PLOS ONE: c-Met som en prognostisk markör i Gastric cancer: En systematisk genomgång och meta-Analysis

Abstrakt

Bakgrund

c-Met har erkänts som ett viktigt terapeutiskt mål i gastric cancer, men den prognostiska egenskapen av c-Met-status är fortfarande oklart. Vi syftar till att karakterisera prognostic effekten av c-Met genom systematisk genomgång och meta-analys.

Metoder

Vi identifierade 15 studier som bedömer överlevnad i magsäckscancer av c-Met status. Effekt mått av intresse var hazard ratio (HR) för överlevnad. Meta-regression utfördes för att uppskatta förhållandet mellan HR och sjukdomsstadium. Slumpmässiga effekter metaanalyser användes för att redogöra för heterogenitet.

Resultat

15 berättigade studier som utfallsdata stratifierade efter c-Met status 2210 patienter. Metaanalys av HRS indikerade en signifikant sämre Os hos patienter med högt c-Met uttryck (genomsnitt HR = 2,112, 95% CI: 1,622-2,748). Undergruppsanalys visade det prognostiska effekten av c-Met var identisk i protein-nivå och genen nivåbaserad metod. Samma effekt sågs också i Asien och västra etnicitet subgruppsanalys. Meta-regression visade HR förknippades inte med sjukdomsstadium.

Slutsatser

Patienter med tumörer som hyser höga c-Met uttryck är mer benägna att ha en sämre Os, med denna prognostisk effekt oberoende av sjukdomsstadium. c-Met status bör utvärderas i klinisk prognos

Citation. Yu S, Yu Y, Zhao N, Cui J, Li W, Liu T (2013) c-Met som en prognostisk markör i Gastric Cancer: En systematisk genomgång och meta-analys. PLoS ONE 8 (11): e79137. doi: 10.1371 /journal.pone.0079137

Redaktör: Anna Sapino, University of Torino, Italien

Mottagna: 11 juni, 2013, Accepteras: 17 september 2013, Publicerad: 4 november 2013

Copyright: © 2013 Yu et al. Detta är en öppen tillgång artikel distribueras enligt villkoren i Creative Commons Attribution License, som tillåter obegränsad användning, distribution och reproduktion i alla medier, förutsatt den ursprungliga författaren och källan kredit

Finansiering:. Denna forskning stöds av projekten 30972551 och 81273187 från National Natural Science Foundation i Kina. (www.nsfc.gov.cn). Finansiärerna hade ingen roll i studiedesign, datainsamling och analys, beslut att publicera, eller beredning av manuskriptet

Konkurrerande intressen:.. Författarna har förklarat att inga konkurrerande intressen finns

Introduktion

Gastric cancer (GC) är en av de vanligaste humana maligna sjukdomar och fortfarande den näst vanligaste orsaken till cancerrelaterad död i världen [1]. Även om de senaste diagnostiska och terapeutiska framsteg har förbättrat de kliniska resultaten av patienter med tidigt stadium av magcancer, prognosen för framskridet stadium förblir extremt fattiga, och totalt 5-årsöverlevnaden är ungefärliga 15% [2,3], så det finns en kontinuerligt behov för att förstå mekanismerna bakom magcancer samt identifiera nya molekylära mål för behandling. Hittills har onkologer identifierat flera faktorer som främjar utvecklingen av magcancer för terapeutisk inriktning, och framstående bland dessa är c-Met.

receptortyrosinkinas c-Met kodas av MET onkogen. Denna receptor och dess hepatocyt tillväxtfaktor (HGF) ligand har befunnits frekvent dysreglerad i gastriska karcinom [4-7]. c-Met är överuttryckt i ca 20% av magcancer cellinjer [8] och 18-82% av gastric cancerfall [7,9-12]. C-Met /HGF vägen stimulerar proliferation, invasion, angiogenes samt skydd mot apoptos i cancerceller [13,14]. Därför har c-Met erkänts som ett viktigt terapeutiskt mål i antineoplastiska strategier, och har även visat sig besitta prediktiva egenskaper för behandling med den monoklonala antikroppen till HGF vid lokalt avancerad eller metastaserad ventrikelcancer [15].

