Botulino toksino skrandžio submucosa sumažina skatino HCl gamybą rats

botulino toksino skrandžio submucosa sumažina skatino HCl gamybą žiurkių
Anotacija pervežimas Background pervežimas botulino toksino blokų acetilcholino išsiskyrimą iš nervų galūnės ir veikia kaip ilgalaikis ir laikinai slopina raumenų susitraukimo, taip pat seilių, prakaito liaukos, antinksčių ir prostatos sekrete. Šio tyrimo tikslas yra ištirti, ar skrandžio gleivine A tipo botulino toksino sumažina paskatino skrandžio gamybą HCl.
Metodai
šešiasdešimt keturi žiurkės buvo atsitiktinių imčių į dvi grupes ir laparotomized. Viena grupė buvo gydomi botulino toksino-A 10 U pagal kelis gleivine skrandžio injekcijų, o antrasis grupė buvo švirkštas fiziologinis tirpalas. Po dviejų savaičių, rūgšties sekrecija stimuliuojama prievarčio perrišimas ir rūgšties išeiga buvo matuojamas. Kūno svoris, maisto ir vandens suvartojimas taip pat buvo registruojami kasdien.
Rezultatai
HCl gamybą po Nustatyta, prievarčio perrišimas būti žymiai mažesnis botulino toksino gydytų žiurkių (657 ± 90,25 mikromolių HCl vs 1247 ± 152 p = 0.0017). Botulino toksino gydytų žiurkių taip pat parodė, gerokai mažesnė maistą ir svorio padidėjimas.
Išvados
A tipo botulino toksinas sumažina skatino skrandžio rūgštingumą. Tai greičiausiai dėl arba slopinimo cholingerinės stimuliacijos skrandžio pakauškaulio ląstelių arba su priemone, apie myenteric nervų rezginiai. Mažinimas ekonomikos augimo ir maistą gali atspindėti ir Susilpnėjusi virškinimą ir sumažėjęs skrandžio motoriką.
Faktai
botulino toksino gaminamas bakterijų Clostridium botulinum į septynių serotipų (A per G). Tai galingiausias žinomas inhibitorius raumenų susitraukimo ir veikia trikdydami acetilcholino išleidimo į nervų apnašas [1]. , Nuryta, botulino toksinas gali sukelti apsinuodijimo maistu žinomas kaip botulizmo forma; Tačiau, ji taip pat yra labai efektyvus vaistas pacientams, sergantiems nervų ir raumenų sutrikimų. Kai toksinas suleidžiamas tiesiai į raumenį, atstojamoji slopinimas raumenų susitraukimo yra selektyvi, ilgalaikė ir grįžtamas. Poveikis prasideda 2-5 dienas po injekcijos, pasiekia savo didžiausią per 7-10 dienų ir trunka 1-2 mėnesius, priklausomai nuo dozės. BTX-A rišasi prie membranos receptoriaus cholinerginės nervų-pabaigos ir patenka į pluoštą, kai veiklioji dalis toksino hidrolizuoja SNAP-25. Šis baltymas yra 206-aminorūgščių hidrofilinis baltymas dalyvauja spąstai "sintezės mašina", kuri jungiasi ir susilieja vescicular ir plazmos membranos, galiausiai išleido neuromediatorių į sinapsių plyšyje. Pašalinant 9 aminorūgšties likutis iš SNAP-25, BTX-A lemia nervų ir raumenų paralyžių. Nuo 1973 A tipo botulino toksinas (BTX-A), buvo sėkmingai naudojami valingą susitraukimo sutrikimų, tokių kaip žvairumui, distonija, drebulio gydymui. Visų pirma, per pastarąjį dešimtmetį, klinikiniai tyrimai apibūdino terapinis panaudojimas BTX-A kai hyperkinetic ligų virškinimo trakto (GIT) [2-4]. Nuo 1992 m toksinas buvo sėkmingai naudojamas achalazija pacientams, ypač neturtingose ​​chirurginės rizikos dalykų. 1994 mūsų grupė aprašė BTX-A poveikį pacientams, kuriems yra įtrūkimas-in-ląs, ligos, susijusios su vidaus (sklandžiai) išangės sfinkterio hypertonus [5, 6].
