Gydomasis poveikis naviką injekcijų dendritų ląstelių lokaliai pasikartojančių skrandžio vėžio atvejis ataskaita

Gydomasis poveikis naviką injekcijų dendritų ląstelių vietoje pasikartojančių skrandžio vėžio atvejis ataskaita
Anotacija
80-erių metų vyras su skrandžio vėžio istorijos ir plaučių emfizema patyrė distalinio pašalintas skrandis skrandžio vėžio 1997 m. 2010 endoskopinis tyrimas atskleidė depresija tipo pažaida, burnos pusėje anastomozės, kuri buvo diagnozuota kaip Sygnet adenokarcinoma. Chirurginis gydymas buvo laikomas, bet buvo atmestas, nes obstrukcinių ir ribojančių kvėpavimo renginiuose. Chemoterapija buvo nutraukta dėl nepageidaujamų reiškinių. Endoskopija buvo naudojamas administruoti naviką dendritų ląstelių (DSC) skirtomis susintetinti peptidai Wilms navikas 1 (WT1) ir mucino 1, ląstelių paviršiaus, susijusio (MUC1). Imunohistocheminis analizė navikų mėginiuose nurodyta pozityvumo už WT1 ir MUC1. Praėjus vienam mėnesiui po septynis ciklai DC buvo vartojamas (nuo 2010 lapkričio iki 2011 metų balandžio), jokių įtartinų pažeidimai buvo akivaizdūs, o jo biopsijos rezultatai buvo normalus. Pacientas buvo remisija 30 mėnesių. Naviką DCS parodė gydomąjį poveikį šiam pacientui, kuris negalėjo būti atliekamos endoskopinės gleivine skrodimo ar operacija.
Raktiniai žodžiai
Dendritic ląstelių WT1 MUC1 Imunoterapija ir pasikartojantis skrandžio vėžys faktai
Skrandžio vėžio yra antra labiausiai paplitusi priežastis vėžio susijusios mirtys visame pasaulyje [1]. Nors operacija yra galutinis gydymo skrandžio vėžio, alternatyvių vaistinių būdai apima endoskopinės gleivine skrodimui (ESD), chemoterapija, ir radioterapija.
Neseniai buvo pranešta, kad pusė visų piktybinių navikų atsirasti pacientams, vyresnių nei 70 metų [2 ]. Lėtinė obstrukcinė plaučių liga (LOPL), kuri yra būdinga oro srauto ribojimo, yra taip pat paplitusi senyvų žmonių [3]. Kai kuriais atvejais, standartinis gydymas piktybinių navikų netinka dėl to, kad lėtinės obstrukcinės plaučių ligos buvimo. Sakai ir kt
. [4] parodė, kad LOPL buvo nepriklausoma rizikos veiksnys viduje ir pooperacinių plaučių funkcijos sutrikimų. Be to, Dimopoulou et al
. [5] pranešė, kad kai kurie vaistai nuo vėžio sukelti toksinį poveikį plaučiams. Pavyzdžiui, paklitakselis, ir irinotekano buvo pranešė, kad sukelti nespecifinės intersticinės plaučių uždegimą. Kai kuriais atvejais, minimaliai gali būti reikalaujama invazinė terapija vyresnio amžiaus pacientams, sergantiems lėtinės obstrukcinės plaučių ligos.
Dendritinės ląstelės (DCS) yra antigeno-pateikiančių ląstelių, kurios yra specializuota už T-ląstelių imunitetą inicijavimą [6, 7]. DC-pagrįstas imunoterapija, kad tikslai susintetino peptidus neseniai buvo naudojamas įvairių piktybinių navikų, įskaitant skrandžio vėžio [8-11]. Tinkamas pasirinkimas susintetintų peptidų būtina stiprinti terapinį efektą DC-pagrįstą imunoterapijos skrandžio vėžio. 2009, vėžys antigenas prioritetų projektas Nacionalinio vėžio instituto užėmė Wilms navikas 1 (WT1) ir mucino 1, mobiliuoju paviršių, susijusią (MUC1), kaip aukščiausia ir antras prioritetinių antigenų atitinkamai [12]. Kaip nustatoma imunohistocheminis (IHC) buvo rasta, iš WT1 ir MUC1 skrandžio vėžio posakiai būti 42 iki 53% [13] ir 93% [14], atitinkamai.
