Ploche ONE: Objav nádorových markerov pre rakoviny žalúdka podľa Proteomics

abstraktné

Karcinóm žalúdka (GC) má vysokú mieru chorobnosti a úmrtnosti medzi rôznymi rakoviny po celom svete. Vývoj neinvazívnych diagnostických metód a technológií pre sledovanie výskytu GC je naliehavá, a hľadanie spoľahlivých biomarkerov je štúdium considered.This určené na priame objaviť diferenciálnej biomarkerov z GC tkanív dve dimenzie-diferenciálnej gélovej elektroforézy (2D-DIGE), a ďalej overiť expresie proteínov westernovým prenosom (WB) a imunohistochémia (IHC) .Pairs z GC tkanív (rakovina žalúdka tkanív a priľahlé normálneho tkaniva) získané z operácie bol vyšetrovaný pre 2D-DIEG.Five proteínov wereconfirmed podľa WB a IHC, vrátane glukózy -regulated proteín 78 (GRP78), glutatión s-transferáza pi (GSTpi), apolipoproteín AI (Apo AI), alfa-1 antitrypsín (A1AT) a gastrokine-1 (GKN-1). Z výsledkov, GRP78, GSTpi a A1ATwere significantlyup-regulované a down-regulované u pacientok s karcinómom žalúdka. Okrem toho, GRP78 a Apo AI boli korelované s A1AT na štúdium proteínu expressions.This predpokladá tieto proteíny môžu byť kandidátmi spoľahlivých biomarkerov rakoviny žalúdka

Citácia :. Wu JY, Cheng CC, Wang JY, Wu DC, Hsieh JS , Lee SC, et al. (2014) Objav nádorových markerov pre rakoviny žalúdka podľa Proteomics. PLoS ONE 9 (1): e84158. doi: 10,1371 /journal.pone.0084158

Editor: Salvatore V. Pizzo, Duke University Medical Center, Spojené štáty |

prijatá: 19.srpna 2013; Prijaté: 12.11.2013; Uverejnené: 03.01.2014

Copyright: © 2014 Wu et al. Toto je článok o otvorený prístup distribuovaný pod podmienkami Creative Commons Attribution licencie, ktorá umožňuje neobmedzené použitie, distribúciu a reprodukciu v nejakom médiu, za predpokladu, že pôvodný autor a zdroj sú pripísané

Financovanie :. Toto dielo bola podporená dotácií NSC96-3111-P-042A-004-Y, NSC100-2314-B-037-040, ako aj National Science rady v Čínskej ľudovej republike. Táto práca bola tiež podporená Kaohsiung lekárske univerzitnej nemocnice (KMUH97-7R32, KMUH98-8R33). Platcovia mal žiadnu úlohu v dizajne štúdie, zber a analýzu dát, rozhodnutie publikovať, alebo prípravu rukopisu

Konkurenčné záujmy: .. Autori vyhlásili, že žiadne konkurenčné záujmy neexistujú

Úvod

Hoci theprevalence rakoviny žalúdka klesá a mení geograficky, zostáva jedným z najčastejších nádorových ochorení v ázijských krajinách a je štvrtým najčastejšie sa vyskytujúce rakovina (9% všetkých prípadov rakoviny) po celom svete. Miery incidencia vekovo štandardizovaná (ASR) sú väčšie ako 20 100000 vo vysoko rizikových krajinách, ako je Čína, Japonsko a Kórea [1], [2], [3]. To je tiež druhou najčastejšou príčinou úmrtí na rakovinu u oboch pohlaví na celom svete (737,000 úmrtia, 9,7% z celkového počtu). Vo východnej Ázii, boli úmrtnosť bola odhadnutá ako asi 28,1 na 100.000 u mužov a 13,0 na 100.000 žien, whilein Severnej Amerike, sú asi 2,8 až 1,5, respektíve [4].

