Terapijski učinak intratumoralno injekcijama dendritičke stanice za lokalno recidivirajućim karcinomom želuca: slučaj report

terapeutski učinak intratumoralno injekcije dendritičke stanice za lokalno recidivirajućim karcinomom želuca: prikaz slučaja pregled Sažetak
80-godišnjeg muškarca s Povijest raka želuca i plućnog emfizema doživio distalni gastrektomije za rak želuca u 1997. u 2010. godini, da endoskopska pregledom ustanovljena je depresivna tipa lezija u usnoj strani anastomoze, koji je dijagnosticiran kao pečatnjak prstena adenokarcinoma. Kirurško liječenje se smatra, ali je odbijen zbog opstrukcije i restriktivnih respiratornih događaja. Kemoterapija je prekinuto zbog nuspojava. Endoskopija je korištena za primanje intratumoralne injekcije dendritičke stanice (DCS) ciljaju sintetizirani peptidi Wilmsov tumor 1 (WT1) i mucina 1, površini stanice povezane (MUC1). Imunohistokemijskom analiza uzoraka tumora pokazuje pozitivnost za WT1 i MUC1. Mjesec dana nakon što je sedam ciklusa DC je davati (od studenog 2010. do travnja 2011. godine), nema sumnjivih lezija bili vidljivi, a njegovi rezultati biopsije su bili normalni. Pacijent je bio u remisiji 30 mjeseci. Intratumoralno injekcije DC pokazao terapeutske učinke kod ovog pacijenta koji nije mogao proći endoskopske submukozalnim seciranje ili operaciju. Pregled Ključne riječi pregled, dendritičke stanice WT1 MUC1 Imunoterapija i rekurentne rak želuca Pozadina pregled Želučani karcinom su drugi najčešći uzrok smrtnih slučajeva raka povezanih svijetu [1]. Iako kirurgija je definitivno za liječenje želučanih karcinoma, alternativni terapijski modaliteti su endoskopske submukozalnim disekcija (ESD), kemoterapije i zračenja. Pregled Nedavno je objavljeno da je polovica svih malignih bolesti se javljaju u bolesnika starijih od 70 godina [2 ]. Kronične opstruktivne plućne bolesti (COPD), koji je karakteriziran protoka zraka, također je uobičajena u starijih osoba. [3] U nekim slučajevima, standardna terapija za maligne bolesti nije pogodan zbog prisutnosti COPD. Sakai i sur pregled. [4] pokazalo je da KOPB je neovisni čimbenik rizika za intra- i post-operativnih plućnih događaja. Osim toga, Dimopoulou sur pregled. [5] izvijestili da neki lijekovi protiv raka pluća inducira toksičnost. Na primjer, paklitaksel, docetaksel i irinotekan su izvijestili da uzrokuje nespecifičnog intersticijalni pneumonitis. U nekim slučajevima, minimalno invazivne terapije može biti potrebno starijih pacijenata s KOPB.
Dendritske stanice (DCS) su stanice koje prezentiraju antigen koje su specijalizirane za pokretanje imunosti T-stanica [6, 7]. DC na bazi imunoterapija koja cilja sintetizirani peptidi nedavno se koristi za različite malignih bolesti, uključujući karcinom želuca [8-11]. Odgovarajući izbor sintetiziranih peptida, potrebno je povećati terapeutski učinak DC-based imunoterapiju raka želuca. U 2009. godini, rak antigen prioriteta projekta Nacionalnog instituta za rak rangiran Wilmsov tumor 1 (WT1) i mucina 1, na površini stanice povezane (MUC1) kao najviši i drugi najviši prioritet antigena, odnosno [12]. Kao što je određeno imunohistokemijski (IHH), pronađeni su izrazi WT1 i MUC1 u želučanog karcinoma da se 42-53% [13] i 93% [14], respektivno.
