Mastcelltäthet i gastriska biopsier av åldersgrupp och dess relation till inflammation och förekomst av Helicobacter pylori

Mastcelltäthet i gastriska biopsier av åldersgrupp och dess relation till inflammation och förekomst av Helicobacter pylori Bild Sammanfattning
Bakgrund
Syftet med denna studie var att undersöka sambandet mellan mastcelldensitet, histologiska svårighetsgraden av gastrit ., och närvaron av Helicobacter pylori (H. pylori) i antral slemhinnan av pediatriska patienter
metoder
i studien ingick 352 (192 manliga och 160 kvinnliga, < 14 år) patienter. Samtliga fall genomgick endoskopi, och biopsier erhölls för histopatologisk undersökning och utvärdering av Helicobacter pylori. Alla biopsier utvärderades enligt Sydney systemet och mastcelltätheten i antral slemhinnan analyserades med Giemsa-färg. Spearmans korrelationstest användes för att bestämma förhållandet mellan mastcelltäthet och andra histopatologiska parametrar. Jämförelsen av mastcelldensitet mellan H. pylori positiva och negativa grupper analyserades med Mann Whitney U-test.
Resultat
Mast celltätheten var 12,6 ± 0,87 i 0,25 mm 2 (0-81). Hjälp av svårighetsgraden av gastrisk inflammation hos H. pylori-positiva och negativa patienter var 1,7 ± 0,6 och 0,6 ± 0,7, respektive, vilket var statistiskt signifikant (p = 0,0001). Mastcelltäthet var inte korrelerad med förekomsten och graden av inflammation, aktivitet, närvaro och värdering av H. pylori i antrum (p > 0,05). Det fanns ingen signifikant korrelation mellan mastcelldensitet och allergi.
Diskussion
Vi drog slutsatsen att det kan finnas vissa andra sätt för bidraget av mastceller i patologiska processer som inbegriper mag-tarmkanalen hos barn.
Bakgrund
Mast celler är runda till ovala celler av bindväv, som mäter 20-30 mikrometer i diameter med cytoplasmiska granuler innehållande glykosaminoglykaner leder till metachromasia och även histamin, neutrala proteaser, trombocytaktiverande faktor och många andra [1]. Ytan av mastceller innehåller specifika receptorer för IgE, som efter fixering och bindning med speciella antigener, kan resultera i frisättning av mastcells granuler och därmed omedelbar överkänslighetsreaktion [1].
Mastceller härstammar från benmärg och är av den De viktigaste celler i inflammatoriska processer. Medan de släpper flera mediatorer och cytokiner i början av inflammatoriska processen, är de betraktade som proinflammatoriska celler av vissa författare [2]. De har viktig roll för att utlösa och reglera inflammatoriska processer. De bor intill blod och lymfatiska kanaler främst under epitelytor såsom hud, respiratoriska, gastrointestinala och urogenitala systemet [3].
Sedan 1996 få studier har utförts på mastcelldensitet i gastrointestinala biopsier, huvudsakligen i vuxen ålder. Nakajima et al. påvisat mastceller genom immunhistokemisk färgning med antihuman tryptas antikropp i gastriska biopsier och drog slutsatsen att täthet av mastceller var två till tre gånger större i H. pylori infekterade magslemhinnan än i negativ normal mage [4]. Bamba et al. visade att ökningen av gastric mastceller i H. pylori positiva biopsier beror på att in situ proliferation av mastceller snarare än migrering från andra webbplatser och resultat från stamcellsfaktor och interleukiner 3, 4 och 6 [5]. Sulik et al. studerade mastcell engagemang i barn med eller utan infektion av H. pylori. Resultaten från denna studie visade att mastceller genom sina många mediatorer kan spela en nyckelroll i kronisk gastrit särskilt i H. pylori positiva fall [6]. Mysorekar et al. undersökte graden av mastcell inblandning i antral gastrit med och utan H. pylori-infektion hos patienter med symtom som tyder på syra peptiska sjukdom. De drog slutsatsen att H. pylori kunde vara ansvarig för att öka mastcelltätheten i det gastriska antrum [7]. Kayaselcuk et al. undersökt sambandet mellan mastcelldensitet, H. pylori densitet och histopatologisk svårighetsgrad av gastrit i corpus och antral mucosa och drog slutsatsen att mastcelltätheten var signifikant högre hos H. pylori positiva gruppen än negativ grupp och även den högre mastcellfördelning korrelerades med ökad inflammation och aktivitet [8]. Maciorkowska et al. utvärderade biopsiprover av magslemhinnan som samlats in från H. pylori-positiva patienter, patienter efter H. pylori-infektion och H. pylori-negativa barn. Proverna bedömdes med avseende på infektion och inflammation och färgades med anti-human mastcell tryptas att räkna mukosala mastceller. I morfometrisk utvärdering, var små skillnader som finns i antalet mastceller bland grupper som inte var statistiskt signifikant (antalet mastceller är: 86,4, 81,4 och 70,2 celler /mm2 av provet, respektive) [9]
Som nämnts. ovan, har studier på mastcelltäthet utförts huvudsakligen på vuxna och på ganska små grupper som ännu. Så vi bestämde oss för att studera mastcelltätheten i åldersgrupp på något större antal fall i en remiss barn sjukhus med lång erfarenhet i pediatrisk gastroenterologi.
