Лечебные эффекты Musa sapientum вар. paradisiaca у больных сахарным диабетом крыс с сопутствующими язвенной болезни желудка: цитокинов и фактора роста с помощью ПЦР-амплификации

Лечебные эффекты Musa sapientum
вар. paradisiaca
у больных сахарным диабетом крыс с сопутствующими язвенной болезни желудка: цитокинов и фактора роста с помощью ПЦР-амплификации
Аннотация
Справочная информация
Настоящее исследование оценивает влияние экстракта Мусы sapientum
фруктов (MSE) на индекс язвенного, уровень глюкозы в крови и слизистой оболочки желудка цитокинов, TNF-a и IL-1 и фактора роста, TGF-альфа (подверженной при диабете и хронических язв) в уксусной кислоте (AA) индуцированную язву желудка (GU) у больных сахарным диабетом ( ДР) крысы.
Методы
МФБ (100 мг /кг, перорально), омепразол (Объединенные машиностроительные заводы, 2,0 мг /кг, перорально), инсулин (INS, 4 ед /кг, подкожно) или pentoxyphylline (PTX, 10 мг /кг, перорально) давали один раз в день в течение 10 дней в течение 14 дней после стрептозотоцин (60 мг /кг, внутрибрюшинно) индуцированный диабетических крыс в то время как нормальные крысы /диабетические получили КМЦ за тот же период после индукции GU с АА , Индекс Язва был рассчитан на основе произведение длины и ширины (мм 2 /крыса) язв в то время, TNF-α, IL-1β и TGF-α были оценены в слизистой желудка гомогената с неповрежденной области /язвы. Фитохимическое скрининг и анализ ВЭТСХ из MSE было сделано в соответствии со стандартными процедурами.
Результаты
Увеличению индекса язвенной болезни, TNF-alpha и IL-1 наблюдалось в нормальном (NR) -аа крыс по сравнению с NR-физиологическом крысы , которые были дополнительно увеличена в DR-АА крыс некоторое время, лечения DR-AA крыс с MSE, ОМЗ, INS и PTX отменил их, тем более с MSE и PTX. Значительное увеличение TGF-alpha была обнаружена в NR-АА крысы, которые не увеличивало далее в DR-AA крысы. MSE и PTX имеет тенденцию к увеличению времени, и INS ОМЗ показали мало или вообще не оказывает влияния на TGF-alpha в AA-DR крыс. Фитохимический скрининг MSE показал наличие сапонины, флавоноиды, гликозиды, стероиды и алкалоиды и анализа ВЭТСХ показала наличие восьми активных соединений.
Заключение
MSE показал противодиабетическое и лучше заживление язвы эффекты по сравнению с Объединенные машиностроительные заводы (противоязвенных) или INS (антидиабетическое) при диабетической крыс и может быть более эффективным при диабете с одновременным язве желудка.
Ключевые слова
Musa sapientum
диабет язва исцеление TNF-α IL-1β TGF-α фона
обширные исследования в отношении анти-ульцерогенных и заживления язвы деятельность подорожника банана были проведены в нашей лаборатории в течение последних 30 лет. Анти-ульцерогенное активность сухого порошка подорожника банана мякоти плодов (Муса sapientum
вар. Paradisiaca
, MS) против различных экспериментальных Гастродуоденальный были зарегистрированы в нашей лаборатории и в других местах. Язва защитные эффекты подорожника банана сообщалось в связи с увеличением в оборонительных факторов а именно. увеличение секреции муцина, слизистых оболочек, гликопротеинов, накопление простагландинов Е и I <югу> 2, продолжительность жизни и клеточную пролиферацию, а не влияет на секрецию наступательный кислотно-пепсина [1-6]. Недавно мы сообщали о язву защитной, подорожник банановые усиливающие антиоксиданты, супероксиддисмутазы (СОД), каталаза (CAT) и глутатионпероксидазы (GSH) и уменьшая свободные радикалы, перекисное окисление липидов (ПОЛ) и оксида азота (NO) уровней в слизистой желудка гомогенатах без каких-либо анти-Н. Pylori
активности в пробирке
[7]. Некоторые сообщения свидетельствуют о том, что сахарный диабет (СД) повышает чувствительность слизистых оболочек к ульцерогенных стимулами и предрасположенности к язвой желудка и нарушением заживления [8, 9]. Наша сообщалось ранее работа по стрептозотоцин-индуцированное диабетом с сопутствующими язвой желудка сделал указывают на причастность как секреции наступательной кислотно-пепсина и генерирование свободных радикалов и защитных факторов, как секреции слизи, слизистых оболочек гликопротеинов, продолжительность жизни клеток слизистой оболочки и антиоксидантного статуса желудка слизистая, которые увеличиваются и уменьшаются соответственно [10, 11].
