Effet de Interleukine-1β sur la prolifération des cellules épithéliales gastriques en culture

Effet de Interleukine-1β sur la prolifération des cellules épithéliales gastriques dans la culture
Résumé de l'arrière-plan
Helicobacter pylori
est le principal facteur de risque pour le développement du cancer gastrique non-cardia. Augmentation de la prolifération de la muqueuse gastrique est une caractéristique de l'infection de H. pylori. Muqueux interkeukin-1β la production est augmentée dans l'infection de H. pylori et les génotypes IL-1ß associés à une activité pro-inflammatoire accrue sont des facteurs de risque pour le développement du cancer gastrique. L'effet de l'IL-1β sur gastrique prolifération des cellules épithéliales a été examiné dans cette étude.
Méthodes
cellules AGS ont été cultivées avec de l'IL-1β. synthèse de l'ADN a été assed par [ 3H] thymidine incorporation et le total des nombres de cellules viables par un test MTT.: Résultats
IL-1β dose dépendante a augmenté le nombre de synthèse d'ADN et de cellules. La prolifération accrue a été bloquée par l'interleukine-1 antagoniste du récepteur. Addition d'un anticorps neutralisant le GM-CSF réduit la prolifération de l'IL-1β stimulée par 31 ± 4%. GM-CSF seul stimulé de manière significative la prolifération. L'addition ou la neutralisation de l'IL-8 n'a eu aucun effet sur la prolifération basale ou l'IL-1β stimulée. Conclusions inhibiteur de la tyrosine kinase génistéine bloquait complètement l'IL-1β stimulée par la prolifération et l'inhibition du signal lié à la voie de la kinase extracellulaire de PD 98059 a inhibé la prolifération de l'IL-1β stimulée par 58 ± 5%.
de l'IL-1β en stimulant la prolifération les cellules épithéliales gastriques. stimulation autocrine par GM-CSF contribue à cette réponse proliférative. Signalisation lumineuse par l'intermédiaire de l'activité tyrosine kinase est essentielle à la réponse mitogene à l'IL-1β. La voie de kinase de signal lié extracellulaire est impliqué dans, mais pas indispensable à la signalisation en aval. IL-1β peut contribuer à l'hyperprolifération vu dans H. pylori muqueuse gastrique
infectée, et être impliqué dans le processus de cancérogenèse.
Contexte
Helicobacter pylori
est considéré comme le principal facteur étiologique le développement de l'adénocarcinome gastrique non-cardia. Des études épidémiologiques à grande échelle ont confirmé une forte association entre l'infection à H. pylori et les deux cancer [1-3] et les premiers stades histologiques, atrophie et métaplasie intestinale [4, 5]; les deux qui augmentent le risque de transformation néoplasique plus tard. Les modèles animaux ont également démontré l'importance de H. pylori
dans la carcinogenèse gastrique [6, 7]. Augmentation des taux de prolifération de la muqueuse gastrique sont typiques chez H. pylori
infection [8-11], et hyperprolifération dans le tractus gastro-intestinal semble être un marqueur de transformation maligne plus tard [12]. La cause de l'augmentation du taux de prolifération est pas claire, mais les taux ont augmenté à réduire à la normale avec la clairance de l'infection [8, 13]. Bien que hypeprproliferation est typique in vivo,
études testant les effets de H. pylori
ou ses produits in vitro
ont montré des résultats contradictoires, à la fois amélioré [14, 15] et diminué [16-18] prolifération signalé. Il est possible que d'autres composantes de la réponse inflammatoire typique de H. pylori
muqueuse infectée pourrait être au moins en partie responsable de la conduite de la prolifération cellulaire accrue.
La cytokine pro-inflammatoire interleukine-1β pluripotentes a un rôle central dans la pathogenèse de l'inflammation de la muqueuse induite par H. pylori. IL-1β l'expression génique et la production de protéines sont augmentés dans l'infection de H. pylori et réduire avec succès l'éradication [19, 20]. La présence du polymorphisme génotype IL-1β accrue associée à l'IL-1β, la production a été associée à une augmentation significative du risque de cancer de l'estomac et des lésions pré-cancéreuses [21, 22]. L'interleukine-1β est un puissant inhibiteur de la sécrétion d'acide gastrique et il est supposé que la réponse de l'IL-1β améliorée modifie la topographie de l'infection gastrique et favorise ainsi l'inflammation et l'atrophie subséquente des corps gastrique [23, 24]. La possibilité que se IL-1 entraîne la prolifération accrue des cellules épithéliales gastriques n'a pas été entièrement étudiées. Altération de la prolifération gastrique par l'IL-1β pourrait contribuer au processus de cancérogenèse, en plus des effets sur la sécrétion d'acide. Par conséquent, les effets directs de l'IL-1β sur la prolifération epitheliale gastrique ont été évaluées.
