Effekter vun myenteric denervation op extracellular Matrixentgasung Faseren an Mast Zell Verdeelung vun normal Mo an gastric lesions

Effekter vun myenteric denervation op extracellular Matrixentgasung Faseren an Mast Zell Verdeelung vun normal Mo an gastric lesions VerfÜgung méiglech VerfÜgung Background VerfÜgung An dëser Etude den Effet vun myenteric denervation entschlof vun benzalconium Chlor (BAC) op Verdeelung vun fibrillar Komponente vun extracellular Matrixentgasung (ECM) an demagogesch Zellen war zu gastric carcinogenesis entschlof vun N-duerch-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) propagéieren. Also huet zu véier experimentell Gruppen ënnerdeelt: Net-denervated (ech) an denervated Mo. (II) ouni MNNG behandelen; Net-denervated (III) a denervated Mamm (IV) mat MNNG behandelt. Fir histopathological, histochemical an stereological Analyse, Rubriken vun gastric Fragmenter sech Kierchefënster mat Hematoxylin-Eosin, Picrosirius-Hematoxylin, Gomori reticulin, Resorcin-Fuchsin, Toluidine Blue an Alcian-Blue /Safranin (AB-SAF) d'Weigert. VerfÜgung Resultater
BAC denervation bewierkt eng Erhéijung vun der Frequenz vun reticular an elastesche Faseren an der denervated (Grupp II) am Verglach zu der net-denervated Mamm (Grupp sin). D'Behandlung vun den Déiere mat MNNG entschlof der Entwécklung vun adenocarcinomas an Net-denervated an denervated Mamm (Gruppen III a IV, bzw.) mat engem bemierkenswäerte Hausse am Verglach Volume vun der stroma, d'Frequenz vun reticular Faseren an der demagogesch infiltrate dat war méi intensiv am Grupp IV. Eng Erhéijung vun der Frequenz vun elastesche Faseren war zu adenocarcinomas vun denervated (Grupp IV) observéiert Verglach zu den Net-denervated Mamm (Grupp III) dass ofgeschnidden vun dësen Faseren gewisen. D'Entwécklung vun lesions (Gruppen III a IV) gouf och mat enger Erhéijung vun de Mast Zell Bevëlkerung, virun allem AB a AB-SAF positiv, deen haaptsächlech an der denervated Grupp IV assoziéiert. VerfÜgung Konklusiounen VerfÜgung D'Resultater weisen eng staark Veräin am morphological Verfall vun der ECM fibrillar Voleten, déi fräi Dicht vun Mast Zellen an der Entwécklung vun den MNNG vun der Net-denervated Grenzwäerter Mo oder denervated vun BAC entschlof erhéijen. Dëst deit drophin, datt d'Etude vun extracellular an intracellular Komponente vun entholl microenvironment dréit zu Versteesdemech vun entholl Biologie vun Aktioun vun myenteric denervation. VerfÜgung Background VerfÜgung Zesummespill tëschent entholl Zellen an der Géigend stroma eent vun de wichtegsten Aspekter vun der Mechanismus ass vun entholl Zell Prolifératioun an Invasioun [1]. Entholl Zellen do d'extracellular Matrixentgasung remodel (ECM), eng komplex Mëschung aus Faseren (collagen, reticular an elastesche) a Buedem Substanz déi Zell Ënnerstëtzung gëtt [2], Kommunikatioun a séier vun der Kontroll vun der microenvironment ze vereinfachen [3]. D'collagen fibrillar System Akten als ënnerstëtz Kader vu Stoffer, wou reticular Faseren collagen Faseren mat der basal laminae vun epithelial, Fleesch a adipose Zellen Pass; der microfibril-elastin System spillt eng Roll am uniform Stress verdeelt d'Widderstandsfäegkeet zu lokal Otemschwieregkeeten Ufuerderunge ze erhalen [4]. VerfÜgung sinn Strukturfongen a funktionell Integritéit vun der collagen fibrillar an microfibril-elastin Systemer wichteg fir de Mo d'Iessen ze kreien, Enzymen Saieren zu secrete der Matière nährstoffaarme zu Ennerbriechung an der Mëschung fir déi kleng Daarm ze Transfert. Déi dräi Aufgaben ofhängeg vun der extrinsic (Nereïden an parasympathetic Divisioune vun der autonom nervös System) an d'Ausriichtung innervation (enteric nervös System - ENS). D'Haapt Komponente vun der ENS sinn zwee Réseauen oder plexuses vun Zelle an nervös Faseren, déi myenteric