Анализ белков цикла связанных клеток в раковых заболеваний дифференцированы типа желудка intramucosal на основе муцина фенотипы: роман гипотеза ранней канцерогенеза желудка на основе муцина phenotype

Анализ белков цикла связанных клеток в рака желудка intramucosal дифференцированы типа на основе муцина фенотипы: а новая гипотеза о ранней канцерогенеза желудка на основе муцина фенотип
Аннотация
Справочная информация
Аномалии ячейки регуляторов цикла общие черты в злокачественных опухолях человека, и некоторые из этих факторов связаны с ранним развитием рака желудка. Однако недавние исследования показали, что желудочный канцерогенез рак характеризуется муцина выражение. Таким образом, паттерны экспрессии белков клеточного цикла связанных исследовались в ранней стадии рака дифференцированы типа желудка, чтобы установить любые механистические отношения с муцин фенотипов.
Методы
Иммунологическое для циклинов D1, A, E и p21, P27, p53 и β-катенин был использован для изучения нарушений клеточного цикла в 190 раков дифференцированной типа желудка intramucosal. Муцин фенотипы определяются выражениями MUC5AC, MUC6, MUC2 и CD10. Ки-67 положительная норма (PR) также был рассмотрен.
Результаты
Overexpressions р53, циклин D1 и циклин достоверно чаще встречались в желудочном фенотипа, чем кишечной фенотип. Циклин А был избыточно экспрессируется в смешанном фенотипа по сравнению с кишечным фенотип, в то время как p27 избыточная экспрессия была более частой в кишечной фенотип, чем в смешанном фенотипа. Снижение p21 был общей чертой рака дифференцированы типа желудка intramucosal исследовали.
Выводы
Наши результаты свидетельствуют о том, что уровни некоторых регуляторов клеточного цикла, по всей видимости, связаны с муцина фенотипы ранних рака желудка дифференцированной типа.
фона
Progression через клеточного цикла и пролиферации клеток находятся под контролем серии циклинов и киназы (CDK) комплексов циклин-зависимых [1-3]. Накопленные данные показывают, что прогрессирование онкогенеза часто включает в себя отклонения в выражениях циклинов и других генов клеточного цикла, связанных с [1-3]. Аномалии были найдены для циклинов D1, A, E и их сотрудничающими партнерами, такие как циклин-зависимой киназы (CDK), которые способствуют прогрессии клеточного цикла [1, 3]. Кроме того, эти прогрессивные факторы можно ингибировать блокаторы, такие как p21, p27 и p57, а другой группе ингибиторов белков, в том числе p16, p15 и p18 [4-10]. Бесконтрольное распространение, что характеризует опухолевые клетки могут быть в значительной степени объясняется усилением и /или потери белковых функций, которые содержат клеточный цикл. Регулирование этих белков клеточного цикла, связанных также регулируется другими факторами, включая р53 и бета-катенина, и их изменения также ослабляют клеточный цикл, что приводит к неконтролируемой пролиферации [11-15].
Из приведенных выше клеток Цикл родственные белки, ключевыми регуляторами прогрессии через G1 фазы клеточного цикла являются циклин D1 и циклин Е, р53, р21 и р27 [1, 4, 6, 12]. Их аномальные выражения были как полагают, играет центральную роль в прогрессировании онкогенеза и было обнаружено, что нарушается в ряде злокачественных опухолей человека. Циклин А также членом белкового суперсемейства циклин, который может быть активирован при переходе от G1 к фазе S клеточного цикла. Аномальные проявления циклин А коррелируют с плохим исходом в различных злокачественных опухолях человека [8, 9]. Кроме того, ядерная экспрессия -катенина участвует в раковых заболеваний желудочно-кишечного тракта [14, 15]. β-катенин накапливается в ядре из-за нарушений сигнала пути Wnt, и его ядерная экспрессия способствует прогрессию клеточного цикла и пролиферации клеток [14, 15]. Тем не менее, на сегодняшний день, его активность не было показано, что влияет на патогенез ранних раков дифференцированной типа желудка.
