Stomach Health > žalúdok zdravie >  > Gastric Cancer > žalúdočné Cancer

Ploche ONE: Vysoké úrovne aromatických aminokyselín v žalúdočnej šťavy počas skorých štádií rakoviny žalúdka Progression

abstraktné

Pozadie

začínajúcich rakovina žalúdka je väčšinou bez príznakov a môžu byť ľahko ľahko minul konvenčné gastroskopia. V súčasnej dobe nie sú k dispozícii žiadne užitočnými biomarkery pre včasnú detekciu rakoviny žalúdka, a ich identifikácia biomarkerov je naliehavo potrebné.

Metódy

žalúdočnej šťavy bola získaná od 185 subjektov, ktoré boli rozdelené do troch skupín : nenádorových ochorení žalúdka (NGD), pokročilá rakovina žalúdka a čoskoro rakovina žalúdka (EGC). Hladiny aromatických aminokyselín v žalúdočnej šťavy boli kvantifikované za použitia vysoko výkonné kvapalinovej chromatografie.

Výsledky

stredných hodnôt (25. do 75. percentil), tyrozínu, fenylalanínu a tryptofánu v žalúdočnej šťava boli 3,8 (07.01.-5.7.) ug /ml, 5,3 (3 /2-9 /9) ug /ml a 1,0 (0,4 - 2,8) ug /ml v NGD; 19,4 (5,8 - 72,4) mg /ml, 24,6 (11,5 až 73,7) mg /ml a 8,3 (2,1 - 28,0) mg /ml v EGC. Vyššie hladiny tyrozínu, fenylalanínu a tryptofánu v žalúdočnej šťave bolo pozorované u jedincov EGC skupín v porovnaní tie skupiny NGD (NGD vs. EGC, P Hotel &0,0001). Pre detekciu EGC, oblasti pod prijímačom prevádzkové charakteristiky (AUC) každého biomarkeru boli nasledovné: tyrozín, 0,790 [95% interval spoľahlivosti (CI), 0,703-0,877]; fenylalanín, 0,831 (95% CI, 0,750 - 0,911); a tryptofán, 0,819 (95% CI, 0,739-0,900). Citlivosť a špecifickosť fenylalanínu bola 75,5% a 81,4%, v danom poradí, pre detekciu EGC. Viacnásobná logistická regresná analýza ukázala, že vysoké hladiny aromatických aminokyselín v žalúdočnej šťave boli spojené s rakovinou žalúdka (upravený p koeficienty v rozmedzí od 1,801 do 4.414, P Hotel &0,001).

záver

Zvýšené hladiny tyrozínu, fenylalanínu a tryptofánu vo vzorkách žalúdočnej šťavy boli detekované v skorej fáze žalúdočnej rakoviny. Tak, tyrozín, fenylalanín a tryptofánu v žalúdočnej šťavy by mohli byť použité ako biomarkery na skorú detekciu rakoviny žalúdka. Žalúdočné šťavy analýza je efektívny, úsporný a pohodlný spôsob pre skríning raného vývoja rakovinou žalúdka v všeobecnej populácii

Citácia :. Deng K, Lin S, Zhou L, Li Y, Chen M, Y Wang et al. (2012) Vysokej úrovne aromatických aminokyselín v žalúdočnej šťavy počas skorých štádií rakoviny žalúdka Progression. PLoS ONE 7 (11): e49434. doi: 10,1371 /journal.pone.0049434

Strih: Alejandro H. Corvalan, Pontificia Universidad Católica de Chile, Lekárska fakulta, Čile

prijatá: 27.apríla 2012; Prijaté: 07.10.2012; Publikované: 13.listopadu 2012

Copyright: © 2012 Deng et al. Toto je článok o otvorený prístup distribuovaný pod podmienkami Creative Commons Attribution licencie, ktorá umožňuje neobmedzené použitie, distribúciu a reprodukciu v nejakom médiu, za predpokladu, že pôvodný autor a zdroj sú pripísané

Financovanie :. Tento výskum bol podporený národná prírodná Science Foundation Číny [Grant číslo: 3097415] (URL: http://www.nsfc.gov.cn/e_nsfc/desktop/zn/0101.htm~~HEAD=pobj). Platcovia mal žiadnu úlohu v dizajne štúdie, zber a analýzu dát, rozhodnutie publikovať, alebo prípravu rukopisu

Konkurenčné záujmy: .. Autori vyhlásili, že žiadne konkurenčné záujmy neexistujú

Úvod

karcinóm žalúdka je druhým najčastejším typom rakoviny vo východnej Ázii a prognóza pacientov s karcinómom žalúdka je zlá v dôsledku neskorého detekcie [1], [2], [3]. K dnešnému dňu, prežitie rakoviny žalúdka a kvalitu života pacienta je iba výrazne zlepšila v prípade, že rakovina je diagnostikovaná čoskoro [4]. Bohužiaľ, menej ako 5% z skorých prípadov rakoviny žalúdka sú detekované a rýchlo diagnostikované [5].