prežitie päťročných sa v rozmedzí od 90% do menej ako 5 percent, a to najmä v závislosti na fáze diagnózy [5], [6] .Ak rakovina žalúdka môže byť detekovaná a spracuje sa v skorých štádiách, prežitie päť rokov rateis lepšia ako 90%; Avšak, tam isno zdanlivý alebo špecifický príznak v ranej fáze žalúdočnej cancer.Thus, čoskoro detectionof rakovinou žalúdka becomesmore difficult.Although séra pepsinogénu (PG) testssuch ako nízka koncentrácia CHZO a /alebo nízky pomer PGI /II boli svedčiace skríningové testy sú vo vysoko rizikových krajinách, ako je Japonsko, ktoré weregood ukazovatele atrofickou gastritídu diagnostický, ale skôr markersof rakovinou žalúdka [7] - [9] .Essentially, endoskopia má beenthe sľubným nástrojom s 2,7 až 4,6-krát vyššia miera detekcie než bária štúdií [10]. Avšak, čoskoro žalúdka diagnóza rakoviny pomocou endoscopydependson odborné zručnosti.

Niektoré neinvazívne biomarkery pre diagnostiku alebo sledovanie gastrointestinálne a pečeňové tumorshave neboli hlásené. Napríklad, alfa-fetoproteínu (AFP), je jedným z klinicky užitočných biomarkerov pre diagnózu a sledovanie hepatocelulárneho karcinómu (HCC) .AFP bola zvýšená nad 20 ng /ml v jednej štúdii, vo viac ako 70% pacientov s HCC [11]. Podľa záverov Európskej asociácie pre štúdium pečene (easly) konferenciu o Barcelona-2000, HCC mohla byť diagnostikovaná bez prípadoch biopsyin kde AFP je s uzlík väčším než 2 cm väčší ako 400 ng /ml, čo je dôkazom arteriálna hypervaskularizací u pacientov s cirhózou [12] .Incolorectal karcinóm (CRC), predoperačné karcinoembryonální antigén (CEA) úroveň je veľmi významným prognostickým kovariátov a je odporúčané American Society of Clinical Oncology (ASCO), ktoré by malo byť testované pred operáciou na poskytovať prognostické informácie [13]. Sériovej zvýšenie hladiny CEA naznačujú vyššiu možnosť opätovného výskytu CRC. Avšak, neexistuje spoľahlivý biomarker pre rakovinu žalúdka.

Preto hľadanie spoľahlivých biomarkerov rakoviny žalúdka, je pre klinickú prax veľmi dôležitá. Cieľom tejto štúdie bolo zistiť, spoľahlivé proteínových biomarkerov z zladených tkanív (nádoru a priľahlých normálnych tkanív) o dve dimenzie-rozdiel gélovej elektroforézy (2D-DIGE) a identifikáciu proteínov laserová desorpcia /ionizácia za účasti matrica-zobrazovacie hmotnostná spektrometria (MALDI -IMS).

materiály a metódy

Tkanivové vzorky

vzorky tkaniva boli získané po informujú súhlasy boli uzavreté. Spárované samplesincluding tumoru a priľahlé normálne pacienti tissuesfrom boli odvodené z endoskopických biopsiou alebo surgery.The nádorových tried boli stanovené podľa americký Joint Commission rakoviny Lešenie (AJCCS) systém patológov pod metylénovej modrej staining.Clinical informácií pacientov bolo zaznamenané, vrátane vek, pohlavie, typ nádoru, invázia a prežitie. Navyše koncentrácie CEA v sére bola tiež meraná rádioaktívnym imunoanalýza v bežnej lekárskej diagnosis.The individualsenrolled v tejto štúdii dali písomný informovaný súhlas k publikácii Tieto prípadové štúdie details.This bola schválená Institutional Review Board of Kaohsiung Medical University Chung- Memorial Hospital Ho (KMUH-IRB-980382).