Недавние исследования показали, что клеточные муцин выражения и опухолевые фенотипы связаны с Клинико-патологические выводы и онкогенеза в differentiated- напечатайте рака желудка [16-19]. Муцина фенотипа опухолей были в основном подразделяются на 3 типа: желудка, кишечника и смешанных фенотипов [16, 17]. Фенотипа желудка характеризуется плохим результатам, различных гистологических особенностей и конкретного подтипа генетических изменений, включая нестабильность микросателлитных (MSI) [17, 18]. В противоположность этому, фенотип кишечном очень хорошо дифференцированный тип, с низкой пролиферативной активностью и отсутствием MSI [17]. Выражения муцинах опухолевыми клетками определяют характеристики опухоли в рака желудка [16-19]. Таким образом, важно для понимания ранних tumorigeneis от рака желудка исследовать биологические изменения в соответствии с этими муцин фенотипов [16-19]. Несмотря на то,
ряд исследований относительно проявлений факторов клеточного цикла связанных сообщалось [ ,,,0],3-7], ассоциации ранних раков дифференцированной типа желудка и их муцин фенотипы и изменения белков клеточного цикла, связанные с не до конца изучены. В настоящем исследовании, мы исследовали аномалии белков цикла связанных клеток на ранней стадии рака желудка дифференцируются типа на основе муцина фенотипы.
Методы
Пациентов
Материалы для этого исследования были получены от 190 пациентов с первичные ранние рака желудка, которые были диагностированы в Отделе молекулярной диагностики патологии, отделении патологии, Иватэ медицинский университет, Мориока, Япония. Информированное согласие было дано у всех пациентов, которые мы рассмотрели. Кроме того, наше исследование было одобрено этическим комитетом нашей (название, молекулярный анализ желудочно-кишечных опухолей и прилегающих к нему слизистой оболочки; справочный номер, H21-140, Комитет по этике Иватэ медицинского университета). Эти опухоли были совместимы с intramucosal раков дифференцированы типа, и были получены из образцов эндоскопической подслизистой диссекции (ОУР). Гистологические критерии, используемые для изготовления гистологических диагнозов были основаны на наших критериях стационара [16], которые были изменены от Исследовательского общества японского для рака желудка [20], так как существуют расхождения в гистологических суждений между японскими и западными патологоанатомами. Детальные клинико-патологические данные (возраст пациента, пол, место опухоли, размер опухоли, макроскопическая тип и степень дифференцировки опухоли) приведены в дополнительном файле 1.
В этом исследовании, intramucosal раки дифференцированной типа были подразделены на 3 группы в зависимости от опухоли ядерного сорта: низкий, средний или высокий. Степень злокачественности опухоли определяли в соответствии с ранее опубликованными критериями [17]. Короче говоря, рак низкосортных был поставлен диагноз наличием клеток с увеличенным объемом гиперхромными ядер, которые в основном ограничивались базальных частях клеток, но это было больше нерегулярные и сложные железы, чем желудка аденомы. Опухоли, которые содержали клетки, имеющие очевидную потерю полярности, высокой ядерной неправильности, увеличенный Ядрышко и hyperchromatin были классифицированы как рак высокосортных. Высокие рака класса часто показывали существенные архитектурные атипию, такие как высокие архитектурные или железистых искажений. Промежуточные выводы между низкой и высокой степени рака были признаны в качестве промежуточных видов рака. Тем не менее, гистологическое различие между желудочной аденомы и рака низкосортного иногда очень трудно. Слайды были независимо друг от друга оценивали 2 опытных патологи (С. Т. и Н. С.); в некоторых случаях, в которых оценки представили разные результаты, был достигнут консенсус в интерпретации после повторной экспертизы.