Men när det gäller de prognostiska egenskaperna hos c-Met status, verkar det fortfarande finnas någon enighet, trots ett relativt stort antal studier av c-Met i magcancer har undersökt sambandet mellan en c-Met-positiva status och överlevnad. I den nuvarande systematisk genomgång har vi utnyttjat den redan existerande litteratur att ta upp frågan om prognostiska egenskaperna hos en c-Met-positiva status i magcancer.

Material och metoder

1. Publikation Ökning

Systematiska datoriserade sökningar utfördes med hjälp av den elektroniska databasen Pubmed (upp till 30 maj 2013). Sökstrategi använde sökorden "c-Met", eller "MET" och "magcancer", eller "magcancer" eller "mage tumör". Engelska publicerade studier var berättigade om de uppfyller följande kriterier: (1) patienter hade diagnosen magcancer; (2) total överlevnad (OS) eller progressionsfri överlevnad (PFS) analyserades stratifierat av c-Met status; (3) Resultaten var en del av en ursprunglig analys; (4) när samma patientpopulation använts i flera publikationer, bara den senaste, största eller fullständig studie ingick i metaanalysen. Data från översiktsartiklar, abstracts och bokstäver ingick inte.

2. Datautvinning

Studie egenskaper extraherades från de stödberättigade artiklar och sammanfattas på ett konsekvent sätt för att underlätta jämförelse. Följande data samlades in från varje studie: första författarens namn, utgivningsår, antal patienter screenas, sjukdomsstadium, klinisk behandling, metodik av c-Met analys inklusive tröskeln används för att dichotomize c-Met som "hög" och "låg ', progressionsfri överlevnad och total överlevnad stratifierat efter status och hazard ratio (HR) med 95% konfidensintervall (cI) för PFS eller OS c-Met. När timmarna och dess konfidensintervall inte direkt rapporterats, var de beräknas från andra data, såsom antalet patienter i varje grupp och Kaplan-Meier kurvor för total överlevnad, med hjälp av den publicerade metoden [16]. Både ojusterade och justerade HR uppskattningar söktes för varje studie. När relevant effekt beräkningar inte kan erhållas genom att använda metoderna ovan, var studien uteslutits från metaanalysen.

3. Statistisk analys

effektmått var PFS och OS. Sambandet mellan c-Met nivå och PFS eller OS utvärderades med hjälp av hazard ratio på hög nivå patienter c-Met över låg nivå patienter c-Met och 95% konfidensintervall från univariata och multivariata Cox proportional hazards modeller, så en HR 1 tyder på en brist på samband mellan c-Met nivå och risk för död, en HR större än 1 indikerar en ökad risk för död i höga nivå patienter c-Met, och en HR mindre än 1 indikerar en ökad risk för död i låg c Met patienter nivå.

Ett fast effekter modell ursprungligen användes för att beräkna de sammanslagna HR uppskattningar. Om jag ^{2 statistik var mer än 50% eller det fasta effekter p-värde för I 2 statistik var mindre än 0,10, vilket tyder på betydande skillnader mellan olika studier, var en slumpmässig effekter modell används sedan för att beräkna den sammanslagna uppskattningen .}

För att fastställa effekten av metod heterogenitet bland studier på metaanalyser slutsatser subgruppanalyser utfördes av studiedesign. I subgruppen analys av c-Met expression konstate metoden framställdes studier klassificeras antingen som protein-nivå metod undergrupp som utförde immunohistokemi (IHC) att stratifiera c-Met-uttryck eller gen-nivå metod undergrupp, till exempel omvänt transkriptas kvantitativ polymeraskedjereaktion ( RT-qPCR), southern blöt, och fluorescens in situ hybridisering (FISH), som dichotomize c-Met status genom genförstärkning, som redovisas i den givna publikation. Klinisk heterogenitet bildades genom subgruppsanalys av etnicitet, där studier klassificerades som asiatiska eller västerländsk undergrupp. För att demonstrera huruvida HR var associerad med sjukdomen skede av GC patienterna genomförde vi meta-regressionsanalys av logaritmen omvandlas utfall (HR) mot andelen framskridet stadium patienter i varje studie, och HR ansågs vara förknippade med sjukdomsstadium när p-värdet av modellen var mindre än 0,05.