Two elektroforéza rozmer-rozdiel gél

One (tabuľka 1) pár vzoriek tkanív washomogenized (PRO 200, Bertec, Taiwan) v priemernom objeme lyzačného pufra (50 mM Tris-HCl, 8M močoviny, 4% (hmotnosť /objem), 3 - [(3-cholamidopropyl) dimethylammonio] -1-propansulfonát a pH 8,5). Individuálne 50 ug vzorky proteín bol označený 400 pmol Cy3 alebo Cy5 samostatne po dobu 30 minút (obr. 1B). Okrem toho, zdieľaná zmes vzorky (100 ug) bol označený 800 pmol CY2 ako vnútorného štandardu v rovnakom čase. Následne označovanie reactionswere zastavená inkubáciou 1 ul 10 mM lyzínu pufra po dobu 30 minút, potom jeden-násobným objemom vzorkového pufru (8 M močoviny, 20 mM dithiothreitolu, 4% (hmotnosť /objem), 3 - [(3 -Cholamidopropyl) dimethylamonio] -1-propansulfonát, 0,5% (objem /objem) pufra IPG a málo Brómfenolová modrá) bol added.The prvý separácia, izoelektrické zaostrovanie, bola vykonaná za použitia viečko zaťaženie na gél prúžkov (7 cm, pI 4- 7) pri 20 ° C pod vedenie 15000voltage pracovných hodín (IPGphor systému, GE Healthcare). Po dosiahnutí rovnovážneho stavu s dodecylsulfát sodným, druhý separationwas vykonáva using4-12% dodecylsulfát sodný v polyakrylamidovom gelelectrophoresis. Gélové snímky boli nasnímané (Typhoon TRIO Variabilný režim Imager, GE Healthcare) s použitím 488, 532 a 633 nm lasery s emisným filtrom 520, 532 a 670 nm, resp. Všetky obrazy boli analyzované DeCyder 6,5 softvér (GE Healthcare) vyberte diferenciálnej proteínov, ktoré wereselected v závislosti onthe umiestnenie pod významnú hodnotu 0,05 podľa Studenta t
-test.

In-gél Tryptický trávenie

gély zafarbené SYBR Ruby (sigma) boli následne odfarbí 10% metanolu a 7% kyseliny octovej v deionizovanej vode po dobu presne 30 min.The viditeľné škvrny gély pod UV transiluminátoru (Spectroline) boli použitý kopať za zaujímavé proteíny ručne. Tieto gélové častice boli premyté 100 ul 25 mM hydrogénuhličitanu amónneho v 50% acetonitrile po dobu 15 minút, a potom sa premyje v 200 ul 25 mM hydrogénuhličitanu amónneho v deionizovanej vode po dobu 15 minút dvakrát, a potom, dostatočne acetonitrilu sa pridá k zmenšeniu gélové častice. Po vysušení sa, individuálne gél particleswereincubated s 3 ul 20 ng /ul trypsínu v 25 mM hydrogénuhličitanu amónneho pri teplote 4 ° C po dobu 1 hodiny a následne sa 3 ul 25 mM hydrouhličitanu amónneho sa pridá k trávenie proteínov pri teplote 56 ° C počas 1 hodina. Po štiepenie v gélu, 2 ul 100% acetonitrilu s 1% kyseliny trifluóroctovej sa pridá k riešeniu a potom boli vzorky podrobia pôsobeniu ultrazvuku po dobu 10 minút k uvoľneniu peptidov z častíc gélu.

Hmotnostné spektrometrická analýza pre identifikáciu proteínov

Každé riešenie proteín štiepený trypsínom sa zmieša 1: 1 10 mg /mlof α-kyano-4-hydroxyskořicové kyseliny sa rozpustí v 50% acetonitril /0,1% kyselina trifluóroctová, a nanesie na AnchorChip MALDI cieľ (Bruker Daltonics GmbH , Brémy, Nemecko) do sucha. Peptidy boli analyzované pomocou MALDI-TOF /TOF UltraflexIII (Bruker Daltonics) pod 20 kV s pozitívnym modelu, a údaje o vrcholové boli prenesené do FlexAnalysis ™ software 3.0 (Bruker Daltonics) pre pokročilých výpočet a kalibrácie. MASCOT 2,2 (Matrix Science) bol použitý tak, aby zodpovedali peptidy s NCBI a Swiss-Prot databázy pre identifikáciu proteínov. Nastavenie bol obmedzený na ľudský taxonómie parameters.Meanwhile, carbamidomethyl cysteín bol použitý ako pevná modifikácie, a oxiduje metionín ako variabilný modifikácie. Pravdepodobnosť (P), bola založená na mowse skóre počítané od -10 x log (P). Proteín skóre vyššie ako 56 bol významný ( p
menšie ako 0,05). Okrem toho, jeden z hlavných peptidových vrcholov, ktoré sú na spektra bola použitá pre potvrdenie rovnaké výsledky pomocou identifikácie aminokyselinové sekvencie, ktorá sa nazýva metóda peptidový fragment fingerprinting.

