Uttrykk og kliniske betydningen av lange ikke-kodende RNA HNF1A-AS1 i human magekreft

Uttrykk og kliniske betydningen av lange ikke-kodende RNA HNF1A-AS1
i human magekreft
Abstract
Bakgrunn
Økende bevis har vist at lange ikke-kodende RNA (lncRNAs) spiller viktige roller i forekomsten og utvikling av kreft hos mennesker, inkludert magekreft (GC). Imidlertid er den funksjonelle og kliniske betydningen av lncRNAs fortsatt dårlig forstått.
Metoder
I denne studien ble det uttrykk for LncRNA HNF1A antisense RNA 1 (HNF1A-AS1
) først undersøkt av lncRNAs microarray analyse i 6 GC vev, og deretter ble ytterligere bekreftet ved sanntids kvantitativ revers transkriptase PCR (QRT-PCR) både i 3 GC cellelinjer og 161 tilfeller av GC vev. Vi vurderte også sammenhengen mellom HNF1A-AS1
uttrykk og clinicopathological funksjoner hos pasienter med GC.
Resultater
LncRNAs microarray analyseresultatene viste at HNF1A-AS1
ble nedregulert i GCS vev (bety ganger endring 2,06 , p
< 0,05), som ble ytterligere bekreftet ved QRT-PCR. Resultatene fra QRT-PCR viste at ekspresjon av HNF1A-AS1
var ikke bare nedregulert i tre GC cellelinjer (AGS, BGC-823, og MKN-45) i forhold til den i en normal gastrisk mucosal epitelcellelinje ( GES-1), men også redusert i GC vev i forhold til det i sammenkoblet tilstøtende ikke-neoplastiske vev (lav ekspresjon, 94 av 161, lav ekspresjon sats, 58,38%). Videre lav HNF1A-AS1
uttrykk var assosiert med tumor størrelse /diameter (p
= 0,005, multivariat analyse), nivåer av serum carcinoembryonic antigen (CEA), og karbohydrat antigen 19-9 (CA19-9), og RRM1 uttrykk i vevsprøver (p
= 0,028, p
= 0,009 og p
= 0,006, henholdsvis).
Konklusjoner
samlet våre data indikerer at lncRNA HNF1A-AS1
kan være en regulator av GC, og dermed det kan ha potensial som en roman biomarkør og behandling mål for denne typen kreft.
nøkkelord
Magekreft kreft~~POS=HEADCOMP lncRNA HNF1A-AS1
Biomarker Bakgrunn
mage~~POS=TRUNC kreft~~POS=HEADCOMP (GC) er en av de mest vanlige kreftformer, og kan forekomme i en hvilken som helst del av magesekken hos mennesket. Disse svulstene er ofte ondartede og har muligheten til å invadere perinevral vev [1]. Data fra den nyeste globale årlige undersøkelsen har vist at det er nesten 1 million nye tilfeller og 740.000 dødsfall fra denne kreft per år på verdensbasis. Forekomsten av GC i Kina er høyere enn i de fleste land i verden, med mer enn 400.000 nye tilfeller hvert år og ca 300.000 dødsfall. Studier har vist at hvis denne sykdom kan diagnostiseres på et tidlig stadium, kan god prognose oppnås ved fullstendig kirurgisk fjerning av den primære tumorvevet [2]. Dessverre, pasienter med GC vise noen symptomer i tidlige stadier av sykdommen og diagnosen er vanligvis vanskelig. Den 5-års overlevelse av GC ved fremskredne stadier forblir fattige og er sta på ca 30% [3]. Cancer biomarkører tillate kreft som skal diagnostiseres, og kan tjene som terapeutiske mål, så vel som kan brukes til å utforske patogenesen av sykdommen; Derfor vil identifisering av kreft biomarkører være av stor verdi.
