PLoS ONE: Mangiferin смягчающего Язва желудка в Ишемия /реперфузированной Rats: Вовлечение PPAR-gamma, NF-kB и Nrf2 /HO-1 Signaling Pathways

Абстрактный
<р> Mangiferin (MF), A xanthonoid от Mangifera индики , было доказано, чтобы иметь антисекреторные и антиоксидантными гастрозащитных эффекты против различных желудочных моделей язвенной болезни; Тем не менее, его молекулярный механизм не был ранее выяснен. Таким образом, цель данного исследования состояла в том, чтобы проверить его модулирующее действие на несколько сигнальных путей с использованием модели ишемии /реперфузии в первый раз. Животных обрабатывали с MF, омепразола (OMP), а также транспортное средство. Механистического исследования показали, что МФ опосредованной его гастропротекторный эффект частично через индукции экспрессии Nrf2, HO-1 и PPAR-гамма наряду с downregulating у NF-kB. Удивительно, но эффект МФ, особенно в высоких дозах, которые превышали опосредовано OMP за исключением Nrf2. Молекулярные результаты были отражены на биомаркеры измерений, где антиоксидантный эффект МФ проявившаяся за счет увеличения общей антиоксидантной способности и глутатион, помимо нормализации уровня малонового диальдегида. Кроме того, MF уменьшил /повышение оксида азота R-индуцированных I, эффект, который был лучше, чем у OMP. В сыворотке крови, МФ, зависимости от дозы, усиленной эндотелиальной синтазы окиси азота, а уменьшил индуцируемой изоформы. Что касается противовоспалительного эффекта МФ, он уменьшил уровень в сыворотке крови IL-1 и С.Е.-селектина, эффекты, которые были продублированы на тканевом уровне миелопероксидазы, нейтрофильной инфильтрации маркера. Кроме того, М. Ф. обладал антиапоптотическим характер подтверждается путем повышения уровня Bcl-2 и снижения, что каспазы-3 в порядке зависимости от дозы. В заключение отметим, что намекал гастропротекторного механизмы МФ опосредуется, частично, за счет модуляции окислительного стресса, воспаления и апоптоза, возможно, через Nrf2 /HO-1, PPAR-γ /NF-kB сигнальных путей.
<Р> Цитирование : Махмуд-Awny М, Аттиа А.С., Абд-Ellah MF, Эль-Абхар HS (2015) Mangiferin смягчающего Язва желудка в ишемией /реперфузией Rats: Участие PPAR-gamma, NF-kB и Nrf2 /HO-1 сигнальных путей. PLoS ONE 10 (7): e0132497. DOI: 10.1371 /journal.pone.0132497
<р> Редактор: Ашраф B. Abdel-Наим, Фармацевтический факультет, Университет Айн Шамс, ЕГИПЕТ
<р> Поступило: 18 марта 2015 года; Принято: 15 июня 2015 года; Опубликовано: 21 июля 2015
<р> Copyright: © 2015 Махмуд-Awny и др. Это статья открытого доступа распространяется в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution, которая позволяет неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе, при условии, что оригинальный автор и источник кредитуются
<р> Доступность данных: Все соответствующие данные находятся в работе
<р> финансирование:.. авторы не имеют никакой поддержки или финансирования сообщать
<р> конкурирующие интересы:. авторы заявили, что не существует никаких конкурирующих интересов