Western blotting

párov vzoriek tkaniva boli homogenizované (pre 200, Bertec) v lyzačním pufri (10 mM fosforečnan sodný, 0,9% chloridu sodného, ​​1% Triton-X100, pH 7,4) a inkubuje na trepanie pri 4 ° C po dobu 1 hodiny. Po zbavenie sa vyzrážané pelety vysokorýchlostné centrifugáciou (10000 otáčok za minútu, 5 minút), boli pridané pipetovanie supernatanty sa vzorkovým pufrom (10 mM fosforečnanu sodného, ​​0,9% chloridu sodného, ​​8 M močoviny, 30% glycerolu, 2 % dodecylsulfát sodný, 0,1% β-mercaptoetanolu a 0,1% brómfenolovej modro) od 1 1: pomeru a varí pri teplote 100 ° C po dobu 5 minút pre proteín denature.Approximately 20 ug každej vzorky proteínu boli naložené na jednotlivé siete 4- 12% dodecylsulfát gélová elektroforéza sulfát-polyakrylamid (SDS-PAGE, Invitrogen). bol použitý iblot blotting systém suchých (Invitrogen) pre premenu proteínov k polyvinylidénfluoridu (PVDF) membránu na báze iónov prúdiace spolu s medenou elektródou. Po použití 0,5% mlieko blot na PVDF membránu po dobu 30 minút, bol pridaný theindividual primárnej protilátka (2 ug /ml) po inkubácii po dobu 2 hodín pri trepanie. Konzistentné sekundárnej protilátky konjugovanej s chrenovou peroxidázou (HRP) (2 ug /ml) boli inkubované po dobu 1 hodiny pri trepanie po sebe. Medzi inkubovaného procesov, repeatedlywashings PBS pufra (10 mM fosforečnanu sodného, ​​pH 7,4 a 0,9% chlorid sodný) weredone. Bola vykonaná detekčný systém ECL (Millipore), a obrazy boli získané Imaging System (Gel Doc XR System, Bio-Rad) v závislosti na priemernom čase skúmanie.

Imunohistochémia

Imunohistochémia bola performedusing štandardné peroxidáze na báze metódy farbenia. Vzorky tkaniva boli vyrezané pomocou kryostatu (HM525, Microm) .Fresh Tkanivové rezy (10 um) na lyzínom potiahnutá sklíčka bola driedon vykurovacieho telesa pri teplote 37 ° C a následne ponoriť sekvenčné 75%, 95% a 100% etanolu po dobu 1 minúta pre fixáciu bielkovín. Stručne povedané, endogénne aktivita peroxidázy bola zastavená 3% peroxidu vodíka po dobu 10 minút. Antigén epizóda bola vystavená ponorením tkaniva snímku v 10 mM kyseliny citrónovej vo vriacej vode po dobu 25 minút. Po sebe nasledujúce inkubácie s jednotlivými primárnou antibodyandthe HRP-konjugované sekundárnej protilátky bolo vykonané pre jednotlivé 1 hodinu pri trepanie. Súprava AEC (Sigma) bol použitý na farbenie tkanív, a operácia nasledovala priložený manuál. Stručne povedané, themixed roztok 2,5 M acetátového pufra, AEC chromogénne (3-amino-9ethylcarbazole) a 3% peroxidu vodíka wasperformed okamžite a následne inkubované s tkanivom slides.The obrazových snímok farbenie bolo pozorované a získané v rámci mikroskopia (BX51, Olympus) .

