Relatie tussen H. pylori infectie en klinisch-pathologische kenmerken en de prognose van maagkanker

Relatie tussen H. pylori infectie en clinicopathologische kenmerken en prognose van maagkanker
Abstract achtergrond
Gericht op de relatie tussen H. pylori en de klinische en pathologische kenmerken en prognose van maagkanker beoordelen door kwantitatieve detectie van H. pylori .
methoden
157 patiënten werden ingeschreven, hadden alle patiënten een record van clinicopathologische parameters. Specimens waaronder tumor en non-neoplastische werden gedetecteerd pylori van Real-Time PCR en klinische gegevens achteraf geanalyseerd. . Variabelen onafhankelijk van invloed zijn prognose werden onderzocht door middel van multivariate analyse met behulp van Cox proportionele risico model
Resultaten
H. pylori-infectie groter was in niet-neoplastisch weefsel dan het tumorweefsel (p < 0,05), H. pylori infectie en de kopieën ervan waren gerelateerd aan de tumor en N staging (p < 0,05). Overall survival (OS) in alle 157 patiënten heeft geen correlatie met de H. pylori-infectie staat (p = 0,715). Wat de patiënten die een curatieve operatie ondergaan, recidief-vrije overleving (RFS) geen correlatie met de H. pylori besmettingsstatus (p = 0,639). Onder de H. pylori positieve patiënten, OS en RFS van degenen met een hogere kopieën waren langer dan bij patiënten met een lage exemplaren, maar er was geen significant statistisch verschil.
Conclusies
H. pylori-infectie status en haar kopieën waren gerelateerde N enscenering. Het OS en RFS bij patiënten met een positieve H. pylori-status heeft geen significant verschil ten opzichte van de patiënten met een negatieve H. pylori-status. Achtergrond
Maagkanker is de tweede meest voorkomende oorzaak van kanker overlijden, hoewel de incidentie is afgenomen dramatisch in sommige ontwikkelingslanden de afgelopen decennia [1], patiënten met deze ziekte hebben gewoonlijk een slechte vooruitzichten [2]. Zelfs na potentieel curatieve chirurgie, meer dan de helft van de patiënten tumor recidief. Lymfeklieraantasting, invasiediepte, leeftijd en tumor locatie zijn geïdentificeerd als de belangrijkste clinicopathologic prognostische factoren [3, 4]. Echter, NCCN Clinical Practice Guideline van maagkanker suggereert dat patiënten met maagkanker moeten roeien Helicobacter pylori (H. pylori) om het risico van herhaling, die werd omschreven als klasse bewijs te verminderen [5].
H. pylori, een Gram -negatieve microaërofiele spiraalvormige bacterie, werd voor het eerst voorgesteld te worden geassocieerd met maagkanker door mede-ontdekker Marshall in 1983 [6]. In 1994, het Internationaal Agentschap voor Kankeronderzoek (IARC) geclassificeerd H. pylori als een definitief CLASSI carcinogeen [7, 8]. Na dat, hebben veel studies zijn uitgevoerd, met inbegrip van epidemiologisch onderzoek [9], experimentele studies [10], dier experimentele gegevens [11, 12], case-control klinische proeven [13, 14]. De meeste van deze studies versterkt dat H. pylori is de belangrijkste oorzaak van maagdarmkanker. Echter, dit standpunt is nog steeds controversieel en betrouwbaarder gegevens nodig. Hoe H. pylori infectie leidt tot maagkanker is nog niet helemaal duidelijk, een verscheidenheid van pathogene factoren kunnen inwerken op verschillende fasen, zoals virulentiefactoren [15], DNA schade, gastheerfactoren [16, 17] en COX-2 [ ,,,0],18]. De incidentie van maagkanker is een multifactoriële en meerstapsproces.