Endoskopia nasleduje patologickým biopsia je teraz preferovanou metódou pre detekciu skoré rakoviny žalúdka (EGC). Avšak, EGC dôjde k vynechaniu často počas gastroskopia, pretože menšie lézie možno ľahko prehliadnuť, čo biopsiu nedostatočne alebo nesprávne interpretovaná patológov [6], [7]. EGC je do značnej miery bez príznakov pred nástupom závažných príznakov, a endoskopické vyšetrovanie na základe závažných príznakov vždy oneskoruje detekciu rakoviny žalúdka. Populačná screening môže uľahčiť včasnú detekciu a diagnózu rakoviny žalúdka. Avšak, ako nedostatok skúsených endoscopists a nepohodlie pacienta súvisiace s postupom znížiť použití tejto metódy ako skríningový nástroj pre EGC.

menej invazívne a účinnejšie biomarkery sú potrebné pre detekciu EGC hmotnostných screening. Aktuálne biomarkery pepsinogén, karcinoembryonální antigén (CEA), a sacharidy antigén 19-9 (CA19-9), nie sú dostatočné pre presné predikciu karcinómu žalúdka v ranej fáze [8], [9], [10].

je dobre známe, že metabolické abnormality sa vyskytujú pred významné morfologické zmeny v malígne tkanive [11]. Podstatné množstvo informácií týkajúcich sa metabolického stavu žalúdočné epitel je obsiahnutý v žalúdočnej šťave. Z tohto dôvodu, žalúdočné šťavy môžu byť použité na vytvorenie diagnostického testu a identifikovať hodnotné a efektívne biomarkerov pre EGC skríning. V predchádzajúcich štúdiách sme založili analýzu fluorescenčné spektra žalúdočnej šťavy [12], [13], [14] a identifikované tri fluorescenčné markery (aromatické aminokyseliny v žalúdočnej šťave), [15], ktorý môže byť použitý na rozlíšenie pokročilé žalúdku rakovina (AGC) od benígnych ochorení. Avšak, to je stále neisté, či tieto biomarkery môžu rozlišovať medzi EGC a benígne ochorenie. Táto štúdia bola vykonaná testovať hypotézu, že žalúdočné šťavy biomarkery mať diagnostickú hodnotu skríning v detekcii EGC.

metódami

Ethics Prehlásenie

Etická komisia Peking University Health Science Centre schválil túto výskumné štúdie. Písomný informovaný súhlas bol získaný od všetkých účastníkov, a celá klinických skúšok bola vykonaná v súlade so zásadami vyjadrenými v Helsinskej deklarácie.

Odber

Vzorky boli odoberané v endoskopickým izbách Pekingu univerzita tretieho nemocnice. Všetky vzorky pacientov získané v tejto štúdii boli histologicky potvrdené slizničnej biopsia a /alebo pooperačné patológie od decembra 2008 do júla 2012. Po celonočnom hladovaní, pacienti podstúpili gastroskopia. Vzorky žalúdočnej šťavy, ktoré boli bez hrubých zvyškov jedál, žlč a krv bola odobratá. Vzorky boli rozdelené do 2 ml podiely a okamžite skladovaná pri teplote -80 ° C pre následnú analýzu. Warthin-Starry (WS) farbenie bola použitá na detekciu Helicobacter pylori
stav infekcie u všetkých vzoriek (Žalúdočné Antrum bol jedným z miest, biopsia a celkový počet miest biopsia bola viac ako dve).