štatistika analýza

štatistický software SPSS bol vykonaný výpočet význam podľa študenta t-test
a korelácia medzi GRP78, GSTpi, A1AT, Apo AI a GKN- 1. Significantdifference ( p
hodnota) bola prijateľná za menej ako 0,5.

Výsledky

biomarkery objav na základe 2D-DIGE

rakovinou žalúdka tkaniva boli analyzované o 2D-DIGE a v porovnaní s párovými normálneho tkaniva k hľadaniu predpokladaných biomarkerov rakoviny žalúdka. Rozdiely proteinexpressions väčšia ako 1,2 násobne boli domnelé kandidátmi. Obraz gél bol prezentácia mieste proteínov značený CY-farbív (viď obr. 1). Pätnásť proteíny by mohli byť identifikované, vrátane glukózy a regulovaný proteín 78 (GRP78), tepelného šoku príbuznú 71 kDa proteínu (HSC70), proteín disulfid izomerázy A3 (PDIA3), mitochondriálnej ATP syntázy podjednotky beta (ATPB), proteín disulfid isomeráza súvisiace proteín 5 (PDIRP5), gastricsin, glutatión s-transferáza pi (GSTpi), apolipoproteín AI (Apo AI), alfa-1 antitrypsín (A1AT) a gastrokine-1 (GKN-1) .V 3 duplikované opakuje, niektoré identické proteíny boli nájdené v rôznych miestach gélu a vylúčená podľa podozrenie na post-translačný modifikácie. A konečne, päť proteínov, vrátane GRP78, GSTpi, Apo AI, A1AT a GKN-1 boli potvrdené a ďalej overená ako domnelé markerov rakoviny žalúdka. Podrobné porovnanie podľa stereopicture a rozšírené gélové imageswere znázornené na obrázku 2.

westernovým prenosom a štatistická analýza

Twelvepairs tkanív u pacientov s karcinómom žalúdka boli použité ako validačnej skupine. Štyri pacienti boli etapa I, 3 pacienti boli etapa II, 2 pacienti boli štádium III a 3 pacienti boli štádium IV. Klinické údaje boli uvedené v tabuľke 1.Five proteínov (GRP78, GSTpi, Apo AI, A1AT a GKN-1) boli potvrdené výsledky Western blotting.Amongthe, GRP78 a GSTpiwere significantlyup-regulované, zatiaľ čo A1AT bola významne down-regulované v žalúdočných rakovinové tkanive v porovnaní s normálnou tkanív (obr. 3) .Pre GSTpi, nineout z 12 pacientov (75%) bola up-regulované v proteínových výrazy tumortissues; na druhej strane, 10 z 12 pacientov (83%) sú down-regulované A1AT proteín expression.Regarding vzťah medzi proteínovými výrazov a štádiách, GRP78 má tendenciu k zvýšeniu stupňa I do fázy IValthough žiadna štatistická významnosť možno nájsť. Expresie GSTpi a A1AT neboli korelované s klinickými fázou (obrázok 4)

Je zaujímavé, že proteínové prejavy GRP78 v týchto dvojíc tkanív zodpovedal, že Apo AI (r ^{. 2: -0,61, p Hotel < 0,01) a A1AT (r 2: -0,49, p Hotel < 0,05) (Obrázok 5) .. Medzitým sa expresia proteínu Apo AI bola v korelácii s tým A1AT (r 2: 0,62, p
< 0,01, obr. 4). Výsledky ukázali, že tieto tri domnelé biomarkery, GRP78, Apo AI a A1AT, boli spojené medzi sebou v expresiu proteínu. Na rozdiel od toho GSTpi a GKN-1 sa zdalo, že je nezávislý na expresiu proteínu.}

Imunohistochémia

DespiteGRP78, GSTpi a A1AT je statisticallydifferent výrazne sa výrazovým vývoj u iných proteínov, bol rovnaký ako pozorovaní v 2D-DIGE experimentu. Imunohistochémia bola použitá na overenie získaných výsledkov z western blotting experimentu. GRP78, GSTpi, Apo AI, GKN-1, a A1AT boli overené v žalúdočných rakovinových tkanivách a non-rakovinové tkanivá, ako je znázornené na obr proteínových výrazoch 6.Doba v pároch tkanív sú v súlade s pozorovaním v western blotting. Konkrétnejšie, up-regulované proteíny, GRP78 a GSTpi, bola špecificky sa nachádza na adenokarcinóme žalúdka buniek. Na druhej strane, sú down-regulované proteíny vrátane Apo AI a A1AT boli prítomné na normálnych žalúdočných žliaz. Ďalšie down-regulovaná proteín, GKN-1, bolo ukázané ako ten, ktorý sa objavil na sliznicu žalúdočné tkaniva.

