Correlatie van hK6 expressie met tumorrecidief en prognose bij gevorderde maagkanker

Correlatie van hK6 expressie met tumorrecidief en prognose bij gevorderde maagkanker
Abstracte achtergrond
Human kallikreïne-gen 6 (KLK6) is een lid van het menselijke kallikreïne-gen familie (kallikreïnen, KLKs). Menselijke kallikreïne-gerelateerde peptidase 6 (hK6) een trypsine-achtige serine protease gecodeerd door het KLK6, is gemeld in hoge mate tot expressie gebracht in verschillende kankers waaronder maagkanker. In deze studie onderzochten we het de correlatie van hK6 expressie met klinisch-pathologische kenmerken, tumor herhaling en de prognose bij vergevorderde maagcarcinoom na curatieve resectie.
Methods
We retrospectief geanalyseerd de klinische gegevens van 129 gevallen gevorderde maagkanker na curatieve gastrectomy . De expressie van hK6 in gevorderde maagkanker weefsels in vergelijking met aangrenzende kankerachtige weefsels werden onderzocht, en de relatie tussen hK6 expressie en klinisch-pathologische kenmerken geëvalueerd. In extra, werden deze patiënten opgevolgd om de relatie tussen hK6 expressie en de overlevingsduur te onderzoeken.
Resultaten
Het positieve tarief van hK6 expressie was significant hoger bij gevorderde maagkanker weefsel, dan die in aangrenzende goedaardige en maagzweren weefsels (36,5%, 33,3%, respectievelijk, P < 0,001). Er was een nauwe relatie tussen hK6 expressie en TNM stadium (P = 0,005), vasculaire invasie (P = 0,037) en perineurale invasie (P = 0,035). Bovendien, patiënten met hK6 positieve toonde significant hogere herhaling en slechtere prognose dan die met hK6 negatief. Multivariate analyse toonde aan dat hK6 expressie was een belangrijke onafhankelijke factor voor tumor herhaling en de algehele overleving.
Conclusie
hK6 is overexpressie in gevorderde maagkanker weefsels. De klinische bruikbaarheid kan worden gebruikt als een ongunstige indicator in het voorspellen tumorrecidief en prognose van gevorderde maagkanker draait. Deze studie suggereert ook dat hK6 een potentieel therapeutisch doel voor maagkanker kunnen zijn
Virtual slides Ondernemingen De virtuele slide (s) voor dit artikel kun je hier vinden:. Http: //www. Diagnosticpathol gie. diagnomx. eu /vs /8558403578787206
Sleutelwoorden
Maag gezwellen Human kallikreïne-gerelateerde peptidase 6 (hK6) Herhaling Tumormarkers Inleiding
Maagkanker is een van de meest voorkomende kwaadaardige tumoren en de tweede belangrijke oorzaak de dood van alle kankers bij de klinische [1], en chirurgische resectie blijft nog enige curatieve behandeling. Zelfs indien de operatie hebben postoperatieve chemo-immunotherapie radiotherapie, doelgerichte therapie die multidisciplinaire samenwerkende stand de overleving van maagkankerpatiënten verbeterd. Nog steeds de postoperatieve herhaling tarief van maagkanker is hoog, vooral gevorderde maagkanker (Advanced maagkanker verwijst naar dat tumor binnenvalt om de muscularis propria of via de muscularis om serosa en extra serosa). En vroegtijdige diagnose moeilijk de specifieke tumormarkers detectie van tumorherval nog niet ontdekt. ​​Ondernemingen De KLKs bestaan ​​uit 15 homologe genen die coderen afgescheiden serineproteasen, gelokaliseerd in tandem op chromosoom 19q13.4. De KLKs vergelijkbare genomische organisatie en tonen significante homologie op zowel de nucleotide- en eiwitniveau. Hetzelfde gen van de familie is uitgedrukt in verschillende weefsels en meerdere genen worden gewoonlijk tot expressie gebracht in hetzelfde weefsel [2].
