Indukciós kromoszóma instabilitás és a gyomorrák megváltoztatásával expressziós mintázata mitotikus ellenőrzőpont gének egerek kitett arékát-nut

Indukciós kromoszóma instabilitás és a gyomorrák megváltoztatásával expressziós mintázata mitotikus checkpoint gének kitett egerekben az aréka anya katalógusa Abstract katalógusa alapon
Vannak erős jelzések közötti okozati összefüggéseket aréka anya fogyasztása és a rák. Meghalaya, India, a különböző arékát anya használunk nyers és feldolgozatlan formában, amelyek kémiai összetétele és farmakológiai hatásait számoltak be. Mégis keveset tudunk az eredeti útvonal részt aréka anya kapcsolódó karcinogenezissel mivel nehéz felmérni annak hatásait genetikai eltérések beavatkozás nélkül más összetevői tényezők. Ezért jelen tanulmányt készítettek egereken ellenőrzésére képes a nyers arékát-anyát (RAN) rákot, és figyelemmel kíséri a kifejezés bizonyos gének kialakulásában. Ez a tanulmány nem volt célja, hogy ki kell zárni minden hatóanyag a RAN és nézni a cselekvés. Katalógusa módszerek katalógusa Három csoport egereket (n = 25 mindegyik) vettünk, és használják a különböző időpontokban különböző kísérleti elemzése . A másik három csoportja egereket (n = 15 mindegyik) tekintettük a tumor indukció vizsgálatokban. Minden készlet, két csoportot adjuk RAN-kivonatot ad libitum katalógusa ivóvízben vagy anélkül mész. A kifejezés bizonyos gének értékelték hagyományos RT-PCR és immunoblot. Az egereknek az egész RAN-kivonatot és anélkül mész, hogy utánozzák az emberi fogyasztásra stílus RAN. Katalógusa Eredmények katalógusa szövettani előkészítése gyomor szöveti kiderült, hogy futott indukált gyomorrák. A fokozatos növekedése a gyakorisága koraérett anafázis és aneuploid sejteket figyeltünk meg a csontvelő sejteket egy nagyobb növekmény következő RAN + mész administeration. Szintek p53, Bax, Securin katalógusa és p65
nyelőcső és a gyomor-sejteket emelkedett a korai napjaiban RAN expozíció míg a különböző mitotikus checkpoint fehérjéket downregulált. Az apoptotikus sejthalált volt kimutatható a nem-rákos gyomor sejtek, de nem a tumorsejtekben, amely azt mutatta overexpressziója Bax katalógusa és hiányában PARP katalógusa.
Következtetés
Present vizsgálat szerint (A) RAN indukálja gyomorrák, azonban jelenléte mész támogatni magasabb sejttranszformációs és ezáltal fejleszteni a rák korábban, (b) perturbációk összetevője a kromoszóma szegregáció gép is be lehetne vonni a kezdeti folyamatában rákkeltő és (c) a fontosságát koraérett anafázist a szűrési marker azonosításához a mitotikus checkpoint hibák a korai napokban. katalógusa Kulcsszavak katalógusa kromoszóma instabilitás mitotikus ellenőrzőpont gének Securin katalógusa apoptózis Háttér katalógusa nyelőcső laphámrák (ESCC) és a gyomor rákos megbetegedések leggyakoribb rák Indiában, a legnagyobb előfordulási ESCC hogy észak-keleti államok, India [1]. Vannak erős jelzések közötti okozati összefüggéseket arékát anya vagy egy fonttal rágás szokásait, és ezek a rákok. Számos tanulmány különböző állatfajok mutattak pozitív indukciós tumorok mindkét cél (pofa-tok, a nyelőcső és gyomor) és a nem célzott (a tüdő és a máj) szövetek amikor arecoline (ARC) vagy aréka anya kivonatot adtunk be különböző eszközökkel, például orális intubáció [2], összekeverjük a diéta, [3] és a pofa-tok alkalmazása [4]. Ezért úgy tűnik, hogy a metabolikus aktiválás Az alkaloidok van szükség a végső átalakítás végső rákkeltő, amely erősen befolyásolja a fiziológiai körülmények és jelenléte bizonyos faktorok [5]. A jelentések azt mutatják generációs reaktív oxigéngyökök (ROS) származó arékát-nut összetevők alkalikus körülmények között [6, 7]. Jelenléte miatt a mész bétel-quid készítmény, arékát-nut chewers nyálában jellemzően változik semleges lúgos állapot, amely lehet ideális a ROS létrehozásában [7]. Nair és munkatársai. [6] is megjegyezte, hogy amellett, ARC, auto-oxidációja arékát anya polifenolok generálhat H 2 O 2 és szuperoxid gyökök lúgos pH.