провоспалительных цитокинов, как фактор некроза опухоли альфа (TNF-alpha), интерлейкин-1β (IL-1), интерлейкин-6 (ИЛ-6) и факторы роста, включая инсулин подобный фактор роста-1 (IGF-1) играют важную роль в патогенезе хронических заболеваний, таких как аутоиммунный диабет и язв желудка [12, 13]. Факторы роста, такие как сосудистый эндотелиальный фактор роста (VEGF), основной фактор роста фибробластов, трансформирующий фактор роста-альфа (TGF-α), оказывают существенную роль в процессах тканевых исцеления, язвы желудка, включая [9, 14]. Недавно мы сообщали о целебным действием спиртового экстракта высушенной мякоти плодов МС (MSE) на уксусной кислоте, индуцированной язвенной болезни желудка в нормальном (NR) крысы и обнаружили, роль цитокинов, TNF-альфа, IL-1 и фактора роста, TGF -α в лечении язвенной болезни [15].
гипогликемической активностью сообщалось из зеленых плодов подорожника банана. Кроме того, leucocyanidin, флавоноид, был выделен из подорожника банана и его диметокси производное, leucocyanidin 3-O-бета-D-галактозил целлобиозида, продемонстрировали гипогликемический эффект в экспериментальных животных [16, 17]. Таким образом, данное исследование было расширено, чтобы оценить целебные эффекты MSE (испытание лекарственного средства) в уксусной кислоте-индуцированной язвенной болезни желудка у больных сахарным диабетом (DR-AA) крысы и его влияние на TNF-alpha, IL-1 и TGF-альфа. Эффекты MSE на язву желудка, ФНО-α, ИЛ-1β и TGF-α, сравнивались с противоязвенных препаратов, омепразол (Объединенные машиностроительные заводы, ингибитор протонного насоса) и pentoxyphylline (PTX, ингибитора TNF-alpha <югу>, видный маркера воспаления) и гипогликемической наркотическими средствами, инсулином (положительные контроли) и CMC-обработке (отрицательный контроль) в DR-AA крыс.
методов
Животные
инбредных Чарльз Фостер-крыс-альбиносов (200-250 г ) любого пола были получены из центрального вивария Института медицинских наук, бенаресскими индуистском университете, Варанаси. Они находились в ведомственном доме животных при 26 ± 2 ° С и относительной влажности воздуха 44-56%, светлых и темных циклов 10 и 14 часов соответственно в течение 1 недели до и во время экспериментов. Животные были обеспечены стандартным грызун гранул диеты (Pashu Aahar, Рамнагар). Еда была отозвана в течение 18-24 часов до начала эксперимента, хотя вода разрешили вволю
. Животные были разделены на семь групп, содержащих 6 животных в каждой. Первые две группы имели нормальных крыс в то время как 3 й по седьмой группах имели диабетических крыс. Язвы желудка были произведены с помощью уксусной кислоты во всех группах, за исключением 1 й группы (NR + NS), где NS наносили на стенки желудка вместо уксусной кислоты. 1 й 3 й группы получали СМС в устной форме в то время как 4 го по 7 й группы получали спиртового экстракта мякоти плодов Мусы sapientum
(MSE), омепразола (ОМЗ), инсулин (ИНС) и pentoxyphylline (PTX) в течение 10 дней, соответственно, после индукции GU с помощью уксусной кислоты. «Принципы лабораторной ухода за животными» (NIH публикации нет. 82-23, пересмотренная 1985) руководящие принципы были соблюдены. Утверждение от Комитета по этике Institutional животных было принято до экспериментальной работы (Dean 542/02 /AB /CPCSEA от 23.8.2002).
Сбор и подготовка экстракта
Большой размер, недозрелые, зеленые плоды подорожника банан ( Муса sapientum Linn
. вар. paradisiaca,
MS), собранных в течение ноября месяца были получены от местного рынка и определены профессором В.К. Джоши, факультет Dravyaguna, факультет Аюрведе, IMS, BHU. Пробу образец (MS-09/231) был сохранен в Департаменте Dravyaguna, IMS, BHU, Варанаси. Кожа плода отрывалась, и массу нарезают на мелкие кусочки и сушат при комнатной температуре. После того, как штора сушки порошка целлюлозы получали из маленьких кусочков и использовали для экстракции. Спиртового экстракта (МФБ) получали путем добавления 1 л этанола дважды, с интервалом в два дня. Этанол, содержащий экстракт, полученный таким образом каждый раз, когда смешивали, а затем сушат в вакуумной сушилке. МФБ хранили при -20 ° С до дальнейшего использования. Выход экстракта составил 1,6% (вес /вес).