KLK6 is een lid van de KLKs, dat codeert voor menselijke kallikreïne-gerelateerde peptidase 6 (hK6). Het is een serineprotease bestaande uit 223 aminozuren met trypsine-achtige activiteit. hK6 is onafhankelijk gekloneerd door drie groepen, onder toepassing van een differentiële weergave techniek van primaire en metastatische borstkankercellijnen. Anisowicz et al. [3] eerst geïsoleerd van volledige lengte cDNA van KLK6, genoemd protease M, dat sterk tot expressie wordt gebracht op het mRNA-niveau op bepaalde primaire borstkanker cellijnen en eierstokkanker weefsels en cellijnen. Yamashiro et al. [4] gekloneerd ditzelfde gen, genaamd neurosin, uit een cDNA-bibliotheek bereid uit een humane colorectale kanker cellijn (COLO 201). Tenslotte, Little et al. [5] gekloneerd identieke cDNA, Zyme genaamd, uit het hersenweefsel van een patiënt met de ziekte van Alzheimer, die een belangrijke rol gespeeld bij de ontwikkeling en progressie van de ziekte van Alzheimer. Studie bleek dat hK6 sterk werd uitgedrukt in maagkanker en aangegeven een slechte prognose [6].
Naar ons beste weten, weinig studies zijn onderzocht met betrekking tot de klinische betekenis van hK6 meningsuiting in gevorderde maagkanker met een recidief en de prognose. In dit onderzoek onderzochten we de expressie van hK6 in de chirurgische specimens van gevorderde maagkanker weefsels gepaarde aangrenzende goedaardige weefsels en maagzweren weefsels middels immunohistochemie HRP en hun correlatie met klinisch-pathologische kenmerken en patiënten overleving geanalyseerd om de betekenis van hK6 in geavanceerde verduidelijken maagkanker na curatieve chirurgie.
Materialen en werkwijzen
patiënten en het verzamelen van weefselmonsters
Een totaal van 129 monsters werden verkregen van patiënten van januari 2007 tot november 2011, die curatieve chirurgie in Huizhou Gemeentelijke onderging voor gevorderde maagkanker Centraal Ziekenhuis van Guangdong. Resectie monsters werden bevestigd primaire gevorderde maagkanker zijn klinische pathologie, geen van de patiënten geen chemotherapie, radiotherapie en andere adjuvante therapie voorafgaand aan gebruik. 52 blokken van aangrenzende goedaardige gastrische weefsels (minimaal 5 cm van de kanker marge) werden verkregen van patiënten. Bovendien, 36 monsters verkregen van patiënten die een operatie ondergaan en werden bevestigd aan een maagzweer gebruikt als controles in dezelfde periode.
Patiënten , klinisch-pathologische kenmerken zoals geslacht en leeftijd, tumor locatie, omvang, differentiatie, T podium, lymfeklier metastase, TNM stadium en of herhaling werden retrospectief beoordeeld. De gemiddelde leeftijd was 60 jaar (bereik: 28 ~ 80 jaar) met 56 vrouwen en 73 mannen. Alle patiënten werden geënsceneerde op basis van de TNM classificatie van het Gemengd Comité Amerikaanse on Cancer (AJCC, 7e editie criteria, 2010) [7] .Tumor locatie in de maag fundus /cardia was 21 gevallen, maag lichaam 32 gevallen, maag antrum 76 gevallen . Tumorgrootte was groter dan 5 cm in 70 gevallen, en minder dan 5 cm in 59 gevallen, ingedeeld 16 gevallen zo goed of matig gedifferentieerde (met inbegrip van buisvormige en papillair adenocarcinoom), 113 gevallen slecht gedifferentieerde (slecht types gedifferentieerd adenocarcinoom en andere mobiele zodanig als mucineuze adenocarcinoom en zegelring celcarcinoom enzovoort), 19 gevallen waren T2, 55 gevallen waren T3 en T4 respectievelijk. N0 /N1 werd gevonden in 49 gevallen, N2 /N3 in 80 gevallen, 43 gevallen withi /II podium, 86 gevallen III /IV stadium, schriftelijke toestemming werd verkregen van alle patiënten of hun families. De studie werd goedgekeurd door het Instituut , s ethische commissie van Huizhou Municipal Central Hospital. Alle monsters werden gefixeerd in 10% geneutraliseerd maldehyde, ingebed in paraffine, gesneden in 3-pm dikke secties en bevestigd op objectglaasjes voor immunohistochemie analyse.