Momenteel is er geen overtuigende gegevens over de relatie tussen H. pylori infectie status of kopieën en de klinische en pathologische kenmerken. Daarnaast prognose verschillen in overleving van patiënten die positief zijn voor H. pylori in vergelijking met degenen die negatief blijft onbekend. In een variabel deel van maagkanker patiënten kan pylori infectie niet worden gedetecteerd en onderscheiden klinische en pathologische kenmerken zijn beschreven in deze subgroep [19, 20]. Bovendien is een recente Duitse studie aangetoond van een betere prognose bij patiënten met H. pylori infectie vergeleken met negatief geval [21] en een Italiaanse studie toonde aan dat negatieve H. pylori status werd geassocieerd met een slechte prognose bij patiënten met maagkanker [22] . Echter, voor zover wij weten, deze klinisch relevante bevindingen nog gevalideerd in grote ervaringen van andere centra. De meeste van deze onderzoeken werd serologische analyse de enige methode om H. pylori-status te beoordelen, enkele van hen zelfs toegevoegde molecuul wijze van PCR; zodat de resultaten van deze onderzoeken zijn weinig overtuigend. In feite zijn er vele soorten werkwijzen verschaft voor het detecteren van H. pylori, inclusief cultuur, histopathologische diagnose, urease test molecule werkwijze serologische analyse en UBT, maar cultuur, Real-Time PCR en UBT een aanzienlijke gevoeligheid en specificiteit [23].
In de huidige studie, gebruikten we de methode van real-time PCR om H. pylori te detecteren status van infectie en de kopieën, en gericht op de mogelijke gevolgen van de H. pylori-status op het clinicopathologische mogelijkheden onderzoeken van maagkanker van de patiënten die een operatie ondergaan en werden gedurende een aanzienlijke periode van tijd om verschillen in recidief-vrije overleving en de totale overleving te beoordelen.
patiënten en methoden
patiënten
De onderzoekspopulatie bestond uit 157 opeenvolgende patiënten (107 mannen en 50 vrouwen) gepland voor een operatie van 1 januari 2002 tot 31 december 2006 bij Sun Yat-Sen University Cancer Center, Guangzhou, China. De mediane leeftijd van de patiënten was 57,2 jaar (uitersten: 27-78 y), Alle patiënten in deze studie had een histologisch bevestigde diagnose van de primaire maagkanker dat werd bevestigd pathologisch na de operatie. Patiënten die niet-chirurgische resectie ondergaan, en die met Siewert type I cardia adenocarcinoom werden uitgesloten van de studie, patiënten met H. pylori uitroeiing therapie of behandeling met antibiotica, bismut-bevattende verbindingen, H2-receptorblokkers of protonpompremmers binnen 4 weken ook waren uitgesloten van de studie. Chirurgie bestond uit subtotaal of totale gastrectomie bij alle patiënten. Een gestandaardiseerde werkwijze werd gebruikt voor chirurgische resectie en lymfadenectomie, zoals elders beschreven [3]. Leeftijd, geslacht, soort operatie, tumorlokalisatie, TNM, chemotherapie, specimen lengte, tumorgrootte en tumordifferentiatie, vermeld voor elke patiënt in een database. Tumor lengte en de breedte van verse monsters werden geregistreerd door de pathologen. pTNM indeling volgde de criteria van de 6de editie van de UICC [24]. Alle patiënten die enig type chemotherapie ondergaan waren op de 5-FU-gebaseerde regime en de basis regime was FOLFOX6 of XELOX. Alle Experimenteel onderzoek dat wordt gerapporteerd in het manuscript hebben geïnformeerde toestemming verkregen van de onderwerpen van de studie en is ethisch uitgevoerd met de goedkeuring van een comité passende ethiek in de Sun Yat-sen Universiteit van Cancer Center.
Tumor weefsel en non-neoplastische weefsel van alle patiënten werd vanuit het resectiepreparaat in de operatiekamer binnen 30 minuten na het verwijderen van de maag. Niet-neoplastisch weefsel werd verwijderd uit de normale gastrische weefsel op een afstand van minimaal 5 cm van de tumor. Wanneer neoplasma omvatte de gehele antrum, werd niet-neoplastische mucosa uit het midden of bovenste gedeelte van de maag. Monsters werden onmiddellijk ingevroren in vloeibare stikstof, verwerkt, gecodeerd en opgeslagen bij -80 ° C in een weefselbank in het laboratorium van de afdeling wetenschappelijk onderzoek.