Фитохимическое исследование
Химические компоненты, такие как сапонины, flovonoids, гликозиды, стероиды и алкалоиды оценивались в МФБ, следуя стандартным методикам [18].
ВЭТСХ палец печати оценка
MSE была подвергнута ВЭТСХ (КАМАГ ТСХ система) анализа отпечаткам пальцев. Экстракты были разбавлены, чтобы получить концентрацию 1 мкг /мкл и наносили на предварительно силикагеля с покрытием G60 F 254 пластин (10х10, толщиной 2 мм, Е. Merck) с использованием LINOMAT IV корректировщик. Затем планшет разработан в CAMAG плоской нижней камере в условиях частичного или полного насыщения атмосферы резервуара с парами растворителя. Система растворителя использовали хлороформ: метанол: муравьиная кислота (9: 1: 0,5). Планшет осторожно сушат и опрыскивают анисовый альдегид-серной кислоты с последующим нагреванием при 110 ° С в течение 5-10 мин. Обнаружение пятен было сделано с помощью ртутной лампой при 254 нм и изображения были записаны с помощью КАМАГ Reprostar 3. Планшет отсканированный с помощью сканера TLC КАМАГ 3 с программным обеспечением оценки WinCATS.
Лекарственные средства и химические вещества
стрептозотоциновой (St . Луис, штат Миссури, США), омепразола (Cipla, Мумбаи, Индия) и pentoxyphylline (Abbott, Бангалор, Индия) были использованы в данном исследовании.
Индукционная сахарного диабета
Диабет индуцировали у взрослых крыс (200- 250 г) с помощью одной внутрибрюшинной инъекции стрептозотоцина (STZ, 60 мг /кг), растворенный в цитратном буфере (рН 4,5) и подается обычно после этого [19] в то время как у контрольных крыс получали только цитратный буфер. Пробы крови брали из ретро-орбитального сплетении крыс и сыворотку отделяли центрифугированием при 3000 оборотах в минуту в течение 3 минут. Уровни глюкозы в крови были оценены в unhemolysed сыворотке крови методом Глюкозооксидаза-пероксидаза (GOD-POD) с использованием диагностического набора глюкозы (Ranbaxy Laboratories Ltd, Индия). Уровень глюкозы в крови (BGL) оценивали через 48 часов и через две недели введения стрептозотоцин и крыс, показывающих BGL выше 250 мг /дл при нерастягивающих условиях голодания, были отобраны для исследования желудка язвы. изменения Вес тела наблюдались до этого (0 день), после того, как 14 дней после диабетиков или нормальных крыс и на 10 й день АА-индуцированное GU после обработки CMC /MSE /ОМЗ /INS /PTX (24 й день) в нормальных и диабетических крыс.
Уксусная кислотосвязущие индуцированных язва желудка у больных сахарным диабетом крыс и протокол лечения
диабетических крыс анестезировали пентабарбитоном (35 мг /кг, внутрибрюшинно). Живот разрезали с разрезом и в желудок визуализированы. Цилиндрическая стеклянная трубка 6 мм в диаметре был плотно прижат на передней поверхности серозной железистой части желудка 1 см от привратника конца. 100% -ной уксусной кислоты (0,06 мл /животное) закапывали в трубку и оставляли на 60 секунд на стенки желудка. После удаления раствора кислоты брюшную полость была закрыта в два слоя и животных в клетке, и кормили нормально. СКО (100 мг /кг, перорально), Объединенные машиностроительные заводы (2,0 мг /кг, перорально), ИНС (4U /кг, подкожно) и PTX (10 мг /кг, перорально) вводили один раз в день, в первую дозу вводят через 4 часа после того, как применение уксусной кислоты на 1-й день, а затем продолжил до 10 дней. Животные были поставлены на быстро в течение 24 часов после последней дозы исследуемого лекарственного средства на 10 й день и умерщвляли с помощью эвтаназии на 11 й день эксперимента для оценки желудка размер язвы и исцеление. Индекс Язва был рассчитан на основе произведение длины и ширины (мм 2 /крыса) язв [20].
