PLoS ONE: Visoka Ekspresija proteina toplinskog šoka 90 je povezana s tumora agresivnosti i lošom prognozom u bolesnika s uznapredovalim rakom želuca

Sažetak pregled

protein toplinskog šoka 90 (HSP90) ekspresija mu je povećana i vrlo povezana s lošom prognozom u mnogim malignih bolesti. Međutim, uloga HSP90 u karcinoma želuca nije u potpunosti rasvijetljen. Cilj ovog istraživanja je ispitati odnos HSP90 izražavanja s kliničkopatološkim parametara i prognozom u uznapredovalim rakom želuca, te procijeniti promjenu HSP90 izražavanja nakon neoadjuvant kemoterapije. HSP90 i matrica metalopeptidaze 9 (MMP-9) izraz antigen procijenjena je imunohistokemijski na 322 naprednih uzoraka karcinoma želuca. Analizirani su odnosi između HSP90 i kliničkopatološkim parametara i prognoze. Odgovor HSP90 razini procijenjena je na kemoterapije u 54 bolesnika primljenih 1-2 ciklusa neoadjuvant kemoterapije. Pozitivni izraz HSP90 nađeno je da je 69.6% u 322 naprednim uzoraka karcinoma želuca. HSP90 ekspresija proteina je značajno povezana s dubine invazije ( P izvoznici < 0,001), limfni čvor metastaze ( P izvoznici < 0,001) i stadij bolesti ( P izvoznici <0,001). Pozitivne stope HSP90 izražavanja bila je viša u obje istaknute serozne invazije grupe ( P izvoznici < 0,001) i limfnih čvorova metastaze skupina ( P izvoznici < 0,001). Štoviše, HSP90 značajno korelira s MMP-9 između 322 želučane tkivu karcinoma ( P pregled < 0,001). U univarijantna i multivarijatne analize, HSP90 bila samostalna prognostički čimbenik i za opstanak recidiva bez (RFS) i ukupno preživljenje (OS). Ovi rezultati sugeriraju da HSP90 može igrati važnu ulogu na tumorske invazije, metastaza i prognozu, a može djelovati kao obećavajući cilj za prognostički predviđanje pregled

Izvor:. Wang J, Cui S, Zhang X, Wu Y, Tang H (2013) Visoka Ekspresija proteina toplinskog šoka 90 je povezana s tumora agresivnosti i lošom prognozom u bolesnika s uznapredovalim rakom želuca. PLoS ONE 8 (4): e62876. doi: 10,1371 /journal.pone.0062876 pregled

Urednik: Yuan Jia-Chen, Peking Union Medical College Hospital, Peking Union Medical College, Kineske akademije medicinskih znanosti, Kina pregled

Primljeno: 26. rujna 2012; Prihvaćeno: 26. ožujak 2013; Objavljeno: 26. travanj 2013 pregled

Copyright: © 2013 Wang et al. Ovo je otvorenog pristupa članak distribuirati pod uvjetima Creative Commons Imenovanje License, koja omogućuje neograničeno korištenje, distribuciju i reprodukciju u bilo kojem mediju, pod uvjetom da je izvorni autor i izvor su zaslužan

financiranja. Ovo djelo imao specifičan izvor financiranja. U financijeri nisu imali ulogu u studiju dizajna, prikupljanja i analize podataka, Odluka o objavi, ili pripremu rukopisa pregled

U konkurenciji interese.. Autori su izjavili da ne postoje suprotstavljeni interesi pregled

Uvod pregled

raka želuca četvrti najčešće dijagnosticirani rak, te predstavlja drugi vodeći uzrok karcinoma povezanih smrti u svijetu [1] - [2]. Kompletan resekcija tumora i susjednih limfnih čvorova je jedini učinkovit tretman za liječenje [3]. Međutim, nakon potpune resekcije, stopa preživljavanja od 5 godina i dalje je niska, izvijestio je da je samo 23% [4]. Osim toga, čak i dodavanje novih, molekulski ciljane terapije u standardnoj kemoterapiji dati samo ograničen opstanak korist [5]. Stoga identifikacija novih prognostičkih i prediktivnih biljega je važno, kako bi se olakšao odabir pacijenata koji su najvjerojatnije imati koristi od multimodalne terapijskih pristupa. Pregled