Potential publikationsbias bedömdes genom att utföra Egger test (p < 0,05 ansågs representativ för statistiskt signifikant publikationsbias) för metaanalys inkluderande 10 eller flera undersökningar. Alla statistiska analyser genomfördes med hjälp av STATA version 11.0.

Resultat

1. Stödberättigade studier och studier egenskaper

flödesschema över vår studie visas i Figur 1. Från 511 abstracts vi funnit, 493 uteslöts baserat på våra inklusionskriterier. Bland de 18 artiklar som fanns kvar för att bedöma berättigande, har 3 artiklar uteslutna eftersom datapunkter inte kan extraheras från data som de presenterade [8,17,18]. Slutligen har vi identifierat 15 berättigade studier [4,7,19-31] som gav utfall stratifierat efter c-Met status från 7 länder, och deras egenskaper är sammanfattade i Tabell 1. I två studier [29,30] utfallsdata var redovisas separat av c-Met uttryck konstaterande metod, och dessa datamängder behandlades separat. Specifikt, Lee et al. [29] skiktade utfall i två grupper, och en undergrupp som används för IHC att göra mål c-Met uttryck uteslöts eftersom relevant effekt uppskattningar inte kunde erhållas. Provstorlekar av datamängder bedöms för överlevnad varierade från 35 till 472 (median 107, tabell 1), med data från totalt 2210 patienter som metaanalyser. Fjorton av dessa studier var av retrospektiv design. En av dessa studier var av prospektiv design. Av de 15 studier, 11 [4,19,22-24,26-31] inkluderade patienter med tidig och framskriden sjukdom (stadium I-IV), men ingen av dessa studier separerade sina patienter i undergrupper. De återstående fyra studier [7,20,21,25] inkluderade patienter med stadium I-III. Alla patienter i vår metaanalys genomgick botande eller noncurative primärtumör resektion, och ingen av dem fick kemoterapi eller strålbehandling före operation. I fem studier [7,22,27-29], har patienter med framskridet stadium ges postoperativ kemoterapi eller chemoradiation, medan patienter i en annan studie inte fick någon postoperativ behandling [21]. Nio studier [4,19,20,23-26,30,31] inte nämna postoperativ behandling. Ingen av dessa studier som nämns palliativ behandling efter återfall utom en [20], där alla patienter som fick återfall gick fluorouracil baserad kemoterapi (tabell S1). Ingen av behandling som används i dessa studier avgjordes av c-Met-status. Genomsnittlig uppföljningstidsdata presenterades av de flesta forskare, med en median på 71 månader (intervall från 20 till 160 månader). OS rapporterades i alla studier, men progressionsfri överlevnad endast presenteras i en studie [20]. Nio studier [4,19-24,28,29] presenterade data om HR, med 95% CI för OS direkt. En studie [30] presenterade HR utan 95% CI för OS. HRs och 95% KI inte direkt fram i de återstående fem studier och de uppskattades från Kaplan-Meier kurvor. Justerat resultat lämnades i åtta studier [4,19-24,28] medan ojusterade resultaten lämnades i endast två studier [29,30] Study (första författare + publiceringsdatum) katalog.
Nej av patienterna ^{en
land
sjukdomsstadium
Andel framskridet stadium (%) Review metod för att skikta c-Met status
hög c-Met uttryck (%) Review HR
95% CI
Toiyama 2011100JapanI-IV34.1RT-qPCR242.99 * 1,67-5,35 * Catenacci 201136USAI-IVNSRT-qPCR84.71.31-16.9 * Catenacci 201135USAI-IVNSIHC431.340.93 -1,92 * Lee 2012438KoreaI-IV10.8SISHNS2.271.05-4.93Li 2012114ChinaI-IV64.9IHC820.5780.221-1.513Taniguchi 1998102JapanI-IVNSIHC421.9 * 0,74-4,85 * Tsugawa 199870JapanI-IV44.4Southern Blot109 0,3 * 3,18-27,25 * Nakajima 1999128JapanI-IIINSIHC461.62 * 0,53-4,90 * Huang 200145TaiwanI-IV64.4IHC719.31.22-70.81KUBICKA 200242GermanyI-IIINSIHC263.77 * 1,54-9,24 * Han 200550KoreaI-IV20.0IHCNS0.6510.053-1.493DREBBER 2008112GermanyI-IV31.6IHC731.91.0-3.5Lee 2011472KoreaI-IV22.4RT-qPCR211.6011.078-2.380Zhao 2011136ChinaI-IIINSIHC741.8791.089-3.241Graziano 2011216ItalyII- IIINSFISH102.911.65-5.11Shi 2012114ChinaI-IV4.7RT-qPCR292.11.20-3.69Table 1. Sammanfattning av studier rapporterar c-Met uttryck och resultat i gastric cancerpatienter
RTqPCR, omvänt transkriptas kvantitativ polymeraskedjereaktion. IHC, immunohistokemi; SISH, silver in-situ-hybridisering; FISH, fluorescerande in situ-hybridisering; NS, ej visad, HR, hazard ratio; CI, konfidensintervall. ett antal patienter kan bedömas för c-Met uttryck och total överlevnad. * Beräknat resultat från data som presenteras i papper med publicerad metodik. CSV Ladda ner CSV}