Введение

Во время язвенной болезни желудка недуг процветание развязок скопились огорчать баланс между разрушительными и защитных мероприятий. Окислительный стресс является ключевым фактором, который порождает язва желудка и приводит к перепроизводству свободных радикалов (FRS) [1]. Ишемия желудка /реперфузией (И /Р) архетип подражает стресс-индуцированной язвы желудка, и в этом случае, надземные FRs, оксид азота (NO) лейкоцитами молекулы адгезии "Е-селектина" [2], нейтрофильной инфильтрации [3], и окислительно-восстановительный дисбаланс [4] играют существенную роль в его патогенезе. Точно так же, ядерный фактор-каппа В (NF-kB), окислительно-восстановительный-чувствительный фактор транскрипции, играет ключевую роль в травмы I /R [5]. Он регулирует экспрессию нескольких генов, ассоциированных с воспалением и повреждения клеток, таких как интерлейкин (IL) -1β, -6, молекул клеточной адгезии и индуцируемой синтазы оксида азота (ИНОС). С другой стороны, несколько факторов, опосредуют их gastroprotection от окислительного повреждения путем уменьшения воспалительной реакции, они включают активатора пролиферации пероксисом рецептора (PPAR) -Г [6, 7] и heamoxygenase-1 (HO-1) [8]. Последнее является индуцибельной изоформы HO, который реагирует на стрессы, такие как окислительный стресс, и он по-прежнему широко рассматривается как защитный механизм против повреждения окислительный ткани [9].
<Р> Один из транскрипционных регуляторов HO-1 ядерный фактор-E2, связанных с фактором-2 (Nrf2) [9], который локализован в цитоплазме, в нормальных условиях и взаимодействует с Keap1 (молекулярный датчик богатый цистеином белок Kelch типа ECH ассоциирования белок 1), чтобы быть быстро деградирует убиквитин-протеосомного пути [10, 11]. Наоборот, в окислительных условиях стресса, Keap1 окисляется и Nrf2 убиквитинирования опущена [11], высвобождая, таким образом, Nrf2 от Keap1. Nrf2 затем перемещается в ядро, чтобы привязывать с антиоксидантной отклика элемента промотора гена-мишени [12, 13], вызывая немедленное трансактивации генов, кодирующих. Эти гены включают многих ферментативных антиоксидант и детоксикации гены, такие как глутатион (GSH) пероксидазы /редуктазы, HO-1 и ГШ S-трансферазы [14].
<Р> Mangiferin (MF), в природе glucosylxanthone, обладает гастропротективное эффект с помощью
своей антисекреторных и антиоксидантной активности, что подтверждается в различных животных моделях язвой желудка [15], но не /модель R I, который является целью настоящей работы. MF было сообщено посредничать его антиоксидантную активность на различных уровнях окислительной последовательности. Он генерирует MF феноксильных радикалы и связывается с ионами металлов (Fe ^{2 + /3 +) в виде стабильного МФ-комплекса железа, который не допускает генерацию гидроксила (ОН) радикалы и /или оксо-феррил группы и убирает мусор липидный пероксигруппу /алкокси-радикалы, тем самым, поддерживая баланс клеточного окисления-антиоксидант [16]. Несмотря на подробные клеточных реакций, описанных, однако, пути молекулярной сигнализации не была решена раньше.
<Р> На молекулярном уровне, настоящее цель состояла в том, чтобы оценить возможную причастность Nrf2 /HO-1, PPAR &gamma и NF -κB сигнальных путей в гастропротекторного эффекта МФ, помимо других биомаркеров очертить возможные механизмы гастрозащитных с помощью /модели реоксигенация гипоксия.}

материалы и методы

Животные
<р> Мужчина Вистар, весом 180-220 г (Научно-исследовательский институт глазных болезней, Гиза, Египет) были сохранены на 12h свет /темнота циклов, постоянных условиях окружающей среды и поддерживали на правильное питание чау и воды вволю
. До начала эксперимента (24 часа) все животные содержались индивидуально в широких сетки нижних клеток и постились. Животные были обработаны в соответствии с руководящими принципами, утвержденными животных по уходу и использованию Комитетом фармацевтического факультета Каирского университета, Каир, Египет (разрешение Number: PT 575). Все были выполнены хирургические процессы под тиопентала анестезией, и все усилия были сделаны, чтобы свести к минимуму страдания.

Препараты
<р> Mangiferin [MF] был приобретен у фирмы Sigma-Aldrich Chemical Company (Сент-Луис, Миссури, США) и омепразол [ОМР] от Chemo SA (Лугано, Швейцария). Все другие химические вещества и реагенты, используемые были аналитической степени чистоты. МФ и ОМР растворяли в физиологическом растворе для инъекции внутрибрюшинно.