Iš BTX-A yra veiksmų neapsiribojant nervų ir raumenų sandūroje, kaip pranešė kitose tyrimuose, kuriuose buvo nustatyta autonominė neuroglandular perdavimo būti paveikta. Paausinėje, pažandės, nosies ir prakaito liaukos buvo parodyta nuosekliai mažinti jų sekreciją po vietos injekcijos toksino, o molekulė neseniai buvo pasiūlyta kaip terapinio parinktį seilėtekis, į Frey sindromą ir į pažastų ir rankų delnų [hiperhidrozę ,,,0],7-12]. BTX-A taip pat buvo pranešta, kad sumažinti zymogen išsiskyrimą iš kasos [13, 14].
Judrumas ir sekrecijos veikla Virškinimo sistema priklausys nuo daugelio neuromediatorių ir moduliatorius. Rūgšties sekreciją reguliuoja cholinerginiu neurono, kuris sukelia tiesioginį stimuliacija parietalinių ląstelių [15]. Prievarčio perrišimas galingai stimuliuoja skrandžio rūgšties sekreciją žiurkių, kaip rodo gerai žinomus eksperimentus [16].
Kaip botulino toksinas selektyviai slopina cholinerginį nervų perdavimo, mes patikrinome hipotezę, kad prieš gydymą botulino toksino būtų sumažinti žiurkių skrandžiuose galimybę išskirti rūgštį po stimuliacijos.
metodai
chirurginės procedūros Viesbutis The eksperimentas patvirtino vietos etikos komiteto. Šešiasdešimt keturi suaugę Wistar vyrai žiurkės (svorio 240-470 g) buvo randomizuoti į BTX grupės (32 žiurkėms) ir sūrų grupės (32 žiurkėmis). Šiuo metu 0, anestezija buvo atliktas su pilvaplėvės ertmę suleista diazepamo (2 mg kg -1) ir ketamino (2 mg kg -1). Per vidurinq pilvo pjūvį skrandžio buvo veikiami ir įrašytas kartu didelio kreivę. Į BTX grupėje, skrandžio dugno ir tekstyno (ne didžiojo prieskrandžio) submucosa buvo sušvirkšta BTX-A (Botox; Allergan, Inc., Irvine, CA, JAV) 10 U 1 ml fiziologinio tirpalo, per keturių mažų injekcijų naudojant 30G adatą. Fiziologinio tirpalo grupė buvo gydomi fiziologiniu tirpalu tuo pačiu būdu,. Norėdami išvengti pooperacinių dehidratacija, gyvūnai buvo sušvirkšta 5 cc druskos po oda ant nugaros. Nuo pirmojo pooperacinio dieną (dieną 1) žiurkės buvo laikyti atskirai narveliuose ir leido maitinti iki soties (standartinis sausas granulių dieta). Kūno svoris, matuojamas ir registruojamas kasdien svoris suvartoti maisto ir mililitrų vandens suvartojimas; ant dienos 13, visi žiurkės buvo alkanas. 14-tą dieną, žiurkės buvo anestezuojamos, ir fazė prievartyje buvo veikiami ir liguotas per mažą laparotomija. Pilvo siena buvo uždaryta, o 5 CC fiziologinis buvo švirkščiamas į poodį. Prieiga prie vandens ir maisto buvo paneigta. vėliau keturias valandas per mirtina dozė anestetikų buvo suteiktas pilvaplėvės ertmę. Stemplės ir dvylikapirštės žarnos buvo nukirpti, skrandis buvo pašalintas ir skrandžio sultys surenkamos. 10 žiurkės (7 BTX ir 3 DRUSKŲ) mirė per dviejų savaičių.
Chemijos procedūra
buvo centrifuguojamas Surinkta skrandžio sultys (15 minučių esant 4000 rpm) žinoma. Virš nuosėdų buvo matuojamas ir titruojama NaOH gauti Bendras rūgščių srautą, kaip Eq per 4 valandas.
