Stomach Health > Желудок Здоровье >  > Gastric Cancer > Рак желудка

PLoS ONE: Reverse корреляция между микроРНК-145 и FSCN1, влияющих на рак желудка Миграция и Invasion

Абстрактный

микроРНК (Миры) играют важную роль в модуляции экспрессии генов в процессах онкогенеза и развития опухоли. Предыдущие исследования показали, что микроРНК-145 вниз регулируется в новообразование желудка и связана с миграцией опухоли и инвазии. Тем не менее, как молекулярный механизм и функции микроРНК-145 при раке желудка остаются неясными. Настоящее исследование является первой демонстрацией значительного понижающей регуляции экспрессии микроРНК-145 в инфильтративного рака желудка по сравнению с расширением рака желудка. Кроме того, анализ выявил корреляции сильные обратные корреляции между микроРНК-145 и уровней экспрессии FSCN1 в инфильтративного рака желудка. Кроме того, мы показали, что микроРНК-145 непосредственно нацелен на FSCN1 и подавляет клеточную миграцию и вторжение в рак желудка. Сбивая выражение FSCN1 привело к подавлению миграции и вторжения в раковых клетках желудка, и повторно выразить FSCN1 в микроРНК-145-клеток с гиперэкспрессией изменили свою миграцию и инвазию дефекты. Таким образом, мы пришли к выводу, что микроРНК-145 регулирует клеточную миграцию и инвазию в развитии рака желудка в первую очередь непосредственно ориентации FSCN1
<р> Образец цитирования:. Чэнь Jj, Цай Уай, Лю Xw, Ло Qc, Чэнь G, Хуан Wf, и др , (2015) обратной корреляционной связи между микроРНК-145 и FSCN1 Затрагивающих рака желудка миграции и инвазии. PLoS ONE 10 (5): e0126890. DOI: 10.1371 /journal.pone.0126890
<р> Академический редактор: чжэнфына Янг, Университет штата Мичиган, США
<р> Поступило: 14 января 2015 года; Принято: 8 апреля, 2015 года; Опубликовано: 26 мая 2015
<р> Copyright: © 2015 Чен и др. Это статья открытого доступа распространяется в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution, которая позволяет неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе, при условии, что оригинальный автор и источник кредитуются
<р> Доступность данных: Все соответствующие данные находятся в пределах своих подтверждающей информации, файлов бумаги и
<р> Финансирование:. 1. Национальный фонд естественных наук Китая (грант № 81172283) ОКК (http://www.nsfc.gov.cn/). Доноры не играет никакой роли в дизайн исследования, сбора и анализа данных, решение о публикации или подготовки рукописи. 2. фонд естественных наук провинции Фуцзянь (грант № 2012D037) ОКК (http://xmgl.fjkjt.gov.cn/). Доноры не играет никакой роли в дизайн исследования, сбора и анализа данных, решение о публикации или подготовки рукописи
<р> Конкурирующие интересы:.. Авторы заявили, что не существует никаких конкурирующих интересов

Введение
<р> рак желудка имеет один из самых высоких показателей смертности для злокачественных опухолей во всем мире [1]. Усовершенствованная медицинская технология может улучшить исход рака желудка. Тем не менее, рак желудка остается второй наиболее распространенной причиной смертности от онкологических заболеваний [2], что обусловлено опухолевой инвазии и метастазированию. Вместе, инвазию и метастазирование образуют процесс, в котором перенос злокачественные опухолевые клетки из первичного сайта в других областях, а затем образуют опухоли в удаленном месте через лимфатическую канал, кровеносные сосуды или полости тела [3]. Следовательно, выяснении молекулярных механизмов, участвующих в развитии и инвазии рака желудка необходимо.
<Р> В 1977 году Мин классифицирован желудочные карцином в расширении и инфильтративные типов на основе их моделей роста и инвазивности [4]. Эти типы легко узнаваемы гистологически. Расширяя карцином растут в массовом порядке и за счет расширения приводит к образованию дискретных опухолевых узлов, тогда как инфильтративные раки имеют опухолевые клетки, которые вторгаются в индивидуальном порядке [5]. Из двух типов рака желудка, инфильтративно рак желудка является более инвазивными, чем расширяющийся рак желудка. Таким образом Такая классификация обеспечивает ссылку, чтобы отличить образцов желудочного рака клинически и облегчает детальные исследования относительно молекулярных механизмов развития рака желудка
.