Immunohistochemie Immunohistochemie werd uitgevoerd met het mierikswortelperoxidase tweestapswerkwijze die vermijdt de interferentie van endogene biotine, waardoor de niet-specifieke vals-positieve achtergrondkleuring verminderen. Immunohistochemie werd uitgevoerd in acht stappen volgens de instructies uitgevoerd: 1, werden de paraffine secties van paraffine ontdaan in xyleen, gerehydrateerd met gradiënt ethanol. 2, antigeenterugtrekking werd uitgevoerd in Tris-EDTA buffer (pH 9,0) met een snelkookpan. 3, Block endogeen peroxidase met 3% waterstofperoxide. 4, vervolgens geïncubeerd met het gezuiverde konijnen polyklonaal antilichaam (AP6325a, Abgent, San Diego, USA), antigeenterugtrekking en verdunning bepaald door voorafgaande experimenten. 5, Detectie van hK6 immuuncomplex werd geïncubeerd met de PV9000 kits (Golden bridge Biotechnology Co, Ltd, Beijing, China). 6, gekleurd met diaminobenzidine substraat chromogeenoplossing (Goldenbridge Biotechnology Co, Ltd) tot de optimale kleuring werd bereikt. 7, De secties werden tegengekleurd met hematoxyline, gedifferentieerde, keerde blauw. 8, ten slotte, gedehydrateerd door middel van gradiënt alcohol, geklaard in xyleen, neutrale gom gemonteerd. Dan waargenomen onder de optische microscoop.
Immunohistochemische kleuring score Leer Alle dia's afzonderlijk door twee senior pathologen werden beoordeeld, zonder voorafgaande kennis van clinicopathologische parameters, de uiteindelijke score voor hun gemiddelde. Voor evaluatie van hK6 immunohistochemische kleuring werd het percentage positieve cellen kwantitatief 10 gebieden die de tumor werden willekeurig geselecteerd, expressie in 1000 kanker cellen (100 cellen per veld) werd geëvalueerd met behulp van een krachtige magnifcation (400 X) en een gemiddeld werd kwantitatief en gescoord als: 0 voor het percentage positieve cellen ≤ 10%, 1 voor het kleuren van 11 ~ 25%, 2 voor het kleuren van 26 ~ 50% en 3 voor het kleuren van 51 ~ 75%, 4 voor het kleuren van > 75% van de cellen onderzocht [6], de kleurintensiteit werd respectievelijk semiquantitatively ingedeeld als volgt: 0 geen signaal, 1 zwak, 2 matige en 3 sterk volgens de voorgaande literatuur [8], totaal kleuring score van 4 of meer werd beoordeeld als immunohistochemische positief.
Follow-up
Al deze patiënten kregen fluorouracil gebaseerde adjuvante chemotherapie na de operatie. Als een regelmatige follow-up, waren alle patiënten gecontroleerd bij elke 3 maanden gedurende de eerste 2 jaar en elke 6 maanden in het derde tot het vijfde jaar, een keer per jaar daarna. Medisch werk-up bestond uit anamnese en lichamelijk onderzoek, hematologie en biochemische tests, inclusief serum CEA, CA19-9 en CA72-4, en imaging waaronder borst radiografie, barium maaltijd, abdominale echografie (US), computertomografie (CT), en endoscopie afhankelijk van de klinische situatie. De follow-up tijd had de dag van de operatie als uitgangspunt, de tijd van de tumor recidief en de dood werden geregistreerd, deze twee punten werden geëvalueerd voor voorspellende analyse. Als de follow-ups onvolledig waren, werden de patiënten of hun familie telefonisch contact, de uiterste datum voor de follow-up was mei 2012 heeft de mediane follow-up periode na de operatie was 25 maanden (range 4-64 maanden).
