PLOS ONE: Överuttryck av E2F mRNA associerade med Gastric Cancer Progression identifierad av transkriptionsfaktor och miRNA samreglering Network Analysis

Abstrakt

genuttryck regleras på transkription och translation nivåer; sålunda, såväl transkriptionsfaktorer (TFS) och mikroRNA (miRNA) spelar roller i reglering av genuttryck. Denna studie profilerade differentiellt uttryckta mRNA och miRNA i magcancer vävnader för att konstruera en TF och miRNA samreglering nätverk för att identifiera förändrade gener i magsäckscancer progression. Totalt 70 fall gastrisk cancer och parade intilliggande normala vävnader utsattes för cDNA och miRNA microarray analyser. Vi erhöll 887 uppregleras och 93 nedregleras gener och 41 nedregleras och 4 uppregleras miRNA i magcancer vävnader. Använda transkriptionsreglerande element Database, vi fick 105 gener som regleras av E2F familj av gener och använda Targetscan, Miranda, miRDB och miRWalk verktyg, förutspådde vi potentiella inriktnings gener av dessa 45 miRNA. Vi byggde sedan upp E2F relaterade TF och miRNA samreglering gen nätverk och identifierade 9 nav-gener. Dessutom fann vi att nivåerna av E2F1, 2, 3, 4, 5, och 7 mRNA i samband med magcancer cellinvasion kapacitet, och har i samband med tumördifferentiering. Dessa data visade Uttryck av E2F mRNA i samband med magcancer progression

Citation. Zhang X, Ni Z, Duan Z, Xin Z, Wang H, Tan J et al. (2015) Överuttryck av E2F mRNA associerade med Gastric Cancer Progression identifierad av transkriptionsfaktor och miRNA samreglerande Network Analysis. PLoS ONE 10 (2): e0116979. doi: 10.1371 /journal.pone.0116979

Mottagna: 30 september 2014. Accepteras: 17 december 2014. Publicerad: 3 februari 2015

Copyright: © 2015 Zhang et al. Detta är en öppen tillgång artikel distribueras enligt villkoren i Creative Commons Attribution License, som tillåter obegränsad användning, distribution och reproduktion i alla medier, förutsatt den ursprungliga författaren och källan kredit

datatillgänglighet: Alla relevanta uppgifter är inom pappers- och dess stödinformationsfiler. Data har deponerats till GEO-databasen under tillträdesnummer GSE63089

Finansiering:. Detta arbete stöddes delvis av bidrag från National Natural Science Foundation i Kina (̭20108025 ochQ.472.662), Stiftelsen för Jilinprovinsen vetenskap och teknik Institutionen (É30522013JH ochÉ40414048GH) och Norman Bethune Program för Jilin University (.012.219). Författarna tackar också Medjaden Bioscience Limited (Hongkong, Kina) för redigering och korrekturläsning detta manuskript. Finansiärerna hade ingen roll i studiedesign, datainsamling och analys, beslut att publicera, eller beredning av manuskriptet

Konkurrerande intressen:.. Författarna har förklarat att inga konkurrerande intressen finns

Introduktion

Gastric cancer är fortfarande en av de mest betydande hälsoproblemen i utvecklingsländer, som i Kina, även om dess förekomst minskar successivt i västländerna. Sammantaget är magcancer står för den fjärde infalls och den andra av dödligheten bland all cancer i världen [1-3]. Gastric risk cancer faktorer inkluderar Helicobacter pylori-infektion, frekvent konsumtion av rökt mat, saltad fisk och kött, och inlagda grönsaker, tobaksrök, fetma eller kronisk gastrit. Dessa riskfaktorer kan samordna för att manipulera genuttryck eller mutation eller epigenetiska förändringar och så småningom leda till magcancer utveckling. Hittills har en stor mängd kunskap som finns samlad om de molekylära förändringar i samband med magcancer, såsom ARID1A, TP53 [4], PTGER4, PRKAA1, ZBTB20 [5] och PLCE1 [6]. Dock kvarstår den underliggande mekanismen för olika gener medierad gastric cancer som ska definieras. Således är det viktigt att ytterligare undersöka molekylära patogenes av magcancer med hjälp av systematiska biologi tillvägagångssätt, såsom byggandet av differentiellt uttryckta gener-reglerande nätverk för att identifiera viktiga genen vägen eller signalering under magcancer utveckling eller progression.

