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Um estudo da actividade anti-microbiana, a toxicidade aguda e efeito citoprotector de um extracto fitoterápico em uma úlcera gástrica rato etanol-HCl model

Um estudo da actividade anti-microbiana, a toxicidade aguda e efeito citoprotector de um extracto fitoterápico num modelo de úlcera gástrica de ratos etanol-HCl
Abstract
Fundo
A decocção das partes aéreas de (A.Rich.) Bak Rhynchosia recinosa
. [Fabaceae] é utilizado em combinação com a casca de tronco de ozoroa Insignis
Del. (Anacardiaceae), Maytenus senegalensis
(Lam.) Excell. [Celastraceae] Entada abyssinica
Steud. ex A.Rich [Fabaceae] e lannea schimperi
(Hochst.) Engl. [Anacardiaceae] como um remédio tradicional para o gerenciamento de úlceras pépticas. No entanto, não foi avaliada a segurança e eficácia desta preparação fitoterápico. Este estudo mostra o perfil fitoquímico e algumas actividades biológicas dos extratos de plantas individuais e uma combinação de extratos das cinco plantas.
Métodos
Uma mistura de 80% de etanol extratos de R. recinosa, O. insignis, M . senegalensis, E. abyssinica
e L. schimperi
em doses de 100, 200, 400 e 800 mg /kg de peso corporal foram avaliados quanto à capacidade de proteger ratos Sprague Dawley de ulceração gástrica por uma mistura de etanol-HCI. efeito citoprotetor foi avaliado por comparação com um grupo controle negativo dado 1% tween 80 em solução salina normal e um grupo controle positivo dado 40 mg /kg de peso corporal pantoprazol. Os extractos individuais e suas combinações, também foram testadas quanto à actividade antibacteriana contra bactérias Gram-negativas quatro; coli Escherichia
(ATCC 25922), Salmonella typhi
(NCTC 8385), Vibrio cholerae
(isolado clínico), e Klebsiella pneumoniae
(isolado clínico) usando o método de microdiluição. Além disso, os extractos foram avaliados para toxicidade artémia e toxicidade aguda em ratinhos. testes fitoquímicos foram feitas usando métodos padrão para determinar a presença de taninos, saponinas, esteróides, glicosídeos cardíacos, flavonóides, alcalóides e terpenóides nos extratos de plantas individuais e no extrato misto de cinco plantas.
Resultados
O combinado extractos etanólicos de as 5 plantas causada uma protecção dependente da dose contra etanol /HCl a ulceração da mucosa gástrica induzida rato, atingindo 81,7% de protecção significa, em comparação com 87,5% de protecção de 40 mg /kg de peso corporal pantoprazol. Ambos os extratos de plantas individuais e os extractos mistos de 5 plantas exibiram fraco para actividade antibacteriana moderada contra quatro G-ve bactérias. Apesar ozoroa Insignis
ser tóxico para ratinhos em doses acima de 1000 mg /kg de peso corporal, os outros extractos de plantas e o extracto combinado de as 5 plantas foram tolerados pelos ratinhos até 5000 mg /kg de peso corporal. Os resultados do teste de artémia mostrou o mesmo padrão de toxicidade com ozoroa Insignis
sendo o mais tóxico (LC 50 = 10,63 ug /ml). testes fitoquímicos mostraram que o extrato combinado dos cinco plantas continham taninos, saponinas, esteróides, glicosídeos cardíacos, flavonóides e terpenóides. Flavonóides, taninos e terpenóides são conhecidos como tendo actividade antioxidante.

Conclusão O extracto combinado das cinco plantas exibiram uma actividade protectora dependente da dose no modelo de rato de úlcera gástrica etanol-HCI. Os extratos também apresentaram atividade antibacteriana fraco contra quatro bactérias Gram negativas e baixa toxicidade aguda em ratos e camarões de água salgada. Embora os resultados apoiar reivindicações por curandeiros tradicionais que usam uma decocção das cinco plantas para o tratamento de úlceras pépticas, mais modelos de úlceras gástricas e estudos de toxicidade animal adequados são necessários para validar possível uso clínico do extrato fitoterápico. É também evidente que as doses dos extractos brutos que mostram a protecção da mucosa gástrica são demasiado grandes para tradução realista para dirigir aplicação clínica, mas outros estudos utilizando bioensaio guiada fraccionamento são importantes para qualquer identificar fracções mais práticos ou composto activo /s.