MicroRNAs (Миры) играют важную роль во многих биологических процессах, в том числе онкологических процессов, путем непосредственного ингибирования экспрессия мРНК мишеней с помощью различных молекулярных механизмов [6, 7]. Кроме того, Миры подвергаются аномальным регулирование во время канцерогенеза и может выступать в качестве либо онкогенов или супрессоров опухолей [7]. Недавние исследования показали, что многие Миры влияют на пролиферацию и вторжение в рак желудка. микроРНК-21 повышающей регуляции в рак желудка и способствует пролиферации опухоли и инвазии рака желудка путем охвата PTEN [8]. В отличие от этого, микроРНК-145 подавляется при раке желудка человека [9]. Кроме того, исследования показали, что микроРНК-145 может подавлять клеточную миграцию и инвазию путем ингибирования N-кадгерина трансляции белка в клетках рака желудка [10]. Тем не менее, Kamikihara и др [11] обнаружены уровни экспрессии N-кадгерина в 146 больных раком желудка с помощью иммуногистохимии, и результаты показали, что только 31 пациентов (21%) имели N-кадгерин-положительных выражение. Таким образом, некоторые другие молекулярные механизмы MIR-145 может регулировать клеточную миграцию и вторжение в рак желудка.
<Р> FSCN1 является 55-кДа актин-связывающий белок, который связан с филоподий и формированием протрузии актина на основе, и способствует подвижность клеток, миграцию и инвазию [12, 13]. Выражение FSCN1 отсутствует или низко в нормальном эпителии, но FSCN1 избыточно экспрессируется во многих карцином, в том числе колоректального аденомы, эпителиального рака яичников и пищевода плоскоклеточного рака [14-16]. Кроме того, ряд исследований показал, что исполнение FSCN1 выражение увеличивает пролиферацию и инвазию яичников и клеток рака желудка [17, 18].
<Р> Последние исследования показали, что функции микроРНК-145 в качестве супрессора опухоли и что микроРНК-145 суперэкспрессия подавляет миграцию и инвазию при раке простаты и рака мочевого пузыря путем охвата FSCN1 [19, 20]. Кроме того, микроРНК-145 подавляет желудочную миграцию раковых клеток и вторжение ориентации N-кадгерин. Тем не менее, положительная норма экспрессии N-кадгерина в желудочном раковых тканей только 21% [10, 11]. Таким образом, определение ключевой целевой ген микроРНК-145 в регуляции желудочной инвазии необходимо.
<Р> В настоящем исследовании мы впервые обнаружили, что экспрессия микроРНК-145 был заметно понижающей регуляции в инфильтративный рака желудка по сравнению с в расширении рака желудка. Кроме того, мы предоставили доказательства того, что микроРНК-145 подавленную клеточную миграцию и инвазию в развитии рака желудка в первую очередь непосредственно ориентации FSCN1, в котором подчеркивается роль микроРНК-145 и FSCN1 в регуляции рака желудка злокачественных фенотипов.

Материалы и Методы

клинические образцы
<р> Все клинические образцы были собраны с информированного согласия пациентов, перенесших гастрэктомию в Чжуншань больницы Сямынь университета в Сямэнь (провинция Фуцзянь, Китай) с июня 2012 года по октябрь 2013 года . В общей сложности 160 пар, собранных клинических образцов включены 80 несекретных образцов желудочного рака, 40 инфильтративные образцов желудочного рака и 40 расширяющихся образцов желудочного рака. Опухоль патологический тип был подтвержден патологии экспертизы, и совпадающая нормальные желудка слизистая были собраны из более чем на 5 см от опухоли.