an submucosal plexus [5]. D'ENS Bedeitung fir d'Regelung vun der gastrointestinal Funktiounen ass no der Javuier Applikatioun vun der cationic dass nach, benzalkonium Chlor (BAC) observéiert, op der serous futti datt zu partiell a selektiv Zerstéierung vun myenteric plexus Zelle Resultater [6]. D'Korrelatioun tëscht carcinogenesis an der ENS gouf an experimentell Modeller mat der myenteric denervation vun BAC an der Aféierungs- vun erhéijen vun N-Duerch-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) [7] an 1,2-dimethylhydrazine bewisen ( DMH) [8] mat enger Reduktioun vun der Heefegkeet a Gréisst vun gastrointestinal erhéijen. VerfÜgung immun Zelle mächtegst Quelle vun paracrine Signaler un d'ENS. Besonnesch sinn enteric Mast Zellen strategesch an hunn mächteg pharmacological mediators datt am Gesiicht vun immunological stimuli Akt datt d'Integritéit vun der gastrointestinal TRACT Afloss kann [9]. D'antibody bindend Zellen ze Mast mécht hinne konnt spezifesch antigens ze erkennen an hir Präsenz zu ENS Signal. ENS, am Tour, B. d'chemesch Signaler vun Mast Zellen als eng Bedrohung an gel et eliminéiert, also eng Schutz- Äntwert suergt [9]. D'Präsenz vun Mast Zellen huet zu puer neoplasias, mat Pro oder anti-entholl Rollen gespillt duerch hir bioactive mediators duerch den Afloss vun der entholl microenvironment [10-12] verëffentlecht beschriwwe ginn. Déi Aktioun vum pro-entholl mediators wéi histamine, tryptase an chymase kann Wanderung an Zell Prolifératioun Pinguin den Ausdrock vun Haftung Molekülle op endothelial Zellen Promotioun an domat de Prozess vun entholl angiogenesis, Metastasen an Prolifératioun activating [13-15]. Wollt den Trainer awer no e puer cytokines wéi interleukin (IL) -2 an -21, Faktor entholl necrosis (TNF) an heparin vun Mast Zellen Hit, kann als anticancer Agenten Akt vun hire Wuesstem inhibiting [16, 17]. VerfÜgung puer Studien hunn, datt et während carcinogenesis gewisen eng Erhéijung vun der Zuel vun de Mast Zellen ass, an neurofibromas, alle Fäll, hemangiomas observéiert, erhéijen vun der adrenal drüs a Haut [18], squamous Zell carcinomas [19], laryngeal squamous Zell [20] an gastric carcinomas [21]. An gastric adenocarcinomas, war dem klengen Verëffentlechung vun den Inhalter an cytoplasmic granules vun Mast Zellen gespäichert mat Ännerungen am microvascular basal laminae assoziéiert, dorënner onregelméissegen deck, verschidde Schichten an enger schwaach Associatioun mat endothelial Zellen an pericytes datt de Remodeling vun Blutt Offshore bäidroen [22]. No chirurgesch Entfernung vun gastric Kriibs, Survival Studie weisen dass mat geklommener Zuel vu Mast Zellen Patienten engem verschlechtert hätt awer am Verglach zu Patiente mat niddereg Zuel vun hinnen. VerfÜgung Den Zweck vun dëser Etude huet d'Auswierkunge vun der chemescher ablation vun myenteric ze bestëmmen Zelle op der Verdeelung vun de extracellular Matrixentgasung Faseren an Net-denervated an denervated Mamm Mast Zellen am gastric mucosa vun, an zu engem Modell vu duerch MNNG Administratioun an deër. VerfÜgung Material a Methoden VerfÜgung hun Design entschlof gastric carcinogenesis
Véier goufen experimentell Gruppen bewäert. Ech Gruppen (n = 5) an II (n = 5) Net-denervated an denervated respektiv, ouni d'Präsenz vun gastric neoplasms; III Gruppen (n = 10) an IV (n = 10) Net-denervated an denervated, respektiv, mat der Präsenz vun gastric neoplasms. Fragmenter vun der pyloric Regioun (antrum) vun Mo. an dëser Etude benotzt goufen aus Ënnersich kritt vun POLLI-LOPES et al duerchgefouert. [7]. D'experimentell Prozedure goufen am Aklang mat de Regelen vum Comité op Care a Gebrauch vun schafft Déieren vun der Fuerschungen vun der N.I.H. gesuergt (USA) an Ethik Komitee fir Déieren gemaach (CEEA) vun FAMERP (Protokoll n ° 6193/2008), São José