Survivin Gentherapie Niveauen an der Randerscheinung Blutt vu Patienten mat gastric Kriibs virauszesoen onofhängeg Iwwerliewe

Survivin Gentherapie Niveauen an der Randerscheinung Blutt vu Patienten mat gastric Kriibs virauszesoen onofhängeg Iwwerliewe VerfÜgung méiglech VerfÜgung Background VerfÜgung D'erkennen entholl Zellen libre (CTC) eng villverspriechend Outil fir ze verbesseren Risiko stratification zu Patiente mat massive erhéijen geduecht ass. Mir propagéieren op ob den Ausdrock vun CTC Zesummenhang Genen unhat all prognostic Muecht un de System TNM Stadium zu Patiente mat gastric carcinoma. VerfÜgung Method VerfÜgung Pressekonferenz Patienten mat TNM Etapp ech gastric carcinoma zu IV retrospectively Coursë waren. carcinoembryonic antigen (CEA), cytokeratin-19 (CK19), wiere endothelial Wuesstem Faktor (VEGF) an Survivin (BIRC5): Randerscheinung Bluttprouwen sech mat Hëllef vun grouss real Zäit Hinnen alleguer (qrtPCR) fir den Ausdrock vu véier CTC Zesummenhang Genen getest. VerfÜgung Resultater VerfÜgung Gene Ausdrock vun Survivin, CK19, CEA an VEGF war méi héich wéi zu normal Kontrollen zu 98,6%, 97,1%, 42,9%, an 38,6% vun de Fäll, respektiv, eng potentiell diagnostic Wäert vun zwou Survivin an CK19 suggeréiert . Op multivariable Iwwerliewe Analyse, TNM Stadium an Survivin mRNA Niveauen sech als onofhängeg prognostic Faktoren zréckbehalen Musiktherapie- datt Survivin Ausdrock vun der Randerscheinung Blutt prognostic Informatiounen zu der TNM System unhat. Am Géigesaz virdrun publizéiert Donnéeën, war de ët Heefegkeet vun CEA, CK19 an VEGF net mat Patienten Medeziner Resultat assoziéiert. VerfÜgung Konklusiounen VerfÜgung Gene Ausdrock Niveau vun Survivin derbäi bedeitendst prognostic Wäert op déi aktuell TNM Stadium System. D'Confirmatioun vun dëse Conclusiounen am groussen mèi an multicentric Serie kéint zu der Iddi Medeziner Kader fir d'Ëmsetzung vun dëser uweist Féierung Risiko stratification ze optimiséieren an schlussendlech déi therapeutesch Gestioun vun dëse Patienten personaliséieren. VerfÜgung Background VerfÜgung Gastric Kriibs duerstellt déi véiert stäerkste gemeinsam Kriibs an zweete Spëtzekandidat Ursaach vum Kriibs-Zesummenhang Doud weltwäit. Déi geschate aktuell Heefegkeet vun gastric Kriibs ass ronn 16,2 /100 000 Persounen /Joer (Welt standardiséierte Tarif, WSR), mat héchsten incidences an Osteuropa an Asien, an Osteuropa a Südamerika [1]. Am Moment huet d'nëmmen prognostic System Zäitche fir d'Gestioun vun gastric Kriibs Patiente beschäftegt baséiert op der International Union Géint Cancer entholl-Node-Metastasen (TNM) Stadium System [2], an deem d'Ausmooss vun entholl Pénétratioun (PT) an nodal Status (pN) [3] sinn déi zwee Haaptgrënn prognostic Indicateuren zu Patienten ouni fernen metastatic Krankheet. Patienten an Grondsteen sinn als Kandidaten fir Kur vun Agrëff. Ee, 50% vun gastric Kriibs Patienten aus entholl relapses och no radikal Agrëff [4, 5]. Sou, schéngt den aktuelle Stadium System net korrekt eenzelne Patient Risiko vu Kriibs Terrain ze virauszesoen. Tatsächlech dës Klassifikatioun identifizéiren breet Kategorien mat vill verschiddene prognostic Ënnergrupp bannen all Etapp, déi dëse System suboptimal fir e personaliséierte therapeutesch Approche maachen. Dëst ass duerch de Fait Beispill datt verschidde Patienten Moment klassifizéiert als "niddereg-Gefor" sinn net Therapie deposéiert adjuvant, obwuel se Erfahrung Krankheet Réckwee maachen. versa Vice, am Moment e puer Patienten, well vun adjuvant Therapie "héije Risiko" TNM Klassifikatioun amgaang, géif dës Behandlung net brauchen [6]. Fir dës Fro ze Adress an verbesseren op der Iwwregens hätt vu Patienten, nei Parameteren zouverlässeg Patienten Resultat virausgesot ginn dringend. Patienten, déi potenziell curative Dokteschpraxen weiderentwéckelt Équipe weiderhin de Risiko vun Terrain, déi