Этика заявление
<р> Протоколы исследований были в соответствии с этических принципов Хельсинкской декларации (1975) и были одобрены Комитетом по медицинской этике (№ 20081012) Чжуншань больницы университета Сямэнь в Сямэнь (провинция Фуцзянь, Китай) по. Мы получили письменные заявления о согласии со стороны всех участников, участвующих в данном исследовании.

Клеточные линии

MGC-803 и SGC-7901 линии рака желудка клеток человека были приобретены из Института клеточной биологии (Шанхай , Китай, http://www.cellbank.org.cn). Человеческой эмбриональной линии клеток почки 293T была получена из Американской коллекции типовых культур (АТСС, штат Мэриленд, США). МГЦ-803 и СГК-7901 клетки поддерживали в среде RPMI-1640, в то время как 293T клетки поддерживали в среде DMEM. Все носители содержали 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS), 100 ед /мл пенициллина и 100 мкг /мл стрептомицина (Invitrogen, Carlsbad, CA, США).

люциферазы анализ
<р> Клетки трансфицировали с генами люциферазы, бета-галактозидазы (β-GAL) и микроРНК-145 мимике или ингибитор микроРНК-145 (Гуанчжоу RiboBio) с использованием Липофектамин 2000 трансфекции реагента (Invitrogen). Активность люциферазы измеряли через 48 ч после трансфекции и эффективность трансфекции была нормирована на внутренней β-гал активности.

Выделение РНК и RT-КПЦР
<р> Общую РНК экстрагировали с использованием реагента TRIzol (Invitrogen ) и обратной транскрипции с M-MuLV обратной транскриптазы (Qiagen) для получения кДНК в соответствии с протоколом производителя. ПЦР в реальном времени проводили с использованием обнаружения SYBR Green основанный на Rotor-Gene 6000 инструмент (Корбетта Life Science) в соответствии с инструкциями производителя и с использованием пары праймеров, перечисленных в таблице 1. микроРНК-145 и U6 праймеры были получены от компании Qiagen. GAPDH или U6 эндогенного контроля был использован в качестве внутреннего стандарта, и результаты были рассчитаны с использованием △△ CT (где СТ пороговый цикл) метод.

плазмида строительство
<р> Праймеры, используемые для строительство люциферазы репортеров и плазмид, перечислены в таблице 1. человеческого FSCN1 3 'нетранслируемой области (UTR) амплифицировали из MGC-803 кДНК с помощью ПЦР-амплификации с LA Taq ДНК-полимеразы (Takara) и клонируют ниже по потоку от кодирования люциферазы последовательность в pMIR-REPORT (Амбене) вектора на сайтах рестрикции SacI и MluI (Promega) построить человеческую FSCN1-3'UTR-люциферазы репортер. Мутации были введены в микроРНК-сайтов связывания с использованием QuikChange мутагенеза Kit (трансгенной). Для получения плазмид экспрессии микроРНК-145 и FSCN1, последовательности, амплифицировали с помощью ПЦР и клонировали в сайты SpeI /NheI и сайты XbaI /NdeI, соответственно, PLV-cs.4.0 основного вектора (Promega). Для получения плазмиды FSCN1 интерференции, две пары последовательностей отжигали и субклонировали в PLKO.1 в соответствии с протоколом производителя.

Лентивирусов производство и трансфекция
<р> HEK293T клетки высевали на 6-луночного вставки через 24 часа перед трансфекцией. Плазмиду экспрессии микроРНК-145, FSCN1 shRNA плазмида или экспрессии FSCN1 плазмиду затем котрансфицируют упаковки плазмид (нск и PCMV-VSV-G), используя реагент для трансфекции Липофектамин 2000 (Invitrogen). Вирусные супернатанты собирали через 48 ч после трансфекции, центрифугировали при 3000 г в течение 15 мин и затем фильтровали через 0,45 мкм фильтры (Millipore). Вирусные титры были определены в трансдукции клеток HeLa в серийных разведений и анализа экспрессии GFP с помощью проточной цитометрии. МГЦ-803 клеток или 7901 клеток на 50-70% сплошности были инфицированы вирусным надосадочную жидкость, содержащую 10 мг /мл полибрена в течение 24 ч. Свежую среду затем добавляли в инфицированных клетках, которые позже были выбраны с пуромицин.