Statistika ir modeliavimas
Siekiant įvertinti bendrą skirtumą tarp šių dviejų grupių priemonėmis reikšmę (BTX vs SALINE), variance analizė buvo atlikta remiantis HCl gamybą kiekvienos žiurkės
laiko kursą kūno svorio kiekvieną žiurkė buvo įrengtas pagal piecewise tiesinės regresijos modelis:. modelis prisiima tiesinė tendencija kūno svorio mažėjo nuo dieną 0 iki žemiausias o vėliau didėja, ty W
(T
) = W
0 + K
d
T
, 0 = t
= T
N
; ir w
(T
) = W
N
+ K
g
(T UAB - T
N
), T
> T
N
; kur w
[g
] yra žiurkių kaip laiko funkciją, svoris, W
0 [g
] yra pradinis svoris su žiurkėmis, W
N
[g
] yra prie žemiausias žiurkės svorį (žemiausia prognozuojama svorio po operacijos), K
d
[g dieną
- 1] yra svorio norma pirmajame etape, t
[diena pervežimas] Ar laikas, T
N
[diena
] yra laikas, reikalingas pasiekti Nadir svoris k
g
[g dieną
-1] yra svorio prieaugis antrąjį etapą norma. Nuo w
N
= W
0 + K
D
T
N
, modelis turi tris laisvas parametrai: K
d
k
g parsisiųsti ir T
N
tiesinės regresijos analizė laikui bėgant taip pat buvo atliktas. stebėjimai laiko ir maisto ir vandens suvartojimas kiekvienoje žiurkės, duoti Apskaičiuota vertybes modelio parametro K
maisto parsisiųsti ir K
vandens
(norma maisto ir vandens suvartojimas .), atitinkamai rezultatai

imties vidurkiai, standartiniai nuokrypiai ir apie HCl gamybą skirtumo reikšmę tarp grupių yra pateiktos 1 lentelėje reikšmingas skirtumas (p < 0,002) rezultatus tarp dviejų grupių, HCl, iš viso gamyba yra žymiai mažesnis BTX rats.Table 1 BTXvs. SALINE HCl gamybos, kūno svorio kartą patiekalų parametrai, maisto ir vandens suvartojimas normos.

BTX grupė
SALINE grupė

P
HCl, gamyba [Eq /4 val]
657.031 ± 848,735
(N = 24 *)
1246.645 ± 442,128
(n = 29)
< 0,002
bazinio kūno svoris [g]
343 51,65
± (n = 26)
350 48.95
± (n = 29)
NS
KD : norma svorio po gydymo [g para-1]
-2,326 1,607
± (n = 26)
-0,3739 0,8827
(n = 29) ±
< 0,0001
kg: norma svorio po nadyro [g para-1] pervežimas 2.003 1.583
± (n = 26) pervežimas 3.423 1.593
(n = 29) ±
< 0,0025
TN: dienos metu 0 iš Nadir kūno svorio [dieną] pervežimas 2,45 1,13
± (n = 26) pervežimas 1,374 1.382
± (n = 29)
< 0.004
K maistas: norma maistą po gydymo [g para-1]
20,016 4,99
± (n = 26)
26,881 2,896
± (n = 29)
< 0,0001
K vanduo: norma vandens suvartojimas po gydymo [g para-1]
38,619 5,325
± (n = 26)
51,868 11,378
± (n = 29)
. < 0,05
* dviejų mėgintuvėlių sumušė centrifugavimo metu ir datas "negauta HCl matavimo
Balsuok kūno svorio po operacijos buvo greitesnis, žemiausias laikas buvo vėliau ir norma, po-žemiausias svorio buvo lėčiau BTX apdorotą nei kontrolinių gyvūnų (visi skirtumai labai reikšminga). Net jei žiurkės buvo reikšmingai skiriasi savo kūno svorio gydymo pradžioje, trys poveikiai aukščiau išversti į prislėgta svorio rekuperacija BTX žiurkių po operacijos. Vidutinis laikas kursai kūno svorį abiejose grupėse yra parodyta 1 Į laikui bėgant kūno svorio skirtumas buvo lygiagrečiai žymus skirtumas maisto ir vandens suvartojimas normos paveiksle, BTX-A-žiurkes valgė ir gėrė mažiau nei kontrolės žiurkėms. Laiko kursai maisto ir vandens suvartojimas abiejose grupėse yra parodyta 2 ir skaičiais 3. 1 pav laikui bėgant vidutinį kasdienį procentinį variacijos kūno svorio BTX DRUSKŲ grupes. buvo laikomi tik Ocalali 14 dieną. 100% reiškia bazinę kūno svorio kiekvieną žiurkės.
