PLoS One: Nagy kifejezése hősokk fehérje 90 társul Tumor agresszivitás és rossz prognózissal előrehaladott gyomorrákban szenvedő betegek Cancer

absztrakt katalógusa

A hősokk protein 90 (HSP90) overexpresszálódik és nagyon rossz prognózissal társul sok rosszindulatú. Azonban a szerepe a HSP90 a gyomorrák, még nem teljesen tisztázott. A cél ennek a tanulmány célja, hogy vizsgálja meg a kapcsolat a HSP90 expresszió klinikopatológiai paraméterek és a prognózis előrehaladott gyomorrák, és megbecsülni a megváltoztatását HSP90 expresszió neoadjuváns kemoterápia. HSP90 és a mátrix metallopeptidáz 9 (MMP-9) antigén expresszióját vizsgáltuk immunhisztokémiai 322 előrehaladott gyomorrák mintákat. Közötti kapcsolatok HSP90 és klinikopatológiai paraméterek és a prognózis elemezték. A válasz HSP90 szint értékelték kemoterápiás hatás 54 beteg kapott 1-2 ciklus neoadjuváns kemoterápia. A pozitív expresszióját HSP90 találták 69,6% -ban 322 előrehaladott gyomorrák mintákban. HSP90 fehérje expressziója szignifikánsan összefüggött a mélységi invázió ( P katalógusa < 0,001), nyirokcsomó áttét ( P katalógusa < 0,001), és a betegség stádiuma ( P <katalógusa 0,001). A pozitív aránya HSP90 expresszió magasabb volt mindkét prominens savós invázió csoport ( P katalógusa < 0,001) és nyirokcsomó áttét csoport ( P katalógusa < 0,001). Sőt, HSP90 szignifikáns korrelációt mutatott az MMP-9 között 322 gyomorrák szövetek ( P katalógusa < 0,001). Az egyváltozós és többváltozós elemzések, HSP90 egy független prognosztikai tényezője mind kiújulás-mentes túlélés (RFS) és a teljes túlélés (OS). Ezek az eredmények arra utalnak, hogy a HSP90 is fontos szerepet játszhatnak a tumor invázió, metasztázis és a prognózis, és lehet, hogy jár, mint egy ígéretes célpont prognosztikai predikciós.

bevezető hivatkozás: Wang J, Cui S, Zhang X, Wu Y, Tang H (2013) Nagy kifejezése hősokk fehérje 90 társul tumor agresszivitás és rossz kórjóslatát előrehaladott gyomorrákban. PLoS ONE 8 (4): e62876. doi: 10,1371 /journal.pone.0062876 katalógusa

Szerkesztő: Yuan-Jia Chen, Peking Unió Medical College Hospital, Peking Unió Medical College, kínai Orvostudományi Akadémia, Kína katalógusa

Beérkezett: szeptember 26 , 2012-ben; Elfogadva: március 26, 2013; Megjelent: április 26, 2013 katalógusa

Copyright: © 2013 Wang et al. Ez egy nyílt hozzáférésű cikk feltételei szerint terjeszthető a Creative Commons Nevezd meg! Licenc, amely engedélyezi a korlátlan használatát, a forgalmazás és a reprodukció bármilyen adathordozón, feltéve, hogy az eredeti szerző és a forrás jóváírásra. Katalógusa

Forrás: Ez a munka volt konkrét finanszírozási forrást. A finanszírozók nem volt szerepe a tanulmány tervezés, adatgyűjtés és elemzés, döntés, hogy közzéteszi, vagy a készítmény a kézirat. Katalógusa

Érdekütközés: A szerzők kijelentették, hogy nem ellentétes érdekek léteznek. Katalógusa

Bevezető

gyomorrák a negyedik leggyakrabban diagnosztizált rák, és a második vezető oka a rák okozta halál világszerte [1] - [2]. Teljes eltávolítása a tumor és a szomszédos nyirokcsomók az egyetlen hatékony kuratív kezelés [3]. Azonban, miután a teljes eltávolítása, az 5 éves túlélési arány továbbra is alacsony, jelentették, hogy csak 23% [4]. Ezen kívül még a hozzáadott új, molekulárisan célzott terápiák a szokásos kemoterápiás csak kevés túlélési előnyt [5]. Ezért azonosítása újabb prognosztikai és prediktív markerek fontos, annak érdekében, hogy megkönnyítsék a betegek kiválasztásában, akik a leginkább valószínű, hogy előnyös multimodális terápiás megközelítések.