Účastníci

vzorky žalúdočnej šťavy boli získané od 49 pacientov s EGC (6 prípadov boli zahrnuté v predchádzajúcom publikácii [15]). Tam bolo 26 prípadov karcinómu ohniskovej a 23 prípadov ťažké dysplázia, ktoré by mohli byť klasifikované ako EGC [16]. Okrem vzoriek žalúdočnej šťavy izolovaných od pacientov s EGC vzorkami z 70 pacientov s non-neoplastických ochorení žalúdka (NGD), ktorý prešiel ambulantne endoskopia počas rovnakého obdobia boli použité ako kontrolná skupina pre porovnanie. Kontrolná skupina obsahovala 47 pacientov s chronickou superficiálna gastritídou, 18 pacientov s chronickou atrofickej gastritídy, a 5 pacientov s peptických vredov. Okrem toho, vzorky žalúdočnej šťavy boli náhodne odobraté z 66 pacientov s AGC (tabuľka 1). Neboli zistené žiadne významné abnormality pozorované v pre-endoskopických obličkových a pečeňových testov jednotlivých prijatých predmetov. Väčšina zaradených pacientov s rakovinou žalúdka nebola predtým diagnostikovaná au žiadneho z pacientov sa výrazné podvýživy (stav výkonnosti Kamofsky, KPS > 90).

Úprava vzoriek

Zmrazené vzorky boli rozmrazené pri izbovej teplote a centrifugovány pri 14000 otáčkach za minútu počas 20 minút pri teplote 4 ° C. Zrazenina sa odstráni a horná vrstva sa oddelí a dočasne uložená pri 4 ° C pre nasledujúci experiment. Vzorky boli očíslované v náhodnom poradí. Experimentátor bol oslepený k diagnóze pacientov prijatí na štúdium.

Kvantifikácia celkový obsah bielkovín vo žalúdočnej šťavy

Ak chcete vyčísliť obsah bielkovín, 100 ul žalúdočnej šťavy supernatantu bol obnovený a ihneď zriedi sa 900 ul 0,15 M fosfátového pufra (pH 7,3) na úpravu pH. Celkový obsah bielkovín v žalúdočnej šťavy bola meraná pomocou BCA (kyselina bicinchoninic) Obsah bielkovín kit (Beijing Cowin Biotech Co Ltd, Peking, Čína) podľa protokolu výrobcu. V prípade, že koncentrácia proteínu bola mimo pracovný rozsah testu (20-2000 ng /ml), bola vzorka ďalej zriedený a znovu analyzované.

systému kvantifikácie

aromatických aminokyselín v žalúdočnej vzorky šťavy boli kvantifikované za použitia fluorescenčný detektor v spojení s HPLC [17], [18], a predtým stanovené kvantitatívny systém [15] bola použitá v tejto štúdii. HPLC vstupný filter, je Diamonsil (2) C18 (3 um, 250 x 4,6 mm) analytická kolóna (Dikma Technologies, Peking, Čína) a chromatografia systém série kvapalina Agilent 1100 (Agilent Technologies, Waldbronn, Nemecko) boli použité v tomto študovať. Tento systém sa skladal z vákuovej odplynenie rozpúšťadla jednotky, štyri gradientové čerpadlá, automatický vstrekovač vzorky teplotne regulovaný, stĺpci termostat, a detektor fluorescencie 3D (FLD). Chemstation softvér bol použitý pre kvantifikáciu množstva aromatických aminokyselín v vzoriek žalúdočnej šťavy. Pred HPLC analýzou reverznej fáze sa žalúdočné šťavy supernatant filtroval cez 0,45 um filter HPLC. Aromatické aminokyseliny v žalúdočnej šťave sa oddelí pri HPLC na C18 analytickej kolóne za použitia 0,05% (objem /objem) kyseliny trifluóroctovej /voda (HPLC; Dikma Technologies) ako rozpúšťadlo A a čistý acetonitril (HPLC, Merck, Darmstadt, Nemecko), ako rozpúšťadlo B modifikátory mobilnej fázy v lineárnom gradientu elučného systému. Po premytí ihly, vzorky boli injikované v objeme 20-100 ul objemu injekcie. Postup HPLC a experimentálne podmienky pre každú vzorku, sú uvedené v tabuľke 2.

aromatických aminokyselín Kvantifikácia

Standard a kontrola kvality riešenia, ktoré obsahovali ekvivalentné koncentrácie L-tyrozínu, L-fenylalanínu a L -tryptophan (99%, Alfa Aesar, Ward Hill, MA, USA) boli pripravené v koncentráciách 0,5, 1,0, 2,0, 5,0, 10,0, 15,0, 18,0 a 20,0 ug /ml na vytvorenie kalibračnej krivky. Štandardy boli skladované pri -80 ° C. Dvadsať mikrolitrov podiely DDH 2O (prázdny kontrolný roztok) a štandardné a vzoriek na kontrolu kvality boli použité na zistenie a pred testovaním tri aromatické aminokyseliny v vzoriek žalúdočnej šťavy overenie kalibračných kriviek. V prípade, že hladina tyrozínu, fenylalanínu a /alebo tryptofánom boli mimo meranom rozsahu, boli vzorky znovu analyzované po zmene objemu injekcie (20 až 100 ul). V prípade, že koncentrácie vzorky bola nedegovateľná po niekoľkých pokusoch o analýze, bolo priradené skóre nula.