Immunohistochemistry
Сразу после иссечения, образцы фиксировали в 20% нейтральном забуференном формалине, заливали в парафин, разрезали на 3 мкм парафиновые срезы и окрашивали гематоксилином и эозином (HE) для рутинного световой микроскопии. Для иммуногистохимического окрашивания, дополнительные срезы толщиной 3 мкм вырезали из залитой в парафин ткани и помещают на поли-L-лизин покрытием предметные стекла. Вкратце, срезы депарафинировали в ксилоле и обезвоживается. Для определения муцина фенотипы, иммунное было сделано для MUC 2 (Ccp58, Novocastra Laboratories, Ньюкасл, Великобритания), CD10 (56C6, Novocastra Laboratories), MUC 5AC (CLH2, Novocastra Laboratories) и MUC 6 (CLH5, Novocastra Laboratories, Ньюкасл , ВЕЛИКОБРИТАНИЯ). Кроме того, иммунологическое окрашивание было сделано для р53 (клон, DO7, DAKO, Carpinteria, CA, США), Ki-67 (MIB-1, Dako), P21 (SX118, Dako), P27 (SX53G8, Dako), циклин D1 ( SP4, Nichirei Co., Токио), циклин E (13A3, Novocastra Laboratories), циклин A (6E6, Novocastra Laboratories) и β-катенин (BD, трансдукция Laboratories).
Immunohistochemistry использовали систему DAKO Envision +, состоящий из декстрана полимеры, конъюгированные с пероксидазой хрена (Dako), как описано ранее [16, 17]. Образцы нагревали с помощью микроволнового излучения в цитратном буфере (рН 6,0) 3 раза в течение 5 мин каждый при 750W до реакции с антителами (H2500, СВЧ-процессор, Bio Rad, США), как описано ранее [16, 17]. Гематоксилин был использован в качестве контрастирующая.
Оценка муцина выражение
В этом исследовании, опухоли желудка были разделены на 4 группы в зависимости от их моделей иммуноокрашивания. Фенотип желудка определяли как опухолей, имеющих преобладающую интрацитоплазматическую муцин типа желудка, как определено иммунным с желудочным муцина человека (MUC5AC) и /или пилорического муцин железы (MUC6), но без каких-либо MUC-2 положительных клеток. Кишечные фенотип указывает опухоль, показывая MUC2-положительные клетки и /или CD10 положительные (наряду с щеточной каемки). Эти опухоли были дифференцированы тонкой кишки абсорбирующих клеток. Кишечные опухоли фенотипа были подразделены на 2 группы: ободочной тип (положительный результат для MUC 2 только) и тонкой кишки типа (положительный для CD10). Смешанный фенотип определяли как опухоли, имеющей иммунным окрашиванием в соответствии с желудочным типа (положительных клеток для MUC5AC и /или пилорического муцин железы), а также кишечного типа муцина (положительных клеток для CD10 и /или MUC2). И, наконец, опухоли без иммунным либо для желудка или кишечника фенотипов были отнесены к "несекретной" типа. Иммунопозитивные результаты для > 5% опухолевых клеток были расценены как положительные, так и иммуноположительных результаты для &ЛТ; 5% как отрицательные, в соответствии с предыдущими докладами [16, 17, 21].
Измерение Ki-67 положительной скорости (PR)
Случайные области от каждого образца были выбраны, в которых для подсчета Ki-67 положительных ядер , Ки-67 положительный показатель рассчитывают как процент от Ki-67 позитивных ядер опухолевых клеточных определяется в 10 полях высокой мощности (HPF, × 400), которая была определена после подсчета по меньшей мере, 500 опухолевых клеток в образце опухоли. Опухоль пролиферативная активность была классифицирована на 2 группы: высокий и низкий. Пролиферативная активность определяли в соответствии с нашими критериями [16, 17]. Вкратце, PR-ткани измеряли как в ткани опухоли и окружающей его неопухолевых ткани. Высокая пролиферация рассматривалась если PR-был в опухолевой ткани выше, чем в неопухолевых ткани. Низкое распространение было оценено, если PR-был в опухолевой ткани ниже, чем в неопухолевых ткани.