La protéine kinase activée par un mitogene (MAPK) sont des voies de cascades bien caractérisés transduction des signaux à partir de la surface cellulaire vers le noyau. La famille comprend des sous-groupes distincts; kinases liées de signaux extracellulaires (ERK), c-Jun NH kinases 2-terminales (JNK) et p38 MAPK [25]. Les ERK sont activés par divers stimuli extracellulaires et médient les effets pro-prolifératifs d'un certain nombre d'hormones et de facteurs de croissance [26, 27]. L'activation par phosphorylation d'une protéine kinase à double spécificité (MAP kinase kinase (MAPKK)) (également connu sous le MEK), permet à son tour d'activer une famille de protéines kinases de sérine-thréonine, connue sous le ERK. Les ERK phosphoryle à son tour, de nombreuses protéines cellulaires, y compris les facteurs de transcription et ont donc un rôle central dans la propagation des signaux mitogenes. En conséquence, le rôle de la voie de MAP-kinase dans la médiation des réponses à l'IL-1β a été évalué.
Méthodes
culture cellulaire
La lignée cellulaire de carcinome gastrique humain AGS a été acheté de la collection européenne de cultures cellulaires animales (Porton Down, Royaume-Uni). Les cellules ont été cultivées en culture monocouche dans du milieu RPMI 1640 supplémenté avec 100 ug /ml de pénicilline, 100 pg /ml de streptomycine, 100 pg /ml de gentamicine, 2,5 pg ml d'amphotéricine B et /10% de sérum de veau foetal. Les cellules ont été cultivées dans 75 cm 2 flacons de culture tissulaire à 37 ° C dans une atmosphère de 5% de CO 2 et 95% d'air et repiquées tous les 5-7 jours.
Études de prolifération
[ 3H] thymidine. Les cellules ont été cultivées dans un milieu contenant 10% de sérum de veau foetal, plaquées dans des plaques à 24 puits à raison de 10 5 cellules /puits et laissées se fixer pendant une nuit. Après un lavage avec du milieu sans sérum, les cellules ont été incubées dans un milieu sans sérum contenant 0,2 mM de thymidine non marquée pendant 24 heures en présence de concentrations croissantes d'IL-1β, IL-8 ou GM-CSF. synthèse de l'ADN a été estimée par mesure de [ 3 H] thymidine dans l'acide trichloroacétique (TCA) en matériau précipitable [28]. [ 3 H] thymidine (0,1 uCi /ml, 10 Ci /mmol) a été ajouté 2 heures avant la fin d'une période de traitement de 24 heures. Les cellules ont été lavées deux fois avec du milieu sans sérum pour éliminer non constituée [ 3 H] thymidine, et l'ADN a été précipité avec TCA à 5% à 4 ° C pendant 15 minutes. Les précipités ont ensuite été lavées deux fois avec 95% d'éthanol, dissous dans 1 ml de NaOH, et analysées par comptage à scintillation liquide. Les résultats sont exprimés en tant que contrôle non stimulée pour cent [ 3 H] thymidine (moyenne ± écart-type) de 4-6 expériences différentes, chacune effectuée en triple. Pour la détection de l'inhibition de la croissance, les cellules ont été incubées soit avec l'inhibiteur spécifique de la MEK PD 98059 (25 uM) [29], l'IL-1 antagoniste du récepteur (500 ng /ml) [30] ou des anticorps neutralisants anti-GM-CSF (5 pg /ml) ou d'anticorps anti-IL-8 (10 ng /ml). Des inhibiteurs ou des anticorps ont été ajoutés 30 minutes avant cytokines. Le nombre total de cellules viables de la croissance cellulaire
ont été évaluées par un MTT modifié (3- [4,5-diméthylthiazol-2-yl] -2,5 diphényl dosage de bromure tetrazolim) [31]. Les cellules ont été étalées dans des plaques à 24 puits dans un milieu contenant 10% de sérum de veau foetal. Après fixation pendant une nuit, le milieu a été changé en milieu de 1% additionné de sérum fœtal de veau et des concentrations croissantes d'IL-1β ont été ajoutés. Les cellules ont été cultivées pendant 48 heures, puis le milieu a été éliminé et du milieu frais RPMI 1640 contenant 0,5 ng /ml de MTT a été ajouté. Les cellules ont été incubées à 37 ° C pendant 3 heures. Le milieu a ensuite été éliminé et 0,04 M de HCl dans de l'isopropanol a été ajouté pour extraire le produit de formazan réduite. La densité optique résultante à 550 nm a été déterminée.