Palavras-chave
ozoroa insignis Maytenus senegalensis Entada abyssinica lannea schimperi gastroproteção Toxicidade fundo
as pessoas Haya da região de Kagera são dotados de uma rica cultura, na prática da medicina tradicional devido a uma ampla troca intercultural entre as diversas tribos étnicas do Lago Victoria Basin [1]. Nesta série de relatórios combinados documentação [1, 2] e avaliação para estabelecer a prova do conceito está sendo feito. Em relatórios anteriores um bom corroboração das reivindicações sobre a atividade antimicrobiana foi estabelecida a partir de testes de laboratório [3-5] e usar evidências da literatura, que indicou um acordo média de 20-30% com as alegações terapêuticas por parte dos médicos tradicionais Kagera [1, 2].
Uma das plantas usadas na medicina tradicional é Rhynchosia recinosa
(A.Rich.) Bak. (Fabaceae) [Akashakanyaliyoya]. As partes aéreas da planta são trituradas juntamente com as cascas do caule de ozoroa insignis
Del. (Anacardiaceae) [Omkerenge], Maytenus senegalensis
(Lam.) Excell. (Celastraceae) [Omurosho], Entada abyssinica
Steud. ex A. Rich (Fabaceae) [Mwiganjula] e lannea schimperi
(Hochst.) Engl. (Anacardiaceae) [Omusangesange] e depois cozido com água para fazer uma decocção. A decocção é administrado a uma dose de um vidro de três vezes por dia para o tratamento de úlceras pépticas. Neste estudo uma mistura de extratos das cinco plantas foi avaliado quanto à capacidade de oferecer proteção contra etanol-HCl induzida úlceras gástricas [6-8], atividade antibacteriana contra algumas bactérias Gram negativas, toxicidade aguda em ratos e toxicidade Artemia salina.
Métodos
Materiais
etanol (absoluto) foi comprado de Fluka Chemie GmbH (Sigma-Aldrich, Zwijndrecht, Holanda), enquanto dimetilsulfóxido (DMSO) foi comprado de Sigma® (Poole, Dorset, Reino Unido). Triptona soja caldo foi comprado de HIMEDIA® (Himedia Laboratories Pvt Ltd, Mumbai, na Índia. Escherichia coli
(ATCC 25922), Salmonella typhi
(NCTC 8385), Vibrio cholerae
(isolado clínico), e Klebsiella pneumoniae
(isolado clínico) foram obtidos do Departamento de Microbiologia e Imunologia da Universidade Muhimbili da Saúde e Ciências Afins (MUHAS). p
cloreto de iodonitrotetrazólio (INT) foi comprado de SIGMA® (Sigma-Aldrich, St Louis, EUA), enquanto pantoprazol (pó liofilizado para injecção iv;. Batch No. JKJ 3534D e fabricado pela Sun Pharmaceutical Industries Ltd, Halol-Baroda Highway, Halol-389.350, Gujarat, Índia), foi comprado de uma farmácia local. os ovos de artémia foram adquiridos de Inovações Aquicultura (Grahamstown 6140, África do Sul) e sal do mar foi preparado localmente por água coletada do Oceano Índico evaporação, ao longo da Dar es Salaam Coast. ciclofosfamida, NEOPHOS 500® (CIPLA Ltd, MIDC Boisar, ÍNDIA) foi comprado de uma farmácia local em Dar es Salaam, na Tanzânia.
Recolha de material vegetal
as plantas foram coletadas e identificadas pelo Sr. Selemani Haji do Departamento de Botânica da Universidade de Dar es Salaam e as exsicata; R. resinosa
(MJM 3506), O. insignis
(MJM 3476), E. abyssinica
(MJM 3466), L. schimperi
(MJM 3411) e M. senegalensis
(MJM 3428) são mantidos nos herbários do Instituto de Medicina tradicional, MUHAS e do Departamento de Botânica da Universidade de Dar es Salaam.