Индукция слизистой желудка ишемии /реперфузии (I /R), и лечение
<р> Модель /Р была выполнена в соответствии с методом, ранее описанный Котани и соавт. [17] с некоторыми изменениями. Если коротко, то под анестезией (тиопентал 50 мг /кг, внутрибрюшинно), крыса глютеновая артерии пережимают в течение 30 мин., После чего при реперфузии было разрешено в течение 72 часов с помощью освобождения зажима артерии. Крысы были распределены на 5 групп (п = 7-9); Животных в первой группе получали физиологический раствор и глютеновая артерии была обработана без зажима, чтобы служить в качестве ложнооперированными контрольной группы. Крысы в ​​следующих группах были подвергнуты I /R; необработанный (второй) группе, получали физиологический раствор, и был обозначен в качестве положительного контроля (I /R), в то время как остальные 3 группы обрабатывали, с MF (10 мг /кг; MF <суб> 10, третья группа), MF ( 20 мг /кг; М.Ф. <суб> 20; четвертая группа), и ОМР (20 мг /кг; ОМР <суб> 20; пятая группа). Все процедуры были выполнены через 30 мин. до операции и в течение 3 дней после реперфузии.

Гистопатологические исследования
<р> Желудок, от трех представительных животных в каждой группе, сразу же погружают в 10% формалине-солевой раствор, заливали в парафин и 5 мкм секций были подготовлены, окрашивали гематоксилином и эозином (H &Amp; E), и исследовали под микроскопом

Биохимические измерения
<р> в конце времени реперфузии и при глубокой анестезии эфиром, собирали кровь из. яремной вены для подготовки образцов сыворотки, а затем животные были умерщвлены, и желудок был вырезан, открыт вдоль большой кривизны и промывали ледяным физиологическим раствором. Степень валового повреждения слизистых оболочек (Язва Index) была оценена и выражена как сумма длин язвой в желудке в мм [18]. В кратком изложении, освещенное увеличительное стекло (3x) использовали для измерения длины длинных поражений (мм) в железистой части желудка, в то время как petechea поражения подсчитывали и каждые пять поражений были представлены в виде 1 мм язвы.
<р> около 50 мг слизистой оболочки желудка была погружена в течение ночи в растворе РНК позднее, хранили при -80 ° с до количественного ПЦР в реальном времени (QRT-PCR) квантификации. Оставшийся слизистую оболочку слом выключен и гомогенизируют в охлажденном льдом физиологическом растворе (МСР-120, Польша) с использованием максимальной скорости в течение 1 мин. Гомогенат центрифугировали при 5000 оборотах в минуту в течение 5 мин при 4 ° С, и полученные супернатанты хранили в аликвотах и ​​хранили при -80 ° С до определения параметров желудка.

Оценка гомогената /параметров сыворотки с помощью ELISA, техника
<р> Гомогенат /сывороточные уровни следующих параметров оценивали с помощью соответствующих наборов ELISA, как показано в скобках:.. IL-1β, С.Е.-селектина (Abcam Inc., Кембридж, Великобритания, Cat No. ab100768 и ab171334, соответственно), иОАС, Енос (EIAab, Ухань, Китай, Кот No. E0837r и E0868r, соответственно), В-клеточный лейкоз /лимфома-2 (Bcl-2;. USCN Life Science Inc., Ухань, Китай, Кот . No. E90778Bo) и каспазы-3 (Cusabio Biotech Co., Ухань, Китай, Кат. номер CSB-E08857r). Каждый биомаркером обрабатывают в соответствии с процедурами производителей услуг. Сыворотка общей антиоксидантной (ТАС) измеряли с использованием метода Benzie и Starin [19]. Вкратце, трехвалентного tripyridyltriazine (Fe 3 + -TPTZ) комплекс был сокращен до черной форме с помощью антиоксидантов, присутствующих в образце при кислом рН, чтобы дать интенсивный синий цвет, который можно контролировать путем измерения изменения поглощения при 593 нм. Изменение непосредственно связано с комбинированным или полной восстановительной мощности источника электронов, не ферментативные антиоксиданты, присутствующие в реакционной смеси. Было выражено уровень ТАС в мкМ /л.

