Leptin receptor sécher ass fir Héich-Fett iessen-entschlof atrophic gastritis zu Mais néideg

Leptin receptor sécher ass fir Héich-Fett iessen-entschlof atrophic gastritis zu Mais VerfÜgung méiglech VerfÜgung Background néideg VerfÜgung Den de Risiko fir malignancies zu verschidde Stoffer dorënner de Mo. vergréissert. Atrophic gastritis mat precancerous lesions ass eng Tendenz-verbonne Krankheet; de Mechanismen awer, datt d'Entwécklung vun Obesitéit-verbonne atrophic gastritis underlie sinn onbekannt. Leptin ass en Hormon aus Mo. ofgeleet souwéi adipose Otemschwieregkeeten an gastric leptin ass an der Entwécklung vun gastric Kriibs Équipe. D'Zil vun der aktueller Etude ass den Engagement vun leptin receptor sécher an der Entwécklung vun atrophic gastritis während Ernährung-entschlof Obesitéit ze ermëttelen. VerfÜgung Method VerfÜgung Männlech C57BL /6, Entity /Entity VerfÜgung an DB /DB
Mais sech eng héich-Fett iessen (HFD) oder eng Kontroll Ernährung (CD) vun 1 Woch zu 5 Méint es. Agebousst Ännerunge vun der gastric mucosa an den Ausdrock vun Molekülle mat atrophic gastritis verbonne waren an deene Mais bewäert. VerfÜgung Resultater VerfÜgung HFD erofzesetzen gastric mucosal hyperplasia mat fräi gastric leptin Ausdrock entschlof. Mucosal hyperplasia war vun enger héijer Frequenz vun Ki67-positiv proliferating Zellen an atrophy vun der gastric Glands an der Präsenz vun inflammation begleet, déi folgend HFD erofzesetzen fräi. Aktivatioun vun ObR sécher-verbonne Molekülle wéi ObR, STAT3, Akt, an Erk war an der gastric mucosa vun Mais z'iesse der HFD fir 1 Woch erwëscht. D'morphological hire Restaurant verbonne mat gastric mucosal atrophy an dem Wëllen vun Muc2 an Cdx2 selwer mat mënschlechen intestinal metaplasia déi assoziéiert. Am Géigesaz zu Wildwest-Typ Mais, leptin-erhéijen Entity /Entity VerfÜgung Mais an leptin receptor-mutated DB /DB VerfÜgung Mais weisen net fräi Cdx2 Ausdrock an Äntwert ze HFD erofzesetzen. VerfÜgung Conclusioun VerfÜgung Zesumme , proposéiere dës Resultater datt Aktivatioun vun der leptin sécher Passerelle am Mo. néideg ass Obesitéit-verbonne atrophic gastritis. VerfÜgung Schlësselwieder VerfÜgung leptin atrophic gastritis High-Fett iessen den Background VerfÜgung Gastric carcinoma (GC) typesch Ressort ze entwéckelen op engem Hannergrond vun atrophic gastritis, intestinal metaplasia, an dysplasia vun gastric mucosa, an ass den zweete Spëtzekandidat Ursaach vum Kriibs-Zesummenhang Doudesfäll weltwäit [1]. Obesitéit Lamb de Risiko vun enger méi héijer prevalence vun gastritis [2, 3], atrophic gastritis [4-6], an gastric Cardia adenocarcinoma [7-9]. Krankheet mat Helicobacter pylori VerfÜgung, eng Bakterie, datt Mënschen a bewunnt de Mo. infects, ass de predominant Ursaach vun precancerous lesions an der mucosal Doropshin vun de Mo [10]. Obwuel H. pylori VerfÜgung Wonn net agespaart ass morbidly mockeleg Patienten un, Erhéijunge Obesitéit der prevalence vun chronescher gastritis an GC [2]. Ausserdeem, ass Obesitéit net nëmmen e Risiko Faktor fir bestëmmte erhéijen mä och mat engem fräi veruerteelt Taux [11] assoziéiert. Sou, schellt Obesitéit potenziell der Entwécklung vun gastritis an gastric tumorigenesis. Dofir, et Imperativ ass Molekülle z'identifizéieren sécher mat béiden verbonne Obesitéit an precancerous lesions an der Gestioun vun héich-Risiko Persounen ze Hëllef. VerfÜgung Leptin, e Produkt vun der mockeleg (Entity VerfÜgung) Gentherapie, ass virun allem duerch adipocytes produzéiert an Akten op seng receptor (ObR) an der hypothalamus Haaptmoolzecht eraus an Energie Dépensen Erhéijung [12]. ObR gehéiert zu der Klass sin receptor Famill cytokine, a seng Struktur ass héich homologous fir datt vun gp130, d'gemeinsam Signal-transducing receptor fir d'interleukin-6 (IL-6) Famill vun cytokines [13]. Vun de sechs Stellvertrieder splice Varianten vun ObR, just de laange isoform, ObRb, transduces e Signal CASCADE datt afgerappt Janus kinase 2 an Signal Better