PLOS ONE: Quantification des niveaux d'ARNm chitinase dans les tissus humains et de souris par PCR en temps réel: Expression des espèces spécifiques de Acidic Mammalian chitinase dans les tissus de l'estomac

Résumé

chitinase hydrolyse chitine, qui est un N
acétyl-D-glucosamine polymère qui est présent dans un large éventail d'organismes, y compris les insectes, les parasites et les champignons. Bien que les mammifères ne contiennent pas de chitine endogène, les humains et les souris expriment deux chitinases actifs, chitotriosidase (Chit1) et chitinase chez les mammifères acide (AMCase). Étant donné que le niveau d'expression de ces chitinases est augmentée dans de nombreuses maladies inflammatoires, y compris des modèles de maladie de Gaucher et murins d'asthme, les chitinases peuvent jouer un rôle important dans les pathophysiologies de ceux-ci et d'autres maladies. Nous avons récemment mis en place un système de PCR quantitative en utilisant un ADN standard unique et montré que AMCase ARNm est synthétisé à des niveaux extraordinairement élevés dans les tissus de l'estomac de la souris. Dans cette étude, nous avons appliqué cette méthodologie pour la quantification des ARNm de chitinase dans les tissus humains et a constaté que les deux ARNm chitinase ont été largement exprimées dans les tissus humains normaux. Chit1 ARNm a été fortement exprimé dans le poumon humain, alors que AMCase ARNm n'a pas été surexprimé dans les tissus normaux de l'estomac humain. Les niveaux de ces ARNm dans les tissus humains étaient significativement plus faibles que les niveaux de gènes de ménage. Étant donné que les niveaux d'expression de AMCase étaient très différentes entre les tissus humains et de souris estomac, nous avons développé un système de PCR quantitative pour comparer les niveaux d'ARNm entre les tissus humains et de souris en utilisant un hybride ADN standard humain-souris. Notre analyse a montré que Chit1 ARNm est exprimé à des niveaux similaires dans le poumon humain et de souris normale. En revanche, le niveau d'expression de AMCase dans l'estomac humain était significativement inférieur à celui niveau d'expression observé dans l'estomac de la souris. Ces différences d'ARNm entre les tissus de l'estomac humain et de souris reflétaient des différences dans les activités chitinolytiques et les niveaux d'expression de la protéine. Ainsi, le niveau d'expression de la AMCase dans l'estomac est spécifique à l'espèce

Citation:. Ohno M, Togashi Y, Tsuda K, Okawa K, Kamaya M, Sakaguchi M, et al. (2013) Quantification des niveaux d'ARNm dans chitinase Tissues Souris humaine et par PCR en temps réel: Expression des espèces spécifiques de Acidic Mammalian chitinase dans les tissus de l'estomac. PLoS ONE 8 (6): e67399. doi: 10.1371 /journal.pone.0067399

Editeur: Emiko Mizoguchi, Massachusetts General Hospital, États-Unis d'Amérique

Reçu: 5 Janvier 2013; Accepté: 15 mai 2013; Publié le 27 Juin, 2013

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