Иммуногистохимическое оценки белков цикла, связанных с клеточными
Доля опухолевых клеток на секции оценивали глазом и выделен счет, как суммированы в дополнительном файле 2А. В общей сложности 500 клеток подсчитывали в случайных полей из репрезентативных участков поражения. Для всех маркеров, только ядерное окрашивание считали положительным. Интенсивность окрашивания оценивали по 5-балльной шкале (от 0 до 6+) и счет был выделен в соответствии с интенсивностью (Дополнительный файл 2B). Индекс окрашивания был простой мультипликативный продукт ячеистости и окрашивания баллов. Далее, высокий уровень экспрессии для опухолевых клеток регистрировали, если индекс окрашивания, был выше в опухолевых клетках, чем в окружающей его неопухолевых ткани. В отличие от этого, низкая экспрессия для опухолевых клеток регистрировали, если индекс окрашивания был равным или ниже в опухолевых клетках, чем в неопухолевых ткани. Например, представитель фигура показана на рисунке 1. Исходные критерии были описаны ранее [22], и настоящие критерии были использованы с незначительными изменениями. Два Срезы окрашивали и значения были основаны на среднем 2-х отдельных результатов. Рисунок 1 Пример рака дифференцированы типа желудка intramucosal. В то время как значения индекса для выражения D1 циклин 16 в слизистой оболочке желудка рака (б), счет 4 в окружающей его неопухолевых слизистой оболочки (а). Опухоль, которая показана на рисунке 1b рассматривается как хорошо дифференцированную аденокарциному японскими патологоанатомами, хотя эта опухоль считается желудка аденома или дисплазия западными патологоанатомами.
Статистический анализ
Результаты приведены в виде средних значений или средних значений. Статистический анализ использовали тест Tamhane для сравнения среди 3 групп и хи-квадрат для сравнения между 2 группами. Статистическая значимость была установлена на уровне р &ЛТ; 0.05.
Результаты
Клинико-патологические характеристики
Как показано в дополнительном файле 3, раков желудка 190 intramucosal дифференцированы типа, 23 (12,1%) были фенотипа желудка, 85 (44,7%) были кишечная фенотип и 79 (41,6%) были классифицированы как смешанные фенотипы. Только 3 (1,6%) опухоли были несекретной типа. Клинико-патологические выводы, основанные на муцин фенотипов также перечислены в дополнительном файле 3. Там не было никаких существенных различий по возрасту, размер опухоли, местоположение, микроскопического типа или гистологического типа между 3 фенотипов. Тем не менее, для желудка и смешанных фенотипов, Случаи высоких опухолей сорта были значительно выше для желудка и смешанных фенотипов, чем кишечном фенотипа (р &ЛТ; 0,01 и р ≪ 0,05, соответственно). Кроме того, /женское соотношение мужчин и для смешанного фенотипа был Ауэр, чем для других типов (р &л; 0,05)
В настоящем исследовании, желудочные фенотипы были разделены на 3 суб-фенотипы:. MUC5AC (+) /MUC6 (+), MUC5AC (+) /MUC6 (-) и MUC5AC (-) /MUC6 (+). Пятнадцать (65,2%) имели MUC5AC (+) /MUC6 (+) шаблон, 5 (21,7%) имел MUC5AC (+) /MUC6 (-) образец и 3 (13,1%) были подразделены как MUC5AC (-) /MUC6 (+) шаблон. Среди 3 желудка суб-фенотипы, не было обнаружено различий клинико-патологических. В отличие от этого, кишечные фенотипы были подразделены на тонкой кишки (N = 67) и ободочной кишки (N = 18) фенотипов. Там не было никаких существенных различий между ними по возрасту, размер опухоли, местоположение, макроскопического типа или гистологического типа.