Produits chimiques et réactifs
IL-1β recombinante humaine et l'IL-8 ont été achetés auprès de Sigma (Poole, Royaume-Uni), GM-CSF recombinant humain et l'IL-1 antagoniste du récepteur, anti-GM-CSF et anti-IL-8 étaient des systèmes D (Abingdon, Royaume-Uni) et R. PD 95059 provenait de Calbiochem (Nottingham, UK). RPMI 1640 était de Gibco BRL (Paisley, UK) et tous les autres réactifs provenaient de Sigma. Les concentrations d'inhibiteurs utilisés ont été prélevés sur les données des fabricants et des données publiées. La capacité de 500 ng /ml d'IL-1RA de supprimer 10 ng /ml d'IL-1β-stimulation de la sécrétion d'IL-8 dans les cellules AGS a été confirmée. L'efficacité de l'anticorps anti-GM-CSF à 5 pg d'anticorps /ml de supprimer le GM-CSF (1 ng /ml) induit la prolifération des cellules AGS a été confirmée. Les résultats de
Statistique cytokine stimulée où par rapport aux cellules témoins non stimulées sur la même plaque 24 puits. Les données ont été comparées par une analyse de variance et test t de Student pour déterminer la signification statistique. Chaque expérience que réalisée en triple sur 4-6 occasions. Les résultats sont exprimés en moyenne ± écart-type. Les différences avec les valeurs P de < 0,05 étaient considérées comme significatives.
Les résultats de l'effet de l'IL-1β sur la [3H] thymidine
Interleukine-1β a provoqué une augmentation dépendante de la dose dans la synthèse de l'ADN tel que mesuré par l'incorporation de thymidine. Comme le montre la figure 1, une stimulation significative n'a été observée avec 1-100 ml IL-1β /ng. La stimulation maximale de 52 ± 6% au-dessus de contrôle a été observé avec 10 ng /ml. La plus forte dose de 100 mg /ml était légèrement moins efficace dans la stimulation de la prolifération. Figure 1: Effet de l'IL-1β sur la [3H] thymidine dans les cellules gastriques AGS épithéliales Les cellules ont été traitées avec des concentrations croissantes de IL-1β pendant 24 heures et la synthèse d'ADN évaluées par la [3H] thymidine. Les résultats sont exprimés en moyennes ± écart-type. * P
< 0,01 par rapport au témoin
Effet de l'IL-1β sur le nombre de cellules
L'augmentation de la synthèse de l'ADN par l'IL-1β a été traduit en une augmentation absolue du nombre de cellules viables. Comme on le voit sur la figure 2, l'IL-1β a augmenté le nombre de cellules d'une manière dépendante de la dose similaire aux effets sur [ 3 H] thymidine. La stimulation maximale a été de nouveau observée à 10 ng /ml d'IL-1β, ce qui produit une augmentation de 22 ± 5% du nombre total de cellules. Figure 2: Effet de l'IL-1β sur le nombre de cellules gastriques des cellules épithéliales cellules ont été traitées avec des concentrations croissantes d'IL-1β pendant 48 heures et le nombre total de cellules viables évaluées par un test MTT. Les résultats sont exprimés en moyennes ± écart-type. * P
< 0,01 par rapport au contrôle des effets de l'inhibition de la cytokine ou l'antagonisme des récepteurs de l'IL-1β-stimulation de la prolifération
prétraitement des cellules avec l'interleukine-1 antagoniste du récepteur abolit les effets stimulateurs de l'IL-1β sur [ 3H] thymidine (figure 3). Des études antérieures ont montré que l'IL-1β peut activer des cellules épithéliales gastriques, y compris les cellules AGS à sécréter d'autres cytokines, en particulier l'interleukine-8, et facteur stimulant les colonies de granulocytes-macrophages (GM-CSF) [31, 32]. Par conséquent, des études complémentaires ont été entreprises pour déterminer si les actions stimulatrices de l'IL-1β sont médiés par l'une de ces deux cytokines. Anticorps neutralisants soit IL-8 ou GM-CSF avait aucun effet sur non stimulé [ 3H] thymidine. Neutralisation de l'IL-8 n'a eu aucun effet sur la croissance de l'IL-1β-stimuated mais la prolifération IL-1β stimulée par l'anticorps anti-GM-CSF réduit de 31 ± 4% (P