lange ikke-kodende RNA (lncRNAs) er ikke-kodende RNA høyere enn 200 nukleotider [4]. Disse RNA ikke koder for proteiner, og er hovedkomponentene i den menneskelige transkriptomet [5]. Emerging bevis indikerer at lncRNAs er viktige regulatoriske molekyler som viktigste funksjoner er knyttet til modulering av genekspresjon nettverk [6]. Mange av disse nettverkene er nært knyttet til kreftutvikling og progresjon [6-9]. Data fra ulike grupper har fastslått at endringer i ekspresjonen av lncRNAs er relatert til patogenesen av forskjellige humane kreftformer. Nyere funn fra Wang et al., Song et al., Og Shao et al. har vist at endringer i uttrykket profiler av lncRNAs er knyttet til magekreft karsinogenese og progresjon og som lncRNAs kan brukes som tidligere biomarkører eller som behandlings mål for GC [10-12].
For å identifisere de unormale ekspresjon av tumorrelaterte LncRNAs og de LncRNAs med potensielle verdier som biomarkører, i denne studien, ble utført lncRNAs uttrykk profilen microarray analyse i seks GC vev og deres sammenkoblede tilstøtende ikke-neoplastiske mage vev. LncRNA HNF1A antisense RNA 1 (HNF1A-AS1
) var en av de LncRNAs som ble identifisert til å bli nedregulert i GC vev av microarray analyse. HNF1A-AS1
, en enkelt-ekson-genet ved bånd 12q24.31 av kromosom 12, er en toveis lncRNA av 2455 nukleotider [13]. Transkripsjonsstartsetet av denne lncRNA er svært nær det av lever nukleær faktor en alpha-genet (HNF1A
; HNF1A-AS1
's start nettstedet er omtrent 5 kb nedstrøms HNF1A
) [13]. Så vidt vi vet, er fortsatt uttrykk for HNF1A-AS1
i GC vev urapportert. Derfor, i dette arbeidet, vi fast bestemt på uttrykket nivåer av HNF1A-AS1
i 3 GC cellelinjer og i 161 tilfeller av GC vev og deres sammenkoblede tilstøtende ikke-neoplastiske mage vev. Vi har også undersøkt muligheten sammenheng mellom uttrykk for HNF1A-AS1 Hotell og clinicopathological funksjoner hos pasienter med GC. Våre data viser potensialet i denne lncRNA som en roman biomarkør og en behandling mål for GC.
Metoder
Vevsprøver og klinisk datainnsamling
Ett hundre og seksti ferske paret vevsprøver (GC vev og ikke -neoplastic vev som er samlet 5 cm fra kreften kanten) ble hentet fra Fuzhou General Hospital, Fujian, Kina, i 2014 og 2015. Alle prøvene ble tatt umiddelbart etter kirurgisk operasjon og bevart i RNAlater (Qiagen, Tyskland) ved -80 ° C inntil bruk. Serumprøver som brukes for påvisning av serum tumor biomarkører og prøvene parafininnstøpte vev som benyttes for påvisning av de immunhistokjemiske markørene ble også samlet fra de samme pasientene. Hver vevsprøve ble histopathologically diagnostisert og bekreftet av minst to patologer. Standardene for tumor-node-metastaser (TNM) stadium og histologisk grad var i tråd med retningslinjene fra International Union Against Cancer (UICC, femte Ed) og National Comprehensive Cancer Network (NCCN) klinisk praksis retningslinjer i Oncology (V. 1,2011), respektivt. Ingen av pasientene fikk behandling før reseksjon.
Etikk uttalelse
Informert samtykke ble innhentet fra alle individuelle deltakere inkludert i studien, og denne studien ble godkjent av etikkomiteen i Fuzhou General Hospital.
LncRNAs microarray analyse Bedrifter den lncRNAs mikromatriser brukt i denne studien var human lncRNAs Microarray V3.0 (Arraystar Inc., MD, USA), som var sammensatt av lncRNAs og mRNA fra det menneskelige genom. lncRNAs microarray analyse og dataanalyse ble utført av KANGCHEN Bio-tech (Shanghai, Kina) basert på produsentens instruksjoner.