Intratumoralno administraciju pomoću DC fagocitozu je potencijalni povoljna opcija [15]. Koristili smo ezofagogastroduodenoskopija (EGD) provoditi intratumoralno injekcije DC obrađenih s WT1 i MUC1. Prezentacija pregled slučaja
od 80-godišnji muškarac s pojavom raka želuca i plućnog emfizema doživio Billroth I distalni gastrektomije za rano karcinom želuca u 1997. u 2005. i 2009. godini, što je navedeno za endoskopske resekcije sluznice želuca lokalne recidiva raka (dobro diferencirani cijevnog adenokarcinom). U svibnju 2010. godine, on je prošao follow-up EGD koji je otkrila u depresiji tipa lezija (10 × 18 mm veličine) na tijelu želuca u blizini anastomoza (O) (Slika 1a). Patohistološko analiza biopsije uzorka otkrila je pečat zvona adenokarcinom (Slika 2a-a "). Kompjutorizirana tomografija skeniranje otkrilo nema metastaza. Iako je ukupno resekcija želuca Ostatak je potencijalno ljekovito terapiju, ovaj zahvat nije izvršeno u obzir pacijentove pluća disfunkcije, koji je uključivao opstruktivne i restriktivne plućne bolesti (vitalni kapacitet (VC): 2,12 l;% VC: 71,9%; prisiljeni izdisajni volumen u 1,0 sekunde: 42,9%). Pacijent je imao 50-godišnjoj povijesti pušenja. ESD je kontraindiciran jer je rak bio nediferencirani tipa. Dakle, liječenje TS-1 (tegafur, gimeracil i oteracil kalij; Taiho Pharmaceutical Co, Ltd, Tokyo, Japan) pokrenut je u kolovozu 2010. Četiri tjedna nakon TS-1 uprave, obrada vezanih anoreksija (razred 2; zajedničke terminologije Kriteriji za neželjenih događaja, verzija 4.0) je primijetio, i stoga, kemoterapija je prekinuta na zahtjev pacijenta. Slika 1 ezofagogastroduodenoskopija (EGD) slike. (A, b) Tip 0-IIc lezija (10 × 18 mm dimenzija) na tijelu želuca kod anastomoza regije (O) prije cijepljenja (a). Rak želuca regresiju na opskurnoj lezija mjesec dana nakon posljednjeg ciklusa liječenja (B). Strelice označavaju položaj raka.
Slika 2 Histološka analiza uzorka biopsije. Hematoksilinom i eozinom (H &E) bojanjem (AA ", ff") i imunohistokemiju serijskih dijelova tkiva za Wilmsov tumor 1 (WT1) (BB ", GG") i mucina 1, stanične površine povezane (MUC1) ( cc ", hh"). (A-a ', f-f "), H &E bojenje prije i nakon cijepljenja. H & E bojenje prikazuje pečat prstenu stanica u tkivo prije cijepljenja (a-a '). Mjesec dana nakon posljednje primjene, patološko ispitivanje otkriva normalne luminalne epitelne stanice (f-f "). (B-b ", g-g") Bojenje za WT1 prije i nakon vakcinacije. Uzorci pozitivni za WT1 u oko 60% stanica prije cijepljenja na mjestu tumora (b-b ") i iznimne smanjenje WT1 pozitivnosti potvrđeno nakon cijepljenja (g-g"). (C-c "h-h ') Bojenje za MUC1 prije i nakon vakcinacije. Oko 70% tumorskih stanica su bili pozitivni na MUC1 prije cijepljenja (c-c ") i MUC1 bojenje zabilježeno je u normalnim žlijezdama tek nakon cijepljenja (f-F"). Imunohistokemijsko bojanje CD4 + i CD8 + T-stanica u uzorku biopsije. Serijski dijelovi tkiva koriste za H & E bojenje pripremljeni i obojeni za CD4 i CD8 (d, e, i, j). (D-d «, i-i") Bojenje za CD4 prije (d-d ") i nakon cijepljenja (I-I"). (E-e "j-j") Bojenje za CD8 prije (e-e "), te nakon cijepljenja (j-j"). CD4 + i CD8 + T-stanice češća kod normalnih želučanom tkivu nakon cijepljenja nego što je primijećeno u tumorskim tkivima prije cijepljenja. (Povećanje: a-j 4 ×, a'-j '10 ×, postoji "j" 20 ×).
