La detección de micrometástasis y centinela de los ganglios linfáticos no centinela de seccionamiento de serie completo y el análisis inmunohistoquímico para el cáncer gástrico

La detección de centinela y no centinela micrometástasis en los ganglios linfáticos de seccionamiento de serie completo y el análisis inmunohistoquímico para el cáncer gástrico
Resumen Antecedentes

Se investigó la presencia y distribución del centinela y las micrometástasis de ganglios no centinela usando serie completa seccionamiento y tinción inmunohistoquímica (IHC), para inspeccionar si micrometástasis en los ganglios linfáticos diseminado a los ganglios linfáticos centinela en primer lugar.
Métodos
un total de 35 pacientes, que fueron sometidos a una gastrectomía con una biopsia de ganglio linfático centinela para el cáncer gástrico, se matricularon en este estudio. fueron seleccionados; total de 1028 ganglios linfáticos de 35 pacientes que tienen cáncer gástrico sin metástasis de los ganglios linfáticos por sección permanente con hematoxilina y eosina (H &E amp). Había 252 ganglios centinela y el otro 776 eran nodos no centinela. Todos los nodos se seccionaron en serie y teñidas alternativamente con H & E y IHC. micrometástasis de ganglios linfáticos se definió como demostrando ser positivo primero o bien el IHC o el seccionamiento de serie completo.
Resultados
micrometástasis se detectaron en 4 (11%) de los 35 pacientes, 6 (0,58%) de 1028 nodos. De estos 4 pacientes, 3 tenían micrometástasis exclusivamente en los ganglios centinela, y el otro tenía micrometástasis en ambos centinela y nodos no centinela. No había ningún paciente que tenía las micrometasitases sólo en los nodos no centinela.
Conclusión
Estos resultados apoyan el concepto de que los ganglios linfáticos micrometástasis de cáncer gástrico se extiende hacia centinela nodos.
Antecedentes Francia El pronóstico de los pacientes con cáncer gástrico está influenciada principalmente por la presencia de metástasis en los ganglios linfáticos. Los ganglios metástasis en los ganglios en pacientes con cáncer gástrico con invasión submucosa ocurren en 15-20% de los pacientes; Por lo tanto, un nodo linfático disección puede ser innecesario que el 80 a 85% restante de los pacientes [1]. Un indicador preciso y fiable para predecir la ausencia de metástasis en los ganglios linfáticos eliminaría muchos linfadenectomías innecesarias [1]. Por lo tanto, un diagnóstico preoperatorio y precisa de metástasis en los ganglios linfáticos sigue siendo importante [2-4]. Una biopsia del ganglio centinela para el cáncer gástrico es un método diagnóstico intraoperatorio para detectar metástasis en los ganglios linfáticos [5-7]. En 1992, Morton et al. [8] introdujo la técnica de inyección de colorante intraoperatoria en el sitio de melanoma para identificar el nodo "centinela", que es el primer nodo que los vasos linfáticos aferentes entran desde el sitio del tumor. Miwa et al. [7, 9] empleado este tipo de técnica de mapeo de tinte para identificar los ganglios centinela de cáncer gástrico, e informó de un alto valor predictivo positivo y la precisión de la biopsia del ganglio centinela del cáncer gástrico precoz. Por otra parte, la presencia de una micrometástasis en un ganglio linfático es un problema grave para la aplicación clínica de la biopsia del ganglio centinela para el cáncer gástrico precoz. micrometástasis de ganglios linfáticos se han encontrado en pacientes determinados como ganglios negativos por el examen histológico de rutina. Anterior investigadores han informado de que las micrometástasis de ganglios linfáticos podría ser detectado mediante seccionamiento paso, la tinción inmunohistoquímica y la reacción en cadena de la polimerasa-transcriptasa inversa [10-12]. Sin embargo, ha habido algunos informes sobre la distribución de las micrometástasis en tanto el centinela y no centinela linfáticos en pacientes con cáncer gástrico con ganglios negativos por el examen histológico de rutina [13-15].
En este estudio, se investigó la forma retroactiva presencia y distribución de centinela y micrometástasis de ganglios no centinela utilizando seccionamiento de serie completo y la tinción inmunohistoquímica. se llevó a cabo estas técnicas son los métodos más precisos para detectar micrometástasis en los nodos para que pudiéramos determinar si micrometástasis en los ganglios linfáticos habían diseminado a los ganglios linfáticos centinela primeros.
Métodos
un ganglio linfático centinela (GLC) de biopsia para el cáncer gástrico en 243 pacientes en el Departamento de Cirugía Gastroenterológica, hospital de la Universidad de Kanazawa, de 1993 a 2002. Antes de la biopsia del ganglio centinela se llevó a cabo, se obtuvo el consentimiento informado por escrito de conformidad con las normas éticas del Comité de Experimentación humana del hospital de la Universidad de Kanazawa. De estos pacientes, se reclutó a 35 años que tenía un cáncer que había invadido hasta la submucosa o la muscular propia y no tenía metástasis en los ganglios linfáticos mediante examen histológico de rutina para este estudio. Ninguno de los pacientes habían recibido quimioterapia preoperatoria o radioterapia. Basado en la clasificación japonesa de carcinoma gástrico, los 35 pacientes se les realizó una biopsia del ganglio centinela seguido de linfadenectomía convencional para la disección de respaldo [16]. Un total de 1028 ganglios linfáticos fueron