Az állam Meghalaya, India, a különböző Areca dió, helyileg úgynevezett "Kwai ', használjuk éretlen és a feldolgozatlan nyers formában, amely magasabb tartalmának alkaloidok, polifenolok és a tanninok, mint a szárított formában [8]. A betel-font használt Meghalaya tartalmaz nyers aréka anya (RAN), lime paszta és kis része a betel leveles dohány nélkül és egyéb összetevőket. Itt az emberek lenyelni az egész fontot után rágó helyett kiköpi ami fontos tényező ESCC és gyomorrák. Nemrégiben 40% nyelőcsőrák gyűjtött minták betegek Meghalaya államnak csak RAN-rágó szokás megmutatta törlését mikroszatellit markerek D9S1748 és D9S1749, közel exon 1β a CDKN2A /ARF katalógusa gén 9p21. A promoter hipermetiláció CDKN2A katalógusa gén szignifikánsan magasabb volt a mintákban a szokást RAN-rágás egyedül, mint azok, amelyek a szokást egyaránt alkalmazható RAN és dohány [9]. Eddig, nem tudjuk, hogy mennyi a kezdeti útvonal magában foglalja a betel-nut kapcsolódó karcinogene- nyelőcsőben és a gyomorban. Azt is nehéz felmérni a hatását tisztán és túlnyomórészt arékát-nut által kiváltott genetikai változások az emberi beavatkozás nélkül más összetevői tényezők, mint a dohányzás vagy a rágás a dohányzás, az alkoholfogyasztás, a különféle nem-vegetáriánus ételek, stb Ezen kívül, a jelen mész teszi lúgos állapotban van, amely nem ideális in vitro
sejttenyészetben, és ezért a hatás arékát-anya nem lehet tesztelni sejttenyésztő rendszerekben. Tekintettel ezekre, a jelen tanulmányt végeztünk egereken, hogy ellenőrizze a képességét, RAN-kivonat vagy a nélkül mész, rákot és egyidejűleg kell értékelni a expressziós mintázata bizonyos gének, amelyek fontos szerepet játszanak a kezdeti folyamatában karcinogenezis.
kémiai összetétele és farmakológiai hatásait arékát anya számoltak be, és felül több munkavállaló [10, 11]. Számos állat vizsgálatok megerősítették, hogy aréka-anya termékek és betel nitrózaminok, képesek indukálni daganatos elváltozások a kísérleti állatokban [11]. Jelentős bizonyíték azt sugallja, hogy aréka-anya-alkaloidok, elsősorban arecoline (ARC) a legfontosabb tényező a BN-toxicitás [11]. Kimutatták, hogy az ARC indukálhat DNS károkat egér csontvelő sejtek [12], és az ilyen DNS-károk lehet csökkenteni, ha az ARC adjuk be az N-acetil-L-cisztein [13]. Ezért érdemes megemlíteni, hogy a jelen tanulmány célja nem az volt, hogy ki kell zárni minden hatóanyag a RAN és nézni a cselekvés. A tanulmány célja az volt, hogy azonosítsa a kezdeti útvonal részt vesz a RAN kapcsolódó karcinogenezis egerekben, és ezért egereknek az egész RAN-kivonat és a nélkül mész annak érdekében, hogy utánozza a fogyasztás szokás az emberi.