Metode koje su korištene za DC pripreme prethodno [16] što je opisano. DCS su pulsirane glavnog sustava tkivne kompatibilnosti (MHC) -l ograničeni WT1 peptidne antigene, u skladu s pacijentovim ljudskih leukocita antigen (HLA) -A uzorak (HLA-A 2402; CYTWNQMNL (mutant WT1 peptida, neo-MPS, San Diego , California, SAD), a MUC1 dugi peptid (30 mer 20 mg /ml; TRPAPGSTAPPAHGVTSAPDTRPAP- GSTAP; Greiner Japanu, Tokyo, Japan)). DCS su karakterizirani protočnom citometrijom kako bi se osiguralo da su postigli tipičan fenotip zrelih DC. Površinski molekule koje su poimence DCS određena. Fenotip CD14 - /low /HLA-DR + /HLA-ABC + /CD80 + /CD83 + /CD86 + /CD40 + /CCR7 + smatralo da definira zrele DB. DCS su zamrznuta do dana primjene. DC suspenzija podesi do ukupnog volumena od 1,0 ml s fiziološkom otopinom. Pregled, šest mjeseci nakon što je dijagnosticiran želučani recidiva raka, intratumoralno injekcije DC su davani korištenjem EGD između studenog 2010. i travnja 2011. Ovaj tretman je odobren od strane Institutional Review board of Isoukai (broj odobrenja: 26-1), a proveden je u skladu s deklaracijom Helsinkija pregled Cijepljenje se ponavlja sedam puta u dva do osam tjedana intervalima (oko 2,99 × 10 7 stanica /. injekcije, prva četiri cijepljenja u intervalima od dva tjedna, a zadnje tri cijepljenja u četiri do osam tjedna intervalima). Igla je korišten (promjer 25 g, dužina 4 mm) za primjenu DC-u četiri submukozna sloja mjestima oko tumora. Nakon toga, primjenjuje se OK432 (1-3KE) otopljen u 0.5 mL fiziološke otopine na dva mjesta u submukozne sloja oko tumora. DC terapija se dobro podnosi, a jedino liječenje vezane štetni događaj je groznica, i tjelesne temperature iznad 38 ° C tijekom dva dana nakon četvrte cijepljenja. Jedan mjesec nakon konačne primjene, rak želuca utvrđeno je da je potpuno regresiju (Slika 1b). Histopatološko ispitivanje uzoraka biopsije nije otkrila pečat prstenu stanica (Slika 2F-f "). Tijekom 30 mjeseci nakon DC-based imunoterapija, nikakav patološki ponavljanje je primijetio. Laboratorijski podaci pokazivali smanjenje karcinoembrionski antigen i ugljikohidratni antigen 19-9 razine nakon DC terapije, koja je smanjena s 8,2 do 6,8 ng /mL (normalne vrijednosti: < 5,0 ng /ml) i s 33,2 na 24,7 U /mL (normale: . < 37,0 U /ml), odnosno
IHC za WT1 (monoklonska 6 F-H2, Dako Cytomation, Carpinteria, Kalifornija, Sjedinjene Američke Države) [13] i MUC1 (Becton Dickinson Labware; Franklin Lakes, New Jersey, Sjedinjene Američke stanja) izvedena je kako je prethodno opisano [17], uz nekoliko izmjena. IHC rezultati su bili pozitivni na WT1 u oko 60% pečatni prsten stanica prije cijepljenja (Slika 2b-b "); Međutim, broj stanica pozitivno obojenim značajno smanjena nakon cijepljenja (Slika 2 g-g "). Oko 70% stanica bilo pozitivno na MUC1 prije cijepljenja (Slika 2a-c "). Nakon cijepljenja, pregradnja potvrđeno je na mjestu malignih stanica, a MUC1 pozitivnost zabilježeno je samo u normalnim žlijezdama (Slika 2H-h ").