aus microscopic entholl Reschter bekannt als Minimum Reschtoffall Krankheet (MRD) originates. MRD kann verschidden Kierper compartments, dorënner de Schanken hiirgestallt, lymph Wirbelen a Randerscheinung Blutt [7] betreffen. An de leschte Joren hunn op der Detektioun vun libre entholl Zellen (CTC) mat Respekt an hire Krankheete Implikatioune fir Patiente mat gastric Kriibs puer Studien do. Als Resultat, grouss ass real Zäit polymerase Kette Reaktioun (qrtPCR) a Variatioune vun dëser Technik, déi am meeschten sensibel Method fir Evaluéieren Gentherapie Ausdrock gin considéréiert ass, goufen an der Detektioun vum entholl lues benotzt, datt d'Präsenz vun CTC weg an der Blutt [8]. an der aktueller Analyse VerfÜgung, fir mir d'Randerscheinung Blutt vun 70 Patenter betraff mat gastric adenocarcinoma andems qrtPCR zu profiling. Mir getest véier biomarkers, zwee vun der Präsenz, ad zwee vun de aggressiveness vun der entholl, an ee vun deenen, déi Survivin klappen, onofhängeg prognostic Muecht un der TMN Stadium System. Dat kéint fir eng besser stratification vun riskéieren d'Patient erlaben a sou engem besseren therapeutesch Direktioun, virun allem an der adjuvant Kader VerfÜgung Method VerfÜgung kennen VerfÜgung An dëser Etude mir 70 Patienten (39 Männer iwwregens, 31 Fraen;. Alter Rei 28 - 90 Joer, Steiren Alter 68 Joer), déi tëscht Oktober 1998 an November 2007, a fir deenen eng Randerscheinung Blutt Prouf war sinn Chirurgie (total oder partiell gastrectomy) fir histologically bewisen gastric carcinoma mécht. D'Etude, déi am Aklang mat der Helsinki-Deklaratioun ass, gouf vun der lokaler ethneschen Comité vun der Universitéit vun Padova (: 70/2006 averstaane Nummer) abruecht. Schrëftlech informéiert Zoustëmmung der Benotzung vun der biologescher uplanzen fir investigational Zwecker iwwert gouf vun all Patienten kritt. An der Zäit vun der Analyse, 33 (47.1%) waren lieweg hierkommen 37 (52.9%) gestuerwen haten. Paracetamol Suivi war 15 Méint (Gamme: 6-119 Méint). Paracetamol Iwwerliewe huet 25 Méint. Entholl Charakteristiken zesummegefaasst ginn an Table 1. D'Déift vun entholl Invasioun (T Kategorie), Ausmooss vun lymph Node Metastasen (N Kategorie) an macroscopic Metastasen (M Kategorie) huet no der UICC TNM Stadium 1 kennen an entholl Charakteristiken system.Table kategoriséiert . VerfÜgung Parameter
N
(%)
kennen VerfÜgung all 70 VerfÜgung
(100.0) VerfÜgung männlech VerfÜgung 39 VerfÜgung (55.7)
weiblech 31 VerfÜgung (44.3) VerfÜgung Alter (Joer) VerfÜgung ≤ 65 zu 21
(30.0) VerfÜgung > 65 zu 49 VerfÜgung (70.0) VerfÜgung multicentric VerfÜgung 5
Location (7.1) VerfÜgung ieweschte drëtt VerfÜgung 11 VerfÜgung (15.7) VerfÜgung Mëtt drëtt
19 VerfÜgung (27.1) VerfÜgung ënneschten Drëttel VerfÜgung 35 VerfÜgung (50.0) VerfÜgung TNM Etapp VerfÜgung ech (IA + normal schwätzen) 10
(14.3)
II VerfÜgung 14 VerfÜgung (20.0) VerfÜgung III (IIIA + IIIB) VerfÜgung 19 VerfÜgung (27.1) VerfÜgung IV VerfÜgung 27 VerfÜgung (38.6) VerfÜgung Zell Linnen (- Gibco, Karlsbad CA, USA Invitrogen) mat 10% an et Kallef serum VerfÜgung de Mënsch gastric carcinoma Zell Linn NCI-N87, aus der American Type Kultur Collection (Manassas, USA) kritt, war zu RPMI-1640 mëttelfristeg incubated . (Euroclone - Celbio, Pero, MI), 10 mm Hepes, 1 mm Natrium Pyruvate (Fläch-Aldrich, St. Louis, MO), bei 37 ° C an 5% CO 2 VerfÜgung NCI-N87 ass enger Linn gastric carcinoma Zell aus engem Liewer Metastasen vun engem gutt ënnerscheet carcinoma vun de Mo. ofgeleet virun cytotoxic Therapie geholl. Laut der datasheet d'Produktioun, auszedrécken Zellen der Uewerfläch glycoproteins carcinoembryonic antigen (CEA). VerfÜgung Zell spiking Experimenter VerfÜgung Eng Zell spiking Etude am Optrag vun der Empfindlechkeet vun dëser qrtPCR technique ze bestëmmen fir z'entdecken Kriibs Zellen zu Randerscheinung Blutt mononuclear Leeschtung war