Оценка активности желудка /содержание миелопероксидазы (МРО), малонового (MDA), восстановленный глутатион (GSH) и общего оксида азота (NOx).
<р> активность МРО (U /г), маркер ткани нейтрофилов infitration, оценивали в соответствии с Брэдли и др. [20]. Метод основан на измерении пероксид водорода-зависимый окисление-дианизидина, катализируемой MPO, что приводит к образованию соединения, проявляющего повышенную оптическую плотность при длине волны 460 нм. В качестве показателя перекисного окисления липидов реактивных соединений тиобарбитуровой кислоты (TBARS), представленных MDA, был использован для определения окислительного повреждения, следуя способу Mihara и Uchiyama [21]. MDA-ТБА аддукт развивается розовый цвет, который экстрагируют н-бутанола и измеренной при двух длинах волн, а именно
., 520 и 535 нм. Описывается Ахмед и др метод. [22] был принят для оценки небелковых сульфгидрильных групп (в основном GSH) путем взаимодействия с реагентом Эллмана после осаждения белковых SH-групп. Реакцию с реагентом Эллмана образуется стабильный желтый цвет 5 меркапто-2-нитробензойной кислоты, которая была измерена колориметрически при 412 нм (мг /г).
<Р> желудочную среду NO производства не оценивалась косвенно как нитрит концентрации /нитрата в соответствии со способом, Miranda и др. [23], где треххлористый ванадий был использован для снижения нитрата в нитрит. Розовый азо-краситель в результате реакции нитрита с сульфаниловой кислоты, с последующим последующим соединением с N- (1-нафтил) этилендиамина измеряли колориметрическим методом при длине волны 540 нм и выражали в виде NOx, мкМ /г.

Количественные в режиме реального времени (RT) -PCR
<р> Суммарную РНК экстрагировали из слизистой оболочки желудка с использованием Просто P Total Экстракция РНК комплект (BioFlux, Ханчжоу, Китай). Чистота полученного РНК была проверена спектрофотометрически-метрически при 260/280 нм. Равные количества РНК (0,368 мкг) retrotranscribed в первой нити комплементарной ДНК (кДНК), при 37 ° С в течение 50 мин. используя 200 ед /мкл M-MuLV обратной транскриптазы (СибЭнзим, Новосибирск, Россия), 1 мкл случайных гексамер (Qiagen, LRS Laboratories, Inc. Корея), и 0,1 М DTT в 50 мкл реакционной смеси. Для оценки экспрессии антиоксидантных и ассоциированных с воспалением генов-мишеней, ОТ-ПЦР проводили с использованием SYBR Green PCR Master Mix (Qiagen), как описано производителем. Если коротко, то в объеме реакционной смеси 25 мкл, 5 мкл кДНК добавляли 12,5 мкл 2x SYBR зеленый мастер-смеси и 2,5 мкл (2,5 мкМ) каждого праймера. Последовательности праймеров были: PPAR-γ Смысловой праймер 5'-GCGGAGATCTCCAGTGATATC-3 '; антисмысловой праймер 5'-ТСА GCGACTGGGACTTTTCT-3 '; NF-kB р65 смысловой праймер 5'-TGCAGAAAGAAGACATTGAGGTG-3 '; антисмысловой праймер 5'- AGGCTAGGGTCAGCGTATGG-3 '; Nrf2 смысловой праймер 5'-ATGGCC ACACTTTTCTGGAC-3 '; антисмысловой праймер 5'-AGATGTCAAGCGGGTCACTT-3 '; HO-1 Смысловой праймер 5'- CGTGCAGAGAATTCTGAGTTC-3 '; антисмыслового праймера 5'- AGACG CTTTACGTAGTGCTG-3 '; и глицеральдегид-3 фосфатдегидрогеназы (GAPDH) смысловой праймер 5'-GGGCAGCCCAGAACATCA-3 '; антисмысловой праймер 5'-TGACCTTG CCCACAGCCT-3 '. ПЦР-реакции включали 15 мин при 95 ° С для активации HotStarTaq ДНК-полимеразы, а затем 45 циклов при 94 ° С в течение 15 сек (денатурирующих), 55 ° C в течение 30 сек (отжиг), и 72 ° C в течение 30 сек (расширение ). Относительное выражение было рассчитано из 2 -ΔΔCT формулы [24].