Cell kultur
AGS, BGC-823, og MKN-45 GC cellelinjer og normal menneskelige mage epiteliale cellelinje (GES-1) ble oppnådd fra American Type Culture Collection, Manassas, VA, Shanghai Institute of Biochemistry og cellebiologi, Chinese Academy of Sciences i Shanghai, Kina, japansk Cancer Research Bank og Beijing Cancer Institute ( Beijing, Kina), henholdsvis. Cellene ble dyrket i F12, RP1640, eller DMEM-medium (Invitrogen, Grand Island, NY, USA), inneholdt alle 10% føtalt bovint serum, i en inkubator ved 37 ° C med 5% CO 2.
Total RNA ekstraksjon og QRT-PCR
Total RNA ble isolert fra både vev og dyrkede celler ved hjelp TRIzol reagens (Invitrogen). Revers transkripsjon ble deretter utført ved hjelp av en Reverse Transcription kit (Promega) i henhold til produsentens instruksjoner. Real-time kvantitativ revers transkripsjon PCR (QRT-PCR) ble utført ved hjelp av SYBR Grønn Mix kit (Promega, Madison, WI, USA) i et trinn en real-time PCR System (ABI, Grand Island, NY, USA) . De primere for 18s og HNF1A-AS1
qPCR var som følger: (fremover) 5'-TCAAGAAATGGTGGCTAT-3 'og (revers) 5'-GCTCTGAGACTGGCTGAA-3' for HNF1A-AS1
; (Fremover) 5'-AGAAACGGCTACCACATCCA-3 'og (revers) 5'-CACCAGACTTGCCCTCCA-3' for 18 år. Betingelsene for PCR var som følger: trinn 1, 95 ° C i 10 min; trinn 2, 40 sykluser ved 95 ° C i 15 s, 57 ° C i 1 min; trinn 3 (dissosiasjon stadium), 95 ° C i 15 s, 60 ° C i 15 s, 95 ° C i 15 sekunder. Den registrerte syklus terskel (CT) verdiene inkludert både HNF1A-AS1 Hotell og 18 s; den sistnevnte tjente som en kontroll. Ekspresjonsnivået av HNF1A-AS1
ble oppnådd ved hjelp av ΔCt metode. Høyere ΔCt verdier indikerte lavere HNF1A-AS1
uttrykk. Resultatene ble oppnådd fra tre uavhengige eksperimenter og uttrykt som gjennomsnitt ± standard avvik (SD).
Måling av AFP, CA-125, CEA, og CA19-9 konsentrasjoner i serum fra pasienter med GC
Konsentrasjonene av alfa-fetoprotein (AFP), karsinoembryonalt antigen (CEA), kreft antigen 125 (CA-125), og karbohydrat antigen 19-9 (CA19-9) ble påvist i serum av alle av 161 tilfeller av denne gruppen pasienter ved hjelp den kvantitative Kit for Tumor Marker (Protein Chip-Chemiluminescence) (HealthDigit, Huzhou, Kina) med HD-2001a ChipReader System (HealthDigit). I denne studien normale referanseverdier for friske individer var < 20,0 ng /ml, < 5,0 ng /ml, < 35,0 U /ml og < 35,0 U /ml for AFP, CEA, CA-125, og CA19 -9, respektivt.
