Variabilidade genética em CYP3A4 e CYP3A5in primário do fígado, estômago e pacientes com câncer colorretal

Variabilidade genética em CYP3A4 Comprar e CYP3A5
no fígado primário, pacientes com câncer gástrico e colorretal arte abstracta
Fundo
enzimas que metabolizam drogas desempenham um papel na carcinogênese química através da ativação enzimática de pró-carcinogéneos para biologicamente reativo metabolitos. O papel dos polimorfismos do gene de várias enzimas do citocromo P450 no risco de câncer digestivo tem sido extensivamente investigado. No entanto, as enzimas que metabolizam drogas com a mais ampla especificidade de substrato, CYP3A4 e CYP3A5, não foram analisadas até agora. Este estudo tem por objetivo analisar a associação entre CYP3A4 comum e polimorfismos CYP3A5 e risco de câncer digestivo.
Métodos
CYP3A4 e CYP3A5 genótipos foram determinados em 574 pessoas, incluindo 178 pacientes com câncer de fígado primário, 82 pacientes com câncer gástrico, 151 pacientes com . câncer colorretal, e 163 indivíduos saudáveis ​​

resultados As freqüências alélicas variante para pacientes com câncer de fígado, câncer gástrico, câncer colorretal e controles saudáveis, respectivamente, foram: CYP3A4 * 1B
, 4,8% (95% Cl 2,6-7,0), 3,7% (0,8-6,6) 4,3% (2,0-6,6) e 4,3% (2,1-6,5); CYP3A5 * 3
, 91,8% (93,0-97,4), 95,7% (92,6-98,8), 91,7% (88,6-94,8) e 90,8% (87,7-93,9). A associação entre CYP3A4 * 1B Comprar e CYP3A5 * 3
alelos variantes não diferiram significativamente entre os pacientes e controles. Não foram observadas diferenças de genótipos, as freqüências alélicas, ou associação entre alelos variantes em relação ao sexo, idade no momento do diagnóstico, local do tumor ou estágio.
Conclusão
polimorfismos comuns no CYP3A4 Comprar e CYP3A5
genes fazer não modificar o risco de desenvolver cancros digestivos na Europa Ocidental.
Fundo
a identificação de genes de baixa penetrância capazes de aumentar o risco de desenvolver câncer poderia constituir uma importante ferramenta para a identificação de indivíduos com alterações na vulnerabilidade hereditária. A este respeito, o papel das enzimas que metabolizam drogas no risco de cancro tem sido objecto de várias centenas de estudos realizados ao longo da última década [1]. A hipótese principal subjacente à ligação entre as enzimas que metabolizam drogas e carcinogénese química baseia-se na activação enzimática de pró-carcinogéneos em metabolitos biologicamente reactivos. Estes metabólitos reativos iria interagir com o DNA, causando assim a expressão do gene alterado ou função, e, eventualmente, carcinogênese. O metabolismo primário de uma variedade de xenobióticos carcinogéneos é principalmente mediada pelo citocromo P450 (CYP) enzimas pertencentes aos CYP 1, 2 ou 3 famílias, as quais em conjunto, compreendem 25 isoenzimas diferentes. Entre eles, os mais relevantes são CYP1A1, CYP1A2, CYP1B1, CYP2E1, CYP3A4 e CYP3A5 [2-4]. A maioria das últimas enzimas são polimórficos, alelos mutantes que causam actividade de enzima abolida, reduzida ou alterada. Até à data, vários estudos têm-se centrado sobre o papel dos polimorfismos do gene ou atividade das enzimas do CYP1A1 [5-11], CYP1A2 [7, 12-14], CYP1B1 [7, 15] e CYP2E1 [6, 16-19] na digestivo o risco de câncer. No entanto, o impacto sobre o risco de câncer de polimorfismos das enzimas CYP com a especificidade de substrato mais ampla, ou seja, CYP3A4 e CYP3A5, não foi analisado em detalhe até agora.
As enzimas CYP3A4 e CYP3A5 são as principais enzimas para o metabolismo de fármacos em adultos [ ,,,0],20], tornando-se ambas as enzimas quase 30% do total das enzimas CYP expressos em fígado humano [21]. Uma vez que nenhuma quantificação individualizada de CYP3A4 e CYP3A5 in vivo
é actualmente possível devido a uma grande sobreposição especificidade de substrato, as actividades enzimáticas unidas são designados como CYP3A [22]. O CYP3A4 e CYP3A5 são expressos no fígado, estômago, epitélio colorrectal e em tecido de cancro colo-rectal [23-26], ainda que existem grandes diferenças inter-individuais na expressão de ambas as enzimas [27-29]. Para além de um efeito local das actividades enzimáticas no metabolismo de carcinogéneos, CYP3A4 metabolismo /5-dependente no intestino proximal é susceptível de afectar luminal vascular ou entrega de moléculas cancerígenas para o fígado ou o cólon.
Estes factos proporcionam um hipótese plausível para a ativação pró-carcinogéneo dietética específica do órgão e, portanto, o risco de câncer digestivo. A hipótese de que justificam o presente estudo é baseado no facto de as actividades de enzima CYP3A4 e CYP3A5 estão envolvidos na activação de pró-carcinogéneos diversos, incluindo a aflatoxina B1 stergmatocystin, aminas heterocíclicas derivadas de alimentos, alfa-hidroxitamoxifeno e N'-nitrosonornicotina, e que tanto enzimas são expressas a um nível elevado no tracto digestivo [27, 30-36]. Assim, pode-se supor que as diferenças genéticas que causam variabilidade no regulamento, expressão ou atividade das enzimas CYP3A seria fatores relevantes modificando suscetibilidade ao câncer ou a evolução clínica. Estas associações alelo da doença já foram mostrados para polimorfismos do gene CYP3A e de próstata, mama e cancro do pulmão [37-43], embora com resultados controversos. Embora o CYP3A4 e CYP3A5 desempenhar um papel biológico relevante no fígado e no epitélio intestinal, não há estudos abordaram se polimorfismo destas enzimas estão relacionadas com o risco de cancro digestivo, provavelmente porque alelos variantes para os genes correspondentes têm sido recentemente descrito. A este respeito, as novas descobertas demonstram que CYP3A5
genótipos principais de actividade enzimática elevada estão relacionados com o cancro esofágico [44]. No entanto, a interacção de CYP3A4 e CYP3A5