Статистический анализ
<р> Данные были выражены как среднее ± S.E.M 7-9 животных. Статистическое сравнение между средствами проводились с использованием однофакторного дисперсионного анализа (ANOVA) с последующим тестом Стьюдента-Ньюмена-Кеулса. Статистическая значимость различий была рассмотрена на P
&л; 0.05.

Результаты

Влияние МФ и OMP на I /индекс язву R-индуцированное
<р> MF, зависимости от дозы, запрещает I /R-индуцированных желудка травмы, как представленные значения индекса язвенного (таблица 1), а также влияние MF <суб> 20 была сравнима с таковой предлагаемый OMP <суб> 20.

Влияние МФ и OMP на экспрессию мРНК генов антиоксидантных

Как показано на рис 1А и 1В, адаптационная реакция против травмы I /R свидетельствовал в повышающей регуляции Nrf2 и HO-1 мРНК, что объясняет причину повышением уровня GSH в необработанном I /R группы. Эти мРНК upregulations были еще более яркими в обработанных группах, указывая, таким образом, к антиоксидантной способности MF.

Влияние МФ и OMP от параметров окислительно-восстановительных
<р> Как показано в таблицах 2 и 3 ввода /R оскорбление вызвало дисбаланс в окислительной /nitrosative статуса. Резкий рост уровня МДА (182%) и производства NOx (187,6%), параллельно с 5.1 складками увеличение иСОА, было воспринято в I /R необработанной группы. Наоборот, травма /Р вдвое благотворного Enos и уменьшило TAC (69,7%), по сравнению с мнимым группой. Все эти изменения были возвращены по OMP, а также МФ, в зависимости от дозы. Почти во всех параметрах MF <суб> 20 имели заметное влияние. Что касается GSH, модель I /R, неожиданно, возвел его на 32%, эффект, который дополнительно усиливается за счет различных схем лечения.

Влияние МФ и OMP на экспрессию мРНК PPAR-gamma и NF -κB гены
<р> Как показано на рис 1C, животные с I /R травмы выявило значительное снижение желудочной экспрессии противовоспалительного PPAR-gamma (25% от уровня мнимого), с заметным увеличением в том, что провоспалительного фактора NF-kB (11,9 раза) (рис 1D). Интересно, что MF лечение группы были способны противодействовать /эффекты I R связанные в соответствии с уровнем дозы испытуемого. OMP, с другой стороны, показали меньший эффект, чем MF сделал на NF-kB, но не изменяет уменьшило PPAR-гамма.

Влияние МФ и OMP на желудочную воспалительных цитокинов и нейтрофилы инфильтрации
<р> Таблица 4 изображает I /R-опосредованных желудочной нечестие, которое усугубило воспалительные биомаркеры. Она увеличила сывороточные уровни IL-1, С.Е.-селектина и желудка MPO активности на 5,2, 5,6 и 2,2 складки, соответственно, по сравнению с ложнооперированных контрольной группы. Все эти изменения были значительно прерывалась при лечении МФ в зависимости от дозы. Тем не менее, MF <суб> 20 эффектов, которые вытеснили опосредовано стандартного эталонного OMP. Эти наблюдения указывают на то, что МФ могут модулировать цитокины и нейтрофилы набора для уменьшения I /R-индуцированной травмы.

Влияние МФ и OMP на Апоптические биомаркеры
<р> Как показано в таблице 4, И /Р оскорбление вызвало апоптоз слизистой оболочки желудка, о чем свидетельствует 6,85 складками повышения уровня каспазы-3. В том же самом контексте, И /Р снижало уровень антиапоптической маркера Bcl-2 (59%). Однако введение МФ, в зависимости от дозы, приостановила эти изменения значительно, эффекты, которые превосходили опосредовано OMP.