Számos gén, mint például a p53 , p65, Securin katalógusa és még sokan mások, amelyekről ismert, hogy általában túlzott mértékben alatt karcinogenezissel [14-16]. Ezen kívül, a genetikai instabilitást is jár a kromoszóma instabilitás (CIN), amely ahhoz vezet, hogy aneuploidia, fémjelzi a rák. Az ilyen aneuploidia megkönnyíthetik tumorigenezis keresztül a veszteség a tumorszuppresszor gén funkciót. Azt is megfigyelték, hogy a részleges elvesztése mitotikus ellenőrzőpont-szabályozás vezet CIN humán rákos sejtekben [17, 18]. Ezért a jelen tanulmányban azt értékeltük expressziós mintázata p53, p65, Securin katalógusa és több mitotikus orsó és összeszerelés ellenőrzőpont gének különböző időpontokban. Megfigyeltük, hogy a RAN indukálhat gyomorrák által megbomlik az összetevői a kromoszóma szegregáció gép. Katalógusa módszerei katalógusa készítése kivonatok
után gránát a rostos réteg a feldolgozatlan nyers és éretlen arékát anya (RAN), 100 g RAN voltak földi és szuszpendáljuk 125 ml desztillált vízben, és alaposan összekeverjük, hogy egy sima pasztát előállítására vizes kivonat futottak. 24 óra eltelte után a pasztát elegyét 3 órán át 37 ° C-on, és a vizes extraktumot centrifugálással összegyűjtjük. Ezt az extrakciós eljárást még egyszer megismételjük hozzáadásával 125 ml vizet a maradékhoz. Mindkét extraktumokat egyesítjük, ami 100 g RAN 250 ml desztillált vízben, szűrjük, és lefagyasztottuk - 80 ° C. A szűrletet liofilizálva egy Secfroid Lyolab BII liofilizáló (Dánia). A liofilizált tömeg tartottuk 4 ° C hőmérsékleten tároltuk felhasználásig. A kivonatot tartalmazott 0,9 g /100 g víz kivonható anyag. Katalógusa Állatok karbantartása és kezelése katalógusa Swiss albínó egereket (25-30 g), 2-3 hónaposak voltak fenn a laboratóriumban a közösségi ketrecben egy szobában ellenőrzött hőmérsékletű (20 ± 2 ° C) és szabályozott világítási (12 óra világos; 12 óra sötét). Normál egér diéta (NMC Oil Mills Ltd., Pune, India) és vizet ad libitum
használtunk minden kísérletben. A kísérleteket megfelelően intézményi előírásoknak és jóváhagyta a "Intézményi Standards for Animal Care and Use" Board. Katalógusa A Set-1, három csoportban az egerek (n = 25 mindegyik) vettünk, amelyet használnak a különböző időpontokban különböző kísérleti elemzése. A Set-2, három csoportja egereket (n = 15 mindegyik) tekintettük a tumor indukció vizsgálatokban. Az 1. ábra vázlatos áttekintést nyújt arról a teljes kísérleti protokoll ítélték ebben a vizsgálatban. Minden egyes készlet, az egyik csoport kezeltük egyszerű ivóvíz tekintik kezeletlen mivel két csoport adtuk RAN ​​kivonat ad libitum
az ivóvízben vagy a nélkül mész (pH = 9,8). A becslések szerint minden egyes egér elfogyasztott 1 mg extraktum naponta. Az ilyen orális administeration át folytattuk 60 napig, ami után a dózist növeljük 1 mg-tól 2 mg per nap, míg 120 nap. Hasonlóképpen, minden 60 nap múlva az adag nőtt 1 mg naponta fogyasztás. 1. ábra Folyamatábra a kísérleti tervezés az elemzés a nyers arékát-anya által közvetített Karcinogenezis egerekben. RAN- nyers aréka anya; d- nap.
készítése metafázisos pontozási kromoszóma
A metafázis előkészítés, a csontvelő sejtek (BMC) gyűjtöttünk két egértől pont a kezeletlen, 15 és 30 napos kezelt csoport és három egér pont a többit. A kezelt csoportok, a BMC gyűjtöttünk után 15, 30, 60, 120 és 180 nappal a kezelés. BMC is gyűjtöttünk a két egerek, amelyek a gyomor tumor. BMC gyűjtöttük 2 óra eltelte után kolhicin kezelés (15 mg /kg). Az állatokat megöljük. A combcsontot kimetszettük, és a BMC is átöblített injektálásával 2 ml 0,075 M KCl-ra előmelegített 37 ° C-on. A sejteket hipotóniás oldatban 15 percig, és rögzített ecetsav és metanol (1: 3). A lemezeket állítottunk elő a láng szárítási módszer, foltos 5% Giemsa 5 percig és szerelt szintetikus táptalajon. Képek metafázis kenhető alapján hozott Zeiss Axioskop mikroszkóppal (Németország).