Naviką administravimą naudojant DC fagocitozę yra potencialus palankus variantas [15]. Mes naudojome ezofagogastroduodenoskopija (EGD) administruoti naviką DCS impulsais su WT1 ir MUC1.
Byla pristatymas
80-metų vyras su skrandžio vėžio ir plaučių emfizema istorijos patyrė Billroth I distalinio pašalintas skrandis anksti skrandžio vėžio 1997 metais 2005 ir 2009 metais, jis buvo perduotas už endoskopinės gleivinės rezekcija vietos skrandžio vėžio pasikartojimo (gerai diferencijuota kanalėlių adenokarcinoma). 2010 metų gegužės mėnesį jis patyrė tolesnių EGD kad atskleidė depresija tipo pažeidimui (10 × 18 mm dydžio) dėl skrandžio šalia anastomozės (O) (1a pav) kūną. Histopatologinė analizė biopsijos mėginiuose atskleidė Sygnet adenokarcinoma (pav 2a-a "),. Kompiuterinė tomografija atskleidė ne metastazes. Nors bendras rezekcija skrandžio likutis yra potencialiai gydomasis terapija, tai operacija nebuvo atlikta įvertinus paciento plaučių disfunkciją, kuri įtraukta obstrukcinė ir ribojantis plaučių liga (plaučių gyvybinė talpa (VC): 2.12 l;% VC: 71,9%; priversti iškvėpimo tūris 1,0 sekundes: 42.9%). Pacientas turėjo 50 metų istoriją rūkymo. ESD buvo draudžiama, nes vėžys buvo nediferencijuotos tipo. Todėl gydymas TS-1 (tegafuras, gimeracil ir oteracil kalis; Taihō Pharmaceutical Co., Ltd ", Tokijas, Japonija) buvo pradėta rugpjūčio 2010. keturias savaites po to, kai TS-1 administravimą, gydymu susijęs anoreksijos (2 klasės; bendros terminologijos kriterijai nepageidaujamų reiškinių buvo pastebėta versija 4.0), taigi, chemoterapija buvo nutrauktas ne paciento prašymu. 1 pav ezofagogastroduodenoskopija (EGD) vaizdai. (A, b) 0 tipo-IIc pažeidimui (10 × 18 mm dydžio) dėl skrandžio prie anastomozių regione (O) kūno iki skiepijimo (a). Skrandžio vėžys regresavo į neaiškių pažeidimas vieną mėnesį po galutinio gydymo ciklo (B). Rodyklės rodo vėžio buvimo vietą.
2 paveikslas histologinis analizę biopsijos mėginio. Hematoksilinu ir eozinas ( "H & R) dažymo (AA" FF ") ir imunohistocheminis serijos skyriuose audinių Wilms navikas 1 (WT1) (BB", VS) ir mucino 1, ląstelių paviršiaus susijęs (MUC1) ( "HH") CK. (A-A ", F-f") H & El dažymo prieš ir po vakcinacijos. H & E dažymo rodo Sygnet ląstelių audinio iki skiepijimo (a-a "),. Praėjus vienam mėnesiui po galutinio administracijos, patologinis tyrimas atskleidžia įprastus luminal epitelio ląstelių (F-F). (B-b ", G-g") Dažymo už WT1 prieš ir po skiepijimo. Mėginiai teigiami už WT1 maždaug 60% ląstelių iki vakcinacijos naviko vietoje (B-B ") ir nepaprastą sumažinti WT1 pozityvumo patvirtino po vakcinacijos (G-G"). (C-c ", h-h") Dažymo už MUC1 prieš ir po skiepijimo. Maždaug 70% naviko ląstelių buvo teigiamas MUC1 iki skiepijimo (c-c ") ir MUC1 dažymo buvo stebimų normaliems liaukų tik po skiepijimo (f-f"). Imunohistocheminis dažymo CD4 + ir CD8 + T-ląstelių biopsijos mėginių. Serijos profiliai iš audinių, naudojamų H & E dažymo paruošti ir dažomos CD4 ir CD8 (D, E, I, J). (D-d "," i-i ") Dažymo už CD4 prieš (d-D") ir po skiepijimo (I-i "). (E-E "J-j") Dažymo už CD8 prieš (E-E ") ir po skiepijimo (j-j"). CD4 ir CD8 + T-ląstelių pastebėtas dažniau normaliomis skrandžio audinių po vakcinacijos, nei buvo pastebėtas navikų audiniuose, prieš vakcinaciją. (Didinimas: A-j 4 ×, a'-j "10 × A" -j "20 ×).