TNF-alpha, IL-1 и TGF-альфа оценкам
TNF-alpha, IL -1β и TGF-α были оценены в неповрежденной слизистой оболочки желудка и слизистой оболочки желудка от диабетических крыс, подвергавшихся воздействию уксусной кислоты с или без различных медикаментозного лечения. Слизистая из железистой части желудка соскребают с изъязвленной /интактной области с использованием стерильных стеклянных слайдов и хранили при -80 ° С до анализа. Суммарную РНК экстрагировали из образцов слизистая методом Chomczynski и Sacchi (1987) [21] с использованием набора для экстракции из Бангалора Genei, Индия. Выделение РНК подвергали количественному анализу и 5 мкг общей РНК использовали для получения кДНК. Смесь ПЦР-амплифицировали в амплификатор ДНК с техническими условиями, описанными в материалах и методах. Таким образом, β-актина, IL-1β, TNF-α и TGF-α были оценены. Результаты были выражены как отношение коэффициента цитокины /роста к бета-актина в различных группах лечения.
Полной изоляции РНК из слизистой оболочки желудка
Приблизительно 100 мг через слизистую оболочку желудка слом из железистой области (участок язвы область) рядом с изъязвленной области было принято в DEPC обрабатывают трубу и гомогенизируют с 1 мл денатурирующих раствора. Для этого 1 мл воды, насыщенного фенолом, затем 200 мкл хлороформа и изоамилового - спиртовую смесь (свежеприготовленный в соотношении 49: 1) был добавлен и тщательно перемешивают. Смесь инкубировали на льду в течение 15 минут и центрифугировали при 10000 оборотах в минуту в течение 20 минут при температуре 4 ° С. Верхний слой осторожно удаляют в другой DEPC обработанной трубы и добавляют 1 мл 100% -ного раствора изопропанола и выдерживают при -20 ° С в течение 30 минут, чтобы осадить РНК. Снова смесь центрифугируют при 10000 оборотах в минуту в течение 20 минут при 4 ° С и супернатант отбрасывали. Осадок ресуспендировали в 0,3 мл денатурирующих раствора и осаждают добавлением равного количества 100% изопропилового спирта. Эту смесь выдерживали при -20 ° С в течение 30 мин и центрифугировали при 10000 оборотах в минуту в течение 20 минут при температуре 4 ° С. Супернатант отбрасывали, а осадок промывали 75% этанолом, чтобы удалить любые остаточные количества гуанидина в течение 15 минут. Опять же содержание центрифугировали в течение 20 мин при температуре 4 ° С при 10000 оборотах в минуту. Супернатант отбрасывали, а осадок, содержащий РНК растворяли в 100 - 200 мкл DEPC очищенной воды, и инкубировали при 55 ° С в течение 10-15 минут. Эта тотальную РНК хранили при -70 ° С до дальнейшего использования. Общую РНК количественно, принимая оптическую плотность при длине волны 260 нм (а <суб> 260) и с использованием следующей формулы Iе концентрацию образца РНК = 40 × A <суб> 260 фактор × разбавление т.е. поглощению 1 единицы при A <к югу от> 260 соответствует 40 мкг РНК на мл (Это соотношение справедливо только для измерений в воде).
первой цепи синтеза кДНК
5 мкг общей РНК была взята из каждого образца в стерильной РНК свободный (DEPC лечение) трубки и стерильную воду добавляют, чтобы компенсировать конечного объема до 9 мкл. Для этого 1 мкл олиго (дТ) Добавили <суб> 18 праймера и помещают при температуре 65 ° С в течение 10 минут, а затем при комнатной температуре в течение 2-х минут. Для этого 1 мкл РНК-ингибитора,, добавляли 1 мкл 0,1 М ДТТ 4 мкл буфера RT (5х), 2,0 мкл 30 мМ дНТФ смеси, 0,5 мкл обратной транскриптазы и 1 мкл стерильной воды и хорошо перемешивают. Смесь выдерживали при 42 ° С в течение 1 ч, и инкубировали при 95 ° С в течение 2 минут и выдерживали во льду быстро. Этот кДНК продукт может быть использован непосредственно для ПЦР-амплификации или иным образом хранить при -20 ° C для дальнейшего использования.