Kromoszóma-vizsgálat, a lemezeket kódolt véletlenszerűen, és legalább 100 jól kiterült metafázist lemezeket tanulmányozásra kiválasztott minden egérből. Végeztünk kromoszóma szám metafázisos terjedését. Kromoszóma aberrációk is pontozni isochromatid szünetek és chromatid szünetek. Lásd Kibővített Kísérleti eljárások részleteit a kiegészítő fájl 1: Tudakozó információ.
Immunblotolást katalógusa származó sejtek csontvelőből, nyelőcső (karcolás belső réteg) és a gyomor (karcolás belső rész) kétszer mostuk PBS-sel (foszfát pufferolt sóoldatban), és lizáltuk radioimmun-kicsapás pufferrel (0,1% SDS, 2 mM EDTA-t, 1% NP-40, 1% nátrium-dezoxikolát, 50 mM nátrium-fluoridot és 100 egység /ml aprotinin). 30 perc elteltével a jeges inkubáiás a sejtlizátumot centrifugáltuk 15 percen át 4 ° C-on, és a fehérje mennyiségét alkalmazásával határoztuk meg a bicinchoninsav- protein assay. Egyenlő mennyiségű fehérjét (40 ug) Minden egyes mintából betöltve minden egyes lyukba; egyenlő terhelés tovább igazoltuk immun-aktin antitest. A mintákat betöltve Novex Tris-glicin 4-20% gradiens gélek és elektroforézis végeztük NuPAGE elektroforézis rendszer (Invitrogen, USA). A fehérjéket átvittük egy polivinilidén-difluorid (PVDF) membránra (Sigma) következő standard protokoll. A membránokat vizsgáltunk egy 1: 1000 hígítású egér monoklonális antitesttel szemben p53 katalógusa (a PAB 240; AB-26; ABCAM, USA), Bax katalógusa (6A7; ab5714; ABCAM, USA), Securin
(DCS-280; ab3305; ABCAM, USA), β-aktin katalógusa (AC-15; ab6276; ABCAM, USA) és a nyúl poliklonális antitest ellen az NF-κβ P65 katalógusa (ab31481; bcam, USA). A blotokat 3-szor mostuk 10 percig minden egyes TBST-pufferben, pH = 7,6 (1 M Tris-Cl, 5 M nátrium-klorid és 0,05% Tween 20), és inkubáljuk szekunder antitesttel (alkáli-foszfatázzal konjugált anti-egér IgG vagy lúgos-foszfatázzal konjugált anti-nyúl IgG-vel 1: 2000; ABCAM, USA) 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük. Alapos mosás után a blotot merítjük 4 ml szubsztrát oldatot BCIP /NBT (Bangalore GENEI, India). Elegendő festést kapott 15 percen belül. Minden immun végeztük három egér-pont. Katalógusa kórszövettani értékelés katalógusa Gyomor szövetet összegyűjtöttük a kezeletlen kontroll és két RAN + lime kezelt egerek tumor. Egy másik készlet, gyomor szövetet is gyűjtöttünk kezeletlen, valamint a csoportok, hogy a kezelt 300 napig RAN-kivonat és a nélkül mész. Három egereket véletlenszerűen kiválasztott minden csoportban. Ezek az egerek nem voltak arra utaló jeleket, tumor külsőleg. A szöveti metszeteket (5-7 nm) került feldolgozásra szövettani metszetek, mint egy szabványos protokoll [19] és hematoxilin és eozin [20]. Metszeteket ezután figyeltek fénymikroszkóp és fényképezett (Carl Zeiss, Németország). Katalógusa RNS extrakció és a hagyományos RT-PCR analízis katalógusa sejteket összegyűjtöttük karcolás a belső réteg nyelőcső és gyomor kezeletlen kontroll, futott és futott + lime kezelt egér (három egér pont). A csontvelő-sejteket gyűjtöttünk össze a combcsont csont az egér. Teljes RNS-t izoláltunk Trizol, majd tisztítjuk, az RNeasy Mini Kit (Qiagen) alkalmazásával a gyártó protokollja. A reverz transzkripciót végeztünk 1 ng teljes RNS-t minden egyes mintából Quantiscript reverz transzkriptáz Quantiscript RT-puffert és RT Primer-mix QuantiTect reverz transzkripciós készlet (Qiagen GmbH, Hilden, Németország), a gyártó protokollja szerint. CDNS megsokszorozása végeztek 20 ul tartalmazó oldat 2 ul cDNS, 10 pmol primer párok aurora A, aurora B, Mad2, Bub1 és GAPDH (primer szekvenciák, lásd Kiegészítő fájl 1: Tudakozó információ) tartalmaznak, majd 10 ul RT qPCR master mix (Qiagen GmbH, Hilden, Németország). A PCR állt kezdeti denaturáció 94 ° C-on 5 percig, majd 30 reakció ciklus (30 másodperc 94 ° C, 30 másodperc 60 ° C-on és 30 másodperc 72 ° C), és a végső ciklusban, 72 ° C-on 10 percig. GAPDH használtunk belső ellenőrzés. Valamennyi PCR-terméket elektroforetikusan elválasztott etídium-bromiddal festett agaróz gélen, és láthatóvá tételéhez UV fényt.