Štatistické metódy

Keď sa dosiahla prijateľná normálne rozdelenie, dáta boli vyjadrené ako priemer ± SD (štandardná odchýlka), a porovnanie medzi skupinami boli vyrobené s použitím ANOVA testu jednosmerný. Keď bol prijateľný normálne rozdelenie nebol dosiahnutý, dáta boli vyjadrené ako mediány (25. do 75. percentil). Kruskal-Wallis testy a následne viac hoc testy porovnaní rozmiestniť (Bonferroniho-opravenej hladine významnosti 0,05 /3 = 0,017) Dunn boli použité pre stanovenie rozdielov medzi týmito tromi skupinami. Kruskal-Wallis a testy Dunn boli vykonané pomocou Minitab (verzia 16, Minitab Company, State College, PA) s makro KrusMC.MAC (získané z webových stránok Minitab). Test Mann-Whitney U bol použitý len na porovnanie medzi dvoma skupinami. Chi-kvadrát test bol použitý k odhadu vzťah medzi dvoma binárnymi premennými. Korelácia Pearson bola vybraná pre analýzu asociáciu medzi premennými. Čiastočná korelácia bola použitá pre posúdenie vzťah medzi úrovňou aromatických aminokyselín a klinickou diagnózou, ktorá viedla k odstráneniu zo sady riadiacich premenných. Prijímač prevádzkové charakteristiky (ROC) krivky a plochy pod krivkou (AUC) ROC boli použité na posúdenie platnosti biomarkery a identifikácia optimalizované hodnoty cut-off. Všetky ostatné štatistické testy boli obojstranné, s P Hotel &0,05 definovaný ako štatisticky významné. Logistické regresné modely boli použité na výpočet beta koeficienty a
hodnôt P pre každý faktor /kovariancie. Všetky výpočty boli vykonané s Excel 2003 (Microsoft Corporation, Seattle, WA, USA), a štatistické testy boli vypočítané pomocou SPSS verzia 15.0 (SPSS, Chicago, IL, USA), SAS 8,1 softvér (SAS Institute Inc., Cary, NC) a PASS 2008 softvérový balík (NCSS, Kaysville, UT)

výsledky

Klinické charakteristiky pacientov

Táto štúdia obsahovala 185 pacientov rozdelených do 3 skupín :. 70 pacientov NGD , 66 AGC pacientov a 49 pacientov EGC. Neboli zistené žiadne významné rozdiely vo výskyte Helicobacter pylori
infekcie (6 prípadov chýbal) medzi troch podskupín. Vek a pohlavie líšila medzi tromi podskupín ( P
= 0,049 a P
= 0,023) (tabuľka 1).

celkový obsah bielkovín vo žalúdočnej šťavy

stredný (25 na 75. percentil) hodnoty celkového obsahu bielkovín vo vzorkách žalúdočnej šťavy boli nasledovné: NGD, 1,5 (0.9-2.4) mg /ml; AGC, 3,3 (03.2.-01.5.) Mg /ml; a EGC, 2,8 (06 /1-7 /3) mg /ml (tabuľka 3). Zvýšenie celkového obsahu bielkovín bolo pozorované u vzoriek žalúdočnej šťavy zo skupiny AGC a EGC keďže skupiny NGD (Dunn test, AGC verzus NGD, P Hotel &0,0001; EGC vs. NGD, P Hotel &0,0001) (tabuľka 1). Nebol zistený žiadny rozdiel v celkovom obsahu bielkovín medzi AGC a skupinou EGC (Dunn test, P
= 0,044, ktorá je vyššia, ako je úroveň významnosti 0,017) (tabuľka 3).