Preparação de extratos vegetais
Todas as amostras de plantas foram secas ao ar e moídos em pó usando uma máquina de fábrica de moagem. As amostras de cada material vegetal foram macerados com 80% de etanol à temperatura ambiente durante 24 h e filtrada através de papel de filtro Whatman Nº1. Este procedimento foi repetido três vezes para assegurar uma evacuação completa do material de planta. Os extractos foram concentrados por meio de evaporação sob pressão reduzida num evaporador rotativo a 40 ° C e a água residual é removido por secagem por congelação. Os rendimentos percentual de extrato obtidos foram Rhynchosia resinosa
(14,4%), ozoroa insignis
(2,0%), Entada abyssinica
(5,3%), Maytenus senegalensis
(2,2%) e lannea schimperi
(5,9%).
rastreio Fitofármaco
os diferentes extractos foram testados quanto à presença de esteróides, saponinas, flavonóides, terpenóides, glicosídeos cardíacos, alcalóides e taninos, utilizando métodos convencionais [9, 10]. Preparação
e administração do extrato fitoterápico
Uma mistura de 80% de etanol extratos de R. recinosa
(a principal planta da receita), O. insignis, M. senegalensis, E. abyssinica Comprar e L. schimperi
em doses de 100, 200, 400 e 800 mg /kg de peso corporal foram avaliados quanto à capacidade de proteger ratos Sprague Dawley de ulceração gástrica por uma mistura de etanol-HCI. efeito citoprotetor foi avaliado por comparação com um grupo controle negativo dado 1% tween 80 em solução salina normal e um grupo controle positivo dado 40 mg /kg de peso corporal pantoprazol. Quantidades iguais de extractos de etanol 80% de cada um dos cinco plantas foram misturados em conjunto para se obter uma mistura uniforme. A mistura foi dissolvida em 1% de Tween 80 para fazer 40, 80 e 160 mg /ml de soluções. Os ratos receberam 5 ml /kg de peso corporal destas soluções, o que se traduz em 200, 400 e 800 mg /kg de peso corporal, respectivamente.
Indução de úlceras pépticas
tanto em ratos Sprague Dawley macho, pesando 100-188g e foram usados. Os ratos foram mantidos em jejum durante 36 horas mas com livre acesso à água [11] beber. Trinta ratos foram distribuídos aleatoriamente em 5 grupos de 6 animais cada. Os ratos no grupo um (controlo de solvente) foram oralmente doseados com pré-5 ml /kg de peso corporal 1% de Tween 80 em solução salina normal; ratos do grupo dois foram oralmente pré-doseados com 40 mg /kg de peso corporal de pantoprazole como controlo positivo [12], e os ratos em grupos de 3, 4 e 5 foram pré-tratados com 200, 400 e 800 mg de solução /kg de peso corporal de os extractos combinados uma hora antes da administração oral de 5 ml /kg de peso do corpo da mistura ulcerogénico. A mistura ulcerogénico continha ácido clorídrico 80% de etanol e 5% em água destilada [6-8]. Os animais foram eutanizados utilizando anestesia com éter 4h após a dose ulcerogénica da mistura de etanol /HCl. Os estômagos foram removidos, cortado e aberto ao longo da curvatura maior, lavados com solução salina normal e observado para a gravidade das úlceras [13]. Cada estômago foi examinada grosseiramente e o grau de ulceração foi graduada de acordo com o método de Shay et ai, [14], com algumas modificações como se segue:. 0 = ausência de lesões estomacais (normal); 0,5 = hiperemia (coloração vermelha); 1 = manchas hemorrágicas, 2 = 1-5 pequenas úlceras; 3 = muitas pequenas úlceras, 4 = muitas pequenas e grandes úlceras; 6 = estômago cheio de úlceras juntamente com perfurações. protecção percentual foi calculado por comparação com o grupo controle sem tratamento [14]
protecção percentual =
100
-.