proteini toplinskog šoka (hsp) su skup evolucijski konzerviranih proteina , Sisavaca Hsp klasificirani uglavnom u četiri porodice prema molekulskoj težini: Hsp90, Hsp70, hsp60 i malih Hsp (15-30 kDa) koji uključuju Hsp27. Je poznato da se vezani na su izraženi kao odgovor na niz stresova uključujući hipertermije, slobodnim radikalima kisika, izveden analoga amino kiselina, etanol i teških metala [6]. Nedavno je pokazao da vezani na značajno povezane s rakovima [7]. Pregled

protein toplinskog šoka (HSP) 90 je važan molekulski nadglednik za slaganju proteina, intracelularne dispozicije i proteolitičke prometa ključni regulatori ćelija rast i opstanak. [8] Mnoge studije pokazale su da je pretjerano HSP90 u solidnih tumora, a ima značajnu povezanost s prognozom [9] - [11]. Također je izvijestio da HSP90 izraz je visoka u želučanim Caner staničnim linijama [12], ali nema velikih studija je provedena na ekspresije u ljudskim tumorima i povezanosti s kliničkopatološkim varijabli. Stoga je cilj ovog rada je pokazati odnos HSP90 izrazom kliničkopatološkim parametara i prognoze u uznapredovalim rakom želuca, te ispitati odgovor HSP90 izražavanja na neoadjuvant kemoterapije. Pregled

Materijali i metode pregled

Pacijenti i klinički podaci pregled

istraživanje je odobreno od strane Institutional Review Board i Etičkog povjerenstva za ljudska povezanih onkoloških bolnica Guangzhou Medical College. Pismeni pristanak za korištenje uzoraka za istraživačke svrhe, koji je dobiven od svih bolesnika prije operacije. Pregled

Analizirali smo tkiva od 322 bolesnika (197 muškaraca i 125 žena) s uznapredovalim karcinomom želuca, koji su liječeni u Povezana onkoloških bolnici Guangzhou Medical College (Guangzhou, Kina) između 2005. i 2011. godine starosti distribucija je od 22 do 84 godina, a prosječna dob bila je 56.11 ± 11,42 godina. Prema anaplastičnim razreda, 15 tumori bili su dobro diferencirani, 102 su umjereno diferencirani, a 205 su slabo diferencirani. Sve napredne pacijenata s rakom želuca uključeni u istraživanje imali histološki potvrđena dijagnoza da je tumor je zahvatio želučane mišićna ili serozne sloj, koji je patološki potvrđeno nakon operacije. Relevantni klinička patološke karakteristike (Tablica 1) su svi dobiveni iz datoteka pacijenata. Tumor faza je klasificirati prema 7. Union International kontrole raka (UICC) TNM sustava [13]. Slučajevi su uzastopno izabran na temelju dostupnosti resekcija tkiva i follow-up podataka. Stotinu i pedeset i sedam u 322 bolesnika koji su bili praćeni najmanje 36 mjeseci imali kompletnu praćenje podataka koji su korišteni za procjenu prognoze. Osim toga, 54 slučajeva u 322 bolesnika podvrgnuti neoadjuvant kemoterapiju, dok ostali nisu primili radio ili kemoterapiju prije gastrektomije. Ovi 54 pacijenata sve podnosi dijagnostički biopsije prije neoadjuvant kemoterapije, i odgovarajući uzorci tumora su dobiveni tijekom kirurške resekcije. Svi su primjerci iz 54 bolesnika imalo dovoljno zaostala tumorskih tkiva kako bi se procijenila. Ukupno 322 naprednih uzoraka karcinoma želuca su korišteni u imunohistokemijski (IHC) analiza. Pregled

preoperativne kemoterapije pregled

Početnu dijagnozu 54 bolesnika je učinjeno nakon siječnja 2010. stadiju bolesti III-IV (M0) raka želuca su upisani za neoadjuvant kemoterapije. Prethodna obrada stupnjevanje tumora provodi se u skladu s jedinstvenom protokolu koji je uključivao endoskopiju s endosonography, CT prsnog koša i trbuha, te dijagnostičku laparoskopiju. Pregled

