Stomach Health > Mo. Gesondheet >  > Gastropathy and Symptoms > Gastritis

PLOS NËMMEN: Isocitrate Dehydrogenase vun Helicobacter pylori potenziell Induces Humoral immun Äntwert zu Themen mat Peptic oppent Krankheet a Gastritis

Wat VerfÜgung

Background VerfÜgung

H. pylori VerfÜgung gastritis an peptic ulcers Ursaachen an ass e Risiko Facteur fir d'Entwécklung vun gastric carcinoma. Vill vun de Proteinen wéi urease, porins, flagellins an entgëften wéi lipo-polysaccharides goufen als méigleche virulence Faktore bestëmmt déi proinflammatory Reaktioun induce. Mir Rapport immunogenic Potenzialer vun isocitrate dehydrogenase (ICD), eng wichteg Haus hält FAQ vun H. pylori VerfÜgung. VerfÜgung

Methodik /Principal effektiv VerfÜgung

Aminosaier Message vun H. pylori VerfÜgung ICD sech fir Regioune mat abréngen héich antigenic wand VerfÜgung Analyse ze zu silico ënnerworf. Och, computational haut kennt vun der H. pylori VerfÜgung ICD wéi zu de E Hardcore. belaascht VerfÜgung ICD war duerchgefouert Niveau vun Struktur Ähnlechkeet an der Disponibilitéit vun Uewerfläch ausgesat motifs ze bestëmmen, wann all. D' icd VerfÜgung Gentherapie war gekloonten, ausgedréckt, an Dir sidd op engem ganz héije homogeneity. Humoral Äntwert ausernee géint H. pylori VerfÜgung ICD war ënnerdeelt an 82 mënschlech Themen duerch eng Aktivitéit Hausnummeren immunosorbent assay (Elisa) Réckstänn vu 58 Patiente mat H. pylori VerfÜgung gastritis oder oppent Krankheet an 24 asymptomatic gesond Kontrollen assoziéiert. D' H. pylori VerfÜgung ICD elicited potenziell héich humoral immun Äntwert an Teamchef héich antibody titers zu Sera entspriechende endoscopically-bestätegt Sujeten gastritis an oppent Krankheet. Allerdéngs, urea-Otem-Test negativ gesond Kontroll Echantillonen an asymptomatic Kontroll Echantillon hu keng Magnéitfeld immun Äntwerte opzeweisen. D'Elisa fir proinflammatory cytokine IL-8 keng bedeitend proinflammatory Aktivitéit vun ICD Collectioun huet. VerfÜgung

Konklusiounen /Grousses VerfÜgung

ICD vun H. pylori VerfÜgung ass eng immunogen déi mat de Provider immun System Kierzunge fir eng méiglech autolytic-release openee an domat elicits vill humoral Äntwerte vun Persounen mat invasiv H. pylori VerfÜgung Wonn. Allerdéngs konnt, ICD net vill IL8 kopéiert an engem cultured macrophage Zell Linn (THP1) stimuléieren an duerfir, vläicht net e bemierkenswäerte proinflammatory Agent ginn VerfÜgung

Fro:. Hussain MA, Naveed SA, Sechi LA, Ranjan S, Alvi A, Ahmed ech, et al. (2008) Isocitrate Dehydrogenase vun Helicobacter pylori VerfÜgung potenziell Induces Humoral immun Äntwert zu Themen mat Peptic oppent Krankheet a Gastritis. PLoS NËMMEN 3 (1): e1481. Doi: 10.1371 /journal.pone.0001481 VerfÜgung

Akademesch Redakter: Keertan Dheda, University College London, England VerfÜgung

Arnaque: 29. August 2007; Akzeptéiert: 24. Dezember 2007; Publizéiert: 23. Januar 2008 zu

Copyright: © 2008 Hussain et al. Dëst ass eng oppen-Zougang Artikel ënnert de Bedingunge vun der Lizenz BY Creative Commons verdeelt, déi bereet benotzen Genehmegungen, Distributioun, an Reproduktioun vun all mëttelgrouss, gëtt d'Original Auteur an d'Quell Kaiser sinn VerfÜgung