Nema povećanja proporcije CD4 + i CD8 + T-stanica zabilježene su u perifernoj krvi, na temelju ocjena provedenih prije i nakon cijepljenja (CD4 + T-stanica: 43,9-42,5%, CD8 + T-stanica: 29,3-25,5%). S druge strane, CD4 + i CD8 + T-stanice su češća kod normalnog želučanog tkiva nakon cijepljenja (Slika 2i-i ", JJ") nego što su bila zapažena u tumorskim tkivima prije cijepljenje (Slika 2d-d ", ee").
učestalost WT1 specifičnih citotoksičnih T limfocita (CTL) povećao se s 0,03 na 0,08%. Metoda koja se primjenjuje je opisan u prethodnom izvješću [16]. Na 31 mjeseca nakon konačne cijepljenja, nivoi WT1 specifične CTL ostala visoka (0,10%) (Slika 3a-c). Slika 3. Analiza Wilmsov tumor 1 (WT1) specifična citotoksični T limfociti (CTL). (A) prije cijepljenja. (B) nakon cijepljenja. (C) na 31 mjeseci nakon posljednjeg cijepljenja. WT1 specifične razine CTL prije cijepljenja povećava od 0.03 (a) do 0,08% kod konačne cijepljenja (b). U 31 mjeseci nakon posljednjeg cijepljenja, WT1 specifične razine CTL porasla na 0,10% (C). Pregled Rasprava Netlogu U tom slučaju, restriktivna plućna bolest dovela primarni onkologa da se odluče za kemoterapiju umjesto operacije. Međutim, pacijent razvio nepodnošljivo kemoterapijom povezana anoreksiju, zbog čega se prekid liječenja. Budući da je nekoliko prethodnih studija pokazala da DC imunoterapija moglo sigurno davati bolesnicima s karcinomom kao minimalno invazivna tretman [8, 9, 18], odabrali smo ovu terapiju za naš pacijenta. Izravni injekcija DC u tumore je ispitivan u kliničkim studijama, uključujući i one na hepatoma [19], rak gušterače [20], i rakom želuca [21]. Wen i sur pregled. [22] u odnosu na terapijski imunitet postići nekoliko načina DC injekcije, uključujući intratumoralnim, intranodalna, intravenski, i potkožnim injekcijama kod miševa. Stope preživljavanja su dramatično porasla za cijepljenja preko intratumoralne injekcije, u usporedbi s injekcijama koje obavlja primjenom drugih metoda isporuke. Pellegatta sur pregled. [23] su izvijestili da, u usporedbi s drugim metodama prikazivanja, intratumoralne injekcije od DC može povećati antitumorsko djelovanje mijenjanjem intratumoralno okoliša i povećanja T-stanični-posredovanih imunih odgovora. U tom slučaju, povišene razine CTL WT1 specifična uočeni su nakon DC imunoterapija, što znači da DCS predstavljeni WT1 naivnoj CD8 + T-stanica na precizan način. Predlažemo da se rak želuca može biti dobar pokazatelj za izravnim ubrizgavanjem DC, te da je to prikladno mjesto za injekcije može se odabrati pomoću žive slike s EGD.
