fluxo fenilalanina e do esvaziamento gástrico não são afectadas pela substituição de caseína com proteína de soro de leite na dieta de gatos adultos consumindo pequenas refeições frequentes

fluxo fenilalanina e do esvaziamento gástrico não são afectadas pela substituição de caseína com proteína de soro de leite na dieta de gatos adultos consumindo pequenas refeições frequentes
Resumo
fundo
diminuir a taxa de proteína de esvaziamento do estômago pode melhorar a eficiência de utilização de aminoácidos dietéticos destinados a deposição de proteína. Alguns estudos em ratos e seres humanos demonstraram caseína a ser mais lentamente liberado a partir do estômago do que a proteína de soro de leite. Para testar se a caseína induz uma taxa mais lenta de esvaziamento gástrico em gatos do que a proteína de soro de leite, L- [1- 13C] fenilalanina (Phe) foi administrado por via oral em 9 gatos adultos para estimar o esvaziamento gástrico e a todo o organismo Phe fluxo.
Resultados
concentrações de aminoácidos indispensáveis ​​no plasma não foram significativamente afetadas pela fonte de proteína dietética. -Pass primeira extração splanchnic de Phe não foi diferente entre dietas e uma média de 50% (SEM = 3,8%). A meia-hora para o esvaziamento gástrico em média 9,9 minutos com caseína e 10,3 min com proteína de soro de leite, e não foi significativamente diferente entre as dietas (SEM = 1,7 min). fluxos de fenilalanina foram 45,3 e 46,5 mmol /(min · kg) para caseína e dietas à base de soro de leite, respectivamente (SEM = 4,7 mmol /(min · kg)).
Conclusões Online em gatos adultos alimentados com pequenas refeições frequentes , a substituição de caseína com proteína de soro de leite na dieta não afecta o fornecimento ou a utilização de aminoácidos. Estas duas proteínas do leite parecem ser igualmente capaz de satisfazer as necessidades de aminoácidos dietéticos de gatos.
Palavras-chave
gato esvaziamento gástrico caseína Whey Protein fenilalanina fundo fluxo
Os gatos são carnívoros e precisam de um alto nível de proteína dietética para manter o equilíbrio de nitrogênio, em comparação com as espécies onívoras e herbívoros [1]. Este requisito é alta devido a taxas mais rápidas de catabolismo dos aminoácidos. A taxa à qual a proteína dietética é esvaziada do estômago para o intestino delgado para absorção pode influenciar a taxa de catabolismo de aminoácidos e, portanto, a capacidade de cumprir a exigência de proteína de alta do gato. Caseína e soro de leite foram designadas proteínas lentas e de esvaziamento rápidos, respectivamente, em outras espécies. Daniel et al. [2] relataram uma meia-vida média de 78 min para o esvaziamento gástrico de suspensões de caseína em ratos, em comparação com 21 min de soro de leite. A taxa de esvaziamento mais lento de caseína na dieta pode conduzir a entrega menos acelerado e mais prolongado de aminoácidos para os tecidos periféricos para a deposição de proteína corporal [3]. Em contraste, o rápido aumento na absorção de aminoácidos a partir do soro resultou em maiores perdas significativamente oxidativas de aminoácidos indispensáveis ​​em humanos [3]. No entanto, Calbet e Holst [4] não encontraram diferenças na esvaziamento gástrico de caseína vs. suspensões de soro de leite em humanos, sugerindo que o vs. designação rápido lento não é consistente. Estas diferenças podem ser um resultado do consumo total de proteínas, que as proteínas de frequência e macronutrientes que acompanham são alimentados, a forma sob a qual eles são incluídos na dieta, ou os métodos de processamento que estas proteínas estão expostos. Além disso, as perdas oxidativas de aminoácidos indispensáveis ​​podem ter menos de um efeito sobre a deposição de proteína em gatos do que onívoros porque os gatos normalmente catabolize uma grande proporção de sua ingestão dietética de aminoácidos independentemente da frequência da alimentação [5].
Para o nosso conhecimento, os efeitos de proteínas rápidas lenta comparada não foram investigados em gatos. Para testar se a caseína induz uma taxa mais lenta de esvaziamento gástrico em gatos que a proteína de soro de leite, e, portanto, pode ser um complemento atractivo a dietas comerciais felino, nós utilizadas oralmente administrado L- [1- 13C] fenilalanina (Phe) para estimar o esvaziamento taxas e de corpo inteiro cinética de Phe em gatos adultos alimentados com caseína e dietas à base de soro de leite.