Funding:. Funding aus CDFD Haaptentwéckler Stipendie (Dept. vun déi, Regierung vun Indien) VerfÜgung

Wettsträit Interessen:. D'Auteuren hunn deklaréiert, datt keng Competitioun Interessen existéieren VerfÜgung

Aféierung VerfÜgung

Helicobacter pylori VerfÜgung ass engem Gramm negativ, Baron Bakterie datt chronescher Aids an mënschlechen Mo. féiert. Et ass eng wichteg pathogen déi geduecht ass mat Mënschen Co-Perséinlechkeeten ze hunn [1], [2]. Et inhabits iwwer Halschent vun der Weltbevëlkerung an ass als méigleche Risiko Facteur fir d'Entwécklung vun gastric adenocarcinoma [3] considéréiert. H. pylori VerfÜgung ass en unerkannte Ursaach vun chronescher gastritis, peptic oppent Krankheet, gastric carcinoma, an mucosa-verbonne lymphoid Otemschwieregkeeten (Malz) lymphoma. Puer Mechanismen goufen hir Roll an pathogenesis vun der GUT ze erklären proposéiert. Trotz héije Kolonisatioun Tariffer nëmmen eng kleng Ziel vun infizéiert Leit Erfahrung H. pylori VerfÜgung -associated Krankheeten [2]. Associatiounen vun H. pylori VerfÜgung mat Krankheet-spezifesch Punkte méi oder manner hun nach Déift obwuel den Daniel Nepgen Message virun bal engem Jorzéngt deciphered waren [2]. VerfÜgung

Ee vun de stäerkste ënnerschiddlech Eegenheeten vun H. pylori VerfÜgung ass d'genetesch Diversitéit tëscht de Medeziner isolates aus verschiddene Patient Populatiounsschichte [3] kritt. Recasting vum Daniel Nepgen ass souguer mat dësem Bakterie, schafen domat vill vun allelic an Phas Variant [3], vir Schwieregkeeten an der Entwécklung vun Diagnos an Impfstoffer. VerfÜgung

Wann Qualifikatiounen, bestoe der Wonn fir Joer an, Magnéitfeld immun Äntwerte vun Krankheet Persoune elicits [4], [5] déi fräi Niveaue vu spezifesche IgG an IgA zu serum an Defensivanlage vun secretory IgA an IgM am Mo. charakteriséiert [6]. Dofir, goufen noninvasive serological Tester recommandéiert a fir d'Diagnos vun H entwéckelt. pylori VerfÜgung Wonn. Dorënner, d'Aktivitéit-Hausnummeren immunosorbent assay (Elisa) ass eent vun de meescht extensiv genotzte Method wéi et relativ gënschteg ass, schnell, einfach ze maachen, a fir Kontroll grouss Zuel vun Echantillon liicht adoptéiert kéint [7]. Projekt fir anti H. pylori VerfÜgung antibodies ass dacks virun endoscopy matzebréngen oder ier Behandlung domat. Obwuel wéinst immunological Erënnerung, kann serodiagnosis net de Succès oder Resultat vun Kampf Behandlung ze kontrolléieren bevirdeelegt ginn, bleift et e Choix wéi eng sensibel Method wahrscheinlech wéinst sengem Net-invasiv Natur [8]. VerfÜgung

Moment, do ass keng eenzeg "Gold Standard 'antigen ginn, déi den Flugtransport ganze all Populatiounsschichte benotzt ginn. Ee vun den Haaptgrënn, fir dësem kéint d'ausseruerdentlech Diversitéit an H ginn. pylori VerfÜgung [9] - [13] an och hir spezifesch Adaptatioun vun verschidden dorophin [12], [13]. Obwuel Proteinen wéi catalase, Gro VerfÜgung EL, an flagellin staark immunogenic ginn, si ginn nonspecific Kräiz-Reaktioune mat anere Gramm-negativ Bakterien a méi besonnesch, Campylobacter jejuni VerfÜgung [14], [15]. Am Géigesaz, virulence Hausnummeren antigens wéi CagA oder VacA, weisen eng relativ héich Ofschloss vun Haaptrei Verännerlechkeet, well et existéieren H. pylori VerfÜgung analyséieren, déi genetesch verschiddenste sinn an phenotypically Variabel fir een oder zwee de antigens [16] - [18]. Trotz dëser, zefriddestellend Associatiounen tëscht serum antibodies an invasiv Krankheet hunn beschriwwe ginn [19]. VerfÜgung