Zellen (PBMC). D'PBMC sech aus gesond Fräiwëlleger kritt, a waren an 1 verdënntem gezielt: 1 zu RPMI mëttelfristeg. Gastric Kriibs Zellen N87 gezielt huet an serially verdënntem vun 1 × 10 6 Zellen /Milliliter bis 1 Zell /Milliliter an der PBMC. Total RNS war ofgebaut an reverse- aus 2 milliliters vun all Ëmwandlung annescht. qrtPCR fir zwee Genen vun interesséieren sech dann gesuergt, wéi hei ënnendrënner beschriwwe. VerfÜgung Sample Kollektioun, RNS erauszéien a cDNA Synthes VerfÜgung A 6 ml aliquot vu Schwächt Blutt vun all Patient bei der Zäit vun Agrëff kritt huet. Sample Veraarbechtung war bannent zwou Stonne no Blutt Réckzuch gesuergt. Sample war fir 10 Minutten am Joer 2000 × g centrifuged, an der PBMC Ëmwandlung war zu flëssegem Stéckstoff gesammelt a gespäichert. VerfÜgung mëchs Echantillon waren thawed a Ganzen RNS ofgebaut gouf mat der Guanidinium Thiocyanate-Phenol-Chloroform Method (Trizol Reagent, Invitrogen, Karlsbad CA, US). Der Integritéitskontroll vum isoléiert RNS war vun qrtPCR Analyse vun der endogenous Referenzmaterial Gentherapie Beta actin (b-actin) gegrënnt als ënnendrënner beschriwwe [9]. VerfÜgung Total RNS (7 μg pro 100 μl Finale Reaktioun Volumen) war ëmgedréint-ausserdeem benotzt zoufälleg primers an MultiScribe Réckproduktioun Transcriptase (High-Kapazitéit cDNA Transkriptiouns Kit Géigendeel, Obwuel Biosystems, Foster City, CA, USA). D'Reaktioun Mëschung war bei 25 ° C fir 10 Minutten incubated, dann bei 37 ° C fir 120 Minutten. cDNA war bei -80 ° C bis benotzen gespäichert. Real-Zäit grouss polymerase Kette Reaktioun VerfÜgung D'transcriptional Niveaue vu véier Genen VerfÜgung (dh, carcinoembryonic antigen [CEA], cytokeratin-19 [CK19], Survivin a wiere endothelial Wuesstem Faktor [VEGF]) waren an der Randerscheinung Blutt vu Patienten, déi heescht vun grouss real Zäit Hinnen alleguer (qrtPCR) mat der famill quantification Method (2 -ΔΔCt Method) [10, 11] gemooss. An deenen 2 -ΔΔCt Method d'Donnéeë wéi déi fantastesch-Changement an der Gentherapie Ausdrock vun enger Referenz Gentherapie a relativ zu engem calibrator Prouf normalized virgestallt ginn. Den Zweck vun der normalization Prozess ass de Wäert vun der transcriptional Niveau vun all Gentherapie vun der Quantitéit vun mRNA presentéieren an all Prouf ze ajustéieren: dat ass meeschtens duerch Partitur der Ausdrock Niveau vun all Gentherapie vun Intérêt vun deenen vun enger Referenz Gentherapie (och kritt sougenannten "housekeeping" Gentherapie). Housekeeping Genen sinn ausgedréckt constitutively an - am Idealfall - sinn net vun experminteller manipulations betraff: also, se sollten ongeféier der Héicht vun mRNA an all Prouf getest spigelen [12]. Wéi d'Referenz Gentherapie an dëser Etude mir Beta-actin benotzt, ee vun de stäerkste Toast housekeeping Genen benotzt. VerfÜgung An enger Etude relativ quantification Hinnen alleguer, de sougenannten "calibrator" ass vun der Gentherapie Ausdrock vun enger gewielt Prouf vertrueden duerch déi den Ausdrock Profil vun all Prouf vun Interessi ass ugepasst: dës Approche der Enquêteur erméiglecht de Ausdrock Profil vun der Echantillon vun Intressi mat all aner Saache vun hir fantastesch-ännere mat Respekt un engem eenzege Prouf (de calibrator) ze vergläichen VerfÜgung. normalerweis, ass de calibrator eng onbehandelt Prouf (zB an engem funktionell studéieren), eng Prouf um Zäit null (zB an enger Zäit-Cours studéieren) oder all dèi Prouf (zB gesond Kontrollen vun engem Kranken ze studéieren, oder normal Här iwert mech selwer zu engem Kriibs Zell Linn studéieren) [10]. Engem Pool vu cDNA aus PBMC vun 20 gesond Donateuren ofgeleet war den calibrator Quell vun eiser Etude benotzt. Evaluatioun vun den 2 -ΔΔCt Kuuscht fantastesch Ännerung vun der Gentherapie Ausdrock relativ zu der calibrator. Fir d'calibrator fusionnéiert der ΔΔCt null, an 2 0 fusionnéiert een, sou