Kliininen merkitys uPA järjestelmän mahasyövän vatsakalvon etäpesäkkeitä

Kliininen merkitys uPA järjestelmän mahalaukun syövän vatsakalvon etäpesäkkeitä
Abstract
tausta
On osoitettu, että urokinaasityyppisen plasminogeeniaktivaattorin (uPA) on mukana kasvainsolujen etäpesäkkeiden hajottamalla soluväliaineen. On kuitenkin vähän suoraa näyttöä kliinisen uPA järjestelmän ilmentymisen vatsakalvon metastaattisen kudoksissa mahasyövän. Tavoitteena tätä oli tutkia uPA järjestelmän ilmentymisen vatsakalvon kudoksissa vatsakalvon ja nonperitoneal etäpesäke potilaita, ja tutkia diagnostista arvoa uPA järjestelmän. Tool Menetelmät
Expressions uPA, uPAR, ja PAI-1 olivat mitattuna semikvantitatiivinen RT-PCR ja ELISA. uPA aktiivisuutta havaittiin käyttämällä uPA toimintaa kit.
Tulokset
ei ollut merkitsevää eroa uPA, uPAR, ja PAI-1 ilmentymisen kahdenlaisia ​​vatsakalvon kudoksen seitsemällä potilaalla on vatsakalvon etäpesäkkeitä. Kuitenkin uPA, uPAR, ja PAI-1 ilmaisuja vatsakalvon etäpesäkeleesioita olivat huomattavasti korkeammat kuin normaaleissa vatsakalvon kudoksissa 24 nonperitoneal etäpesäkkeiden potilaat (P
< 0,05). Myöskään tilastollinen ero uPA aktiivisuuden havaittiin eri eri kudoksissa.
Johtopäätökset
ilmentymistä uPA järjestelmän positiivisesti korreloi vatsakalvon etäpesäke mahasyövän. Tämä ilmaus ero vatsakalvon tai nonperitoneal etäpesäke potilaat saattavat tarjota viittaus diagnosoimiseksi vatsakalvon etäpesäke.
Avainsanat
Mahasyöpää ELISA Peritoneaalisille etäpesäkkeiden RT-PCR UPA järjestelmä Taustaa
Vaikka ilmaantuvuus ja kuolleisuus mahalaukun syövän ovat pienentyneet Kiinassa viime vuosikymmeninä, mahasyöpä on edelleen suuri taakka paikallisen terveydenhuollon ohjelma [1]. Tärkeää on, että toistumisen mahasyövän tapahtuu jälkeenkin mahdollisesti parantava resektio, yleisimmin muodossa vatsakalvon etäpesäkkeiden [2]. Näin ollen on kiireellinen tarve luoda tehokas varhaisen diagnoosin strategioiden vatsakalvon etäpesäke mahasyövän.
Syöpä invaasiota ja etäpesäkkeiden ovat monitekijäinen prosesseja [3] ja olennainen vaihe käsittää peräkkäisen tuhoa ja käyttökuntoon soluväliaineen ja tyvikalvoista, mikä puolestaan ​​edellyttää osallistumista useiden proteolyyttisen entsyymin järjestelmiä, kuten seriiniproteaasien ja metalloproteaasit [4]. Urokinaasi-tyyppisen plasminogeeniaktivaattorin (uPA) on yksi seriiniproteaasin, ja se sitoutuu sen reseptoriin, uPA-reseptori (uPAR) pinnalla kasvainsolun. Aktivoinnin jälkeen soluun sitoutuneen uPA pystyy muuttamaan plasminogeenin osaksi plasmiini, joka sitten pystyy hajottamaan useita osia soluväliaineen [5]. Toiminnan uPA-uPAR kompleksin plasminogeenin voidaan ohjata proteaasinestäjien PAI [6, 7]. Siten tasapainoisen tuotannon solu- ja perisellulaarinen uPA, uPAR, ja PAI-1 on edellytys tehokkaalle polttovälin proteolyysin, soluadheesiota, ja muuttoliike ja siten, kasvainsolun invaasiota ja etäpesäkkeiden [8, 9].