Áramlási citometriás elemzését sejtek katalógusa egér csontvelő sejtek, és a sejteket összegyűjtjük karcolás a belső réteg a nyelőcső és a gyomor mindkét kezeletlen és kezelt 260 napig RAN vagy anélkül lime fixáltuk 70% -os etanollal. Gyomor tumorsejtek is gyűjtöttünk és rögzített. A fixált sejteket PBS-ben mostuk, és újra szuszpendáljuk 500 pl propidium-jodid-oldatot (50 ug /ml propidium-jodid, 0,2 mg /ml RN-áz) 1 órán át szobahőmérsékleten sötétben. 10.000 sejtet szerzett minden egyes minta és elemeztük FACS Calibur (Becton-Dickinson). CELLQuest Pro szoftverrel végeztük számszerűsíteni sejtciklus rekeszek megbecsülni a sejtek százalékát elosztva a különböző sejtciklus fázisok.
Annexin V címkézés tanulmányok
apoptotikus alkalmazásával értékeltük Annexin V-fluoreszcein-izotiocianát módszer a gyomorban tumorsejtek és szintén a belső réteg a sejtek a gyomor és a nyelőcső a kezeletlen és a RAN és anélkül lime kezelt egér után 260 napos folyamatos administeration. A sejtüledéket újra szuszpendáljuk PBS-ben. A sejteket propidium-jodiddal festettük és Annexin-V-FITC használatával BD PharmingenTM Annexin V: FITC Apoptosis Detection Kit (BD-Pharmingen Biosciences, San Diego, CA), mint egy gyártó előírásainak megfelelően. Röviden, összegyűjtése után és mosás kétszer PBS, a sejteket újra felszuszpendáltuk a kötődési pufferben (500 ul). FITC-Annexin-V (5 ul) adtunk a sejtekhez, majd hozzáadunk 5 ul PI protokoll szerint. A mintákat ezután 15 percig inkubáljuk sötétben szobahőmérsékleten, és utána áramlásos citometriával mértünk értékelést.
Statisztikai analízis
Az értékeket átlag ± SEM vagy átlag ± SEM kontroll- és a kísérleti mintákat és statisztikai analízist végeztünk Student-féle t teszt GraphPad Prism szoftver 5.1. Az értékeket statisztikailag szignifikánsnak tekintettük, ha ap érték 0,05 vagy annál kevesebb. Katalógusa Eredmények katalógusa Általános észrevételek
Out tizenöt egerek két egereknek gyomorrák után 220 és 256 napon át tartó etetés RAN kivonat mésszel (2A ábra a és b). Nem tumor alakult egér, illetve kezeletlenül beadni RAN csak. A szövettani metszetben világosan megkülönböztetik a normál (2A ábra c) és tumoros gyomor (2A ábra d-f). Azonban hisztológiai készítménye gyomor szövetet is készült három látszólag normális látszó egereket véletlenszerűen kiválasztott ebből a csoportból után 300 nappal a etetése RAN-kivonat és a nélkül mész. Mindkét RAN és anélkül lime megmutatta, hogy képes rákot a gyomorban. Háromból két kezelt egerek csak futott mutatta, rákot megelőző stádiumban (diszplázia), mivel mind a három kezelt egerek RAN ​​+ mész kimutatta karcinóma (2b ábra). 2. ábra boncolt egér és kórszövettani mind normális és tumorszövetben gyomor kezelést követően RAN és a nélkül mész. A. boncolt egér (a) normál gyomor és (b) daganatos gyomor nyíllal. Kórszövettani normál (C) és a tumor a gyomor (d, e és f) által indukált RAN kivonat mésszel. A nyilak jelzik elfekélyesednek neoplazma (D) és a tumor óriás sejtek (E és F). A nagyítás jelzi akár 10X vagy 40X. B. Hisztopatológia normál és tumoros gyomor egerek következő futott és futott + mész kezelés 300 nap. Minden panel, "Normal" azt jelzi, egerek tumor nem "diszplázia" jelzi egerek rákmegelőző gyomor szöveteit. "Carcinoma" jelzi egerek tumoros gyomorban. Diszplázia mutatja anisokaryosis (méretvariációt atommagok) és anisocytosissal (méretvariációt sejtek). A nagyítás jelzi akár 10X, 40X és 100X.