do Rio Preto, SP. VerfÜgung Déieren VerfÜgung Männlech Wistar VerfÜgung deër 100 eng 150 g Gewiicht, kritt vun dem Déier Gebei vun der Schoul vun Medezin vun Ribeirão Preto, Brasilien, waren (4 Déiere pro Cage) Haffbibliothéik, an Temperaturen tëscht 23 an 25 ° C, an dobäi Iessen a Waasser ad libitum VerfÜgung. Gastric denervation VerfÜgung VerfÜgung D'Déiere waren Nodeel im mat ketamine hydrochloride an thiazine Chlor (0,15 ml /0,05 l /100 g vun Gewiicht) [23]. De Mo vun all Déier engem midline ieweschte postwendend misse laparotomy exteriorized Bunn an der peritoneal éischter en duerch e klenge fenestration zu engem Plastiksplack fir Sujet Applikatioun vun 0.6% BAC isoléiert (v /v) (Aldrich chemesche Co. zu Salins verdënntem (0,9% NaCl) [7, 24]. d'isoléiert Mamm mat gauze agewéckelt waren an BAC oder Salins eenzock an huet fir 30 min moist [6, 7, 24]. d'serosal Uewerfläch vun der Mamm grëndlech mat Salins gewäsch war, goufen d'Organer zréck fir hir Präparaten Plaz an der postwendend misse Mauer sutured war. d'Déiere waren am Plastik Käfeg (4 Déieren /Cage) ënnert kontrolléiert Temperatur, an dobäi Iessen a Waasser ad libitum VerfÜgung. VerfÜgung Schulung vun neoplasias zu gastric antrum mucosa haten
Aachtelsfinalë Wochen nom Agrëff, d'Déieren vun Gruppen III (Net-denervated) a IV (denervated) ingested enger Léisung vun N-Duerch-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) (Aldrich chemesche Co., Inc., Milwaukee, allem) fir 28 Wochen an destilléiert an deionized Waasser op enger Konzentratioun vun 100 mg /L opgeléist. D'Déiere goufen 2 Méint no de leschten ofgeroden MNNG geaffert an d'Mamm huet fir morphological Analyse gesammelt. VerfÜgung Morphological a grouss Analyse VerfÜgung Extracellular Matrixentgasung Faseren VerfÜgung Fragmenter vun der pyloric Regioun vun de Mo. (antrum) fix sech zu 4% formalin fir 12 Stonnen gefiermt, am fléissendem Waasser, léif an eng Ethanol Serie gewäsch an am paraffin Ënnerbewosstsinn. Fir d'extracellular Matrixentgasung studéieren, Rubriken 4 μm-décke sech mat Hematoxylin-Eosin Kierchefënster [25], Picrosirius-Hematoxylin [26] an Gomori reticulin [27] fir histopathological Analyse, a fir collagen an reticular Faseren Evaluatioun bzw.. D'Mineral vun elastesche System benotzt studéiert Weigert d'Resorcin-Fuchsin dat selektiv souwuel elastesche an elaunin Faseren eweg (de oxytalan Faseren unstained bleiwen, well si an dëser Etude oxidized net virdrun sinn) [28]. D'uplanzen huet mat enger Olympus BX60 Liicht microscope (Olympus, Hamburg, Däitschland) an der microscopic Felder analyséiert goufen digitalized d'Image-Pro Plus Versioun 4.5 fir Windows Software (Media Cybernetics, Silver Springs, MD) benotzt. Fënnef ënnerschiddleche Beräicher vun der gastric mucosa huet mat enger × 20 objektiv analyséiert, an d'Eechung fäerdeg war mat enger Olympus microscopic Rutsch graded. Déi grouss Analyse gouf no der Prozedur vum Weibel sech [29], e Gitter Test System mat 168 Punkten an 84 Test Linnen, d'Bekannten Volumen (Prozentsaz) vun der gastric mucosa compartments (epithelium, stroma an anerer compartments ze vergläichen, ausser de epithelium an stroma) fir Hematoxylin-Eosin staining an der famill Frequenz vun reticular an elastesche Léngen Verdeelung (Prozentsaz) fir Gomori reticulin an resorcin- fuchsin staining d'Weigert, bzw.. Wäerter sinn als mengen ± Sem vun relativer Volumen (Prozentsaz) vun der gastric mucosal compartments a mengen ± Sem vun relativ dacks vun reticular an elastesche Léngen Verdeelung (Prozentsaz) gemellt. VerfÜgung Mast Zellen VerfÜgung Analys vum Mast Zellen am gastric antrum war an Rubriken Kierchefënster mat Toluidine Blue 0,5% fir quantification vun intakt an degranulated Zellen an, mat Alcian-Blue-Safranin (AB-SAF) fir quantification vun mucosal an connective Otemschwieregkeeten