Se on havaittu, että uPA järjestelmä on hyvin korreloi mahalaukun syöpiin, mittaamalla ekspressiotaso uPA, uPAR, ja PAI-1 mahasyövän ja normaalin limakalvon kudoksen ja analysoimalla niiden vastaavuus eri kliinisiä patologisia piirteitä. Esimerkiksi Plebani ym
. [10] määritelty uPAR, uPA, ja PAI-1 tasot käyttäen ELISA mahasyövän ja normaali näytteitä 20: llä mahalaukun syövän leikkauspotilaiden. uPAR ilmentymistaso on merkittävästi korkeampi mahasyövän, ja alhainen uPAR liittyy parempaan säilymiseen. Taniguchi et al
. [11] tutkittiin suhdetta ekspression uPAR ja ennusteeseen viittaavia parametreja käyttäen immunohistokemiallista analyysiä 102 ensisijaista mahakarsinoomat. uPAR immunoreaktiivisuus havaittiin 38 tapausta 102 (37%). Lisäksi ilmaisuja uPA, uPAR ja PAI-1 korreloi merkitsevästi eri kliinis tekijät: kasvaimen koko, syvyys tuumori-invaasio, erilaistumista, imusolmuke etäpesäke [12-15], ja vatsakalvon etäpesäkkeiden [16, 17].
kuitenkin ollut hyvin vähän suoria todisteita, jotka osoittaisivat kliinistä merkitystä uPA järjestelmän erottavien vatsakalvon metastasoituneen normaaleista vatsakalvon kudoksista mahasyövän. Verrattuna jakaantuu tasaisesti ja järjestely imusolmukkeiden, vatsakalvon kudos on suurempi alue, miehittää koko vatsaontelossa, mikä merkitsee enemmän satunnaisuuden ja ennakoimattomuus solujen vatsakalvon etäpesäkkeitä mahasyövän. Siten tavoitteena oli tutkia tarkemmin ilmaisun ero uPA järjestelmän välillä vatsakalvon metastaattisen kudosten ja normaali vatsakalvon kudoksissa mahasyövän ja diagnoosin varmistamiseksi merkitys uPA järjestelmän yhdistämällä nämä tulokset kliinistä tietoa.
menetelmät
Kliininen näyte
Arvioimme 31 potilasta (21 miestä, 10 naista), joiden diagnoosi mahasyöpä, joka oli otettu meidän osastolla heinäkuun 2010 joulukuussa 2010. Heidän keski-ikä oli 62,58 vuotta (vaihteluväli 23-85). Potilaat oli diagnosoitu mahalaukun syöpä perustuu ennen leikkausta tai leikkauksen jälkeisiä patologinen analyysi. Niistä 7 potilaalla oli vatsakalvon etäpesäke (patologinen tyyppi: 1 kyseessä kohtuullisesti erilaistunut putkimaisen adenokarsinooma, 1 tapaus luokan II III adenokarsinooma, 3 tapausta huonosti eriytetty adenokarsinooma, ja 3 tapausta huonosti eriytetty adenokarsinooma yhdistettynä sinettisormus karsinooma) , kun taas 24 potilasta oli nonperitoneal etäpesäke (patologinen tyyppi: 3 tapausta kohtuullisesti erilaistunut putkimainen adenokarsinooma, 3 tapausta luokan II adenokarsinooma, 2 tapausta luokan II III adenokarsinooma, 9 tapausta huonosti eriytetty adenokarsinooma, 3 tapausta sormuksensa cell carcinoma, 1 tapauksessa mucinous syöpä, 1 tapauksessa luokan II adenokarsinooma yhdistettynä sinettisormus cell carcinoma, 1 tapaus luokan III adenokarsinooma yhdistettynä sinettisormus karsinooma ja 1 tapauksessa luokan II adenokarsinooma yhdistettynä mucinous syöpä).
