PLOS NËMMEN: geziilte Läsche vun Kcne2 Erlaabt Gastritis Cystica Profunda an Gastric Neoplasia

Wat VerfÜgung

Gastric Kriibs weltwäit den zweete Spëtzekandidat Ursaach vum Kriibs Doud ass. Predisposing Facteure gehéiert achlorhydria, Helicobacter pylori VerfÜgung Wonn, oxyntic atrophy an TFF2-ausdrécken metaplasia. An parietal Zellen, enger steriler KaliumiodidPëlle Riewe der KCNQ1 α subunit an der KCNE2 β mat subunit engem K déi + efflux aktuell gastric Seier secretion vun der enger steriler H + K + ATPase ze vereinfachen. An anere Wierder, genetesch Läsche vun murine Kcnq1 VerfÜgung oder Kcne2 VerfÜgung gastric Seier secretion impairs. Aner Beweiser huet am mënschleche gastric Kriibs Zell Prolifératioun, onofhängeg vun hirer Roll an gastric sauer eng Roll fir KCNE2 ugeholl. Hei, weisen mir déi 1-Joer-ale Kcne2 VerfÜgung - /- Mais an engem pathogen-gratis Ëmwelt all Collectioun engem schwéieren gastric preneoplastic phenotype mat gastritis cystica profunda, 6-fantastesch fräi Mo. Mass, fräi Ki67 an nuklear Cyclin D1 Ausdrock, an TFF2- an cytokeratin 7-ausdrécken metaplasia. Verschidde Kcne2 VerfÜgung - /- Mais och pyloric polypoid adenomas Schatzkummer verlängeren an der Ausléiser, an neoplastic Invasioun vun dënn walled kritt an de Sous-mucosa. Endlech, Analyse vu mënschlechen Otemschwieregkeeten gastric Kriibs uginn reduzéiert parietal Zell KCNE2 Ausdrock. Zesumme mat virdrun Conclusiounen, proposéiere de Resultater KCNE2 Stéierungen als eng méiglech Risiko Faktor fir gastric neoplasia VerfÜgung

Fro:. Roepke TkLanguage, Purtell K, Kinnek CE, La Perle KMD, Lerner DJ, Abbott GW (2010) geziilte Läsche vun Kcne2 VerfÜgung Gastritis Cystica Profunda an Gastric Neoplasia Erlaabt. PLoS NËMMEN 5 (7): e11451. Doi: 10.1371 /journal.pone.0011451 VerfÜgung

Redakter: Xin-Yuan Guan, D'Universitéit vun Hong Kong, China VerfÜgung

Arnaque: 3 Mee 2010; Akzeptéiert: 13 Juni, 2010; Publizéiert: Juli 6, 2010 VerfÜgung

Copyright: © 2010 Roepke et al. Dëst ass eng oppen-Zougang Artikel ënnert de Bedingunge vun der Lizenz BY Creative Commons verdeelt, déi bereet benotzen Genehmegungen, Distributioun, an Reproduktioun vun all mëttelgrouss, gëtt d'Original Auteur an d'Quell Kaiser sinn VerfÜgung

Funding:. G.W.A. ass vun der Nationaler Heart, Lung an Blood Institut, National Instituter Gesondheetsminister (R01 HL079275), d'amerikanesch Heart Association (Grant-A-Hëllef 0855756D), an eng Irma T. Hirschl Berufflech Fuerscher Award ënnerstëtzt. D'funders hu keng Roll am Etude Design, Daten Kollektioun an Analyse, Décisioun, oder Virbereedung vun der mëttelalterlech Handschrëft ze publizéieren VerfÜgung

Wettsträit Interessen:.. D'Auteuren hunn deklaréiert, datt keng Competitioun Interessen existéieren VerfÜgung

Aféierung VerfÜgung

Gastric Kriibs bleift ee vun de groussen Ursaache vun veruerteelt, an den zweete Spëtzekandidat Ursaach vum Kriibs Doud, weltwäit. Gastric carcinogenesis ass e Prozess, deen duerch verschidden Etappe dorënner oxyntic atrophy, oppent Opstellung, foveolar hyperplasia, hypo- an achlorhydria an Panz Zell metaplasia Verlaf [1]. Trotz Fortschrëtter am Traitement vun gastric Kriibs, ass relativ wéineg iwwert de molekulare Mechanismen gastric carcinogenesis Équipe bekannt, d'Entwécklung vun normal gastric mucosa an preneoplastic gastric lesions, oder d'Potential Roll fir ioun Chaînen op dës Prozesser. VerfÜgung