2 paveikslas laiko eiga vidutinė paros maistą ir BTX ir sūrių grupes. Tik buvo laikomi Ocalali 14 dieną.
3 pav Laikas kursas vidutinė paros vandens įleidimo į BTX ir sūrių grupes. Tik buvo laikomi Ocalali 14 dieną.
Diskusijos
Šiame tyrime, po paruošiamojo apdorojimo eksperimentinių gyvūnų su BTX-A, buvo priimta prievarčio perrišimas technika. Iš esmės, šis mechanizmas apima Vágó-nervo klajoklio reakciją, sukeltą aktyvintos gleivinės baroceptors į antralinėje dalyje [17], o ne anticholinerginis mediatoriai (histamin ir gastrino), atrodo, mažiau dalyvautų [18].
Membraniniai muskarino buvo aprašyta dėl basolateral plazminės membranos ir pakauškaulio ląsteles, patvirtinantis cholinerginis inervacijos HCl sekrecijos ląstelių [19, 20].
smarkiai sumažėjus priverstine rūgšties galingumu BTX-A žiurkes yra suderinamas su hipotezę bloko Neuro-liaukų transmisiją parietalinės ląstelės, kilusios iš skrandžio gleivinės. 1977 Kondo ir Magee pastebėjo, kad I. V. botulino toksinas gali slopinti pentagastrino sukeltas ir mažesniu mastu histamino sukelta skrandžio rūgšties sekreciją [21]. Jie taip pat pažymėjo, kad rūgštis atsakas į nervo klajoklio stimuliacija buvo, kaip ir tikėtasi, panaikino, o kad methacoline buvo inaltered. Tai pastebėjimas patvirtina, kad botulino toksinas negadina išskiriančių ląstelių, bet veikia grįžtamai slopina acetilcholino išsiskyrimą. Jos veiksmai yra tikriausiai toks efektyvus, skrandžio HCl gamybos, nes slopinant cholinerginio signalą labiausiai iš mechanizmų, kad prisidėti prie rūgšties sekrecijos yra visi slopinamas.
Kūno svorio sumažėjimas, pastebimas abiejų žiurkių grupių per pirmąsias kelias dienas po operacijos, kaip tikėtina pasekmė chirurginio streso. Po kelių dienų, sūraus gydytų žiurkių vėl auga normaliu greičiu. Priešingai, BTX-žiurkes parodė atkakliai mažesnės augimo tempai, Lygiagrečios sumažėjo suvartojamų kalorijų.
Poveikis yra labai atkuriamas, tiek suaugusiųjų ir (mažesniu mastu) gyvūnų jaunikliais. Iš tiesų ankstesniame tyrime mes iškėlė hipotezę, kad skrandžio peristaltika būtų sumažėjusi ir dėl to maistą sumažėjo. Kai rentgeno filmai žiurkių šertų priešingai parodė ilgai skrandžio ištuštinimą kartus, palyginti su ne gavusių žiurkių [22]. Šioje tyrimo eigą kūno svorio buvo tiriamas su tinkamu matematinio modelio pagalba, leidžia mums įvertinti pirmąją svorio etapą (kuris trunka kelias dienas po injekcijos į žiurkes) ir antrą svoris pelnas etapą. Šioje serijos, BTX-gavusių žiurkių turėjo statesnį ilgiau ir svorio, taip pat lėčiau po svorio priaugimo, palyginti su kontrolinių gyvūnų. . Pastebėtas poveikis kūno svorio gali būti susijusios su sutrikusio virškinimo gebėjimui, kuriam tarpininkauja skrandžio rūgšties sekrecijos slopinimo ir galbūt kitais mechanizmais,
išvados
BTX-A yra stiprus nervų ir raumenų toksinas: kai įleidžiamas raumenų, jį sumažina susitraukimo jėgą nuo dozės priklausomu būdu. Efektas yra ilgalaikis (1-3 mėnesių), grįžtamas, be didelių šalutinių poveikių.