Vuonna potilaille, joilla on vatsakalvon etäpesäkkeitä, me leikattiin vatsakalvon etäpesäke vaurioita, sekä pieni määrä omentum majus, pelveoperitoneum, ja pallea vatsakalvon ilman vatsakalvon etäpesäke. Niistä potilaista, joilla nonperitoneal etäpesäke, muutama asemointia on omentum majus, pelveoperitoneum, ja pallea vatsakalvon suoritettiin myös. Kerättyjä näytteitä säilytettiin -80 ° C: ssa lisäanalyysiä.
Kaikki potilaat olivat elossa lopussa tutkimuksen, ja meidän hyväksyi tutkimuksen eettinen komitea Shanghai East Hospital, sidoksissa Tongjin.
Soluviljely
Soluja vatsakalvon mesothelial solulinja (HMrSV5) pidettiin DMEM: ssä (Sigma, St. Louis, USA), johon oli lisätty 10% naudan sikiön seerumia. Solut jatkoviljeltiin melkein joka päivä 1: 4 tai 1: 5 laimennus dosviljelypulloihin 37 ° C: ssa ilmakehässä 5% CO 2.
Yhteensä RNA uuttamalla ja cDNA-synteesi
Yhteensä RNA eristettiin solujen saostamalla käyttäen RNeasy ™ RNA liuuttovälinepakkausta seuraten valmistajan ohjeita (Qiagen, Valencia, USA). RNA-puhtaus ja pitoisuus määritettiin spektrofotometrisesti absorbanssilla 260 ja 280 nm, vastaavasti. Käänteistranskriptio suoritettiin 1 ug kokonais-RNA: sta käyttämällä oligo (dT) alukkeita ja AMV-käänteistranskriptaasia (Promega, Madison, USA). 20 ui PCR-reaktio sisälsi 2 ui 10 x RT-puskuria, 2 ul dNTP: itä, 4 pl MgCI 2, 0,5 ui RNasiinia, 1 ui oligo (dT) 18, 0,75 ui käänteistranskriptaasi ja 1 ug RNA: ta . PCR-ehto oli 70 ° C: ssa 10 minuutin ajan, 42 ° C: ssa 15 min, ja 99 ° C: ssa 5 min, minkä jälkeen cDNA: n säilytettiin 4 ° C: ssa (3 kuukauden kuluessa).
Semikvantitatiivinen RT PCR
geeniekspressiotasot uPA, uPAR ja PAI-1 määritettiin vertaamalla β-aktiini-geenin tai glyseraldehydi-3-fosfaattidehydrogenaasi (GAPDH). 25 ui RT-PCR-reaktioseos sisälsi 1 ui cDNA, sense ja anti-sense-alukkeita (kukin 0,25 ui), 2,5 ui 10 x PCR-puskuria, 2 ul 25% MgCl 2, 0,5 ui Taq-1 ui dNTP , ja 17,5 ui RNaasittomalla H 2O. Sisäkkäistä PCR: ää käytettiin monistamiseen karsinoembryonaalisen antigeenin (CEA) ja 1 ui ensimmäisen PCR-tuotetta käytettiin toisessa PCR: ssä templaattina. Monistusolosuhteet olivat seuraavat: (i) alkudenaturaatio 95 ° C: ssa 5 min; (Ii) 30 sykliä denaturointi 94 ° C: ssa 1 min; (Iii) hybridisoidaan 56 ° C: ssa 30 s uPA, 60 ° C 1 min uPAR, 55 ° C 1 minuutin ajan, PAI-1, tai 72 ° C: ssa 2,5 