Выражения белков клеточного цикла, связанных с муцина фенотипы
Нет избыточная экспрессия р53 не был найден в любой окружающей неопухолевых слизистой оболочки. Избыточная экспрессия р53 наблюдалась в 33 из 190 случаев, которые мы исследовали (17,4%), и более часто встречаются в желудочном фенотипу (10/23, 43,5%) по сравнению с другими типами (2 кишечном фенотипа, 13/85, 15,3 % и смешанный фенотип, 9/79, 11,4%). Хотя разница между желудочных и кишечных фенотипов не достигало статистической значимости (р = 0,054), желудочный и смешанные фенотипы действительно показывают значительную разницу (р &л; 0,05). Кроме того, ни избыточная экспрессия p53 не было обнаружено в низкосортных видов рака (0/26). В противоположность этому, р53 был избыточно экспрессируется в 11 из 103 промежуточного класса рака (10,7%) и 22 из 61 видов рака высокой степени (36,1%). Значительные различия между раком высокого класса и низкой степени злокачественности или раковых заболеваний среднего класса были найдены (р &л; 0,01). В основном выражается
p21 в поверхностном эпителии кишечника метапластического железы и желудка foveolar эпителия. Частота снижению экспрессии p21 была 59 из 190 опухолей (31,1%). Снижение экспрессии p21 было обычно наблюдается в желудочном, кишечных и смешанных фенотипов. Там не было никаких существенных различий для снижения p21 выражений между 3 фенотипов.
Экспрессия р27 была ограничена поверхностным эпителием и основанием кишечника метапластического железы. Частота снижения экспрессии p27 была очень низкой в рака желудка, которые мы исследовали (12/190, 6,3%). В отличие от этого, наблюдалась частота для р27 избыточной экспрессии в 53 из 190 опухолей (27,9%). Частота р 27 оверэкспрессии была выше в кишечном фенотипа (31/85, 36,5%), чем в желудке (6/23, 26,1%) и смешанных фенотипов (16/79, 20,2%). Тем не менее, эти различия не были значимыми.
Была выражена циклина D1 в нижней части кишечника метапластического железы. В исследованных рака желудка, 27 из 190 случаев (14,2%) показал суперэкспрессированный циклин D1. Циклин D1 был избыточно экспрессируется в фенотипе желудка для 7 из 23 случаев (30,4%). Для сравнения, избыточная экспрессия циклина D1 был обнаружен в 11,8% (10/85) и 12,7% (10/79) кишечника и смешанных фенотипов соответственно. Никаких существенных различий не было найдено между желудочным фенотипа и других типов.
Экспрессия циклина A была в основном ограничена нижней половине кишечника метапластического железы. Положительное окрашивание на циклин А был обнаружен у 42,1% (80/190). Частота циклин A сверхэкспрессия была выше, в желудочной фенотипу (16/23, 69,6%), чем в кишечном фенотипу (25/85, 29,4%, р ≪ 0,01). Тем не менее, никаких существенных различий не было найдено между желудка и смешанных фенотипов (39/79, 49,4%).
Неопухолевых железы были в основном негативные для циклин Е. В рака желудка обследованных, частота циклин Е сверхэкспрессии была очень низкий. Никакой существенной разницы между 3-муцин фенотипов был замечен.
В этом исследовании, только ядерное выражение для бета-катенина считался положительным. Ни одна ядерная экспрессия -катенина не наблюдалось в окружающем неопухолевых слизистой оболочки, за исключением привратника желез. Большинство пилорического желез выражается ядерной -катенин. Выражение Ядерный β-катенин был обнаружен в 80 из 190 опухолей (36,8%). Хотя кишечная фенотип (44/85, 51,8%) показали самую высокую частоту ядерного -катенина среди 3 фенотипов, различие не было значительным.