Влияние МФ и OMP на желудочную гистопатологических изменений

Улучшающиеся влияние различных схем лечения на испытанных биомаркеров были дополнительно подтверждены гистологическими выводов, представленных на рис 2. на рисунке показаны микрофотографии слизистой оболочки желудка, которые показывают [A] нормальный слизистой желудка (мю), подслизистого (см) и мышечная ( мл) архитектура в секции крысы ложнооперированными. [B] I секции /R выявляют отшелушиваются слизистую оболочку (м), juxtraposed с подстилающей геморрагии (черная стрелка), [C] тяжелая сосудистая заторы (V), очаговый воспалительный клетки инфильтрата (м), в основном, как нейтрофилы, и отеки (O) в подслизистой. [D] MF <суб> 10 раздел обнародует только заторы в подслизистой кровеносных сосудов (V) с легкой воспалительной клеточной инфильтрации (желтая стрелка) и /или отека. С другой стороны, [E] MF <суб> 20 раздел, похожий на ложнооперированными управления, показывает нормальную неповрежденную гистологическую структуру, для очень мягкой сосудистой заторы, за исключением (V) в подслизистую оболочку; МФ <суб> 20 эффект заменен, что из [F] OMP, где перегруженных кровеносные сосуды (V) и отек в подслизистом слое по-прежнему обнаруживается в секциях OMP.