Svi 54 bolesnici su liječeni s FOLFOX režim (leukovorin, 5-fluorouracila i oksaliplatin) [14] i podvrgnuti gastrektomije sa D2 Limfadenektomija nakon kemoterapije. Neoadjuvansima kemoterapija se sastoji od intravenske infuzije oksaliplatina (85 mg /m ^{2, 2 h) i leucovorin (200 mg /m 2, 2 h), nakon čega slijedi 5-fluorouracila 2600 mg /m 2 kao 24 sata kontinuirane infuzije. Ciklusi su ponovljeni na dva tjedno tijekom jednog ili dva ciklusa. Kirurški resekcija tumora bila je zakazana 2 tjedna nakon završetka kemoterapije. Bilo je 16 bolesnika koji su primili jedan ciklus FOLFOX režima, dok su drugi dobili dva ciklusa neoadjuvant kemoterapije. Pregled}

IHC Bojenje pregled

Mi smo koristili ranije opisani IHC postupkom [15]. Ukratko, formalin-fixed, paraffin-embedded uzorci tkiva iz pristanak pacijenta smanjena su u 4-p.m sekcija i stavi na polilizinskog obloženih dijapozitiva, deparafmizirani u ksilenu i rehidrirane u nizu stupnjevito alkohola. Predmetnice tkiva su zatim tretirane s 3% vodikovog peroksida u metanolu kroz 10 min kako bi se zaustavila Aktivnost endogene peroksidaze, a antigeni su dobiveni u 0.01 M natrij citrat puferu (pH 6,0), pomoću u mikrovalnoj pećnici. Nakon 30 min prethodne inkubacije na 10% normalnom kozjem serumu za sprječavanje nespecifične bojenje, uzorci su inkubirani preko noći upotrebom primarnih antitijela, ili anti-HSP90 (Abcam, # ab13495, UK, razrjeđenje 1:200) ili anti-MMP-9 ( Abcam, # ab38898, Velika Britanija, razrjeđivanje 1:200), u vlažnoj posudi na 4 ° C. Predmetnice tkiva su tretirane s ne-biotin sustav za otkrivanje je hren peroksidaza-u skladu s uputama proizvođača (Gene Tech). Rezultati IHC su ocijenjeni od strane dva nezavisna ispitivača znao identitet pacijenata i kliničkom stanju. U proturječne slučajevima, patolog pregledao slučajeve, a postignut je konsenzus pregled

HSP90 i MMP-9 bojanja intenziteti su ocijenjene na skali od 0-3 prema postotku pozitivnih tumora (0, <. 5% pozitivnih stanica, 1, 5-20% 2, 20-50%, ili 3, > 50%). Izraz je vrlo niska za 0, niska za 1, umjerena za 2 i visoke 3 (Sl. 1). HSP90 i MMP-9 izraz su klasificirani kao negativni za rezultate ≤1 i pozitivan za rezultate ≥2. Pregled

Follow-up pregled

pacijenti imali follow-up sastanaka svaka 3 mjeseca za prve 3 godine nakon operacije, svakih 6 mjeseci za naredne 2 godine, a godišnje nakon toga. Medijan praćenja razdoblje je 27 mjeseci (raspon 4-82 mjeseci) u 322 bolesnika, dok je 33 mjeseci u 157 pacijenata čiji je prognoza analiziran. Ponavljanje potvrđeni su tumorski markeri razinama, uključujući CEA, AFP, karbohidratni antigen 19-9, ca125 i CA724, B-tipa ultrazvučnom pregledu svaka 3 moljaca i kompjutoriziranom tomografijom (CT) ili magnetsku rezonanciju (MRI) svakih 6 mjeseci nakon gastrektomije. Glavni uzroci smrti bile su želuca povratka bolesti. Ukupno preživljenje (OS) izračunata je iz datuma operacije do datuma smrti ili zadnji praćenja. Ponavljanje bez preživljavanje (RFS) definirana je kao od datuma operacije do datuma recidiva ili iz razdoblja resekcija do datuma zadnjeg promatranja snimljene. Pregled