M
e
um
n
u
l
c
e
r
i
n
d
e
x
o
f
t
r
e
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p
M
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x
o
f
c
o
n
t
r
o
l
g
r
o
u
p
×
100
análise estatística
Os resultados do índice de úlcera são expressos como média desvio ± padrão (SD). Os resultados do índice de úlcera foram analisados ​​usando o teste de Kruskal-Wallis análise de variância unidireccional. As médias foram comparadas usando teste não paramétrico de Kruskal-Wallis.
Teste para atividade antibacteriana
Quatro bactérias Gram-negativas Escherichia coli
(ATCC 25922), Salmonella typhi
(NCTC 8385),
e isolados clínicos de Vibrio cholerae
e Klebsiella pneumoniae
foram utilizados para o estudo. As concentrações inibitórias mínimas (MICs) foram determinadas usando o método de microdiluição em [15]. As soluções de reserva dos extractos foram preparadas por dissolução de 100 mg de extractos em 1 ml de DMSO (100 mg /ml). Cada uma das placas de 96 poços de microtitulação foram primeiro pré-carregado com 100 ul do caldo de cultura seguida pela adição de 100 ul dos extractos para o primeiro poço de uma linha para fazer um volume total de 200 uL nos primeiros poços. Após mistura cuidadosa, 100 ul foram retirados de cada um dos primeiros poços e colocado em fila os seguintes poços de linha. O processo foi repetido para baixo as colunas para as últimas cavidades na parte inferior, onde 100 jil foi descartado. Em seguida, 100 ul das suspensões bacterianas (0.5Mac Farland padrão de turbidez) foram adicionados a cada poço, para fazer um volume final de 200 uL em cada poço. Gentamicina Sulfato (100 ug /ml) foi usada como o medicamento padrão. Linhas contendo caldo, DMSO e bactérias foram incluídos como controlos negativos (solvente de controlo) e linhas contendo caldo e bactérias só foram incluídos, a fim de ver se havia crescimento bacteriano ou não (controle de crescimento). As placas foram então incubadas a 37 ° C durante 24h. Após incubação durante 24 h, a 37 ° C, 40 ul de 0,02% p
-iodonitrotetrazolium (INT) solução de cloreto de foi adicionado a cada poço seguido por incubação durante 1 h a 37 ° C. O crescimento bacteriano foi indicada por uma mudança de cor para cor de rosa nos poços. A ausência de crescimento bacteriano foi indicado por nenhuma mudança de cor do corante. A primeira concentração à qual não ocorreu crescimento bacteriano foi considerada como MIC.
Teste de letalidade camarões Brine
O teste de letalidade de Artemia salina (BST) foi utilizado para prever a presença, nos extractos, de actividade citotóxica [16] . As soluções de reserva dos extractos foram feitas em DMSO e, em seguida, ajustado a 5 ml com mar artificial para se obter concentrações compreendidas 8-240 ug /ml e incubou-se em frascos em duplicado com larvas de Artemia salina. Ciclofosfamida que foi um controlo positivo para a actividade citotóxica foi dissolvido em água destilada. Dez larvas de camarão salmoura foram colocados em cada um dos frascos duplicados. Controle de larvas de camarão de água salgada foram colocados em uma mistura de água artificial do mar (3,8 g /l sal marinho) e DMSO somente. As concentrações de DMSO foram restringidos a 0,6% ou inferior. Após 24 h os náuplios foram examinados de encontro a um fundo iluminado, e determinou-se o número médio de larvas sobreviveram em cada frasco duplicado. A análise dos dados

Os resultados médios de mortalidade artémia foram plotados contra os logaritmos das concentrações usando o Fig P programa de computador (Biosoft Inc, EUA), que também dá as equações de regressão. As equações de regressão foram utilizados para calcular LC 16, LC 50 e LC 84 valores. intervalos de confiança (IC 95%) foram calculadas usando três resultados [17]. Um LC 50 valor superior a 100 mg /ml foi considerado para representar um extrato inativo. Os estudos de toxicidade aguda