min CEA; ja (iv) pidennys 72 ° C: ssa 1 min ja 2,5 min. PCR-alukkeet olivat seuraavat: uPA, A, 5'-AGAATTCACCACCATCGA GA-3 ', ja B, 5'-ATCAGCTTCACAACAGTCA T-3'; ja uPAR, A, 5'-ACA GGAGCTGCCCTCGCGAC-3 'ja B, 5'-GAGGGGGATTT CAGGTTT AGG-3'; PAI-1, A, 5'-CTTTGGTGAAGGGTCTGC-3 'ja B, 5'-CTC CACCTCTGAAAAGTCC-3'; CEA: A, 5'-TCTGGAACTTCTCCTGGTCT CAGCTGG-3 ', B, 5'-TGTAGCTGTTGCAAATGCTTTAAGGAAGAAGC-3', ja C, 5'-GGGCCACTGTCGGCATCATG ATTGG-3 '; ja β-aktiini, A, 5'-TTGAAGGTAGTTTC GGGAAT-3 'ja B, 5'-GAA AATCTG GCACCACAC CTT-3'; GAPDH: lle, A, 5'-GAAGGTGAAGGCGGAGT C-3 'ja B, 5'-GAAGATGGTGATGGGATTTC-3'. A- ja B-alukkeita CEA käytettiin ensimmäisessä PCR: ssä, kun taas B ja C alukkeita käytettiin toista vahvistusta. Monistustuotteen oli 474 bp, 1046 bp, 409 bp, 131 bp, 591 bp ja 230 bp, vastaavasti.
Kvantitatiivinen ELISA-analyysi
Tris-puskuroitua suolaliuosta (pH 8,5, 1,8 ml) lisättiin jäädytetyn kudoksiin (100-300 mg) ja homogenointi suoritettiin jäähauteessa. Sen jälkeen, 0,2 ml 10%: Trixon X-100 lisättiin sen varmistamiseksi, että lopulliseksi pitoisuudeksi 1% Trixon X-100 homogenaattia. Homogenaattia ravistellaan 16 tuntia ja sitten sentrifugoitiin jäähdytetyssä sentrifugissa 4 ° C: ssa 1 h ajan 100.000 g
. Supernatantti siirrettiin uuteen putkeen ja proteiinipitoisuus määritettiin bikinkoniini- hapon määritystä. Pitoisuudet uPA, uPAR, ja PAI-1-antigeenin määritettiin käyttämällä ELISA sarjat mukaan valmistajien ohjeiden (American Diagnostica, Greenwich, USA). Reaktio pysäytettiin lisäämällä 50 ui H 2SO 4, ja imeytyminen mitattiin 450 nm: ssä ELISA-levylle lukijaa (EL312e mikrolevynlukijaa, Bio-Tek Instruments, Winooski, USA). Arvot uPA, uPAR ja PAI-1-antigeenin ilmaistiin ng /mg proteiinia.
UPA aktiivisuuden määritys
uPA aktiivisuus mitattiin käyttämällä uPA aktiivisuuden määritys kit (Chemicon). Lyhyesti, kudos-proteiini sekoitettiin määrityspuskurissa ja inkuboitiin kromogeenisen substraatin 96-kuoppaisilla levyillä 37 ° C: ssa 2-24 tuntia. Absorbanssi luettiin OD 405, ja aktiivisuus (yksikköä) ekstrapoloitiin standardikäyrältä.
Tilastollinen analyysi
Kaikki tiedot analysoitiin SAS-versio 6.12 ohjelmistot ja tulokset kirjattiin keskimäärin ± vakiona poikkeama. Merkitystä ryhmien välisten erojen arvioitiin varianssianalyysi, jota seurasi parillista t
testi. P
< 0,05 katsottiin tilastollisesti merkitsevä.