Полимеразной цепной реакции (ПЦР) амплификации
Результирующий кДНК (2 мкл) амплифицировали в объеме реакционной смеси 50 мкл содержащей 2 ед Taq-полимеразы, дНТФ по 1 мкл (30 мМ), 5 мкл 10 × буфер для ПЦР и специфических праймеров (вперед и назад), были использованы при конечной концентрации 1 мМ. Полимеразная цепная реакция смесь амплифицировали в амплификатор ДНК (MJ Research) и инкубирование и термических условий езды на велосипеде были как следует: денатурация при 94 ° С в течение 2 минут, отжиг при 60, 66 и 62 ° С в течение бета актина, TGF - α, ИЛ - β и TNF - α, соответственно, и удлинение при 72 ° С в течение 50 секунд и окончательное удлинение в течение 2-х минут. Число циклов равно 30 для всех реакций. Нуклеотидную последовательность этих праймеров были как следует: β актин, толку 5'-TTG ТАА CCA ACT GGG ACG ATA TGG - 3 '; антисмысловая 3 '- GAT GAT CTT GGT GCT AGG - 5' (764 пар оснований); TGF - α чувство 5 '- ATG GTC CCC GCG GCC GGA CA- 3'; антисмысловая 3 '- GAC CAC TGT CTC AGA GTG GCA GCA AGG CAG TCC TTC ТТТ - 5' (476 пар оснований); IL - 1β чувство 5'- GCT ACC TAT GTC TTG CCC GT-3 '; антисмысловая 3 '- GAC CAT ТГК TGT TTC СТА GG - 5' (543 пар оснований); ФНО - α смысл 5 '- TAC TGA ACT TCG GGG TGA TTG GTC C - 3'; антисмысловая 3 '- CAG CCT TGT CCC AGA TTG AAG ACC - 5' (295 б.п.). Праймеры были выбраны на основе последовательностей, опубликованных в предыдущем исследовании [9] были синтезированы на Бангалор Genei, Бангалор, Индия.
Полимеразной цепной реакции продукты были обнаружены с помощью электрофореза в агарозном геле, содержащем 1,5% бромид этидия. Расположение предсказанного продукта подтверждена с использованием 300 пар оснований ДНК-трап (Бангалор Genei, Индия) в качестве стандартного размера маркера. Затем гель сфотографированы под УФ-просвечивания. Плотность продуктов ПЦР измеряли с помощью программного обеспечения альфа-Imager. Сигнал для продуктов ПЦР были стандартизированы в отношении, что из -актина мРНК из каждого образца, и результаты выражали в виде /β соотношение мРНК актина ПЦР-продукта.
Статистический анализ
тест неспаренных Student't 'был использован для статистического сравнения между двумя группами. Сравнения с участием более двух групп были проведены с использованием одного дисперсионного анализа (ANOVA) и для множественных сравнений по сравнению с контрольной группой было сделано с помощью теста Даннетта.

Результаты исследования Фитохимическое
Предварительное фитохимическому скрининг MSE показал наличие сапонинов, flovonoids, гликозиды, стероидов и алкалоидов путем химического тестирования. Палец печать Высокопроизводительные тонкослойной хроматографии (ВЭТСХ) хроматограммы показали наличие по крайней мере, восемь активных соединений (рисунок 1). Анализ фактора удерживания и цвета устраненных полос при длине волны 254 нм при R <югу> ф 0,71 в MSE может быть флавоноид, leucocyanidin, как ранее сообщал Прабха и окружающих [17], где они показали аналогичный результат с метанольным экстрактом Муса sapientum
фруктов. Рисунок 1 Палец печать ВЭТСХ хроматограмме MSE.
исследовании уровня глюкозы в крови
Нормальный (NR) + NS (98,7 ± 6,0 мг /дл) и NR + AA (106,3 ± 5,8 мг /дл) у крыс показали мало или вообще никаких изменений уровня глюкозы в крови (BGL). Зависимый от дозы анти-гипергликемии исследование было проведено с 50, 100 и 200 мг /кг MSE вводили в течение 10 дней, чтобы у диабетических крыс и уменьшение 11,0, 17,0 и 19,9% (Р
&л; 0,3 до P
&л; 0,1, N = 6) в BGL наблюдалось (BGL- 297,6 ± 21,2 мг /дл). СКО (100 мг /кг) имел тенденцию к снижению (17,0% меньше, P
&лт; 0,1), но СИН снижало BGL (61,4% снижение, P
&лт; 0,05) в то время как, и Объединенные машиностроительные заводы PTX показали мало или нет изменить в BGL по сравнению с группой DR + AA. Тем не менее, доза 100 мг /кг был отобран для дальнейшего исследования, как эта доза была ранее оказалась эффективной в лечении уксусной кислоты индуцированных язва желудка у нормальных крыс 15.