Kvantitatívne systém

Ako je uvedené na chromatograme fluorescencie (obrázok 1), tri aromatické aminokyseliny boli úplne oddelené. Retenčné časy pre každú z troch aminokyselín boli nasledovné: tyrozín, 8 min; fenylalanín, 12 min; a tryptofán, 16 min. Kalibračná krivka, linearity a pracovné rozsahy boli nasledovné: tyrozín, Y = 0.32X + 1,30, R 2 = 0,9999, 0,5 až 20,0 ug /ml; fenylalanín, Y = 7.15X + 1,03, R 2 = 0,9999, 0,5 až 20,0 ug /ml; a tryptofán, Y = 0,25x + 3,01, R 2 = 0,9999, 0,5 až 20,0 ug /ml. Výťažky z tyrozínu, fenylalanínu a tryptofánu boli 100,5 ± 2,7%, 101,3 ± 3,4% a 99,6 ± 1,6%, resp. K upresnenie tyrozínu, fenylalanínu a tryptofánu boli 100,1 ± 0,5%, 100,0 ± 1,8% a 98,7 ± 1,5%, resp. Experimentálne systém bol stabilný a spoľahlivé pre kvantifikáciu aromatických aminokyselín v žalúdočnej šťave.

aromatických aminokyselín Assay

Stredná (25 do 75. percentil) hodnoty tyrozínu, fenylalanínu a tryptofánu boli 3,8 (07.1.-05.7.) ug /ml, 5,3 (3.02.-9.9.) ug /ml a 1,0 (0,4 - 2,8) ug /ml vo vzorkách NGD; 18,3 (6,4 - 52,3) mg /ml, 25,7 (11,1 až 76,1) mg /ml a 4,7 (2,5 - 20,3) mg /ml vo vzorkách AGC; a 19,4 (5,8 - 72,4) mg /ml, 24,6 (11,5 až 73,7) mg /ml a 8,3 (2,1 - 28,0) mg /ml vo vzorkách EGC (tabuľka 3). Hladiny aromatických aminokyselín v žalúdočnej šťavy boli výrazne odlišne medzi skupinami NGD, AGC a EGC (Kruskal-Wallis test, tyrozín χ 2 = 49,847, fenylalanín χ 2 = 62,397, tryptofán χ 2 = 52,846, všetko P Hotel &0,0001). Hladiny tyrozínu, fenylalanínu a tryptofánu významne zvýšili v žalúdočnej šťavy získanej z oboch skupín AGC a EGC v porovnaní s tými, skupiny NGD (Dunn test, AGC verzus NGD, všetko P Hotel &0,0001; EGC vs. NGD, všetko P Hotel &0,0001) (tabuľka 3 a obrázok 2). Po očistení o vplyv celkových hladín bielkovín v žalúdočnej šťavy, významná súvislosť ešte existoval medzi úrovňou aromatických aminokyselín a klinickou diagnózou (Čiastočné korelácia, AGC vs. NGD: tyrozín, R = 0,334, P
< 0,001; fenylalanín, R = 0,257, P Hotel < 0,001 a tryptofán, R = 0,312, P Hotel < 0,001; EGC vs. NGD: tyrozín, R = 0,378 , P Hotel &0,001, fenylalanín, R = 0,392, P Hotel &0,001 a tryptofán, R = 0,380, P Hotel &0,001). Neboli zistené žiadne významné rozdiely v úrovni tyrozínu, fenylalanínu a tryptofánu medzi vzorkami žalúdočnej šťavy AGC a EGC (Dunn test, P
= 0,811, P
= 0,781 a P
= 0,691, v danom poradí) (tabuľka 3). Tento výsledok bol v súlade s predchádzajúcimi nálezmi [15], ktorá uviedla, že neexistujú žiadne asociácie medzi Helicobacter pylori
infekcie a hladiny aromatických aminokyselín v žalúdočnej šťavy (Mann-Whitney U test, tyrozín P
= 0,871; fenylalanín, P
= 0,742 ,. tryptofán, P
= 0,913)