Высокая скорость пролиферации опухолевых клеток было показано в более чем 30% Ки -67 PR в большинстве рака желудка, которые мы рассмотрели. В соответствии с нашими критериями, высокое распространение было найдено в 101 190 опухолей (53,2%). Высокая пролиферацию опухолевых клеток чаще наблюдалось в желудочном и смешанных фенотипов по сравнению с кишечным фенотипом (р &ЛТ; 0,01 и р ≪ 0,05). Мы обобщили эти результаты для белков цикла связанных клеток на основе муцина фенотип на рисунке 2. Кроме того, представитель пример показан на рисунке 3. Рисунок 2 Частоты белковых выражений клеточного цикла, связанных в желудочных, кишечных и смешанных фенотипов. Рака желудка фенотип характеризуются overexpressions P53 и циклин A. Хотя частота р27 избыточной экспрессии между кишечными фенотипа и другими фенотипами не достигли статистической разницы, что это может быть характерно для кишечника фенотипа. Снижение p21 и накопления -катенина обычно наблюдаются в 3 фенотипов. Ki-67 срабатываний в желудочном фенотип или смешанного фенотипа выше, чем в кишечном фенотипа. Статистические сравнения использовали тесты Tamhane для всех 3-х фенотипов.
Рисунок 3 Типичный пример кишечной intramucosal дифференцированы типа рака желудка фенотипа. а. Низкий мощность опухолевой ткани. б. Высокий мощность опухолевой ткани. гр. p53 избыточная экспрессия была замечена. d. p21 был снижен. е. p27 был избыточно экспрессируется. е. Сверхэкспрессия циклин А. г. Сниженная экспрессия гена циклина D1. час Только была выражена Muc2 в этой опухоли, предлагая кишечную фенотип.
Обсуждение
Несмотря на тенденцию к снижению заболеваемости, рак желудка остается важной медицинской проблемой во всем мире, и это является наиболее распространенным новообразованием в Японии. Intramucosal рак определяется как опухоль на самой ранней стадии рака желудка. Чрезвычайно важно, чтобы исследовать intramucosal рак для оценки патогенеза рака желудка. Широко распространено мнение, что возникает раковая клетка из-за нарушений регуляции клеточного цикла, который состоит из нескольких белков цикла связанных клеток, таких как циклинов, циклин ингибитора зависимой киназы, р53 и бета-катенина. Кроме того, недавние исследования показали, что различные клинико-патологические выводы для рака желудка характеризуются муциновых выражениями. Мы изучали аномальные проявления белков цикла связанных клеток, которые способствуют желудочного канцерогенеза, основанный на муцин фенотипы в рака желудка дифференцируются типа intramucosal.
В настоящем исследовании, иммуногистохимическое был использован для изучения уровней экспрессии белков клеточного цикла, связанных с. Иммунопозитивность для белков цикла связанных клеток ткани опухоли определяли путем сравнения уровней между опухолевой ткани и окружающей его неопухолевых ткани. Согласно этим критериям, уровень иммунопозитивность опухолевой ткани могут отличаться для каждого конкретного случая. Тем не менее, отделяя параметры в пределах этих видов рака в "низкой" и "высокой" категории, основанные на сравнении этих факторов с не опухолевой ткани может быть нетрадиционным способом. "Неопухолевых" ткань включает в себя гастрит (хроническая или хронический активный) и /или кишечной метаплазии; параметры в этих различных воспалительных или метапластических тканях может значительно варьировать. Это может быть более осмысленным использовать абсолютную скорость (то есть, фактическая%), а не этого внутреннего относительного значения. Тем не менее, мы считаем, что этот иммуногистохимическое критерий важен для нахождения потенциала деятельности белков клеточного цикла, связанных на ранней стадии рака желудка дифференцированный типа, при условии, что ткань неопухолевых тканей, окружающих опухоль тесно связана с развитием опухоли.
было считали, среди патологов, что желудочный фенотип рака желудка показывает низкосортный атипию в рака желудка intramucosal дифференцированы типа (19). Тем не менее, в настоящем исследовании, в желудочном intramucosal раков дифференцированной типа, что рассмотренных нами, фенотип желудка показали высокого класса атипию. Хотя причина остается неизвестной, одна из возможных причин является то, что желудочный фенотип, показывающий низкосортный атипию, напоминающая желудочный foveolar эпителий гистологически, возможно, были включены в предыдущих исследованиях. В настоящем исследовании, наблюдалась только одна такая опухоль. Кроме того, эти различия могут быть обусловлены числом образцов или этнических или этиологических факторов. Хорошо известно, что избыточная экспрессия р53 коррелирует со степенью опухоли. В настоящем исследовании, мы полагаем, что это разумно, чтобы показать высокую частоту р53 избыточной экспрессии для фенотипа желудка по сравнению с другими фенотипами.