Metodų, kurie buvo naudojami nuolatinės srovės paruošti buvo aprašyta anksčiau [16]. DCS buvo impulsinis su pagrindinėmis Audinių suderinamumas komplekso (MHC) -I-ribojamas WT1 peptidų antigenus, atsižvelgiant į paciento žmogaus leukocitų antigenų (ŽLA) -A modelis (ŽLA-A-2402; CYTWNQMNL (mutantas WT1 peptidų, neo-MPS ", San Diegas , Kalifornija, Jungtinės Amerikos Valstijos) ir MUC1 ilgai peptidas (30 mer 20 mg /ml, TRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAP- GSTAP; Greiner Japonija, Tokijas, Japonija)). DCS buvo tiriamas naudojant tėkmės citometrijos siekiant užtikrinti, kad jie pasiekė tipiškas fenotipą subrendusių DCS. Paviršiaus molekules, kurios buvo išreikštos DCS buvo nustatomas. Fenotipų CD14 - /mažas /ŽLA-DR + /ŽLA-ABC " + /CD80 + /CD83 + /CD86 + /CD40 + /CCR7 + buvo laikoma apibrėžti brandus DCS. DCs buvo kriosaugojamų iki administravimo dieną. DC pakaba buvo pakoreguotas bendras tūris 1,0 ml fiziologinio tirpalo.
Šešis mėnesius po to, kai skrandžio vėžio pasikartojimo buvo diagnozuota, naviką DCS buvo administruojamos naudojant EGD nuo 2010 lapkričio iki 2011 balandžio Šis gydymas buvo patvirtinta institucinė apžvalga valdyba Isoukai (patvirtinimo numeris: 26-1) ir buvo vykdoma laikantis Helsinkio deklaracijos
Skiepai buvo pakartoti septynis kartus dviejų iki aštuonių savaičių intervalais (maždaug 2,99 × 10 7 ląstelių /. įpurškimas; pirmieji keturi skiepai kas dvi savaites ir per pastaruosius trejus skiepai ne nuo keturių iki aštuonių savaičių intervalais). Adata buvo naudojamas (skersmuo 25 g, ilgis 4 mm) administruoti DCS keturių Po gleivine sluoksnio svetainių visame naviko. Vėliau mes administruoja OK432 (1-3KE) ištirpinti 0,5 ml fiziologinio tirpalo dviejų vietų po gleivine sluoksnis aplink naviką. terapija DC buvo gerai toleruojamas ir tik su gydymu susijęs nepageidaujamas poveikis buvo karščiavimas, su kūno temperatūros virš 38 ° C temperatūroje dvi dienas po ketvirtosios skiepijimo. Praėjus vienam mėnesiui po galutinio administracijos, buvo nustatyta, kad skrandžio vėžys, kad regresavo visiškai (1b pav.) Histopatologinė tyrimas biopsijos tyrimai neparodė antspaudo žiedas ląsteles (pav 2F-F). Per 30 mėnesių šių DC remiantis imunoterapija, nėra patologinių pasikartojimo buvo pastebėta. Laboratorinės duomenys rodo, sumažinti karcinoembrioninį antigenų ir angliavandenių antigeno 19-9 lygiai po DC gydymo, kuriame sumažėjo nuo 8,2 iki 6,8 ng /ml (normalus: < 5,0 ng /ml) ir iš 33,2 iki 24,7 V /ml (normalus: . < 37,0 V /ml), atitinkamai
IHC už WT1 (monokloninis 6 F-H2, Dako Cytomation, Carpinteria, Kalifornija, Jungtinės Valstijos) [13] ir MUC1 (Becton Dickinson laboratory; Franklin ežerų, Naujasis Džersis, Jungtinės narės) buvo atliktas kaip buvo aprašyta anksčiau [17], su keliais pakeitimais. IHC rezultatai buvo teigiami WT1 maždaug 60% nuo antspaudo žiedas ląstelių iki skiepijimo (2b pav-B "); Tačiau ląstelių dažymosi teigiamas skaičius buvo nepaprastai sumažintas po vakcinacijos (pav 2g-G "). Maždaug 70% ląstelių buvo teigiamas MUC1 iki skiepijimo (pav 2c-c "). Po vakcinacijos, rekonstruoti buvo patvirtinta piktybinių ląstelių vietoje ir MUC1 pozityvumo buvo pastebėtas tik esant normalioms liaukų (pav 2H-H ").