IHC
Vi brukte immunhistokjemi (IHC) i parafininnstøpte seksjoner for å bestemme ekspresjon av vaskulær endotelial vekstfaktor (VEGF), human epidermal vekstfaktor-reseptor 2 (C-erbB-2 eller HER2 ), tymidylatsyntase (TS), brystkreft 1 (BRCA1), excision reparasjon cross-komplemente gruppe 1 (ERCC1), Ki67 antigen (Ki67), og ribonukleotidreduktase subenhet M1 (RRM1), synaptophysin (Syn), nervecelle adhesjonsmolekyler (CD56), og kromogranin A (CGA); 150 tilfeller av parafininnstøpte vevsprøver av denne gruppen pasienter var tilgjengelige for IHC-analysen. IHC ble utført av patologer i samsvar med instruksene fra produsentene. Antistoffene og andre reagenser for IHC som brukes i dette arbeidet ble kjøpt fra Maixin (Fujian, Kina) og ZSGB-BIO (Beijing, Kina). Med unntak av Ki67, ble intensiteten av fargingen gradert fra 0 til 4, der 0 er ingen farging; 1, mindre enn 25% av cellene positive; 2, 25 til 50% av cellene positive; 3, er 51 til 75% av cellene positive; og 4, > 76% celler positive. For Ki67, ble karakterene direkte dømt som den prosent positive for Ki67 uttrykk. Glassene ble gradert av minst to patologer.
Statistisk analyse
Statistiske Program for samfunnsvitenskap (SPSS) 16,0 programvare (SPSS, Chicago, IL, USA) og GraphPad Prism 5.0 (GraphPad Software, LaJolla, CA, USA ) ble anvendt for alle statistiske analyser. Enveis variansanalyse (ANOVA), rang-sum test, og Student t
test var viktigste statistiske metoder som brukes i dette arbeidet, p
< 0,05 ble ansett som statistisk signifikant.
Resultater
LncRNAs microarray analyse utstillinger som HNF1A-AS1
uttrykk er nedregulert i GCS vev
Som vist i fig. 1, resultatene av lncRNAs ekspresjonsprofilen mikromatriseanalyse fått fra seks GC vev og deres sammenkoblede tilstøtende ikke-neoplastiske gastrisk vev viste at HNF1A-AS1
ekspresjon ble nedregulert i alle de seks GC vev (bety ganger endring 2,06, p
< 0,05), som indikerte at dette lncRNA kan ha potensial til å bli en av de kreftrelaterte LncRNAs. Derfor valgte vi det for videre analyse. Fig. 1 HNF1A-AS1
ble downexpressed i seks GC vev identifisert ved lncRNAs microarray analyse. 84C, 83C, 87C, 78C, 97C og 90C indikert seks GC vev (84, 83, 87, 78, 97, og 90 var de seks tilfeller av vev nummer, C
kreft); 83n, 87n, 90n, 78n, 97N, og 84n angitte seks tilsvarende sammenkoblede tilstøtende ikke-neoplastiske mage vev (N
ikke-neoplastiske mage vev). Cluster analyse basert på microarray resultatene viste at HNF1A-AS1
uttrykk i GC vev ble nedregulert sammenlignet med den sammenkoblede røyk neoplastiske mage vev (gjennomsnittlig ganger endring 2,06, p
< 0,05)
qRT- PCR verifikasjon bekrefter videre at HNF1A-AS1
uttrykk er nedregulert i GC cellelinjer og vev
Vi først undersøkt uttrykk for lncRNA HNF1A-AS1
i tre GC cellelinjer: AGS, BGC-823, og MKN -45. Ved å bruke QRT-PCR, bekreftet vi at uttrykket av HNF1A-AS1
