Mast celletæthed i gastriske biopsier af pædiatriske aldersgruppe og dens relation til betændelse og tilstedeværelse af Helicobacter pylori

Mast celletæthed i gastriske biopsier af pædiatriske aldersgruppe og dens relation til betændelse og tilstedeværelse af Helicobacter pylori
Abstrakt
Baggrund
Formålet med denne undersøgelse var at undersøge forholdet mellem mast celledensitet, histologisk alvorlighed gastritis, og tilstedeværelsen af ​​Helicobacter pylori (H. pylori) i antrale slimhinde af pædiatriske patienter. Salg Metoder
undersøgelsen omfattede 352 (192 mandlige og 160 kvindelige, < 14 år) patienter. Alle sager undergik endoskopi, og biopsier blev opnået for histopatologisk undersøgelse og vurdering af Helicobacter pylori. Alle biopsier blev bedømt ifølge Sydney-systemet og mast celledensitet i antrale slimhinde blev analyseret ved Giemsa farve. Spearmans korrelation test blev anvendt til at bestemme forholdet mellem mast celledensitet og andre histopatologiske parametre. Sammenligningen af ​​mastcelle densitet mellem H. pylori positive og negative grupper blev analyseret ved Mann Whitney U test.
Resultater Salg Mast celledensitet var 12,6 ± 0,87 i 0,25 mm 2 (0-81). Midler til sværhedsgraden af ​​gastrisk inflammation hos H. pylori-positive og negative patienter var 1,7 ± 0,6 og 0,6 ± 0,7 henholdsvis som var statistisk signifikant (p = 0,0001). Mast celledensitet blev ikke korreleret med tilstedeværelsen og graden af ​​inflammation, aktivitet, tilstedeværelse og score på H. pylori i antrum (p 0,05). Der var ingen signifikant sammenhæng mellem mast celle tæthed og allergi.
Diskussion
Vi konkluderede, at der kan være nogle andre måder for bidrag af mastceller i patologiske processer, der involverer mavetarmkanalen hos børn.
Baggrund
Mast celler er runde til ovale celler af bindevæv, måling 20-30 mikrometer i diameter med cytoplasmatiske granuler indeholdende glycosaminoglycaner resulterer i metachromasia og også histamin, neutrale proteaser, blodpladeaktiveringsfaktor og mange andre [1]. Overfladen af ​​mastceller indeholder specifikke receptorer for IgE, som efter fiksering og binding med særlige antigener, kan resultere i frigivelse af mastcelle-granuler og dermed øjeblikkelig hypersensitivitetsreaktion [1]. Salg Mast celler stammer fra knoglemarv og er af den de fleste vigtige celler i inflammatoriske processer. Mens de frigiver adskillige mediatorer og cytokiner i begyndelsen af ​​inflammatoriske proces, betragtes de som proinflammatoriske celler af nogle forfattere [2]. De har vigtig rolle i udløsning og regulere inflammatoriske processer. De bor tilstødende blod og lymfe kanaler primært under epitheloverflader såsom hud, luftveje, mave-og urogenitale tarmkanalen [3].