Nezrelih DC-su korišteni za izravna injekcija u prethodnim studijama jer je njihova fagocitna sposobnost ima smatraju se bolja od zrelih DC [24]. Međutim, nezrele DC su pokazali da izaziva toleranciju i inhibiciju funkcije efektora T-stanica [25, 26] antigen specifične. Drutman i Trombetta [27] pokazali su da zreli DC zadržana robustan kapacitet za hvatanje topljivih antigena. Nadalje, antigeni internaliziraju zrelih DC učinkovito predstavljeni su na MHC klase II stanice i cross-predstavljena MHC stanice klase I. De Vries i sur pregled. [28] pokazali su da zreli DC učinkovito prelaze u T-stanicama naseljena područja limfnih čvorova u bolesnika s melanomom. Uzeti zajedno, ovi rezultati ukazuju na to da bi to moglo biti razumno koristiti zrele DC-za izravna injekcija u tumore. | Rezultati IHC za WT1 i MUC1 pokazala značajne promjene nakon cijepljenja. Mucina visok glikoprotein molekulske mase, koja ima važnu ulogu u zaštiti epitel gastrointestinalni trakt, a što je normalan u izobilju na luminalnoj površini različitih sekretornih epitelnih stanica. Jezgra peptidi u tandem repeat domene su maskirani u normalnim stanicama i izložena u raka povezanog sa stanicom mucina. CTL za MUC1 stanice raka samo napad s izloženim tandem repeat domena [29]. U ovom slučaju, MUC1-pozitivne stanice bile su prisutne na površini pečat prstena adenokarcinoma prije cijepljenja (Slika 2a-c "); Međutim, MUC1-pozitivne stanice su potvrđeni samo na normalne luminalnih epitelnim stanicama nakon DC imunoterapija, kao što smo očekivali (Slika 2H-h "). pregled Zaključci pregled Koliko je nama poznato, ovo je prvi izvještaj o terapeutski učinci DC koje ciljaju sintetizirani peptidi u bolesnika s rakom želuca koji nije mogao proći ESD ili kurativne operaciju.
pristanak pregled smo osigurati precizne objašnjenja terapije za pacijenta i njegove obitelji. Oni su dali pisani pristanak za objavu ovog slučaja i popratne slike. Kopija pismene suglasnosti je dostupna za pregled od strane Editor-in-Chief ovog časopisa. Informacije
autora
MK je direktor Seren klinici. MN je pomoćnik osoblje na Odjelu za gastrointestinalna kirurgija, Kanagawa Cancer Center, direktor Seren Clinic, i profesor na Odjelu za imunologiju, St Marianna University School of Medicine. TS, AC, te su djelatnici pomoćnici u Seren klinici. MO, SS, YY, YS i NS su i profesori na svakom sveučilištu pregled Kratice pregled KOPB. Pregled Kronična opstruktivna plućna bolest
CTL: pregled citotoksičnih T-limfocita
DC: pregled, dendritičke stanice
EGD: pregled ezofagogastroduodenoskopija

HLA: pregled ljudskog leukocita antigena
IHC: pregled Imunohistokem
MUC1: pregled mucina 1 , stanične površine povezana
WT1: pregled, Wilmsov tumor 1.
deklaracijama
Zahvale pregled Priznajemo pacijenta koji je pristao sudjelovanje u ovom istraživanju i njegovim primarnim onkologa. Ova studija nije dobio financijsku potporu.
Autora originalne dostavljeni datoteke za slike
Ispod su linkovi na autora izvornika dostavljenih datoteka za slike. 12957_2014_1883_MOESM1_ESM.tif autora izvorna datoteka za Slika 1 12957_2014_1883_MOESM2_ESM.tif autorskim izvorne datoteke za sliku 2 12957_2014_1883_MOESM3_ESM.tif autorskim izvorne datoteke na Slici 3 suprotstavljenih interesa
Autori nemaju financijske ili osobne odnose s osobama ili organizacijama koje bi mogle neprimjereno utjecaj ovaj rad.
autora doprinosa pregled MK i MN koncipiran i dizajniran studije i prikupljeni, okupljeni, analizirani i interpretirani podatke. TS, klima, AN, MO, SS, YY, YS i NS interpretirati podatke. MK i MN napisao rukopis i odobrio konačni rukopis. Svi autori pročitali i odobrili konačnu rukopis. Pregled

• Usporedba između bolje i slabo diferencirani lokalno uznapredovalim rakom želuca u preoperativnoj kemoterapije: retrospektivna, komparativna studija na jednom institutu za tercijarnu njegu
• Korelacija između povećalo uskom rasponu slike i histopatologiju u želučanom strše /ili Polipoidne lezija: a ispitivanje pilota izvodljivosti