DNA Extraction en real-time PCR voor H. pylori
zowel tumorweefsel en niet-neoplastisch weefsel verkregen van alle patiënten in de studie werd opgehaald uit de weefselbank. DNA werd uit 50 mg van vast weefsel (zowel tumor en niet-neoplasitic) geëxtraheerd met behulp van de QIAamp DNA ontlasting minikit (Qiagen). Om de opbrengst aan gezuiverde DNA verhogen, de gehele supernatant (500 pl) werd gebruikt voor verdere DNA-zuivering na de toevoeging van de tablet Inhibitex, aanpassing van de volgende stappen van de Qiagen protocol bij deze gewijzigde monsterhoeveelheid. Van H. pylori isolaten, werd DNA geëxtraheerd met behulp van de QIAamp DNA MINIKIT volgens het protocol voor isolatie van genomisch DNA uit bacteriële kweken (Qiagen).
GenBank werd gezocht naar sequenties van de genen die coderen voor 16S rRNA van H. pylori. De gepubliceerde sequenties werden uitgelijnd met behulp van CLUSTALW http:... //Www ebi ac uk /ClustalW /en primers en probes werden ontworpen met behulp van Primer Express-software (Perkin Elmer /Applied Biosystems, Foster City , Calif.) en de LightCycler probe design software (Roche Diagnostics, Mannheim, Duitsland). Een BLAST onderzoek werd uitgevoerd om de specificiteit van de DNA-sequenties van de primers en sondes http controleren:.. //Www NCBI NLM nih gov /BLAST /
De bepaling bevatte twee PCR... primers (Daan Gene Co, Ltd van Sun Yat-sen Universiteit, Guangzhou, China): primer1 F (5'-GCT AAG AGA TCA GCC TAT GTC -3) en primer2 R (5'-CCG TGT CTC AGT TCC AGT GT 3 '), ontworpen om een ​​118 basepaar fragment van het 16S rDNA amplificeren, samen met een probe, Tensensor (5'-LCRed705-GCA TGT TTA GGT ATT CGA AGA TAC ACphos- 3'), gemerkt met de fluorofoor LC Red 705 (Daan Gene Co, Ltd van Sun Yat-sen Universiteit, Guangzhou, China).
Elk Real-Time PCR werd uitgevoerd in een uiteindelijk volume van 50 pl met een buffer van 10 pi (10 mM Tris-HCl (pH 8,0), 50 mM KCl en 1,5 mM MgCl 2), 2 pi cDNA, 1 ul van elke primer (F 10 pmol /pl, R 10 pmol /ul), 1 pi van elke deoxynucleotide (10 mM), 1 ui Taq-polymerase (3U /pl) (Daan Gene Co, Ltd van Sun Yat-sen Universiteit, Guangzhou, China) en 1 pl probe (Daan Gene Co, Ltd van Sun Yat-sen Universiteit , Guangzhou, China). Elke reactie werd als volgt geamplificeerd: denaturatie bij 93 ° C gedurende 3 minuten gevolgd door 40 cycli van denaturatie bij 93 ° C gedurende 30 seconden; hybridisatie bij 55 ° C gedurende 45 seconden; en extensie bij 72 ° C gedurende 40 seconden. Amplificaties werden uitgevoerd met een ABI 7500 DNA motor (Applied Biosystems Inc, CA, USA). Gebruikte H. pylori standaard versterking curves van de standaard curve lineaire regressie grafiek te maken, en dan veranderd de Ct-waarden in het aantal H. pylori kopieën.
Follow-up Leer Alle patiënten na ontslag uit het ziekenhuis, ging een follow-up programma volgens standaard protocol [25]. Binnen de eerste 2 jaar na de operatie, een follow-up om de 3 maanden bestond uit een klinisch onderzoek, routine bloedonderzoek, de beoordeling van de concentratie van tumormarkers, en abdominale echografie of CT-scan; endoscopie werd elke 6 maanden uitgevoerd voor de eerste 2 jaar na de operatie. Voor de komende 3 jaar, werden de patiënten gevolgd om de 6 maanden en onderging endoscopie om de 12 maanden. Bij terugval (als lokaal recidief of metastase op afgelegen plaatsen) werden alle patiënten volledig opgevoerd ziekten detecteren andere sites. Overleving werd gemeten vanaf de datum van de tumor resectie tot de dood of tot de laatste dag van de patiënt bekend was om te leven. De follow-up werd gesloten in december 2008. De tussentijdse follow-up periode was 24,4 maanden (range, 0,2-81,8 maanden) Statistische analyse
.