Syftet med denna studie var att undersöka sambandet mellan mastcelldensitet, histopatologiska fynd och närvaron av Helicobacter pylori i antral slemhinnan i pediatriska patienter
metoder
352 barn (< 14 år gammal, med magbesvär). hänvisade till barn Medical Center, Tehran University of Medical Sciences med olika gastrointestinala problem var inskrivna i denna studie från 2004-2006, genom sekventiell provtagning. Samtliga fall genomgick endoskopi, och antral biopsier erhölls för histologisk undersökning och utvärdering av Helicobacter pylori. Ett frågeformulär fylldes för varje patient inklusive kliniska och endoskopiska fynd och historia av mat och andra allergier.
Proverna fixerades i 10% formalin, bearbetades, inbäddades i paraffin och skars i sekventiella 3 mikrometer sektioner. Ytliga och djupa snitt färgades med haematoxyline-eosin (två bilder) och en bild färgades av Giemsa fläcken. Gastric svårighetsgrad bestämdes genom Sydney poängsystem och närvaro och poängsättning av H. pylori bestämdes av kriterier i tabellen 1.Table en modifierad poängsystemet för H. pylori densitet.
Densitet av H. pylori

Histologiska funktioner
0
inga bakterier 1
få bakterier (5 till 10) observerades endast under × 40 förstoring 2
Fläckvis utgåvan (< 50 av de totala yta kryptor) med lägre densitet (NCB < 10) katalog 3
Fläckvis fördelning (< 50 av de totala ytan kryptor) med högre densitet (NCB > 10) katalog eller diffus spridning (> 50 av de totala yta kryptor) med blandning av låg densitet (NCB < 10) 4
Diffus fördelning (> 20 av de totala yta kryptor) med blandning av hög (NCB > 10) och låg densitet ( NCB < 10) katalog 5
Diffus utgåvan (> 50 av de totala ytan kryptor) alla med hög densitet (NCB > 10) Review NCB = Antal av H. pylori i varje kryptor
Mastceller celler~~POS=HEADCOMP var räknas av Giemsa fläcken på × 1000 förstoring i 10 områden med en Zeiss standard 20 ljusmikroskop och summan beräknades för varje fall (som mäter 0,25 mm 2). Alla mastcellräkningar och histologisk utvärdering utfördes av en enda observatör.
Den statistiska analysen utfördes med användning av SPSS, version 11,5 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Värden testades för normalitet med hjälp av en Kolmogorov-Smirnov test. Spearmans korrelationstest användes för att bestämma förhållandet mellan mastcelltäthet och andra histopatologiska parametrar. Jämförelsen av mastcelldensitet mellan H. pylori positiva och negativa grupper analyserades med Mann Whitney U-test. Ett P-värde på 0,05 eller mindre ansågs signifikant.
Resultat
Under en period av studie två år, var 352 antral biopsier erhölls från deltagarna. Bland dessa personer, 54,5% (192 personer) var män. Det fanns ingen signifikant skillnad mellan kön av patienterna (p > 0,05). Medelåldern för patienter som ingick i studien var 7,17 ± 3,27 (intervall: 1-14 år). Tabell 2 ger en indikation på patienternas grundläggande egenskaper och klinisk diagnos. Som framgår av tabell 2, 119 personer (33,8%) av patienterna hade smärta innan du äter, 102 personer (28,9%) smärta efter att ha ätit, 49 personer (13,9%) viktminskning, och 47 personer (13,5%) hade halsbränna. Inget betydande samband återfanns mellan kön och typ av gastrointestinala klagomål. 69 personer (19,6%) var positiva för allergi historia. Endoskopiska fynd visas i tabell 2.Table 2 Patienternas baslinjedata och klinisk diagnos baserad på endoskopiska fynd.
vid manliga (n = 192)

kvinnliga (n = 160)
p-värde
Ålder (år) *
7 ± 3,5
7,3 ± 3,1
nsa
symptom (%) katalog Pain innan du äter
66 (18,7%) Review 53 (15,1%) Review NSB
Smärta efter att ha ätit
60 (17%) Review 42 (11,9 %) katalog NS
Viktminskning
29 (8,2%) Review 20 (5,7%) katalog NS
halsbränna
23 (6,6%) Review 24 (6,8 %) katalog NS
övriga
55 (15,6%) Review 38 (10,7%) katalog NS
historia allergi (%) Review 34 (17,7%) Review 35 (21,8%) katalog NS
klinisk diagnos (%) Review Baserat på Endoskopiska resultat
Normal
85 (24,1%) Review 75 (21,3%) katalog NS
Esofagit
32 (9,1%) Review 25 (7,1%) Review gastrit
37 (10,5%) Review 30 (8,5%) Review Duodenit
3 (0,9%)
3 (0,9%) Review Gastroesophagitis
35 (9,9%) Review 27 (7,7%) Review Data visas som medelvärde ± SD.