Миграция клеток и инвазию анализа
<р> Клетки (3х10 5) высевали на 8,0 мкм размер пор Бойденом камеры (Transwell, Corning Life Sciences, Актон, штат Массачусетс, США) либо покрытые 10 мкг Матригель (BD Bioscience, Bedford, MA, США) на лунку (для вторжения анализах) или влево без покрытия (для миграции анализов) в бессывороточной среду, содержащую 10 г /л бычьего сывороточного альбумина. Среду, содержащую 10% FBS служившую хемоаттрактанту в нижней камере. Номера вторгшиеся клетки были удалены с ватным тампоном после 36 ч (для вторжения анализов) или 20 ч (для миграции анализов). Вторгся клетки окрашивали гематоксилином (HE) и подсчитывали. Данные представлены как среднее ± стандартное отклонение от трех отдельных экспериментов

вестерн-блоттинга
<р> Белки экстрагировали эритроцитах буфера для лизиса (УДР;. 50 мМ Трис, 140 мМ NaCl, 0,5% NP- 40 и 100 мМ NaF (рН 7,6)), содержащего 1 мМ фенилметансульфонилфторид (ФМСФ, Sigma-Aldrich, США). Каждый образец разделяли на 10% геле SDS-PAGE, а затем переносили на поливинилиденфторид (ПВДФ) мембран. Мембраны блокировали 5% молоком и инкубируют с первичным кроличьей античеловеческой FSCN1 антитела (1: 3000; Cell Signaling Technology, США) или мышиного антитела против человеческого GAPDH (1: 5000; Sigma-Aldrich) антитела в течение ночи при температуре 4 ° С , Затем мембраны инкубировали с соответствующим пероксидазой хрена (HRP) вторичные антитела (Thermo Fisher Scientific). Полосы были разработаны с использованием усовершенствованную хемилюминесценции (ECL) системы (Amersham Biosciences, Бакингемшир, Великобритания). Белок GAPDH, был использован в качестве нагрузочного контроля.

Статистический анализ
<р> Данные выражены в виде среднего значения ± SD. Статистическая значимость была проанализирована с Т-тест Стьюдента. Корреляция между уровнями микроРНК-145 и уровней экспрессии мРНК FSCN1 /белка в раковых заболеваний желудка человека была рассчитывается путем корреляции Спирмена. Все статистические анализы были рассчитаны с использованием GraphPad Prism статистики программного обеспечения (GraphPad Software). P
&л; 0,05 считалось статистически значимым (NS, не имеет существенного значения; * P
&л; 0,05; ** P
&л; 0,01; *** P &
л;. 0.001)

Результаты

Сильная обратная зависимость между экспрессией микроРНК-145 и его предполагаемому мишень, FSCN1, при раке желудка инфильтративный типа человека
<р> Мы использовали базу данных TargetScan (http://www.targetscan.org) для определения 3 'НТО конкретных целевых мРНК микроРНК-145, которые могут регулировать миграцию и инвазию клеток рака желудка. Из всех предсказанных мРНК, мы выбрали FSCN1, который ранее был замешан в миграции опухоли и инвазии. FSCN1 также высоко консервативные последовательности на УТР 3 ', которые дополняют последовательности семян микроРНК-145.
<Р> Во-первых, мы исследовали, является ли соотношение MIR-145 и FSCN1 может быть клинически значимым путем измерения экспрессии уровни /белка микроРНК-145 и мРНК FSCN1 в нормальной /опухоли парные образцы от 80 пациентов с раком желудка. Статистический анализ показал значительную обратную корреляцию между экспрессией микроРНК-145 и экспрессии FSCN1 мРНК /белка в 80 пар клинических образцов (рис 1А и 1В).