Изменения Вес тела
среднее ± SE тела веса крыс во всех 7 исследованных групп при 0 день показал диапазон 201,3 ± 3,4 до 205,4 ± 2,9 г /крысу в начале эксперимента. 1 2-й и й группы были нормальными крысы в ​​то время как 3 до 7-го й был диабетические группы крыс. Увеличение массы тела наблюдалось в 1 й (8,9%, P &л; 0,05) и 2 й (5,6%) группы в то время как диабетических крыс 3 го до 7 й группы показали уменьшение массы тела на 8,7 до 11,3% (P &ЛТ; от 0,05 до Р &ЛТ; 0,01), соответственно, на 14 й пост нормальной /диабетическая день по сравнению с их соответствующим значением 0 день. Был значительный выигрыш в весе после лечения с MSE (9,7%, P < 0,05) и INS (15,3%, P < 0,01) в то время, мало увеличение массы тела наблюдалось с ОМЗ (3,4%) и PTX (4,7% ) лечения по сравнению с их соответствующей 14 дней значения. Тем не менее, диабетических контрольных крыс не показывают какого-либо увеличения их массы тела от его 14-дневного значения.
Язве желудка заживление
NR + AA крысы показали увеличение индекса язвы (UI-14,3 ± 2,3, P &
л; 0,05) по сравнению с NR + NS (Нет) язвы крысы некоторое время, DR + крыса АА показал дальнейшее увеличение индекса язвы (увеличение 108,4%, P &
ЛТ; 0,05) по сравнению с NR + AA крысы указывает на повышенную склонность к образованию язв и задержка заживления язвы. DR + AA крыс, получавших ОМЗ, INS и PTX показали снижение индекса язвы на 39,3, 38,6 и 43,3% соответственно (вблизи NR + уровня AA) в то время, MSE показал снижение на 63,8%, меньше, чем значение NR + AA крыс, указывающие на лучшее заживление по сравнению с MSE, Объединенные машиностроительные заводы INS или PTX (рисунок 2). Рисунок 2 Влияние спиртового экстракта мякоти плодов Мусы sapientum (MSE, 100 мг /кг × 10 дней), омепразола (ОМЗ, 2 мг /кг × 10 дней), инсулин (INS, 4U /кг × 10 дней) и pentoxyphylline (PTX, 10 мг /кг × 10 дней) на желудочную индекс крысы язвы слизистой оболочки желудка и цитокинов, фактор некроза опухоли-альфа (TNF-альфа) и интерлейкина-1 (IL-1) и преобразования роста фактор- a (TGF-α ) как отношение к бета-актина в уксусной кислоте (AA) индуцированную язву желудка в нормальных условиях (NR) и диабетических крыс (DR). Результаты являются средними значениями + SEM, 4 животных в цитокинов и факторов роста, исследования и 6 животных в желудочном исследовании язвы. CMC, MSE, ОМЗ и PTX вводили перорально в то время; ИНС был дан подкожным путем. * P
&л; 0,05 по сравнению с группой NS, аР
&л; 0,05 по сравнению с NR + AA группы и + P
&л; 0,05 по сравнению с группой DR + AA (Статистический анализ проводился одним способом ANOVA с последующим тестом Даннетта для множественных сравнений).
TNF-alpha, IL-1 и TGF-альфа
Представлены результаты TNF-alpha, IL-1β и TGF-α были выражены как отношение цитокинов /рост фактор, бета-актина (фиг.2 и 3). Рисунок 3. Влияние MSE, ОМЗ, INS и PTX на слизистую оболочку желудка TNF-alpha, IL-1 и TGF-α уровней у диабетических крыс (DR) (метод ОТ-ПЦР). Lane M: маркер. Дорожка 1: NR + NS. Дорожка 2: NR + AA. Дорожка 3: DR + AA. Дорожка 5: DR + AA + MSE. Дорожка 6: DR + AA + ОМЗ. Полоса 7: DR + AA + INS. Дорожка 8:. DR + AA + PTX
TNF-α и IL-1β
NR + AA крыс показали увеличение слизистой оболочки желудка TNF-alpha на 265,1% (P &
л; 0,05) и IL- 1β на 52,8% (P &
л; 0,05) по сравнению с NR + NS (неповрежденной слизистой оболочки) крыс. крыс DR + AA показал дальнейшее увеличение уровней IL-1 и TNF-alpha по 345,0 и 102,5% соответственно (P &
л; 0,05) по сравнению с соответствующими крыс NR + NS и на 21,9 и 32,6% больше (P
&л; 0,05) по сравнению с соответствующими крыс NR + AA. Лечение крыс DR + AA с гипогликемической препарата, INS и анти наркотиков язва, МФБ и ОМЗ и PTX отменил уровни IL-1 и TNF-alpha рядом с NR + AA уровне. Тем не менее, как MSE и PTX показали лучшие снижающие воздействие на ФНО-альфа и IL-1 по сравнению с ОМЗ или INS (рис 2 &Amp; 3).