gëtt reduzéiert a activator vun Transkriptiouns 3 (JAK2-STAT3) activéiert, phosphoinositide 3-kinase (PI3K), an extracellular Signal-reegelen kinase 1/2 (ERK1 /2) [14]. Nieft senger Roll an Energie homeostasis, enormen leptin pleiotropic Auswierkungen op angiogenesis, hematopoiesis, an excellence wéi gutt [14]. Leptin an ObR sinn och zu verschiddene Stoffer dorënner de gastrointestinal TRACT [15] ausgedréckt. Zousätzlech kann de Mo. spontan leptin an ObR auszedrécken, fir d'Defensivanlage vun leptin receptor sécher am Mo. während GC Entwécklung Virwaat [16-18]. Mir hunn jo bewisen virdrun d'Bedeitung vun leptin sécher an de Mo a seng Roll an der Entwécklung vun intestinal-Typ gastric entholl engem murine Modell benotzt [19]. Viagra vun Mëtt Nereïden Regulatioun vun leptin sécher ënnerstëtzt leptin Resistenz. Trotz héije Niveau vun libre Plasma leptin, mockeleg Persounen do äntwerten net un hir Hausaufgabe-suppressing Effekter, déi besot hunn leptin Resistenz [20]. Well leptin zu der Entwécklung vun gastrointestinal malignancies entscheedende ass a stellt e Lien tëscht Obesitéit an tumorigenicity [17], e bessert Verständnis vun der dysregulation vun gastric leptin sécher an hirer Roll an gastric wirklech Obesitéit-entschlof ass néideg. VerfÜgung Method
Déieren a Bierger VerfÜgung Männlech C57BL /6J (Wildwest-Typ: virstellen), Entity /Entity VerfÜgung, an DB /DB VerfÜgung Mais (Clea Japan, Tokyo, Japan) waren bei 7 Woche vun Alter studéiert. D'Déiere goufen individuell am Plastik Käfeg bei 24 ° C ± 1 ° C mat Luuchte vun 0600 bis 1800 h waren. De Mais sech mat entweder enger Kontroll-Fudder (CD, 10% vun Kalorien aus Fett, D12450J) oder eng héich-Fett iessen (HFD, 60% vun Kalorien aus Fett, D12492) (Research Bierger Galaxy New Brunswick, NJ gëtt ) a Waasser ad libitum VerfÜgung. Der Ethik Comité fir Déier Experiment vun der National Institut fir gestallt Sciences guttgeheescht all Déier Experimenter. Histopathological Analyse vun der gastric mucosa
gastric Rubriken vun 10% formalin-fix Stoffer-Paraffin Ënnerbewosstsinn sech aus der HFD- a CD kritt -fed Mais a sech mat hematoxylin an eosin (H & E) geschriwwen, a fir hire Restaurant op der gastric mucosa évaluéieren. De Bilan vun mucosal hire Restaurant am Mo. war op engem summation vun Fändelen fir hyperplasia baséiert (0 Nët-substantiell Verfall; 1, niddreg; 2, moderéiert; 3, héich), Zell einfach (0 Nët-substantiell Verfall; 1, niddreg; 2, moderéiert; 3, héich), Verloscht vun gastric glandular Zellen (0 Nët-substantiell Verfall; 4, niddreg; 5, moderéiert; 6, héich), Alcian blo staining (0 Nët-substantiell Verfall; 4, Mann; 5, diffusen; 6, ganz staark diffusen), an dysplasia (0 nët-substantiell Verfall; 7, niddereg). All Critère vun zwou Persounen mat Critèren onofhängeg blann-Faarwen war dat virdrun definéiert sech [19]. VerfÜgung Intragastric pH Miessunge VerfÜgung Gastric pH war gemooss no engem publizéiert Method [21]. An dowéinst, Mais sech no anesthetization vum Kuelendioxid inhalation geaffert. No Mo. Entféierung, war d'gastric lumen ofgegruewen an Katakombe mat 0,5 ml Salins (150 mm, pH 7.0), an de pH vun den agesammelte gastric Flesseggassystem gemooss gouf mat engem pH Meter (Mettler, Toledo, leider). VerfÜgung Immunohistochemical Analyse VerfÜgung Paraffin-Ënnerbewosstsinn Rubriken vun 10% formalin-fix Stoffer goufen Kierchefënster entweder mat H & E oder mat periodesch-Seier Schiff (Pas) an Alcian blo. Fir antigen retrieval, deparaffinized an rehydrated uplanzen sech mat 3% Waasserstoff Hem zu methanol behandelt endogenous peroxidase Aktivitéit ze blockéieren an dann zu enger Schleck erëm gehëtzt goufen eng Retrievagen A Kit (BD Biosciences, San Jose, CA) benotzt, gefollegt vun Iwwernuechtung incubation mat der Primärschoul Table S1: antibodies (Abs) bei 4 ° C als zu Weider Fichier 1 opgezielt. Duerno goufen d'drënner mat engem biotinylated anti-Kanéngchen IgG oder anti-Geess IgG Ab an streptavidin-Label peroxidase mat engem