hősokkfehérjék (HSP-k) egy sorozat evolúciósan konzervált fehérjék . Emlős HSP-k volna besorolni elsősorban négy család aszerint, hogy azok molekulatömeg: HSP90, HSP70, HSP60 és a kis HSP-k (15-30 kDa), amelyek magukban foglalják Hsp27. Már ismert, hogy a HSP-k vannak kifejezve válaszként egy sor hangsúlyozza, beleértve a hipertermia, oxigén-eredetű szabad gyökök, aminosav analógok, az etanol és a nehézfémek [6]. A közelmúltban azt mutatta, hogy a HSP-k szignifikánsan társított rákok [7].

A hősokk fehérje (HSP) 90 fontos molekuláris chaperon protein összecsukható, az intracelluláris hajlam és proteolitikus forgalma kulcsfontosságú szabályozói sejt növekedését és túlélését [8]. Számos tanulmány igazolta, hogy a HSP90 van overexpressziója szilárd tumorokban, és szignifikáns összefüggést prognózissal [9] - [11]. Azt is leírták, hogy a HSP90 expresszió magas gyomor caner sejtvonalak [12], de nem a nagy vizsgálatokat végeztek az expresszió humán tumorok és az egyesület klinikopatológiai paramétereivel. Ezért a vizsgálat célja az, hogy bemutassa a kapcsolatot a HSP90 expresszió klinikopatológiai paraméterek és a prognózis előrehaladott gyomorrák, és megvizsgálja a válasz a HSP90 expresszió a neoadjuváns kemoterápia. Katalógusa

Anyagok és módszerek katalógusa

a betegek és klinikai adatok katalógusa

a vizsgálat által jóváhagyott intézményi Review Board és az emberi Etikai Bizottsága Kapcsolt onkológiai Kórház Guangzhou Medical College. Írásos hozzájárulás a minták kutatási célokra kapunk minden betegnél a műtét előtt. Katalógusa

Elemeztük szövetet 322 beteg (197 férfi és 125 nő) a fejlett gyomorkarcinómát akiket a Kapcsolt Kórház onkológiai Guangzhou Medical College (Guangzhou, Kína) között 2005-ben és 2011-ben a kor eloszlás 22-84 év, és az átlagéletkor 56,11 ± 11,42 év. Az anaplasticus évfolyam, 15. tumorok jól differenciált, 102 közepesen differenciált, és 205 volt rosszul differenciált. Minden fejlett gyomorrákos betegek vontak be a vizsgálatba volt szövettanilag igazolt diagnózis, hogy a daganat betört gyomor izmos vagy savós réteg, amely betegesen megerősítette a műtét után. Vonatkozó klinikai patológiai jellemzői (1. táblázat) mind nyert a betegek fájlokat. A tumor stádium szerint osztályozott 7. Nemzetközi Rákellenes Unió (UICC) TNM stádium rendszerben [13]. Az esetek kiválasztása egymás alapján rendelkezésre álló reszekció szövetek és nyomon követési adatokat. Százötven-hét 322 betegnél, akik követték legalább 36 hónapon át teljes követési adatokat, melyeket kiértékelésére használjuk a prognózist. Emellett 54 esetben a 322 betegnél neoadjuváns kemoterápia, míg a többiek nem kapnak radio- és kemoterápia előtt gasztrektómiának. Ezek 54 beteg összes benyújtott diagnosztikai biopszia előtt neoadjuváns kemoterápia, és kiegyenlített daganatmintákat során szerzett sebészi eltávolítását. Minden példányok 54 beteg volt elég reziduális tumor szövetek értékelni. Összesen 322 előrehaladott gyomorrák mintákat használtuk az immunhisztokémiai (IHC) analízissel. Katalógusa

preoperatív kemoterápia katalógusa

A kezdeti diagnózis 54 beteg került sor, miután 2010. január stádiumú III-IV (M0) gyomorrák vontak a neoadjuváns kemoterápia. Előkezelés stádium szerint végeztük egységes protokoll, amely tartalmazza endoszkópia endosonography, a CT a mellkas és a has, és diagnosztikus laparoszkópia. Katalógusa