Siden 1996 få undersøgelser er blevet udført på mast celle tæthed i gastrointestinale biopsier, primært i voksen alder. Nakajima et al. viste tilstedeværelsen af ​​mastceller ved immunhistokemisk farvning med anti human tryptase antistof i gastriske biopsier og konkluderede, at densiteten af ​​mastceller var 2 til 3 gange større i H. pylori inficerede maveslimhinden end i negativ normal mave [4]. Bamba et al. påvist, at stigning i gastriske mastceller hos H. pylori positive biopsier er grundet in situ proliferation af mastceller snarere end migrationen fra andre steder og resultater fra stamcellefaktor og Interleukiner 3, 4 og 6 [5]. Sulik et al. studerede mastcelle involvering i børn med eller uden infektion med H. pylori. Resultaterne af denne undersøgelse viste, at mastcelle gennem sine talrige mediatorer kan spille en central rolle i kronisk gastritis især i H. pylori positive tilfælde [6]. Mysorekar et al. undersøgte omfanget af mastcelle involvering i antral gastritis med og uden H. pylori-infektion hos forsøgspersoner med symptomer på syre peptisk sygdom. De konkluderede, at H. pylori kan være ansvarlig for at øge masten celledensitet i det gastriske antrum [7]. Kayaselcuk et al. undersøgt forholdet mellem mast celledensitet, H. pylori tæthed og histopatologisk sværhedsgrad af gastritis i corpus og antrale slimhinde og konkluderede, at mast celledensitet var signifikant højere hos H. pylori positive gruppe end den negative gruppe og også højere mastcelle fordeling blev korreleret med øget inflammation og aktivitet [8]. Maciorkowska et al. evalueret biopsi eksemplarer af maveslimhinden indsamlet fra H. pylori-positive patienter, patienter efter H. pylori infektion og H. pylori-negative børn. Prøverne blev vurderet for infektion og betændelse og farvet med anti-human mastcelletryptase at tælle mucosale mastceller. I morfometrisk evalueringen blev små forskelle fundet i antallet af mastceller blandt grupper, som ikke var statistisk signifikant (antallet af mastceller er: 86,4, 81,4 og 70,2 celler /mm2 af prøven, henholdsvis) [9]
Som nævnt. ovenfor, har undersøgelser af mast celledensitet blevet hovedsageligt udføres på voksne og på forholdsvis små grupper som endnu. Så vi besluttede at studere mast celle tæthed i pædiatriske aldersgruppe på lidt større antal tilfælde i en indbringelsen børn hospital med mange års erfaring i pædiatrisk gastroenterologi.
Formålet med denne undersøgelse var at undersøge sammenhængen mellem mast celle tæthed, histopatologiske fund og tilstedeværelse af Helicobacter pylori i antral slimhinde hos pædiatriske patienter
Metoder
352 børn (< 14 år, med gastrointestinale klager). der henviste til Children Medical center, Teheran Universitet Medical Sciences med forskellige gastrointestinale problemer var indskrevet i denne undersøgelse fra 2004-2006, ved sekventiel prøvetagning. Alle sager undergik endoskopi, og antral biopsier blev opnået for histologisk undersøgelse og vurdering af Helicobacter pylori. Et spørgeskema blev udfyldt for hver enkelt patient, herunder kliniske og endoskopiske fund og historie af fødevarer og andre allergier.
Prøverne blev fikseret i 10% bufferet formalin, behandlet, indlejret i paraffin og skåret i sekventielle 3 mikrometer sektioner. Overfladiske og dybe snit blev farvet med haematoxyline-eosin (to dias) og ét dias blev farvet af Giemsa farve. Gastrisk sværhedsgrad blev bestemt ved Sydney scoringssystem og tilstedeværelse og scoring af H. pylori bestemtes ved kriterier i tabel 1.Table 1 Modificeret Pointsystemet for H. pylori densitet.
Densitet af H. pylori

histologiske træk
0
Ingen bakterier
1
Få bakterier (5 til 10) kun observeret under × 40 forstørrelse
2
Stedvis distribution (< 50 af den samlede overflade krypter) med lavere densitet (NCB < 10)
3
Stedvis fordeling (< 50 af den samlede overflade krypter) med højere densitet (NCB > 10)
Eller diffus distribution (> 50 af den samlede overflade krypter) med blanding af low-density (NCB < 10)
4
Diffus fordeling (> 20 af den samlede overflade krypter) med blanding af høj (NCB > 10) og lav densitet ( NCB < 10)
5
Diffus distribution (> 50 af den samlede overflade krypter), alle med høj densitet (NCB > 10)
NCB = Antal af H. pylori i hver krypter
Mastceller var optalt ved Giemsa farve på × 1000 forstørrelse i 10 felter med et Zeiss standard 20 lysmikroskop og summen blev beregnet for hvert tilfælde (måler 0,25 mm 2). Alle mast celletal og histologiske evaluering blev udført af en enkelt observatør.