Ambos ratos albinos originais feminina de Theiller do sexo masculino e foram usados. Os ratos foram aclimatizados num quarto com ar condicionado a 20 ° C durante 7 dias antes da experimentação. Antes de administração de extratos, os ratos foram fome de 36 horas, mas permitiu o acesso a água potável adequada, e mantidos em gaiolas com fundo de malha de arame para evitar a coprofagia. Inicialmente a dose de 1000 mg p /kg de corpo foi administrado a um grupo de 6 ratos (machos e 3 fêmeas) 3, e os ratinhos observados para sinais de toxicidade imediata e /ou morte durante 72 h. Se não foi observada nenhuma toxicidade outro grupo de 3 machos e três ratinhos fêmea foi dada uma dose de 2000 mg /kg de peso corporal e as mesmas observações feitas. Se não há sinais de toxicidade ou de morte ocorreu doses foram sequencialmente aumentada até 3000, 4000, e 5000 mg /kg de peso corporal, respectivamente. Os extractos foram solubilizadas em 1% de Tween 80 e administrados em volume de uma única dose oral de 5 ml /kg de peso corporal ou dois independentes 5 ml /kg de peso corporal doses dadas dentro de um intervalo de hora em hora, dependendo da solubilidade. Um grupo de controle foi executado para cada extracto de planta que foi administrada uma única 5 ml ou dois 5 ml /kg de corpo peso de 1% de Tween 80 para coincidir com o volume de extracto de planta administrada. Apuramento Ethical
Este estudo foi dada a permissão ética pela Universidade Muhimbili de Saúde e ciências aliadas Ethical Review Board.

resultados da triagem fitoquímica
os resultados dos ensaios fitoquímicos como relatado na Tabela 1 mostram que os taninos estão presentes em todos os 5 extratos de plantas e na mistura das plantas 5, excepto no R.recinosa
extracto. Esteróides e terpenóides estavam presentes em todos os 5 extractos de plantas e o extracto misturado dos 5 plantas. Alcalóides foram detectados apenas no O. insignis
extrato, mas não os outros 4 plantas ou a mistura. Flavonóides estavam presentes em L. schimperi, O. insignis, E. abyssinica
extratos eo extrato misto das 5 plantas. Os outros compostos são como relatado na Tabela 1 1.Table compostos fitoquímicos presentes nos extratos de plantas
Extrato
Taninos
saponinas
Esteróides
Cardiac glicosídeos
flavonóides
alcalóides
Terpenoids
L. schimperi
+
- +
+
+
- +
R. resinosa
-
+
+
- -
- +
O. insignis
+
+
+
+
+
+
+
M. senegalensis
+
+
+
+ Restaurant -
- +
E. abssynica
+
- +
+
+
- +
mistura
+
+
+
+
+
- +
chave: + = meios compostos indicados estão presentes; - Meios indicados compostos estão ausentes
atividade antiulcerogênica Tours A combinadas extractos 80% etanólico de O. insignis, E. abyssinica, L. schimperi, R. recinosa Comprar e M. senegalensis protegida
gástrica de ratos. ulceração da mucosa do por a mistura etanol-HCI. A Figura 1 mostra fotografias da aparência bruta dos estômagos de ratos pré-tratados com 1% de Tween 80 em solução salina normal, de 800 mg /kg de peso corporal de uma mistura dos extractos de plantas 5, e 40 mg /kg de peso corporal pantoprazol, respectivamente. O extracto misturado exibiu uma actividade gastro-protectora dependente da dose, que aumentou de 28,3% para uma dose de 200 mg /kg de peso corporal (P ≤ 0,001) para 53,3 (P ≤ 0,001) a 400 mg /kg de peso corporal e 81,7% (P ≤ 0,001) a 800 mg /kg de peso corporal, em comparação com ratos tratados com solvente (Tabela 2). O pantoprazole, um inibidor da bomba de protões, a 40 mg /kg de peso corporal, obtida 87,5% significa gastroproteção (P ≤ 0,001). Todas as três doses e pantoprazol mostrou um índice de úlcera significativamente inferior em comparação com os ratos tratados solvente (p ≤ 0,001). Houve uma diferença significativa nas pontuações do Índice úlcera entre as 3 doses de extrato utilizados, e entre 40 mg /kg de peso corporal pantoprazol e ambos 200 e 400 mg /kg de corpo peso do extracto (P ≤ 0,001). No entanto, na dose de 800 mg corpo /kg em peso da pontuação do índice de úlcera média do extracto foi comparável ao de 40 mg /kg de pantoprazol peso corporal (P > 0,05), indicando que a esta dose o extracto foi tão bom como o pantoprazol . A Figura 1 fotografias mostrando a aparência bruta dos estômagos de ratos fêmea insulto com mistura de etanol /HCl (80% /5%). Em A, o rato foi pré-doseado com o solvente antes de insulto com a mistura de etanol /HCl. Em B, o rato foi pré-doseados com 40 mg /kg de pantoprazol peso corporal antes da exposição à mistura ulcerativa e em C o rato foi pré-doseado com 800 mg corpo /kg em peso dos extractos combinados de as 5 plantas. As áreas escuras ou pontos indicam os pontos ulceradas.