ANOT signifikant (NS), students t test.
bchi square test
Såsom visas i tabell 3, av 352 fall, 36,6% av gastriska biopsier visade ingen signifikant patologisk förändring, 29% mild kronisk gastrit, 10,2% moderat kronisk gastrit, 1,1% svår kronisk gastrit, och 23% follikulär gastrit. 15,6% uppvisade också aktivitet. 17,6% av fallen var positiva för H pylori. Hjälp av svårighetsgraden av gastrisk inflammation hos H. pylori-positiva och negativa patienter var 1,7 ± 0,6 och 0,6 ± 0,7, respektive, vilket var statistiskt signifikant (p = 0,0001). Det fanns en statistiskt signifikant samband mellan H. pylori och aktiviteten av gastrit (p = 0,0001) .table 3 Patologiska egenskaper
vid manliga (n = 192)
kvinnliga (n = 160)
p-värde
gastrit (%) Review Normal
70 (19,9%) katalog 59 (16,8%)
0,166
Mild
55 (15,6%) Review 47 (13,4%) Review Måttlig
26 (7,4%) Review 10 (2,8%)
Svår
1 (0,3%) Review 3 (0,9%) Review Follikulära
40 (11,4%) Review 41 (11,6%) Review Helicobacter pylori (%)
34 (9,7%) Review 28 (8%) katalog 0,537
aktivitet (%) Review 30 (8,5%) Review 25 (7,1%) Review 0,560
Mast celltäthet
medelvärde (intervall) Review 13,1 (0-78) Review 12,2 (0-81) katalog NS
Median
7
5
en ej signifikant (NS)
Mast celltätheten var 12,6 ± 0,87 i 0,25 mm 2 (intervall: 0-81) (Fig. 1). Mastcelltäthet, närvaro och graden av inflammation baserat på H. pylori-status presenteras i tabell 4. Vi fann ingen signifikant korrelation mellan mastcelldensitet och kön av patienterna. Också ingen signifikant korrelation mellan mastcelldensitet och närvaron och graden av inflammation [(r = -0,032, p = 0,604), (Fig. 2)], aktivitet (p = 0,09) och närvaro av H. pylori (p = 0,21). Enligt H. pylori-status, det inte fanns någon statistiskt samband mellan mastcelldensitet och svårighetsgraden av gastrit (fig. 3 och 4). Ingen signifikant skillnad fanns mellan mastcelldensitet och historia av allergi (p = 0,34) .table 4 Mast celldensitet och närvaron och graden av inflammation.
gastrit

mastcelldensitet
Totalt (n = 352) på
HP (+) (n = 62) Review HP (-) (n = 290) Review normalt
0
14 ± 18,6 (6) Review 13,9 ± 18,5 (5,5) Review mild
19,3 ± 30,9 (3) Review 13,7 ± 15,1 (9) Review 9,4 ± 11,8 ( 4,5) Review måttlig
5,2 ± 6,3 (2,5) Review 11,7 ± 13,5 (5,5) Review 9,4 ± 11,8 (4,5) Review svår
14
3 ± 5,1 (0)
5,7 ± 6,9 (4,5) katalog follikulärt
10,1 ± 14,5 (5) Review 12,1 ± 15 (4) Review 11 ± 14,6 (5) Review total
9,5 ± 14,1 (4) *
13,3 ± 16,5 (6,5) Review Data visas som medelvärde ± SD (median) Review HP: Helicobacter pylori
* Mann-Whitney-test; inte statistiskt signifikant (p = 0,217) katalog Figur 1 Mastceller ses av Giemsa färgning som stora ovala celler som innehåller metakromatiska granulat (fem ses i detta område, oljeimmersion × 1000, Giemsa fläcken).
figur 2 Förhållandet mellan mastcelldensitet och svårighetsgraden av gastrit (r = -0,032, p = 0,604).
Figur 3 sambandet mellan mastcelldensitet och svårighetsgraden av gastrit i H. pylori negativa patienter (r = -0,003, p = 0,962) .