statistische analyse
statistische analyse werd met behulp van de SPSS 13.0 uitgevoerd, de relaties tussen hK6 meningsuiting en de patiënt klinisch-pathologische kenmerken werden geanalyseerd met de Chi-kwadraat (χ 2) en Fisher's exact test. Om te overleven analyse werden twee eindpunten onderzocht: recidief-vrije overleving (RFS) en totale overleving (OS) resp. RFS wordt gedefinieerd als het tijdsinterval tussen het tijdstip van de operatie en de datum van eerste gedetecteerde herhaling of metastase en OS wordt gedefinieerd als het tijdsinterval tussen het tijdstip van de operatie en de datum van overlijden of de datum van laatste follow-up voor de die leefden aan het einde van de studie. De Kaplan-Meier model gebruikt om het bestaan ​​tussen patiënten positieve en negatieve hK6 expressie onderzocht. De betekenis van een verschil in de overleving curves werd bepaald met de log-rank test. Variabelen bereiken van een significantieniveau in de univariate analyse werden vervolgens in een voorwaartse LR proportionele risicoanalyse (Cox-model) die variabelen onafhankelijk geassocieerd met overleving identificeren geïntroduceerd, de p-waarde van 0,05 (of minder) werd beschouwd als statistisch significant.
resultaten
hK6 expressie in gevorderde maagkanker weefsels
verschillende eiwitten werden tot expressie gebracht in verschillende locatie van de cel, zoals cytoplasma membraan, kern [9, 10] .hK6 positieve kleuring was voornamelijk in het cytoplasma van maagkanker cellen als bruin of donker bruin korrels (figuur 1) werd ook in de aangrenzende goedaardige en maagzweren epitheelcellen waargenomen door immunohistochemie. Het percentage positieve KLK6 expressie bij maagkanker weefsels was 77,5% (100/129), aanzienlijk hoger dan in aangrenzende goedaardige weefsels (36,5%) en zweren (33,3%) weefsels respectievelijk (P < 0,001; Tabel 1). Figuur 1 Immunohistochemische kleuring van hK6 in de gevorderde maagcarcinoom (A, B) en aangrenzende goedaardige (C, D) weefsels. Een hK6 positieve meningsuiting; B hK6 negatieve meningsuiting; C hK6 positieve meningsuiting; D hK6 negatieve uitdrukking.
Tabel 1 De expressie van hK6 in aangrenzende goedaardige, maagzweer en gevorderde maagkanker weefsels
Group
Cases
Positive
Positieve rate

χ2-value

P-value

GCT
129
100
77.5%
39.201
<0.001a
ANT
52
19
36.5%
0.096
0.757b
GUT
36
12
33.3%
Afkorting: ANT
, Aangrenzend goedaardige weefsels; GUT
, maagzweer weefsels; GCT maagkanker bij GCT in vergelijking met ANT en GUT, P < 0.001, ANT in vergelijking met GUT, P = 0,757.
HK6 meningsuiting en klinisch-pathologische kenmerken Ondernemingen De correlatie tussen hK6 expressie niveaus en clinicopathologische kenmerken is zoals samengevat in tabel 2, hK6 expressie significant gecorreleerd met TNM stadium (P = 0,005) , vasculaire invasie (p = 0,037) en perineurale invasie (p = 0,035). hK6 positieve tumoren vaker waren later stadium een ​​verhoogde incidentie van vasculaire en perineurale invasie, anderzijds werd geen statistisch significant verschil waargenomen tussen de expressie en geslacht, leeftijd, tumor, grootte, differentiatie, T-trap, lymfe lodes metastase of marge (P > 0,05) .table 2 De relatie tussen KLK6 meningsuiting, tumorrecidief en klinisch-pathologische kenmerken
kenmerken
Cases
Positive
Positieve rate

χ2-waarde
P-waarde
Geslacht
1.214
0,271