Housekeeping Genen vun H. pylori VerfÜgung kuerzem Populatioun Migratiounen benotzt ginn hunn zu Streck an huet an der Nepgen ganze Joerhonnerte [20] gin stabil fonnt. Housekeeping Proteinen Ee, hunn net déi a grousse fir hiren Asaz am Diagnos oder Impfstoffer getest goufen. D'metabolic Enzymen schéngt e gudde Kandidat ze ginn an déi Jonker-diagnostic Test Kit fir désignéiert well se dacks net Kräiz-reagéiere mat Sera aus gesond Kontrollen [21]. Och, Wéint hirer housekeeping Funktioun, si si ënnert verschiddene H héich conserved. pylori VerfÜgung analyséieren onofhängeg vun hirem genotypes an esou kann den ideal Jonker-diagnostic Kandidaten déngen. VerfÜgung

Proteinen déi aus Bakterien am spéiden Mooss Wuesstem Phas, wéi superoxide dismutase an isocitrate dehydrogenase (ICD) verëffentlecht ginn, si beschriwwen als autolysis lues [22] - [24] an e puer vun hinnen hunn bewisen gouf excellent diagnostic antigens gin. Zum Beispill, ICD vun M. Tuberkulos VerfÜgung huet wéi e Potential antigen ze diskriminéieren hin Tuberkulos Patienten aus gesond Kontrollen [24] beschriwwe ginn. Mä virdrun Vergläicher vun der antigenic Musteren vun H. pylori VerfÜgung Proteinen (dorënner e puer vun den housekeeping Proteinen) vum Patient Sera unerkannt réischt kee Veräin vun spezifesch H. pylori VerfÜgung antigens mat Fäll vu bestëmmte gastroduodenal wirklech [21]. VerfÜgung

Dës Etude beweist Interaktioun vun de Provider immun System mat H. pylori VerfÜgung ICD zu der Form vu wesentleche humoral Äntwerte vun Krankheet Sujeten gesinn. Weider, beschreiwen mir H. pylori VerfÜgung ICD antigen oppent Krankheet an gastritis Patienten aus uninfected gesond Persounen. VerfÜgung

Resultater VerfÜgung

An silico haut kennt, Ausdrock an Offäll vum H. pylori ICD FAQ VerfÜgung

fir z'ënnerscheeden Protein Haaptrei vun ICD vun H. pylori VerfÜgung war baséiert op antigenic Index, hydrophilicity an Uewerfläch Probabilitéit ze soe seng immunogenicity analyséiert. Figur 1A weist zu silico VerfÜgung antigenic Profiler vun ICD generéiert Protean Software (DNAStar Galaxy USA) benotzt. Kuerz, goufen entspriechend puer Spure mat abréngen héich antigenic bestinn (~3.4) Aminosaier motifs ze immunoreactive identifizéiert. D' H. pylori VerfÜgung ICD also grouss antigenic gréisseren (Dorënner 1A) wourop eis et als putatively immunogenic FAQ Wanterschlof ugewisen. D'antigenicity bestinn vun ICD sech virdrun op déi vergläichbar fir eng PPE antigen Rv2430c vun mycobacterial Urspronk gemellt, déi weider bewisen huet en immunodominant antigen [25] gin. D' E. belaascht VerfÜgung ICD war och zu engem ähnlechen Manéier analyséiert a wossten putatively immunogenic ze ginn; do war eng kloer Differenz als Verglach zu H fonnt. pylori VerfÜgung ICD, mat Respekt un d'Heefegkeet an Positioun vun antigenic Reschter. Spéider, gebaut mir eng homology Modell vun der H. VerfÜgung ICD pylori baséiert op der glaskloer Struktur vun E. belaascht VerfÜgung ICD (PDB Code 1AI2) a konnt Stäip Organisatioun vun H bis hin. Pylori VerfÜgung (26695) ICD zesumme mat deem vun E. belaascht VerfÜgung. Déi zwee ICDs sech fonnt vill ähnlech (RMS Deviation 0.45) nach mat Respekt un 3 wichteg Uewerfläch ausgesat Glück Regiounen ënnerscheet déi héchstwahrscheinlech de Beräicher vun strukturellen Ënnerscheeder zu sécherlech zu der putative antigenic epitopes entspriechend, méiglecherweis Ënnerscheed antibody Äntwerte leeden (Dorënner 1B ) VerfÜgung