Diskusia

Je dôležité mať biomarkerov pre diagnostiku a následnú kontrolu žalúdočné cancer.However, karcinoembryonální antigén (CEA), sacharidy antigén (CA19-9) a CA72-4 sa bežne používajú v klinickej practices.The štúdie, ktorej cieľom je vydať predpokladaných biomarkerov porovnaním rozdielovej proteíny medzi prispôsobeným nádorových a normálnych tkanivách. potom sa tieto domnelé biomarkery boli skúmané validácia group.Five domnelej proteíny, vrátane GRP78, GSTpi, Apo AI, A1AT a GKN-1, boli identifikované dva-dimensiondifference gélovej elektroforézy (2D-DIGE), andmatrix asistovaná laserová desorpcia /ionization- zobrazovacie hmotnostná spektrometria (MALDI-IMS) a fatherlyvalidated v 12 klinických patients.Among piatich predpokladané proteíny, GRP78 a GSTpi boli významne up-regulované a najmä lepší v rakovinových bunkách pomocou western blot a immunohistochemistry.In kontrastu, A1AT wassignificantlydown-regulované a mali pozitívny a negatívna korelácia s expresiou Apo AI a GRP78.

bolo navrhnuté mnoho predpokladanej biomarkerov rakoviny žalúdka v predchádzajúcich úrovniach studies.High z GSTpi v žalúdočných karcinómov bolo preukázané, [14] .v výrazy GSTpi boli korelované s rakovina žalúdka stagewhere zvýšenej GSTpi werefound v 50% na stupňoch aj alebo II a 80% v etapách III alebo IV pacienti s rakovinou žalúdka [15] .A predchádzajúce štúdie ukázali, že GSTpi pozitívni pacienti mali menej prežitie päťročné bez výskytu chorôb (49,0%) v porovnaní s GSTpi-negatívnych pacientov (75,0%), je uvedené GSTpi bol marker prognostický význam [16] .V tejto štúdie, zvýšená expresia GSTpi u 75% pacientov s karcinómom žalúdka bol tiež demonstrated.However, rozsah nadmerné expresia GSTpi nebola korelované s štádiách (obr. 4).

Over-expressionof GRP78 proteín bol tiež označená ako domnelého biomarker gastrointestinálneho cancers.GRP78 over-výrazy môžu byť detekované a súvisí so štádiom a prognóza adenokarcinóme pažeráku [17] a [kolorektálneho karcinómu ,,,0],18]. Je to jeden z bunkových proteínov odpovede na stres, ktoré hrajú dôležitú úlohu v biológii nádorov, ako je regulácia apoptózy a udržiavanie intracelulárnu rovnováhu vápnika [19], [20]. Bolo tiež oznámené, že nadmerné vyjadrenie GRP78 imunohistochemicky vo vzorkách karcinómu žalúdka a metastatických lymfatických uzlín boli negatívne koreluje s prežitím pacientov [21]. Avšak metódy použité v tejto štúdii boli odlišné od správy Zhang. Skúmali sme kandidátnych proteínov 2D-DIGE oddeľovať rozdielne proteíny a MALDI-TOF /TOF pre identifikáciu peptidov v prispôsobeným nádorových a normálnych tissues.In našej štúdii, nadmerná expresia GRP78 bola zvýšená a mal tendenciu korelácie s štádiách, aj keď nie štatistická významnosť vzhľadom k obmedzeniu prípadov čísel.