datt de fantastesch Ännerung vun der Gentherapie Ausdrock relativ zu der calibrator een, vun Definitioun fusionnéiert. VerfÜgung D'Method fir eis experimentell System validéiert war vun dër datt de efficiencies vun amplification vun den Ziler an de b-actin Genen waren ähnlech. TaqMan Gene Expression Assays spezifesch fir CEA, CK19, Survivin an VEGF sech aus Obwuel Biosystems kaaft. Ze verhënneren knaschtege Frankräich DNA hire, war d'primer hien huet misse bei der Kräizung tëscht zwee exons gesat. D'qrtPCR assay war mat dem Abi PRISM 7300 liichtkraaftarm Detektioun System gesuergt. D'Hinnen alleguer Reaktioun virugoe zu engem schroen (30 μl) 15 μl vun 2 × TaqMan Universal Hinnen alleguer Master Mix, 1,5 μl vun 20 × TaqMan Gene Expression assay (all reagents aus Obwuel Biosystems), 12,5 μl vum Waasser an 1 μl vun cDNA Schablounen déi op . Fofzeg Zykle vun amplification sech fir all Prouf bei 95 ° C (15 Sekonnen) an 60 ° C (1 Minutt) an mRNA Ausdrock Niveauen sech normalized géint laachen b-actin mRNA Ausdrock gesuergt. VerfÜgung statistique Analyse VerfÜgung statistique analyséiert goufen Leeschtung vum aktuelle Wäert View V. 4,57 Software (ABACUS Konzepter, London, UK) an der StatXact V7.0.0 Software (Cytel Software Corporation, USA) benotzt. D'Korrelatioun tëscht Gentherapie Niveauen (Héich versus niddereg Gentherapie Ausdrock, wéi déi vun de Steiren Wäert definéiert) a Kategorien TNM Stadium Krankheet huet andems der Cochrane-Armitage Trend Test évaluéieren. Survival Kéiren sech mat der Kaplan-Meyer Method geschat, a univariate Iwwerliewe Vergläicher sech no der Läschlëscht-Platz Test berechent. D'transcriptional Niveau vun der véier Genen, zesumme mat anthropometric Facteuren an TNM Etappen (no der 5. Editioun vum System AJCC TNM Stadium 1997 erauskoum), huet als onofhängeg Verännerlechen am multivariate Iwwerliewe Analyse geheescht, déi Leeschtung war mat der Cox proportional Risikoe Réckgang Modell [13]. D'Auswiel vun Variabelen déi bedeitendst dem predictive Modell bäidroen war vun stepwise Method gesuergt. . Aussiichten Wäerter &Si besteet; 5% waren statistesch relevant als VerfÜgung Resultater VerfÜgung Zell spiking: Empfindlechkeet vun qrtPCR Technik VerfÜgung An der N87 Zell Linn, mRNA Niveau vun der CEA, CK19, Survivin, an VEGF Genen sech duerchaus ausgedréckt (Well 1): also, dat gastric carcinoma Zell Linn vertrueden eng valabel positiver Kontroll fir eis Experimenter. Figur 1 Gene Ausdrock Niveau vun de véier Genen vun Interessi an N87 Mënsch gastric Kriibs Zellen (wéi déi grouss real Zäit Hinnen alleguer gemooss: gesinn Text fir Detailer). Den natierlechen uräicheren vum Ausdrock Niveau ass op der y Achs gemellt: d'Achs Urspronk (0) duerstellt dem rouenden Prouf (genannt calibrator) mat deem all experimentell Echantillon vun der famill quantification Method Verglach sinn (cf. Text fir Detailer) VerfÜgung. fir d'Detectioun Limit (Empfindlechkeet) vun der qrtPCR Technik, Serien 10-fantastesch dilutions (an PBMC) vun N87 gastric carcinoma Zellen sech am triplicate vun qrtPCR etabléieren CEA an Survivin den Gene lues benotzt assayed. . Dës entsprécht Opklärung 1 bis 10 malignant Zellen pro 10 ml vun Randerscheinung Blutt (Donnéeën net gewisen) VerfÜgung Expression lues am Blutt Echantillon 8 PBMC dilution nogewise ginn> Randerscheinung Blutt Echantillon vun all 70 Patienten goufen fir de véier Gentherapie lues bewäert. Den Ausdrock gouf positiv (méi héich wéi calibrator) zu 98,6%, 97,1%, 42,9%, 38,6% vun Echantillon fir Survivin, CK19, CEA, VEGF, bzw. (Table 2). Zanter Survivin an CK19 Gentherapie Niveauen an bal all Patienten wéi déi méi grouss sinn fonnt an gesond Kontrollen, Punkt dëse Conclusiounen zu engem diagnostic Potential vun deenen zwou genes.Table 2 Transcriptional Niveaue vu véier prognostic lues an der Randerscheinung Blutt vu Patienten mat gastric Kriibs.
