Magcancer cellsupernatant orsakar apoptos och fibros i de peritoneala vävnader och resulterar i en gynnsam miljö för peritoneala metastaser, in vitro och in vivo

Magcancer cellsupernatant orsakar apoptos och fibros i de peritoneala vävnader och resulterar i en gynnsam miljö för peritoneala metastaser, in vitro Mössor och in vivo
abstrakt
Bakgrund
I denna studie undersökte vi effekter av lösliga faktorer som frisätts av gastric cancerceller på peritoneala mesotelceller i Methods
HMrSV5, en human peritoneal mesothelial cellinje in vitro Mössor och in vivo
.
, inkuberades med supematanter från gastric cancerceller. Morfologiska förändringar hos HMrSV5 celler observerades. Apoptos hos HMrSV5 celler observerades under ett transmissionselektronmikroskop och kvantitativt bestämmas genom MTT-analys och flödescytometri. Uttryck av apoptosrelaterade proteiner (kaspas-3, kaspas-8, Bax, Bcl-2) till immunokemiskt utvärderades Resultat.
Synliga morfologiska förändringar som indikerar apoptos observerades i HMrSV5 celler 24 h efter behandling med supernatanterna från gastric cancerceller. In vivo
, peritoneala vävnader behandlade med magcancer cellsupernatant var kraftigt förtjockad och innehöll omfattande fibros.
Slutsatser
Dessa resultat visar att supernatanter av gastric cancerceller kan inducera apoptos och fibros i HMrSV5 humana peritoneala mesotelceller genom supernatanter i början peritoneal metastas, i en tidsberoende sätt, och indikerar att lösliga faktorer i bukhålan påverkar morfologi och funktion av mesotelceller, så att den resulterande miljön kan bli gynnsamt för peritoneala metastaser.
Nyckelord
peritoneala karcinomatos Mage neoplasmer mesotelcell Apoptos Fibrosis bakgrund
Peritoneal karcinomatos begränsar allvarligt förbättring av cancerpatienter som gastriska 'prognoser efter operationen [1]. Peritoneala metastas resulterar i en metastatisk kaskad, vanligtvis inträffar vid slutskedet tumörutveckling, vilket avsevärt bidrar till magcancer relaterad dödlighet. Mekanismerna för peritoneal metastas av diffust infiltrerande cancer är inte klart.
Peritoneal stroma miljö gynnar spridningen av tumörceller genom att fungera som en rik källa av tillväxtfaktorer och kemokiner kända för att vara inblandade i tumörmetastas. Molekyler som förmedlar denna kaskad har inte undersökts [2]. Enligt uppgift kunde mesotelceller förhindra cancerinvasion och undergår morfologiska förändringar som svar på lösliga faktorer som frisätts av cancerceller [3]. De specifika molekyler som är involverade i denna process bestäms av inneboende egenskaper hos de metastatiska tumörceller. Tumörceller behöver fästa ordentligt på submesothelial monoskiktet och tränger in i mesothelial monolager för invasion. Buck et al.
[4], undersöks den skyddande effekten av mesothelial skiktet, med användning av en råttmodell, i vilken mesothelial slemhinnan i parietala peritoneum avdrevs i de experimentella råttor, som lämnar det basala membranet intakt. Vi visade tidigare att lagret av konfluenta, intakta mesotelceller hindrar cancercellinvasion av bukhålan. Men när integriteten för denna barriär bryts, kan metastaser uppträda, eftersom bukhinnan ger en gynnsam miljö för gastric cancerceller att växa [5-9]. Ytterligare studier har visat att, före fastsättningen av gastric cancerceller på bukhinnan, mesotelceller förvärva halvsfärisk form och börja kasta. Som ett resultat, är nakna områden i submesothelial bindväv exponerades till peritonealkaviteten [10-12]. Det är troligt att penetrering av mesothelial monoskiktet av tumörceller initierar med tumörinducerad mesotelcell apoptos. I denna studie undersökte vi effekterna av lösliga faktorer som frisätts av gastriska cancerceller på morfologi och biologiska aktiviteten för peritoneala mesotelceller in vitro och in Metoder
vivo
.
Reagents
3- (4, 5-dimetyltiazol-2-yl) -2,5-difenyl tetrazoliumbromide (MTT) erhölls från Fluka, USA. Propidiumjodid (PI) erhölls från Biosharp, USA. Bcl-2, Bax, kaspas-3, var kaspas-8 och aktin primära antikropparna, och den sekundära antikroppen, get-anti-mus-IgG erhölls från Santa Cruz Biotechnology Inc., CA, USA. Dulbeccos modifierade Eagles medium (DMEM) och fetalt kalvserum (FCS) erhölls från GIBCO BRL (Grand Island, NY, USA). Andra laboratoriereagenser erhölls från Sigma, USA. En faskontrastmikroskop (Japan Nikon), transmissionselektronmikroskop (Hitachi H-6001, Japan) användes.
Cellinjer och cellkultur
mänskliga peritonealdialys mesotelceller linje HMrSV5 erhölls från Institutionen för cellbiologi , Kina Medical University, Kina. HMrSV5 isolerades ursprungligen från human omentum. Kortfattat, omentum som samlats in från samtyckande icke-uremiska patienter som genomgick elektiv bukkirurgi, och inkuberades i 0,05% (vikt /vol) trypsin och 0,01% (vikt /volym) EDTA under 20 min vid 37 ° C. De skördade mesotelcellerna centrifugerades vid 150 g under 5 min och överfördes sedan till 75 cm 2 vävnadsodlingskolvar och odlas i en fuktad 5% CO 2 inkubator, i DMEM kompletterat med 10% fetalt kalvserum (FCS ), 100 U /ml penicillin, 100

• Är samtidig splenektomi fördelaktigt för den långsiktiga överlevnaden för patienter med magcancer genomgår botande gastrektomi? En enda institution study
• Expression och kliniska betydelsen av långa icke-kodande RNA HNF1A-AS1 i human magcancer