Histofine SAB-PO Kit (Nichirei Biosciences Galaxy Tokyo, Japan) Kierchefënster an entwéckelt mat 3, 3'-diaminobenzidine (botzt) Léisung (ImmPact TM botzt, Vecteure Laboratoiren, Burlingame, CA) no de Protokoll d'Produktioun, gefollegt vun hematoxylin counterstaining. Fir immunofluorescence staining, waren der drënner mat der Primärschoul Abs (Zousätzleche Fichier 1: Table S1) incubated an geklot dann mat Alexa 488-conjugated Kanéngchen oder Maus IgG Ab oder Alexa 556-conjugated Geess IgG Ab, wéi ubruecht. D'grousst drënner waren benotzt verlängeren Gold Antifade reagent mat 4 'Descher, 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) (Life Technologies, Karlsbad CA) fir ze erkennen e fluorescence microscope (Olympus, Tokyo, Japan) benotzt. Western VerfÜgung blot Analyse VerfÜgung epithelial Zellen Gastric huet isoléiert a bereet no enger Modifikatioun vun engem virdrun publizéiert Method [22]. Leschten kleng Segmenter vun de Mo. sech fir 10 min an enger équilibréierter Léisung Salz d'Hank bei Raumtemperatur opreegt (HBSS) (Thermo Fisher Wëssenschaftlech Galaxy Waltham, MA) mëttelfristeg mat 1 mm DTT. Der Entféierung vum supernatant, goufen Stoffer bei 37 ° C fir 10 min an HBSS mat 10 mm héich géinteneen. Der Entféierung vum supernatant, war d'Otemschwieregkeeten Ophiewe duerch eng Nylon ech den Stëps ze protégéieren an um 20 duerch eng 25/40% erauskomm Percoll (Fläch-Aldrich, St. Louis, MO) packt centrifuged um 600 × g VerfÜgung ° C fir 20 min. D'Zellen vum Interface vu 25/40% gesammelt goufen d'epithelial Zellen. Lysates sech aus Stoffer an Zellen bereet an déi westlech blotting analyséiert, no engem virdrun publizéiert Method [23]. D'Abs am Südweste blotting benotzt ginn an Weider Fichier zesummegefaasst 1: Table S1 VerfÜgung Laser-knipsen microdissection VerfÜgung der uewendriwwer-beschriwwen paraffin-Ënnerbewosstsinn gastric Stoffer an 6-μm-décke Rubriken geschnidde goufen an Descher op Membran drënner (. MembraneSlide 1.0 Pen, Carl König Microscopy, Firmechef, Thornwood, NY). Paraffin war vun do falsch de Rubriken mat xylene geläscht, no deenen d'Sektiounen sech an enger Serie vun 100% op 70% Ethanol Termen an d'Loft-gedréchent Beweegung. Mucosal Rubriken vun gastric epithelia sech gelooss an op AdhesiveCaps gesammelt (palm Microlaser Technologies, Bernried, Däitschland) vun engem Laser-knipsen microdissection (LMD) System (PALM MB-III, Microlaser Technologies). VerfÜgung Chemeschen ëmgedréint Transkriptiouns-polymerase Kette Reaktioun (qRT-Hinnen alleguer) VerfÜgung Total RNS aus der LMD Echantillonen an aus murine war gastric mucosa benotzt AllPrep FFPE DNA /RNS an RNeasy Mini Trikoten (QIAGEN, Valencia, CA) ofgebaut, respektiv, laut der Ëmwelt- d'Hiersteller. cDNA war vun ongeféier 100-200 NG RNS aus der LMD Rubriken oder 1-2 μg RNS aus gastric mucosal Zellen mat der ReverTra Ace ® qPCR RT Kit (TOYOBO, Co., Ltd., Rekorder, Japan) Wierderbuch no Fabrikant d'Protokoll. qRT-Hinnen alleguer war den Power SYBR Green Hinnen alleguer Master Mix (Life Technologies, Karlsbad CA) mat spezifesche primer baut duerchgefouert (400 nm bei der Finale konzentréieren, Zousätzleche Fichier 2: Table S2) laut dem Protokoll 'Producteure. Relativer Ännerungen am Gentherapie Ausdrock sech d'ΔΔCt Method benotzt berechent, an der 18S rRNA Gentherapie war fir normalization benotzt. VerfÜgung Chemeschen Analyse vun immunohistochemical staining VerfÜgung Fir microscopic Miessunge, leptin-Kierchefënster gastric mucosa Echantillon waren mat engem microscope fotografeschen (Olympus ), a grouss Analyse huet mat ImageJ Software (http gesuergt:... //rsb Infoen nih Gov /Luxusartikelen /index HTML).. Mucosal Héicht tëscht der Basis vun der gastric Glands an den Hals Zone gemooss gouf. VerfÜgung Plasma assay VerfÜgung Serum war vum Blutt kritt vun cardiocentesis ënner anesthetization an gespäichert bei -80 ° C gesammelt. Insulin (Mouse Insulin Elisa Kit, Shibayagi, Gunma, Japan), leptin (Leptin