Platnosť aromatických aminokyselín pre odhaľovanie AGC a EGC

V analýze ROC krivky pre rozlíšenie medzi AGC a NGD, plôch pod krivkami (AUC) pre tyrozín, fenylalanín, tryptofán a celkové bielkoviny boli 0,824 [95% interval spoľahlivosti (CI), 0,753 až 0,895, P Hotel < 0,001] 0,858 (95% interval spoľahlivosti, 0,794 až 0,922, P Hotel <0,001), 0,818 (95% interval spoľahlivosti, 0,747 - 0,889, P Hotel <0,001) a 0,803 (95% CI, 0,728 - 0,878, P
<, v danom poradí (obrázok 3A a tabuľka 4) 0,001). Podľa analýzy ROC krivky pre rozlíšenie medzi EGC a NGD, AUC pre tyrozín, fenylalanín, tryptofán a celkové bielkoviny boli 0,790 (95% CI, 0,703 do 0.877, P Hotel &0,001), 0,831 (95 % CI, 0,750 - 0,911, P Hotel <0,001), 0,819 (95% interval spoľahlivosti, 0,739 - 0,900, P Hotel <0,001) a 0,719 (95% interval spoľahlivosti, 0,623 až 0,814 , P Hotel &0,001), v danom poradí (obrázok 3B a tabuľka 4). Optimalizované cut-off hodnoty, ktoré sa odlišujú AGC alebo EGC od NGD boli vybraní na základe stanovenia maximálnej čiastky citlivosti a presnosti z kriviek ROC (tabuľka 4). Po výbere optimalizované hodnoty, citlivosť, špecifickosť a presnosť potreba rozlišovať medzi AGC a NGD boli nasledovné: tyrozín, 83,3%, 68,6% a 75,7%; fenylalanín, 81,8%, 75,7% a 78,7%; tryptofán, 84,8%, 68,6% a 76,5%; a celkové bielkoviny, 75,8%, 74,3% a 75,0%. Po výbere optimalizované hodnoty, citlivosť, špecifickosť a presnosť potreba rozlišovať medzi EGC a NGD boli nasledovné: tyrozín, 75,5%, 71,4% a 73,1%; fenylalanín, 75,5%, 81,4% a 79,0%; tryptofán, 61,2%, 97,1% a 82,4%; a celkové bielkoviny, 59,2%, 81,4% a 72,3% (tabuľka 4). Po výbere optimalizované hodnoty uvedené v našej predchádzajúcej štúdii [12], [15], citlivosť, špecifickosť a presnosť pre detekciu EGC boli nasledovné: tyrozín, 51,0%, 94,3% a 76,5%; fenylalanín, 79,6%, 74,3% a 76,5%; tryptofán, 61,2%, 94,3% a 80,7%; a celkové bielkoviny, 83,7%, 62,9% a 71,4%. S použitím iného optimálnu hodnotu, získali sme podobné výsledky. Pomocou kombinácie tyrozínu, fenylalanínu a tryptofánu nijako významne zlepšiť detekciu AGC alebo EGC, pretože koncentrácia troch aromatických aminokyselín v vzoriek žalúdočnej šťavy boli úzko súvisí s seba (tyrozín-fenylalanínu, R = 0,871; tyrosine- tryptofán, R = 0,941; fenylalanín-tryptofán, R = 0,840, P
. < 0,001 pre každého)

logistická regresná analýza

V logistickej regresnej analýzy Vzťah medzi úrovňou aromatických aminokyselín v žalúdočnej šťave a EGC bola hodnotená. Jednorozmerné logistická regresia analýzy boli vykonané pre hodnotenie prediktívne hodnoty kandidátskych biomarkerov pre detekciu EGC. V týchto jednorozmerných analýzach, beta koeficienty (SE) ako vek, pohlavie, Helicobacter pylori
stav, bielkovín a zvýšené hladiny aromatických aminokyselín v žalúdočnej šťavy boli vypočítané. Štyri premenné (vek a zvýšené tyrozín, fenylalanín a tryptofán hladiny v žalúdočnej šťave) bol P Hotel &0,05 a boli identifikované za použitia viacnásobné logistickej regresnej analýzy (tabuľka 5). Vzhľadom na to, že sa medzi collinearities tyrozínu, fenylalanínu a tryptofánu (všetky R > 0,8), sme hodnotili vzťah medzi úrovňou tyrozínu, fenylalanínu alebo tryptofánu a EGC v troch rôznych modeloch a odhaduje nastavenej koeficienty v každom modeli. Zvýšené hladiny týchto aromatických aminokyselín v žalúdočnej šťave boli spojené s EGC (tyrozínu: upraví beta koeficientom 1,801, SE 0,527; fenylalanín: upraví β koeficient 2,555, SE 0,586; tryptofán: upraví β koeficient 4,414, SE 0,945) (tabuľka 5 ). Tak, zvýšené hladiny aromatických aminokyselín v žalúdočnej šťave môže byť nezávislé markery pre detekciu EGC.