Tulokset
Semi-kvantitatiivinen RT-PCR-analyysi CEA, uPA, uPAR, ja PAI-1 mRNA: n ilmentymisen
CEA on tärkeä merkkiaine gastroenteeriset kasvaimia. Siten käytimme korkea herkkyys sisäkkäisiä RT-PCR-menetelmä ekspression havaitsemiseksi CEA mahasyövän kudosten kanssa tai ilman vatsakalvon etäpesäke. Kuten odotettua, tulokset olivat kaikki positiivisia CEA vatsakalvon etäpesäkeleesioita seitsemän vatsakalvon etäpesäkkeiden potilailla (kuvio 1). Myös paljain silmin havainto vatsakalvon etäpesäkkeiden potilaita, kolme tapausta osoitti CEA-positiivinen ilmentymisen nonperitoneal metastaattisen kudoksiin. Niistä 24 potilaasta, joilla nonperitoneal etäpesäkkeitä, 2 oli CEA-positiivinen ilmaisu normaaleissa vatsakalvon kudoksissa. Ei CEA ekspressiota havaittiin vatsakalvon mesothelial solulinjassa HMrSV5. Kuitenkin, uPA, uPAR ja PAI-1could ilmaistaan ​​HMrSV5 soluissa (kuvio 2). Kuva 1 CEA mRNA: n ekspression seitsemän tapausta mahasyövän vatsakalvon etäpesäkkeitä. M: 1000 bp markkeri; Kaistat 1, 2, 3, 4, 5, 6, ja 7 esitetty seitsemän vatsakalvon metastaattisen tapauksissa. p-aktiini käytettiin sisäinen viite normalisoida ilmaus CEA. Monistustuotteet olivat 131 bp CEA ja 591 bp: n β-aktiini, vastaavasti. CEA karsinoembryonaaliselle antigeeni.
Kuvio 2 uPA järjestelmä mRNA: n ekspression HMrSV5 solussa. M, 1000 bp markkeri; kaista 1, uPA; kaista 2, uPAR; kaista 3, PAI-1; kaista 4, β-aktiini. β-aktiini käytettiin sisäisessä. Monistustuotteet olivat 474 bp: n uPA, 1046 bp: n uPAR, 409 bp PAI-1, ja 591 bp: n β-aktiini, vastaavasti.
UPA järjestelmä proteiinin ilmentyminen mahasyövän kudosten kanssa tai ilman vatsakalvon etäpesäkkeiden
kvantitatiivinen ELISA-menetelmää käytettiin kartoitettiin uPA, uPAR ja PAI-1-proteiinin sisällön vatsakalvon etäpesäkeleesioita ja CEA-negatiivinen nonperitoneal metastasoitunut kudosten 7 vatsakalvon etäpesäkkeiden potilailla, ja CEA-negatiivinen normaalia vatsakalvon kudoksissa 24 nonperitoneal etäpesäkkeiden potilailla. Tulokset (taulukko 1) osoittivat, että ei ollut merkittäviä eroja uPA, uPAR, ja PAI-1 ilmentymisen kahdenlaisia ​​vatsakalvon kudoksen seitsemästä vatsakalvon etäpesäke potilasta. Kuitenkin, uPA, uPAR ja PAI-1 ilmentymisen olivat merkitsevästi korkeammat vatsakalvon etäpesäkeleesioita kuin normaali vatsakalvon kudoksissa 24 nonperitoneal etäpesäkkeiden potilailla (P
< 0,05) .table 1 uPA järjestelmä proteiinin ekspression mahasyövän kudoksissa tai ilman vatsakalvon etäpesäke
Protein
vatsakalvodialyysilla etäpesäke (7 tapausta)
Nonperitoneal etäpesäke (24 cases)

CEA(+)

CEA(−)

CEA(−)

uPA
3.312
2.488
0.408
0.784
0.640
3.088
1.664
0.280
0.632
0.488
2.952
0.648
0.672
0.664
0.224
0.712
0.504
0.280
0.800
0.424
0.520
0.488
0.440
0.656
0.328
0.480
0.128
