Stomach Health > želudac Zdravlje >  > Stomach Knowledges > Istraživanja

Ekspresija i klinički značaj Mir-132 kod pacijenata s rakom želuca

Ekspresija i klinički značaj Mir-132 kod pacijenata s rakom želuca
apstraktnog pregled pozadine i objektivno Netlogu Mir-132 ima ulogu u reguliranju neurona morfologiju i stanični razdražljivost. Malo se zna o učincima Mir-132 u rak. Cilj ovog istraživanja je procijeniti izraz Mir-132 i njegovog kliničkog značaja kod raka želuca.
Metode
kancerogena tkiva i odgovarajuće normalna tkiva od 79 bolesnika s karcinomom želuca ispitani su na ekspresiju Mir-132 koriste se analizira kvantitativni PCR i povezanost između razine mir-132 ekspresije i kliničkopatološkim faktora i prognozu. pregled Rezultati
u 79 kliničkih uzoraka pacijenata s rakom želuca, mir-132 razina ekspresije u tkivu raka bili su znatno veći od onih u odgovarajući normalnim tkivima (P
= 0,001). Viša razina ekspresije Mir-132 bili su povezani s učestalijim limfnih čvorova metastaza (P
= 0,033), više limfni tumor embolije (P
= 0,007), te višem stupnju (P
= 0,016). Osim toga, izraz Mir-132 bio je neovisan prognostički čimbenik za ukupno preživljavanje (P
= 0,020). Pregled Zaključak
Mir-132 može poslužiti kao učinkovito prognostički faktor za pacijente s rakom želuca. Pregled, Virtual slajdovi
virtualna tobogan (i) za ovaj članak može se naći ovdje: http:... //www diagnosticpathol dručju diagnomx eU /vs /8168577241196050
ključne riječi
želučanog rak Prognoza biološke markere Uvod pregled Iako je incidencija karcinoma želuca je značajno opada već nekoliko desetljeća, još uvijek je četvrti najčešći karcinom i drugi najčešći uzrok smrti od raka [1, 2]. Višestrukog gena čini se da pridonijeti zloćudne biološkom ponašanju rakom želuca [3, 4]. Vrlo je važno utvrditi prognostički čimbenici kako bi se povećala terapijski učinak i smanjili negativne učinke u liječenju pacijenata oboljelih od raka.
MikroRNA su klasa endogenih malih nekodirajuće RNA koji funkcioniraju kao regulatori gena reguliranjem messenger RNA prijevod i degradacija [5]. MikroRNA igraju ključnu ulogu u regulaciji normalne funkcije kao što su proliferaciju, diferencijaciju i apoptozu. Osim toga, deregulacija miRNAs doprinijeti karcinogeneze i napredovanja raka [6, 7]. Kao član obitelji miRNAs, Mir-132 ima važnu ulogu u upali, angiogeneze, i živčanog razvoja [8-10]. Nedavno, neka istraživanja pokazala da je deregulacija Mir-132 je povezan s različitih humanih tumora, kao što su ne-malih stanica pluća, osteosarkom, rak dojke, hepatocelularnog karcinoma, karcinoma prostate i karcinoma gušterače [11-16]. Međutim, ne postoje izvješća o izrazu i klinički značaj Mir-132 kod raka želuca.
U ovoj studiji, Mir-132 ekspresija u bolesnika s rakom želuca je pregledao i analizirana je povezanost između Mir-132 i kliničkopatološkim parametrima , Dodatno, procijenili smo ekspresiju nekih proteina uključenih u kontroli staničnog ciklusa (p21, p53), proliferacije tkiva i diferencijacije (c-myc). P21 i p53 proteini su proizvodi tumor-supresorskih gena, koje su aktivirane s modulaciju proliferacije stanica preko kontrolu G1 kontrolne točke arest staničnog ciklusa [17, 18]. c-myc proteina je vrsta faktora transkripcije.