Werden gevallen positief voor H. pylori geacht wanneer de 16S rRNA aanwezig was van realtime PCR product amplificatie ofwel tumorweefsel of de niet-neoplastisch weefsel en de gevallen werden gedefinieerd als positief voor H. pylori in normaal weefsel als het 16S rRNA aanwezig is op Real-Time PCR amplificatie product in niet-neoplastisch weefsel was . Alle patiënten werden verdeeld in twee groepen; Een groep van 82 patiënten bestond uit patiënten die voor H. pylori-infectie positief waren, groep B van 75 patiënten bestond uit patiënten met negatieve resultaten voor Real-Time PCR amplificatie product had. Voorts werd Groep A verdeeld in twee groepen op de mediaan (1338.5copies) kopieën aantal H. pylori, een groep HP infectie met hoog-kopieën (≥1338.5 kopienummer) van 41 gevallen, de andere groep van HP-infectie met lage -Kopieën (< 1338,5 aantal kopieën). van 41 gevallen
Statistische analyse werd uitgevoerd met behulp van SPSS-software voor Windows (versie 13.0, SPSS Inc, Chicago, IL). De associatie tussen H-pylori-infectie status en clinicopathologische functies werd vergeleken met behulp van Pearson Chi-square test (2 staart testen in elk). De onafhankelijke steekproeven Student t-test werd gebruikt voor vergelijking van leeftijd op het moment van de operatie. Recidief-vrije overleving werd berekend voor alle patiënten die niet hadden Lokale of recidief en overleving werd berekend voor patiënten die in leven waren, ongeacht de status van terugval. Langdurige overleving werd beoordeeld met behulp van de Kaplan-Meier-methode, gezien dood of terugval van kanker als eindpunt; patiënten die stierven aan andere dan tumorrecidief oorzaken werden beschouwd als gecensureerd op het moment van de dood. De log-rank test werd gebruikt voor statistische vergelijkingen tussen factoren. Variabelen onafhankelijk van invloed zijn prognose werden onderzocht door middel van multivariate analyse met behulp van Cox proportionele risico model. De score statistiek werd gebruikt om variabelen te selecteren voor de toegang tot het model. Een statistische niveau van P < 0.05 werd gebruikt voor het opnemen van voorspellende variabelen.
Resultaten
H. pylori, zoals bepaald door Real-Time PCR
kwantitatieve detectie van H. pylori uit 157 gevallen van patiënten met maagkanker, elk met tumor en niet-neoplastisch weefsel; een totaal van 314 exemplaren. 49 patiënten (31,2%) toonden positieve H. pylori in het tumorweefsel en 69 patiënten (43,9%) toonden positieve in de niet-neoplastisch weefsel (figuur 1). De gecombineerde positieve zowel tumor als niet-neoplastisch weefsel 36 patiënten (22,9%), terwijl 82 (52,2%) patiënten kunnen worden gedetecteerd met H. pylori één van de monsters. Het aantal H. pylori kopieën varieert van 2,51 × 10 2 ~ 1,45 × 10 8. Figuur 1 Detectie van H. pylori in de tumor en niet-neoplastisch weefsel (twee groepen vergelijking P = 0,003). Ondernemingen De associatie tussen Clinicopathologische Kenmerken en H. pylori Infectie Status