< 0,01) (figure 3). Figure 3: Effet de l'inhibition des cytokines sur l'IL-1β-stimulation de [3H] thymidine dans l'estomac cellules épithéliales cellules AGS ont été traitées avec 10 ng /ml d'IL-1β pendant 24 heures, plus soit de l'interleukine-1 antagoniste du récepteur (IL-1RA 500 ng /ml), la neutralisation de l'IL-8-anticorps anti (10 pg /ml) ou de neutralisation d'anticorps anti-GM-CSF (5 pg /ml). la synthèse d'ADN a été évaluée par la [3H] thymidine. Les résultats sont exprimés en moyennes ± écart-type. * P
< Effets de stimulation 0,01 vs. IL-1β en l'absence d'inhibiteur. De GM-CSF sur la prolifération
Compte tenu des résultats obtenus avec l'anticorps anti-GM-SCF, les actions directes de croissance-stimulatrice de GM-CSF ont été examinés. GM-CSF a connu une croissance action stimulatrice puissante sur les cellules AGS: amélioration significative de [ 3H] thymidine a été observée à toutes les concentrations (0,001-100 ng /ml) de GM-CSF. GM-CSF lui-même semble être un stimulateur plus puissant que l'IL-1β; la stimulation maximale de 108 ± 17% au-dessus de contrôle a été observé avec 100 ng /ml de GM-CSF (figure 4). L'action inhibitrice de l'anticorps anti-GM-CSF a été confirmée par la suppression de la croissance de l'action stimulatrice de 1 ng /ml de GM-CSF (données non présentées). Des études antérieures ont montré que l'IL-1β stimulée par GM-CSF libération dans des conditions similaires dans les cellules AGS soit environ 10-20 pg /puits /24 heures [32]. Pour confirmer les résultats obtenus avec l'anticorps anti-IL-8, [ 3 H] thymidine a été mesurée en réponse à l'IL-8. Aucune augmentation de la prolifération a été observée à toutes les concentrations d'IL-8 (0,001 à 100 ng /ml) (données non présentées). Dans des conditions similaires IL-1β stimulée par l'IL-8 libération est d'environ 3000 pg /puits /24 heures [31]. Figure 4: Effet du GM-CSF sur la prolifération des cellules épithéliales gastriques. les cellules AGS ont été traitées avec des concentrations croissantes de GM-CSF pendant 24 heures. La prolifération cellulaire a été évaluée par la [3H] thymidine. Les résultats sont exprimés en moyennes ± écart-type. * P
< 0,05, ** P
< 0,01 par rapport au témoin
Mécanisme d'IL-1β-stimulation de la prolifération cellulaire The inhibiteurs spécifiques de la génistéine, qui inhibe les tyrosine kinases et PD 98059, qui inhibe la MAP kinase kinase (MEK), et ainsi inhibe la voie ERK, étaient utilisé pour évaluer les voies intracellulaires possibles médiation des effets de l'IL-1β. Afin d'examiner les effets de l'IL-1β distincts de ceux du GM-CSF, ces expériences ont été réalisées en présence de l'anticorps neutralisant anti-GM-CSF. Comme le montre la figure 5, ni génistéine, ni PD 98059 modifiées non stimulées [ 3H] thymidine. Genistein complètement aboli l'IL-1β-stimulation de la prolifération. L'inhibition de la MEK avec PD 98059 réduit la prolifération IL-1β stimulée par 58 ± 5% (P
< 0,01) (figure 5), mais n'a pas aboli complètement la croissance action stimulatrice de l'IL-1β. Des augmentations supplémentaires de la concentration de PD 98050 supra-maximale n'a pas inhibé la prolifération de l'IL-1β stimulée (données non présentées). Figure 5: Effet de l'inhibition de l'activité tyrosine kinase de la MEK et de l'IL-1β stimulée par la prolifération des cellules de l'épithélium gastrique. les cellules AGS ont été traitées avec 10 ng /ml d'IL-1β pendant 24 heures en présence de génistéine inhibiteur de la tyrosine kinase (100 uM) ou le PD 98059 inhibiteur de MEK (25 uM). La prolifération a été évaluée par la [3H] thymidine. Des études ont été réalisées en présence d'anticorps anti-GM-CSF (5 pg /ml). Les résultats sont exprimés en moyennes ± écart-type. * P
< 0,01 vs Rapport contrôle
Cette étude a démontré que l'IL-1β prolifération des cellules AGS a augmenté. Cet effet a été inversé par l'antagoniste du récepteur, ce qui suggère qu'il était médié par le récepteur de l'interleukine-1. IL-1β stimulé à la fois [ 3 H] thymidine, comme mesure de la stimulation du taux de synthèse d'ADN et également le nombre total de cellules, telle que mesurée par le test MTT. Cela montre que la stimulation de la synthèse d'ADN par l'IL-1β se traduit par une augmentation réelle du nombre de cellules.