Bolesnici i metode
ljudskog želuca rak i odgovara normalna tkiva dobiveni su od 79 pacijenata koji su se podvrgnuli gastrektomije na Odjelu za rak želuca i mekih tkiva sarkoma, Sveučilište Fudan Šangaj raka Centar, u razdoblju od siječnja 2007. do prosinca 2009. Djelomična gastrektomije je provedeno u 36 bolesnika, a ukupno gastrektomije je provedena u drugim 43 pacijenata. Najmanje 4 cm resekcija margine od bruto tumora su zajamčena za sve pacijente. Ukupno 71 bolesnika primljenih adjuvantne kemoterapije. Nakon resekcije, uzorci su odmah zamrznute u tekućem dušiku te uskladišten na -80 ° hladnjaku. Kriteriji za uključivanje za ove studije bili su adenokarcinom i potpuni patoloških podataka; Kriteriji za isključenje su neoadjuvant terapija, peritonejsku širenje, i udaljene metastaze. Podaci su preuzeti iz njihovih operativnih i patološkim izvješćima, a follow-up Podaci su dobiveni putem telefona ambulantno i kliničke baze podataka. Pisani pristanak bio dobiven od svih bolesnika, a ova studija je odobren od strane Etičkog povjerenstva Šangaj Cancer Center Sveučilišta Fudan. Vađenje pregled RNA i kvantitativne real-time PCR
ukupne RNA iz tkiva ekstrahiran s Trizol reagensa (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) u skladu s uputama proizvođača. Kvantitativni PCR u realnom vremenu (QRT-PCR) provedeni su testovi za detekciju ekspresije endogenog Mir-132 prema postupku Applied Biosystems. Ukratko, cDNA je reverzno prepisana iz uzoraka ukupne RNA pomoću Mirna specifičnih matičnih petlje primer iz TaqMan mikrornk testovi i reagensi iz TaqMan® mikrornk reverzne transkripcije Kit (ABI, Forest City, CA, USA). Zatim, PCR produkti su amplificirani iz uzorka cDNA primjenom Taqman mikrornk Ispitivanja zajedno s TaqMan® Univerzalni PCR glavne smjese i količine PCR proizvoda su praćene pomoću Applied Biosystems 7900 za detekciju sekvenci. U6 mali nuklearni RNA korištena je kao interna kontrola. Relativna količina Mir-132 je izračunata korištenjem 2 (delta DeltaC (T)) postupkom [19].
Imunohistokemijsko bojanje
p21, p53, i c-myc se može detektirati imunokemijskim metodom. Svi primarni antitijela i mišje monoklonska antitijela su kupljena od Dako (Hamburg, Njemačka). Imunokemijsko bojenje je provedena metodom poveća označen polimerni sustav (ELPS). Nakon inkubacije preko noći na 4 ° C s anti-p21, p53, i c-myc antitijelom, sekcije su tretirani standardnim postupcima imunoperoksidaznog pomoću streptavidin biotin peroxidise kompleksa priborom (LSAB + Kit /HRP, Dako). Reakcija peroxidise tada je razvijen s diaminobenzidin (Dako). Negativne kontrolne sekcije su podvrgnuti istom postupku, osim što je prvo protutijelo je zamijenjen fosfatnog pufera (PBS) [20].
Imunohistokemijsko bojanje bodovanje pregled svih odresci su ispitani dva patologa bez znanja klinički ishod. Postotak imunoreaktivne stanice i bojanja intenziteti su procijenjena u svakom uzorku. Postotak imunoreaktivnih stanica ocjenjuje na skali od 0 do 4: bez bojanja praćen je 0, 1-10% stanica obojanih označeni kao 1, 11-50% kao što je 2, 51-80% kao što je 3, i 81- 100% kao 4. bojanja intenziteti su ocijenjeni od 0 do 3: 0 se definira kao negativna 1 kao slabo, 2 kao moderirana te 3 jaka, respektivno. Sirovi podaci su pretvoreni u imunohistokemijske rezultatom (IHS) množenjem količina i intenzitet rezultate. Na konačnoj analizi, slučajevi imali rezultat od manje od 1 smatrani su kao negativni i ≥ 1 bio je smatran pozitivnim [20]. Pregled, statistička analiza
pacijenata značajkama i kliničkopatološkim karakteristike su analizirani pomoću dvije -tailed Studentov t-test pregled za kontinuiranu varijablu i χ 2 testa za rangirane varijable. Ukupni krivulje preživljavanja izračunate su Kaplan-Meier metodi, a razlike između krivulja preživljavanja su ispitani dugo rang test. Nezavisne prognostički čimbenici ispitana su multivarijatne analize preživljenja korištenjem Cox proporcionalnih rizika model. Prihvaćena Razina značajnosti bila je P izvoznici < 0.05. Statističke analize i grafika provedena pomoću SPSS 13.0 statističkog paketa (SPSS Inc., Chicago, IL)