genuttryck regleras på transkription och translation nivåer. På transkriptionsnivå gen transkriptionsfaktorer (TFS) spelar en viktig roll i regleringen av mänsklig genuttryck, medan miRNA kan vid posttranskriptionsnivå reglera mRNA-translation och halveringstid. Specifikt, TF: er är proteiner som binder till specifika DNA-sekvenser och därigenom styra gentranskription. Mirna är en klass av naturligt förekommande små icke-kodande RNA med 18 till 22 nukleotider i längd och funktionellt, kan miRNA posttranskription tystnad proteinuttryck genom att binda till komplementära mål gentranskript och därmed försämra dessa budbärar-RNA eller hämma dem från att översätta till proteiner. Sålunda kan både TF: er och miRNA reglera gener i olika skeden av genexpression och kan bilda en återkopplingsslinga och ett komplicerat reglerande nätverk att tätt styra genuttryck. I detta avseende, kunde studier av denna gen reglerande nätverk hjälper oss att förstå cell homeostas och fysiologisk process, biologisk funktion, och mekanismen för sjukdomar. Hittills har ett antal studier visat genreglering av TF och miRNA i magcancer, såsom nukleär faktor kappa B [7], FoxM1 [8], hypoxi-inducerbara faktor 1 [9], och MIR-7 [10] mir-375 [11], mIR-125b, mIR-199a, mIR-100 [12]. Faktum är avvikande miRNA eller TF uttryck bidrar till mänsklig cancer [13]. Därför, i denna studie undersökte vi vilken roll de kombinerade miRNA och transkriptionsfaktorer i reglering av genuttryck i magsäckscancer för association med magsäckscancer progression. Vi upptäckte först differentiellt uttryck av gener och miRNA i magcancer vävnadsprover och analyserade dem bioinformatically att bilda den reglerande nätverk TF-miRNA att relatera uttryck av E2F familjen mRNA i magcancer. Vi bekräftade sedan E2F uttryck för association med magsäckscancer progression.

Material och metoder

Patienter och vävnadsprover

Denna studie har godkänts av etikkommittén School of Basic Medical Sciences, Jilin University och varje patient samtyckt i ett skriftligt informerat samtycke formulär. Efter det inskrivna vi 70 patienter magcancer från Jilin University (Changchun, Kina) mellan april 2012 och oktober 2014. Samtliga patienter fick något innan operation behandling som kemoterapi eller strålbehandling. Både tumör och avlägsna normala vävnader erhölls från operationssalen och lagrades i flytande kväve i 10 minuter.

RNA isolering och miRNA förberedelse

Totalt cellulärt RNA isolerades från vävnadsprover med hjälp av Trizol-reagens (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) och därefter renas ytterligare med hjälp av en RNeasy Mini kit (Qiagen, Düsseldorf, Tyskland). RNA-koncentrationen bestäms med Epoch Multi-volym spektrofotometer System (BioTek, Vermont, USA). Efter det var miRNA isolerades från dessa RNA-prov med hjälp av Mirvana miRNA isolering Kit (Ambion, Austin, TX, USA).

Exon microarray analys

I denna studie vi först profilerad genuttryck mellan 45 magcancer och parade intilliggande normala vävnadsprover med hjälp av Affymatrix Gene Chip Exon Arrays 1,0 ST (Affymatrix, CA, USA). Specifikt var 1 | ig RNA-prov omvänt transkriberas till cDNA och dessa cDNA-prover digererades sedan in i cDNA-fragment med endonukleaser och märktes med DNA-märkningsreagens med användning av DNA Labeling Kit (Affymatrix, CA, USA). De märkta cDNA-schabloner användes som prober för att hybridisera till Affymatrix genchip Exon Arrays 1,0 ST i ett tillstånd av 45 ° C inkubation och rotation vid 60 rpm under 17 timmar. Efter det var uppsättningarna tvättas och skannas med Gene Chip Scanner 3000 med Gene Chip Operating Software (GCOS).