Métodos
gatos e habitação
Nove castrados,, gatos shorthair doméstico livres de patógenos específicos de propriedade da Procter and Gamble, Inc . (5 do sexo masculino, 4 do sexo feminino) foram utilizados neste estudo. Os gatos foram 9,5 ± 1,2 anos (média ± SE) e pesava 5,0 ± 0,4 kg. avaliação física padrão pelo veterinário responsável da saúde geral de todos os gatos foi concluída antes do início do estudo, e todos foram considerados saudáveis. Os gatos foram identificados pelo nome e microchip, e alojado na Procter and Gamble Pet Care, Pet Health and Nutrition Center, Lewisburg, OH, EUA. Antes do início do estudo, os gatos foram aclimatados à habitação grupo na colônia gato que era um ambiente controlado onde os gatos só tinha acesso interior. Os gatos foram expostos à luz natural e artificial (0600-1800 h), temperatura ambiental interna foi mantida a 22 ° C, e os quartos foram limpos diariamente. Os gatos foram alimentados uma vez por dia em gaiolas individuais dentro de sua sala de alojamento em grupo. Uma vez que os gatos completou sua alimentação foram colocados de volta no ambiente de alojamento em grupo e todos os gatos completou sua cota diária de alimentos dentro de 5 horas. Se qualquer alimento foi deixado depois de 5 horas, ele foi pesado e ingestão alimentar verdadeira foi calculado. Todos os procedimentos foram revistos e aprovados pela P & G Pet Care Animal Care e do Comitê Use e em conformidade com os requisitos do USDA e AALAC. Relatórios da metodologia neste manuscrito adere às orientações chegar. Projeto
Experimental
O esvaziamento gástrico foi estimada comparando a cinética de rotulado excursão Phe através de plasma a partir de um oral versus uma dose IV [6]. O método também produz estimativas de extracção de primeira passagem pelo leito esplâncnico, e o fluxo de corpo inteiro de Phe. Fenilalanina é um aminoácido indispensável dietético para a síntese de proteínas e não é catabolizado para qualquer extensão, excepto no fígado onde é convertido para o aminoácido tirosina, que pode ser incorporada proteína corporal ou mais catabolizado no fígado para produzir ATP ou glucose [ ,,,0],7]. Devido ao seu baixo e continha catabolismo e tamanho pequena piscina, marcado Phe tem sido frequentemente utilizada como um marcador para as medições de síntese de proteínas e de rotação em animais [8]. , condições de estado estacionário foram alimentados usada para simplificar os cálculos de Phe fluxo. cinética intravenosa Phe foram medidos em primeiro lugar, e, em seguida, os gatos foram atribuídos a caseína e as dietas à base de soro de leite em um desenho cruzado para a avaliação da cinética de Phe orais.
Antes estimativa da cinética IV Phe, todos os gatos foram alimentados com uma comercial padrão adulto dieta (Iams multi-gato, P & g Pet Care, Mason, OH) a 60 g /dia uma vez por dia em 0700 h durante 7 dias. Este nível de ingestão historicamente não resultou em nenhuma alteração de peso em qualquer um dos gatos e, por conseguinte, foi utilizada como a exigência de energia metabolizável para a manutenção do peso dos gatos neste estudo, uma vez que queríamos os gatos para manter, não perder ou ganhar, em peso. No dia 8, depois de uma 18-h rápido, cateteres Surflo (18 ga 2 × "; Terumo Medical Corp., Somerset, NJ) foram inseridos em uma veia cefálica sob sedação com propofol (Hospira Inc., de Lake Forest, IL). A distribuição de alimentos por dia, foi dividido em 24 pequenas refeições. Depois de duas pequenas refeições foram alimentados com 15 minutos de intervalo, amostras de sangue de linha de base foram coletados a partir do cateter e, em seguida, um bolus de 12 mg /kg BW L- [1- 13 C] Phe (99 átomos% 1- 13C) foi administrado por via intravenosa (IV) através do cateter e lavada com solução salina heparinizada. Depois disso, os gatos foram alimentados 1/24 de sua ração diária de alimentos a cada ½ hora para manter um estado de equilíbrio fisiológico em que a cinética de Phe não mudaria durante a sua medição. As amostras de sangue foram recolhidas em tubos heparinizados de aproximadamente 10, 20, 30, 45, 60, 90, 120, 180, 240, 300, 480, 600, e 720 minutos após o bolus IV. tempos de amostra reais foram registrados. As amostras foram imediatamente centrifugadas a 5000 rpm e o plasma foi congelado a -20 ° C para análise posterior. Hematócrito foi avaliada a cada 6 th amostra para garantir que hematócrito não diminuiu. Não havia gatos foram removidos devido a um declínio no hematócrito.