Une partie de l'action stimulatrice de l'IL-1β semble être indirecte. La neutralisation du GM-CSF dans le milieu conduit à une réduction significative de la prolifération de l'IL-1β stimulée. les cellules AGS sont connues pour sécréter le GM-CSF en réponse à l'IL-1β [32]. GM-CSF lui-même est un puissant stimulant de la prolifération cellulaire. Ainsi, il semble probable qu'une partie de la croissance des actions stimulatrices de l'IL-1β sont dus à une action intermédiaire autocrine de GM-CSF. Il existe des données antérieures limitées suggèrent que le GM-CSF stimule la prolifération des cellules non hématopoïétiques; Dippold et al
exogène a montré que le GM-CSF stimule la croissance des cultures deux fois sur deux dérivées de carcinomes gastriques et des lignées cellulaires de carcinome du pancréas deux des neuf [33, 34]. Cependant, contrairement à l'étude actuelle, la production autocrine de GM-CSF a pas de cellules épithéliales gastriques détectable.
Produisent également de l'IL-8 en réponse à l'IL-1β [31]. Cependant, dans ce système modèle, IL-8 seul avait aucune action pro-proliférative et la neutralisation de l'IL-8 n'a pas affecté l'action stimulatrice de l'IL-1β. Il est donc peu probable que l'IL-8 a un rôle autocrine dans l'action de l'IL-1β croissance-stimulatrices. Il est possible que d'autres cytokines produites par les cellules épithéliales gastriques en réponse à l'IL-1β, H. pylori ou
autres insultes inflammatoires pourraient également jouer un rôle en tant que médiateurs autocrines ou paracrines de croissance. Il a été récemment rapporté qu'un autre chimiokine C-X-C, GRO /CINC-1, qui est également régulée à la hausse chez H. pylori infection
prolifération stimulée dans les cellules epitheliales gastriques chez le rat [35]. Le rôle de ces autres médiateurs autocrines potentiels mérite une étude plus approfondie.
Les résultats des études d'inhibiteur suggèrent fortement que l'activité tyrosine kinase est essentielle pour la croissance promotion de l'action de l'IL-1β dans les cellules AGS. L'inhibiteur de tyrosine kinase de la génistéine a supprimé l'action stimulatrice de l'IL-1β. IL-1β est connu pour activer une pléthore de voies intracellulaires de signalisation [31, 36-39], mais dans la situation actuelle, il semble être une exigence absolue pour la signalisation par l'intermédiaire d'une tyrosine kinase, à la suite de l'activation du récepteur.
Le mitogène -activated cascade de protéine est une voie bien caractérisée médiation des actions stimulatrices de la croissance cellulaire de nombreux facteurs de croissance et des hormones. Inhibition de la voie ERK avec le PD inhibiteur de MEK 98,059, ce qui empêche l'activation de ERK par phosphorylation, a une action inhibitrice significative contre l'action stimulatrice de l'IL-1β. Ceci suggère que l'activation de la voie ERK est importante dans la médiation des actions stimulatrices de croissance de l'IL-1β. L'activation de cascades de MAP-kinase, y compris p42 et p44 ERK voies et p46JNK et p55JNK c-Jun NH kinase 2-terminales par l'IL-1β a été démontrée chez le rat, les cellules gastriques épithéliaux [41, 42], mais l'importance fonctionnelle de ces voies n'a pas été examiné. L'activation de JNK et ERK a été inhibée par la génistéine [41], conformément à la conclusion de l'étude actuelle qui se trouvent en aval de MAPK activité de la tyrosine dans la signalisation de l'IL-1β-induite. Cependant, dans le courant 98.059 étude PD n'a pas aboli complètement l'action stimulatrice de l'IL-1β, ce qui suggère que d'autres voies de substitution, activés ultérieurement sur l'activité de la tyrosine kinase, jouent également un rôle dans la signalisation des réponses proliferatives à l'IL-1β. D'autres études sont en cours à l'heure actuelle pour examiner ces.