0.440
0.256
0.384
0.376
1.440
0.512
0.440
0.848
0.312
0.464
0.168
uPAR
3.664
4.936
1.432
0.345
1.034
2.720
2.304
0.640
1.256
0.532
2.744
2.192
1.536
0.239
0.479
1.432
1.808
0.704
0.671
0.561
0.912
1.280
0.792
0.845
0.390
1.184
0.480
0.272
0.432
0.633
1.064
2.728
1.280
0.467
0.291
1.120
0,968
0,776
PAI-1
1,511
4,204
0,568
3,665
Ei havaitseminen
3,872
1,725 ​​
0,262
1,426
0,071
2,782
0,876
0,488
3,598
Ei havaitseminen
0,369
0,745
0,662
0,488
Ei havaitseminen
1.315
3,023
0,894
0,127
0,289
1.041
0,262
0,963
Ei havaitseminen
0,195
1,181
0,977
0,041
0,329
0,395
0,085
0,316
0,382
uPA aktiivisuuden havaitseminen
Olemme myös havainneet uPA toimintaa vatsakalvon etäpesäkeleesioita ja CEA-negatiivinen nonperitoneal metastasoitunut kudoksia 7 vatsakalvon etäpesäke potilaat, ja CEA-negatiivinen normaalia vatsakalvon kudoksissa 24 nonperitoneal etäpesäkkeiden potilasta. tulokset osoittivat, että mitään tilastollista eroa ei havaittu useilla eri kudoksissa (taulukko 2) .table 2 uPA aktiivisuutta mahasyövän kudoksissa tai ilman vatsakalvon etäpesäke
Peritoneaalidialyysi etäpesäkkeiden (7 tapausta)
Nonperitoneal etäpesäke (24 cases)

CEA(+)

CEA(−)

CEA(−)

19.936
16.536
3.914
4.510
5.635
0.846
3.091
1.942
5.407
4.151
1.417
8.725
3.117
4.702
0.899
2.352
16.170
2.142
10.046
2.419
2.820
4.799
1.302
3.730
2.828
2.123
3.310
5.299
7.287
1.233
6.066
6.533
7.922
6.485
8.150
7,802
4,466
3.468
Keskustelu
Koska sen puute erityisiä kliinisiä ilmenemismuotoja varhaisessa vaiheessa vatsakalvon etäpesäke, optimaalinen hoito mahdollisuus on aina jäänyt mahalaukun syöpäpotilailla. Esiintyminen askites, vatsan kasvaimia, ja suoliston esteitä ilmaisee pitkälle mahasyövän. Siksi tehokas diagnoosi mahasyövän vatsakalvon etäpesäke on edelleen haaste klinikoilla. tällä hetkellä tärkein diagnostinen menetelmä mahasyövän vatsakalvon etäpesäkkeitä sisältää vatsakalvon huuhtelu ja sytologinen tutkimus [18, 19]. kuitenkin positiiviset tulokset osoittavat ainoastaan ​​piilevä vatsakalvon etäpesäke koska vatsakalvon etäpesäke ei myöskään Emergent vaikka kasvainsolut ovat läsnä peritoneaalinestettä. Niinpä havaitseminen vatsakalvon kudoksissa näyttää olevan enemmän suoria ja tarkkoja. Yllättävää kyllä, vatsakalvon kudosten kattaa koko vatsaonteloon, kun taas tuumorisolujen implantaation on satunnainen, niin havaitaan suoraan kasvainsolujen vatsakalvon kudoksiin on hyvin vaikeaa. Molekyylibiologit uskovat, että on olemassa joitakin molekyylitason muutoksia itse tuumorisoluissa ja niiden vaikutusta kudoksiin, ja nämä muutokset kudoksissa voidaan aloittaa ennen kasvaimen solut heihin yhteyttä [9]. Tämän ratkaisun, tutkimme molekyylitason muutoksia vatsakalvon kudoksissa tutkia mahdollisuuksia diagnoosin vatsakalvon etäpesäke.