В этом исследовании, p53 избыточная экспрессия была чаще всего встречается в фенотипе желудка, чем в желудочно-кишечном или смешанный фенотип. Этот факт позволяет предположить, что избыточная экспрессия р53 играет существенную роль, по крайней мере, на ранних стадиях развития рака желудка фенотип, хотя предыдущие исследования показали, прогрессивное увеличение р53 избыточной экспрессии в рака желудка от начала до поздней стадии [12]. В этом
исследование, снижение экспрессии р21 наблюдалось приблизительно в 30% из 3-муцин фенотипов. Предыдущие исследования показали, что низкая экспрессия р21 коррелирует с прогнозом пациента при раке желудка [5, 6]. Тем не менее, очень мало известно об экспрессии p21 под действием желудочной видов рака на основе муцина фенотипы. Кроме того, любая ассоциация экспрессии p21 со стадией опухоли (глубина опухоли) остается неизвестной. Наши данные свидетельствуют о том, что снижение экспрессии p21 играет общую роль в раннем развитии 3 муцин фенотипов рака желудка дифференцированной типа. Тем не менее, предыдущее исследование показало, что прогрессирующее снижение экспрессии р21 происходило в продвинутой стадии рака желудка дифференцированный типа с ранней фазы [6]. Выражение p21 также коррелируют с выражениями других белков клеточного цикла, связанных, например, р27 и Ki-67, возможно, через р53-зависимого пути [1, 5, 6]. Было высказано предположение, что р21 взаимодействует с P53 и, в результате, клеточный цикл контролируется с помощью p53-зависимому пути [1, 5]. Кроме того, считается, что р21 также ингибируется совместно с р27 [1, 5]. В настоящем исследовании, однако, мы обнаружили, ни корреляция уменьшения p21 с уменьшением р27 ни обратной корреляции редукции р27 с р53 избыточной экспрессии (данные не показаны). Мы полагаем, что другой путь существует для контроля клеточного цикла в раковых заболеваний желудка человека.
Хорошо известно, что р27 является прототипическим ген-супрессор опухолей [1-3]. Однако недавнее исследование показало, что, в то время как в некоторых случаях р27 ингибирует клеточный цикл, в других случаях она способствует прогрессии к следующей фазе клеточного цикла [23]. Сообщалось, что либо потери или низкая экспрессия р27 коррелирует с опухолевой прогрессии или прогнозе пациента [24, 25]. В отличие от других исследований, мы показали, что низкая экспрессия (уменьшение) р27 была очень низкой частоты в нашей серии рака желудка. В соответствии с настоящими результатами, снижение экспрессии р27 играет незначительную роль в развитии рака желудка дифференцированный типа.
В отличие от этого, избыточная экспрессия р27 часто найдены в кишечном фенотипа по сравнению с другими 2 фенотипов, хотя разница между ними не достигали статистически значимого уровня. Действительно ли эта избыточная экспрессия р27 связан с угнетением клеточного цикла или прогрессию клеточного цикла не известно, хотя несколько объяснений предлагаются. Во-первых, что р27, что гиперэкспрессируется для подавления прогрессии клеточного цикла в опухолевых клетках приводит от механизма отрицательной обратной связи. С другой стороны, второе объяснение состоит в том, что избыточная экспрессия p27 положительно связана с прогрессированием клеточного цикла для опухолевых клеток; то есть р27 действует как онкогенного фактора [23]. Кроме того, недавнее исследование показало, что экспрессия р27 регулируется выражением Skp2, который является убиквитинлигаза субъединица р27 [26]. Согласно этому отчету, экспрессия р27 обратно коррелирует с экспрессией Skp2.