Female
56
46
82,1%
Man
73
54
74,0%
Age
0,067
0,796 Restaurant < 60 jaar
65
51
78,5%
≥60 jaar
64
49
76,6%
Tumor website
3,806
0,149
fundus /cardia
21
19
90,5%
lichaam
32
26
81,3%
antrum pylorus
76
55
72,4%
tumorgrootte
0.540
0,462
< 5 cm
59
44
74,6%
≥5 cm
70
56
80,0%
Differentiatie
0.004
0,951
goed /matig gedifferentieerde 16
16
13
81,3%
slecht gedifferentieerde
113
87
77,0%
T-stadium
1,486
0,476
T2
19
13
68,4%
T3
55
45
81,8%
T4
55
42
76,4%
Lymfeklier
1.682
0,195
N0 /N1
49
35
71,4%
N2 /N3
80
65
81.3 %
Vasculaire invasie
4,370
0,037
Absent
81
58
71,6%
Presenteer
48
42
87,5%
perineurale invasie
4,439
0.035
Absent
76
54
71,1%
Presenteer
53
46
86,8%
Margin
0,211
0,646
Absent
110
84
76,4%
Presenteer
19
16
84,2%
TNM stadium
8,029
0.005
I + II
43
27
62,8%
III + IV
86
73
84,9%
hK6 meningsuiting associatie met tumor herhaling en een slechte algehele overleving
Aangezien de follow-up eindigde, was 68 (52,7%) patiënten overleden, Een totaal van 61 patiënten overleden als gevolg van progressie van de tumor en 7 te wijten aan andere oorzaken. In totaal waren er 69 (53,5%) patiënten ontwikkelden tumor recidief, 31 van hen ontwikkeld als loco-regionale recidief, 19 zoals metastasen op afstand (11 in de lever, 3 in de longen, en 5 in het bot), 14 als peritoneale herhaling en 5 als overblijfsel; Alle, maar acht patiënten met een tumor recidief overleed aan het.
Kaplan-Meier survival curves aangegeven patiënten met positieve hK6 uitdrukking hadden meer kans om zowel een kortere RFS (P = 0,002, figuur 2A) in vergelijking met patiënten met een negatieve hK6 meningsuiting. Univariate analyse expressie met betrekking tot RFS, met behulp van de Cox regressie model, bleek dat hK6 uitdrukking, TNM stadium, grootte van de tumor, T-stadium, lymfe lodes, marge en waren beïnvloedende factoren voor RFS, wanneer hK6 expressie, samen met andere factoren werden onderzocht in een multivariate model, TNM stadium, hK6 uitdrukking, tumorgrootte, marge waren onafhankelijke voorspellers terugkeer van de tumor (tabel 3), wat aangeeft hK6 positieve patiënten zijn twee keer meer kans op een recidief dan hK6 negatieve hebben. Figuur 2 Kaplan-Meier curves toont de kans vrij van herhaling (A) en algehele overleving (B) bij patiënten met hK6-negatieve en hK6-positieve expressie. Afkortingen:. 95% CI 95% betrouwbaarheidsinterval, HR hazard ratio, OS totale overleving, RFS recidief-vrije overleving
Tabel 3 Univariate en multivariate analyse van hK6 en andere klinisch-pathologische kenmerken met betrekking tot RFS in gevorderde maagkanker

Univariate
Multivariate
Variable
HR
95% CI
P
HR

95% CI
P
Gender F /M
1.05
0.65 -1 0,69
0.86
- -
-
Age < 60 /≥60 jaar
1.30
0.81- 2.08
0.29
- - -
Tumor website
-
- 0,58
- Frankrijk -
- body /fundus
0.68
0,31-1,49
0,33
- -
- antrum /fundus, body
0.88
0,45 -1,71
0,70
- - -
tumorgrootte < 5 /≥5 cm
2.05
1,25-3,37
0,005
1,80
1,07-3,04
0,027
graad Well /Slecht
0.88
0,40 -1,93
0.75
- - -
T-stadium
-
- 0.10 -
-
- T3 /T2
2.21
0,92-5,30
0,077
-
- 0.58
T4 /T2, T3
2.60
1,08 -6,26
0,032
-
- 0.75
N-stadium N0,N1/N2,N3
2.28
1.34-3.87
0.002
–
–
0.83
Vascular−/+
0.91
0.49-1.70
0.77
–
–
–
Perineural−/+
1.27
0.71-2.25
0.42
–
–
–
Margin−/+
2.42
1.41-4.15
0.001
2.49
1.44– 4.31
0.001
TNM stadium I, II /III, IV
3.10
1,69-5,68
0.000
2.25
1,18 -4,30
0,014
hK6- /+
2,77
1,41-5,47
0.003
2.09
1,04 -4.