D'Regioun-ausgedréckt N-Uschloss war seng-afp ICD GT bis &sidd;. 95% homogeneity op engem Néckel Affinitéit Kolonne (Dorënner 2). D'molekulare Mass vun der recombinant ICD war alles 47. kDa gin. Protein Offäll war ënner gebierteg Konditiounen mat engem Rendement vun 2.0 mg vun FAQ pro 500 ml vun Ufank Kultur duerchgefouert. VerfÜgung

Zesummespill vun H. pylori ICD mat de Mënsch immun System VerfÜgung

Humoral immun Äntwerte ausernee géint den H. pylori VerfÜgung ICD sech Patienten mat H Verglach. pylori VerfÜgung Wonn (gastritis, NUD, DU an GC) a gesond Kontrollen (Dorënner 3). D'immunoreactivity Date goufen statistesch analyséiert an am Verglach mat Uschloss un béiden Krankheet a gesond Sera. Dës Donnéeën bewisen, dass Sera vun all vun der Krankheet Patienten Zougehéieregkeet zu gastritis an ausléisen oppent (DU) Kategorien statistesch relevant gedroen ( P VerfÜgung &Si besteet; 0.0001) anti ICD antibody Niveau wéi am Verglach zu deene vun der gesond Kontrollen. D'ICD FAQ, déi eng scheinbar wichteg metabolic Roll huet, war domat eng staark humoral Äntwert zu Themen mat gastritis an DU ze kënnen ze dran fonnt. Allerdéngs gouf am Fäll vun Net-oppent dyspepsia (NUD) an gastric Kriibs (GC), reduzéiert humoral Äntwert gesinn. Tatsaach dës Observatiounen, ass et wahrscheinlech, datt d'Verëffentlechung vun ICD FAQ mat aktiv verbonnen ass, H. pylori VerfÜgung Wonn. Am Géigesaz zu observéiert humoral Äntwerte, déi recombinant, H. pylori VerfÜgung ICD induce net all bedeitend bewosst immun Äntwerte wéi aus Mangel vun secretion vun IL-8 aus Mënsch macrophages entschlof mat recombinant Siicht, H. pylori VerfÜgung ICD kënschtlech VerfÜgung (Dorënner 4). Mir dofir, proposéiere datt ICD nëmmen de humoral unzekräizen Laafenden an kann net fir gastric wirklech oder cytokine entschlof Ännerungen am gastric Physiologie bäidroen. VerfÜgung

Diskussioun VerfÜgung

Umeldung an characterization vun héichgradeg immunogenic H. pylori VerfÜgung Proteinen ass eng obligatoresch Noutwendegkeete fir d'Entwécklung vun serological Tester baséiert op recombinant sidd antigens. Kombinéiert mat der urea Goalchance Test, ass serology engem noninvasive Approche ze entdecken H. pylori VerfÜgung Wonn, an e puer serological Test Trikoten baséiert op ville verschiddene H. pylori VerfÜgung antigens sinn kommerziell sinn. Obwuel d'humoral immun Äntwert op H. pylori VerfÜgung schéngt relativ dicht ze ginn, Kombinatioune vun kéint oft unerkannt antigens fir diagnostic Zwecker [21] nëtzlech beweisen. D'metabolic Enzymen wéi ICD Virworf gutt Kandidate ginn haaptsächlech fir serological Test Kit Entwécklung harnessed gin well se mat Sera net Kräiz-reagéieren do vun Net-Krankheet oder gesond Persounen [24]. VerfÜgung

d'Bedeitung vu ville immunogenic Proteinen vun H. pylori VerfÜgung puer metabolic Enzymen anerem huet an de Medeziner Echantillon vun engem fréiere proteomics baséiert Etude [21] net appréciéiert goufen. Eis Etude war awer ausernee sidd ze diskutéieren, recombinant, H. pylori VerfÜgung ICD fir seng immunological Eegeschafte vun verschiddenen Klassen vun H. pylori VerfÜgung Seier peptic Krankheet Patienten infizéiert. Mir versicht fir systematesch d'Präsenz an Nëtzlechkeet vun immun Äntwerte vun der ICD FAQ zu H elicited ënnersicht. pylori VerfÜgung Patienten infizéiert. VerfÜgung