Down-regulácia proteínov môže hrať dôležitú úlohu v karcinogenéze. V tejto štúdii, tri proteíny, Apo AI, A1AT, a GKN-1, boli down-regulovaná v normálnej žalúdočnej tkaniva v porovnaní s rakovinou žalúdka tissues.The vzťah Apo AI a karcinómu žalúdka nebola hlásená. Apo AI je jedným z hlavných proteínových zložiek s vysokou hustotou lipoproteínu cholesterolu (HDL-C) a hrá hlavnú úlohu v udržiavaní transport cholesterolu a atheroprotective účinok HDL-C [22], ako je .Apolipoproteins apo AI môže modulovať lipopolysacharid-inducedinflammatory odozvy v sepsa [23]. V tejto štúdii, je možné, že sa znížil Apo AI je odrazom chronického zápalu, čo je príčinou rakoviny. Ďalšie štúdie je nevyhnutné na vytvorenie väzby medzi znížením Apo AI a dys-regulácia zápalu.

Aj keď zvýšila A1AT v počiatočných fázach a korelácia s pokrokom stupňov s karcinómom žalúdka bolo pozorované Bernacki K. et al. [ ,,,0],24], iba obmedzené množstvo dát by mohla objasniť zvýšil A1AT ako nádorový marker rakoviny žalúdka. Namiesto toho, znížená A1AT u karcinómu žalúdka bol nájdený v našej štúdii. A1AT má protizápalovú aktivitu in vitro a prispieva k potlačeniu syntézy prezápalového cytokínov, ako je interleukín-8, TNF-alfa, interleukín-1 beta [25]. Bolo oznámené, že hostiteľské genetické faktory, ktoré majú vplyv na interleukín-1-beta môžu určiť fenotyp ochorenia infekcie H. pylori [26]. Je možné, že sa znížil A1AT inhibuje prezápalovú potláčaní cytokínov účinok. [25]. V našej štúdii korelácia medzi znížil A1AT a ApoA1 bol predpokladaný ukazovateľ chronického zápalu.

Gastrokine-1 (GKN-1), majúci niektoré mitogénnu účinky na črevnú epitelové bunky (IEC-6), bol dole -regulated žalúdočné rakoviny tkanive v porovnaní so zodpovedajúcimi normálnou žalúdočnej sliznici v našej štúdii. Žalúdočnej sliznice obnovenie po úraze môže brzdiť, ak GKN-1 je down-regulovaná [27], [28] .To bolo hlásené, že GKN1 súvisí s apoptotické signály, ktoré sú dôležité pre obnovu tkanív počas neoplastické transformácie [29]. Dáta z tejto štúdie tiež vyplýva, znížená GKN-1 možno nájsť v žalúdku rakovinových tkanív.

Metóda proteomiky založených na identifikáciu proteínov apoptózu súvisiacimi karcinómom žalúdka bolo oznámené predtým Bai Z. et al [ ,,,0],30] .Nevertheless, diferenciálnej expresie proteíny tejto štúdie neboli rovnaké správy je Bai, čo naznačuje, ENO1, GRP78, GRP94, PPIA, PRDX1 a Ptení ako potenciálny rakovinou žalúdka biomarkers.Regarding vývoj rakoviny žalúdka, je komplikovaný proces, a vykazuje interakcie medzi hostiteľom, životné prostredie a baktérií, ako je napríklad Helicobacter pylori
.A jediný faktor alebo proteín nemohol byť schopný predpovedať výskyt a progresiu karcinómu žalúdka. V tejto štúdii sa zistilo, že päť domnelé proteíny, ktoré majú byť odlišne exprimované v tkanivách (spárovaných tumoru a priľahlé normálneho tkaniva). Dva z nich (GRP78 a GSTpi) vzrástli regulované a iní (Apo, A1AT a GKN-1) boli down-regulované. Ďalšie štúdie bude potrebné objasniť theseproteins asbiomarkers pre detekciu karcinómu žalúdka.

• Ploche ONE: Znížená Core fukosylace Prispieva k zhubnému nádoru v rakoviny žalúdka
• Ploche ONE: MYC Deregulácia v žalúdočnej rakoviny a jej klinicko-dôsledkoch