Diskusia

V predchádzajúcich štúdiách sme pozorovali zvýšenú fluorescenciu, žalúdočné šťavy v AGC a identifikované tri fluorescenčné biomarkerov pre skríning pokročilou rakovinou žalúdka [12] [15]. Či sa tieto potenciálne biomarkery sú užitočné pre včasné odhalenie rakoviny žalúdka je neistý. V našom súčasnom šetrení, sme testovali platnosti pomocou aromatických aminokyselín v žalúdočnej šťave pre diagnózu EGC. Naše výsledky ukazujú, že vysoké hladiny aromatických aminokyselín sú prítomné v žalúdočnej šťave z pacientov s EGC v porovnaní s pacientmi NGD. Tak môžu byť cenné pre včasnú detekciu EGC vysokej hladiny aromatických aminokyselín v žalúdočnej šťave.

Vzhľadom k veľkosti thesmall vzorky, boli vykonané analýzy výkonu pre Kruskal-Wallis test a ROC AUC. Pokiaľ je nám známe, vzorca alebo postupy na určenie veľkosti vzorky potrebný k testovaniu rozdielov v lokalitách s mnohonásobnými vzorkami s použitím Neparametrické metódy sú oveľa zložitejšie [19], a žiadna moc alebo veľkosť vzorky metódou výpočtu je v súčasnej dobe k dispozícii, pokiaľ ide o generické alternatívnej hypotézy pre test Kruskal-Wallis [20]. Lachenbruch a Clements navrhol, že test Kruskal-Wallis môže mať väčšiu silu než F-testu, kedy sa distribúcia populácie nie sú normálne. Tvrdili, že v porovnaní s F-test, test Kruskal-Wallis bol odolnejší proti odlety z predpokladu rovnosti rozptylu [21]. Tak, za použitia sily F-testu sa zbližujú silu testu Kruskal-Wallis môže poskytnúť chudobným dolná hranica pre normálnu distribúciou. Po hodnosti transformáciu Bezprostredná sily (1 - β chyba) boli vypočítané s použitím F- (ANOVA) a ako je implementovaný v SAS 8.1. Všetky blízkym moci sú viac než 0,99. Tak možno spoľahlivo vyvodiť záver, že hladiny celkového proteínu a aromatických aminokyselín v žalúdočnej šťave, sú významne odlišné medzi NGD, AGC a EGC. Power analýzy pre krivky ROC boli vykonané pomocou softvéru PASS 2008. Žiadna z týchto síl bolo menej ako 0,99. Z tohto dôvodu, je prijateľné k záveru, že vysoké hladiny aromatických aminokyselín v žalúdočnej šťave môže byť cennými ukazovateľmi AGC alebo EGC.

Zvýšená produkcia aromatických aminokyselín v EGC zodpovedá výsledkom pre predchádzajúcej štúdii [15] a je v súlade s skorým správam v iných zhubných ochorení (krvný [22], pľúc [23], [24], [25], prsníka [23], [24], močového mechúra [26], atď.). Domnievame sa, že nasledujúce dôvody môžu vysvetliť tento jav. Po prvé, nádorové bunky vyžadujú dostatočné aromatické aminokyseliny sa hromadí v ohniskách rakoviny, aby spĺňali výrazne zvýšenej potreby pre syntézu proteínov podporuje rýchly rast. Vysoká expresia aminokyselín transportérov (ako je napríklad L-typu aminokyselín transportéra 1) v rôznych nádoroch [27], [28], [29], [30], [31], [32], [33], [34], [35] bola hlásená v mnohých štúdiách. transportéry aminokyselín môžu zvýšiť transport aminokyselín a hromadí aromatických aminokyselín v blízkosti ohniska rakoviny. Infiltrácia nadmerných aromatických aminokyselín sa môže výrazne zvýšiť v žalúdočnej šťave v EGC v porovnaní s NGD. Po druhé, aberantne metabolizmus v rakovinových bunkách by predchádzať viditeľné zmeny v žalúdku karcinogenézy [11]. Je známe, že abnormality dopravné aminokyselín a metabolizmus v rakovinových oblasti sa vyskytujú často v ranom štádiu rakoviny žalúdka. Žalúdočné šťavy, ktorý je generovaný žalúdočné epitel, obsahuje veľké množstvo informácií o metabolického stavu epitelu. Preto sa informácie získané z analýzy žalúdočnej šťavy, môže byť užitočné pri oddeľovaní biomarkery pre včasnú detekciu karcinómu žalúdka. Napokon, matrix metaloproteinázy (MMP), ktoré sú enzýmy, ktoré degradujú extracelulárnej matrix a bazálnej membrány, hrajú úlohu v skorej fáze tumorogenézy [36], [37], [38], [39], [40]. Nadmerné expresie a aktivita MMP urýchľuje degradáciu extracelulárnej matrix a bazálnej membrány. Degradácia matrice vytvára aromatické aminokyseliny v žalúdočnej šťave obklopujúce nádorové bunky. Navyše, krvný aromatické aminokyseliny by sa ľahko prenikajú do postihnutej bazálnu membránu a epitelu karcinómu ložísk a zvyšujú hladinu aminokyselín v žalúdočnej šťave. Tieto príčiny by mohli vysvetliť výrazné posilnenie aromatických aminokyselín v žalúdočnej šťavy z pacientov EGC.