Minden 54 beteget kezeltek a FOLFOX séma (leucovorin 5-fluorouracil és oxaliplatin) [14], és ment gastrectomián D2 lymphadenectomiával kemoterápia után. Neoadjuváns kemoterápia állt intravénás infúzió oxaliplatin (85 mg /m ^{2, 2 H) és leucovorin (200 mg /m 2, 2 H), majd 5-fluorouracil 2600 mg /m 2 például a 24 órás folyamatos infúzió formájában. Ciklus ismétlésével 2 hetes időközönként, egy vagy két ciklus. Sebészeti tumor rezekció volt ütemezve 2 hét befejezése után a kemoterápia. Voltak 16 beteg, akik egy ciklus FOLFOX séma, míg mások két ciklus neoadjuváns kemoterápia. Katalógusa}

IHC festést katalógusa

Mi egy korábban leírt IHC eljárás [15]. Röviden, a formalin-fixált, paraffinba ágyazott szöveti mintákon ebbe beleegyező betegek vágott 4-um szakaszok és helyezzük polilizin bevont tárgylemezekre, paraffint xilolban, és rehidratált egy sor osztályozott alkoholok. A szövetet tárgylemezeket ezután 3% -os hidrogén-peroxiddal metanolban 10 percig, hogy leállítsuk az endogén peroxidáz aktivitás, és az antigéneket nyertük vissza 0,01 M nátrium-citrát pufferrel (pH = 6,0) alkalmazásával a mikrohullámú sütő. 30 perc elteltével az előinkubálás 10% -os normál kecske szérummal, hogy megakadályozza a nem specifikus festődés, a mintákat egy éjszakán át inkubáltuk egy primer antitest, akár anti-HSP90 (ABCAM, # ab13495, UK, hígítás 1:200) vagy anti-MMP-9 ( ABCAM, # ab38898, UK, hígítás 1:200), párásított tartályban 4 ° C-on. A szövet tárgylemezeket kezeltük egy nem-biotin torma-peroxidáz detektáló rendszer alkalmazásával a gyártó utasításai szerint (Gene Tech). Az IHC eredmények értékelése két független vizsgálók ismerte a beteg azonosságának és a klinikai állapot. Ezen eltérő esetekben a patológus vizsgálta az esetekben, és egyetértés született. Katalógusa

HSP90 és MMP-9 festés intenzitását eddig skálán 0-3 százalékos aránya szerint a pozitív tumor (0, < 5% pozitív sejtek; 1, 5-20%, 2, 20-50%, vagy 3, > 50%). A kifejezés nagyon alacsony, 0, alacsony, 1, mérsékelt, 2 és magas 3 (ábra. 1). HSP90 és MMP-9 expresszió sorolták negatív pontszámok ≤1 és pozitív eredményt ≥2. Katalógusa

A nyomon követés katalógusa

A betegek nyomon követése kinevezések 3 havonta az első 3 évben a műtét után 6 havonta az elkövetkező 2 évben, majd a későbbiekben évente. A medián követési idő volt 27 hónap (4-82 hónap) 322 betegnél, míg a volt 33 hónapig 157 betegeknél, akiknek a prognózis elemeztük. Kiújulás is megerősítette tumormarkerek szinten, beleértve a CEA, AFP, CA199, CA125 és CA724, B-típusú ultrahangos ellenőrzés minden 3. lepkék, és komputertomográfia (CT) vagy mágneses rezonancia (MRI) 6 havonta gastrectomia után. A fő halálokként gyomorrák megismétlődését. A teljes túlélés (OS) számítottuk napjától műtét a halál időpontját vagy az utolsó nyomon követése. Kiújulás-mentes túlélés (RFS) definiáltuk napjától műtét időpontjáig relapszus vagy a határidő reszekció időpontját az utolsó észlelés. Katalógusa