Mast Zellen [30, 31] gesuergt. Fir dësen Zweck, goufen siechzeg zoufälleg Beräicher vun der gastric mucosa analyséiert, pro Déier, mat enger Olympus Liicht microscope (Olympus, Hamburg, Däitschland) mat engem × 12,5 /16 stinn gebaut an enger × 40 Muecht Zil (König, Däitschland) . Wäerter sinn als mengen ± Sem vun der Zuel vun Zellen pro mm gemellt 2. VerfÜgung statistique Analys VerfÜgung Data analyséiert goufen benotzt Statistica 6.0 Software (StarSoft Galaxy, Tulsa, OK). D'Donnéeë sinn als mengen ± Sem virgestallt a sech un de Student d't VerfÜgung Test an eent-Manéier Analyse vun variances (ANOVA) ofginn, an dann op d'Tukey-Kramer Multiple Vergläicher Test oder Bonferroni. Ënnerscheeder mat Wäerter vu P VerfÜgung &Si besteet; 0,05 waren statistesch relevant considéréiert. VerfÜgung Resultater VerfÜgung Histopathological an histochemical Analyse vun Grenzwäerter Mamm VerfÜgung Nord-, pyloric Fragmenter vun Net-denervated an denervated Mamm vun benzalkonium Chlor (BAC) (Gruppen ech an II, bzw.) studéiert . Analyse vu Brochdeeler vun Grupp II zougedréckt datt myenteric denervation datt d'pyloric Glands ëmginn rauszesichen d'Quantitéit an Verdeelung vun den meshwork collagen Faseren Verännerung am Verglach zu Grupp sin (Figebam. 1A an 1B). Dëst Resultat war vun Picrosirius-Hematoxylin stain (Figebam. 1E an 1F) a grouss Analyse vun der famill Volume vun der epithelium an stroma vun der gastric mucosa aus zwou Gruppen (Figebam. 1I an 1J) confirméiert. Figur 1 Histological Analyse vun Grenzwäerter Mamm. A, B, E an F) VerfÜgung Pyloric gastric Glands (g) ëmgi vun stroma mat collagen Faseren (s) an der mucosa futti vun de Gruppen observéiert ech an II. Epithelium (ep). Gastric hëlt (f). Muscularis mucosa (m). C, D, G an H) VerfÜgung Pyloric gastric Glands (g) vun tumoral Zellen opgebaut besat den gréissten Deel vun der gastric mucosa vun de Gruppen III a IV. Eng Heefung vun PMN (Feiler) war am Glands observéiert. Hematoxylin-Eosin (A-D); Picrosirius-Hematoxylin (E-H). Erausgoen: 20 μm. Ech-L VerfÜgung) Ray compartments (epithelium, stroma, anerer) Bänn vun der gastric pyloric mucosa. Wäerter sinn als mengen ± Sem vun Prozentsaz vun relativer Volumen ausgedréckt. Gruppen ouni lesions (ech an II) virgestallt eng héich relativ Volume vun epithelium (p &Si besteet; 0,05) am Verglach zu Gruppe mat lesions (III a IV). D'Präsenz vun adenocarcinoma am Gruppen III a IV zu engem groussen Erhéijung schéinen (p &Si besteet; 0,05). Vun stroma Verglach zu Gruppen ech an II VerfÜgung Non-denervated an denervated Mamm mat MNNG behandelt (Gruppen III a IV, bzw.) Ännerungen an Otemschwieregkeeten Architektur an Unuerdnung vun der Mineral vun der extracellular Matrixentgasung virgestallt an eng Erhéijung vun der Duerchmiesser vun pyloric Glands souwéi an relativ Volume vun der stroma (Figebam. 1c, d, G an 1H). Behandlung mat MNNG entschlof der Entwécklung vun benign an malign erhéijen, besonnesch adenomatous polyps an adenocarcinomas (Figebam. 1c an 1G) an Net-denervated Mamm (Grupp III). Déiere mat denervated Mamm a behandelt mat MNNG (Grupp IV) entwéckelt precancerous lesions an malign erhéijen vun dysplasia charakteriséiert, atrophic gastritis an adenocarcinoma (Figebam. 1D an 1H). An zwou Gruppen, war d'stroma vun der adenocarcinomas vun der Präsenz vun demagogesch Zellen beräichert, den Mast Zellen, neutrophils, Plasma Zellen an lymphocytes, weist immunological Äntwert ze neoplasias (Figebam. 2). Allerdéngs goufen d'neoplastic lesions vum Grupp IV vun kleng a manner aggressiv Profiler Verglach wéini Grupp III, an der demagogesch infiltrate an der entholl stroma en der huet méi intensiv, besonnesch an Déieren, déi adenocarcinomas (Figebam. 