TGF-α
NR + AA крыс показали значительное увеличение слизистой оболочки желудка TGF-α (увеличение 165,1%, P &
л; 0,05) по сравнению с крысами NR + NS. Тем не менее, TGF-α был не далее увеличена у крыс DR + АА по сравнению с группой NR + AA. Лечение крыс DR + AA с ОМЗ и INS не приводило к повышению уровня TGF-α дальше, пока, MSE и PTX имеет тенденцию к увеличению TGF-альфа (Рисунки 2 &Amp; 3). Обсуждение
подопытных крыс с диабетом
показали повышенная склонность к образованию язв желудка и нарушение заживления желудочных поражений [8, 9], и это обострение язвенной болезни /замедленного заживления были отменены агентами, исправляющих уровень сахара в крови [22]. Инсулиннезависимый сахарный диабет (ИНСД) увеличилась склонность к язвой желудка путем усиления наступательной, секрецию кислоты-пепсина и слизистой желудка свободные радикалы, перекисное окисление липидов (ПОЛ), оксид азота (NO) и уменьшение в слизистой оболочке гликопротеин и антиоксиданты, супероксиддисмутазы ( SOD) уровней [10].
Стрептозотоцин (СТЗ) широко используется для индукции экспериментального диабета у животных и его цитотоксическое действие опосредовано активных форм кислорода. СТЗ, как представляется, более конкретно, поскольку есть поглощение бета-клеток специфической GLUT2, но не другими переносчиков глюкозы и имеют меньше побочных эффектов. Это вызывает активацию поли АДФ-рибозилирование, что приводит к образованию супероксидных радикалов и, как результат, бета-клетки подвергаются разрушению путем некроза [23]. Механизм, лежащий в основе повышенной чувствительности слизистой оболочки желудка у животных с диабетом к повреждению является многофакторным и включает в себя ослабление кровеносных сосудов, а также повышенную продукцию провоспалительных цитокинов, TNF-альфа и IL-1, которые приводят к длительной воспалительной реакции и процесса замедленного выздоравливания на область язву [9]. Основным механизмом, с помощью которых цитокины оказывают свое вредное влияние на заживление язвы может включать ингибирование факторов роста, ответственных за регенерацию слизистой оболочки и восстановления от повреждений [24]. Кроме того, было сообщено, что ФНО-α усиливает выработку IL-1 и других цитокинов, что приводит к накоплению нейтрофилов [25] и росту производства ROS в слизистой оболочке желудка подвергается ишемии-реперфузии. Пентоксифиллин, ингибитор TNF-alpha сообщается для ускорения заживления кислотно-индуцированной язвы желудка у крыс уксусной возможно посредством ингибирования продуцирования TNF-alpha [13]. Сообщалось, что усиление пролиферации клеток во время заживления язв может быть опосредована увеличением высвобождения EGF и TGF-alpha. Кроме того, было сообщено, что, несмотря на увеличение уровня TGF-альфа у крыс с диабетом с сопутствующими язвой желудка заживление было отложено из-за неизвестного механизма /с. Было предложено, чтобы гипергликемию у животных с диабетом может вызвать некоторые структурные модификации TGF-альфа или его рецепторов в области язвы, что приводит к дисфункции этого фактора роста в течение сахарного диабета [9, 26].