Parietal Zellen erreechen déi opgrond vun engem enger steriler H + K + ATPase (HKA) déi protons an de Mo. lumen am Austausch fir K Protonen gastric sauer Pompelen. Fir dës Aktivitéit affirméieren, K Protonen aus der parietal Zell an de Mo. lumen via d'enger steriler Membran reesen muss, weider Realitéiten fir d'HKA [2] ze garantéieren. Dëst K + ioun efflux existeiert duerch eng oder méi Zorte vun enger steriler, K + - selektiv Televisiounsprogrammer. Puer Erläsche rectifier (Kir) Riewe sinn an dësem Prozess baséiert op parietal Zell Ausdrock an pharmacological Beweiser [3], [4] agebonne, mee sou wäit et genetesch ass Beweiser fir just ee Kanal dës Roll Erfëllung: KCNE2-KCNQ1 [5] - [7]. KCNQ1 ass e sechs-transmembrane Domain α subunit aus der S4 superfamily, déi funktionell Formen, Volt-gated, homotetrameric K + - selektiv Televisiounsprogrammer zu heterologous Ausdrock Studien [8], [9]. KCNQ1 kann och heteromeric Kanal investéiert mat Niewekäschten subunits aus der KCNE Gentherapie Famill Form, an all fënnef bekannt KCNE Gentherapie Produite goufen dës Distanz zu KCNQ1 Funktioun vun heterologous Ausdrock Studien [10] regléieren. One, KCNE2, konvertéiert KCNQ1 zu engem Volt-onofhängeg, constitutively-aktiv Kanal hir aktuell duerch niddreg pH fräi ass. KCNE2 an KCNQ1 sinn souwuel am oder ronderëm de parietal Zell enger steriler Membran ausgedréckt, a cibléiert Gentherapie Läsche vun entweder subunit Resultater am achlorhydria wéinst leider gastric Seier secretion [5] - [7]. Sou sinn KCNE2-KCNQ1 Riewe essentiel fir gastric Seier secretion a Gedanken dorunner luminal K Protonen als Realitéiten fir d'gastric HKA fir VerfÜgung

Kcnq1 VerfÜgung -. /- Mais a Kcne2 VerfÜgung - /- Mais weisen ähnlechen gastric phenotypes, vun achlorhydria, hypergastrinemia an gastric glandular hyperplasia charakteriséiert [5] - [7]. Parietal Zellen aus entweder wäert weisen ~10-fantastesch reduzéiert Muecht vum Proton Luede ze erhuelen, eng primär Mängel an gastric Seier secretion suggeréiert. Kcnq1 VerfÜgung - /- Mais entwéckelen och metaplasia, dysplasia an Pré-malignant adenomatous hyperplasia vun de Mo. onofhängeg vun Wonn [11]. Dëst deit drophin, datt KCNQ1 Viagra ze gastric neoplasia onofhängeg vun H Féierung konnt. pylori VerfÜgung wéinst schwéieren achlorhydria, oder eng zousätzlech Risk Faktor vertrieden déi a Verbindung mat H. pylori konnt VerfÜgung zu gastric Kriibs predispose VerfÜgung

D'achlorhydria an gastric hyperplasia mir zu virdrun observéiert Kcne2 VerfÜgung -. /- Mais entscheet war opfälleg, datt de pore-administrativ subunit vun der komplex, KCNQ1, war nach presentéieren, an eigentlech war et staark an duebel Zuel vun Zellen pro gastric drüs zu Kcne2 ausgedréckt VerfÜgung - /- Mais am Verglach zu Kcne2 VerfÜgung + /+ Mais [7]. An enger rezenter Etude, war KCNE2 Ausdrock fonnt bei relativ niddregen Niveau mënschlechen gastric erhéijen an gastric Kriibs Zell Linnen ausgedréckt gin; donieft missen iwwer-Ausdrock vun KCNE2 Trupen dem Wuesstem vun der Mënschheet gastric Kriibs Zellen an Otemschwieregkeeten Kultur, an an Sauna Mais [12]. Dës Conclusiounen konnten de spezielle Méiglechkeet, datt KCNE2 kéint zu gastric carcinogenesis Équipe ginn, an eventuell eng onofhängeg vun entweder H. pylori VerfÜgung Krankheet oder achlorhydria. Hei, fir weider d'Potential Roll vun KCNE2 definéieren an Regulatioun vun normal gastric Zell Wuesstem, scrutinized mir de gastric wirklech vun Kcne2 VerfÜgung - /-. Mais bis zu 15 Méint vun Alter VerfÜgung

Resultater VerfÜgung

Kcne2 - /- VerfÜgung Mais II gastric hyperplasia Collectioun VerfÜgung

Mir virdrun bewisen, dass Kcne2 fir normal Regulatioun vun gastric mucosal Zell Wuesstem néideg ass: 3- Mount-al Kcne2 VerfÜgung - /- Mais hunn gastric hyperplasia, achlorhydria an Manque parietal Zell Wirklechkeet [7]. Hei Verglach mir de Mo. Mass vun 3-Woch, 3-month- an 12-15-Mount-al Kcne2 VerfÜgung - /- Mais. D'Mass vun Mamm an 3 Wochen vum Alter waren ähnlech fir Kcne2 + /+ VerfÜgung a Kcne2 VerfÜgung - /- Mais, Coursë vun 3 Méint do war groussen gastric hyperplasia am Kcne2 VerfÜgung - /- Mais. Dës Differenz Équipe vun 12-15 Méint bis d'Mooss fräi dass Kcne2 VerfÜgung - /- Mais haten Mamm 6-fantastesch grouss wéi déi vun Kcne2 + /+ VerfÜgung Mais vum selwechten Alter (Dorënner 1 A) VerfÜgung