Mirna microarray analys

Vi profilerade också differentiellt uttryckta miRNAs i 15 magcancer och parade intilliggande normala vävnadsprover som använder Affymatrix Gene Chip mikroRNA array. Liknande de cDNA microarray experiment de miRNA prober med användning av RNA Labeling Kit (Affymatrix, CA, USA) hybridiserades till Affymatrix Gene Chip mikroRNA array vid 45 ° C och roterades med 60 rpm under 17 timmar. Efter det var uppsättningarna skannas med GCOS.

microarray dataanalys

Råmicroarray data analyserades med hjälp av limma algoritm för att identifiera differentiellt uttryckta gener och miRNA och analyseras sedan med hjälp av linjära modeller och empiriska Bayes metoder. En t
-test och Bonferroni korrigering användes för att bedöma den statistiska signifikansen av varje differentiellt uttryck. Gener och miRNA ansågs vara signifikant differentiellt uttryckt om p
-värden < 0,05 och genuttryck visade åtminstone 1,5-faldig förändringar mellan cancer och deras normala vävnader. Qubic (Kvalitativ BI-klustring) program användes för att kluster-analys differentiellt uttryckta gener. Den grundläggande idén med algoritmen är att hitta alla undergrupper av gener med liknande uttrycksmönster bland vissa undergrupper av cancervävnader, och därmed gener som är involverade i varje sådant mönster kan eventuellt användas som signaturer för cancer sub-typning eller iscensättning. För vår bi-klusteranalys, har vi använt följande parametrar: r = 1, q = 0,06, c = 0,95, o = 100, f = 1 [14,15]. Databas för Notering, visualisering och integrerade Discovery (David) och Kyoto Encyclopedia of gener och genom (Kegg) verktyg användes för funktionell analys och väg klassificering av dessa olika gener.

QRT-PCR

totalt cellulärt RNA från cancer och normala mag vävnader omvänt transkriberas till cDNA med hjälp av en ^{st cDNA-strängen Synthsis Kit (Takara, Dalian, Kina) enligt tillverkarens rekommendationer. Expression av E2F1, E2F2 och E2F4) mRNA analyserades i 10 gastrisk cancer och parade intilliggande normala vävnadsprover med q-PCR med användning av SYBR Premix Ex Taq (Takara) och β-aktin användes som en intern kontroll. Primrarna listas i tabell 1. De qPCR data för kvantifierades genom att använda 2 ΔΔCt metoder.}

Konstruktion av TF-miRNA sam-reglerande nätverk

Efter microarray analys av data, vi fick TF och latenta målgener som regleras av E2F familjen genom sökning av transkriptionsregulatoriskt element Database (TRED). Dessutom har de miRNAs riktar E2F familj bestäms förhör fyra mål förutsägelse databaser, dvs Targetscan, Miranda, miRDB och miRWalk databas [16-18]. Vi kombinerade då dessa differentierade uttryckt gener och miRNA för att konstruera denna TF-miRNA samreglering nätverk med anknytning till E2F familjen använder Cytoscape programvara. I TF-miRNA samreglering nätverk, definierade vi nod som ett nav gen eller miRNA när den direkt kopplade till mer än två totalt noder i nätverket.

Analys av E2F familje mRNA för association med kliniken patologiska egenskaper från mag cancerpatienter

Använda mottagaren arbetar karakteristiska (ROC) kurvor, analyserade vi differentiellt uttryckta gener som regleras av E2F mRNA mellan magcancer och parade angränsande normal vävnad genen. Vi valde då och utmärkte de bästa matchade generna för association med kliniken patologiska egenskaper med hjälp av binär logistisk regressionsanalys.

Statistisk analys

ROC kurvan och binär logistisk regressionsanalys användes för differentiellt uttryckta gener som regleras av E2F mRNA mellan magcancer och parade intilliggande normala vävnader. Envägs ANOVA användes för att associera mellan E2F familj och graden av tumörcellinvasion. GraphPad Prism 6 programvara utfördes för att erhålla ROC kurva och beräkning av känslighet, specificitet och området under kurvan (AUC). SPSS 18,0 programvara användes för envägs ANOVA och binär logistisk regressionsanalys. Ett p-värde < 0,05 ansågs vara statistiskt signifikant

Resultat

Upptäckt av differentiellt uttryckta gener och miRNA mellan magcancer och deras motsvarande normala vävnader

Vi uruppfördes. den Affymatrix Exon Arrays analys för att detektera differentiellt uttryckta gener mellan magcancer och parade intilliggande normal vävnad i 45 patienter (patientuppgifter visas i S1 tabell). Geo Dataset av NCBI åtkomstnummer med denna studie var GSE63089. Använda > 1,5 faldiga förändringar som cut-off-värdet, identifierade vi 887 uppregleras och 93 ned-reglerade gener (S2 tabell). Funktionell analys visade att dessa differentierade gener bildas huvudsakligen gen vägar, såsom cellcykelkontroll, p53-signaleringsvägen, cancer pathway, extracellulär matrix-receptorinteraktion, cellvidhäftning, glykolys /glukoneogenes, och cytokin receptorinteraktion (Fig. 1). E2F familjemedlemmar spelar en viktig roll under cellcykelns G1 /S övergången i celler och genuttryck av E2F1, 2, 3, 4, 5, och 7 befanns alla vara överuttryck (p < 0,01) i gastric cancer i detta studie.