var betydelig redusert i alle tre GC cellelinjer i forhold til at i normale mage epitelceller (GES-1 celler, AGS, p
< 0,0001; BGC-823, p
< 0,05; MKN-45, p
< 0,05, fig. 2). Vi har også undersøkt HNF1A-AS1
uttrykk i GC vevsprøver og paret tilstøtende ikke-neoplastiske vevsprøver. Våre resultater viste at HNF1A-AS1
ble nedregulert på 58,38% (94/161) av GC vev i forhold til det i de ikke-neoplastiske vev (p
< 0,01, Fig. 3). Samlet utgjør disse dataene indikerer at HNF1A-AS1
er nedregulert i menneskelig GC. Fig. 2. Redusert ekspresjon av HNF1A-AS1
i GC-cellene i forhold til den normale gastriske epitel-celler. QRT-PCR ble brukt til å sammenligne uttrykket av HNF1A-AS1
i BGC-823, MKN-45, og AGS GC celler som for ikke-neoplastiske GES-1 celler. Data som vises er fra tre uavhengige eksperimenter og uttrykt som gjennomsnitt ± SD. Stjernene
indikerer verdier med en statistisk signifikant forskjell kontra verdien i GES-1 celler. * P
< 0,05, **** p
< 0,0001. GC
magekreft, QRT-PCR
kvantitativ real-time PCR, SD
standardavvik
Fig. 3 Uttrykk for HNF1A-AS1
i neoplastiske og ikke-neoplastiske mage vev. Ekspresjonen av HNF1A-AS1
i GC-vev ble sammenlignet med den i tilgrensende ikke-neoplastiske vev (n =
161, ** p
< 0,01). T
GC vev, N
ikke-neoplastiske vev. Data som vises er fra tre uavhengige eksperimenter og uttrykt som gjennomsnitt ± SD (ΔCt verdi). GC
magekreft, SD
standardavvik
Association of HNF1A-AS1
uttrykk med clinicopathological funksjoner i pasienter med GC
å vurdere den kliniske betydningen av HNF1A-AS1
, vi analysert forholdet mellom dets ekspresjon og clinicopathological funksjoner hos pasienter med GC. Som vist i tabell 1 og 2, viste den univariate analysen at uttrykket av HNF1A-AS1
var assosiert med tumor størrelse /diameter (p
= 0,002), invasjon dybde (T etapper, p
= 0,032 ), lymfatisk metastase (N etapper, p
= 0,006), vene invasjon (p
= 0,001), og perinevral invasjon (PNI, p
= 0,014). Imidlertid, etter kontroll påvirke faktorer, inkludert alder, kjønn, tumor plassering, tumor størrelse /diameter, differensiering, invasjon (t etapper), lymfatisk metastase (N etapper), venøs invasjon, og PNI, den multivariate analysen bekreftet videre at tumorstørrelse vedvarte i være signifikant korrelert til HNF1A-AS1 uttrykk (p
= 0,005), noe som medførte at pasienter med tumorstørrelse ≥ 5 cm hadde lavere nivåer av HNF1A-AS1. Disse data tyder på at HNF1A-AS1
kan spille roller under kreftforekomst og progresjon, og kan være en ny biomarkør av mage cancer.Table en Association of HNF1A-AS1 uttrykk (ΔCt) med clinicopathological funksjoner i pasientenes
Kjennetegn

No. av saken (%)
Mean ± SD
p
verdi
Alder (år)
0,119
≥60
82 (50.9 )
16.17 ± 2.90
< 60
79 (49,1)
15.47 ± 2.71
Kjønn
0,688
Mann fra 123 (76,4)
15,78 ± 2.88
Kvinne
38 (23,6)
15.99 ± 2.66
Tumor plassering
0,560
Sinus ventriculi
57 (35,4)
16,06 ± 3,13
Cardia
33 (20,5)
15.87 ± 3.04
corpora ventriculi
45 (28,0)