230,039
Volgens de survival analyse, Kaplan-Meier survival analyse toonde aan dat patiënten met een positieve hK6 uitdrukking hebben lagere OS (P = 0,002, figuur 2B), univariate analyse bleek dat positief hK6 uitdrukking, TNM stadium, grootte van de tumor, lymfeklieren, T-stadium, en de marge zijn belangrijke factoren die de OS tarieven, wanneer deze factoren waren betrokken bij een multivariate analyse (Tabel 4), TNM podium en hK6 waren onafhankelijke prognostische factoren van OS.Table 4 Univariate en multivariate analyse van prognostische factoren van OS in gevorderde maagkanker
Univariate
multivariate

Variable
HR
95% CI
P
HR
95% CI
P
Gender F /M
1.35
0,80-2,25
0.26
- -
- Age < 60 /≥60 jaar
1.59
0,95-2,67
0.08
- - -
Tumor website
-
- 0,17
- Frankrijk -
- body /fundus
0.47
0,20-1,09
0,078
- -
- antrum /fundus, body
0.57
0,29 -1,13
0.11
- - -
tumorgrootte < 5 /≥5 cm
1.72
1,02-2,90
0.043
-
- 0.57
graad Well /Slecht
0.57
0,26-1,27
0.17
- - -
T-stadium
-
- 0.004 -
-
0,019
T3 /T2
1.60
0,66-3,89
0,30
0,83
0,33-2,12
0,70
T4 /T2, T3
3,36
1,38-8,15
0.007
1.86
0,73-4,70
0.19
N-stadium N0,N1/N2,N3
2.87
1.57–5.21
0.001
–
–
0.12
Vascular−/+
1.23
0.65-2.34
0.52
–
–
–
Perineural−/+
1.32
0.71-2.43
0.38
–
–
–
Margin−/+
1.29
0.72-2.31
0.40
–
–
–
TNM stadium I, II /III, IV
4.05
2.04- 8.03
<0.001
2.99
1.45–6.16
0.003
hK6−/+
2.88
1.40-5.92
0.004
2.66
1.25–5.63
0.011
Multivariate analyse gaf aan dat hK6 expressie was een van de onafhankelijke prognostische factoren voor overleving voor patiënten met maagkanker gewenste TNM (P = 0,011). Bespreking

studies bleek dat hK6 werd uitgescheiden naar de extracellulaire matrix en betrokken bij de afbraak van matrixeiwitten zoals fibronectine, laminine, vitronectine, collageen en geïnduceerde E-cadherine ectodomein verlies, verminderde de adhesie van cellen [11, 12] en leidde tot keratinocyt tumor proliferatie, migratie, invasie en metastase [13 bevorderen ]. Het is bekend dat menselijke hK6 is betrokken bij verscheidene tumoren, hebben verschillende onderzoekers gemeld dat hK6 is overexpressie in ovariumkanker [14], baarmoeder sereuze papillaire kanker [15], colorectale kanker [16], maagkanker [6] en slokdarmkanker [17], maar in underexpressed speekselkliertumoren [18] en niercelcarcinoom [19], die afhankelijk van het type tumorweefsel en micro [20]. hK6 bevordert de groei van de meeste tumoren. Wanneer echter hK6 werd overexpressie bij borstkanker MDA-MB-231 cellen, cellen werden geleid gekenmerkt omkering van het kwaadaardige fenotype, gemanifesteerd door lagere proliferatiesnelheden en verzadigingsdichtheid, duidelijke remming van verankering onafhankelijke groei, verminderde celmotiliteit en het vermogen om te vormen tumoren. Het mechanisme kan zijn dat hK6 een beschermende rol tegen tumorprogressie gemedieerd door remming van epitheliale naar mesenchymale transitie [21] spelen.