Den statistiske analyse blev udført under anvendelse af SPSS version 11.5 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). Værdier blev testet for normalitet ved anvendelse af en Kolmogorov-Smirnov test. Spearmans korrelation test blev anvendt til at bestemme forholdet mellem mast celledensitet og andre histopatologiske parametre. Sammenligningen af ​​mastcelle densitet mellem H. pylori positive og negative grupper blev analyseret ved Mann Whitney U test. En P-værdi på 0,05 eller mindre blev betragtet som signifikant.
Resultater
Over en studieperiode to år, blev 352 antral biopsier opnået fra deltagerne. Blandt disse personer, 54,5% (192 personer) var mænd. Der var ingen signifikant forskel mellem køn patienter (p 0,05). Gennemsnitsalderen for patienterne i undersøgelsen var 7.17 ± 3.27 (spændvidde: 1-14 år). Tabel 2 giver en indikation af patienternes baseline karakteristika og klinisk diagnose. Som det fremgår af tabel 2, 119 personer (33,8%) af patienterne havde smerter, før de spiser, 102 personer (28,9%) smerter efter at have spist, 49 personer (13,9%) vægttab, og 47 personer (13,5%) havde hjerte brænder. Ingen signifikant relation blev fundet mellem køn og type af gastrointestinal klage. 69 personer (19,6%) var positive for allergi historie. Endoskopiske fund er afbildet i tabel 2.Table 2 Patienternes baseline karakteristika og klinisk diagnose baseret på endoskopiske fund.

mandlige (n = 192)

kvindelige (n = 160)
p-værdi
Alder (år) *
7 ± 3,5
7,3 ± 3,1
NSA
Symptomer (%)
smerte før spise
66 (18,7%)
53 (15,1%)
NSB
Smerter efter spise
60 (17%)
42 (11,9 %)
NS
Vægttab
29 (8,2%)
20 (5,7%)
NS
Heart brænde
23 (6,6%)
24 (6,8 %)
NS
Andre
55 (15,6%)
38 (10,7%)
NS
historie allergi (%)
34 (17,7%)
35 (21,8%)
NS
Klinisk diagnose (%)
Baseret på Endoskopisk Resultater
Normal
85 (24,1%)
75 (21,3%)
NS
Esophagitis
32 (9,1%)
25 (7,1%)
Gastritis
37 (10,5%)
30 (8,5%)
Duodenitis
3 (0,9%)
3 (0,9%)
Gastroesophagitis
35 (9,9%)
27 (7,7%)
data vises som gennemsnit ± SD.
anot signifikant (NS), studerendes t test.