context
Virun calibrator (%) *
Hei calibrator (%) *
Undetectable (%)
zu Survivin VerfÜgung 69 (98.6) VerfÜgung 1 (1,4) VerfÜgung 0 (0.0) VerfÜgung CK19 VerfÜgung 68 (97.1) zu 2 (2,9) 0 VerfÜgung (0.0 ) VerfÜgung CEA VerfÜgung 30 (42.9) zu 21 (30,0) 19 VerfÜgung (27.1) VerfÜgung VEGF VerfÜgung 27 (38.6) zu 43 (61.4) VerfÜgung 0 (0.0 VerfÜgung) * Gene Ausdrock Niveauen gemooss goufen déi grouss real Zäit Hinnen alleguer: d'famill quantification Method benotzt Echantillon ausseet wéi uewen oder ënnen de Niveau vun der calibrator (hinzeginn Randerscheinung Blutt Echantillon vun gesond Donateuren fonnt) VerfÜgung Desweideren,. wa mir der 75. Géck vun Survivin Ausdrock Niveauen pro Etapp considéréiert, hu mir e groussen fräi Trend (p = 0.04) fir Etappe vum ech bis III, mä net fir Etapp IV (Dorënner 2). Figur 2 Survivin Gentherapie Niveauen an der Randerscheinung Blutt gemooss vun 70 Patiente mat TNM Etapp ech bis IV gastric Kriibs. Den Trend Test Analyse weist e groussen Zouhuele Survivin transcriptional Niveauen ganze Patienten mat Etapp ech bis III gastric Kriibs (Trend Test P-value = 0.04). Fir all Kolonn ass d'mengen ± Fils gemellt VerfÜgung Analyse traureg VerfÜgung No engem mengen Suivi vun 26 Méint, d'Steiren globale Iwwerliewe (OS) fir TNM Etapp ech-II net erreecht huet. de Steiren OS fir Etapp III a IV hat 25 an 13 Méint, respektiv (umellen-Platz Test P-Wäert &Si besteet; 0,0001, Dorënner 3). Figur 3 Allgemeng Survival fir TNM Etapp ech-II, III a IV fir all Patienten (umellen-Platz Test P-Wäert &Si besteet; 0.0001). VerfÜgung Afall univariate Iwwerliewe Analyse, ënnert der véier Genen mir getest hunn, nëmmen Survivin Ausdrock hätt z'identifizéieren zwee Patient Gruppe mat vill verschiddene hätt. An Tatsaach, dass den 75sten Géck vun Log-transforméiert Gentherapie Transkriptiouns Niveauen (1.508) wéi der cutoff Punkt, Steiren OS fir héich (> 1.508) an niddreg (≤1.508) Iwwerfloss Survivin mRNA goufen 14 an 41 Méint, respektiv (log- attributer P-value = 0,036, Dorënner 4). Figur 4 Kaplan-Meier Iwwerliewe Kéiren vun Patienten mat héije (&plain 75. Géck) oder niddereg (&Si besteet; 75. Géck) transcriptional Niveau vun der Randerscheinung Blutt gemooss Survivin. Log-Platz Test P-value = 0,036. VerfÜgung D'multivariate Iwwerliewe Analyse dorënner TNM Etapp, Alter, Geschlecht an mRNA Niveau vun de véier lues awer, datt nëmmen TNM Etapp an Survivin mRNA Niveauen an der Randerscheinung Blutt gemooss onofhängeg Patienten OS virauszesoen . D'iwwerschloen Verhältnis (SH) verbonne mat Survivin Niveauen beweist d'Erhéijung vun Risiko vu Doud fir 100 fantastesch Erhéijung vun Survivin Ausdrock (Table 3) .Table 3 Multivariate Iwwerliewe Analyse vun 70 Patiente mat gastric Kriibs. VerfÜgung Covariates
HR
95% CI
P-Wäert
zu VerfÜgung niddreg limitéiert
Uewergrenz
VerfÜgung ech TNM Etapp VerfÜgung 1 (Lokalzäit) VerfÜgung - VerfÜgung -