Tot nu toe is gebleken dat KLK6 opgereguleerd in gastrointestinale maligniteiten zoals pancreas en darmkankers [22]. Ogawa et al. [16] gemeld dat KLK6 mRNA expressie was significant hoger in kankercellen dan in overeenkomstige goedaardig colorectaal weefsel. Kim et al. [23] onderzocht de KLK6 mRNA en zijn overeenkomstige proteïne niveaus middels RT-PCR en ELISA, vond dat KLK6 mRNA opgereguleerd ongeveer 8-voudig, in vergelijking met nontumor regio en serum hK6 niveaus van maagkankerpatienten was 1,7-voudig tot gezonde individuen. Wanneer inactivering KLK6 met kleine interferentie RNA (siRNA), cellulaire invasiviteit daalde met 45%. Hij ontdekte ook dat KLK6 afbreken extracellulaire matrix eiwitten aan tumor invasiviteit en metastase. Exogene overexpressie van KLK6 leidde tot een verminderde activiteit van de E-cadherine-promoter. Bovendien, onze studie toonde de positieve snelheid van hK6 meningsuiting in gevorderde maagkanker weefsel was significant hoger dan die in aangrenzende goedaardige en maagzweer weefsel. Er werd echter geen verschil gevonden tussen aangrenzende goedaardige weefsels en maagzweer weefsel. Deze bevindingen suggereren dat expressie hK6 een belangrijke rol in de maag kankerontwikkeling kunnen spelen.
Ogawa et al. [16] gemeld dat hoge KLK6 mRNA expressie in colorectale kanker weefsels werden gecorreleerd met serosal invasie, lever metastase, geavanceerde Duke's stadium, echter, beperkte rapporten stelde de relatie tussen KLK6 expressie en klinisch-pathologische kenmerken. Nagahara et al. [6] gemeld dat overexpressie van KLK6 geassocieerd is met TNM, lymfatische invasie bij patiënten met maagkanker. In de huidige studie, de TNM de positieve percentage hK6 expressie was significant hoger in later stadium (stadium III en stadium IV: 84,9%) dan die eerder stadium (stadium I en II mannetje: 62,8%). Het verschil was statistisch significant, waaruit blijkt dat hK6 positieve uitdrukking was sterk gecorreleerd met TNM etappe in gevorderde maagkanker. Onze studie toonde ook aan dat er een relatie bestaat tussen hK6 positieve uitdrukking met vasculaire invasie, die consistent zijn met [6] verslag Nagahara was. Bovendien werd gemeld dat hK6 positieve uitdrukking werd geassocieerd met perineurale invasie, die niet bestudeerd in [6] verslag Nagahara, maar het moet verder onderzocht worden om na te gaan. Wij vonden geen verband tussen hk6 meningsuiting in gevorderde maagkanker en de patiënt geslacht, leeftijd, tumor site, grootte, differentiatie, T-stadium, lymfe ader metastase, die in overeenstemming met eerdere resultaten [6].
Een overvloed aan bewijs heeft aangetoond dat verschillende leden van de KLKs potentiële biomarkers kanker [24]. De meest bekende en gebruikte KLKs is KLK3. KLK3 gen codeert voor prostaatspecifiek antigeen (HK3), door de Amerikaanse FDA goedgekeurd als specifieke marker van prostaatkanker, die op grote schaal wordt gebruikt voor screening, diagnose, het bepalen van de werkzaamheid en de beoordeling van de prognose van prostaatkanker [25]. KLK2 eiwit (hK2), wordt ook beschouwd als een secundaire marker van prostaatkanker. Recente rapporten hebben aangegeven dat hK6 hoge expressie bij eierstokkanker [26], darmkanker [16, 27], pancreaskanker [28], niet-kleincellig longcarcinoom [29] en intracraniale tumoren [30] kan een onafhankelijke prognostische factor , wat suggereert dat hK6 een prognostische marker voor deze tumoren kunnen zijn.
Studies hebben gesuggereerd dat een hoge KLK6 expressie nauw werd geassocieerd met een kortere algehele en ziektevrije overleving voor eierstokkanker [31] en darmkanker patiënten [32]. Hetzelfde resultaat werd bevestigd in gevorderde maagkanker in onze studie. Al deze suggereren dat KLK6 een potentiële biomarker in het voorspellen van de tumor herhaling en therapeutisch doel voor hen kan zijn. Veel studies vertoonden consequent dat TNM stadium het meest betrouwbare prognostische indicator van gastrointestinale tumoren zoals maagkanker, maag lymfomen patiënten [9, 10, 33, 34], terwijl andere kenmerken, is er geen overeenstemming. Jin et al. [33] gevonden Ezrin overexpressie significant verhoogd in lymfklier metastase, Demirag et al. [10] toonde PKP3 expressie en slechte prognose bleken te correleren met lymfklier nummer. Terwijl in de huidige studie, hadden we geen associatie tussen lymfeklier metastase en prognose in multivariate analyse te vinden.