BChl square test
Som vist i tabel 3, af 352 tilfælde, 36,6% af gastriske biopsier viste ingen signifikant patologiske forandringer, 29% mild kronisk gastritis, 10,2% moderat kronisk gastritis, 1,1% alvorlig kronisk gastritis, og 23% follikulært gastritis. 15,6% viste også aktivitet. 17,6% af tilfældene var positive for H. pylori. Midler til sværhedsgraden af ​​gastrisk inflammation hos H. pylori-positive og negative patienter var 1,7 ± 0,6 og 0,6 ± 0,7 henholdsvis som var statistisk signifikant (p = 0,0001). Der var en statistisk signifikant sammenhæng mellem H. pylori status og aktiviteten af ​​gastritis (p = 0,0001) .table 3 Patologiske karakteristika

mandlige (n = 192)
kvindelige (n = 160)
p-værdi
Gastritis (%)
Normal
70 (19,9%)
59 (16,8%)
0,166
Mild
55 (15,6%)
47 (13,4%)
Moderat
26 (7,4%)
10 (2,8%)
Svær
1 (0,3%)
3 (0,9%)
follikulær
40 (11,4%)
41 (11,6%)
Helicobacter pylori (%)
34 (9,7%)
28 (8%)
0,537
Aktivitet (%)
30 (8,5%)
25 (7,1%)
0.560
Mast celletæthed
middelværdi (interval)
13,1 (0-78)
12,2 (0-81)
NS
Median
7
5
en Ikke signifikant (NS)
Mast celletætheden var 12,6 ± 0,87 i 0,25 mm 2 (interval: 0-81) (fig. 1). Mast celletæthed, tilstedeværelse og graden af ​​inflammation er baseret på H. pylori status er vist i tabel 4. Vi fandt ingen signifikant korrelation mellem mast celledensitet og køn af patienterne. Også nogen signifikant korrelation blev fundet mellem mast celledensitet og tilstedeværelse og graden af ​​inflammation [(r = -0,032, p = 0,604), (fig. 2)], aktivitet (p = 0,09) og tilstedeværelse af H. pylori (p = 0,21). Ifølge H. pylori status, var der ingen statistisk korrelation mellem mast celledensitet og sværhedsgraden af ​​gastritis (fig. 3 og 4). Ingen signifikant forskel blev fundet mellem mast celle tæthed og historie allergi (p = 0,34) .table 4 Mast celletæthed og tilstedeværelse og graden af ​​inflammation.
gastritis

mast celletæthed
alt (n = 352)
HP (+) (n = 62)
HP (-) (n = 290)
normal
0
14 ± 18,6 (6)
13,9 ± 18,5 (5,5)
mild
19,3 ± 30,9 (3)
13,7 ± 15,1 (9)
9,4 ± 11,8 ( 4.5)
moderat
5,2 ± 6,3 (2,5)
11,7 ± 13,5 (5,5)
9,4 ± 11,8 (4,5)
alvorlig
14
3 ± 5,1 (0)
5,7 ± 6,9 (4,5)
follikulært
10,1 ± 14,5 (5)
12,1 ± 15 (4)
11 ± 14,6 (5)
samlede
9,5 ± 14,1 (4) *
13,3 ± 16,5 (6,5)
data vises som gennemsnit ± SD (median)
HP: Helicobacter pylori
* Mann-Whitney test; ikke statistisk signifikant (p = 0,217)
Figur 1 Mastceller er set af Giemsa farvning som store ovale celler indeholdende metakromatisk granulat (fem ses i dette område, olie nedsænkning × 1000, Giemsa farve).
Figur 2 Forholdet mellem mast celledensitet og sværhedsgraden af ​​gastritis (r = -0,032, p = 0,604).
figur 3 forholdet mellem mast celledensitet og sværhedsgraden af ​​gastritis hos H. pylori negative patienter (r = -0,003, p = 0,962) .
Figur 4 forholdet mellem mast celle tæthed og sværhedsgraden af ​​gastritis i H. pylori positive patienter (r = 0,182, p = 0,485).
diskussion
Mastceller hævdes at være et vigtigt element i den cellulær infiltration i løbet af gastrisk slimhindeinflammation grund H. pylori-infektion [10]. Der er kun få data i litteraturen om antallet af mastceller i kronisk betændelse i maveslimhinden i pædiatriske aldersgruppe og eksisterende data har temmelig modstridende resultater.
Mast celle afsløring er ret let ved en simpel og billig farvning (Giemsa) som også kan anvendes til at påvise tilstedeværelsen af ​​H. pylori. Det er værd at bemærke, pålidelig detektering opnås ved at undersøge vævet under nedsænkning olie (x1000) og i lavere forstørrelser, de kan blive savnet. Selv guldstandarden er farvning af væv med anti-tryptase antistof ved immunhistokemiske metoder, det er en tidskrævende og temmelig dyrt metode ikke anbefales til rutinemæssig patologisk vurdering af gastriske biopsier.
