.

Reconhecimentos

Os autores gostariam de agradecer a Qiuming Geng , Shigang Ding Qinqin Tao, Jingjing Lu, Yan Deng e todos os colegas nas salas de endoscopia da Universidade de Pequim Terceiro Hospital de auxílio na coleta de suco gástrico.

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