Met de ontwikkeling van moleculaire en proteomics bij maagkanker, hebben veel eiwitten potentiële markers voor vroege diagnose, prognose en therapeutische geweest doelwitten van maagcarcinoom, onder hen c-Met [9], PKP2 en PKP3 [10], Ezrin [33], zijn de bekende ones.Moreover, andere moleculaire biomarkers zijn momenteel in studie.
Enkele eerdere studies onderzochten de clinicopathologic betekenis van hK6 meningsuiting in gevorderde maagkanker weefsels. Dus in dit onderzoek onderzochten we het verband tussen hK6 expressie met tumor recidief en prognose bij gevorderde maagkanker. De bevindingen geven aan dat de expressie van hK6 geassocieerd is met TNM, vasculaire invasie, perineurale invasie en slechte prognose voor patiënten met gevorderde maagkanker. Bovendien vonden we dat patiënten met een positieve hK6 uitdrukking hadden meer kans om herhaling te hebben, en lagere RFS en OS tarieven in vergelijking met degenen met een negatieve hK6 expressie. Multivariate analyse bleek dat hK6 expressie een significante onafhankelijke prognostische factor RFS en OS bij patiënten met gevorderde maagkanker. Onze bevindingen ondersteunen dat hK6 kan worden gebruikt als een potentiële biomarker en therapeutisch doelwit voor maagkanker. Bovendien kan positieve uitdrukking van hK6 in gevorderde maagkanker weefsels waardevolle informatie aan het biologische gedrag van maagkanker te begrijpen.
Kortom, onze studie toonde aan dat hK6 expressie in gevorderde maagkanker significant gecorreleerd met TNM stadium, vasculaire invasie en perineurale invasie evenals RFS en OS tarieven. Dit is een zeldzame rapport aan hK6 expressie en haar correlatie met tumorrecidief en een slechte prognose bij gevorderde maagkanker te evalueren. Verdere studies zijn nodig om de mogelijkheden te onderzoeken of hK6 kan worden gebruikt als een waardevolle biomarker te voorspellen tumor recidief en een therapeutisch doelwit voor maagkanker met serummonsters van patiënten. En we zullen ook de KLK6
onderzoeken op het mRNA-niveau uit de weefsels monsters volgende stap. Verklaringen
Dankwoord
De auteurs willen graag bedanken Wenli Zhao, Ming Zhong, Yingxia Liu (afdeling Pathologie, Huizhou eerst ziekenhuis, provincie Guangdong) en Qingxu Yang, Tongtong Wu (afdeling Pathologie, Huizhou Municipal Central Hospital, de provincie Guangdong) voor hulp bij de optische microscopische observatie en weefsel sectie.
Funding
de studie werd gefinancierd door Natural Science Foundation van de provincie Guangdong, China, (GDNSF, no.1051600101000001).
Authors 'originele ingediende dossiers voor afbeeldingen
Hieronder staan ​​de links naar de auteurs oorspronkelijke ingediende dossiers voor afbeeldingen. 'Originele bestand voor figuur 1 13000_2012_773_MOESM2_ESM.tiff Authors' 13000_2012_773_MOESM1_ESM.pdf Auteurs originele bestand voor figuur 2 Concurrerende belangen Ondernemingen De auteurs verklaard dat zij geen concurrerende rente. Bijdragen
Authors '
XL en XY pathologische uitgevoerd onderzoek, HX en JL analyzied de gegevens, YH opstellers van het manuscript. Alle auteurs gelezen en goedgekeurd het definitieve manuscript.

• Promoter methylering en expressie van TIMP3-gen in de maag cancer
• Gastrobeschermende effect van carob (johannesbroodboom L.) tegen-ethanol oxidatieve stress in rat