2D) entwéckelt. Figur 2 Histological Analys vum MNNG Behandlung entschlof adenocarcinoma. A a B) VerfÜgung Morphological Vue vun adenocarcinoma (AD) an Net-denervated (Grupp III) a denervated Mo. (Grupp IV). Hautfaarf Layer (M). Dégoût demagogesch infiltrate (A). C an D) VerfÜgung Detail vun demagogesch infiltrate vun entholl stroma vun Mast Zellen opgebaut (schwaarz Feiler), neutrophils (arrowheads), lymphocytes (gréng Feiler) a Plasma Zellen (rout Feiler). Toluidine Blue. Erausgoen:. 100 μm (. Lalumi A a B), 10 μm (. Lalumi C an D) VerfÜgung Histochemical Analyse vun der pyloric Rubriken VerfÜgung war mat Gomori reticulin an Weigert d'Resorcin-Fuchsin staining standing d'Verdeelung ze studéieren ( Frequenz) vun der reticular an elastesche Faseren an der stroma, bzw.. Rubriken ze zwou Methoden deposéiert réischt ähnlechen Verdeelung vun de meshwork Faseren datt d'pyloric Glands vun der Mamm vu Gruppen ech an II (Figebam. 3A, B, E an 3F) ëmginn. Non-denervated oder denervated Mamm mat MNNG behandelt (Gruppen III a IV, bzw.), presentéiert vermeintlech fräi Montant vun reticular Faseren (Figebam. 3C an 3D) an Déck an kuerz elastesche Faseren héich desorganiséiert (Figebam. 3G an 3H) an der adenocarcinomas am Verglach zu hire jeweilege Kontroll Gruppen (Gruppen ech an II, bzw.). Figur 3 Histochemical Analyse vun reticular (A-D) a elastesche Faseren (E-H) an d'Grenzwäerter Mamm. A a B) VerfÜgung Groups ech an II virgestallt reticular Faseren rectilinear an ageriicht (Feiler) ronderëm den epithelium (ep) an der stroma (s). C an D) VerfÜgung Reticular Faseren (Pfeil) opgeriicht a scheinbar densest op der Basis (arrowheads) vun Glands (g). Collagen Faseren Heefung tëscht der Glands (*) waren observéiert. E an F) VerfÜgung D'Glands vun enger ongewéinlecher web vun elastesche Faseren (Pfeil) a méi schwéier faarflech E. G an H accordéiert ginn) VerfÜgung Eng Erhéijung vun der deck dës Faseren, Stéierungen a véiermol vun fibrillar Verännerlechen gruppéiere Radius vun elastin (Feiler) kann ëm d'Glands (g) am Verglach zu hire jeweilege Kontroll Gruppen (ech an II) observéiert ginn. Gomori d'Sëlwer (A-D); Weigert d'Resorcin-Fuchsin (E-H). Erausgoen:. 10 μm VerfÜgung Chemeschen Analyse vun der reticular Faseren VerfÜgung bestätegt d'Erhéijung vun dëser extracellular Komponent an der an de Gruppen observéiert adenocarcinomas III a IV an och onerwaart groussen Zouhuele vun der mucosa vun denervated Mo. zougedréckt (Grupp II ) am Verglach zu Grupp sin (Table 1). Trotz der visueller Erhéijung vun elastesche Faseren an der stroma vun Net-denervated an denervated Déieren mat MNNG behandelt (Gruppen III a IV, bzw.), keng statistesch Ënnerscheed war an hir Verdeelung am Verglach zu Kontroll Gruppen (ech an II) (Table 1) observéiert . Op der aner Hand, d'myenteric denervation bedeitendst Erhéijung vun der elastesche Faseren vun gastric stroma aus Gruppen II an IV Verglach zu Net-denervated Mamm vu Gruppen ech an III (Table 1) entschlof. Nee groussen Ënnerscheed war an der collagen an elastesche Léngen Verdeelung tëschent Net-malign an malign lesions vun stromas aus Gruppen III an IV.Table 1 Stereological Evaluatioun vun den Auswierkunge vun myenteric denervation an der gastric antrum bemierken. VerfÜgung zu rel Frequenz Verdeelung vun der Mineral (%) 1
Groups
Collagen System
elastesche System
ech VerfÜgung 16,87 ± 0,5 VerfÜgung 13,27 ± 0,5 VerfÜgung II VerfÜgung 24,06 ± 1,5 * VerfÜgung 19,4 ± 0.6 * VerfÜgung III - Wees VerfÜgung 21,8 ± 0,9 VerfÜgung 11,2 ± 0.6