Tabel 1 toont de resultaten van een vergelijking van de klinische en pathologische kenmerken tussen de patiënten in groep a en groep B van de patiënten in groep a, neoplasmata vaker in het bovenste maag (37,8% vs. 18%) en een meer geavanceerde pN classificatie (N2 /N3) was waargenomen, terwijl een lagere pN classificatie (N0 /N1) werd gezien in groep B. voor de operatie, patiënten die negatief zijn voor H. pylori waren hadden hogere concentraties van carcino-antigeen (CEA) dan wel degenen die voor H. pylori-positief waren. Geen statistisch significante verschillen met betrekking tot geslacht, leeftijd, grootte van de tumor, tumor site, bruto type, de diepte van de tumor invasie, metastasen op afstand, UICC podium, CA 19-9 en de P53 genexpressie werden waargenomen tussen de twee groups.Table 1 Association Between Clinicopathologische Features en H. pylori Status
clinicopathologische Features
Groep A (positief)
(n = 82) (%)
groep B (Negative)
(n = 75) (%)
P waarde
Geslacht
0,287
Man
59 (72,0)
48 (64,0)
Vrouw
23 (38,0)
27 (36,0)
Age
0,128 Restaurant < 57,2 jaar
45 (54,9)
32 (42,7)
≥57.2 jaar
37 (45,1)
43 (57,8)
Tumor website
0.040
Upper
31 (37,8)
18 (24,0)
midden of Lower
51 (62,2)
57 (76,0)
tumorgrootte (gemiddelde ± SD)
5,64 ± 2,82
5.84 ± 2.99
0,671
Gross soort
0,816
Early GC I
1 (1.2)
1 (1.3)
Vroege GC III
10 (12.2)
7 (9.3)
Borrmann I
15 (18.3)
12 (16,0)
Borrmann II
37 (45,1)
32 (42,7)
Borrmann III
11 (13,4)
15 (20,0)
Borrmann IV
8 (9.8)
8 (10,7)
Histologische Onderscheid
0.236
Well
36 (43,9)
28 (37.3)
Slecht
35 (42,7)
31 (41,3)
Slijm /Signet-ring cel
11 (13,4)
16 (21.3)
diepte van tumorinvasie
0,749
T1
4 (4.9) Pagina 2 (2.7)
T2
9 (11,0)
9 (12,0)
T3
58 (70,7)
54 (72.0 )
T4
11 (13,4)
10 (13,3)
lymfe-node metastase
0.039
N0
30 (36,6)
16 (21.3)
N1
29 (35,4)
29 (38,7)
N2
14 (17,1)
19 (25,3)
N3
9 (11,0)
11 ( 14.7)
Distant uitzaaiingen
0,822
M0
71 (86,6)
64 (84,0)
M1
11 (13,4)
11 (16,0)
UICC stadium
0,124
I
10 (12.2)
6 (8,0)
II
20 (24,4)
13 (17,3)
III
32 (39.0)
32 (42,7)
IV
20 (24,4)
24 (32,0)
chirurgie
0,943
Curatieve
65 (79,8)
62 (85,3)
palliatieve
17 (20,7)
11 (14,7)
tumormarker
CEA
0,026 Restaurant < 5 ug /l
64 (11.0 )
51 (68,0)
≥5 ug /L
9 (78,0)
19 (25,3)
CA 19-9
0,346 Restaurant < 30 ug /l
44 (53,7)
44 (58,7)
≥30 ug /L
12 (14,6)
18 (24,0)
P53
0,827
positieve
9 ( 11.0)
8 (10,7)
negatief
40 (48,8)
40 (53,3)
De associatie tussen clinicopathologische kenmerken en H. pylori Kopieën
De drie klinische en pathologische kenmerken boven die genoemd werden geassocieerd met de H. pylori besmettingsstatus werden geanalyseerd om te zien of ze geassocieerd met de H. pylori kopieën. In tabel 2 wordt een vergelijking van de klinische en pathologische kenmerken tussen de patiënten in groep 1, met high-kopieën H. pylori en groep 2 met een lage-kopieën H. pylori is reported.Table 2 De vereniging tussen Clinicopathologische Kenmerken en H. pylori Kopieën

H. pylori high-titer
(41cases,%)
H. pylori lage titer
(41cases,%)
P waarde
Tumor website
0,013
Upper
21 (51,2)
10 (24,4)
Midden of Lower
20 (48,8)
31 (75,6)
lymfe-node metastase
0,014
N0
20 (48,8)
10 (24,4)
N1
13 (31,7)
16 (39,0)
N2
6 (14,6)
8 (19,5)
N3 Pagina 2 (4.9)
7 (17,1)
CEA
0,269 Restaurant < 5 ug /l
34 (82,9)
30 (73,2)
≥ 5 ug /l
3 (7.3)
6 (14,6)
van de patiënten in de groep met hoge kopieën H. pylori, neoplasmata vaker in het bovenste maag (51,2% vs. 18%) en een onderste pN classificatie (N0 /N1) werd waargenomen terwijl een meer geavanceerde pN classificatie (N0 /N1) werd gezien in de groep met een lage-kopieën H. pylori. Echter werd geen statistisch significant verschil waargenomen in de concentratie van CEA tussen beide groepen (Tabel 2).