- VerfÜgung Etapp II VerfÜgung 1,20 VerfÜgung 1,01 VerfÜgung 1,45 VerfÜgung 0,048 VerfÜgung Etapp III VerfÜgung 1.34 bis 1.05 bis 1.70 VerfÜgung 0,017 VerfÜgung Etapp IV VerfÜgung 3,17 VerfÜgung 1,38 VerfÜgung 6,77 VerfÜgung 0,004 VerfÜgung Survivin * VerfÜgung 1.34 VerfÜgung 1,14 VerfÜgung 1,53 VerfÜgung &Si besteet; 0,001 VerfÜgung HR: iwwerschloen Verhältnis; CI: Vertrauen nolauschterer; * Der HR verbonne mat Survivin Niveauen fir 100-fantastesch Erhéijung vun Survivin Ausdrock der Erhéijung vum Doud Risiko bedeit. VerfÜgung Well nëmmen dës véier onofhängegen Verännerlechen vun de Cox Modell erëmgewielt goufen, seet dat Analyse datt Survivin Gentherapie Ausdrock nëtzlech prognostic Informatiounen derbäi kënnt VerfÜgung ze gutt wéi déi TNM Stadium System etabléierten Facteuren. VerfÜgung Diskussioun VerfÜgung an dëser Etude fonnt mir dass Survivin transcriptional Niveau vun der Randerscheinung Blutt vu Patienten mat gastric carcinoma onofhängeg mat hirem globale Iwwerliewe vergläichen gemooss. Wann validéiert am groussen mèi Studien, géif erlaben dës Resultater der prognostic Muecht vun konventionelle prognostic Faktore ze erhéijen, déi am Moment vun der TNM Stadium Parameteren duergestallt ginn. Dëst ass vu spezielle Relevanz fir Patiente mat TNM Bühn ze sin III Krankheet, fir deen optimal Risiko stratification essentiel ass Sujeten mat der héchster Chancen aus adjuvant Behandlungen ze profitéieren ze identifizéieren. VerfÜgung Eis Conclusiounen vun allem Relevanz sinn och aus der entholl Biologie Embryone well d'Survivin Gentherapie encodes e Schlëssel anti-apoptotic FAQ fir d'inhibitor vun apoptosis FAQ (IAP) Famill gehéiert. Nieft eent vun de beschte charakteriséiert anti-apoptotic Facteure gëtt [14], ass Survivin den Objet vun intensiv Enquête wéinst der Tatsaach, datt am Erwuessenen ass et selektiv duerch Cancers vun verschidden Originen quasi nëmmen ausgedréckt; Saunaen, hiren Ausdrock an der Primärschoul entholl gouf mat verschlechtert hätt a Resistenz zu konventionell chemotherapeutics [15] assoziéiert. Dës Observatiounen maachen eng ideal Zil fir entholl-spezifesch Therapien Survivin, wéi kleng Protein inhibitors an antigen-spezifesch immunotherapy [16]. VerfÜgung Survivin FAQ Ausdrock am primäre erhéijen, gastric Kriibs dorënner, huet als prognostic Faktor propagéieren ginn, méi héich Niveauen Wiesen mat verschlechtert Kriibs Resultat verbonne [17]. Iwwer RNS Ausdrock, hunn Survivin mRNA Niveau wéi enger Bewaacher vun libre entholl Zellen (CTC) an verschidden Art Kriibs ënnersicht ginn, mä den sinn Donnéeën knapp [18, 19]. An enger Serie vu 26 gastric Kriibs Patienten, Survivin mRNA am Randerscheinung Blutt (als asaatz vun Elisa-baséiert qrtPCR gemooss) huet gemellt gi mat Patienten hätt ze vergläichen, déi TNM Stadium vun der Finale mutivariable Modell ausgeschloss ginn (onfairen all Verännerlechen an de Cox Modell) [20]. An eisem grousse Serie (n = 70), ass de prognostic Roll vun Survivin Blutt Niveauen confirméiert, obwuel d'TNM haut e wesentleche prognostic Faktor an der Finale multivariable Modell bleift (de stepwise Modus fir eis Selektioun benotzt). Trotz der grousser Associatioun mat Patienten hätt, Niveauen Survivin mRNA hutt Erhéijung net an alle véier TNM Etappen: den Trend fir fräi transcriptional Iwwerfloss war eigentlech bewisen nëmmen zu Patiente mat Etapp ze sin III Krankheet (Dorënner 2). Dëst brengt kéint hänkt op der niddereg Echantillonen vun der eenzeger TNM Etappen (an der konsequent niddereg statistesch Muecht) mee vläicht beweist och dass Survivin eng Roll an locoregional spillt an net am fernen metastatic Krankheet (wou aner Genen méi relevant ginn hätt, wéi viru kuerzem gemellt [21]) VerfÜgung Géigesaz zu anere Studien [9, 22-26], huet den Niveau vun CK19 an CEA net mat