15,92 ± 2,50
Andre
26 (16,1)
15.11 ± 2.36
diameter (cm)
0,002
≥5
73 (45,3)
16,59 ± 2,8
< 5
88 (54,7)
15,2 ± 2,70
Differensiering
0,396
Vel
2 (1,2)
16,15 ± 0,71
Moderat
34 (21,1)
15.24 ± 2.66
Dårlig
125 (77,7 )
15.98 ± 2.87
Invasion
0,032
T1
13 (8,1)
16.13 ± 1.95
T2
14 (8,7)
14.09 ± 2,24
T3
16 (9,9)
14.85 ± 3.71
T4
118 (73,3)
16.13 ± 2.76
lymphatic metastase
0,006

N0
38 (23,6)
14.74 ± 2.77
N1-3
123 (76.4)
16.16 ± 2.76
venøs invasjon
0,001
Fraværende
86 (53,4)
15.14 ± 2.58
Presenter
75 (46,6)
16,61 ± 2,90
perinevral invasjon (PNI)
0,014
Fraværende
89 (55,3)
15,34 ± 2,77
Presenter
72 (44,7)
16.43 ± 2.79
CEA
0,028
Normal
130 (80,7 )
15,59 ± 2,74
Høy
31 (19,3)
16.83 ± 2.97
CA19-9
0,009
140 (87,0)
15.60 ± 2.70
Høy
21 (13,0)
17,32 ± 3,22
AFP
0,936
Normal
150 (93,2)
15,82 ± 2,80
Høy
11 (6,8)
15,89 ± 3,25 hoteller, CA-125
0,494
Normal
154 (95,7)
15,79 ± 2,84
Høy
7 (4,3 )
16,55 ± 2,33
Kursiv verdier er signifikante på p
< 0,05
Tabell 2 Sammenligning av p
verdier hentet fra univariate og multivariate analyser av foreningen av HNF1A-AS1 uttrykk (ΔCt) med clinicopathological funksjoner i pasientenes
Kjennetegn
Univariat

Multivariate
p
verdi
p
verdi
Alder (år)
0,119
0,197
Kjønn
0,688
0,174
Diameter (cm)
0,002
0,005
Differensiering
0,396
0,603
Invasion
0,032
0,580
Lymfatisk metastase
0,006
0,235
venøs invasjon
0,001
0,057
perinevral invasjon (PNI)
0,014
0,192
Tumor plassering
0,560
0,342
Kursiv verdier er signifikante på p
< 0,05
Association of HNF1A-AS1
uttrykk med serum eller immunhistokjemiske markører for GC
HNF1A-AS1
uttrykk i GC vev var assosiert med to blodprøver av fordøyelseskanalen svulster, CEA (p
= 0,028) og CA19-9 (p
= 0,009), men det var ingen signifikant sammenheng med andre fordøyelseskanalen kreft serum markør AFP eller med epitelial tumor markør CA125 (tabell 1). Ekspresjonen av HNF1A-AS1
i tumorprøver ble også signifikant korrelert med én immunhistokjemiske markører for cancer, RRM1 (p
= 0,006), men ikke med VEGF, C-erbB-2, TS, BRCA1, ERCC1, Ki67, CD56, Syn, eller CGA (tabell 3) .table 3 Association of HNF1A-AS1 uttrykk (ΔCt) med immunohisochemical funksjoner i GC vev
Kjennetegn
No. av saken (%)
Mean ± SD
p
verdi
VEGF
0,809
0
15 (10,0)
15.27 ± 3.69
1 22 (14,7)
15.57 ± 2.92
2
33 (22,0)
15.83 ± 2.72
3
59 (39,3)
15,94 ± 2,54
4
21 (14,0)
16.39 ± 3.32
C-erbB-2
0,312
0
129 (86,0)
15,70 ± 2,84
1 5 (3,3)
16.37 ± 2.96
2
4 (2,7)
15.77 ± 1.01
3
12 (8,0)
17,30 ± 3.21
TS
0,543
0
22 (14,7)
16,41 ± 2,45
1 53 (35,3)
15.99 ± 2.97
2
52 (34,7)
15,33 ± 2,73
3
21 (14,0)
16.25 ± 3.34
4
2 (1,3)
15.92 ± 1.82
BRCA1
0,893
0
10 (6,7)
16,59 ± 1,83
1 31 (20,7)
16,07 ± 2,91
2
73 (48,6)
15.78 ± 2.57
3
34 (22,7)
15.61 ± 3.57
4
2 (1,3)
15.77 ± 5.01
ERCC1
0,585
0
19 (12,7)
15.81 ± 2.39
1 22 (14,7)
16,51 ± 3,61
2
44 (29,3)
15,96 ± 2,85
3
41 (27,3)
15.85 ± 3.05
4
24 (16,0)
15.11 ± 2.02
RRM1
0,006
0
81 ( 54,0)
15,79 ± 2,41
1 10 (6,7)
13.27 ± 4.11