Обсуждение
<р> Хотя предыдущие исследования подтвердили антиоксидантные [15] и противовоспалительными [25] потенциала МФ, но никто не разъяснил потенциальные молекулярные пути, участвующие в чинили нарушенные окислительно-восстановительные /воспалительные системы. Таким образом, в настоящей работе мы проверили слизистой оболочки желудка экспрессию Nrf2 /HO-1, чтобы понять, если этот сигнальный путь участвует в механизме антиоксидантной MF. Кроме того, исследование целевой экспрессию NF-kB и PPAR-gamma изучить также некоторые из возможных MF противовоспалительного молекулярных машин.
<Р> Наши исследования сигнальной трансдукции показало, что I /R значительно усиливает свою активность мРНК Nrf2 и HO-1, указывающий на возможное адаптивного эффекта тела против I /Р повреждающего инсульта; эти результаты имитировать, что Пана и соавторами [26] в сетчатке I /R модели. Enhanced HO-1 экспрессии белка, регулируется Nrf2 [27], может происходить в ответ на окислительный стресс [28] и воспалительных заболеваний и широко применяется в качестве защитного механизма против окислительного повреждения тканей [9], факты, которые поддерживают наши выводы. МФ, с другой стороны, подтвердило антиоксидантное действие путем повышения далее экспрессию Nrf2 и HO-1, результаты, которые были записаны ранее в гепатотоксического модели [29]. Насколько нам известно, это открытие является первым прямым доказательством для гастропротекторного роли МФ через антиоксидантной пути Nrf2 /HO-1 в /модели язвенного I R-индуцированной.
<Р> Антиоксидант характер MF далее проявляется здесь в качестве его способность бороться с высоты I /R-индуцированное липопероксидов [30] и уменьшение ОДУ [31]. Тем не менее, влияние I /R и MF на GSH показали ту же картину, наблюдаемую в Nrf2 и HO-1 выражение, где I /R, причиненный тонкий, но значительный рост GSH, эффект, который был увеличен дополнительно МФ [32] , Это действие, указывает на возможную компенсаторная реакция против повреждения I /R и связывает GSH с сигнального пути Nrf2 /HO-1, которые поддерживаются до настоящего времени по Дас и др. [29]. Корреляция между GSH и Nrf2 может быть связана с молекулярной взаимного влияния между активируемых Nrf2 и γ-glutamylcysteine ​​лигазы [10, 33], фермента, который катализирует этап ограничения скорости в синтезе GSH [34]. Кроме того, HO-1 антиоксидантных роль связана с его способностью катализировать распад прооксидантного гема в железо, биливердина и окиси углерода [35]; биливердина затем превращается в билирубин, который действует как антиоксидант против перекисного окисления липидов [36].
<р> К тому же чинили статус возмущенного окислительно-восстановительного, MF продлил его действие повлечь за собой nitrosative стресс, а также. MF против I /R влияние на уровни Эноса /иСОА, где он восстановил активность конститутивного фермента Енос [37] и снижало вредный индуцируемой изоформы [38]. Таким образом, ожидается, что повышенный уровень иСОА в необработанной группе отвечает за избыточного уровня NOx, который подрывает целостность слизистой оболочки желудка через
его взаимодействие с супероксиданиона и образованием пероксинитрита [39]. Последний представляет собой мощный свободный радикал, который возмущает клеточных макромолекул через перекисное окисление липидов, прямой митохондриальных нарушений, ингибирование мембранного Na ^{+ /K + - АТФазы и оксидативный модификации белка [40]. Наоборот, МФ-опосредованной производство NOx может управляться из восстановленных Енос, а не иОАС, поддерживая, таким образом, антиоксидантные /свободных радикалов свойства МЖ [16]. Защитный NO гасит свободные радикалы с последующим сохранением GSH в слизистой оболочке желудка; GSH действует как в качестве нуклеофильного поглотителя надпероксидов и в качестве кофактора в пероксидазой опосредованного снижения GSH водородных перекисей [41].
<Р> Вредные события, которые следуют за I /R оскорбление включают увеличение высвобождения провоспалительных медиаторов и набор лейкоцитов, помимо нарушения окислительных /nitrosative механизмов [42]. В текущем исследовании, MF подтверждено его противовоспалительное /действие иммунной модулирующее, который был задокументирован ранее [25, 43], путем ингибирования IL-1 [43], E-селектина [25] и нейтрофильной инфильтрации [44] и в других различные модели. Эти эффекты могут быть связаны частично с изменениями МФ-модулирующим на молекулярном уровне. МФ индуцирует экспрессию гена PPAR-гамма, наряду с понижающей родительского воспалительного фактора транскрипции /медиатора NF-kB, препятствуя, таким образом, I /R эффект. Ранее проведенные исследования сообщали о том, что I /R повреждающее действие опосредовано частично с помощью
подавления мРНК PPAR-gamma [7, 45], который является фактором транскрипции, который выступает в качестве влиятельного плейотропному регулятора противовоспалительными, антиоксидант, и процессы очистки фагоцита-опосредованной. Помимо своего прямого геномного эффекта PPAR &gamma было обнаружено негативно взаимодействовать с другими факторами транскрипции, как NF-kB, который лежит в основе многих аспектов противовоспалительного /иммуномодулирующего эффекта PPAR &gamma [25, 46], факты, тон с нашими выводами. Кроме того, повышенная экспрессия PPAR &gamma было доложено ингибировать продукцию NOx /иСОА [47], предложение, таким образом, объяснение для МФ-опосредованного торможения в иСОА. PPAR &gamma также препятствует макрофагах-управляемые цитокины и молекулы адгезии лейкоцитов, как показано в настоящем документе, частично с помощью