CEA on yleinen kasvaimeen liittyvän antigeenin, ja on kansainvälisesti hyväksytty, koska gastroenteeriset tuumorimarkkeri [20, 21]. Siksi olemme havainneet ilmaus CEA vatsakalvon kudoksissa. Positiivinen CEA-ilmaisun tulokset osoittavat, että kasvaimen solut ovat läsnä vatsakalvon kudoksissa. Kuten odotettua, tuloksemme osoittivat, että CEA ilmentyi kaikissa vatsakalvon etäpesäkeleesioita seitsemän vatsakalvon etäpesäke potilasta. Kiinnostavaa oli kolme potilasta vatsakalvon etäpesäkkeitä ja joilla CEA positiivisesti ilmaistu nonperitoneal metastaattisen kudosten ja kaksi potilasta, joilla nonperitoneal etäpesäkkeitä, joka oli positiivinen CEA ilmentymistä normaaleissa vatsakalvon kudoksissa. Tämä viittaa siihen, että näillä potilailla oli mahdollisuuksia kehittää vatsakalvon etäpesäkkeitä.
Koska sisältää tärkeää proteolyyttisiä entsyymejä, uPA järjestelmä tuumorisoluissa on osoitettu olevan vuorovaikutuksessa ekstrasellulaarisen matriksin helpottaa mikroympäristöä muodostumista etäpesäkkeiden; Siten uPA järjestelmä voi olla mukana prosessissa vatsakalvon etäpesäkkeiden [22]. Expression of uPA järjestelmä todetaan lisätään implantoitu kasvain ja isännän kudosten [23, 24]. UPA-järjestelmä koostuu seriiniproteaasin uPA, glykolipidi-ankkuroitu reseptorin, uPAR ja serpin inhibiittori, PAI-1, [25]. Siksi pyrimme tutkimaan kattavasti muutoksia nämä kolme tekijää vatsakalvon kudoksissa metastaasien kanssa tai ilman.
UPA Järjestelmä jakautuu laajalle eri soluissa; Meidän RT-PCR osoitti, että uPA, uPAR, ja PAI-1 voidaan jopa ilmaistaan ​​mesoteelisolut. Välttää epäspesifisiä tuloksia, edelleen kvantitatiivinen ELISA havaitsemiseen käytettiin ilmentymisen uPA järjestelmän proteiineja. Olemme havainneet, että uPA, uPAR ja PAI-1-proteiinin pitoisuudet olivat merkitsevästi korkeammat CEA-positiivisia muutoksia tai CEA-negatiivinen vatsakalvon kudoksissa vatsakalvon etäpesäkkeiden potilailla verrattuna normaalin vatsakalvon kudosten nonperitoneal etäpesäkkeiden potilailla (P
< 0,05) . Erityisesti saattaa olla suurempi kliininen merkitys kasvanut uPA järjestelmä proteiinipitoisuus CEA-negatiivinen vatsakalvon kudoksia vatsakalvon etäpesäke potilaista. Tämä havainto osoitti, että nämä CEA-negatiivinen vatsakalvon kudoksissa saattaa olla tilassa Subkliinisen vatsakalvon etäpesäkkeiden ja että etenemistä tämä tauti voi johtaa vatsakalvon etäpesäkkeitä. Vaikka uPA järjestelmä muutoksia vatsakalvon kudoksia ei varmasti ole osoitettu kasvainsoluissa, muutokset vatsakalvon kudoksissa ainakin antaa viitearvon diagnosointiin vatsakalvon etäpesäkkeiden [26]. Heiss et al
. [27] huomaavat uPAR voidaan pitää huollettavana indeksi ennustamiseen mahasyöpä luuytimen mikrometastaasin verrattuna sytokeratiini (CK18). Tässä tutkimuksessa, uPAR proteiinipitoisuus oli myös huomattavasti suurempi CEA-negatiivinen vatsakalvon kudoksissa vatsakalvon etäpesäkkeiden potilailla kuin CEA-negatiivinen vatsakalvon kudoksissa nonperitoneal etäpesäkkeiden potilailla (P
< 0,05). Lyhyesti, ehdotamme, että lisääntynyt uPAR ja PAI-1 ilmaisuja vatsakalvon kudoksissa nonperitoneal etäpesäke potilaat voivat pitää viitteenä indikaattori vatsakalvon etäpesäkkeitä.