2
17 (11,3)
15.51 ± 3.08
3
35 (23,3)
16.98 ± 2.93
4
7 (4,7)
15.48 ± 2.67
Ki67
0,328
1 14 (9,3)
16,54 ± 1.67
2
35 (23,3)
16.44 ± 2.79
3
57 (38,0)
15.48 ± 2.97
4
44 (29,4)
15.66 ± 3.02
Syn
0,463
0
128 (85,3)
15.99 ± 2.95
1 16 (10,7)
15.15 ± 2.17
2
3 (2,0)
13.98 ± 0.87
3
3 (2,0)
15,59 ± 3,06
CD56
0,364
0
137 (91,4)
15.94 ± 2.86
1 9 (6,0)
15.66 ± 3.09
2
2 (1,3)
12.72 ± 0.84
3
2 (1,3)
14.22 ± 0.97
CGA
0.980
0
141 (94,0)
15.87 ± 2.91
1 7 (4,7)
15,69 ± 1,83
2
2 (1,3)
15.63 ± 3.26
Kursiv verdier er signifikante på p
< 0,05
Diskusjon
Flere linjer av bevis har vist at endringer i uttrykket av lncRNAs spiller viktige roller i kreftutvikling og kreftutvikling [14, 15] og at endret uttrykk for lncRNA er kjent for å være signifikant assosiert med flere clinicopathological funksjoner humane tumorer, slik som lymfeknutemetastase, TNM stadium, fjern metastase, og karakteren av vev differensiering. For eksempel, redusert uttrykk for magekreft-forbundet transkripsjon 1 (GACAT1
) er signifikant assosiert med metastase, invasjon, og vev differensiering hos pasienter med GC [16]. I tillegg er forhøyet ekspresjon av homeobox (HOX) transkript antisans-RNA (hotair
), en lang intergeniske ikke-kodende RNA, forbundet med karakteren av endometrial karsinom (EC), metastase, dybden av myometrial invasjon, og dårligere total overlevelse [17]. Til slutt blir lav ekspresjon av HMlincRNA717
i GC forbundet med distal metastase og invasjon av det venøse og nervesystemer [12]. Alle disse funnene er bevis for de viktige rollene lncRNAs i kreftutvikling og av den potensielle verdien i deres kliniske anvendelse.
I denne studien har vi fastslått at uttrykket nivået av HNF1A-AS1
i tre magekreft cellelinjer ble signifikant redusert i forhold til den normale gastriske epitel-celler. Enda viktigere, det ble nedregulert på 58,38% av gastriske prøver cancer vev i forhold til det i tilgrensende ikke-neoplastiske vev. Funnene fra Yang et al. viser at dette lncRNA ble oppregulert i esophageal adenokarsinom (EAC) [13]. Karsinogenese og progresjon av kreft er en kompleks patologisk prosess som medieres av genuttrykk nettverk. Kreftforekomst i forskjellige organer eller vev kan reguleres ved differensielt uttrykte nivåer av de samme genene eller de samme lncRNAs [18, 19]. Dette kan forklare hvorfor HNF1A-AS1
viser sprikende uttrykk profiler i ulike typer kreftceller. Videre undersøkelser kan være nødvendige for å åpenbare den nøyaktige molekylære mekanisme for disse forskjellene
Det er vel kjent at kreftinvasjon og metastase foregår ofte ved hjelp av tre vanlige veier.: Lymfeknutemetastase, reise gjennom vaskulaturen, og lokal såing og vekst. PNI er en ekstra midler for invasjonen som vanligvis korrelert med lokalt residiv. Fordi lokalt tilbakefall er nært assosiert med dårlig prognose, å identifisere pasienter med høy risiko for PNI har stor klinisk betydning.