Nr CD4 proporcijos didėja + ir CD8 + T-ląstelės buvo pažymėta periferiniame kraujyje, remiantis atliktais prieš ir po vakcinacijos vertinimais (CD4 + T-ląstelių: 43,9 iki 42,5%; CD8 + T-ląstelių: 29,3 į 25,5%). Kita vertus, CD4 + ir CD8 + T-ląstelių buvo pastebėtas dažniau normalus skrandžio audinyje po vakcinacijos (pav 2i-I ", JJ"), nei jie buvo pastebėta navikų audiniuose, prieš vakcinacija (pav 2d-d ", EE).
į WT1 konkrečių citotoksiniais T limfocitų (NBN) padidėjo nuo 0,03 iki 0,08%, dažnį. Naudojamas metodas turi būti aprašytas mūsų ankstesniame pranešime [16]. 31 mėnesius nuo galutinio vakcinacijos, iš WT1 konkrečių NBN ​​lygis išliko aukštas (0,10%) (pav 3a-C). 3 pav analizė Wilms navikas 1 (WT1) specifinę citotoksiniais T limfocitai (NBN). (A) Prieš vakcinaciją. (B) po skiepijimo. (C) 31 mėnesius nuo galutinio skiepijimo. WT1 specifinio CTL lygiai iki skiepijimo padidėjo nuo 0,03 (a) 0,08% galutinio skiepijimo (b). 31 mėnesius nuo galutinio vakcinacijos, WT1 specifinio CTL kiekis padidėjo 0,10% (C).
Diskusijų
Šiuo atveju ribojančios plaučių liga paskatino pagrindinę onkologas pasirinkti chemoterapijos vietoj operacijos. Tačiau pacientas sukūrė netoleruotiną chemoterapija susijęs anoreksija, kuri reikėjo gydymo. Kadangi keli ankstesni tyrimai parodė, kad DC imunoterapija gali būti saugiai vartojamas vėžiu sergančių pacientų, taip [, 8, 9, 18], arba minimaliai invazinės gydymo, mes pasirinkome šią terapiją mūsų pacientui. Tiesioginis įpurškimas DCS į navikus buvo tirtas klinikinių tyrimų, įskaitant nuostatas dėl hepatoma [19], kasos vėžio [20], ir skrandžio vėžio [21]. Wen Jiabao ir kt
. [22] palygino gydomąjį imunitetą pasiekti kelių rūšių DC injekcijos, įskaitant naviką, intranodal, į veną ir po oda injekcijos pelėms. Išgyvenimo rodikliai buvo ženkliai padidėjo vakcinacijos per naviką injekcijos, palyginus su injekcijos atliekamos naudojant kitus siuntimo metodai. Pellegatta kt
. [23] pranešė, kad, palyginti su kitais metodais, naviką injekcija DCS gali padidinti priešnavikinį veiksmingumą keičiant naviką aplinką ir padidinti T-ląstelių-, kuriuose mediatorius yra imuninį atsaką. Šiuo atveju, padidėjo WT1 konkrečių CTL koncentracija susidaro po DC imunoterapija, nurodant, kad BŠ pateikti WT1 į naivus CD8 + T-ląstelių tiksliai būdu. Mes rekomenduojame, kad skrandžio vėžys gali būti geras rodiklis tiesiogiai įpurškiant DCS ir kad tinkamas svetainė injekcinis galima pasirinkti naudojant gyvą vaizdus su EGD.
Immature DCS buvo naudojami tiesioginės injekcijų ankstesniais tyrimais, nes jų fagocitozės gebėjimas yra buvo laikomas pranašesnis, kad brandžių DCS [24]. Tačiau, įrodyta, kad nesubrendusios DCs, tolerancijai indukuoti ir antigeną-specifiškai slopinantis efektoriaus T-ląstelių funkciją [25, 26]. Drutman ir Trombetta [27] parodė, kad brandus BŠ išlaikė tvirtą gebėjimą fiksuoti tirpių antigenus. Be to, antigenai internalizuoti brandžių DCS buvo efektyviai pateikiama MHC II klasės ląsteles ir kryžminio pateikiama MHC I klasės ląsteles. De Vries et al
. [28] parodė, kad brandus BŠ efektyviai migruoti į T-ląstelių apgyvendintose vietovėse limfmazgių melanomos pacientams. Kartu paėmus, šie duomenys rodo, kad tai gali būti protinga naudoti brandus DCS tiesioginės injekcijų į navikus.