Elisa, Millipore, St. Charles, MO), Zocker (Glukose CII-Test, Wako, Rekorder, Japan), an Net-esterified fatty Seier (NEFA ) (NEFA C-Test, Wako) Niveauen an der Sera laut Ëmwelt- 'fir d'Produzente gemooss goufen. VerfÜgung statistique Analyse VerfÜgung den Test VerfÜgung Mann-Whitney U an der Kruskal-Wallis Test sech benotzt bedeitendst ze bestëmmen Ënnerscheeder. A p VerfÜgung -value vu manner wéi 0,05 war bedeitendst considéréiert. Statistique analyséiert goufen benotzt Prism Software Versioun standing 6 (GraphPad, San Diego, CA, USA). VerfÜgung Resultater VerfÜgung HFD-z'iesse Mais atrophic gastritis VerfÜgung entwéckelen Fir erauszefannen, wéi Ernährung-entschlof Obesitéit der pathogenesis vun gastric mucosa schellt , goufen C57BL /6 Mais entweder HFD (60% Kalorien aus Fett) oder CD (10% Kalorien aus Fett) an der histological Ännerunge vun der gastric mucosa z'iesse waren an enger Zäit-ofhängeg Manéier iwwerpréift. Am Verglach zu den CD-z'iesse Mais, Schatzkummer der HFD-z'iesse Mais rapid Gewiicht gewannen bei engem Taux vu > 2 g pro Woch während den éischten 12 Wochen. Sou gouf, war eng moderéiert Erhéijung vun 1 g pro Woch vun 12 bis 20 Wochen observéiert (Figebam. 1a). D'cardial mucosa zougedréckt hyperplasia am 1 Woch, virun all bedeitend Ënnerscheed am Kierper Gewiicht kréien tëscht CD- an HFD-z'iesse Gruppen (1,5 ± 0,29 zu CD vs VerfÜgung 1,8 ± 0,4 an HFD, p VerfÜgung >. 0,05) (Figebam. 1a an 1b). An 3 Wochen, e reduzéierten parietal Zell Zuel an morphological hire Restaurant vun der foveola am Mo huet observéiert, gefollegt vun glandular metaplasia an engem komplette Verloscht vun zymogenic an parietal Zellen um 12 Wochen no der Initiatioun vun HFD erofzesetzen (Figebam. 1b). Obwuel d'hyperplastic Ännerung vun der gastric foveolar epithelium am 1 Woch an der HFD-z'iesse Mais gesi war, puer CD45 + communal Zellen sech presentéieren an HFD-z'iesse Mais (Figebam. 1b an 1d). Allerdéngs, no 3 Wochen vun erofzesetzen, eng substantiell Zomm vun communal Zellen sech gesinn d'interglandular an basal Plazen am Aklang mat der Entwécklung vun hyperplasia iwwerfalen ze hunn (Figebam. 1b an 1d). am 1 Woch no Fudder Initiatioun an der antrum, war liicht mucosal hyperplasia zu HFD-z'iesse Mais observéiert. Souwuel de Cardia an antrum ugewisen Ersatz vun normal glandular Zellen wéi parietal an G Zellen mat atypical an onregelméissegen Zellen no 3 Wochen vun HFD erofzesetzen (Figebam. 1b). Ausserdeem, betounen dysplastic epithelia, mat Zellen vergréissert Kären nuklear pseudostratification, an isoléiert nucleoli weist, gouf visuell an der hyperplastic lesions vun HFD-z'iesse Mais op 12 Wochen no erofzesetzen (Figebam. 1c). Eng héich Frequenz vun Ki67-positiv proliferating Zellen war an der hyperplastic an dysplastic Mo. lesions vun der HFD-z'iesse Mais observéiert, wobäi dës Zellen e definéiert proliferating Zone am CD-z'iesse Mais (Figebam. 1e) virgestallt. Dës hire Restaurant séier lues vun 8 Wochen vun erofzesetzen (Figebam. 2C). Um 20 Wochen vun erofzesetzen, huet de klappt vun der Glanz- gastric mucosa flaach mat engem helle gefuer, an polyp-wëll lesions waren an der Cardia an fundic Regioune vun HFD-z'iesse Mais (Feiler zu Figebam. 2a) observéiert. Op dësem Punkt, war d'Zell einfach komplett, an den normalen gastric Glands sech duerch intestinal Krypta-wëll Strukturen am cardial basal mucosa vun HFD-z'iesse Mais (Figebam. 2b) ersat. Dës Resultater weisen, datt HFD-erofzesetzen gastric epithelial Integritéit och um fréie Phase vun Blummen- a proposéiere Mäe datt d'Optriede vun mucosal hyperplasia am Mo vun inflammation-onofhängeg Evenementer ageleet gouf. Figebam. 1 agebousst Ännerunge vun gastric mucosa Wéint HFD-erofzesetzen. engem Verfall vun Dumouriez zu Kierper Gewiichter vun C57BL /6 J Mais z'iesse CD (n VerfÜgung = 10) oder HFD (n VerfÜgung = 10) während 20 Wochen. b Vertriederin H & E-Rubriken vun der gastric Cardia an antrum aus Mais z'iesse CD oder HFD fir 1, 3, an 12 Wochen. c hues Bild vun der gastric antrum zu Mais z'iesse CD an HFD zu Figebam. 