- MT VerfÜgung 25,71 ± 0,5 * VerfÜgung 11,1 ± 0,4 VerfÜgung IV - Wees VerfÜgung 21,2 ± 1,6 VerfÜgung 20,2 ± 1,7 & VerfÜgung IV - MT VerfÜgung 26,87 ± 1,5 * VerfÜgung 19 ± 0,7 & VerfÜgung Histological Virbereedung Leeschtung war den VerfÜgung zu spontan a Methode beschriwwen. Wäerter sinn als mengen ± Sem vun Prozentsaz vun relativ dacks vun Faseren ausgedréckt. Non-malign entholl (Wees); malign entholl (MT). 1 statistique Analyse baséiert op ANOVA gefollegt vun der Verbesserung vun Tukey-Kramer. * P &Si besteet; 0,05 vs. Grupp sin; &Amp; P &Si besteet; 0,05 vs. Grupp III. VerfÜgung Quantification vun Mast Zellen an d'Fragmenter vun der pyloric Regioun vun de Mo. VerfÜgung Mast Zellen sech am mucosal, submucosal an Hautfaarf Schichten an all experimentell Gruppen analyséiert a laachen. D'Analys vun der Gesamtzuel vun Zellen pro gastric ofgesprengt zougedréckt kee groussen Ënnerscheed tëschent der Net-denervated (ech) an denervated (II) Gruppen (Figebam. 4A). Allerdéngs, an Net-denervated oder denervated Gruppen behandelt mat MNNG (III a IV, bzw.), d'Entwécklung vun benign oder malignant lesions war mat enger grousser Erhéijung vun der Zuel vun de Mast Zellen am gastric antrum verbonne Verglach mat den Net-denervated Grupp (ech). An der mucosal an submucosal Schichten, déi bedeitendst Erhéijung vun Mast Zellen vun der Net-denervated oder denervated Gruppe mat MNNG behandelt, (III a IV) war mat enger Erhéijung vun intakt an degranulated Zellen (Figebam. 4B) assoziéiert. An der Muskel duerstellt, war dës Erhéijung haaptsächlech mat der grousser Zuel vun intakt Mast Zellen (Figebam. 4C) assoziéiert. Figur 4 Chemeschen Analyse vun Mast Zellen am Mo. Donnéeën vertrieden mengen ± S.E.M vun siechzeg Felder pro Déier analyséiert wéi am Material a Methoden beschriwwen. Non-denervated (ech) an denervated Mo. (II) ouni lesions. Non-denervated (III) a denervated Mo. (IV) mat lesions. Non-malignant entholl (Wees). Malignant entholl (MT). A) VerfÜgung Total Zuel vun Mast Zellen am gastric ofgesprengt. * P &Si besteet; 0,05 vs. Grupp I. # P &Si besteet; 0,01 vs. aner experimentell Gruppen. B an C) VerfÜgung intakt an degranulated Mast Zellen am mucosal, submucosal an Hautfaarf Schichten. * P &Si besteet; 0,05 vs. Grupp sin; #P &Si besteet; 0,05 vs. aner experimentell Gruppen; δ P &Si besteet; 0,05 vs. Grupp III - Wees (intakt Mast Zellen); &Amp; P &Si besteet; 0,05 vs. Grupp III - Wees (degranulated Mast Zellen). C) VerfÜgung intakt an degranulated Mast Zellen an der Hautfaarf futti. * P &Si besteet; 0,05 vs. Grupp sin; # P &Si besteet; 0,05 vs. Grupp II. VerfÜgung Phenotypic Analyse vun de Mast Zellen Fir d'phenotypic characterization vun Mast Zellen VerfÜgung et der Method vun Alcian Blue-Safranin (AB-SAF) benotzt gouf. An Déiere vun Net-denervated (ech) an denervated (II) Gruppen, war et eng treffen vun Mast Zellen AB positiv (AB +) an der mucosal an submucosal Schichten vun der gastric antrum, dës Zellen als mucosal Mast Zellen characterizing (Britney) (Figebam. 5A an 5B). An der experimentell Gruppen behandelt mat MNNG (III a IV), eng héich Unzuel vun AB + an AB-SAF + Mast Zellen bestemmt observéiert goufen, deen haaptsächlech an der denervated Grupp (IV) (Figebam. 5C an 5D). Fragmenter vun der gastric mesentery sech mat antrum benotzt d'Präsenz vun SAF + Zellen ze confirméieren, déi vun dëser Method vun staining der connective Otemschwieregkeeten Mast Zell (CTMC) characterizing (Figebam. 5E an 5F). Figur 5 Phenotypical Analyse vun Mast Zellen vun gastric ofgesprengt. A a B) VerfÜgung Submucosal futti vun Net-denervated (Grupp sin) an denervated (Grupp II) Mo weist Mast Zellen mat cytoplasmic granules positiv ze alcian-blo (Feiler), mucosal Mast Zell phenotype characterizing - am Detail vun Rot A . C an d) VerfÜgung sinn zwee Mast Zell Populatioun an der gastric lesions vun Net-denervated (Grupp III) a denervated (Grupp IV) Mamm bemierken: alcian-blo positive Mast Zellen (schwaarz Feiler) an alcian-blo /safranin positiv Mast Zellen (rout Feiler). E an F) VerfÜgung Mast Zellen mat safranin positive granules (Feiler) sinn an de mesentery observéiert, connective Otemschwieregkeeten Mast Zellen characterizing. Alcian-blo /Safranin Method. Erausgoen: 