Tabela 2 Efeito de extratos etanólicos combinados em úlceras gástricas etanol /HCl-induzida em ratos
Tratamento
Dose (mg /kg de peso corporal)

média do índice de úlcera (n = 6)
% ge Protecção
Solvente controle
0
6,0
0
Combinado 5 extratos de plantas
200 mg /kg
4,3 ± 0,8
28,3 *
Combinada 5 extratos vegetais
400 mg /kg
2,8 ± 1,2
53,3 *
Combinada 5 extratos de plantas
800 mg /kg 1,1 ± 0,8

81,7 *
Pantoprazol
40 mg /kg 0,7 ± 0,9

87,5 *
Cada valor é uma média dos resultados de 6 ratos. * = P significativa ≤ 0,001 em comparação com controlos de solvente.
Actividade antibacteriana
Os extractos de etanol aquoso de todas as cinco plantas exibiram alguma actividade antibacteriana com CIMs variando de 0.8-12.5 mg /ml (Tabela 3). A actividade mais elevada foi demonstrado por M. senegalensis
(MIC 0,8 mg /ml) e E.
abyssinica (MIC 0,8 mg /ml) extrai contra Vibrio cholerae
seguido pela L. schimperi extracto
com uma MIC de 1,6 mg /ml contra S. typhi
. A L. schimperi
extrato foi inactivos contra E. coli
e V. choleraee
, enquanto o E. abyssinica
extrato foi inactivos contra K. pneumoniae
. Quando os extractos das cinco plantas foram combinadas (C1), que exibiram actividade antimicrobiana contra todas as bactérias com quatro MICs entre 0,8 - 12,5 mg /ml (Tabela 4). A combinação deu valores de CIM de 0,8 mg /ml contra S. typhi Comprar e E. coli
e 1,6 mg /ml contra K. pneumoniae
enquanto o MIC para V. choleraee
foi de 12,5 mg /ml. Da mesma forma as outras combinações C2 (Rynchosia resinosa
+ Maytenus senegalensis
+ Entada abyssinica
), C3 (lannea schimperi
+ Rynchosia recinosa
+ Maytenus senegalensis)
e C4 (lannea schimperi
+ Rynchosia resinosa
+ ozoroa insignis
) que foram testados (Tabela 4) foram mais ativos que a planta individual extracts.Table 3 resultados para atividade antibacteriana da planta individual extrai organismos de teste

extratos vegetais (MICs mg /ml)
L.shimperi
R.recinosa
O.insignis
M .senegalensis
E.abyssinica
gentamicina sulfato de
K.pneumoniae
6,25
12,5
NA
12,5
NA
0.000325
S. typhi
1,6
6,25
NA
6,25
12,5
0,00125
E.coli
NA
6,25
NA
12,5
12,5
0,000625
V.cholerae
NA
6,25
NA
0,8
0,8
0,00156
chave: NA = MIC > 12,5 mg /ml.