1b op 12 Wochen no erofzesetzen (Vergréisserung, × 400). D'Zell nucleolus, nuklear hypertrophy, dyspolarity, an pseudostratification waren observéiert. d CD45 staining vun der gastric mucosa vun 1 an 3 Woch HFD-z'iesse Mais. E Ki67-staining an der gastric mucosa vun Mais z'iesse CD oder HFD fir 3 Wochen. 5-10 Mais sech an all Analyse benotzt, a Vertrieder Daten sinn VerfÜgung Lalumi gewisen. 2 Entwécklung vun gastric mucosal atrophy an Ernährung-entschlof mockeleg Mais. engem Déi gastric lumen war laanscht de baussenzege curvature vun Mais z'iesse CD oder HFD fir 20 Wochen opgemaach. Feiler unzeginn polyp-wëll lesions am Mo vun HFD-z'iesse Mais. b Vertriederin H & E-Rubriken vun der gastric Cardia an antrum aus Mais z'iesse CD oder HFD fir 20 Wochen. c D'histological Punkten aus der Mamm vun Mais z'iesse CD oder HFD (&Si besteet; 3 Wochen, 4-8 Wochen, 8-20 Wochen vun erofzesetzen; 10 Mais pro Grupp) huet laut graded zu der diagnostic Critèrë vun der Method beschriwwen. Resultater goufe vun der Kruskal-Wallis Test analyséiert, gefollegt vun engem Multiple Verglach Test d'Dunn. * P VerfÜgung &Si besteet; 0,05, ** p VerfÜgung &Si besteet; 0,01, NS; net relevant VerfÜgung Upregulation vun intestinal lues an der gastric mucosa VerfÜgung Mir iwwerpréift weider ob der gastric mucosa zu HFD-z'iesse Mais Charakteristike vun intestinal mucosa Schatzkummer. Mir gesinn, dass d'Frequenz vun Alcian blo-Kierchefënster Becher Zellen, déi intestinal mucus Zellen sinn, fräi, wéi se an der gastric mucosa zu HFD-z'iesse Mais verbreet (Figebam. 3A). Muc2, eng intestinal Typ vun mucin, war ectopically an der gastric mucosa ausgedréckt nëmmen vun HFD-z'iesse Mais (Figebam. 3A), wat beweist, datt gastric mucin zu der intestinal Typ ëmgerechent war den huet am meeschten Mënsch gastric carcinomas [24] observéiert ginn. D'Resultater vun der Gentherapie Ausdrock Analyse sech konsequent mat der immunohistological Conclusiounen. D'mRNA Ausdrock vun Muc2 VerfÜgung an Tff3 VerfÜgung (e peptide Co-ausgedréckt mat Muc2) fräi hierkommen, déi vun der gastric-Typ mucins, Muc1 VerfÜgung, Muc5ac VerfÜgung, an Muc6 VerfÜgung, bleift ännert sech näischt oder ofgeholl an der Mamm vun HFD-z'iesse Mais (Figebam. 3B). D'Cardia vun HFD-z'iesse Mais awer och ectopic Ausdrock vun phospholipase A2 (PLA2), eng intestinal Paneth Zell verbruecht (Figebam. 3A). Am Géigesaz, den Ausdrock vun H + K + - ATPase, engem Bewaacher vun parietal Zellen datt gastric Seier secrete, ofgeholl mat engem concurrent Héicht vun gastric pH am HFD-z'iesse Mais (. Lalumi 3A an 3C) . Zousätzlech, transposes der Dereguléierung vum Transkriptiouns Faktor Ausdrock an enger metaplastic phenotype. An anere Wierder, Faktor der mRNA Ausdrock vun Cdx2 VerfÜgung, eng intestinal Meeschtesch Transkriptiouns datt e Bewaacher vun intestinal metaplasia ass, war héich an HFD-z'iesse Mais bei 1 Woch (Figebam. 3). Doriwwer eraus, war an der gastric mucosa vun HFD-z'iesse Mais fräi Cdx2 VerfÜgung mRNA Ausdrock op 12 Wochen am Géigesaz zu datt am CD-z'iesse observéiert Mais, an deem et war konstant (Figebam. 3D an 3). Konsequent mat der ectopic Cdx2 VerfÜgung mRNA Ausdrock, déi mRNA vun Sox2 VerfÜgung, engem Transkriptiouns Faktor fir Mo. organogenesis [25], de Lien downregulated ze ginn, d'Entwécklung vun intestinal metaplasia an der gastric mucosa zu HFD-z'iesse Mais besot ( Figebam. 3). Geholl zesummen, zou, dës Resultater datt HFD-erofzesetzen intestinal metaplasia gut iwwerstan. Figebam. 