10 μm (Lalumi A-F.); 5 μm (Detail Figebam. A) VerfÜgung. VerfÜgung Déi total quantification vun dräi bestemmt vun Mast Zellen (AB +, AB-SAF + an SAF +) confirméiert der morphological Observatiounen, weist en treffen vun AB + Zellen am pyloric ofgesprengt an all experimentell Gruppen (Table 2). An Net-denervated an denervated Gruppen behandelt mat MNNG (III a IV, bzw.), huet dës Zell subtype fir d'Net-denervated Grupp (ech) bedeitend Verglach. An denervated Mamm mat MNNG (Grupp IV) behandelt, Sous-bewosst AB-SAF + och zu malignant lesions war am Verglach zu lesions am Net-denervated Grupp mat MNNG (III) .Table 2 Densitéit vun Mast Zellen behandelt vill fräi mat verschiddene phenotypes an der gastric antrum. VerfÜgung zu Pyloric ofgesprengt
Groups
AB + VerfÜgung
+
AB + SAF +
ech VerfÜgung 8 ± 2 VerfÜgung 1 ± 1 VerfÜgung 4 ± 1 VerfÜgung II VerfÜgung 14 ± 4 VerfÜgung 3 ± 1 VerfÜgung 13 ± 10 VerfÜgung III - Wees VerfÜgung 49 ± 16 * VerfÜgung 5 ± 2 VerfÜgung 11 ± 4 VerfÜgung III - MT VerfÜgung 23 ± 4 *** VerfÜgung 4 ± 2 VerfÜgung 13 ± 5 zur VerfÜgung IV - Wees VerfÜgung 28 ± 5 *** VerfÜgung 2 ± 1 VerfÜgung 23 ± 8 VerfÜgung IV - MT VerfÜgung 36 ± 8 ** # VerfÜgung 13 ± 10 zu 47 ± 12 & VerfÜgung Histological Virbereedung Leeschtung war ëmschriwwen an spontan a Methode VerfÜgung. Wäerter (Zuel vun Zellen pro mm2) ausgedréckt sinn als mengen ± Sem vun 60 Felder pro Déier mat enger héijer Muecht objektiv analyséiert (40 ×). Alcian-blo VerfÜgung (AB +), safranin (SAF +) an Alçın-blo VerfÜgung /safranin positive Zellen (AB + SAF +). * P &Si besteet; 0,05 vs. Grupp sin; # P &Si besteet; 0,01 vs. III - Wees an - MT; &Amp; P &Si besteet; 0,05 vs. II. VerfÜgung D'Analyse vun de verschiddene bestemmt vun Mast Zellen am mucosal an submucosal Schichten vun pyloric Fragmenter zougedréckt e wesentleche Erhéijung vun Mast Zellen AB + nëmmen an Déieren mat enger benign entholl (Table 3). An denervated Mamm mat MNNG (Grupp IV) behandelt, d'Populatioun vun Mast Zellen AB-SAF + am Verglach mat anere experimentell Gruppen fräi, bedeitendst fir malignant Patient gëtt. D'Fleesch futti zougedréckt enger anerer Profil vun der ofgesprengt als Ganzt, an denervated Mamm ouni a mat neoplasia (Gruppen II a IV) zougedréckt engem treffen vun Mast Zellen AB-SAF +. An weder Grupp studéiert, d'Zuel vun Zellen SAF +, deen de CTMC Markenzeeche, overtook Wéinst Zell subtypes.Table 3 Distribution vun Mast Zellen mat verschiddene phenotypes am Schichten vun gastric antrum. VerfÜgung zu Histological Schichten
zu Mucosa an Submucosa
Hautfaarf VerfÜgung
Groups
AB +
SAF +
AB + SAF +
AB +
SAF +
AB + SAF + VerfÜgung VerfÜgung ech (Control) VerfÜgung 7 ± 2 VerfÜgung 0 ± 0 VerfÜgung 3 ± 0 VerfÜgung 1 ± 0 VerfÜgung 1 ± 1 VerfÜgung 2 ± 1 VerfÜgung II VerfÜgung 12 ± 4 VerfÜgung 0 ± 0 VerfÜgung 2 ± 1 VerfÜgung 2 ± 1 VerfÜgung 2 ± 1 VerfÜgung 11 ± 9 VerfÜgung III - Wees VerfÜgung 40 ± 14 * VerfÜgung 1 ± 1 VerfÜgung 4 ± 1 VerfÜgung 8 ± 3 * VerfÜgung 3 ± 2 VerfÜgung 7 ± 3 VerfÜgung III - MT VerfÜgung 12 ± 2 VerfÜgung 0 ± 0 VerfÜgung 3 ± 1 VerfÜgung 11 ± 3 * VerfÜgung 4 ± 1 VerfÜgung 10 ± 4 VerfÜgung IV - Wees VerfÜgung 19 ± 3 ** VerfÜgung 1 ± 0,6 VerfÜgung 12 ± 8
± 3 * VerfÜgung 1 ± 0 VerfÜgung 18 ± 7 VerfÜgung IV - MT VerfÜgung 27 ± 10 VerfÜgung 9 ± 8 VerfÜgung 25 ± 8 # & VerfÜgung 9 ± 2 ** π VerfÜgung 3 ± 2 VerfÜgung 22 ± 9 VerfÜgung Histological Virbereedung Leeschtung war wéi an spontan a Methode VerfÜgung beschriwwen. Wäerter (Zuel vun Zellen pro mm2) ausgedréckt sinn als mengen ± Sem vun 60 Felder pro Déier mat enger héijer Muecht objektiv analyséiert (40 ×). Alcian-blo VerfÜgung (AB +), safranin (SAF +) an Alçın-blo VerfÜgung /safranin positive Zellen (AB + SAF +). * P &Si besteet; 0,05 vs. Grupp sin; # &Si besteet; 0,05 vs. ech an III-MT; &Amp; P &Si besteet; 0,01 vs. II; π P &Si