H. pylori infectie en overleving
De mogelijke invloed van H. pylori status op het lange-termijn overleving van patiënten werd onderzocht door middel van univariate en multivariate analyse. Totale overleving analyse werd uitgevoerd bij 157 patiënten die een operatie ondergingen. Aan het einde van de follow-up, 75 patiënten waren nog in leven, 82 patiënten was overleden van de tumor, en 1 patiënt was overleden aan andere oorzaken; de kanker-gerelateerde 5-jaars overleving in de gehele serie was 48,4%.
univariate analyses toonden een verband tussen de totale overleving en histologische differentiëren chirurgie, UICC stadium en concentratie van CA-199 (gegevens niet getoond). Echter kunnen dergelijke vereniging gevonden tussen H. pylori infectiestatus en algehele overleving (p = 0,715) (Figuur 2). In multivariate analyse, histologische differentiëren, chirurgie en UICC stadium waren onafhankelijke prognostische factoren voor de totale overleving. Concentratie van CA-199 was niet significant geassocieerd met overleving in multivariate analyse (gegevens niet getoond). Het effect van H. pylori status prognose werd waargenomen in alle subgroepen aan de UICC stadium onderzocht; het verschil was niet statistisch significant gevonden te zijn (gegevens niet getoond), Bovendien is het effect van H. pylori status prognose werden bij alle subgroepen aanzien van de verschillende tumorplaatsen, was het verschil niet gevonden statistisch significant ( extra bestanden 1 en 2). Nadere analyse van de patiënten die positief waren voor H. pylori werden uitgevoerd; Kaplan Meier analyse toonde dat de totale overleving bij patiënten met hoge exemplaren H. pylori infectie beter dan bij patiënten met lage exemplaren, maar het verschil was niet statistisch significant (p = 0. 068) (figuur 3.) De associatie tussen H. pylori kopieën en prognose werden alle subgroepen aanzien van de verschillende tumorplaatsen geëvalueerd Er is geen statistisch significantie (Extra bestanden 3 en 4). Figuur 2 associatie tussen de totale overleving en H. pylori-infectie status van 157 patiënten met maagkanker (p = 0,715).
Figuur 3 Associatie tussen de totale overleving en het aantal kopieën H. pylori bij patiënten die voor H. pylori-positief waren (P = 0. 068).
Relapse-overleving analyse werd uitgevoerd bij 129 patiënten die een R0 resectie ondergingen. Aan het einde van de follow-up, 73 patiënten waren nog in leven, 56 patiënten was overleden terugkeer van de tumor of verre metastase. De potentiële impact van H. pylori-status op het recidief-vrije overleving van de patiënten werd onderzocht door middel van univariate en multivariate analyse.
Univariate analyses toonden een verband tussen recidief-vrije overleving en histologische differentiëren tumor, diepte van tumorinvasie (pT stadium), lymfe-node metastase (pN fase). Echter kunnen dergelijke vereniging gevonden tussen H. pylori infectiestatus (p = 0,639) (figuur 4), het aantal exemplaren H. pylori, Helicobacter pylori infectie in het weefsel en terugval overleving non-neoplastische. In multivariate analyse, histologische differentiëren, tumor, diepte van tumorinvasie (pT stadium), lymfe-node metastase (PN stadium) waren onafhankelijke prognostische factoren voor recidief-vrije overleving. Het effect van H. pylori status prognose werd volgens de UICC fase onderzocht waargenomen in alle subgroepen, was het verschil niet gevonden statistisch significant te zijn (gegevens niet getoond). Gegevens voor totale overleving van de patiënten die R0 resectie waren vrijwel gelijk aan die van recidief-vrije overleving. Histologische differentiëren tumor, diepte van tumorinvasie (pT stadium), lymfe-metastase (pN stadium) waren onafhankelijke prognostische factoren voor overleving (gegevens niet getoond). Figuur 4 associatie tussen recidief overleving en H. pylori infectie van 129 patiënten die curatieve geopereerd (p = 0,639). Bespreking