Eis Analyse recombinant ICD vun H benotzt. pylori VerfÜgung vill héich antibody titers ënnert peptic oppent Krankheet an gastritis Patienten verroden, wéi mat NUD a Kriibs Patienten am Verglach (Dorënner 3). Mir spekuléieren, datt d'immun Äntwert peptic oppent Fäll an gastritis gesinn an wahrscheinlech wéinst héich gedroen vun Bakterien mat invasiv wirklech an domat eng méi héich Zuel vun autolysed pathogens oder pathogens Fotoe ICD op der Uewerfläch verbonne ginn hätt. Dëst kann eventuell de comparatively héich-antibody Äntwert zu invasiv Kategorie Patienten erklären. VerfÜgung

H. pylori VerfÜgung antigens gi beschriwwen an der extracellular Plaz via Multiple Mechanismen wéi spezifesch secretion Édouard autolysis, an Opstellung vun Membran vesicles [23] an der Uewerfläch Eegeschafte vun H verëffentlecht ginn. pylori VerfÜgung ugeholl goufen an dono adsorption /Uewerfläch Lokalisatioun vun esou Proteinen [26] eenzegaarteg gin. ICDs Traditionell esou lues vun autolysis bekannt [22], [24], [27], während de spéiden Mooss Phase lassgelooss. D'extracellular Fräiloosse vu Proteinen kéint eventuell nëmme während occuring gin kënschtlech VerfÜgung Wuesstem vun H. pylori VerfÜgung. Mä zu VIVO VerfÜgung Existenz vun esou Mechanismen, wann bewisen, kéinten d'Roll vun verschiddenen secreted Proteinen am molekulare wirklech vun oppent Krankheet ze erklären kënnen. Der Entrée vun H. pylori VerfÜgung Proteinen an der gastric submucosal Plaz hu vläicht wichteg funktionell Konsequenzen wéi Promotioun vun proinflammatory an chemotactic Äntwerte duerch release vun cytokines aus ageschalt macrophages. Och, déi extracellular release an oder adsorption oder Uewerfläch Lokalisatioun [26] vu potentiel immunogenic Proteinen kéint eng bakteriell Strategie fir diverting eng effikass lokal immun Äntwert [23] Ënnerstëtzung. Haalt dës verschidde Mechanismen vergiessen, vergewësseren mir proinflammatory Potenzialer vun ICD mat der Hëllef vun engem IL-8 Elisa assay. An eiser Observatioun, hu ICD net vill IL-8 secretion an ënnerscheet, cultured macrophages induce. Mä, well mer net Roll vun ICD als Bezuch zu Aféierungs- vun anere proinflammatory cytokines Analys gemaach wéi TNF-α an IL1-β, gëtt et virzäitegen ginn Iéch z'engagéieren an gastric inflammation zu ausschléissen. VerfÜgung