Statisztikai elemzés katalógusa

Minden statisztikai analízist SPSS szoftver (version 16.0, Chicago, IL, USA). Közötti kölcsönös összefüggés HSP90 expresszió és a klinikai adatok számítása a chi-négyzet próba, és megjelenik a kereszt-táblázatok. Csoport különbségeket vizsgáltuk a Student-féle t katalógusa próba. Túlélési görbéket a Kaplan-Meier-módszerrel és elemeztük a log-rank teszt. Jelentős prognosztikai talált egyváltozós elemzés került a többváltozós elemzés segítségével a Cox-féle arányos kockázati modell. A többszörös összehasonlítás korrigáltuk segítségével Bonferroni módszerrel. Kétfarkú P katalógusa értékeket számoltunk. A különbségeket akkor tekintettük szignifikánsnak, ha a P katalógusa < 0,05. Katalógusa

Eredmények katalógusa

Az Egyesület a HSP90 klinikopatológiai változók katalógusa

Voltak 322 esetben az előrehaladott gyomorrák daganatos beteg vizsgáltuk immunhisztokémiai. HSP90 festés elsősorban található a citoplazmában a tumorsejtek. Túlexpressziója HSP90 volt megfigyelhető 224 322 (69,6%) Gyomorrák minták. Katalógusa

Az eredmények szerint az immunhisztokémiai, korreláltuk HSP90 állapotát 322 gyomorrákos mintákat nyolc másik széles körben elismert klinikai és patológiai paraméterek (1. táblázat ). A vizsgálatok azt mutatták, hogy a HSP90 pozitív expressziós szintje szignifikánsan magasabb volt a gyomorrákos betegek fokozott tumor mérete ( P katalógusa = 0,001), a tumor helyén ( P katalógusa < 0,001), mélysége invázió ( P katalógusa < 0,001), jelenléte nyirokcsomómetastasis ( P katalógusa < 0,001), és a betegség stádiuma ( P katalógusa < 0,001) (1. táblázat). Nem szignifikáns összefüggés volt megfigyelhető a nem, az életkor, és minőségű differenciálás HSP90 expresszió. Katalógusa

Impact HSP90 túltermelése az invázió és metasztázis gyomorrákban katalógusa

Nevezetesen, a korrelációs prominens savós invázió és nyirokcsomómetastasis a HSP90 pozitivitás javasolt potenciális szerepét a HSP90 fokozott invázió és metasztázis a gyomorrák. Ezért megvizsgáltuk a kapcsolat a HSP90 és MMP-9 fehérje expresszió gyomorrákban. Katalógusa

A pozitív arányok HSP90 expresszió 89,9%, illetve 92,3% -kal több kiemelkedő savós invázió csoport (T3 /T4) és több gyakori a nyirokcsomók érintettsége csoport (N1-3), míg már csak 44,4%, illetve 19,0% a T2 és N0 ( P katalógusa < 0,001 és P katalógusa < 0,001) ( Asztal 1). A szint a HSP90 T3 nem mutatott különbséget azokkal a T4, és közben, a kifejezés a HSP90 nem volt szignifikáns különbség az N1, N2 és N3 (Adatok nem mutatjuk). Ezen túlmenően, a HSP90 protein expresszió szignifikánsan összefüggött a MMP-9-expresszió 322 gyomorkarcinóma szövetekben. 98 betegek alacsony HSP90 expresszió, 86 beteg (87,8%) volt az alacsony MMP-9 expresszió, míg 134 224 beteg (59,8%), magas HSP90 expresszió is magas volt MMP-9 expresszió ( P <katalógusa 0,001) (ábra. 2). katalógusa

Effect tumor HSP90 fehérje szintje a Prognózis katalógusa

túlélési analízis azt mutatta, hogy az RFS és OS szignifikáns különbség a között 157 beteget szerint a kifejezés a HSP90 ( P katalógusa < 0,001 és P katalógusa < 0,001) (3.). A posztoperatív medián RFS és OS 27.0 hónap és 33,0 hónap volt. A posztoperatív medián RFS és az OS betegek pozitív festődése HSP90 voltak 15,0 hónap és 20,0 hónap, míg azok a betegek negatív festéssel HSP90 voltak 60,5 hónap és 64,0 hónap. A 3 éves és 5 éves összesített túlélés betegek HSP90 negatív kifejezése volt 83,1% és 75,7%, szemben a 39,4% és 30,1% -ában HSP90 pozitív kifejezés volt (2. táblázat). Katalógusa