Prognose og overlevelse av pasienter med GC, kan også bli påvirket av størrelsen på tumoren, som er relatert til dens tids av vekst. Mindre svulster utviser mindre brudd i magen enn de større svulster. Videre økte dybde av invasjon av større svulster øker sannsynligheten for at det lymfatiske systemet vil bli brutt. Økende lymfeknutemetastase gjør det mulig for kreft til å vokse lettere og resulterer i dårlig prognose.
Både CEA og CA19-9 er velkjente tumor markører som vanligvis er oppregulert i serum eller i vevsprøver fra pasienter med tidlig eller primære ondartede svulster fordøyelseskanalen. RRM1 er ett av de tre kjente humane ribonukleotid-reduktase med funksjonene for regulering kreftcellevekst via formidling av DNA-syntese og reparasjon, og påvisning av ekspresjon av RRM1 i GC vev ved IHC har blitt identifisert til å ha prognostisk betydning hos pasienter med GC [ ,,,0],20].
Konklusjoner
Oppsummert analyserte vi foreningen av uttrykket nivået av HNF1A-AS1
med clinicopathological funksjonene til pasienter med GC. Våre resultater viste at ekspresjon av HNF1A-AS1
var signifikant nedregulert i både GC vev og cellelinjer. Videre ble redusert ekspresjon assosiert med tumor størrelse /diameter og nivåer av serum CEA, CA19-9, og vev RRM1. Disse funnene tyder på at HNF1A-AS1
kan være involvert i undertrykkelse av magekreft forekomst og utvikling, og at den har potensial til å tjene som en ny behandling mål og biomarkør for evaluering av sykdommens alvorlighetsgrad hos pasienter med GC. Fordi utvalgsstørrelsen med denne studien var relativt lite, kan ytterligere bekreftelse være nødvendig for å bekrefte HNF1A-AS1
er sant klinisk verdi.
Erklæringer
Takk
Dette arbeidet ble støttet av Innovasjon Team Foundation Fuzhou General Hospital for Lie Wang (2014CXTD04); Foundation Postdoktor i Fuzhou General Hospital (43853) for Yuan Dang; Foundation National Natural Science of China (Grant nr 81372788), Medical Scientific Research Key Foundation of Nanjing Military Command (nr 11Z032) den, og stiftelsen av Fujian-provinsen (No. 2014J01427) for Qiaojia Huang Natural Science; . Og The Medical Scientific Innovation Foundation of Nanjing Military Command (No. 2013-MS122) for Yinghao Yu
Åpne AccessThis artikkelen distribueres under betingelsene i Creative Commons Attribution 4.0 Internasjonale lisens (http:. //Creative org /lisenser /ved /4. 0 /), som tillater ubegrenset bruk, distribusjon og reproduksjon i ethvert medium, forutsatt at du gir riktig kreditt til den opprinnelige forfatteren (e) og kilde, gi en link til Creative Commons lisens, og angi om endringer ble gjort. Creative Commons Public Domain Dedication waiver (http:. //Creative org /offentlig eiendom /null /1. 0 /) gjelder for data som gjøres tilgjengelig i denne artikkelen, med mindre annet er angitt
Konkurrerer. interesser
forfatterne hevder at de ikke har noen konkurrerende interesser.
forfatternes bidrag
YD utførte eksperimenter og dataanalyse. FL guidet noen eksperimenter. XO, KW, og YL deltok i prøver samlet. YY guidet formalinfiksert parafin-embedded tissue innsamlet og immunhistokjemisk analyse. LW og YW guidet store ferske prøver samlet. LW bidro også til store midler støtte. QH utformet studien. QH og YD skrev manuskriptet. Alle forfattere lese og godkjent den endelige manuskriptet.

• Magekreft cellesupernatanten fører til apoptose og fibrose i de peritoneale vev og resulterer i et miljø som er gunstig for peritoneal-metastaser, in vitro og in vivo
• Er protonpumpehemmere førstevalget for akutt behandling av magesår? En metaanalyse av randomiserte kliniske trials