Nodeems dës dass H. pylori VerfÜgung ICD elicits engem humoral Äntwert, mir d'Basis vun immun Spezifizitéit vun dësem FAQ propagéieren wéi déi Struktur baséiert haut kennt reflektéiert. Eis Haaptrei analyséiert a molekulare haut kennt vun H. pylori VerfÜgung a E. belaascht VerfÜgung ICDs hutt léist net komplett strukturell Iwwerlappungen tëscht déi zwee (Dorënner 1); verschidde Regioune vun strukturell dissimilarities sech méiglecherweis discerned déi zu der putative antigenic epitopes zu H entspriechen. pylori VerfÜgung ICD. Ausser der verbonne Problemer ze strukturell Conservatioun oder Diversitéit, hypothesize mir datt héich ofbaubar vun H. pylori VerfÜgung ICD wéi zu ICD vu (commensal) E Verglach. belaascht VerfÜgung mat de Provider immun System zu VIVO VerfÜgung mat 1) verschidden invasiveness vun H verbonne ginn hätt. pylori VerfÜgung a E. belaascht VerfÜgung 2) verschidden Hellegkeet vun bakteriell opbauen, Ëmsaz a autolysis 3) verschidden Repertoire vun antigen Fotoe Zellen (macrophages versus dendritic Zellen) Équipe an hir famill Iwwerfloss 4) Disponibilitéit vun Uewerfläch ausgesat epitopes zu H. pylori VerfÜgung ICD (wéi déi vun Dorënner 1B Optakt), a 5) Präsenz vun aktiv lesions vun chronescher inflammation, mucosal Schued a chemotactic Effekter vun der aner H. pylori VerfÜgung Proteinen am MILIEU VerfÜgung. VerfÜgung

Iwwerdeems que méiglech Kräiz-ofbaubar aus anere invasiv Bakterien wéi C. jejuni VerfÜgung, getest mir H. pylori VerfÜgung ICD géint 8 Echantillon vun C. jejuni VerfÜgung enteritis Patient Sera a fonnt, datt et net Kräiz-reagéiert huet vill (Donnéeën net gewisen). D' H. pylori VerfÜgung gratis Status vun eisem C. jejuni VerfÜgung positive Patiente baséiert op d'Feele vun Symptomer vun indigestion, Mo. Péng an heartburn etc. Mä alles, well mir nëmmen limitéiert Sera Echantillon benotzt aus C. jejuni VerfÜgung Patienten, si mir net viséiert ze Mark H. pylori VerfÜgung ICD als Eenzel diagnostic antigen. Trotzdeem, C. jejuni VerfÜgung net ëmmer kënnen am Kader vun enger vill kompetitiv Hannergrond ausser C. jejuni VerfÜgung Patienten selwer sinn klinesch vun H koloniséiert. pylori VerfÜgung oder vice-versa. VerfÜgung

Endlech, déi villverspriechend Resultater mir am Sënn vun enger grousser humoral Äntwerte H kritt. pylori VerfÜgung ICD kann net als direkt applicabel fir Plaz Diagnos gi. Trotzdeem ass, ass et méiglech, datt eis Conclusiounen eng Grondlag fir d'Entwécklung vun engem sero-diagnostic Test fir H. pylori VerfÜgung gastroduodenal pathologies assoziéiert. Mir proposéieren d'Potential vun dëser antigen a seng epitope spezifesch peptides weider mat engem grousse Batterie vun Sera Echantillonen analyséiert ginn verschidden Krankheet Sujeten vertrëtt. Den Zerfall, entspriechend de Status a Bedeitung vun Kräiz-reagéiert antibodies zu Sera fir déi Bakterien ëmmer Krankheeten wéi Salmonellen niwweleg., Shigella niwweleg. an aner invasiv enteropathogens kéint och alles ginn. Et ginn Objeten am sécher Aktivitéiten an der submucosal Raum, besonnesch seng Interaktioun mat der Aktivatioun macrophages an lymphocytes zu-Déift der Bedeelegung vun ICD ze entdecken. Och, well seng wichteg Roll an der tricarboxylic Seier Zyklus an dem Fehlen vun glyoxylate shunt zu H. pylori VerfÜgung [27], fällt d'Evaluatioun vun ICD als méiglech interventional Zil- spannenden Skizz. VerfÜgung

spontan a Methode VerfÜgung

An silico antigenicity vun virausgesot H. pylori ICD (HP0023)

Nukleotid Haaptrei vun H. pylori icd VerfÜgung (ORF HP0023) an den entspriechende Haaptrei Aminosaier war vun Pylorigene Datebank (http://genolist.pasteur.fr) kritt a war bis Analyse vun DNAStar Pak (DNAStar Galaxy Madison, USA) ënnerworf. Aminosaier Haaptrei vun ICD war fir all antigenic determinants Leescht ënnerworf Protean Programm bannent de Pak DNAStar benotzt. Parameteren wéi hydrophilicity, Uewerfläch Probabilitéit an antigenic Index sech fir de ganze FAQ anhand Software berechent. Antigenic bestinn domatten méi wéi 2 Moundalpen um > 3.0 CDM sech als vill méi antigenic als VerfÜgung