Мин классифицирован желудочных карцином в расширяющейся типа и инфильтративный тип на основе моделей роста и инвазивности, и существует корреляция между классификацией Минга и клиническим прогнозом [5]. Таким образом, были выбраны 40 инфильтративные Образцы желудочного рака и 40 расширяющиеся Образцы желудочного рака, как было указано представителем ОН окрашивания (Фиг.2А). В этой классификации, клетки расширяющейся карциномы, в силу ограниченности их проникающей способности, агрегатного и производят очерченную массу в виде полипоидные и fungating поражений. В противоположность этому, клетки карциномы инфильтративно распространилась периферически и широко, и масса опухоли не образует. Мы тестировали экспрессию микроРНК-145 и мРНК FSCN1 при раке желудка по сравнению с соседней нормальной слизистой оболочки желудка с помощью ПЦР в реальном времени. микроРНК-145 был заметно понижающей регуляции в инфильтративно рака желудка по сравнению с расширением рака желудка, в то время как экспрессия мРНК FSCN1 была заметно повышающей регуляции (фиг.2В). Мы отобрали 10 инфильтративные образцов желудочного рака и 10 расширения образцов желудочного рака вместе с прилегающими к ним нормальных тканей для анализа экспрессии КПЦР и вестерн-блоттинга. Общие уровни экспрессии микроРНК-145, были ниже, в частности, в инфильтративных образцов желудочного рака по сравнению с прилегающей нормальной слизистой оболочки желудка. В отличие от этого, общие уровни мРНК /белок, FSCN1 были выше в инфильтративно рака желудка (фиг.2С). Следовательно, экспрессия микроРНК-145 и его предполагаемому мишень FSCN1 была сильная обратная зависимость в развитии рака желудка инфильтративный типа человека, тем самым предполагая, что существенно важную роль микроРНК-145 и FSCN1 в желудочном инвазии рака.

MIR -145 непосредственно нацелен FSCN1 в клеток рака желудка
<р> Чтобы определить, является ли микроРНК-145 регулирует экспрессию FSCN1 в клеток рака желудка, мы сначала повышающей регуляции уровня MIR-145 в рака желудка MGC-803 клеток с использованием лентивирус на основе вектора. Затем мы проводили КПЦР, которое показало, что микроРНК-145 избыточная экспрессия значительно понижающей регуляции уровня мРНК FSCN1 (Фиг.3А), и западные эксперименты блот подтвердили, что уровень белка FSCN1 также подавляются в микроРНК-145-избыточно экспрессирующих клеток (фиг.3В ). И наоборот, нокдаун уровней микроРНК-145 с использованием ингибитора микроРНК-145 привело к значительно индуцированной экспрессии /белка FSCN1 мРНК в обоих SGC-7901 и клеток MGC-803 (рис 3C). Мы произвели светлячка вектор люциферазы репортер, содержащий UTR в FSCN1 3 'и затем совместно трансфицированных клеток MGC-803 с микроРНК-145 мимике или ингибитор микроРНК-145, чтобы исследовать, если FSCN1 является прямой мишенью MIR-145. Лизаты анализировали на активность люциферазы 24 ч после трансфекции. Анализ люциферазы показали, что микроРНК-145 подражает привело к приближенному снижению активности 55%, в то время как ингибитор микроРНК-145 в клетках МГЦ-803 увеличилась активность люциферазы на 62% по сравнению с микроРНК-отрицательного контроля (рис 3D). Кроме того, мы мутировали три основных мнимых элементов распознавания микроРНК-145 (MRes) в 'UTR через QuikChange мутагенеза FSCN1 3 для использования в люциферазы (рис 3D). Результаты показали, что регуляторные эффекты микроРНК-145 мимике или MIR-145 ингибитора были в основном аннулированы, которые подтвердили, что глушителей эффекты MIR-145 на FSCN1 были отменены в результате нарушения взаимодействия микроРНК-MRE (рис 3D). В совокупности эти исследования послужили убедительные доказательства того, что FSCN1 является непосредственной мишенью микроРНК-145 в клетках рака желудка.