3 Verfall vun intestinal Beméien an der gastric mucosa vun HFD-z'iesse Mais. Gastric Rubriken Kierchefënster fir Pas-Alcian blo, Muc2, PLA2, an H + K + ATPase (en), an Cdx2 (d) zu Mais z'iesse CD oder HFD fir 20 Wochen. Gene Ausdrock vun mucins (b), an Cdx2 VerfÜgung an Sox2 VerfÜgung (e) an der gastric mucosa vun Mais z'iesse CD oder HFD op 1 bis 12 Wochen no erofzesetzen. Mir geheescht 5-10 Mais an all Analyse, a Vertrieder Daten sinn gewisen. c D'gastric pH vun der gastric lumen gemooss gouf no der Beschreiwung vun der Method gëtt. Wäerter vertrieden heescht ± Fils vun 5 Mais. D'Resultater goufen déi Kruskal-Wallis Test analyséiert. * P VerfÜgung &Si besteet; 0,05 VerfÜgung HFD erofzesetzen Well vun Ufank morphological hire Restaurant op der gastric mucosa observéiert fréi leptin receptor sécher während gastric intestinal metaplasia VerfÜgung activéiert, iwwerpréift mir der Gentherapie Ausdrock vun Mo-spezifesch liicht, peptides, an Enzymen 1 Woch no HFD Mo. . Leptin mRNA Ausdrock vun allem war wiesentlech méi héich an de Mo vun HFD-z'iesse Mais; am Géigesaz, war ghrelin Ausdrock ënneschten an HFD-z'iesse Mais (Figebam. 4A). Den Ausdrock vun anere Genen wéi Atp4a VerfÜgung, Atp4b VerfÜgung, Pga VerfÜgung, an PGC VerfÜgung, déi gerannt bis H + K + - ATPase, pepsinogen A, an pepsinogen C weisen, respektiv, net grouss Ënnerscheeder tëscht CD- an HFD-z'iesse Mais, obwuel den Ausdrock vun Atp4a VerfÜgung an Atp4b VerfÜgung (Figebam. 4A) erofgoen Lien. Normalerweis ass an Chef an parietal Zellen leptin ausgedréckt [26, 27]; Ee, HFD-z'iesse Mais staark leptin Ausdrock vun der hyperplastic gastric epithelia (Figebam. 4B an 4C) Schatzkummer. Och wann den serum leptin Konzentratioun tëscht CD- an HFD-z'iesse Mais am 1 Woch no erofzesetzen (Lalumi 4d.) Ähnlech war, der leptin Ausdrock vun der hyperplastic Regioun vun de Mo. war konsequent mat strukturellen op H observéiert Ännerungen & E grousst Sektiounen um 1 Woch (Figebam. 1b). D'leptin Ausdrock weider bis 12 Wochen ze erhéijen Post HFD erofzesetzen, déi nom Ausdrock ongeféier op deem Niveau vun CD-z'iesse Mais op 20 Wochen (Figebam. 4B an 4C) observéiert erholl. Concomitant mat den héije leptin Ausdrock am 1 Woch, phosphorylation vun ObRb, STAT3, Akt, an Erk, déi Molekülle mat sécher leptin receptor verbonne sinn, war an der gastric mucosa vun HFD-z'iesse virstellen Mais (Figebam. 5a) fonnt. Dës Molekülle bleift bei 4 Wochen ageschalt der erofzesetzen. Am Géigesaz, leptin-erhéijen Entity /Entity VerfÜgung an ObR mutated DB /DB VerfÜgung Mais net phosphorylated ObRb show hat, an liicht ageschalt STAT3, Akt, an Erk nëmmen Schatzkummer. An Ënnerstëtzung vun der Validitéit vun dëse Conclusiounen, déi isotype-Kontroll Ab reagéieren net speziell an keen Ausdrock vun p-ObRb war an DB /DB VerfÜgung Mais (Figebam. 5b a 5c) fonnt. Figebam. 4 Opléisung vum gastric leptin Ausdrock an der fréi Period vun HFD erofzesetzen. engem Gene Ausdrock vun gastric-spezifesch Molekülle am 1 Woch no CD an HFD erofzesetzen. b Gastric Rubriken fir 1, 12, an 20 Wochen fir leptin zu Mais z'iesse CD oder HFD Kierchefënster. c Quantification vun leptin Ausdrock an (b). D'Donnéeë sinn als famill Ausdrock bei all Zäit-Punkt un de Ausdrock Niveau vun der antrum vun CD-z'iesse Mais no 1 Woch virgestallt. d Serum leptin Konzentratioun am Mais z'iesse CD an HFD fir 1 Woch. Déi Wäerter genügend Mëttelen ± Fils vun 5 Mais. D'Resultater goufen duerch den Mann-Whitney U VerfÜgung Test analyséiert. * P VerfÜgung &Si besteet; 0,05, ** p VerfÜgung &Si besteet; 0,01 VerfÜgung Figebam. 5 Upregulation vun leptin receptor sécher an der gastric mucosa vun HFD-z'iesse virstellen Mais. engem Western blot Analyse vun der phosphorylation vun ObRb, STAT3, Akt an ERK1 /2 an der gastric mucosa vun virstellen, Entity /Entity VerfÜgung an DB /DB VerfÜgung Mais z'iesse CD an HFD fir 1 an 4 Wochen. A Ganzen 3 Mais sech an all Ernährung Grupp pro ee Experimenter benotzt. All Experimenter war zweemol widderholl a Vertrieder Daten sinn gewisen. b Immunohistochemistry an (c) westlech blot Analyse vun phosphorylation vun ObR an der gastric mucosa vun DB /DB VerfÜgung Mais a virstellen Mais z'iesse CD oder HFD fir 3 Wochen. Mir geheescht 3 Mais an all Analyse, a Vertrieder Daten sinn gewisen. Feiler weg ObR-positiv Zellen phosphorylated VerfÜgung Kliniken inflammation atrophic gastritis ausléisen kann. IL-6 a IL-11, déi virun allem an de Mo. ausgedréckt ginn, well demagogesch Äntwerte während neoplastic Werdegang [28, 29]. Besonnesch, IL-11 Ausdrock Erhéijunge atrophic gastritis an intestinal metaplasia vun der fundic mucosa [30]. Fir Potential Initiateure vun intestinal metaplasia identifizéieren, iwwerpréift mir den Ausdrock vun leptin, IL-6, an IL-11 an d'gastric mucosa. Well leptin am 1 Woch no erofzesetzen ausgedréckt huet, Erhéijung Il6 VerfÜgung an Il11 VerfÜgung mRNA Niveauen net an der gastric Cardia vun HFD-z'iesse Mais bis 3 Wochen no Fudder Initiatioun (Figebam. 