retirados de los 35 pacientes. De éstos, 252 ganglios linfáticos eran GLC y el otro 776 eran no-GLC. Las 252 SLNs fueron negativos para metástasis tanto en intraoperatorio de cortes congelados examen y sección permanente con hematoxilina y eosina (H & E). Los otros 776 nodos fueron negativos para metástasis en el examen histológico de H & E de múltiples pasos de seccionamiento a intervalos de 0,2 cm. Los datos clínico-patológicos fueron evaluados de acuerdo con la Clasificación japonesa de cáncer gástrico [16]. Las características de los pacientes se enumeran en la Tabla 1. Para la detección de los GLC, se utilizó el mapeo linfático intraoperatorio endoscópica (IELM), que consistía en una inyección intraoperatoria de 0,2 ml de 2% de azul de patente en la capa submucosa en cuatro sitios alrededor del carcinoma gástrico a través un gastroscopio [9]. El tinte apareció inmediatamente en la superficie serosa y se tiñe los vasos linfáticos y los nodos [5, 9]. En este estudio, la SLN se definió como el ganglio linfático que teñidas de azul 20 minutos después de la inyección. Los territorios ganglionares fueron definidas como el área que contiene los vasos linfáticos manchadas y que fueron capaces de dividirse en cinco categorías en función de las direcciones de las arterias rodeada del estómago, de la siguiente manera: el área de la arteria gástrica izquierda, la zona de la arteria gástrica derecha, el área de la derecha gastroepiplóica arteria, el área de la arteria gastroepiplóica derecha y el área de la arteria gástrica posterior. Los GLC extirpados fueron enviados a la sección congelada examen. Los ganglios linfáticos teñidos con H & E en secciones representativas fueron cortadas por el plano con el diámetro más grande que incluía el hilio nodo, y se examinaron durante la operación de características metastases.Table 1 Pacientes
edad mediana (rango)
62 (37-85) Sexo seguro
Hombre
23
Mujer página 12
profundidad de la invasión
SM
24
MP
11
tipo histológico
disociados *
18
indiferenciado * *
17
linfáticos invasión
negativo
16
positiva página 19
Vascular invasión
negativo
30
positivo página 5
SM, submucosa; MP, muscular propuria
* El tipo diferenciado; papilar, adenocarcinomas tubulares bien y moderadamente diferenciados
** El tipo indiferenciado;. Adenocarcinoma pobremente diferenciado, adenocarcinoma mucinoso y carcinoma de células en anillo de sello México La tejidos congelados restantes fueron descongelados, y los tejidos y no GLC se cortaron rutinariamente a intervalos de 0,2 cm. A continuación, las múltiples ganglios linfáticos y seccionada muestras resecadas se fijaron en formalina al 10%, procesados ​​a través de etanol graduado, y embebidos en parafina de las secciones permanentes. Los ganglios linfáticos se tiñeron con H &. E y se examinaron por dos patólogos
En este estudio, todos los ganglios linfáticos resecados se seccionaron en serie a intervalos de 25 micras de espesor 4-micras además y, o bien alternativamente se tiñeron con H & E y la tinción inmunohistoquímica (IHC) utilizando un anticuerpo anti-citoqueratina. La técnica fue utilizada ENVISION (Dako, Carpinteria, CA) para IHC y utilizamos el anticuerpo monoclonal citoqueratina 8/18 anticuerpo anti-humano (Santa Cruz Biotechonology, California, EE.UU.) [17-19]. Todos los principales especímenes tumorales de 35 pacientes se sometieron a tinción de citoqueratina y se utilizaron como control positivo. Un micrometástasis del ganglio linfático se define como un nodo negativo para metástasis por nuestro examen histológico de rutina, pero positivo, ya sea por el IHC o los métodos completas de seccionamiento en serie.
Resultados
El número total de secciones examinamos fue 24.094. De ellos, 5986 eran GLC y 18.108 eran no-GLC. De los 35 pacientes, 4 (11%) tenían micrometástasis. A micrometástasis se encontró en 6 de 1.028 nodos (0,6%) y 60 secciones (0,3%) de 24.094 (. Figs 1, 2). De estos 6 nodos que implican una micrometástasis, 4 eran GLC y los otros 2 eran no-GC en la cuenca linfática. No se detectaron micrometástasis fuera de la cuenca (Tabla 2). Los detalles del patrón de distribución, la ubicación y tamaño de las micrometástasis se muestran en las Tablas 3, 4 y 5. De los 4 pacientes que tenían una micrometástasis de ganglios linfáticos, 3 pacientes tenían micrometástasis exclusivamente en el GLC. El otro paciente tuvo una micrometástasis en el ganglio centinela tanto y no-GC en la cuenca linfática. Ningún paciente tenía una micrometástasis sólo en los no GLC. Ningún paciente ha sufrido hasta una recurrencia o ha muerto a partir de diciembre, 2007.Table 2 Número y localización de los ganglios linfáticos con micrometástasis
Localización de nodos
Número de nodos

con micrometástasis
sin micrometástasis
GLC
4 de 248
no-GC en cuna linfática página 2
653
no GLC de cada cuenca
0
121
Todos los nodos
6
1022
GLC, los ganglios linfáticos centinela sobre Table 3 Distribución de patrón ganglios linfáticos micrometástasis

Número de casos
patrón de distribución Red de micrometástasis
examen histológico de rutina
completa cortes seriados y IHC
GLC (-), no GLC (-): perfil 35
31
GLC (+), no GLC (-)
0
3
GLC (+), no GLC (+): perfil 0
1

• fibroblastos asociados al cáncer se correlacionan positivamente con el potencial metastásico de los cánceres gástricos humanos
• perfil de expresión de ARN no codificante de largo en el cáncer gástrico humano y su no codificante perfil clínico a largo significances