Kcne2 -. /- VerfÜgung Mais Collectioun gastritis mech profunda VerfÜgung

Och bei 3 Wochen vun Alter, trotz ähnlechen Mo. Mass fir déi vun Kcne2 + /+ VerfÜgung Mais, gastric mucosa vun Kcne2 VerfÜgung - /- Mais awer schonn vacuolations no der basolateral Säit (Dorënner 1 B; hues an d). Fir de Werdegang vun gastric hyperplasia ermëttelen an hir Konsequenzen, am Ganzen eelef 12-15 Mount-al Kcne2 VerfÜgung - /- Mais a fënnef Kcne2 + /+ VerfÜgung Mais sech histologically iwwerpréift. D'gastric mucosa zu all Kcne2 VerfÜgung - /- Mais zougedréckt glandular hypertrophy an diffusen hyperplasia mat fräi Zuelen vun Panz Zellen an parietal Zellen datt heiansdo vacuolated waren (Dorënner 1 C). Contreras, gastritis cystica profunda (GCP) observéiert gouf an 11/11 Kcne2 VerfÜgung - /- Mais, mä 0/5 vun den Kcne2 VerfÜgung + /+ Mais ( χ 2 p VerfÜgung = 0.002) (Vergréisserung vun Beruf am Dorënner 1 E). Dilated Glands enthale Zell Protokoll an, an e puer mä net all Kcne2 VerfÜgung - /- Mais, neutrophils. Et war och gastric epithelial hyalinosis mat heiansdo intraluminal Kristaller, an lymphoplasmacytic Bodrum an der mucosa, submucosa an muscularis. An e puer 12-15-Mount-al Kcne2 VerfÜgung - /- Maus Mamm, gouf dichteg lamina proprial fibrosis, virun allem am iwwerflächlech Schichten bemierken. GCP, och virdrun op den benign gastric pseudotumor bezeechent, allgemeng Klengegkeeten wéi engem Spektrum vun hyperplastic an metaplastic Ännerungen dëse Schued un der gastric mucosa. Iwwerdeems GCP histological Fonctiounen verbonne mat malignancy Sarkasmus, ass et an sech generell System benign considéréiert - obwuel et als eng méiglech Risiko Faktor fir gastric Kriibs ugeholl gouf [13], [14] VerfÜgung

erhéicht proliferative lues zu gastric. mucosa vun Kcne2 - /- VerfÜgung Mais VerfÜgung

Fazit vun der Virronn, Ausdrock vun etabléierten preneoplastic lues zougeholl huet Kcne2 VerfÜgung - /- Mais am Verglach zu Kcne2 VerfÜgung + /+ Mais. Ki67 antigen ass eng Zell Zyklus Zesummenhang nuklear FAQ allgemeng als Prolifératioun Bewaacher benotzt zu proliferating an neoplastic Stoffer, dorënner de Mo [15]. Ki67 staining zu Sektiounen aus Kcne2 VerfÜgung + /+ Maus Mamm (3 Méint) eng kleng Grupp vu Ki67 positive Zellen am isthmic Regioune vun gastric Glands uginn, wobäi dës proliferative unzekräizen wiesentlech zu age- erweidert huet iwwereneestëmmen Kcne2 VerfÜgung - /- Mais (Dorënner 2 E-C). Epithelium Doropshin mech Beräicher vun GCP zu 12-Méint ale Kcne2 VerfÜgung - /-. Mais hien och eminent staining vun Käre mat Ki67, duerops vun engem héije Prolifératioun Tarif (Dorënner 2 B) VerfÜgung

Cytokeratin (CK) -7 ass eng 54 kDa polypeptide zu enger grousser Villfalt vu epithelial Stoffer dorënner haett, Broscht, an an et Mënsch Mo. ausgedréckt; awer, ass et net zu normalen Erwuessenen gastrointestinal epithelia ausgedréckt [16]. Upregulation vun CK-7, duerops dedifferentiation, war evident zu Kcne2 VerfÜgung - /- gastric mucosa um 12 Méint; am Alter-stemmt Kcne2 VerfÜgung + /+ Mais, gastric mucosal positive epithelial Zellen sech vill méi rar (Dorënner 2 D). CK-7 ass och eminent ronderëm cysts (Dorënner 2 E) VerfÜgung

TFF2-ausdrécken metaplasia zu gastric mucosa vun Kcne2 -. /- VerfÜgung Mais VerfÜgung

Trefoil- Faktor Famill (TFF) 2-ausdrécken metaplasia ass an de Mënschen mat Werdegang ze gastric Kriibs verbonnen, an an Persounen gerbils Krankheet mat H. pylori VerfÜgung [17]. Gastric mucosa vun Kcne2 VerfÜgung - /- Mais Schatzkummer Beräicher vun metaplasia mat groussaarteg TFF2 Ausdrock, an epithelial Zellen dorënner Doropshin cysts (Dorënner 3 E-C). TFF2-ausdrécken metaplasia ass normalerweis mat oxyntic atrophy assoziéiert, wéi e Verloscht vun parietal Zellen charakteriséiert [1]. Hei, mir analyséieren gastric mucosa vum 12.-Mount-al Mais mat TFF2-ausdrécken metaplasia fir Ausdrock vun der HKA β subunit (HKA β), engem parietal Zell verbruecht. Contreras, gouf et keng Beweiser vun oxyntic atrophy zu Conditioune vun Zuel vun parietal Zellen (Dorënner 4 A). Weider, war HKA β an Zellen ausgedréckt cysts (Dorënner 4 B) VerfÜgung

erhéicht gastric mucosal Cyclin D1 Ausdrock an gastric neoplasia zu Kcne2 Doropshin -. /- VerfÜgung Mais VerfÜgung