Il y a des données contradictoires disponibles concernant les effets directs de l'IL-1β sur la prolifération épithéliale gastrique. Bien que l'étude en cours et à l'étude par Fan et al
prolifération stimulée en utilisant des leucocytes milieu conditionné a montré une prolifération accrue de la lignée de cellules AGS humaine [14], d'autres ont montré une inhibition de sérum, le TGF-α et de l'EGF stimulée RGM1 rat cellules épithéliales gastriques par l'IL-1β [41, 42]. Tominaga et al
a montré que le prétraitement des cellules RGM1 avec IL-1β pendant 6 heures inhibé la prolifération à 24 heures, mais l'effet inhibiteur a été perdu à 48 heures, [41]. Les raisons de ces écarts ne sont pas claires. Ils peuvent refléter des différences intrinsèques entre les lignées cellulaires, les différences dans l'activation et l'implication des voies favorisant la croissance paracrines, la variabilité des espèces, un effet spécifique pour certains facteurs de croissance, ou les différences sous-jacentes dans la biologie des lignées cellulaires dérivées d'un cancer (AGS) ou normal tissus (RGM1). Les études qui démontrent l'inhibition de la prolifération par l'IL-1β ont été réalisées en présence de stimuli favorisant la croissance puissants (sériques élevés ou des concentrations de facteurs de croissance spécifiques dans le milieu de culture), whist les études actuelles ont été réalisées dans un milieu de sérum exempt de sérum ou de 1% . Il est possible que les multiples voies de signalisation activées par IL-1β ont des effets différents sur la prolifération, l'effet dominant selon les interrelations complexes de stimuli et les voies de signalisation dans des circonstances différentes. Les cytokines pro-inflammatoires comme l'IL-1β et le TNF-α activent différentes voies de signalisation avec des résultats divergents et différents temps-cours dans le système endocrinien et pariétales cellules gastriques [37, 38, 43-46]. D'autres études sont en cours pour étudier les rôles spécifiques des différentes voies de signalisation dans les cellules épithéliales gastriques dans des conditions différentes.
Il existe des données épidémiologiques maintenant solides reliant H. pylori
avec carcinome gastrique. Le processus cancérigène semble impliquer un certain nombre d'étapes: H. pylori de l'inflammation induite par la progression à l'atrophie, la métaplasie intestinale, la dysplasie et finalement un carcinome [47]. De même l'infection de H. pylori chez des gerbilles de Mongolie induit facilement l'atrophie gastrique et le cancer [6]. Alors que la carcinogenèse gastrique est sans aucun doute un processus multifactoriel, impliquant des facteurs bactériens et hôtes pathogènes, y compris le statut de HLA, le régime alimentaire et le statut antioxydant [47, 48], il est clair que l'augmentation de la prolifération épithéliale gastrique, en particulier lorsque relativement augmenté par rapport à l'apoptose, est importante partie de la voie [49, 50]. Augmentation de la prolifération épithéliale gastrique est typique de l'infection de H. pylori; il est manifeste à tous les stades de l'infection et de l'éradication de l'infection réduit la prolifération. prolifération accrue est un marqueur important du risque accru d'adénocarcinome gastro-intestinal [12]. Les mécanismes de la prolifération accrue ne sont pas complètement compris. In vitro
tests d'études cultures de H. pylori ou
constituants ont donné des résultats contradictoires dans les différents systèmes, avec différents types de cellules et souches bactériennes. La stimulation directe de la prolifération épithéliale gastrique par H. pylori
a été rapporté par certains auteurs [14, 15], tandis que soit des effets neutres [15] ou une augmentation de l'apoptose et une diminution de la prolifération ont été rapportés par d'autres [16-18]. Fan et al
a rapporté que des milieux conditionnés à partir soit H. pylori ou
mitogène des lymphocytes activés directement stimulé AGS prolifération cellulaire [14], ce qui suggère que la réponse inflammatoire pourrait être en partie responsable de l'amélioration de la prolifération épithéliale. la production d'IL-1β est augmentée dans H. pylori
infection et cette cytokine est considérée comme étant au cœur de la régulation de la réponse pro-inflammatoire dans H. pylori
infection.