Циклин D1 избыточная экспрессия только показал низкую частоту на ранней стадии рака желудка дифференцированной типа (27/190, 14,2%). Тем не менее, хотя различия не достигли существенного уровня, частота циклин D1 гиперэкспрессия в фенотипе желудка выше, чем в кишечных и смешанных фенотипов. Циклин D1 был ранее изучен в нескольких сериях рака желудка, с сообщенным частотой 20 ~ 56% от избыточной экспрессии сообщается [27-29], отличаются от наших результатов. В качестве возможной причины этих отличий циклин D1 избыточной экспрессии, хотя раков рано дифференцированы типа, для фенотипа желудка, за исключением, не требуют увеличения циклина D1 после того, как опухоль развивается, опухолевые клетки необходим высокий уровень циклин D1 для опухолевой прогрессии. Это говорит о том, что циклин D1 избыточная экспрессия коррелирует с прогнозом пациента в рака желудка [28].
Сверхэкспрессия циклин А также более широкое распространение в желудочных и смешанных фенотипов по сравнению с кишечным фенотипом. Это говорит о том, что избыточная экспрессия циклин А играет важную роль в онкогенеза желудка и смешанных фенотипов. Таким образом, в рака желудка, приобретение желудочного муцина выражение может быть связано с циклин A сверхэкспрессии, которая затем приводит к пролиферации опухоли высокой. Кроме того, циклин А был тесно связан с прогнозом пациента или агрессивности опухоли [8, 9]. Это может означать, что циклин A гиперэкспрессия связана как с развитием и прогрессии опухоли в приблизительно половине видов рака дифференцированный типа желудка.
В настоящем исследовании, циклин Е суперэкспрессия показали низкие частоты в 3-фенотипов. В противоположность этому, предыдущие исследования показали, что избыточная экспрессия циклина E коррелировала с плохим исходом [4, 10], хотя и контрастные результаты были предложены [30]. Представленные результаты показывают, что избыточная экспрессия циклин Е не играет существенной роли в ранней онкогенеза раковых заболеваний дифференцированы типа желудка. Кроме того, избыточная экспрессия циклин Е может способствовать, прежде всего, прогрессирование рака желудка. Эти данные свидетельствуют о том, что высокое распространение фенотипа желудка может характеризоваться сверхэкспрессией циклин D1 и /или циклин A, и что смешанный фенотип связан с циклин A сверхэкспрессии.
Хорошо известно, что выражение β-катенин активирует клеточный цикл и играет центральную роль в пути передачи сигнала Wnt [14, 15]. В настоящем исследовании, интересно отметить, что выражение β-катенин было обычно наблюдается в начале рака желудка дифференцированный типа, которые мы рассмотрели. Уже принято считать, что выражение β-катенин имеет решающее значение для развития аденомы ободочной кишки [31, 32]. Представленные результаты и предыдущие исследования относительно колоректального аденомы показывают, что экспрессия β-катенин может быть общим изменением в раннем развитии желудочно-кишечных опухолей [31]. Это можно было бы объяснить выводы, что в рака желудка, промоторы генов, связанных с сигнального пути Wnt высоко метилированных [32-34], что приводит к накоплению ядерного экспрессии β-катенина.
Выводы
В резюме, мы полагаем, что клеточные муцин фенотипы intramucosal аденокарциномы дифференцированной типа желудка зависят от различных изменений клеточного цикла, связанных, и что клинико-патологические выводы являются результатом различных путей на основе муцина выражение: желудка, кишечника и смешанные фенотипы , Фиг.4 иллюстрирует новую модель канцерогенеза для intramucosal аденокарциномы дифференцированный типа, который зависит от их муцин фенотипов. На основе аномалиями белков клеточного цикла, связанных, overexpressions р53 и циклин A характеризуют рак желудка фенотип, тогда как избыточная экспрессия р27 может быть связано с развитием рака кишечника фенотип.

Исследования

Исследования

Other Languages