reduzéiert Ausdrock KCNE2 gouf ugeholl virdrun Zouhuelen vun der gastric Kriibs Zell Linn SGC7901 via fräi Meenungsäusserung vun Cyclin D1 [12] ze verbesseren. Hei, westlech blots ugeholl datt Kcne2 VerfÜgung Gentherapie Läschen total Cyclin D1 Ausdrock vun der gastric mucosa vun 12-Méint ale Mais (Dorënner 5 A) fräi. Cyclin D1 zougedréckt schwaach a virun allem cytoplasmic Ausdrock op d'Basis vun Kcne2 VerfÜgung + /+ oxyntic Glands (Dorënner 5 B, C, lénks Brieder), wéi virdrun fir normal, proliferating Zellen zu Maus Mo. beschriwwen [ ,,,0],18]. Am Géigesaz zu Kcne2 VerfÜgung - /- Mais, huet Cyclin D1 méi verbreet an nuklear staining am Hals Moien Regioun vun gastric Glands, an glandular pit (Dorënner 5 B, C, richteg Brieder). An zwee vun eelef 1-Joer-ale Kcne2 VerfÜgung - /- Mais analyséiert, goufen pyloric polypoid adenomas observéiert, an den Ausléiser ze verlängeren (Dorënner 5 D). D'selwecht zwee Kcne2 VerfÜgung - /- Mais och neoplastic Wuesstem an der Form vun thrombi komponéiert vun fibrin an glandular epithelium, an dënn-walled kritt (identifizéiert mat endothelial Bewaacher CD34) bannent der gastric submucosa Schatzkummer ( Figur 5 e-H). VerfÜgung

reduzéiert parietal Zell KCNE2 Ausdrock vun mënschlecher gastric Kriibs Otemschwieregkeeten VerfÜgung

Tatsaach, datt an enger viregter Etude reduzéiert KCNE2 Ausdrock fonnt huet gastric Kriibs Zell Linn Prolifératioun ze verbesseren, an KCNE2 Ausdrock war zu Mënsch gastric Kriibs [12] zu reduzéiert fonnt, mir iwwerpréift KCNE2 Ausdrock am normale Mënsch gastric mucosa, an gastric Kriibs Otemschwieregkeeten. Immunofluorescence Studien markant Ënnerscheeder mat Respekt ze KCNE2 an KCNQ1 Co-Lokalisatiouns verroden, tëscht normal a malignant Mënsch gastric mucosae. Wéi erwaart, KCNQ1 an KCNE2 Co-en der betraff zu parietal Zellen am normale Mënsch gastric mucosa (Dorënner 6 A), wéi hutt KCNQ1 an HKA β (Dorënner 6 B). Am Géigesaz, selten mënschlechen gastric carcinomas, KCNQ1 an KCNE2 Ausdrock overlapped (Dorënner 6 C, D), obwuel KCNQ1 seng staark Co-Lokalisatiouns mat HKA β (Dorënner 6 E) erëmgewielt. KCNE2 Ausdrock vun parietal Zellen Soumat war selten zu gastric carcinoma observéiert. D'Feele vun KCNE2-KCNQ1 Co-Lokalisatiouns war souguer méi déiwer zu Mënsch gastric adenocarcinoma (Dorënner 6 F), déi nees erëmgewielt Co-Lokalisatioun vun KCNQ1 an HKA β (Dorënner 6 G). VerfÜgung

Diskussioun VerfÜgung

Kalium Televisiounsprogrammer zu proliferative Entwécklungsstéierungen VerfÜgung

Kalium Riewe hunn als potentiell Zil fir Anti-Kriibs Therapien Gedenkminutt [19], dorënner KCNQ1, hERG an Kv2.1, all vun deem α subunit Partner vun KCNE2 sinn. Erofgaangen imprinting vun Projet'en am KCNQ1 Gentherapie Ursaach Beckwith-Wiedemann Syndrom (BWS) verursaacht, déi zu Kriibs ipso [20] - [22], an KCNQ1 Knockout ipso gastric metaplasia [11]. D'hERG KaliumiodidPëlle Kanal α subunit, deen investéiert mat der KCNE2 Niewekäschten subunit mënschlechen Häerz [23] Formen, ass an e puer erhéijen iwwer-ausgedréckt, an huet identifizéiert ginn als entholl Iwwerliewe Faktor [24] - [27] Den Kv2 huet. 1 [28]. VerfÜgung

KCNE2 war virdrun fonnt ausgedréckt gin 2-fantastesch ënnen am mënschleche gastric Kriibs Otemschwieregkeeten wéi an Nopeschlänner normal gastric Zellen, an gezwongen upregulation vun KCNE2 haten anti-proliferative Auswierkungen op gastric Kriibs Zellen kënschtlech VerfÜgung an Sauna Mais heijen [12]. D'postulated Mechanismus fir dës anti-proliferative Effekt ass erof-Regulatioun vun Cyclin D1, Werdegang duerch d'Zell Zyklus riskéiert [12] gläicht, wat mat der hERG blocker cisapride observéiert gouf [29]. Nik Ausdrock vun Cyclin D1 zu Mënsch gastric erhéijen deemolegt Weltbild mat engem besonnesch aarme hätt [30], also Faktoren Verständnis dass Cyclin D1 Ausdrock Erhéijung ze therapeutesch Pistë fir dës an aner Forme vu Kriibs kann Féierung. Overexpression vun Cyclin D1 gouf virgeschlo zu oncogenesis ze bedeelegen vun der Zell Zyklus beonrouegend, an huet confirméiert gouf eng wichteg oncogenic Faktor esophageal carcinoma ginn [31], a mat der Nuklearenergie Heefung vun β-catenin zu spillt endometrioid adenocarcinomas verbonne [32]; nuklear Cyclin D1 overexpression zu gallbladder carcinomas ass eng kritesch Evenement [33]. VerfÜgung