Figur 4 förhållandet mellan mastcelldensitet och svårighetsgraden av gastrit i H. pylori-positiva patienter (r = 0,182, p = 0,485) Diskussion
mast~~POS=TRUNC celler~~POS=HEADCOMP.
påstås vara en viktig del i cellulär infiltration under loppet av gastrisk mukosal inflammation på grund av H. pylori-infektion [10]. Det är bara lite data i litteraturen om antalet mastceller i kronisk inflammation i magslemhinnan i åldersgrupp och befintliga uppgifter har ganska motstridiga resultat.
Mast cell upptäckt är ganska lätt genom en enkel och billig färgning (Giemsa) som också kan användas för att detektera närvaro av H. pylori. Det är värt att notera att tillförlitlig detektering uppnås genom att undersöka vävnad under oljeimmersion (x1000) och i lägre förstoringar de kan missas. Även guldmyntfoten är färgning av vävnad med anti-tryptas antikropp genom immunhistokemiska metoder, är det en tidskrävande och ganska dyr metod rekommenderas inte för rutinmässig patologisk bedömning av gastric biopsier.
Vi bestämde oss för att studera på ganska stort antal prover i en remiss barn sjukhus med lång erfarenhet av pediatrisk gastroenterologi och bestämma mastcelldensitet och dess relation till inflammation och förekomst av H. pylori.
i denna studie har vi inte märker en betydande korrelation mellan mastcelldensitet, svårighetsgraden av inflammation, aktivitet av gastrit och närvaro och frekvens av H. pylori i antrum. Våra resultat är ganska i överensstämmelse med resultaten av några författare som Maciorkowska et al., Men inte andra [6-8], även om ingen av dessa studier genomfördes på ett sådant stora serier som vår.
H. pylori är den mest frekventa och betydande faktor i etiologin för kronisk aktiv gastrit, förutom att vara inblandad i olika sjukdomar såsom magsår, gastriskt adenokarcinom, och lymfom [8]. Våra resultat visade också att det fanns ett signifikant samband mellan infektion med H. pylori och svårighetsgraden av gastrit (p = 0,0001).
Mastceller är de viktigaste cellerna i akuta allergiska reaktioner med medling av IgE. I denna studie fanns ingen signifikant korrelation mellan allergiska symtom som anges av föräldrar (mat och andra allergier) och gastric mastcelldensitet.
Många barn genomgå endoskopi med vanligt klagomål av kronisk eller återkommande buksmärtor i vårt center. De finns främst inom intervallet 5 till 7 år och inga betydande förändringar observeras både endoskopiskt och mikroskopisk undersökning, som i många av våra fall (nästan 231 av 352 fall). Vår studie visar att mastcelltätheten i denna grupp är något högre än andra grupper (även om statistiskt ej signifikant) och föreslår vi att kanske mastceller spelar en roll vid produktionen av sådana symptom inte genom deras traditionella kända vägar i inflammatoriska processer men med en ännu odefinierat väg såsom stimulerande effekt på mag nerv plexus. Så rekommenderar vi att ökningen av mastcelltätheten bör ingå i slutrapporten av gastric biopsier.
Även om vi inte utfört immunohistokemiska fläckar för mastcelldetektering, föreslår vi att Giemsa fläcken är en pålitlig och enkel färgningsmetoden finns i alla laboratorier och även har god interobserver korrelation. Även om det har också brister, såsom felaktig detektering av artefaktuella färgning som mastceller, effekter av ödem och krympning och även saknade dem på grund av degranulering, dessa har ingen betydande inverkan på den slutliga sammanräkningen.
Förutom bristerna i vår studie är det nödvändigt att nämna att den utfördes på ett ganska stort antal pediatriska patienter och resultaten är inte överraskande samstämmiga med andra studier huvudsakligen utförs i vuxen åldersgrupp.
förklaringar
Tack
studien utfördes av ett bidrag från Immunology, astma och allergi Research Institute, Barn Medical Center, Tehran University of Medical Sciences
Vi är tacksamma för Ms Zahra Omidi och Ms Mitra Mir. Khaef för deras hängivna teknisk support.
Författarnas ursprungliga inlämnade handlingarna Images of Nedan finns länkar till författarnas ursprungliga inlämnade filer för bilder. 13000_2006_60_MOESM1_ESM.pdf Författaroriginalfilen för figur 1 13000_2006_60_MOESM2_ESM.pdf Författaroriginalfilen för figur 2 13000_2006_60_MOESM3_ESM.pdf Författaroriginalfilen för figur 3 13000_2006_60_MOESM4_ESM.pdf Författaroriginalfilen för figur 4

• Dåligt differentierad komponent i gastriska nypa biopsier förut submukosala invasion
• Skillnader i riskfaktorer mellan mönster av återfall hos patienter efter kurativ resektion för avancerad magsäckscancer