Patienten Iwwerliewe vun eiser Serie vergläichen, entweder op univariable (Donnéeën net gewisen) oder multivariable Iwwerliewe Analyse:. dëser vläicht op e puer Facteuren ofhänken. Éischt vun all, mécht d'Abezéiung vun eiser multivariable Analyse (mat engem stepwise Modus vun eis Auswiel) vun engem Bewaacher net vun aneren Auteuren considéréiert all Verglach unfeasible. VerfÜgung Skulpture, nëmmen e puer positiv Rapporten univariable Iwwerliewe Analyse, benotzen deen de jeopardizes Zouverlässegkeet an reproducibility vun hire Resultater, eemol Upassung fir gutt etabléiert prognostic Faktoren (dh TNM Etappen) ëmgesat [9, 25, 27, 28]. Desweideren, am Aklang mat eisem Resultater aner Enquêteuren do Rapport opgepasst association tëscht cytokeratins positive Zellen Präsenz an hätt [29] (Table 4) .Table 4 Ausgewielten Serie der prognostic Roll vun libre entholl Zellen (CTC) an Patienten mat gastric Kriibs analyséiert. VerfÜgung Author

Year

Ref.

Patients

Method

Survival Analyse
lues
effektiv
Koga T et. al. VerfÜgung 2008 VerfÜgung [9] VerfÜgung 101 VerfÜgung Chemeschen RT-Hinnen alleguer VerfÜgung Univariate VerfÜgung CK18, CK19, CK20, CEA VerfÜgung CK19 der besser Bewaacher geflitzt ass, an ass villsäiteg ze Estimatioun hätt oder fir adjuvant Behandlung VerfÜgung Yie SM et. al. VerfÜgung 2008 VerfÜgung [20] zu 26 (gastric Kriibs) VerfÜgung RT-Hinnen alleguer Elisa VerfÜgung Multivariate VerfÜgung Survivin VerfÜgung Status vun Survivin-ausdrécken CTC ass eng staark an onofhängeg Estimatioun fir um Terrain VerfÜgung Hiraiwa K et. . Al VerfÜgung 2008 VerfÜgung [22] zu 44 (gastric Kriibs) VerfÜgung CellSearch System VerfÜgung Multivariate VerfÜgung CD45 (-) Zellen vs CK (+) Zellen VerfÜgung CTSs vill soll mat fortgeschratt entholl Etapp VerfÜgung Illert B et. al. VerfÜgung 2005 VerfÜgung [23] zu 70 VerfÜgung Chemeschen RT-Hinnen alleguer VerfÜgung Multivariate CK20 VerfÜgung CK20 VerfÜgung ass eng onofhängeg prognostic Bewaacher VerfÜgung Yeh KH et. al. VerfÜgung 1998 VerfÜgung [24] zu 34 VerfÜgung gemaach grouss RT-Hinnen alleguer VerfÜgung Univariate VerfÜgung CK19 VerfÜgung CK19 CTC ausdrécken verbonne si mat aarmséileg hätt VerfÜgung Seo JH et. al. VerfÜgung 2005 VerfÜgung [25] zu 46 VerfÜgung Chemeschen RT-Hinnen alleguer VerfÜgung Net VerfÜgung CEA standing VerfÜgung CEA mRNA ass vill mat Medeziner Terrain soll VerfÜgung Wu CH et. al. VerfÜgung 2006 VerfÜgung [26] zu 42 VerfÜgung Chemeschen RT-Hinnen alleguer VerfÜgung Net VerfÜgung hTERT gesuergt, CK19, CK20, VerfÜgung CEA CEA mRNA mat héichen Risiko vun Thes soll ass Terrain /Metastasen VerfÜgung Uen YH et. al. VerfÜgung 2006 VerfÜgung [27] zu 52 VerfÜgung Chemeschen RT-Hinnen alleguer VerfÜgung Univariate VerfÜgung c-begéint, MUC1 VerfÜgung c-zesummegesaat MUC1mRNA vill mat Iwwregens hätt VerfÜgung vergläichen Mimori K et. al. VerfÜgung 2008 VerfÜgung [28] zu 810 VerfÜgung Chemeschen RT-Hinnen alleguer VerfÜgung Univariate VerfÜgung MT1-MMP VerfÜgung MT1-MMP ass eng onofhängeg Faktor fir Terrain Bestëmmung an fernen Metastasen