Hei, mir beschreiwen extensiv metaplastic Ännerungen am gastric muscosa wéinst genetesch Stéierungen Kcne2 VerfÜgung. Dat ass mat fräi nuklear Cyclin D1 Ausdrock vun der gastric mucosa, erënner vun de Resultater vun de leschte kënschtlech VerfÜgung Studie vun KCNE2 [12] assoziéiert. Weder den aktuelle Rapport nach der leschter Etude vum Ee, delineate de Mechanismus fir Cyclin D1 upregulation zu Kcne2 VerfÜgung - /- mucosa - ass et eng Konsequenz vun metaplastic Ännerungen Secondaire an dëse Mais bis achlorhydria, oder ass et eng méi direkt association tëschent Kcne2 VerfÜgung an Cyclin D1? D'Etude vun Yanglin a Kollegen PSA fir deen op d'mannst zu engem Deel, well an hirer Etude Priedegt der Cyclin D1 Ännerungen an isoléiert Zellen ouni den Afloss vun achlorhydria [12]. Mir verstinn Ännerungen Lycée zu achlorhydria d'Wahrscheinlechkeet dominant Faktor sinn, mä en direkte Lien net ausgeschloss ginn. Spannen, hERG, aner Partner vun KCNE2, ass zu gastric Kriibs Zellen ausgedréckt awer net normal gastric epithelia, an de Kanal blocker cisapride hERG war virdrun vun inhibiting Element an S Phas vum G (1) Phase vun der gastric Kriibs Zell Wuesstem eraus fonnt Zell Zyklus, waarden apoptosis [29]. Well KCNE2 Hien deelweis gëtt hERG vum Zentralstaat conductance reduzéieren an Ursaache aktivéiert [23], ass et engem spezielle Méiglechkeet, datt d'observéiert anti-proliferative Auswierkunge vun KCNE2 overexpression kënschtlech VerfÜgung [12] si wéinst hERG aktuell Ennerdréckung Fördere apoptosis, an Ëmgedréit datt KCNE2 verwandelt-Regulatioun oder genetesch Stéierungen kann gastric bewosst Prolifératioun zugonschte vun hERG aktuell Dicht waarden VerfÜgung

GCP an TFF2-ausdrécken metaplasia (SPEM) zu Kcne2 -. /-
Mais VerfÜgung

GCP kann mat liichte epigastric Péng, bloating, gastric dogéint oder ieweschte gastrointestinal Hals an Mënschenhandel presentéieren, an ass déi allgemeng am Patiente mat enger Geschicht vun entweder gastrectomy oder gastrostomy [34] gesinn. Allerdéngs hunn e puer Fäll ass mat kee Veräin virewech gastric Agrëff gemellt [35], [36]. D'pathogenesis vum Mënsch GCP ass gegleeft vun enger Verletzung vun der muscularis mucosae ze beuerteelen, wat fir ectopic entrapping vun gastric Glands am submucosa Féierung kann, muscularis mucosae oder serosa, oder aus chronescher inflammation. GCP ass allgemeng eng benign Medeziner Entity- considéréiert, obwuel Associatioun mat gastric Kriibs huet gemellt ginn [14], [37], [38]. VerfÜgung

Am Labo Déieren, GCP Secondaire ze Helicobacter sp VerfÜgung . Wonn gouf als Virgänger vun intramucosal dysplasia an neoplasia [39], an Zesummenhang mat der Entwécklung vun gastric carcinoma beschriwwen. GCP war dacks am H fonnt. pylori VerfÜgung -infected Persounen gerbils datt och gastric adenocarcinoma an lymphoid hyperplasia [40] entwéckelt. An enger viregter murine genetesch Modell vun GCP, TGF Beta 1 +/- Mais entwéckelt glandular hyperplastic lesions datt morphologic Fonctiounen mat mënschlechen GCP, mat gemëschte demagogesch einfach vun der Géigend mucosa a chronescher vasculitis zu Stoffer bascht ze dës lesions gedeelt [ ,,,0],41]. Hei, zu Kcne2 VerfÜgung - /- Mais, GCP existeiert an dem Fehlen vun enger Primärschoul demagogesch lesion, an onofhängeg vun wiere obliteration. Amplaz, proposéieren mir dass d'Primärschoul Mängel Verloscht vun der β subunit vum Kanal investéiert mat KCNQ1 KCNE2 ass, domat eng wichteg enger steriler K + Recycling Passerelle an parietal Zellen impairing an gastric sauer vun der parietal Zell HKA bedengt. Während dëser engem "funktionell atrophy" an der parietal Zell Populatioun duerstellt, en effektive Verloscht vun parietal Zellen zu virdrun Studie vun intestinal metaplasia, 'oxyntic atrophy Odyssée, war e wichtege Prozess vun der etiology vun intestinal metaplasia, verbonne mat Seier reflux Krankheet als oder H. pylori VerfÜgung Wonn, an ass déi gemeinsam metaplastic Prozess an der ieweschter gastrointestinal TRACT observéiert [42]. VerfÜgung