Após o estudo IV Phe, gatos foram alocados aleatoriamente para caseína isonitrogenadas e isocalórica ou dietas à base de soro de leite (Tabela 1) em um desenho cruzado. As duas dietas felinos extrudados seco (Tabela 1) foram feitas em uma extrusora de rosca dupla (APV MPF-65, Baker Perkins Limited, Reino Unido), utilizando condições condicionado, extrusão, secagem e processamento de realce de sabor semelhantes e padrão. Ambas as dietas foram formuladas para atender ou exceder Associação de Autoridades de Controle de alimentação Americanos (Champaign, IL) recomendações e seria considerado "completo e equilibrado" para gatos adultos. Os gatos foram mantidos com estas dietas para 23 dias, e alimentado 30 g em 0700 e 1500 h diariamente. Nos dias 21 e 23, 5 e 4 gatos, respectivamente, foram submetidos a um protocolo de cinética Phe oral de acordo com o protocolo descrito acima IV, onde 12 mg /kg de peso corporal de L- [1- 13C] Phe foi administrado por via oral por seringa. Os gatos foram subsequentemente alimentados com a dieta normal durante 7 d, comutada para a dieta experimental em frente aos 21 e 23 dias, e o protocolo Phe cinética oral foi repetida. Atribuição de gatos para amostragem nos dias 21 ou 23 permaneceu a mesma em ambos periods.Table 1 Ingrediente e composição química de caseína e dietas à base de soro de leite (como alimentados base)
Ingredientes (%)
caseína
Whey
milho amarelo
37,2
35,2
caseína
20,0
0
Whey
0
21,6
gordura de frango
9,7
9,1
glúten de milho
6.1
6,2
refeição subproduto de frango
10,7
10,7
frango
5.0
5.0
polpa de beterraba
2,4
2,4
frango digest
fosfato 1,4
1,4
bicálcico
1,04
1,05
grãos de milho
0,95
0,96
arroz
0,94
0,96
Egg
0,81
0,82
levedura de cerveja
0,76
0,77
sódio bissulfato
0,76
0,77
cloreto de potássio
0,64
0,65
carbonato de cálcio
0,64
0,65
cloreto de sódio
0
0,48
Mineral Premix1
0,42
0,42
cloreto de colina
0.20
0,21
óleo de peixe
0.20
0.20
DL-metionina
0,12
0,12
a vitamina Premix2
0,09
0,09
analisados ​​os teores de nutrientes (como Fed)
energia metabolizável (MJ /kg) 3
15,5
16,1
Matéria seca
81,3
82,6
Fat
15,4
17,1
Crude Fiber
1,5
1,2
Ash
6,2
6,2 extrato
N-livre
34,5
34,0
Crude Protein
33.7
34.0
Arginine
1.67
1.80
Histidine
0.76
0.62
Isoleucine
1.39
1.50
Leucine
3.34
3.41
Lysine
2.02
2.07
Methionine
0.97
1.00
Phenylalanine
1.54
1.15
Tryptophan
0.46
0.58
Tyrosine
1.33
0.95
Valine
1.74
1.72
1Mineral Premix continha:. 40,4% de potássio, 38,1% Chloride, de 3 500 ppm de cobre, 16 120 ppm de manganês, 60 000 Zinc, 420 ppm de iodo, 150 ppm de cobalto
2Vitamin Premix continha: 36 300 K UI /kg de vitamina A, 1 725 000 UI /kg de vitamina D3, 148 650 UI /kg de vitamina E, 22 575 ppm de tiamina, 89 130 ppm niacina, 19 200 ppm de piridoxina, 25 935 ppm de ácido pantotênico, ácido fólico 2.430 ppm, 189 ppm de vitamina B12, 5520 ppm inositol, 54 000 ppm de vitamina C, 540 ppm Biotina, 5940 ppm Riboflavina.
3Calculated usando coeficientes Atwater modificados (1). Os procedimentos analíticos
concentrações de [ 13 C] Phe no plasma foram determinados com um espectrómetro de triplo quadrupolo de massa (API 4000; Applied Biosystems /MDS SCIEX, Concord, ON, Canadá) acoplada a um sistema de HPLC Agilent 1100 (Agilent, Mississauga, ON, Canada; LC-MSMS), como previamente descrito por Turner et ai . [9]. Para a determinação das concentrações de aminoácidos, 25 ul de plasma foram misturados com 200 ul de metanol em tubos de microcentrífuga. Estes foram centrifugados a 13000 rpm durante 5 minutos. O sobrenadante foi seco sob uma corrente de N 2, reconstituído em ácido 5 ul de 0,1% fórmico em água duplamente destilada e 0,1% de ácido fórmico em acetonitrilo, e submetido a derivação com f enilisotiocianato e separação por HPLC de [10], [11 ].
conteúdo de nutrientes das dietas foram determinados em amostras duplicadas usando a AOAC [12] procedimentos para a matéria seca (934,01), proteína bruta (990,03), aminoácidos (999.12), ácido gordo hidrolisado (954,02), fibra bruta (969,33) e cinzas (942,05). A concentração de extrato livre de nitrogênio (NFE) foi calculada pela diferença (NFE = 100 -. (Cinzas brutas + proteína bruta + ácido hidrolisado de gordura + fibra bruta)
Estimativa da cinética de isótopos
parâmetros da cinética de Phe e esvaziamento gástrico foram estimadas usando métodos descritos anteriormente para cães [6]. para determinar o número de compartimentos necessários para simular a eliminação Phe do plasma, único P
1

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