Onder de talrijke werkwijzen die hierboven zijn beschreven, de meest veelbelovende voor de toekomst is de toepassing van Real-time PCR [26]. De nieuwe real-time PCR-techniek is een doorbraak in de diagnose van H. pylori omdat hierdoor niet alleen een snelle en nauwkeurige detectie van H. pylori maar ook de kwantificering [23]. Bij de werkwijze van real-time PCR, er vele genen te selecteren voor amplificatie, en de primerpaar 16S rRNA en 23S rRNA vertoonden een hoge specificiteit en gevoeligheid [27]. In de huidige studie, we kozen voor de 16S rRNA voor amplificatie van real-time PCR; . De resultaten toonden aan dat 52,2% van de 157 maagkanker positief voor H. pylori-infectie, die de resultaten van andere studies volgens dezelfde methode [28] benaderde waren Ondernemingen De belangrijkste bevindingen van deze studie waren: 1) H. pylori infectie groter in niet-neoplastisch weefsel dan in tumorweefsel; 2) H. pylori infectie gerelateerd aan de tumorplaats, N opvoeren, alsmede het niveau van CEA; Bovendien tumor staging en N betrof de H. pylori exemplaren nummer. In Highly-geïnfecteerde patiënten, de N-staging had een eerder stadium (N0 /N1) en tumor sites in bovenbuik werden gevonden, terwijl de CEA niveau los van de H. pylori kopieën nummer was; en 3) de overleving en recidief overleving bij patiënten met H. pylori positieve toestand had geen significant verschil met de patiënten met een negatieve H. pylori-status; en in H. pylori-positieve patiënten, prognose was beter in die met hoge kopieën aantal H. pylori dan bij mensen met lagere exemplaren nummer, maar het resultaat was geen significant statistisch verschil.
We namen een hogere frequentie van besmetting met H .Pylori in niet-neoplastisch weefsel dan in het tumorweefsel van de patiënt met maagkanker. De mogelijke verklaring is dat 1) wanneer een tumor in de plaats waar de H. pylori leefden ontstaan, zou de tumor de micro-omgeving die niet geschikt zou veranderen de H. pylori te overleven in een more.2) Sommige geleerden [ ,,,0],29] wees erop dat de H. pylori worden opgeslokt door de neutrofiele granulocyten, die overvloedig in het neoplastische weefsel. De gastheer immuunrespons tegen de tumor verhoogt de inductie van apoptose door de bacteriën. Ondernemingen De klinische en pathologische kenmerken van H. pylori-positieve patiënten werden vergeleken met die van de groep patiënten met negatieve H. pylori-status. Statistische analyse toonde aan dat bovenbuik locatie was vaker voor bij H. pylori-positieve patiënten; bij de patiënten die voor H. pylori-positief waren, de exemplaren van H. pylori in bovenbuik locatie waren hoger dan in het midden of onderbuik. In het algemeen, de maag, met name de maag pylorus is de meest geschikte plaats voor H. pylori te groeien. Diagnose en hoeveelheid H. pylori-infectie werd uitgevoerd met niet-neoplastisch weefsel op een afstand van minimaal 5 cm van tumor. Daarom monsternemingsplaatsen verschilden volgens tumor, bijvoorbeeld, kan de bovenste maagkanker niet-neoplastisch weefsel monster uit het midden of onderbuik, en het middelste of onderste maagkanker kan genieten van het bovendeel. Verder kan een punt van monsterneming antrum en corpus leiden sampling error van H. pylori diagnose en beoordeling van H. pylori hoeveelheid, dus we denken dat dit resultaat niet concluderen dat H. pylori-infectie gerelateerd aan de tumorplaats.
We vonden ook een hoger percentage van meer geavanceerde pN stadium in H. pylori-negatieve patiënten; bovendien werd pN staging verband met de H. pylori exemplaren nummer. In de hoge-kopieën patiënten, N staging heeft eerder (N0 /N1). Theoretisch, tumorinvasie en metastase geassocieerd met de matrix metalloproteinases (MMPs) afgescheiden door de maag kankercel, die extracellulaire matrix kan worden afgebroken, veranderen de structuur van vasculaire basale membraan en bevorderen kankercel invasie en metastase [30, 31]. MMP-2 is een van de belangrijkste MMP's in het proces van tumorinvasie en metastase. Monig et al. [32] gemeld dat MMP-2 expressie sterk gecorreleerd met verloop van lymfeknoop metastase van maagkanker. Zodra de H. pylori maag besmet, kan de afscheiding van MMP-1, MMP-2, MMP-3 en TIMP-3 stimuleren van maagkanker cellen [33], en tenslotte prompt en versnelling van de voortgang invasie en metastase van maagkanker. De huidige studie toonde een tegenovergestelde conclusie daarom aangeraden dat de H. pylori infectie een positieve factor lymfe-metastase.