Репрессии FSCN1 необходимо для MIR-145 для ингибирования миграции и инвазии клеток рака желудка
<р> рак желудка MGC-803 и SGC-7901-клетки, стабильно трансфицированные с двумя различными FSCN1 shRNAs для ингибирования FSCN1, чтобы лучше понять потенциальную роль FSCN1 в микроРНК-145-опосредованной миграции опухоли и вторжения. Эффективность интерференции FSCN1 shRNAs была подтверждена с помощью Вестерн-блот-анализа (фиг 4A и 4B). Результаты Transwell Анализ показал, что способность клеток мигрировать и вторгнуться был сильно подавлен после того, как сбивание экспрессию FSCN1 в MGC-803 и СГК-7901 клеток по сравнению с клетками отрицательного контроля (фиг.4С и 4D), тем самым предполагая существенную роль из FSCN1 в этих процессах.
<р> микроРНК-145, как известно, подавляет миграцию и инвазии многих видов рака, включая рак желудка [10, 19, 21]. Как и следовало ожидать, принудительная экспрессия микроРНК-145 привело к значительно уменьшилось миграции и вторжения ставок в MGC-803 и SGC-7901 клеток. Кроме того, одновременное повторное выражение FSCN1 под угрозу микроРНК-145-подавленное миграции клеток и вторжения способность почти полностью в обоих микроРНК-145-трансфицированных MGC-803 и SGC-7901 клеток (рис 5А и 5В). С другой стороны, мы использовали FSCN1 shRNA для ингибирования экспрессии FSCN1 в MIR-145 ингибиторной-трансфицировали MGC-803 и SGC-7901 клеток. Нокдаун FSCN1 полностью отменила микроРНК-145 ингибитор опосредованной активации миграции клеток и вторжения, тем самым предполагая существенную роль FSCN1 в этом процессе (рис 5C и 5D). В совокупности, приведенные выше результаты показали, что подавление FSCN1 необходимо для MIR-145 для ингибирования миграции и инвазии клеток рака желудка.