Oxyntic atrophy an dem Fehlen vun enger grousser inflammation kann duerch DMP-777, e neutrophil elastase inhibitor entschlof ginn déi Ziler och fir hir Aktioun wéinst als protonophore parietal Zellen [43]. Oxyntic atrophy zu gastric-erhéijen Mais, folgende Behandlung mat DMP-777, féiert ganz séier ze TFF2-ausdrécken metaplasia, och un den spasmolytic peptide ausdrécken metaplasia (SPEM) bezeechent [44]. SPEM ass ausserdeem well vu senge staark Associatioun mat mënschlechen gastric adenocarcinoma, an et ass vun der Majoritéit vun fundic drüs biopsies vum Mënsch H observéiert. pylori VerfÜgung -infected gastritis Patienten [45]. D'Ernimmung vun SPEM zu Kcne2 VerfÜgung - /- Mais an dem Fehlen vun entweder H. pylori VerfÜgung oder klassesch oxyntic atrophy hindeit, datt de "funktionell atrophy 'déitlech Kcne2 VerfÜgung Läschen genuch kann SPEM ausléisen. Ee groussen Ënnerscheed tëschent Kcne2 VerfÜgung - /- Mais, an deenen zu der Nozaki Etude ass, datt Kcne2 VerfÜgung - /- Mais sinn hypergastrinemic, net gastrin-erhéijen. Weideren Ënnerscheed ass, datt DMP-777 engem gastric tubulovesicle Proton packt desorganiséieren ouni impairing H + K + - ATPase Funktioun hierkommen geziilte Kcne2 VerfÜgung Stéierungen evitéiert H + /K + -ATPase Funktioun vun hirer luminal Realitéiten Stoppen, K Protonen [7], [44]. Villäicht huet dëst sëtze Mechanismus an Zukunft vläicht definitiven Indizien iwwert der kritescher Evenementer zu oxyntic atrophy datt zu SPEM Resultat: et am Moment ass, datt SPEM Aféierungs- Resultater vun enger hunn zu parietal Zell-secreted Reglementatioun vun normal gastric mucosal Erneierung, déi sonic Kéiseker gehéiert an TGF-α [46], [47] wéinst Verloscht vun parietal Zellen. Weider Studie vun Kcne2 VerfÜgung - /- parietal Zellen - déi nach dobäi sinn, mee Mazoutstank - Legislateuren definitiven kënnen déi se nach secrete kann, an déi déi se kann net VerfÜgung

D'gastric mucosa. vun Kcne2 VerfÜgung - /- Mais weisen och fräi Ausdrock vun der etabléierter Prolifératioun Bewaacher Ki67, wéi eng Erhéijung vun der Kontur vun der mucosal proliferative Band manifesting, a wéi Ki67-positiv Zellen Doropshin der cysts zu Regiounen vun GCP. Den Zerfall, CK7 der de-dat Tandel, net zu 1-Joer-ale ausgedréckt Kcne2 VerfÜgung + /+ gastric mucosa, war an dass vun dicht ausgedréckt Kcne2 VerfÜgung - /- Mais. Alles an dësen an der lues virun zesummen beschriwwen, de Kcne2 VerfÜgung - /- gastric mucosa geet metaplasia mat méi Fonctiounen vun preneoplasia, an an e puer neoplasia Fäll, virun allem an engem spezifeschen pathogen-gratis Ëmwelt mat keng Beweiser vun gastric Helicobacter VerfÜgung Krankheet oder oxyntic atrophy, an an de Flichte vun der chemescher inhibitors vun gastric sauer. Zesumme mat der Opklärung hei dass parietal Zell KCNE2 Ausdrock ebenfalls Mënsch gastric Kriibs Otemschwieregkeeten (Dorënner 4) an der viregter Rapport reduzéiert ginn, datt KCNE2 gastric Kriibs Zell Prolifératioun [12] bremst, proposéiere d'Donnéeën KCNE2 Stéierungen mat gastric Kriibs Werdegang verbonnen ass. Zukunft Studien generéiert waat ob Kcne2 VerfÜgung Stéierungen predisposition zu gastric Kriibs bannent pathogen an carcinogen-baséiert Ëmwelt- Majoratiounen, d'Mechanismussen hannert dës méiglech Differenzen, an d'Potential mechanistic Linken tëschent Kcne2 VerfÜgung, Cyclin D1 an Zell Zyklus perturbation ausserhalb vum Räich vun achlorhydria-verbonne Krankheet etiology. Ausserdeem, wéi KCNQ1 an KCNE2 sinn och an Schild epithelial Zellen-ausgedréckt Co, wou se fir Schild Hormon biosynthesis wichteg sinn [48], wäert et interessant ginn e Potential Roll fir KCNE2 zu Manque thyrocyte Prolifératioun ze iwwerpréifen. VerfÜgung

spontan a Methode VerfÜgung

Generation an Benotzung vun der Gentherapie-geziilte Mais VerfÜgung

All zu dëser Etude beschriwwen Mais sech no NIH an Cornell University Finanzpolitiker Déieren Care an benotzt Comité Richtlinnen Haffbibliothéik, ausgenotzt an euthanized. All Mais an dëser Etude beschriwwe goufen Haffbibliothéik, ausgenotzt an euthanized no NIH an Weill Medical College Finanzpolitiker Déieren Care an Benotzt Comité Richtlinnen. Ethesch Accord zu Haren a Recolte Otemschwieregkeeten vu Wëllschwäin-Typ an Kcne2 VerfÜgung - /- Mais fir biomedical Fuerschung war den Accord vun Weill Medical College Finanzpolitiker Déieren Care an Benotzt Comité (Protokoll 0704-610A). Kcne2 VerfÜgung - /- Mais aus C57BL wéi virdru beschriwwen /6 Kcne2 + /VerfÜgung generéiert goufen - x Kcne2 +/- VerfÜgung Passë [7]. Deiten sech mat iwwerschratt Software (Microsoft) analyséieren, andeems ee-Manéier Analyse vun Varianz (ANOVA) mat statisteschen Bedeitung Formatioun um P VerfÜgung &Si besteet;. 0,05 VerfÜgung