2. c-Met status assignation

c-Met utvärdering utfördes av IHC i 9 studier [4,7,21,23-25,27,28,30], och RT-qPCR i 4 studier [19, 22,30,31]. Ytterligare tre studier använt FISH [20], Southern blöt [26], och silver in situ hybridisering (SISH) [29], respektive, eftersom deras metod för att skikta c-Met status. I de 9 studier som utvärderar c-Met uttryck av IHC, präglades heterogenitet observerades mellan tröskelvärden som används för att dichotomise c-Met status. En studie [21] kom fram till ett komposit (H) poäng genom att multiplicera utsträckning cellfärgning poäng (0-4, 0 = ingen, 1 = 1-10%, 2 = 11-50%, 3 = 51-75%, 4 = > 75%) av intensitetspoäng (0-3, 0 = ingen, 1 = svag, 2 = måttlig, 3 = stark) med H-poäng lägre än 3 betecknas c-Met låg. En annan studie [28] använde samma intensitet poäng men en annan del poäng (0-3, 0 = ingen, 1 = < 35%, 2 = 35-75%, 3 = > 75%) med H-poäng mer än 4 betecknas c-Met hög. I fem studier, var andelen celler som färgades undersökas ensam, med prover ≥5% [4,7], > 10% [25], eller > 30% [23,27] betecknas c-Met hög. I de återstående två studierna, färgningsintensitet grad lägre än 2 [30] eller 3 [24] representerade låga nivåer av c-Met uttryck.

I fem studier som tilldelats c-Met uttryck på gennivå, var hög c-Met status definieras som en kopia av c-Met 7 gånger [30], 5 gånger [20], 4 gånger [19, 22] eller två gånger [29] mer än den för inre referens. Ytterligare en studie [26] utföra Southern blot utsetts hög c-Met status som dubbelt så hög som i normal slemhinna. Den återstående undersökning [31] som använts bildanalysator programvara för att utvärdera proverna.