besteet; II 0,05 vs.. VerfÜgung Diskussioun VerfÜgung An dëser Etude war d'histopathological Ännerungen an Verdeelung vun den extracellular Matrixentgasung (ECM) fibrillar Komponente propagéieren, an Mast Zellen am pyloric Regioun vun Grenzwäerter Mamm Net-denervated oder denervated vun benzalkonium Mord (BAC) an Nët-behandelt oder behandelt mat der carcinogen N -methyl-N '-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG). VerfÜgung Nord-, der histopathological an stereological Analyse huet keng Ännerungen an der famill Volume vun der epithelial an stromal compartments an der pyloric Brochstécker aus Net-denervated (Grupp sin) an denervated Mamm (Grupp II). Mä, sot d'Etude vun fibrillar Komponente vun ECM an dës ugedait datt BAC denervation eng Erhéijung vun der Frequenz vun reticular an elastesche System Faseren an der denervated gastric mucosa (Grupp II) bewierkt Verglach zu Net-denervated (Grupp ech), well hien vun histochemical an stereological Analyse mat Gomori reticulin an Resorcin-Fuchsin staining d'Weigert, bzw.. Wahrscheinlech, ëmmer d'Feele vun contractile Stimulatioun vun myenteric denervation an dës Fragmenter (Grupp II) bäidroen eng Erhéijung vun der Synthes vun reticular an elastesche Faseren vun glat Muskel Zellen an /oder eng nei Associatioun vun Faseren an der stroma als Mechanismus fir adequat der peristaltic Schwéngung Koordinatioun, an LIESEN zu denervated Organer ze verhënneren [32-34]. VerfÜgung Prefabrizéierten vun net-denervated (Grupp III) a denervated (Grupp IV) Déiere mat MNNG der Entwécklung vun malignant erhéijen entschlof (adenocarcinomas), benign erhéijen (adenomatous polyps) an precancerous lesions (dysplasia an atrophic gastritis). D'Entwécklung vun adenocarcinomas zu souwuel Net-denervated an denervated Mamm konnt e wesentleche Hausse am Verglach Volume vun der stromal unzekräizen ze förderen. Während der entholl Entwécklung vun der Aarbecht oder gastric mucosa, der Interaktioun stroma /epithelium ass erofgaangen an opgezwong eng nei Conditioun verbonne zu der morphologic Ännerunge vun extracellular Matrixentgasung Komponente an entholl Wuesstem [35]. D'epithelial Zell Verbreedung zu souwuel malignant an benign lesions Ännerungen am drüs wellkomm Ursaachen, déi vun enger Brennwäit Remodeling vun der fibrillar Komponente vun der extracellular Matrixentgasung duerno [27]. An dësem Aspekt VerfÜgung, huet de histochemical Analyse e wesentleche Erhéijung op der reticular Faseren vun der adenocarcinoma (Grupp III) am Verglach zu der net-denervated Mamm ouni lesions (Grupp sin). D'Erhéijung vun stromal collagen Faseren duerstellt engem Mechanismus duerch deen entholl Zellen der "Attack" vun T lymphocytes flüchten (CD8 +) an apoptosis zu induce, dat als eng Barrière fir d'einfach vun CD8 Akt géif + [ ,,,0],36]. Trotz enger net relevant Verfall op der elastesche System, e Stéierungen vun dësen Faseren war zu adenocarcinomas vun der Net-denervated Mo. (Grupp III), mat der Präsenz vun Organer vun elastesche Elementer fractionated, proposéiert Iech eng ofgeschnidden oder Remodeling vun der stroma an Äntwert observéiert zu Fouss ënner dem Afloss vun neoplastic Zellen. Dës Ännerungen am elastesche System Faseren sech gläichzäiteg mat der Remodeling vun collagen Faseren, och zu prostatic lesions observéiert [37] an an der prostatic stroma während dëser drüs Réckgang folgenden castration [38, 39]. Laut deene Resultater, konnt de aggressiv entholl vun der fibrous Komponente vun der Matrixentgasung bewäert ginn.

• Wéi soll tracers fir Sentinelle Wirbelen a gastric Kriibs ze entdecken ginn heijen - submucosally vu bannen oder subserosally ausserhalb vun de Mo.
• Clinicopathologic Charakteristiken a Behandlung Resultater vun hepatoid adenocarcinoma vun de Mo, eng rar mee eenzegaarteg subtype vun gastric cancer