Nästa, också utförde vi array analys av Affymatrix Gene Chip mikroRNA i 15 fall av magcancer och parade intilliggande normala vävnader (patienternas data visas i S1 tabell). Geo Dataset av NCBI åtkomstnummer med denna studie var GSE63121. Vi hittade 41 nedregleras och 4 uppregleras miRNA (S3 tabell). Fikon. 2 illustrerade bi-kluster klusteranalys av dessa differential 45 miRNAs i magcancer kontra normala vävnader. Funktionellt kan dessa differentiellt uttryckta miRNA reglera olika genprodukter vägar, såsom transkriptionsaktivator aktivitet, DNA-bindande, transkriptionsfaktoraktivitet, post transkriptionell reglering av genuttryck, och G1 /S övergång av mitotiska cellcykeln.

Building- upp och analys av E2F familjerelaterad TF-miRNA samreglering nätverk

för att visa E2F familjerelaterad TF-miRNA samreglering nätverk, utnyttjade vi TRED att fråga TF och latent målgener reglerade genom E2F familj och valde sedan differentiellt uttryckta TF och latenta målgener i magcancer vävnader. Vi hittade totalt 105 TF och latenta målgener som kan potentiellt regleras av E2F familj i magcancer (5 nedregleras och 100 upp-reglerade gener, se S4 tabell), vilket skulle kunna utgöra ett 105-gen nätverket efter bi- kluster klusteranalys (Fig. 3) Den DAVID analys visade dessa 105 gener är de flesta cellcykelrelaterade gener (Fig. 4).

Därefter använde vi onlineverktyg Targetscan, Miranda, miRDB och miRWalk databas för att förutsäga potentiella inriktnings gener av dessa 45 miRNA och sedan samman dessa inriktnings gener med dessa 105 differentiellt uttryckta gener. Vi hittade 7 nedregleras och 2 uppregleras miRNA (S3 tabell). Efter att vi byggt upp E2F-relaterade TF-miRNA reglerande nätverk (Fig. 5).

Efter det analyserade vi denna E2F-relaterade TF-miRNA reglerande nätverk och fann att E2F1, E2F2 och E2F4 i E2F familjen spelar en viktig roll i denna TF och miRNA samreglering nätverk. Tre över reglerade mRNA (E2F1, E2F2 och E2F4) från differentiellt uttryckta mRNA validerades med realtids-PCR (RT-PCR). Resultaten visade att E2F1, E2F2 och E2F4 var reglerat i magcancer proven jämfört med normala prover. RT-PCR-resultat och microarray data överensstämmer (p < 0,05, Fig 6.). Dessutom identifierade vi 9 nav-gener från E2F-relaterade TF-miRNA reglerande nätverk, som kan samverka regleras av TF (Fig. 7). David analys av dessa 9 nav gener och funktioner visas i tabell 2.

Association of E2F familje mRNA-nivåer med klinik patologiska egenskaper från gastric cancerpatienter

Vi analyserade ytterligare ett uttryck för E2F mRNA och sedan i samband dem med kliniken patologiska egenskaper från gastric cancerpatienter. ROC-kurvor analysen visade att E2F1, 2, 3, 4, 5, och 7 kan vara de latenta mål att skilja magcancer vävnad och de normala (Fig. 8). Kombination av flera E2F familje mRNA kan ytterligare förbättra specificiteten och känsligheten för deras särskiljande mellan magcancer och normala vävnader efter regression av binär logistisk analys (Fig. 8). Dessutom fann vi nivån av E2F1, 2, 3, 4, 5, och 7-mRNA associerade med djup av gastrisk cancerinvasion (Fig. 9). Vi fann också att E2F uttrycket har samband med tumördifferentiering (Fig. 10).