IHC rezultatus WT1 ir MUC1 nurodė reikšmingų pokyčių po vakcinacijos. Mucino yra didelės molekulinės masės glikoproteinas, kuris vaidina svarbų vaidmenį saugant virškinimo trakto epitelį ir normaliai būna gausa dėl luminal paviršiaus įvairių sekrecijos epitelio ląstelių. Pagrindinės peptidai tandemo pakartoti domeno yra užmaskuotas normaliomis ląstelėmis ir veikiami vėžio ląstelių susijusių mucino. NBN už MUC1 tik ataka vėžio ląsteles su veikiami tandemas pakartoti srityse [29]. Šiuo atveju, MUC1-teigiamomis ląstelėmis, dalyvavo dėl Sygnet adenokarcinomos paviršiaus iki skiepijimo (pav 2c-c "); Tačiau MUC1 teigiami ląstelės buvo patvirtinta tik normaliomis luminal epitelio ląstelių po DC imunoterapija, kaip tikėjomės (pav 2H-H ").
išvadas
Kiek mums žinoma, tai pirmasis pranešimas apie terapinis poveikis DCS, kad normos, susintetinti peptidai pacientui su skrandžio vėžiu, negalėjo būti atliekamos ESD ar chirurginio gydymo.
Sutikimas
Mes numatyta tikslius paaiškinimus terapija pacientui ir jo šeimai. Jie davė raštišką sutikimą dėl šio atvejo ataskaitos paskelbimo bei juos lydinčių vaizdų. A raštiško sutikimo galima peržiūrėti, kurį redaktorius vyriausiasis žurnalo.
Autorių informacija
MK yra SEREN klinikos direktorius. MN yra personalo asistentė departamento Virškinimo chirurgijos Kanagavos Vėžys centras, iš SEREN klinikos direktorius, ir tuo Imunologijos departamento profesorius, Šv Marianne universiteto medicinos mokyklos. TS, AC, ir buvo darbuotojus asistentų SEREN klinikoje. MO, SS, MM, YS, o NS taip pat profesoriai ne kiekvienam universitetui
Santrumpos
LOPL.
Lėtinė obstrukcinė plaučių liga
NBN:
citotoksiniais T limfocitai
DC: Rīga, dendritic ląstelių
EGD: Rīga, ezofagogastroduodenoskopija

ŽLA: Rīga, žmogaus leukocitų antigenų
IHC: Rīga, imunohistocheminis
MUC1: Rīga, mucino 1 , ląstelių paviršiaus susijęs
WT1: Rīga, Wilms navikas 1.
deklaracijų
Padėkos
Mes pripažįstame pacientą, kuris sutiko dalyvauti šiame tyrime ir jo pirminių onkologai. Šis tyrimas negavo finansinės paramos.
Autorių originalios pateikti failai vaizdų
Žemiau išvardintos nuorodos į autorių originalus pateiktų failų vaizdų. 12957_2014_1883_MOESM1_ESM.tif Autorių originalus failas 1 pav 12957_2014_1883_MOESM2_ESM.tif Autorių originalaus failo 2 pav 12957_2014_1883_MOESM3_ESM.tif Autorių originalaus failo 3 pav konkuruojančių interesų Viesbutis The autoriai neturi finansinių ar asmeninių santykių su žmonių ar organizacijų, kurios galėtų netinkamai įtaka šis darbas.
Autorių įmokos
MK ir MN sumanė ir sukūrė tyrimą ir surinkti, sumontuoti, analizuoti ir aiškinti duomenis. TS, AC, An, MO, SS, MM, YS, o NS aiškinti duomenis. MK ir MN rašė rankraštį ir patvirtino galutinį rankraštį. Visi autoriai skaityti ir patvirtino galutinį rankraštį.

• Palyginimas tarp geriau ir blogai diferencijuoti lokaliai išplitusiu skrandžio vėžiu Priešoperacinės chemoterapija: retrospektyvus, lyginamasis tyrimas vienoje tretinės sveikatos priežiūros i…
• Koreliacija tarp didinamuoju siauros juostos vaizdus and histopathology skrandžio atsikišusių /ar Polipveidīgs pažeidimų: bandomasis galimybių bandymus