6a). Um 12 Wochen, IL-11 Ausdrock eng grouss Zuel vun CD45 begleet + communal Zellen (Figebam. 6a an 6B). Dës Conclusiounen hindeit datt HFD-entschlof leptin Ausdrock an afgerappt Aktivéierung der Aféierungs- vun demagogesch cytokines während intestinal metaplasia ginn. Figebam. 6 verspéiten Aféierungs- vun proinflammatory cytokines an der gastric mucosa der HFD-erofzesetzen. engem Gene Ausdrock vun leptin, Il6 VerfÜgung, an Il11 VerfÜgung an der gastric mucosa vun CD- an HFD-z'iesse Mais no 1, 3, an 12 Wochen. Déi Wäerter genügend Mëttelen ± Fils vun 4 Mais. D'Resultater goufen déi Kruskal-Wallis Test analyséiert. * P VerfÜgung &Si besteet; 0,05, p VerfÜgung &Si besteet; 0,01. b Immunohistological staining vun de Mo. Rubriken vun der CD a HFD-z'iesse Mais mat Abs géint IL-11 an CD45 VerfÜgung Keng leptin sécher Hien gastric intestinal metaplasia VerfÜgung HFD erofzesetzen leptin sécher ausgeléist, flénke intestinal metaplasia zu virstellen Mais . Ëmgedréit, oofgesinn vun de Flichte vun leptin sécher soll also gastric wirklech-HFD entschlof. Fir d'Roll vun leptin sécher an der Entwécklung vun intestinal metaplasia ermëttelen, iwwerpréift mir gastric mucosal Ännerungen am leptin-erhéijen Entity /Entity VerfÜgung Mais an leptin receptor-mutated DB /DB VerfÜgung Mais. Den C /Entity VerfÜgung an DB /DB VerfÜgung Mais eng héich Kierper Gewiicht huet ewéi virstellen Mais gemaach; kee groussen Ënnerscheed zu Kierper Gewiichter awer, war no erofzesetzen (: Dorënner S1a Weider Fichier 3) am 1 Woch tëscht CD- an HFD-z'iesse Mais observéiert. Den C /Entity VerfÜgung an DB /DB VerfÜgung Mais z'iesse d'CD fir 1 Woch hyperinsulinemia Schatzkummer hierkommen nëmmen HFD-z'iesse Entity /Entity VerfÜgung Mais awer fräi Insulin Niveauen. HFD-z'iesse DB /DB VerfÜgung Mais ähnlechen Insulin Niveauen zougedréckt zu deene vun CD-z'iesse DB /DB VerfÜgung Mais, wéinst hirer Insulin Resistenz (Zousätzleche Fichier 3: Dorënner S1b). D'DB /DB VerfÜgung Mais och hyperleptinemia an hypergluconemia Schatzkummer. (: Dorënner S1b Weider Fichier 3) de non-esterified fatty Seier (NEFA) Konzentratioun net dorënner virstellen Allerdéngs huet variéieren, Entity /Entity VerfÜgung, an DB /DB VerfÜgung Mais mat entweder CD oder HFD es. Histopathological Analyse verroden, datt de virstellen Mais Verglach, Entity /Entity VerfÜgung an DB /DB VerfÜgung Mais datt mockeleg an insulin- waren oder leptin- resistent zougedréckt puer morphological Ännerungen wéi hyperplasia vun der gastric cardial mucosa am 1 Woch no Initiatioun vun HFD erofzesetzen (Figebam. 7A). Mucosal Héicht Analyse war konsequent mat der histological Conclusiounen (Figebam. 7c). Ausserdeem, Teamchef immunohistochemical Analyse fräi colocalization vun Cdx2 an leptin an der gastric mucosa vun virstellen Mais z'iesse der HFD fir 1 Woch (Figebam. 8a), wobäi DB /DB VerfÜgung Mais net Cdx2 Ausdrock vun leptin-positiv Zellen show gemaach. Am Géigesaz, Entity /Entity VerfÜgung Mais onverännert Cdx2 a kee leptin Ausdrock. Den Zerfall, Co-Lokalisatioun vun phosphorylated ObRb an Cdx2 nogewise gouf zu HFD-z'iesse virstellen Mais, mä net zu HFD-z'iesse Entity /Entity VerfÜgung oder DB /DB VerfÜgung Mais, dat nëmmen e puer phosphorylation vun ObRb oder Cdx2 gewisen, bzw.. CD-z'iesse Entity /Entity an DB /DB Mais eng drastesch Erhéijung vun Kierpergewiicht awer nëmmen liicht hyperplasia an der gastric mucosa Verglach zu virstellen Mais awer bei 3 Wochen (Figebam. 