Tabela 4 a atividade antibacteriana da planta combinado extrai organismos de teste
MICs (mg /ml)
C1
C2
C3
C4
C5
C6
gentamicina sulfato de
K.pneumoniae
1.6
0,8
3,12
6,25
1,6
6,25
0,000325
S. typhi
0,8
0,8
0,8
1,6
0,8
6,25
0,00125
E.coli
0,8
1,6
0,8
1,6
1,6
6,25
0,000625
V.cholerae
12,5
12,5
6,25
6,25
12,5
6,25
0,00156
chave: C1 = Rynchosia resinosa
+ ozoroa insignis
+ Maytenus senegalensis
+ Entada abyssinica
+ lannea schimperi
; C2 = Rynchosia resinosa
+ Maytenus senegalensis
+ Entada abyssinica;
C3 = Rynchosia recinosa
+ lannea schimperi
+ Maytenus senegalensis
; C4 = Rynchosia resinosa
+ lannea schimperi
+ ozoroa insignis;
C5 = Rynchosia resinosa
+ Entada abyssinica
+ lannea schimperi
; C6 = Rynchosia resinosa
+ Maytenus senegalensis
+ lannea schimperi
.
Teste de toxicidade Artémia (BST)
Tabela 5 mostra que o ozoroa insignis
extrair (LC 50 = 10,63 ug /ml) foi o mais tóxico para as larvas de Artemia salina. O extracto de Maytenus senegalensis
foi o seguinte tóxico (LC 50 = 81,63 ug /ml), mas os outros extractos de plantas eram virtualmente não-tóxicas com LC 50 valores que variam 128,41-222,43 ug /ml. Os extractos de etanol combinadas dos cinco plantas deu uma LC 50 valor da 66.12μg /ml.Table 5 Resultados para toxicidade Artemia salina de extratos vegetais
Extractos
LC50 (ug /ml)

IC 95% (ug /ml)
Entada abyssinica
140,39
102,47-192,34
lannea shimperi
128,41
100.32- 164.40
Rhynchosia recinosa
222,43
151,31-326,97
ozoroa insignis
10,63
7,65-14,78
Maytenus senegalensis
81.63
64,79-102,84
extracto combinado de 5 plantas
66,12
52,52-83,24
ciclofosfamida
16.30
12,01-22,30 toxicidade
aguda em ratos in the 80% extracto de etanol de ozoroa insignis
era tóxica para os ratos em doses acima de 1000 mg /kg de peso corporal; causando hiperventilação dentro de 30 min da administração de extrato, o aumento da defecação e passagem de fezes moles. Os ratos mostraram cabelo desalinhado, sobretudo, após 24-72 h. Dois ratinhos morreram e quatro exibiram diarreia na dose de 2000 mg /kg de peso corporal. Ratos alimentados com o Entada abyssinica
extrato não apresentou qualquer toxicidade até 2000 mg /kg de peso corporal, mas acima desta dose os ratos apresentaram aumento da frequência respiratória e cabelo desalinhado. Dois ratinhos morreram com a dose de 3000 mg /kg de peso corporal. O lannea schimperi
extrato causou aumento da defecação /diarreia mas não matou nenhum ratos até 2000 mg /kg de peso corporal. A mortalidade ocorreu a ratinhos em doses de 3000 mg /kg em peso corporal e acima. Maytenus senegalensis
e Rhynchosia resinosa
extractos foram bem tolerados pelos ratinhos até 5000 mg /kg de peso corporal. Ao contrário dos extractos de plantas individuais, o extracto combinado foi bem tolerada pelos ratinhos até 5000 mg /kg de peso corporal, não mostrando sinais de toxicidade ou de morte.
Discussão
Etanol ulceração gástrica induzida é devido a uma série de mecanismos que incluem a depleção de muco gástrico e quebrando a barreira mucosa, a difusão de retorno de ácido, um aumento da permeabilidade da mucosa gástrica, levando ao aumento da fuga de iões hidrogénio a partir do lúmen, e diminuição da diferença de potencial eléctrico transluminal [18]. Ela também provoca mudanças no fluxo sanguíneo da mucosa, destruição de microvascular e as células não vasculares, degranulação dos mastócitos, neutrófilos lesão da mucosa mediada [18], e depleção de certos varredores de radicais livres de oxigênio [18]. Metabolismo do etanol também libera radicais livres [19]. Todos os autores leram e aprovaram o manuscrito final.

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