Histologie VerfÜgung

Fir Histologie an Mo. Mass quantification, Kcne2 + /+ VerfÜgung a Kcne2 VerfÜgung - /- Mais bei 3 Wochen, 3 Méint an 12-15 Méint benotzt CO geaffert _{2 asphyxiation (5-10 pro genotype). Mamm goufen ofgegruewen Post-Eenzegartegkeet vum Fall bestätegt, Mo. Mass alles, dann Mo. Otemschwieregkeeten zu 10% neutral gefiermt formalin fest war, déi Iddi Methoden Filteren an paraffin Faarwen Ënnerbewosstsinn. Gastric mucosal Rubriken um 5 μm Intervalle geschnidde goufen, Faarwe op positif-Attack Superfrost drënner, Kierchefënster mat hematoxylin an eosin (H & E)., A bewäert mat enger Olympus BX45 microscope VerfÜgung}

Immunohistochemistry VerfÜgung

Immunohistochemical erkennen Ki67, CK-7 an TFF2 (och als spasmolytic peptide genannt) war mat engem Discovery XT Prozessor (Ventana MEDICAL SYSTEMS) gesuergt. Der Primärschoul antibody Konzentratioune benotzt goufen: 0,05 μg /ml (Kanéngchen polyclonal anti-Ki67, Vecteure Laboe); 1 μg /ml (Maus monoclonal anti-CK-7; Abcam); 1 μg /ml (Maus monoclonal anti-TFF2; Abcam). Virecht Primärschoul antibody incubation, Otemschwieregkeeten Rubriken sech fir 30 min an 10% normal Geess serum, 2% BSA vun PBS (anti-Ki67) gespaart; 30 min an 10% normal Geess serum, 2% BSA vun PBS an Avidin /Biotin fir 8 min (anti-CK-7); 30 min an 10% normal Geess serum, 2% BSA vun PBS an Avidin /Biotin fir 4 min (anti-TFF2). Primärschoul antibody incubation mol waren: 3 HR (Ki67 an CK-7); 5 Stonnen (anti-TFF2). Secondaire antibody incubations goufen: 32 min an 1:200 biotinylated Geess anti-Kanéngchen IgG (Vecteure Laboe) fir Ki67; 60 min an 1:200 biotinylated Päerd anti-Maus IgG (Vecteure Laboe) fir CK-7 an TFF2. Fir Ki67 Secondaire antibody incubation, Blocker D, Streptavidin-HRP an botzt erkennen Kit (Ventana MEDICAL SYSTEMS) huet laut den Hiersteller d'Instruktioune benotzt. Fir CK-7 an TFF2, Maus IgG1 (5 μg /ml) war als isotype negativ Kontroll, an Blocker D, Streptavidin-HRP an botzt erkennen Kit (Ventana MEDICAL SYSTEMS) waren benotzt ginn. VerfÜgung

Fir Cyclin D1 erkennen, sech Mo. drënner fir 30 min bei 58-60 ° C gehëtzter an dann deparaffinized. Endogenous peroxidase Aktivitéit war fir 15 min duerch incubating Rubriken vun 1% Waasserstoff Hem vun PBS gespaart (8.3 ml 30% H _{2O 2 /241.7 ml PBS) vun unmasking vun der antigenic epitope duerno zu 10 mm Citrate microwaving Respektiv op héich Muecht fir 15 min. Drënner waren fir 20 min gi si, fir 5 min an destilléiert Waasser gewäsch, fir PBS transferéiert an zu 10% normal Päerd serum (vun 2% BSA-PBS der Mindeststeier) fir 30 min an engem fiichten Chambre incubated. Mouse monoclonal anti-cyclin D1-antibody (Zell sécher) war um 1:1000 mat 2% BSA vun PBS notéiert an Nuecht op 4 ° C an engem fiichten Chambre incubated. Drënner waren am PBS an de Secondaire biotinylated Päerd anti-Maus IgG antibody (Vecteure Laboe) war fir 30 min bei RT um 1:500 vun PBS applizéiert rinsed. Drënner waren zou an eng Avidin-Biotin Komplex (Vectastain ABC Elite Kit, Vecteure Laboe) war fir 30 min applizéiert um 1:25 zu PBS verdënntem. D'Signal war an 3,3-Diaminobenzidine (Fläch, ëmfrot Nr 026K3767) bis de gewënschte Faarf Intensitéit gouf erreecht duerch incubation fonnt. No Finale Mëtten am Waasser, waren drënner an hematoxylin liicht counterstained. KCNQ1 an HKA β Single Etikette an erkennen gesuergt huet wéi virdru beschriwwen [7]. CD34 erkennen war mat 1:50 anti-CD34 antibody (AbCam). Drënner waren mat enger Nikon Sonnendäischtert E600 microscope gekuckten an fotografeschen mat engem RT Faarf Camera an Spot Software (Diagnostic Instrumenter, Inc.). VerfÜgung}