7b an 7c). Trotz héije Kierper Gewiichter mussen, Entity /Entity VerfÜgung an DB /DB VerfÜgung Mais z'iesse der HFD fir 3 Wochen manner hyperplasia Schatzkummer wéi virstellen Mais hutt de HFD fir 20 Wochen es. No 20 Wochen vun HFD erofzesetzen, presentéiert d'virstellen Mais en onregelméisseg a Äonen Struktur vun der Cardia (Figebam. 7b). HFD erofzesetzen net geklommen dem Wëllen vun Cdx2 an Muc2 an der gastric mucosa vun Entity /Entity VerfÜgung an DB /DB VerfÜgung Mais (Figebam. 8B). Dës Resultater hindeit, datt leptin wéi sécher an den Moo ass e wichtege Faktor, datt zu Obesitéit-Zesummenhang gastritis zu metaplastic wirklech féiert. Figebam. 7 Trupen Verfall vun gastric Wirklechkeet an HFD-z'iesse Mais ouni leptin sécher. Vertrieder H & E-Rubriken vun der gastric mucosa aus virstellen, Entity /Entity VerfÜgung an DB /DB VerfÜgung Mais z'iesse CD oder HFD fir 1 (en) an 3 Wochen (b). All Wäert op d'Biller weist d'Gewiicht vun der Maus aus deem de gastric mucosa kritt huet an Kierchefënster mat H & E-stain. c Kilometréierung vun mucosal Héicht vun der gastric fundus vun virstellen, Entity /Entity VerfÜgung an DB /DB VerfÜgung Mais bei 1 an 3 Wochen a vun virstellen Mais op 20 Wochen no erofzesetzen. Déi Wäerter genügend Mëttelen ± Fils vun 4 Mais. D'Resultater goufen déi Kruskal-Wallis Test analyséiert. * P VerfÜgung &Si besteet; 0,05, ** p VerfÜgung &Si besteet; 0,01 VerfÜgung Figebam. 8 Downregulation vun intestinal epithelial lues zu Mais ouni leptin sécher. engem Immunohistological staining vun de Mo. Rubriken vun der CD a HFD-z'iesse Mais mat Abs géint leptin, Cdx2, a p-ObRb. b Gene Ausdrock vun Cdx2 VerfÜgung an Muc2 VerfÜgung an der gastric mucosa vun Mais z'iesse CD oder HFD fir 1 Woch. Déi Wäerter genügend Mëttelen ± Fils vun 4 Mais. D'Resultater goufen déi Kruskal-Wallis Test analyséiert. * P VerfÜgung &Si besteet; 0,01 VerfÜgung Diskussioun VerfÜgung Dës Etude weist d'éischt Beweiser d'Theorie datt HFD-entschlof verstäerkte leptin receptor sécher an der gastric mucosa bewierkt atrophic gastritis zu engem murine Modell ënnerstëtzen. Mir hu fonnt, datt HFD erofzesetzen kontrolléiert leptin Produktioun an der Aktivatioun vun leptin-ObR sécher an der gastric mucosa, atrophic gastritis an intestinal metaplasia Spur. Am Bezug op déi héich Frequenz vun gastritis zu mockeleg Patienten [31, 32], eis Resultater ënnermaueren d'Roll vun leptin receptor sécher an Obesitéit-entschlof atrophic gastritis. H. pylori VerfÜgung Krankheet ass eng grouss Ursaach vum chronescher gastritis an GC als [33, 34]; awer, ganz wéineg H. pylori VerfÜgung -infected Patienten entwéckelen GC [35]. Ausserdeem, ass d'Frequenz vun gastritis däitlech méi héich zu morbidly mockeleg Patienten, wobäi d'prevalence vun H. pylori VerfÜgung Wonn ähnlech ass zu mockeleg an Net-mockeleg Persounen [2]. Soumat ass Obesitéit e wichtege Faktor fir d'prevalence vun histologic gastritis Comptabilitéit an d'Transformatioun vun gastric mucosal Zellen zu Nieft H. pylori VerfÜgung Wonn. Nieft adipose Otemschwieregkeeten VerfÜgung, déi placenta [36] an mammary Glands [ ,,,0],37, 38] produzéiere och leptin, déi an et Wuesstem an Entwécklung trophoblast Zell Verbreedung ënnerstëtzt ze regléieren [39, 40] an der Entwécklung vun der mammary of, respektiv. An deene Stoffer, ass leptin Souwuel normal an malignant Zellen produzéiert, a seng overexpression huet an neoplastic Zellen [36, 41] Gewise ginn. Nik Ausdrock vun leptin an ObRb ass mat méi séier entholl Terrain a veruerteelt mënschlechen Schouljoer-III invasiv Broscht erhéijen verbonne [42, 43]. All Auteuren liesen an guttgeheescht der Finale mëttelalterlech Handschrëft. VerfÜgung

• Multiple Primärschoul malignancies Primärschoul sporadesch colorectal Kriibs an Japan sensibiliséieren: Heefegkeet vun gastric Kriibs mat colorectal Kriibs Patiente ka méi héich ginn wéi virdrun…
• Risiko Beurteelung vun gastric Kriibs mat Asbestose verbonne: e Fall report