Statistička analiza pregled

Sve statističke analize su provedene korištenjem software (SPSS verzija 16,0, Chicago, IL, USA). Međuovisnost između izražavanja HSP90 i kliničkih podataka izračunat je pomoću hi-kvadrat test, a prikazani su u poprečnom tablicama. Razlike grupe su ispitani pomoću Student-a t pregled -test. Krivulje preživljavanja su nacrtane pomoću Kaplan-Meier metodi i analizirani pomoću log-rank testa. Značajne prognostički čimbenici koju utvrdi univarijantne analize su ušli u multivarijatne analize pomoću Cox proporcionalnih rizika model. Višestruke usporedbe su ispravljene pomoću Bonferronijeva metode. Dvostrana izračunate su P
vrijednosti. Razlike su smatrane statistički značajna kada je P pregled. ≪ 0,05 pregled

Rezultati

Udruga HSP90 s kliničkopatološkim varijable

Bilo je 322 slučajeva napredne želuca rak koji su ispitivani su imunohistokemijski. HSP90 obojenje uglavnom se nalazi u citoplazmi stanica tumora. Prekomjerna ekspresija HSP90 zabilježeno je u 224 od 322 (69,6%) uzoraka s rakom želuca. Pregled

Prema rezultatima imunohistokemijski, u korelaciji smo status Hsp90 u 322 želučanih uzoraka raka s osam drugih naširoko priznat kliničko parametara (Tablica 1 ). Naše analize su pokazale da Hsp90 razina pozitivnog izražavanja bila je značajno viša u bolesnika s karcinomom želuca s povećanom veličine tumora ( P pregled = 0,001), tumora stranice ( P izvoznici < 0,001), dubina invazije ( P izvoznici < 0,001), prisustvo limfnih čvorova metastaza ( P izvoznici < 0,001) i stadij bolesti ( P izvoznici < 0,001) (Tablica 1). Ne značajna povezanost uočena između spola, dobi i stupnju diferencijacije s HSP90 izražavanja. Pregled

Utjecaj HSP90 Prekomjerna ekspresija na invaziju i metastaziranje u rak želuca Netlogu

Naime, korelacija istaknutom seroznog invazije i limfni čvor metastaza sa hSP90 pozitivnosti sugerira potencijalnu ulogu hSP90 u povećanom invazije i metastaziranja raka želuca. Stoga smo istraživali odnos HSP90 i MMP-9 ekspresija proteina u raka želuca. Pregled

Pozitivne stope HSP90 izraza su 89,9% i 92,3% u više istaknutih seroznog invazije skupine (T3 /T4) i više česta limfnih grupa angažman čvor (N1-3), a bilo je samo 44,4% i 19,0% u T2 i N0 ( P izvoznici < 0,001 i P izvoznici < 0,001) ( tablica 1). Razina HSP90 u T3 su pokazali da nema razlike sa onima u T4, au međuvremenu, izraz HSP90 imali značajne razlike među N1, N2 i N3 (tablica podataka nije prikazano). Osim toga, HSP90 ekspresija proteina značajno bila povezana s MMP-9 ekspresija je u 322 tkivu karcinoma želuca. 98 pacijenata s niskom ekspresijom HSP90, 86 pacijenata (87,8%) je slabo MMP-9 ekspresija, a 134 od 224 pacijenata (59,8%) s visokom ekspresijom HSP90 imali visoku razinu aktivnosti MMP-9 ekspresija ( P pregled <0,001) (slika 2) pregled

Utjecaj tumora hSP90 proteina razini o Prognoza pregled

Opstanak analiza je pokazala da RFS i OS su bile značajne različiti među 157 pacijenata prema izrazu hsp90 (<.. em> P pregled < 0.001 i P pregled < 0,001) (slika 3).. Postoperativna Medijan RFS i OS su 27.0 mjeseci i 33.0 mjeseci, respektivno. Postoperativna Medijan RFS i OS bolesnika s pozitivnim bojanjem hsp90 su 15,0 mjeseci i 20,0 mjeseci, a oni bolesnika s negativnim bojanjem HSP90 bilo 60,5 mjeseci i 64.0 mjeseci. 3-godišnje i 5-godišnje kumulativne stope preživljavanja bolesnika s HSP90 negativnog izražavanja bila 83,1% i 75,7%, u usporedbi s 39,4% i 30,1% bolesnika s HSP90 pozitivnog izražavanja, odnosno (tablica 2). Pregled