Hastigheten för höga c-Met-status varierade från 8% till 82% (median, 36%). Den observerade median andelen hög c-Met uttryck var 59% (intervall 26-82%), och 16% (intervall 8-29%) respektive i studier med IHC och andra metoder. Två studier inte presentera andelen hög c-Met nivå.

3. De viktigaste resultaten av total överlevnad

Resultaten av metaanalys av sambandet mellan c-Met nivå och total överlevnad finns i Figur 2. 16 dataset fanns tillgängliga för att samla OS 8 med ojusterad [7,25 -27,29-31] och 8 med justerade datapunkter [4,19-24,28]. Meta-analys av beräkningarna indikerade en betydligt sämre OS hos patienter med högt c-Met uttryck (genomsnitt HR = 2,112, 95% CI: 1,622-2,748). Men heterogenitet var stor (p = 0,007, jag ^{2 = 52,4%), vilket indikerar stora förutsägelse intervall för prognostiska effekt i en individuell klinisk miljö. Det fanns inga tecken på små studiegrupper effekter med uppskattningar ovan rapporterats (Egger test: p = 0,168).}

Resultatet av c-Met konstaterande metod subgruppsanalys den ges i figur 3. Patienter med högt c-Met uttrycksnivåer hade en betydligt sämre OS i både gen-nivå metod grupp och proteinnivå metod gruppen (HR = 2,661, 95% CI 1,858-3,809 och HR = 1,661, 95% CI 1,171-2,357 respektive). Det fanns ingen statistiskt signifikans mellan de två undergrupperna (p = 0,086).

I en subgruppsanalys stratifiera patienter genom etnicitet, fanns signifikant samband mellan hög c-Met uttryck och dålig OS i både asiatiska och västerländska patienter (HR = 2,032, 95% CI 1,433-2,882 och HR = 2,294, 95% KI 1,446-3,640, respektive). Resultatet ges i figur 4. Inga statistiskt signifikans fanns mellan de två undergrupperna (p = 0,696).

En metaregressionsanalys utfördes för att testa sambandet mellan HR och sjukdomen skede av patienter i 9 studier [4,19,22-24,26,28,29,31], bland vilka "framskridet stadium" standed för steg IV [19,22-24,26,29,31] eller stadium III och steg IV [4 28]. Den totala lnHR hade inget samband med ln (procent av framskridet stadium) (p = 0,853, Figur 5).

Diskussion

Denna systematiska granskning har baserats på 15 publikationer som täcker perioden från 1998 till maj 2012 och omfattar totalt 2210 patienter med magcancer. Resultaten av denna meta-analys visar på prognostisk betydelse av c-Met-expressionsnivån i GC patienter i asiatiska och västerländska länder. I den totala metaanalys av sambandet mellan c-Met nivå och total överlevnad, resultaten indikerade en statistiskt signifikant ökning i total överlevnad hos patienter med låg c-Met uttryck i förhållande till patienter med högt c-Met uttryck.

Subgruppsanalys visade att styrkan i förhållandet mellan c-Met-nivå och total överlevnad var identiska baserad på den metod som används för att fastställa c-Met-status. Både gen-nivå metod grupp och proteinnivå metod gruppen visade statistiskt signifikant samband mellan c-Met status och total överlevnad. Med andra ord, metoden som används för att uppskatta c-Met status inte påverka prognos egendom. Emellertid var en statistiskt signifikant heterogenitet ses i båda undergrupperna. Förklaringen till dessa ganska stor variation är sannolikt att vara multifaktoriell såsom olika populationer studerats, men de viktigaste aspekterna är förmodligen användningen av olika antikroppar för IHC och housekeeping-gener för RT-qPCR och tillämpning av olika kriterier för att skikta c-Met status. I en fas II-studie inom de senaste åren som utvärderade effekten av HGF-antikropp och MET pathway biomarkörer i avancerade GC patienter [15], de bedömningskriterier som utvecklats av Kelly et al. identifierade hög c-Met uttryck i procent av celler staining≥50% samt färgningsintensitet grade≥1 för de färgade diabilder, och det totala antalet MET genkopior > 15 för fisk. Om denna nya kriterier är allmänt accepterat på samma sätt som Her2 scoring kriterier som utvecklats av Hofmann et al. [32] för ToGA rättegång, variationen mellan studierna kommer att minimeras.