Tanult metafázisos terjed katalógusa Annak eldöntésére, hogy a folyamatos administeration RAN kivonat (15-180 nap) vagy anélkül mész bármilyen hatást a kromoszómák vizsgáltuk metafázis kenhető , 2 óra eltelte után a kezelés kolhicinnel, csontvelő mintákban. Méréseink szerint fokozatos növekedése mitotikus alakok korán elválasztott testvér kromatiddal (3A és C) egyaránt futott és futott + lime beadott egér képest sem a kezeletlen egerekben. Az is világos, a tanulmány RAN + mész beadott egér csontvelő szignifikánsan nagyobb gyakorisággal, mint koraérett anafázist mint csak futott be (3A). 180 nap után folyamatos administeration RAN + mész, 34,4% koraérett anafázist képest 18,4% -kal (p = 0,002) a RAN-beadott egér BMC látták. 3. ábra kariotípus analízis a genomikus instabilitás csontvelősejtjeiben egér expozíció után a RAN extraktum (RAN + L) vagy a nélkül mész (RAN). (A) aránya metafázisokat idő előtti testvér-kromatid szétválasztás. Két egér pontonként kezeletlen, 15 és 30 napos kezelt csoport és három egér pont a többit. Legalább 100 metafázist értékeltünk minden egérnek. (B) Normál metafázis terjedt egér csontvelő sejtekben. (C) Korai testvér-kromatid elszakadás egér kitett RAN. Zárójelben testvér-kromatiddal fekvő szeparált mitotikus adatok azt mutatják, a fenotípus. (D és E) Metaphase terjedését mutatta, 37. és 38. kromoszómát, ill. (F, G és H) Metaphase terjedését mutatta, több, mint 60 kromoszómák. (I) kimutatta, több mint 80 kromoszómája van. Katalógusa Mi számít a kromoszómaszámát metafázisban terjed, hogy megértsék a jelentőségét koraérett anaphases kapcsolatban kromoszóma stabilitást. A kezeletlen egerek egy stabil (2n = 40) kariotípusú (3B, ábra), és nem mutat semmilyen aneuploid sejteket. Mi nem megfigyelni alacsony gyakorisága az aneuploid sejtek (ábra 3D-I; 1. táblázat) A RAN-beadott, és anélkül mész, 120 napig, és azt is megjegyezték, hogy a frekvencia aneuploid sejtek fokozatosan növeltük. Az átlagos gyakorisága (13,8%) az aneuploid sejtek szereznek mind a gyomor tumoros egerek. Összességében gyakorisága aneuploid sejtek több alábbi RAN + lime administeration mint RAN egyedül (1. táblázat) .table 1 kromoszóma analízis egér csontvelő sejtek expozíció után RAN kivonat vagy anélkül lime katalógusa kezelés minta katalógusa
kezelés nap Matton Összesen terjedését szerezte Matton kromoszóma nincs. Matton aneuploidia Matton Koraszülött testvér

37 Matton 38 Matton 39 Matton 40 Matton 41 Matton 42 Matton > 60 katalógusa
% (átlag) Matton Chromatid elválasztás% Matton Kezeletlen katalógusa 0 katalógusa 110 katalógusa 110 katalógusa 0 katalógusa 0 katalógusa 104 katalógusa 104
0
0 katalógusa RAN katalógusa 120 katalógusa 105 katalógusa 1 katalógusa 1 katalógusa 103 katalógusa 1.9 katalógusa 17,5 katalógusa 120 katalógusa 2
1 katalógusa 2

• Kifejezése egy LINE-1 endonukleáz variáns gyomorrák: a szövetség a klinikopatológiai parameters
• Gyomorvédő mechanizmusa Paederia foetida Linn. (Rubiaceae) - a népszerű ehető növény által használt törzsi közösség Észak-Kelet India