Diskussion

I denna studie utnyttjade vi en cut-off-värde av 1,5 gånger förändring profilerade differentiellt uttryckta mRNA och miRNAs i magcancer vävnader, vilket är i linje med de flesta av tidigare studie av cDNA eller miRNA microarrays [19]. Dessa differentiellt uttryckta mRNA och miRNA i magcancer vävnader var mestadels relaterade till cellcykelprogression, särskilt E2F familj. Hittills har medlemmarna i E2F proteiner inkluderar E2F1- E2F8 och bland dem, E2F1, 2, 3, 4, 5, och 7 proteiner allt väsentligt överuttryckt i magcancer i den aktuella studien. Således, förutspådde vi att E2F familj har viktiga reglerande funktioner i magcancer. Därför konstruerade vi denna E2F-relaterade TF-miRNA samreglering nätverk för magcancer utifrån våra microarray profildata. Detta nätverk innehåller 105 TF och deras reglerade latenta målgener (5 nedregleras och 100 upp-reglerade gener) som är relaterade till E2F familj och 9 differential miRNAs (7 nedregleras och 2 uppregleras miRNA) (Fig. 5) . Med andra ord kan E2F familj av gener agera på dessa 105 gener och 9 miRNAs att reglera cellcykelns progression av magcancer. I själva verket fann vi att målgener regleras av E2F1 och E2F4 verkade mängder differentiellt uttryck i magcancer, vilket tyder på att E2F1 och E2F4 är mycket sannolikt att inta en viktig del i tillväxten av magcancer. Dessutom miRNAs differentiellt uttryckta i magcancer kunde reglera uttrycket av E2F1, E2F2, E2F5 och E2F7, vilket tyder på att miRNAs-förändrade uttryck av E2Fs proteiner är viktiga faktorer i magcancer utveckling eller progression.

I själva verket E2F familjemedlemmar spelar en viktig roll under cellcykelns G1 /S övergång i celler och deras förändrade uttryck bidrog ett antal humana sjukdomar, inklusive cancer [20]. Till exempel, under gastrisk cancertillväxt och progression, kommer cancerceller främja tumörcellproliferation, men hämma apoptos. På gennivå, transkriptionsfaktor E2F familj av gener spelar en viktig roll i regleringen av cellcykelprocessen genom att gynna snabb expression av gener som krävs för DNA-syntes vid G1 /S fasövergång. E2F aktivitet själv styrs av retinoblastom protein (RB) och fick proteiner p107 och p130. Hittills medlemmarna i E2F proteiner är E2F1-E2F8, inklusive transkriptions aktiverade faktorer E2F1-3a, som främst reglerar cellcykeln övergång från G0 till S-fas, och transkription hämmade faktorer E2F3b-E2F8, som uttrycks i vilande eller differentierade celler och förhindra cellcykelprogression [21]. Tidigare studier har visat att förändrad expression av E2F-genfamiljen var nära förknippad med tillväxten av bröstcancer [22], äggstockscancer [23], blåscancer [24], kolorektal cancer och cancer i bukspottskörteln [25]. I magcancer, tidigare studier visade att E2F onormalt uttrycktes och E2F uttryck regleras av miRNA var associerad med cellcykelprogression och apoptos förtryck i gastric cancerceller för att undertrycka TGF tumörsuppressor väg [26]. E2F genmutation är också en av orsakerna till tidig magcancer förekomst [27]. Vår nuvarande uppgifter stöds detta konstaterande.

Men förutom E2F familj, TP53, BRCA1 och STAT3 spelar också en viktig roll i denna TF och miRNA samreglering nätverk (Fig. 5). Till exempel, TP53is en av de mest studerade gener och spelar en roll i regleringen av apoptos, genomisk stabilitet, och angiogenes [28]. En tidigare studie visade att p53
mutation är direkt kopplade till utvecklingen av magcancer [4] och en annan studie visade att återställande av p53-aktivitet inducerade känslighet för magcancer till kemoterapi [29]. BRCA1 är känsligheten genen för bröstcancer och reglerar cell apoptos och reparationer DNA-skada. BRCA1 spelar en roll i regleringen DNA-reparationsaktivitet och BRCA1
mutation bidragit till utvecklingen av bröstcancer, äggstockscancer [30], pankreascancer [31], och magcancer [32]. Förlorat uttryck av BRCA1 protein var associerad med dålig överlevnadsgrad av gastric cancerpatienter [33]. Vår aktuella studien visade att BRCA1 mRNA i samband med magcancer differentiering. Dessutom är STAT3 en transkriptionsfaktor som aktiveras som svar på tillväxtfaktorer och cytokin, och bidrar till reglering av cellproliferation, apoptos och motilitet i celler. Tidigare studier har visat att STAT3 var en viktig reglerande faktor [34] i magcancer utveckling och att STAT3-aktivering främjas tumörcellöverlevnad och migration [35]. En tidigare studie utnyttjas STAT3 hämmare för behandling av magcancer och visade effekt [36].