Mennessä määritystä uPA toiminnan mahasyövän kudosten ja niiden solunulkoisen matriisin, Okusa et al
. [28] raportissa, että korkeammat uPA aktiivisuus liittyy merkittävästi kasvaimia vatsakalvon etäpesäkkeitä ja kasvaimista syvemmälle invaasion mahan seinään. uPA tuottama stromasoluja voi säädellä syöpäsoluinvaasiota [29]. Kuitenkin meidän tulokset osoittivat, että ei ollut merkitsevää eroa uPA toiminnan eri kudoksissa. Tämä voi johtua dynaamista toimintaa uPA, joka näyttää olevan riippuvainen tietystä solun ympäristöihin ja toteaa, että se kohtaa [30].
Johtopäätökset
Tutkimuksemme osoittaa, että uPA järjestelmä ilme on huomattavasti korkeampi vatsakalvon kudoksissa vatsakalvon etäpesäkkeiden potilailla kuin nonperitoneal etäpesäkkeitä potilailla. Tämä ilmaus ero voi tarjota viittaus diagnosoimiseksi vatsakalvon etäpesäke. On kuitenkin olemassa vielä joitakin rajoituksia tässä tutkimuksessa. Tapausten määrä mukana tässä tutkimuksessa oli melko pieni, lähinnä siksi harvat potilaat vatsakalvon etäpesäkkeitä otettiin meidän sairaalassa heinä 2010 joulukuussa 2010. Yritimme poistaa vaikutuksen tämän ongelman sisällyttämällä kudokset (mukaan lukien omentum majus, pelveoperitoneum, ja pallea vatsakalvon) tässä tutkimuksessa. Lisätutkimuksia Useammat aiheista tarvitaan vielä saada selkeämpi ja vakuuttavia tuloksia.
Lyhenteet
CEA:
Karsinoembryonaalinen antigeeni
DMEM:
Dulbeccon modifioitua Eaglen väliaine
ELISA:
Entsyymi immunosorbenttimääritys
GAPDH:
glyseraldehydi-3-fosfaatti dehydrogenaasi
PCR:
Polymeraasiketjureaktio
RT:
käänteiskopioijaentsyymin
RT-PCR:
RT-PCR
uPA:
urokinaasi plasminogeeniaktivaattorin
uPAR:
Urokinaasi plasminogeeniaktivaattorin reseptorin.
julistukset
Kiitokset
Kiitämme seuraavia henkilöitä: Xuehua Chen, jotka osallistuivat sekvenssirinnastukseen ja auttoi valmistelussa käsikirjoituksen. Tunnustamme myös Yubao Ji, Yi Zhang, ja Bin LV, jotka ovat osallistuneet tämän tutkimuksen.
Kirjoittajien alkuperäinen toimitti asiakirjat kuville
Alla linkkejä kirjoittajien alkuperäiset toimitti asiakirjat kuville. 40001_2012_56_MOESM1_ESM.tif Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 1 40001_2012_56_MOESM2_ESM.tif Kirjoittajien alkuperäinen tiedosto kuvio 2 Kilpailevat edut
Kirjoittajat ilmoittavat, että heillä ei ole taloudellisia tai nonfinancial kilpailevia intressejä.
Tekijät osuudet
YD ja ZZ suunniteltu tutkimus, ja suoritettiin RT-PCR, ELISA, ja aktiivisuus tunnistus HZ ja ZZhou. YD, MZ, ja XW osallistui sekvenssirinnastukseen ja laati käsikirjoituksen. ZZ auttoi tehdä tilastollinen analyysi. Kaikki kirjoittajat luettu ja hyväksytty lopullinen käsikirjoitus.

• FOLFIRI kuin toisen linjan hoito potilailla, joilla on dosetakselia esikäsitellyt mahasyövän: historiallinen cohort
• Havaitseminen promoottorin hypermetylaatiota CpG saaren E-kadheriinin mahalaukun sydämen adenokarsinoomaa