Pituch-Noworolska Eng et. . Al VerfÜgung 2007 VerfÜgung [29] zu 57 VerfÜgung Flow cytometry VerfÜgung Univariate VerfÜgung CD45 (-) Zellen vs CK (+) Zellen VerfÜgung D'Präsenz vum CK (+) Zellen ass vun kee prognostic Wäert VerfÜgung Dës contraire Daten kéinten op de Fait hänkt datt CK19 an CEA lues Präsenz vun CTC sinn awer net onbedéngt vun CTC Fähegkeet metastasize: eigentlech, et ass gutt akzeptéiert, datt e Ziel vun CTC nëmmen de biologeschen huet Potential vun Lut ze metastatic Siten wou, wann déi schlussendlech stierwen CTC ouni fir d'Provider schiedlech sinn [7]. An anere Wierder, lues vun CTC "aggressiveness" wéi Survivin kéint léist méi Informatiounen zu Conditioune vun Korrelatioun "mat Patienten hätt gin. VerfÜgung Skulpture, am haitegen Etude der mRNA Heefegkeet vun Survivin an CK19 gouf ëmmer méi grouss wéi déi fonnt an gesond Kontrollen ausser een an zwee Fäll, bzw.. Dat ënnersträicht d'Wichtegkeet vun enger grouss Method vun benotzt (qrtPCR) datt eis aktivéiert Patienten Risiko op eng kontinuéierlech Skala ze stratify hierkommen Standard Hinnen alleguer quasi all Patienten als positive séiert hätt. Op der aner Säit, dat get - wat fir déi bescht vun eisem Wëssen nach ni virdrun gemellt ginn - seet, dass dës Genen och fir diagnostic Zwecker exploitéiert ginn, obwuel en engagéierten Etude speziell fir dëst Zil entworf hëllt ass VerfÜgung Als. final allem, géift mir ze observéieren wéi datt Hinnen alleguer-baséiert Methoden erlaabt do net d'Zell Quell vun de gemoossenen lues ze identifizéieren: am fong, all dës Methoden verlaangen der lysis vun der aus der Randerscheinung Blutt vu Patienten fir recoltéiert Zellen der ofzebauen mRNA benotzt den Ausdrock vun Zil- Genen ze bewäerten. Nieft CTC, aner potentiell Quelle vun Hinnen alleguer-fonnt Genen sinn PBMC, libre endothelial Zellen (Cec), Schanken hiirgestallt ofgeleet Stammzellen libre souwéi Haut Zellen (e.g. keratinocytes, Här iwert mech selwer, melanocytes) contaminating d'Echantillonen am Blutt virgesinn. Trotzdem, sinn CTC wahrscheinlech den Haapt Zell Quell fir Survivin ze ginn wéi hir Ausdrock ganz limitéiert an normal erwuessener Stoffer ass an d'Spill ass haaptsächlech un malignant Zellen limitéiert [30]. An dat wat, sinn cytometric Methode manner ufälleg fir falsch positive Resultater, nodeems se antibody-baséiert Zell vun cytological Identifikatioun vun entholl Zellen duerno zortéieren, datt hir phenotypic characterization ginn [31]. VerfÜgung Konklusiounen VerfÜgung Gene Ausdrock Niveau vun Survivin préziséiert Foto bedeitendst prognostic Wäert op déi aktuell TNM Stadium System vum Patienten mat gastric carcinoma. D'Confirmatioun vun dëse Conclusiounen am groussen mèi Serie kéint nodeems de Risiko stratification ze optimiséieren an schlussendlech déi therapeutesch Gestioun vun dëse Patienten ze personaliséieren. VerfÜgung Deklaratioune VerfÜgung Auteuren 'original deposéiert Fichieren fir Biller VerfÜgung sinn ennen de Linken zu de Auteuren 'original deposéiert Fichieren fir Biller. 12967_2009_422_MOESM1_ESM.eps Auteuren 'original Datei fir Figur 1 12967_2009_422_MOESM2_ESM.eps Auteuren' original Datei fir Figur 2 12967_2009_422_MOESM3_ESM.eps Auteuren 'original Datei fir Figur 3 12967_2009_422_MOESM4_ESM.eps Auteuren' original Datei fir Figur 4 Wettsträit Interessen VerfÜgung D'Auteuren erklären, datt si keng Competitioun Interessen hunn. VerfÜgung

• Clinicopathological Fonctiounen an prognostic Rollen vun KRAS, BRAF, PIK3CA an NRAS kennen fortgeschratt gastric cancer
• Stent versus gastrojejunostomy fir d'palliation vun gastric Outlet dogéint: eng systematesch review