polimorfismos do gene e o risco de desenvolvimento de grandes cancros digestivos, tais como o fígado, estômago ou cancros colorrectais permanecem por explorar. Este estudo tem como objetivo analisar essa interação.
Métodos
O grupo de estudo consistiu de 411 pacientes não relacionados com cancros digestivos, incluindo 178 pacientes com câncer de fígado primário, 82 pacientes com câncer gástrico e 151 pacientes com câncer colorretal e 163 saudáveis assuntos. A tabela I apresenta um resumo dos grupos de estudo incluídos no estudo. Todos os participantes eram indivíduos brancos espanhóis, que vivem nas mesmas áreas que os pacientes (Madrid e arredores), e foram incluídos no estudo após ter dado consentimento informado por escrito. Todos os pacientes com diagnóstico de fígado, estômago ou câncer colorretal que participaram os Serviços de colaboração dos hospitais selecionados foram incluídos no estudo. O diagnóstico foi baseado na histologia análises de biópsias endoscópicas e /ou espécimes de ressecção cirúrgica. Foram coletados dados referentes doenças conhecidas anteriores digestivos, álcool e consumo de tabaco, testes sorológicos para hepatite B e vírus C e outras doenças. bebedores pesados ​​foram definidos como indivíduos que bebem mais de 50 g de álcool por day.Table 1 Resumo dos grupos de estudo.

NO
MACHOS
FÊMEAS
média de idade (SD; GAMA)
câncer de fígado
178
145
33
66,1 (9,8; 20-88)
O câncer gástrico
82
54
28
67,7 (13,9; 31-99)
câncer colorretal
151
82
69
66,3 (11,2; 33-89)
indivíduos saudáveis ​​
163
111
52
46,3 (12,7; 21-95)
No: número de indivíduos
Todos os pacientes foram solicitados a participar do estudo, e todos eles concordaram em fazê-lo. As amostras de controlo foram obtidos a partir de estudantes de medicina, Universidade e funcionários do hospital. Um exame médico foi feito para identificar indivíduos com boa saúde. Mais de 95% dos indivíduos saudáveis ​​solicitados concordaram em participar do estudo. O protocolo foi aprovado pela Comissão de Ética do Hospital Universitário San Carlos, Madrid. Um fator de confusão possível no presente estudo é que, dentro de um grupo de estudo, a freqüência de indivíduos portadores de um alelo variante determinada pode mudar com a idade no caso em que a presença de tais alelo estaria relacionada a doenças graves. Se um determinado genótipo tem um "efeito protetor" contra qualquer doença, pode-se esperar que, em populações compostas por indivíduos mais velhos há um aumento da frequência de um tal genótipo protegendo. Por isso, incluído no grupo de controle um subgrupo selecionado de 41 indivíduos saudáveis ​​com idades variando de 90 a 95 anos [45]. A análise da
CYP3A4 e CYP3A5
genótipo indica frequências para genótipos que eram idênticos aos de indivíduos saudáveis ​​mais jovens. As frequências para CYP3A4 * 1B Comprar e CYP3A5 * 3
alelos foram similares para controles mais jovens e mais velhos (ver secção Resultados). 4,33% e 90,7% para os controlos jovens e 4,18 e 91,2% para os controlos mais velhos. Outro possível fator de confusão está relacionado com o fato de que indivíduos de controlo são muito pessoas, e as diferenças no estilo de vida educado em comparação com pacientes com câncer pode ser esperado. Desde cancros digestivos são, em parte, relacionada com a dieta, essas mudanças no estilo de vida pode ser relevante. No entanto, deve-se afirmar que os pacientes e controles foram entrevistados para garantir que a dieta e estilo de vida não fazem diferir entre pacientes e controles.
Amostras de sangue de todos os participantes foram armazenadas a -80 ° C até análise. O ADN genómico foi preparado a partir de leucócitos periféricos e estéril dissolvido em Tris-HCl a 10, a pH ácido etilenodiaminotetra-acético 8,0, 1 mM, a uma concentração final de 400 a 600 mg por ml. As amostras de ADN foram purificados de acordo com procedimentos padrão [46] e armazenadas a 4 ° C em frascos de plástico esterilizadas.
As análises para a CYP3A4 * 1B
e CYP3A5 * 3
variantes genéticas foram levadas a cabo por amplificação de restrição procedimentos como descrito noutro local [47, 48]. Estas variantes alélicas foram analisados ​​em vez de outros, porque estes são variantes comuns que causam alterações funcionais. [47, 48].
Análise estatística
O estudo foi desenhado tendo em consideração a frequência esperada de indivíduos que expressam CYP3A5, ou seja, com pelo menos uma CYP3A5 * 1

• efeitos anti-inflamatórios, gastroprotective e anti-ulcerosas de algas vermelhas Gracilaria changii (Gracilariales, Rhodophyta) extract
• quimioterapia neo-adjuvante seguida de cirurgia e quimioterapia ou cirurgia e quimioradioterapia para pacientes com ressecáveis ​​câncer gástrico (CRÍTICOS)