подавления экспрессии гена NF-kB [25, 48]. Кроме того, МФ было сообщено, чтобы уменьшить адгезию ПЯЛ к эндотелию и охраняться от их проникновения в ткани желудка [49], наряду с модуляцией PPAR-gamma и экспрессии NF-kB. Эти данные подтверждают наши на E-селектина, иСОА и MPO, как упоминалось ранее. Кроме того, MF-индуцированной HO-1 может рационализировать усиление активности противовоспалительный характер MF, через
его монооксида углерода побочный продукт, который придает противовоспалительным свойством [50]. С этой целью экспериментальные результаты нашего исследования определить еще гастрозащитных механизмы на как на молекулярном и клеточном уровнях, с помощью которых MF защищаемых слизистую оболочку желудка от I /R-индуцированной травмы. Эти результаты подтверждают с результатами предыдущих исследований в экспериментальной модели колита [51, 52], и придавить противовоспалительное действие МФ.
<Р> Ранее Wu и др. [53] сообщили, что PPAR-γ избыточная экспрессия также защищает митохондриальный мембранный потенциал и предотвращает апоптоз путем повышающей регуляции экспрессии Антиапоптозный Bcl-2 белков семейства. Кроме того, окись углерода, субпродукт HO-1 активности, наделяет антиапоптозную активностью по повышающем регулирования антиапоптической молекулы Bcl-2 и понижающей регуляции проапоптотического сигнала Вах [54]. Данные текущего исследования показали, что I /R-индуцированное повреждение желудка связано также с апоптозом, о чем свидетельствует выраженное снижение Bcl-2 [55] и возвышения каспазы-3 [56], в то время как М.Ф. вернула I /R индуцированная апоптоза дозозависимым повышением уровня Bcl-2, а также снижение уровня каспазы-3. MF Антиапоптозный эффект совпадает с результатами Гош и др. [38] и может быть отнесена к МФ-опосредованной повышающей регуляции PPAR-гамма и /или уровней HO-1 мРНК
<р> Все эти находки были дополнительно отражены на гистологических изменений. ввода /R оскорбление вызвало осыпание эпителиального защитного слоя и привело к лежащей в основе кровоизлиянием с выраженной перегрузкой кровеносных сосудов наряду с инфильтрацией воспалительных клеток в собственной пластинке слизистой оболочки, эффект, который обозначает прекращение кровотока, который сопровождался отеком. Скопление кровеносных сосудов может быть результатом возвышения сосудосуживающего эндотелина-1 в желудочном ткани [57], увеличение лейкоцитарной инфильтрацией [58], и /или снижение активности Эноса, как описано в настоящем исследовании. Соответственно, И /Р не только сопровождается образование свободных радикалов, а также с четким снижением уровня эндогенных антиоксидантов и повышенной инфильтрацией воспалительных клеток, изменения, которые были тормозится М.Ф., особенно при высоком уровне доз, когда нормальное гистологическое наблюдалась структура.
<р> Что касается ссылки OMP препарата, который оказывает свое действие гастропротекторный его антиоксиданта, антиапоптическая [59], а также противовоспалительное [60] действия, за пределами кислотного подавления [61], мы очерчены в настоящем документе молекулярные события, которые вносят вклад в эти эффекты. В настоящем исследовании мы документально подтверждено, что OMP антиоксидантное действие, о чем свидетельствует путем ингибирования перекисного окисления липидов и повышения обороноспособности биомаркеров, опосредуется с помощью
сигнального пути Nrf2 /HO-1. OMP, а также ингибирует провоспалительный цитокин IL-1, а также адгезию нейтрофилов и инфильтрация в лице снижения уровня С.Е.-селектина и активность MPO, соответственно. Хотя OMP подавляются экспрессию NF-kB, но он не может бороться с I эффект /R на PPAR-гамма, предполагая, что противовоспалительный /иммунно-модулирующее действие OMP проистекает из подавления экспрессии гена NF-kB, и, возможно, другие механизмы, но не то из PPAR-gamma
. <р> Хотя эффект OMP на экспрессию Nrf2 превысил МФ <суб> 20, но обратное было очевидно на HO-1 и ГШ, несоответствия, которые могут быть связано с их влиянием на NF-kB. Последнее было доказано, выступать в качестве негативного регулятора пути Nrf2, конкурируя с ним за связывание с транскрипционный совместно с активатором CREB-связывающий белок (CBP), а также способствовать связыванию корепрессор гистондезацетилазы 3 (HDAC3) к элементу антиоксидантом ответа (ARE) [62]; эти эффекты могут задержать Nrf2 опосредованную транскрипцию своих нижестоящих мишеней.
<р> Кроме того, антиапоптического свойство OMP полагались не только на его способности повышать уровень антиапоптического белка, Bcl-2 или снижения уровня апоптическая маркер, каспазы-3, так как обнаружено в данном исследовании, но и на снижение окислительного повреждения ДНК [59].
<р> Наконец, можно сделать вывод о том, что гастропротекторный эффект МФ, особенно в дозе 20 мг /кг, можно приписать активации Nrf2 /HO-1 антиоксидантной метаболическом пути PPAR-γ противовоспалительный путь через
downregulating NF-kB, и к увеличению антиапоптический белка Bcl- 2 и уменьшение каспазы-3. Все эти механизмы, наконец, поддерживать нормальную желудочную целостность слизистой оболочки барьера.}

• PLoS ONE: двунаправленная наводок между стресс-индуцированной язвенной болезни желудка и депрессии при хроничес…
• PLoS ONE: High-Mobility Group Box 1 Ингибирует Язва желудка Исцеление через Toll-подобный рецептор 4 и приемное гнездо для прод…