Dessutom miRNA (MIR-125a-5p, MIR-331-3p, MIR-17, MIR-150, MIR-155 mir-27b, mIR-31, mIR-92a och mIR-509-5p), som differentiellt uttryckta i magcancer, befanns reglera uttrycket av E2F1, E2F2, E2F5 och E2F7 i denna studie (S3 tabell). Tidigare studier har visat att MIR-125a-5p uttryck i samband med gastric cancer genom att rikta av E2F3 [37]. MiRNA-331-3p riktar direkt E2F1 och inducerad tillväxthämning av mänskliga gastric cancerceller [38]. Dessutom kunde blockera TGF-β1-medierad aktivering av Rb uttrycket av MIR-155 och i sin tur för att minska förekomsten av den hämmande pRB-E2F1 komplex och lyft G0 /G1 gripande [39]. MIR-17 familje kluster växer fram som viktiga modulatorer av TGF-βtumor suppressor signalering i magcancer, genom reglering av p21, E2F1-3 och E2F5 mål genuttryck [40-42]. Dessutom, MIR-150, MIR-31, och MIR-92a visades också nära relaterad till magsäckscancer [43-46]. Även om det har förekommit någon rapporterat om MIR-509-5p i samband med magcancer, MIR-509-5p anslöt sig Mdm2 /p53 återkoppling och reglerar tillväxten av cancerceller [47]. Dessa studier överensstämde med våra nuvarande resultat.

Dessutom kan det föreskrivande förhållandet mellan TF-gener och miRNA-TF har de synergieffekter. Baserat på vår nystartade E2F-relaterade TF-miRNA samreglering nätverk, identifierade vi nio nav-gener som huvudsakligen innebär i cellcykeln och kromosom organisation (Fig. 7). Vidtagit alla uppgifter tillsammans, vår nuvarande studie indikerar att magcancer utveckling och progression är inblandade flera gener och fortsatta studier kommer att fokusera på dessa gener som nya mål för kontroll av magcancer.

Men vår nuvarande studie bara som en preliminära uppgifter och ytterligare bekräftelse studier behövs för att verifiera våra data i ex vivo och in vitro. Denna systematiska tillvägagångssätt kan hjälpa oss att utforska cancer patogenes och ge den teoretiska grunden för att söka ny strategi för behandling av magcancer i framtiden.

Bakgrundsinformation
S1 tabell. Kännetecken för patienter
doi:. 10,1371 /journal.pone.0116979.s001
(DOC) Review S2 tabell. . Sammanfattning av 980 differentiellt uttryckta gener i gastric cancervävnader jämfört med de avlägsna normala vävnader
genuttryck nivåer i magcancer vävnader jämfört avlägsna normala vävnader var minst 1,5 gånger annorlunda med ett p-värde. ≪ 0,05
doi: 10.1371 /journal.pone.0116979.s002
(XLSX) Review S3 tabell. . Sammanfattning av 45 differentiellt uttryckta miRNA i gastric cancervävnader jämfört med de avlägsna normala vävnader
nivåer av miRNA uttryck i magcancer vävnader kontra avlägsna normala vävnader var minst 1,5 gånger annorlunda med ett p-värde < 0,05.
doi: 10.1371 /journal.pone.0116979.s003
(XLSX) Review S4 Tabell. Sammanfattning av 105 differentiellt uttryckta gener i TF-reglerande nätverk i magcancer vävnader
doi:. 10,1371 /journal.pone.0116979.s004
(DOCX) Review

Tack till

vi tackar Medjaden Bioscience Limited (Hongkong, Kina) för redigering och korrekturläsning detta manuskript.

• PLOS ONE: Urinnivåer N-nitrosoföreningar i förhållande till risk för magcancer: Resultaten från Shanghai Cohort Study
• PLOS ONE: Kirurgiska Resultat av 2041 varandra följande Laparoskopiska gastrektomi Rutiner för Gastric Cancer: en storskalig Case kontroll Study