ispitati utjecaj hSP90 prekomjerne ekspresije na RFS-a i OS, proveli smo Jednosmjerna analiza tradicionalnih kliničko varijable za prognozu. Rezultati univarijatne analize su pokazale da značajne varijable u RFS i OS analizu uključeni Hsp90 ekspresijom ( P izvoznici < 0,001 i P izvoznici < 0,001), veća veličina tumora ( P pregled = 0,002 i P pregled = 0,002, respektivno), istaknuti serozne invazija ( P izvoznici < 0,001 i P izvoznici < 0,001) i limfnih čvorova metastaze ( P izvoznici < 0,001 i P izvoznici < 0,001) bili su pozitivni prognostički čimbenici za RFS-a i OS u bolesnika s karcinomom želuca (Tablica 2). Međutim, spol, dob, sijelo tumora ili razlikovanje status imala prognozu vrijednost na RFS-a i OS bolesnika s rakom želuca. Pregled

Osim toga, ocijeniti nezavisnu utjecaj HSP90 prekomjernom ekspresijom na RFS-a i OS, a multivarijatni Cox proporcionalni opasnosti model je prilagođen veličini tumora, dubini invazije, limfnih čvorova metastaza i HSP90 izražavanja. Naši rezultati pokazuju da HSP90 izraz bio neovisan prognostički faktor za oba RFS (HR = 2,158, 95% CI: 1.165-3.999; P pregled = 0,015) i OS (HR = 1,888, 95% CI: 1.022- 3,486; P pregled = 0,042) bolesnika s rakom želuca. Veličina tumora, dubina invazije i limfnih čvorova metastaze sve imali nezavisnu prognostičku vrijednost u multivarijatne analize (tablica 3). pregled

Odgovor HSP90 u neoadjuvant Kemoterapija pregled

razlika u preživljavanju zabilježen je u bolesnika s karcinom želuca potaknuo nas je na pitanje je li izraz HSP90 odnosilo na primjenu kemoterapije. Otkrili smo ekspresiju Hsp90 u dijagnostičkim biopsijom materijala i odgovarajuće kirurške uzoraka od 54 bolesnika s rakom želuca. pregled

HSP90 je izražena u 66,7% (36/54) i biopsija i 57,4% (31/54) od resekcija uzoraka. Neoadjuvant kemoterapija nije promijenila Hsp90 ekspresije između biopsije i tumorskih uzoraka ( P pregled = 0.321) (Sl. 4). U 24 (44,4%) slučajeva, HSP90 izraz lica bio je identičan u biopsije i odgovarajućeg uzorka. 13 (24,1%) slučajeva pokazala reguliranje prema HSP90 izražavanja i 17 (31,5%) slučajeva pokazala downregulation hsp90 izražavanja u kirurških uzoraka u usporedbi s biopsijom materijala.

Rasprava pregled

proteini toplinskog šoka ( Hsp) nalaze se povećala u mnogih solidnih tumora i zloćudnih bolesti hematološkog sustava. Njihova ekspresija može igrati važnu ulogu u održavanju homeostaze proteina malignih stanica, čak i u neprijateljskom hipoksičkih i acidotic mikrookolini tumora. U međuvremenu, hsp dopustiti tumorske stanice tolerirati genetičkih promjena koje bi inače bile kobne [16]. To je izvijestio da je prekomjerna ekspresija HSP je povezana s lošom prognozom, kao što je Hsp27 u rektalni rak [17], HSP70 u gušterače adenokarcinoma [18] i HSP90 u gastrointestinalnih strome tumora [19]. Ipak, uloga HSP90 u rak želuca još nije u potpunosti razjašnjen. Pregled