Ahhoz, hogy megvizsgáljuk a HSP90 túltermelése az RFS és OS végeztünk egyváltozós elemzés a hagyományos klinikopatológiai változók prognózist. Az eredmények egyváltozós elemzés kimutatták, hogy szignifikáns változókat az RFS és OS analízisbe HSP90 túltermelése ( P katalógusa < 0,001 és P katalógusa < 0,001), a nagyobb tumor mérete ( P katalógusa = 0,002 és P = 0,002 katalógusa -kal), kiemelkedő savós invázió ( P katalógusa < 0,001 és P katalógusa < 0,001) és a nyirokcsomó áttétek ( P katalógusa < 0,001 és P katalógusa < 0,001) volt pozitív prognosztikai faktorok az RFS és OS gyomorrákos betegek (2. táblázat). Azonban, nem, életkor, tumor helyén vagy differenciálódási állapotát nem volt prognózis érték RFS és OS betegek gyomorrák. Katalógusa

Továbbá, hogy értékelje a független hatását HSP90 fokozott expressziója RFS és OS többváltozós Cox-féle arányos kockázati modellek korrigált a daganat mérete, mélysége invázió, nyirokcsomó-metasztázis és 90 kifejezést. Eredményeink igazolták, hogy a HSP90 expresszió független prognosztikai tényezője mindkét RFS (HR = 2,158, 95% CI: 1,165-3,999; P katalógusa = 0,015) és az OS (HR = 1,888, 95% CI: 1.022- 3,486; P katalógusa = 0,042) a gyomorrákos betegeknél. Tumor mérete, mélysége invázió és a nyirokcsomó-metasztázis minden volt független prognosztikai értéke a többváltozós analízis (3. táblázat). Katalógusa

A válasz a HSP90 neoadjuváns kemoterápia katalógusa

A különbség a túlélésben észlelték gyomorrák arra ösztönzött minket, hogy kérdés, HSP90 expresszió kapcsolatos kemoterápia. Azt észleltük, HSP90 expresszió diagnosztikai biopszia anyagokat és kiegyenlített sebészeti mintákban 54 gyomorrákos betegeknél. Katalógusa

A HSP90-ben kifejezve 66,7% (36/54) a biopszia, és 57,4% (31/54) reszekció példányok. Kemoterápiára nem változtatta meg a HSP90 expresszió között a biopszia tumorminták ( P katalógusa = 0,321) (ábra. 4). 24 (44,4%) esetben, HSP90 expresszió azonos volt a biopszia és az egyező mintákat. 13 (24,1%) esetben mutatott túlszabályzását HSP90 expresszió és 17 (31,5%) esetben azt mutatta downregulációját HSP90 expresszió sebészeti mintákban képest a biopsziás anyag. Katalógusa

Vita katalógusa

A hősokk fehérjék ( HSP-k) találhatók meg kell növelni számos szilárd tumor és a hematológiai rosszindulatú betegségek. A kifejezés játszhatnak fontos szerepet játszik a fehérje homoeostasis a malignus sejtek még a ellenséges hipoxiás és acidotikus mikrokörnyezetében a daganat. Eközben a HSP-k lehetővé teszik a tumorsejtek tolerálni genetikai elváltozások, amelyek egyébként végzetes lehet [16]. Leírták, hogy a túlzott mértékű expressziója a HSP társul rossz prognózissal, mint például a Hsp27 rektális rák [17], HSP70 a hasnyálmirigy adenokarcinóma [18] és a HSP90 gastrointestinalis stromalis tumorok [19]. Mindazonáltal, a szerepe a HSP90 gyomorrák, még nem teljesen tisztázott. Katalógusa