Gegevens uit deze studie aan dat H. pylori-infectie gerelateerd aan het niveau van CEA in de gastheer serum. Voor zover wij weten, is de eerste keer dat een dergelijke invloed van deze factor verslag uit over het niveau van CEA. Patiënten met een positieve H. pylori-status had een laag niveau vergeleken met degenen die negatief waren, maar het niveau van CEA was geen verband met de H. pylori kopieën nummer; een mogelijke verklaring was autoimmuun responsen geïnduceerd door H. pylori remde de groei van kankercellen [34], en uiteindelijk verminderde het niveau van CEA in het serum gastheer.
dateert uit 1995, studies uit Taiwan [35, 36], voor zover wij weten, is de eerste die de relatie tussen H. pylori infectie status en de resultaten van de patiënten met maagkanker bericht, multivariate analyse toonde aan dat alleen TNM was de onafhankelijke prognostische factor; De definitie van H. pylori status werd uitgevoerd door serologie, het aantal patiënten was klein en follow-up was vrij kort. In 2006, een prospectieve studie die H. pylori-status als een onafhankelijke prognostische factor [21]. Cultuur onderzoek, histologische analyse en serologische assay werd uitgevoerd om H. pylori-status te definiëren. De betere prognose waargenomen bij patiënten die H. pylori infectie toegelicht aan de hand van een verbeterde immuunrespons tegen de tumor [21]. Ook is verondersteld dat omdat pylori componenten nabootsen specifieke receptoren of oppervlakte moleculen op maagepitheelcellen kan auto-antilichamen een kruisreactie tegen maagkanker cellen [34] induceren. Toch hebben verschillende auteurs twijfels geuit over de werkelijke voorspellende waarde van H. pylori status suggereert dat H. pylori negativiteit eenvoudig kan worden bij meer geavanceerde tumorprogressie [37, 38]. Een recente studie in Italië [22] blijkt dat patiënten met negatieve H. pylori-status bleek een slechte prognose, maar de werkwijzen van deze studie is twijfelachtig, aangezien gebruikte combinatiemethoden PCR voor Vaca en serologische analyse om de status te definiëren van H. pylori-infectie. Theoretisch kan PCR slechts één kopie van het doelwit DNA te detecteren wanneer getest in water, maar de meeste studies hebben aangetoond dat standaard PCR gevoeligheid en werkzaamheid niet zo exact [23, 39] en de serologische analyse niet onderscheiden of de patiënt een huidige infectie of een infectie van het verleden [23, 40]; beide methoden draagt ​​gedeeltelijk op een vals negatief.
Wij hebben aangetoond dat de UICC fase histologische differentiëren en chirurgie zijn de onafhankelijke prognostische factoren op de overleving van de patiënten met maagkanker, en de tumorplaats, histologische differentiëren diepte van tumorinvasie, lymfe-node metastase waren de onafhankelijke prognostische factoren van de recidief-vrije overleving voor de patiënten die een curatieve operatie ondergaan. De H. pylori besmettingsstatus geen onafhankelijke prognostische factor aangezien er geen verschil in de overleving van deze patiënten met of zonder H. pylori, maar verdere analyse van H. pylori-positieve patiënten openbaarde dat de prognose van patiënten met hoge kopie aantal H. pylori was beter dan die met lage exemplaren nummer, maar het resultaat was geen significant statistisch verschil.
in vaccinatie-experimenten [41] met cholera toxoïd mensenhandel, H. pylori-infectie fungeert als een adjuvans voor de inductie een lokale B-celrespons in maagslijmvlies.

• P01.11. Amalaki Rasayana, een Ayurvedische voorbereiding: om het effect tegen experimentele maagzweren in albino rats
• Functionele aanpassingen in verband met maag-darmkanaal organogenese tijdens de metamorfose in Atlantische heilbot (Hippoglossus hippoglossus)