U ovom istraživanju smo opisali prognostičku vrijednost HSP90 ekspresiju proteina u uznapredovalog raka želuca, a određuje odnos HSP90 izražavanja s invazijom, metastaza, i kemoterapijskog odgovora pacijenata oboljelih od raka želuca. Imunohistokem je korišten za analizu povezanosti HSP90 ekspresije proteina s kliničkim patoloških faktora i prognostičku snagu 322 pacijenata s rakom želuca. Rezultat je pokazao da Hsp90 razina proteina je značajno povezana s veličinom tumora, tumora stranice, dubina invazije, limfnih čvorova metastaza i kliničkim fazama. Osim toga, Kaplan-Meier analiza je pokazala da je u cjelini, HSP90-pozitivni pacijenti imali lošiju prognozu nego učinio HSP90-negativnih bolesnika s obje RFS i OS. Štoviše, multivarijatna analiza Cox Model pokazuje da je status izraz HSP90 je identificiran kao nezavisni faktor rizika za oba RFS i OS. Naši podaci sugerira da bi HSP90 igraju važnu ulogu u tumorskom prognozu i da HSP90 mogao biti potencijalni prognostički faktori karcinoma želuca, pregled

Poznato je da se degradacija ekstracelularnog matriksa (ECM), bio signal za početak invazije i metastaziranja, i MMP važne molekule uključene u degradaciju ECM tijekom invazije i metastaziranja [20]. Chu et al. [21] izvijestili da je rak MMP-9 značajno koreliraju s dubinom invazije i limfnih čvorova metastaze i da MMP-9-pozitivnih pacijenata s rakom želuca imali lošije rezultate od onih s MMP-9-negativnim tumorima. Štoviše, objavljeno je da je HSP90 i MMP-9 može predstavljati kao kompleksa anaplastičkih velikim staničnim limfomima i MMP-9 može biti aktivirana HSP90 promovirati staničnu invaziju. [22] Naši rezultati pokazuju da je ekspresija HSP90 i MMP-9 su u korelaciji s drugim, što znači veću invazivne i metastazira aktivnost Hsp90 stanicama raka visoke ekspresije. HSP90 može biti ključna molekula za napredovanje u raka želuca. Osim toga, HSP90 vrlo izražena u dubini invazije, posebno u T3 i T4 karcinoma. Što se tiče statusa limfnih čvorova je u pitanju, pacijenti s limfnih čvorova metastaze imaju tendenciju pokazati povišen Hsp90 izraz, dok nije bilo statistički razlika između N1, N2 i N3. Kolektivno, HSP90 izraz u rak želuca, potiče tumorski agresivnost ukazuje na to da HSP90 moglo biti izvedivo cilj u liječenju raka. Pregled

Osim toga, istražili smo odgovor HSP90 u neoadjuvant kemoterapije, i utvrdili da neoadjuvant kemoterapija nije promijenio izraz Hsp90 između biopsije i tumorskih uzoraka karcinoma želuca. To nam sugerira da je razina hsp90 u velikoj mjeri ostaju nepromijenjeni u kemoterapije, što nam je dalo priliku da važnu opažanje da je izraz razina hsp90 u tumorima bila stabilna, bez obzira na to da li je primio neoadjuvant kemoterapiju ili ne. On je izvijestio da HSP90 otpornost na kemoterapije raka [23] - [24]. Štoviše, inhibicija HSP90 izražavanja može smanjiti angiogeneze i proliferacije želučane stanica raka, te nadvladati otpor kemoterapiji [12]; [25]. Uzeti zajedno, ciljanje HSP90 s kemijski inhibitori mogu uzeti u obzir za liječenje karcinoma želuca, posebice kada HSP90 jako je izražen u želuca. Pregled

Ukratko, pokazujemo hiperekspresija HSP90 može igrati važnu ulogu u invaziji tumora , metastaze i prognoza, a može raditi kao obećavajući cilj za prognostički predviđanje kod raka želuca. pregled

Priznanja

zahvalno kliničke podatke koje odjelu patologije. pregled

• PLoS ONE: Enterococcus faecalis Infekcija uzrokuje upalu, intracelularne Oxphos neovisan ROS proizvodnje, te oštećenja DNA nastalih u ljudskom rak želuca Cells
• PLoS ONE: mikrornk-219-2-3p djeluje kao supresor tumora na rak želuca, a reguliran je DNK Methylation