Обсуждение
<р> Дерегуляция Мирс участвует в различных человека рака, включая рак желудка человека. Однако молекулярные механизмы, с помощью которых Mirs модулируют процесс канцерогенеза и поведение раковых клеток, не были полностью определены. Выражение Дифференциальный микроРНК в опухолях по сравнению с прилегающими к ним нормальными тканями или между группами образцов опухолей с благоприятным или плохим клиническим исходом был использован для генерирования подписей Mir с потенциальным прогностическое и /или прогностическую ценность в определенных типов рака. Тем не менее, привлечение аберрантно выраженными Мирс при раке желудка человека остается в значительной степени неизученными. Предыдущие исследования показали, что микроРНК-145 вниз регулируется в различных злокачественных опухолей человека, включая рак молочной железы, рак легкого и рак желудка [9, 22, 23]. Lu и др [24] обнаружили, что функции микроРНК-145 в качестве супрессора опухоли и цели двух онкогенов, а именно ANGPT2 и NEDD9, в почечно-клеточной карциномы. Другое исследование показало, что микроРНК-145 подавляет клеточную миграцию и инвазию путем ингибирования N-кадгерина трансляции белка в клетках рака желудка [10]. Тем не менее, Kamikihara и др [11] обнаружили, что только 21% больных раком желудка имеют N-кадгерина-положительное выражение, анализировали с помощью иммуногистохимии. Таким образом, альтернативный молекулярный механизм, лежащий в основе MIR-145 участвует в регуляции клеточной миграции и инвазии рака желудка.
<Р> В настоящем исследовании мы подтвердили, что микроРНК-145 понижающей регуляции в желудочном раковых тканей по сравнению к смежной нормальной слизистой оболочки желудка, что согласуется с предыдущими результатами [9]. В попытке определить новые цели вниз по течению от MIR-145, мы использовали базу данных TargetScan для проведения экспериментов скрининга. Из нескольких кандидатов, мы выбрали FSCN1 для дальнейших экспериментов, поскольку FSCN1 было обнаружено, играют важную роль в миграции опухоли и инвазии. Несколько линий доказательств указывают на то, что FSCN1 является прямой нижестоящей мишенью MIR-145. Во-первых, FSCN1 содержит высоко консервативные последовательности на UTR 3', комплементарные последовательности семян микроРНК-145. Во-вторых, обратная корреляция между микроРНК-145 и FSCN1 был найден в парных образцах от больных раком желудка. И, наконец, при классификации клинических образцов в расширение типа и инфильтративный тип, основанный на классификации Мин, мы обнаружили, что микроРНК-145 замечательно вниз регулируется в инфильтративного рака желудка по сравнению с расширением рака желудка. В то же время, более сильная обратная корреляция также была обнаружена между уровнями экспрессии микроРНК-145 и FSCN1 в инфильтративного рака желудка. Настоящее исследование пролить новый свет на корреляции между микроРНК-145 и FSCN1 в инфильтративного рака желудка. В предыдущем исследовании, Лорен разделить рак желудка на следующие два типа: тип кишечный и диффузный тип [25]. Кишечный рак тип описывается как железистой опухоли, напоминающие карциномы ободочной кишки, и диффузный рак типа состоит из одиночных или небольших скоплений клеток без образования желез. Типы опухолей в классификации Лорен и Мин близко соответствуют друг другу. Большинство расширяющиеся опухоли имеют признаки рака кишечного типа, и наиболее инфильтративные опухоли являются диффузные раки типа [5]. Тем не менее, значительное количество желудочных карцином не могут быть отнесены к кишечного типа или диффузного типа, в том числе недифференцированных видов рака, которые не проникали диффузно и железистых видов рака, которые инфильтрируют диффузно. Кроме того, обнаружение раннего рака желудка с использованием классификации Lauren является относительно сложным, поскольку на ранней стадии рака диффузного типа, по определению, не диффундируют. Тем не менее, классификация Мин может решить эти проблемы [5]. В классификации Мин, закономерности распределения клеток четко указывают на принципиальную разницу в их потенциал роста, а также способности проникновения и вторжения. Как инфильтративный рак желудка более агрессивны, чем расширение рака желудка, эти результаты свидетельствуют о том, что микроРНК-145 и FSCN1 оба играют решающую роль в желудочном инвазии рака.
<Р> Хотя несколько сообщений о причастности регулирования FSCN1 по Мирс во многих карцином [19, 20, 26], насколько нам известно, ни один отчет не предположил, что FSCN1 является прямой мишенью MIR-145 при раке желудка. В данном исследовании мы подтвердили, что микроРНК-145 репрессирует экспрессию FSCN1 и непосредственно нацелен на 3 'UTR из FSCN1 в желудочном раковых клеток. Кроме того, одновременное повторное выражение FSCN1 скомпрометирована микроРНК-145-подавлял миграцию клеток и способность вторжения почти полностью микроРНК-145 трансфицировали MGC-803 и СГК-7901 клетки, что указывало, что подавление FSCN1 необходимо для Mir -145 для ингибирования миграции и инвазии клеток рака желудка. Поэтому FSCN1 является важным объектом вниз по течению MIR-145 в регуляции желудочной инвазии.
<Р> Таким образом, настоящее исследование выявило, что микроРНК-145 в первую очередь вниз регулируется в инфильтративного рака желудка и что экспрессия микроРНК-145 и экспрессия FSCN1 имеют сильную обратную корреляцию в инфильтративного рака желудка. Функционально, мы показали, что микроРНК-145 подавляет клеточную миграцию и инвазию в рак желудка в первую очередь путем непосредственного таргетинга FSCN1. Следовательно, восстановление экспрессии микроРНК-145 могут быть изучены в качестве альтернативной стратегии лечения против рака желудка.

Рак желудка

Other Languages