Immunofluorescence VerfÜgung

All Mënsch Otemschwieregkeeten aus ProSci kritt huet, Poway, CA, a war zertifizéiert wéi se aus qualifizéiert an lizenzéierte wirklech Servicer kritt gouf, andeems entspriechend Zoustëmmung zu biomedical Fuerschung a mat Donateur Anonymitéit Schutz fir benotzen conformed; dofir, gouf zousätzlech Weill Medical College Finanzpolitiker Kritik Verwaltungsrot Ethik averstaane net néideg. Immunofluorescence erkennen HKA β, KCNQ1 an KCNE2 zu Mënsch gastric Otemschwieregkeeten (ProSci) war mat engem Discovery XT Prozessor (Ventana MEDICAL SYSTEMS) gesuergt. Déi folgend Mënsch Stoffer sech benotzt: normal Mo. Otemschwieregkeeten vun engem 50-Joer-ale Fra (PSC-10-809-XB1); gastric carcinoma Otemschwieregkeeten, Patient Informatiounen erreechbar (PSC-10-814-CA1); gastric adenocarcinoma Otemschwieregkeeten vun engem 51-Joer-ale Fra (PSC-10-809-XA1). Der Primärschoul antibody Konzentratioune benotzt goufen: 0,5 mg /ml anti- HKA β (Maus monoclonal, Affinitéit Bioreagents), 1 mg /ml anti-KCNQ1 (Kanéngchen oder Geess polyclonal, Chemicon), an zu-Haus anti-KCNE2 serum benotzt gouf um engem 1:500 dilution der Kolonn-Beräicherung IgG. Virecht der Primärschoul antibody incubation, goufen d'Otemschwieregkeeten Rubriken fir 30 min an 10% normal Geess serum blockéiert, 2% BSA vun PBS, gefollegt vun 8 min Avidin /Biotin blockéieren. Der Primärschoul antibody incubation (3 HR) war mat biotinylated anti-Maus IgG (ABC Kit vun Vecteure Laboe) vun 32 min incubation duerno, 60 min incubation mat biotinylated anti-Geess IgG (ABC Kit vun Vecteure Laboe), oder biotinylated anti-Kanéngchen antibody um 1:200 dilution (Vectastain ABC Kit). D'Première erkennen war mat Streptavidin-HRP D (Ventana MEDICAL SYSTEMS) gesuergt, gefollegt vun incubation mat Tyramide-Alexa Fluor 488 (Invitrogen) oder Tyramide Alexa Fluor 568 (Invitrogen). Kierchefënster drënner waren mat engem König Axiovert 200 widefield microscope gekuckten a Fotoen benotzt MetaMorph Software Qualifikatiounen 7.1 (cuisine Comments). VerfÜgung

Western blotting VerfÜgung

Fir westlech blotting, goufen gastric Membran ufale virbereet wéi virdru beschriwwen [7]. Dräi Mamm vum 12.-Mount-al Kcne2 + /+ VerfÜgung a Kcne2 VerfÜgung - /- Mais goufen ofgegruewen Post-Eenzegartegkeet vum Fall bestätegt, Géigewier oppen laanscht de curvatura grouss ventriculi, geschëppt vun ingesta an direkt an flëssegem Stéckstoff virgezunnen-gefruer. Mamm sech dann zu engem gefiermt homogenized mat 50 mm Tris-HCl, 150 mm NaCl, 100 ug /ml PMSF, 1 ug /ml Nonidet P40, 0,5% SDS an 0,5% Natrium orthovanadate, da fir 30 min op Äis incubated an centrifuged um 12000 × g VerfÜgung fir 20 min bei 4 ° C. Protein Konzentratioun vun der supernatant war no der Bradford Method gemooss. Total FAQ (40 μg /Geschäftswelt) war an engem Précoce-Goss Tris-glycine 4-20% gelies (Jule INC, Milford, CT) an getrennt vun electrophoresis iwwerlaascht. Proteinen sech dann op eng PVDF Membran transferéiert (Bio-Rad, Hercules, CA), an ass blockéiert mat 5% Mëllech, 0,05% Tween-20 vun PBS fir 12 Stonnen bei 4 ° C op engem Frontmann. Primärschoul antibody incubations (4 HR, RT vun 1% Mëllech, 0,05% Tween-20, PBS, 'Respektiv A ") goufen: 1:2000 anti-Cyclin-D1 (Abcam); 1:5000 anti-GAPDH (Abcam). Schläimhait huet 4 Mol gewäsch, 20 min all mat gefiermt antibody incubation dann mat de passenden Secondaire antibodies (BioRad) verdënntem 1:10000 zu Respektiv A fir 2 HR um RT dann 4 incubated Katakombe × 20 min all mat Respektiv A an eemol fir 5 min mat PBS.

• PLOS Pathogens: Caveolin-1 geschützt B6129 Mais géint Helicobacter pylori Gastritis
• PLOS NËMMEN: Epstein Barr Virus an Helicobacter pylori Co-Wonn Sidd positiv Associéierten mat streng Gastritis am Cabinet kennen