IL-1β est un inhibiteur profond la sécrétion d'acide gastrique in vivo
[51] et dans les cellules pariétales isolées [37, 38]. Les polymorphismes génétiques de la grappe de gènes IL-1β entraînant une augmentation de l'activité transcriptionnelle sont associés à un risque accru de changements histologiques pré-cancéreuses et cancéreuses chez H. pylori
infection [21, 22]. L'hypothèse générale expliquant cette observation a été que le renforcement de l'IL-1β la production à la suite de H. pylori
infection est responsable de la plus grande suppression de la sécrétion acide, ce qui permet à son tour une plus grande colonisation du corps muqueuse acide sécrétant [24]. Cette plus grande colonisation provoque une inflammation supplémentaire, ce qui conduit finalement à la perte de l'épithélium de l'acide-sécrétoire spécialisée (atrophie) et plus potentialise le cercle vicieux de l'inflammation accrue et diminué la sécrétion d'acide [52]. atrophie gastrique prédispose de manière significative au cancer [3]. On croit que l'atrophie en combinaison avec des médiateurs libérés dans l'inflammation tels que les radicaux libres oxygène et de l'oxyde nitrique, l'alimentation, l'état anti-oxydant et surcroissance éventuellement bactérienne et génération de nitrosamines dans l'estomac achlorhydriques [53] faire avancer les changements histologiques, la cause mutageneisis et piloter la progression du cancer. le plus une alternative, mais pas mutuellement exclusives, l'hypothèse est que la réponse de cytokines accrue améliore directement la prolifération des cellules épithéliales et se prédispose au cancer, en plus des effets sur la sécrétion d'acide. Le chiffre d'affaires cellulaire accrue de cette réponse hyperprolifératif serait lui-même rendre la muqueuse plus vulnérables aux effets mutagènes des radicaux libres et d'autres produits toxiques générés dans l'inflammation de l'estomac achlorhydriques.
Ailleurs dans le tractus gastro-intestinal, l'IL-1β a été montré pour stimuler [ 3H] thymidine et augmenter le nombre de cellules de myofibroblastes subépithéliaux humaines cultivées colique, qui est pensé pour avoir une importance dans le remodelage de la muqueuse dans l'inflammation [54]. Les effets pro-prolifératifs de l'IL-1β dans le tractus gastro-intestinal méritent une étude plus approfondie, étant donné l'importance de cette cytokine dans la régulation de la réponse inflammatoire de la muqueuse.
Conclusions
Les résultats de l'étude suggèrent que l'IL-1β et le GM-CSF peut stimuler directement la prolifération gastrique épithéliale. Cela pourrait expliquer les réponses prolifératives aux médias de lymphocytes conditionnés démontrés par Fan et al
[14]. Amélioration de la prolifération épithéliale due à l'IL-1β peut contribuer au risque accru de cancer de l'estomac et des lésions précancéreuses dans H. pylori
individus infectés par des allèles IL-1β spécifiques associés à des niveaux de production plus élevés. IL-1β stimule la prolifération par l'intermédiaire de l'activation du récepteur à médiation par la voie d'une tyrosine kinase. la signalisation en aval implique ERK-dépendante et voies -indépendante.
D'autres études seront nécessaires pour clarifier les mécanismes impliqués dans l'IL-1β-stimulation de la prolifération épithéliale gastrique, ainsi que des données de corrélation génotype IL-1β, la production de protéines IL-1β et la prolifération épithéliale in vivo
Ce sera un complément à l'étude en cours et améliorer encore notre compréhension de H. pylori
carcinogenèse gastrique induite par
Liste des abréviations
EGF:..
épidermique facteur de croissance
ERK:
extracellulaire signal lié kinase
GM-CSF:
facteur stimulant les colonies de granulocytes-macrophages

IL:
interleukine
JNK:
c-Jun NH 2-terminal

MAP:
mitogène protéine activée
MTT - 3- [4:
5-diméthylthiazol-2-yl] -2,5 diphényl tetrazolim

TCA: acide trichloracétique
TGF-α.
facteur de croissance transformant alpha

Déclarations
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