Computational haut kennt vun ICD Struktur VerfÜgung

Ausschöpfung Modeller-6, engem molekulare haut kennt Programm datt eng automatiséiert Approche setzen. zu Komparativ haut kennt FAQ Struktur zur Zefriddenheet vun raimlech restraints [28] war fir Bestëmmung vum dräi Dimensiounen Modell vun H benotzt. pylori VerfÜgung ICD. D'ICD Modell vun H. pylori VerfÜgung war baséiert op den E generéiert. belaascht VerfÜgung ICD Skelett 1A12 déi global 68% leien Identitéit mat der H deelt. pylori VerfÜgung ICD. VerfÜgung

Produktioun vun recombinant H. pylori ICD VerfÜgung

Den ORF zu entspriechend H. pylori icd VerfÜgung (HP0023, 1,275 KB) war vun Hinnen alleguer aus dem Frankräich DNA vun engem H Kick. pylori VerfÜgung Patient isoléieren MS8. D'recombinant ICD FAQ war eriwwer an E ausgedréckt. belaascht VerfÜgung a sidd bis homogeneity (Dorënner 2) no der Methode virdrun duerch Banerjee beschriwwen et al VerfÜgung [24]. D'Recolte vun sidd FAQ war bis 2.0 mg vun sidd FAQ pro 500 ml vu ab Kultur vun recombinant E standardiséierte weider. belaascht VerfÜgung. D'sidd recombinant FAQ war dialyzed géint 20 mm Tris HCl, pH 7.5, mat 100 mm NaCl an 3% glycerol. Weider gouf de stilvoller FAQ mat polymixin B behandelt Auswierkunge vun all LPe kontaminéierte zu ausschléissen. D'sidd recombinant ICD lyophilized war an direkt gefruer an Medeziner Diagnos fir matgeholl benotzen gespäichert. VerfÜgung

kennen a mënschlech serum Echantillon VerfÜgung

D'Etude Bevëlkerung ( n VerfÜgung = 82) aus 58 H. pylori VerfÜgung Patient Echantillon Krankheet zu der Deccan College vun Medical Sciences Berichterstattung haaptsächlech kritt aus Fäll (an all Kategorie analyséiert fir Detailer vun Zuel vu Fäll, wann ech glift Dorënner 3 gesinn) an den alliéierten Spideeler, (DCMS), Hyderabad, an 24 klinesch gesond Donateuren. Déi gesond Kontroll Grupp war vun 18 bewisen H aus. pylori VerfÜgung negativ Fäll mat Urea Goalchance Assay (Uba) a 6 asymptomatic Persounen getest déi confirméiert huet H. pylori VerfÜgung vun kommerziell sinn Elisa Kit esou terribel negativ (Pyloriset EIA-GIII, Orion, Espoo, Finnland). An all de Patient Gruppen, Diagnos vun oppent oder gastritis war vun endoscopy vun der Richterskala gastroenterologist confirméiert oder Indikatiounen. D'Präsenz vun H. pylori VerfÜgung zu diseased Sujete vun dëser Etude abegraff war virdrun vun Gramm d'staining, eng rapid urease Test (rut), 16S rRNA a cag VerfÜgung A Gentherapie baséiert PCRs a Kultur [29] confirméiert. D'Etude Bevëlkerung hat kee Geschlecht oder Alter Westen. Schrëftlech informéiert Autorisatioune goufen aus all d'Patienten a gesond Kontrollen op de respektiven Zentren kritt. VerfÜgung