Subgruppsanalys visade också att både asiatiska och västerländska patienter hyser höga c-Met nivå var signifikant associerade med sämre överlevnad, som inte varierar beroende på etnicitet. Även skillnader i resultat har rapporterats mellan asiatiska och västerländska populationer med magcancer [33,34], våra resultat gjorde c-Met en mer utbredd prognostisk markör.

sjukdomsstadium är en av de viktigaste faktorerna som inflytande OS. Under de 15 studierna bedöms i vår metaanalys, 11 inkluderade patienter med stadium I-IV. Men ingen av dessa studier separerade sina patienter i undergrupper. Med detta i åtanke, tillämpade vi meta-regression för att upptäcka om det prognostiska egenskap av c-Met skulle påverkas av variationen av den procentuella andelen avancerade scenpatienter bland studier. Resultaten visade att den totala personal hade inget samband med andelen framskridet stadium patienter 9 studier, vilket innebar prognostiska effekten av c-Met var oberoende till sjukdomsstadium. Detta resultat främjas ytterligare prognostiska värdet av c-Met i magcancer.

En annan viktig faktor för OS är klinisk behandling, vilket inkluderar kirurgi, postoperativ kemoterapi eller strålbehandling, och palliativ behandling efter återfall eller sjukdomsutveckling. I vår metaanalys, den sammanslagna HR av fem studier där patienterna fick postoperativ behandling var 1,556, med 95% CI 1,152-2,102 (figur S1), samma som HR och 95% CI av en studie där patienterna gjorde 't får någon postoperativ behandling. På grund av variationen på behandling och avsaknaden av studie bedömde, är det svårt att säga om det prognostiska effekten av c-Met är associerad med klinisk behandling eller inte baserat på tillgängliga studier. Ytterligare studier fortfarande motiverat att bättre klargöra denna förening.

Så vitt vi vet är detta den första metaanalys som starkt tyder på hög c-Met status representerar negativ prognostisk biomarkör för total överlevnad i GC patienter. Patienter med tumörer som hyser höga c-Met uttryck är mer benägna att ha en sämre OS och denna prognostisk effekt var oberoende av sjukdomsstadium. Men stora studier med standardiserade objektiva metoder fortfarande krävs innan c-Met-testning kan röra sig mot rutinmässig klinisk användning som ett prognosverktyg.

Sammantaget denna studie övergripande resultat stöder hypotesen att c-Met expressionsnivån är förknippad med total överlevnad i GC patienter. Framtida studier bör försöka blockera HGF /c-Met vägen för att förlänga den totala överlevnaden av GC patienter och prognosen för patienter som hyser höga c-Met uttryck skulle ändras med fler och fler kliniska prövningar utvärdera riktade medel mot HGF eller c Met i GC patienter.

Bakgrundsinformation
tabell S1.
klinisk behandling av studier rapporterar c-Met uttryck och resultat i gastric cancerpatienter.
doi: 10.1371 /journal.pone.0079137.s001
(DOC) Review figur S1.
Forest diagram som visar metaanalys av hazard ratio uppskattningar för OS i postoperativ och ingen postoperativ behandling grupp.
doi: 10.1371 /journal.pone.0079137.s002
(TIF) Review checklista S1.
avsnitt som innehåller varje objekt i PRISMA checklista.
doi: 10.1371 /journal.pone.0079137.s003
(DOC) Review

• PLOS ONE: Kliniska bevis för tre olika Gastric Cancer subtyper: Dags för en ny Approach
• PLOS ONE: TWIST1 Främjar Gastric Cancer Cell Proliferation genom uppreglering av FoxM1