A jelen tanulmányban ismertetett prognosztikai értékének HSP90 fehérje expresszió előrehaladott gyomorrákban, és határozzák meg a kapcsolat a HSP90 expresszió invázió, metasztázis, és a kemoterápiás válasz a gyomor rákos betegeknél. Immunhisztokémiai használtuk, hogy elemezze a korrelációját a HSP90 protein expresszióját a klinikai patológiai tényezők és prognosztikai hatását 322 gyomor rákos betegeknél. Az eredmény igazolta, hogy a HSP90 fehérje szint szignifikáns összefüggést mutatott a tumor mérete, hely, mélység invázió, nyirokcsomómetastasis és klinikai szakaszban. Ezen túlmenően, Kaplan-Meier analízis kimutatta, hogy általában a HSP90-pozitív betegek prognózisa rosszabb, mint volt a HSP90-negatív betegek egyaránt RFS és OS. Sőt, a többváltozós Cox modell elemzése azt mutatta, hogy a HSP90 expresszió állapotát jelölte független rizikófaktora mind RFS és OS. Adataink azt javasolta, hogy a HSP90 lehet fontos szerepet játszanak a tumor a prognózist, és a HSP90 lehet egy potenciális prognosztikai faktor a gyomorrák.

Már ismert, hogy a lebomlás az extracelluláris mátrix (ECM) volt a jel az elején invázió és metasztázis, és az MMP-k fontos molekulák részt vesznek az ECM lebomlása során invázió és metasztázis. [20] Chu és mtsai. [21] beszámolt arról, hogy a rák az MMP-9 szignifikáns korrelációt mutatott a mélysége invázió és nyirokcsomó-metasztázis és, hogy az MMP-9-pozitív gyomorrák beteg rosszabb eredményeket, mint azok az MMP-9-negatív tumorok. Sőt, azt is leírták, hogy a HSP90 és MMP-9 képezhet, mint komplex az anaplasztikus nagy sejtes limfómák, és MMP-9 lehet aktiválni a HSP90 elősegítő sejtek invázióját. [22] A eredmények igazolták, hogy a kifejezés a HSP90 és MMP-9 korreláltak egymással, ami magasabb az invazív és metasztatizáló aktivitást HSP90 magas expressziós rákos sejteket. HSP90 lehet kulcsfontosságú molekula progresszió gyomorrákban. Ezen túlmenően, a HSP90-ben erősen expresszálódik mélysége invázió, különösen a T3 és T4 karcinómák. Ami a nyirokcsomó státusz illeti, a betegek nyirokcsomó áttétek általában azt mutatják, emelkedett HSP90 expresszió, míg nem volt statisztikailag különbség a N1, N2 és N3. Együttesen HSP90 expresszió gyomorrák elősegíti a tumor agresszivitását azt sugallja, hogy a HSP90 lehet megvalósítható célt a rák gyógyításában. Katalógusa

Továbbá megvizsgáltuk a válasz HSP90 neoadjuváns kemoterápia, és megállapította, hogy kemoterápiára nem változtatja meg a HSP90 expresszió között a biopszia tumorminták a gyomorrák. Azt javasolta nekünk, hogy a HSP90 szint nagyrészt változatlan kemoterápiás értelemben használjuk, így számunkra a lehetőséget, hogy egy fontos megfigyelés, hogy a kifejezés a HSP90 szint a daganatok stabil volt, függetlenül attól, hogy kapott neoadjuváns kemoterápia vagy sem. Leírták, hogy a HSP90 rezisztenciát biztosít a kemoterápia a rák [23] - [24]. Továbbá gátlása A HSP90 expressziója csökkentheti az angiogenezis és a gyomorrák sejtburjánzást, és leküzdeni az ellenállást a kemoterápia [12]; [25]. Mindent összevetve, célzási Hsp90 kémiai inhibitorokat lehet tekinteni a kezelés a gyomorrák, különösen, ha a HSP90-ben erősen expresszálódik a gyomorrák.

Összefoglalóan azt bizonyítják overexpressziója HSP90 is fontos szerepet játszanak a tumor invázió , metasztázis és a prognózis, és lehet, hogy dolgozni, mint egy ígéretes célpontja prognosztikai becslés gyomorrákban. katalógusa

Köszönetnyilvánítás katalógusa

hálásan köszönjük a klinikai adatok szerint a patológiai osztály. katalógusa