Уксусная кислота (АА ) индуцированная язва у крыс, как сообщалось, имеют близкое сходство с клиническими язвы в месте, хронизации и тяжести и служит самой надежной моделью для изучения процесса заживления язвы [20]. В настоящем исследовании мы наблюдали повышенные уровни провоспалительных цитокинов TNF-a и IL-1 в желудочной слизистой оболочки нормальных крыс, обработанных с помощью уксусной кислоты. Диабетические крысы показали дальнейшее повышение их уровня по сравнению с нормальными крысами при воздействии уксусной кислоты, вызванной язвой желудка. Выше наблюдение было в подтверждение с ранее сообщалось работах [13, 27, 28]. MSE было сообщено обратное увеличение TNF-alpha и IL-1 в GU, индуцированное АА у нормальных крыс и способствует заживлению язвы его различными эффектами на слизистой оболочки желудка защитных факторов, в том числе повышенной пролиферации и антиоксидантов клеток и уменьшая свободные уровни радикалов [7, 15]. Лечение с помощью инсулина восстанавливается нарушенную заживление язв у больных сахарным диабетом животных, в основном за счет нормализации гипергликемии, но не к непосредственному действию инсулина на заживление язвы, потому что инсулин вводили крысам, не страдающих диабетом не показали никакого эффекта в заживлении язвы [ ,,,0],27]. Это показало, что противодиабетических препаратов были эффективными, исправляя повышенный уровень глюкозы, тем самым снижая уровни этих цитокинов в то время как анти язвы препарат (омепразол) был повышающим заживлению язвы и снижая их уровень [15]. TNF-α было сообщено, чтобы стимулировать до регуляции IL-1 уровней, поэтому, управляя TNF-α экспрессию ИЛ-1β экспрессию можно было управлять. Это может быть механизм, с помощью которого пентоксифиллина уменьшается как уровни цитокинов [29].
Данная работа показала увеличение уровня TGF-альфа у крыс, получавших с уксусной кислотой. Тем не менее, дальнейшее увеличение уровня TGF-альфа был найден у больных сахарным диабетом крыс и это наблюдение согласуется с предыдущими наблюдениями, показывающие важность этого фактора роста в процессе заживления язвы. Тем не менее, тот факт, что задержка заживления язв желудка в диабетическом состоянии, несмотря на повышенную экспрессию TGF-alpha, указывает на то, что целебные эффекты этого фактора роста, может быть ослаблен каким-то неизвестным механизмом. Это препятствует главной роли этого фактора в наблюдаемой задержке заживления язв желудка при диабетической условиях. Одна возможность состоит в том, что гипергликемию у животных с диабетом может вызвать некоторые структурные модификации TGF-альфа или его рецепторов или уменьшить наличие основных ингредиентов, необходимых для нормального заживления в области язвы, что приводит к дисфункции этого фактора роста в течение сахарного диабета. Необходимы дальнейшие исследования, чтобы ответить на вопрос, почему повышенная экспрессия TGF-alpha не способствует освобождению функционально активного фактора роста [9]. Было также сообщено, что повышенный уровень TGF-α может увеличить клеточную пролиферацию [30]. MSE показал тенденцию к увеличению уровня TGF-альфа у больных сахарным диабетом крыс. Это может быть лучше коррелировать с клеточной пролиферации, как MSE сообщалось увеличение пролиферации клеток [4].
Гипогликемической активностью за счет стимуляции выработки инсулина и утилизации глюкозы сообщалось из зеленых плодов банана и подорожника волокна из фруктов были найдены увеличить glucogenesis в печени и пониженную глюкозы в крови натощак. Муса sapientum
Сообщалось, что содержит бета-ситостерол, leucocyanidin, sryngin, кверцетин, sterylglycosides, аминокислотах и ​​т.д. b-ситостерол и диметокси производное leucocyanidin, leucocyanidin 3-O-бета-D-галактозил целлобиозида, продемонстрировали гипогликемический эффект в экспериментальных животных [16]. Флавоноиды наиболее широко известны своей противоязвенной активностью, гиполипидемической активностью, противовоспалительной активностью, антиоксидантной активностью, антимикробной активностью [31] и антигипергликемических [32] деятельность. ВЭТСХ дактилоскопии СКО продемонстрировал восемь активных компонентов, где один из компонентов может быть leucocyanidin, как сообщалось ранее Прабха и связывает [17], которые сравнивали с аутентифицированного составляющей стандартной leucocyanidin. Алкалоиды были зарегистрированы, чтобы показать анти-диабетического и противовоспалительное, антиоксидантное действие [33] в то время как сапонины показали антидиабетические эффекты [34].
Вывод изображения Присутствие многих активных компонентов, таких как флавоноиды, сапонины, гликозиды и Все авторы читали и одобрили окончательный вариант рукописи.

• Cisapride уменьшается содержание желудка аспирации в искусственной вентиляции легких patients
• Методологические вопросы при анализе роли физической активности в профилактике рака желудка: критический rev…