Vi besluttede at studere på temmelig stort antal prøver i en henvisning børn hospital med mange års erfaring i pædiatrisk gastroenterologi og bestemme mast celle tæthed og dens relation til betændelse og tilstedeværelsen af ​​H. pylori.
i denne undersøgelse, vi ikke observere en signifikant sammenhæng mellem mast celle tæthed, sværhedsgraden af ​​inflammation, aktivitet af gastritis og tilstedeværelse og tæthed af H. pylori i antrum. Vores resultater er temmelig samstemmende med resultaterne af nogle forfattere som Maciorkowska et al., Men ikke andre [6-8], selv om ingen af ​​disse studier blev udført på en sådan store serier som vores.
H. pylori er den hyppigste og væsentlig faktor i ætiologien af ​​kronisk aktiv gastritis, ud over at være impliceret i forskellige sygdomme som mavesår, gastrisk adenocarcinom, og lymfom [8]. Vores resultater viste også, at der var en signifikant sammenhæng mellem infektion med H. pylori og sværhedsgraden af ​​gastritis (p = 0,0001).
Mastceller er de vigtigste celler i akutte allergiske reaktioner med mediering af IgE. I denne undersøgelse var der ingen signifikant sammenhæng mellem allergiske symptomer anført af forældre (fødevarer og andre allergier) og gastrisk mast celle tæthed.
Mange børn gennemgår endoskopi med fælles klage af kroniske eller tilbagevendende mavesmerter i vores center. De er hovedsageligt i intervallet 5 til 7 år og er ikke observeret nogen signifikante ændringer både endoskopisk og ved mikroskopisk undersøgelse, som i mange af vores sager (næsten 231 ud af 352 sager). Vores undersøgelse viser, at mast celledensitet i denne gruppe er lidt højere end andre grupper (men dog ikke statistisk signifikant) og vi foreslår, at måske mastceller spiller en rolle i at producere sådanne symptomer ikke ved deres traditionelle kendte veje i inflammatoriske processer, men af ​​en endnu udefineret vej såsom stimulerende virkning på gastrisk nerve plexus. Så anbefaler vi, at stigningen i mast celle tæthed bør indgå i den endelige rapport af gastriske biopsier.
Selvom vi ikke udført immunhistokemiske pletter for mast celle afsløring, foreslår vi, at Giemsa farve er en pålidelig og nem farvning metode til rådighed i alle laboratorier og har også god interobserver korrelation. Selv om det har også mangler, såsom fejlagtig detektion af kunstig farvning som mastceller, effekter af ødem og svind og mangler også dem på grund af degranulering, disse har ingen væsentlig indflydelse på den endelige optælling.
Udover manglerne i vores undersøgelse er det er nødvendige for at nævne, at det blev udført på stedet en stor serie af pædiatriske patienter, og resultaterne er ikke overraskende overensstemmende med andre undersøgelser hovedsageligt udført hos voksne aldersgruppe.
erklæringer
Tak
Denne undersøgelse blev udført af en bevilling fra Immunologi, Astma og Allergi Research Institute, Børn Medical center, Teheran Universitet Medical Sciences
Vi er taknemmelige for fru Zahra Omidi og fru Mitra Mir. Khaef for deres hengivne teknisk support.
Forfattere 'originale indsendte filer til Images of Nedenfor er links til forfatternes oprindelige indsendte filer til billeder. 13000_2006_60_MOESM1_ESM.pdf Forfatternes oprindelige fil til figur 1 13000_2006_60_MOESM2_ESM.pdf Forfatternes oprindelige fil til figur 2 13000_2006_60_MOESM3_ESM.pdf Forfatternes oprindelige fil til figur 3 13000_2006_60_MOESM4_ESM.pdf Forfatternes oprindelige fil til figur 4

• Dårligt differentieret komponent i gastriske knivspids biopsier forudsiger submukøst invasion
• Forskelle i risikofaktorer mellem mønstre af tilbagefald hos patienter efter kurativ resektion for avanceret gastrisk karcinom