Nervų sistemą, virškinimo trakto susideda iš labai daug neuronų tinklą, kuris yra organizuojamas gangliar ir agangliar rezginiai, kaip ir Meissner "ir Auerbach anketa rezginiai kontroliuojantys peristaltiką, sekreciją, sugertis ir muscolaris gleivinės veiklą.
nuo skrandžio HCl sekrecija yra stipriai priklausoma nuo cholinerginio veiklos pasireikšti klajoklio nervo dirginimo ir myenteric pluošto, kuris galiausiai sprendžia jų neuroglandular sankryžų, ji buvo protinga manyti, jis gali būti slopinamas vietos injekcija BTX-A [23, 24]. Skrandžio rūgšties sekreciją buvo sukeltas iki prievarčio perrišimo technika įrodyta, galingą stimulą rūgšties sekreciją. Įdomu tai, kad šis poveikis yra sumažintas vagotomy, vagolytic agentų ar gangliar blokatoriai, t.y. anti-Cholinerginį manevrus. Stebėtas poveikis stimuliuoja rūgšties produkcijos po gleivine injekcijos BTX-A dera su hipotezę sutrikusi nervų-liaukų cholinerginį perdavimą. Ji yra taip pat įmanoma, kad nervų stimuliacija buvo sumažėjusi ne iš myenteric rezginiai, kur nervų sistemos neuronų sinapsės yra gausiai lygiu. Iš toksino injekcija buvo griežtai Po gleivine, bet, kadangi molekulė turi difuzinių savybių, iš pluoštų rezginiai dalyvavimas negalima atmesti, bent jau atsižvelgiant į vidaus rezginio.
Tolesni tyrimai yra tikslingas siekiant apibrėžti veiksmų puslapį iš BTX-A skrandžio neuroninio tinklo, todėl paaiškinti, stebėtą poveikį. Tačiau dabartinė darbas rodo, kad, nepaisant galutinis priežastis svorio, gleivinės BTX-A injekcijos ženkliai paveikia skrandžio rūgšties gamyba mechanizmą ir nustato ilgalaikio svorio su eksperimentiniais gyvūnais.
Autorius įmokos
MR, SR , pls, dalyvavo projektuojant ir koordinuojant tyrimo, atliko chirurginę procedūrą ir parengė rankraštį.
SP, atliko statistinę analizę.
GD, sumanyta tyrimo ir dalyvavo jo sandarą ir koordinavimą.
Visos autoriai skaityti ir patvirtino galutinį rankraštį.
deklaracijų
nusipelniusieji
Šis darbas buvo iš dalies remiamą į Telethon-Italia suteikimo. Originalios
autorių pateikti failai vaizdų
Žemiau nuorodos į autorių originalo pateiktų failų vaizdų. 12876_2003_63_MOESM1_ESM.pdf Autorių originalus failas 1 pav 12876_2003_63_MOESM2_ESM.pdf Autorių originalaus failo 2 pav 12876_2003_63_MOESM3_ESM.pdf Autorių originalaus failo 3 pav konkuruojančių interesų
Nėra deklaruotus.

• Visceralinių riebalų pokyčiai po distalinio pašalintas skrandis pagal tipą rekonstrukcijos procedūrą skrandžio vėžio
• Metastazavusiu vėžinių evoliucija ir organoidinis modeliavimas įpainioti TGFBR2as vėžio vairuotojui difuzinio skrandžio vėžio