počiatočnej fáze karcinómu žalúdka má niekoľko príznakov a môže byť ľahko minul konvenčné endoskopické [6], [41]. Tieto problémy sa znižuje rýchlosť skoré detekcie a účinnú liečbu rakoviny žalúdka. Abnormálne hladiny aromatických aminokyselín v žalúdočnej šťavy môžu byť použité na monitorovanie výskytu porúch metabolizmu aminokyselín a odhaliť skoré malígne transformáciou, ktoré sa vyskytujú v žalúdku. Najmä, naše výsledky ukazujú, že hladiny aromatických aminokyselín v žalúdočnej šťave môže rozlišovať EGC od žalúdka. Toto zistenie predstavuje možnosť, že tieto biomarkery môžu byť použité pre masový skríning karcinómu žalúdka v ranom štádiu. Meranie úrovní aromatických aminokyselín v vzoriek žalúdočnej šťavy, môže byť efektívna a ekonomický, rýchly a pohodlný spôsob detekcie AGC alebo EGC v populácii.

Aj keď aromatické aminokyseliny môžu byť sľubné biomarkerov pre EGC, tam sú stále nevýhody spojené s týmto prístupom. Použitie menej invazívnych procedúr by bolo prospešné pre účely skríningu. Žalúdočné šťavy v našej štúdii boli odsaté pri endoskopii, čo by vážne obmedzujú použiteľnosť posúdenie žalúdočnej šťavy biomarkerov pre detekciu EGC. Ak chcete zvýšiť potenciálne uplatnenie tohto nálezu, môže byť zavedený non-endoskopických prostriedky pre odber vzoriek žalúdočnej šťavy. Endogastric kapsule [42], [43], [44] je dĺžka 45-50 cm nylonové vlákno pripojené k kapsule obsahovala savého papiera. Kapsule môže žalúdočné šťavy vzorkovanie prijateľnejšie, bezbolestné a pohodlné pre pacientov v porovnaní s žalúdočnej šťavy kolekcie endoskopicky. Hladiny aromatických aminokyselín v žalúdočnej šťave môže byť ovplyvnená tekutiny a potraviny spotrebované pacienta. Z tohto dôvodu, plná nalačno u pacientov so zlou motility žalúdka je nevyhnutná pre zvýšenie presnosti biomarkerov testy a detekciu karcinómu žalúdka. Vzhľadom k tomu, veľkosť vzorky v tejto štúdii, je malý, rozsiahlejšie štúdie sú potrebné na určenie, či aromatických aminokyselín v žalúdočnej šťave môže pomôcť pri skríningu v ranom štádiu rakoviny žalúdka. Okrem toho bude ďalšie štúdie určiť optimalizované hodnoty hraničných pre každú značku. Akonáhle sú diagnostické hodnoty skríningové identifikovať nové metódy (ako je hmotnostná spektrometria) by mohla umožniť jednoduchú, rýchlu a vysokou priepustnosťou detekciu aromatických aminokyselín v žalúdočnej šťavy.

Na záver, výrazne zvýšené hladiny aromatických aminokyseliny boli nájdené v žalúdočnej šťave z pacientov s neskorej fáze alebo v skorom štádiu rakoviny žalúdka v porovnaní so skupinou NGD. Analýza aromatických aminokyselín môže byť efektívnou metódou pre včasné odhalenie rakoviny žalúdka. Pokiaľ overená v štúdii veľkom meradle, aromatických aminokyselín v žalúdočnej šťavy by bolo užitočné ako biomarkery pre skríning EGC vo všeobecnej populácii.

Poďakovanie

Autori by radi poďakovali Qiuming Geng , Shigang Ding Qinqin Tao, Jingjing Lu Yan Deng a všetci kolegovia v endoskopia izbách Peking University tretieho nemocnice za ich pomoc pri žalúdočnej šťavy kolekciu.

Other Languages