Elisa fir humoral Äntwerte VerfÜgung

Elisa assay Leeschtung war d'humoral immun Äntwert am Mënschen géint recombinant ICD ze kontrolléieren. Kuerz, waren der 96-gutt microtiter Placke mat ~500 NG vun recombinant ICD FAQ bedeckt. D'Beschichtete Placke waren Nuecht op 4 ° C incubated, gewäsch dräimol mat PBS-T (0,05% Tween 20 an 1 × PBS) an zweemol mat PBS. Placke waren dann mat 100 μl vun erauszesichen Prellbock (2% BSA zu 1 × PBS) bei 37 ° C fir 2 Stonnen gespaart. D'Placke waren dräi mol mat wäschen gefiermt PBS-T an zweemol mat PBS gewäsch. D' H. pylori VerfÜgung -infected Mënsch Sera fir verschidde Krankheete Gruppe gehéiert goufen serially verdënntem (1:50, 1:100, 1:200 an 1:400) zu erauszesichen Prellbock (1% BSA vun PBS), beschtméiglecher titers ze kréien. Verdënntem Sera [50 μl vun 1:200 verdënntem Sera] goufen zu antigen-Beschichtete Wells derbäi a bei 37 ° C fir 1 HR incubated. D'Placke waren dräimol mat PBS-T an zweemol mat PBS a weider incubated mat anti-Mënsch IgG-horseradish peroxidase (Fläch) bei 37 ° C fir 1 HR rinsed. Horseradish peroxidase Aktivitéit nogewise gouf e chromogenic Substanz benotzt, o VerfÜgung -phenylenediamine tetrahydrochloride (Fläch) zu citrate-phosphate Prellbock (pH 5.4) an H 2O 2 den 1 μl /ml. D'Reaktioune waren mat 0,5 M H 2SO 4, an der absorbance Wäerter opgehalen huet bei 492 nm an eng Elisa Lieser (Bio-Rad) gemooss. All Elisa huet op d'mannst zweemol mat all Medeziner Sera isolates widderholl. Student d' t VerfÜgung Test Leeschtung war ze berechnen p VerfÜgung Wäerter baséiert op d'Moyene vun der serum antibody titers fir gesond a Personal Klassen entspriechend vun der online wëssenschaftleche Rechner vun GraphPad benotzt (www.graphpad.com_quickcalcs_ttest1 .cfm). P VerfÜgung Wäerter manner wéi 0,05 statistesch relevant considéréiert goufen. VerfÜgung

Elisa fir proinflammatory cytokine IL-8 VerfÜgung

THP-1 Zellen (mënschlech Monocyte, ATCC TIB 202) ugebaut an haten an RPMI 1640 (Invitrogen) mat 10% an et Bovine serum ergänzt, 2 mm Glutamine an 1% anti-bakteriell an Anti-mycotic Léisung (Gibco). Fir macrophage wëll Etapp, ongeféier 1 × 10 -6 Zellen /gutt ënnerscheet sech mat 5 Dummeldéng /ml bor-12 myristate 13c acetate (PMA, Fläch). No 24 Stonnen, sech Zellen eemol mat RPMI 1640 Medien gewäsch a stimuléiert 10 μg /ml vun recombinant ICD benotzt. A proinflammatory FAQ, HP940, vun H. pylori VerfÜgung [30], ënner ähnleche Konditiounen sidd war als positive Kontroll (1 ug /ml) benotzt. Zellen sech op 37 ° C fir 24 Stonnen an engem humidified Atmosphär incubated. Zellen ouni FAQ Behandlung (unstimulated Zellen) fiert als negativ Kontroll. Kultur supernatant gesammelt no 24 Stonnen fir d'Estimatioun vun IL-8 benotzt gouf benotzt kommerziell sinn optEIA Elisa Kit (BD Biosciences). Assay war no der Uweisunge vum Fabrikant standing an der cytokine Niveauen sech mat der recombinant Standard an de Kit gëtt berechent. Empfindlechkeet vun IL-8 war 3,1 PG /ml. Wäerter sech als mengen ± Fils ausgedréckt. VerfÜgung

Arbeschterlidder VerfÜgung

Mir sin wëllkom fir Seyed E. Hasnain an Sharmistha Banerjee fir Diskussiounen. Mir soen eise Partner CM Habibullah an Barik A Salih fir Hëllef op Patient Material an Informatiounen. Dank sinn och wéinst Francis Megraud fir verschidde Kontroll Sera Echantillon ëmzesetzen. NA ass jeeweilegen Fellow vun europäeschen Helicobacter Sécuritéit Group (EHSG). VerfÜgung

Other Languages