Klinicko význam Claudin-4 v žalúdočnej carcinoma

klinicko význame Claudin-4 v karcinómu žalúdka
abstraktné
pozadia
Aberrant expresiu Claudin proteínov bola zaznamenaná u rady nádorových ochorení. Predchádzajúce štúdie preukázali, že nadmerná expresia Claudin môžu podporovať tumorigenezi a metastáz prostredníctvom zvýšenej invázie a prežitie nádorových buniek. Avšak, prognostický význam Claudin-4 u rakoviny žalúdka zostáva nejasný.
Metódy
Imunohistochémia bola použitá na analýzu expresie Claudin-4 v 329 klinických vzorkách karcinómu žalúdka a 44 normálnych vzoriek žalúdka, 21 vzorkách črevnej metaplázia, a 21 priľahlých predchodcom lézie vzorky dysplázia. Štatistické metódy analýzy boli použité pre vyhodnotenie vzťahu medzi Claudin-4 expresie a rôznych klinicko parametrov. Jednorozmerné a viacrozmerné analýzy boli vykonané, v danom poradí, pre detekciu nezávislé prediktory prežitia.
Výsledky
Claudin-4 expresie bol prítomný iba v 7 (15,9%), normálne žalúdočné vzorky, ale expresia Claudin-4 v črevnej metaplázia lézie a dysplázia lézie bola 90,5% a 95,2%, v uvedenom poradí. Expresie Claudin-4 bola významne spojená s histologických rozdielov (P Hotel &0,001) Modely rastu nádorov a (P Hotel &0,001), ale nie je spojená s prežitím pacientov. Avšak prechodný typ farbenia Claudin-4 vykazovali trend korelácia s prežívania pacientov (p = 0,023
). Miera prežitia päť rokov s nízkou expresiou Claudin-4 v prostrednej typu (76,4%) bola podobná ako rozširujúci typ (64,5%), zatiaľ čo vysoká expresia skupiny (46,6%) bol bližšie k infiltrative typu (50,7%).
Závery
zistenia uvedené v tejto štúdii ukazujú Claudin-4 aberantne expresie v karcinómu žalúdka a prekurzorov lézií. Expresie Claudin-4 by mohol slúžiť ako základ pre identifikáciu karcinómu žalúdka z medziproduktu typu.
Kľúčové
karcinómu žalúdka Claudin-4 Tesná spojenie Doterajší
rakovina žalúdka je jedným z najčastejších zhubných nádorov, a približne 738,000 úmrtí došlo v dôsledku rakoviny žalúdka v roku 2008 na celom svete. Viac ako 70% nových prípadov a úmrtí dochádza v rozvojových krajinách, najmä vo východnej Ázii [1]. rakovina žalúdka je všeobecne chápaný tak, že vyvíjať ako viacstupňové priebehu od chronickej gastritídy, atrofickej gastritídy ,, črevnej metaplázia, dysplázia, a konečne rakoviny [2]. V priebehu tohto procesu, strata bunkovej polarity a narušenie buniek, bunkových spojenie je často pozorované, a to hrá dôležitú úlohu v progresii rakoviny.
Tesné spoje (TJS) sú veľmi dôležité pre udržanie normálnu štruktúru a fyziologickú funkciu epitelu a endotel [3, 4]. TJS slúži nielen ako fyzická bariéra, aby sa zabránilo rozpustených látok a vody z voľne prechádzajúcej paracelulární priestoru medzi epitelových a endotelových buniek listov, ale tiež hrajú kľúčovú úlohu v udržiavaní bunkovej polarity signálu a [3, 5, 6]. Rakovinové bunky však často vykazujú abnormálne funkciu TJ [7].
Klaudiny sú členmi veľkej rodiny transmembránových proteínov, ktoré patria medzi základnými zložkami TJS a Claudin-aberantne expresie potenciálne vedie k štruktúrne a funkčné poškodenie TJS [ ,,,0],8]. V súčasnej dobe celkom 24 Claudin génov boli identifikované u cicavcov, a často vykazujú tkanivovo špecifické vzory expresie [9]. V poslednej dobe sa rad štúdií ukázali, aberantne expresie klaudiny v niekoľkých ľudských nádorov [10, 11]. Pokiaľ je nám známe, výraz Claudin-1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 18 a 23 boli zaznamenané u karcinómov žalúdka [12-23]. Medzi rôznymi Claudin proteíny súvisiace s rakovinou žalúdka, funkcia Claudin-4 nebola v súlade. Napríklad Jung et al
. [15] a Ohtani et al
. [19] preukázali, že expresia Claudin-4 významne koreluje s priaznivým prežitia u pacientov s karcinómom žalúdka v 72 a 124 prípadov, resp. Avšak, Resnick a kol
. [13] hlásil, že stredné až silné Claudin-4 farbenie u karcinómu žalúdka bola významne spojené so zlou prežitie 146 prípadoch. Soiniet al
. [14] zistili, žiadny jasný vzťah medzi Claudin-4 prejavu a prognózu pacienta v 118 prípadoch. Zaujímavé je tiež expresie Claudin-4 bolo preukázané, že hrajú úlohu pri určovaní aktivitou matričnej metaloproteinázy (MMP), čo naznačuje, že Claudin-4 mohol sprostredkovanej invázii prostredníctvom aktivácie MMP [24, 25]. Okrem toho, predchádzajúce štúdie uvádzajú, že Claudin-4 môžu mať potenciál ako liečba rakoviny [26-28]. Tak, ďalšie vyšetrovanie potrebné vyjasniť tieto kontroverzné výsledky a skutočné funkcie Claudin-4. V tejto štúdii sme sa zamerali na identifikáciu klinicko združenia a prognostický význam Claudin-4 expresiu u rakoviny žalúdka.
Metódy
Pacienti a vzorky tkaniva
v tejto štúdii, tkanivové vzorky z celkového počtu 329 pacientov s rakovina žalúdka boli získané v rokoch 1998 až 2004 na katedre chirurgické onkológie, prvý nemocnice Čínske lekárskej univerzity. Všetci pacienti podstúpili kuratívny radikálnej gastrektómii so štandardným lymfadenektómia. Histopatologické diagnózy z 21. črevnej metaplázia, dysplázia 21, 44 mikroskopicky normálne žalúdočnú sliznicu a 329 vzoriek adenokarcinóme žalúdka zo 329 pacientov bola vykonaná dvoma nezávislými patológov. Získali sme písomný informovaný súhlas od všetkých pacientov, a štúdia bola schválená etickou komisiou China lekárskej univerzity. Žiadny z pacientov dostávala chemoterapiu alebo rádioterapiu pred chirurgickým zákrokom. Podrobné pooperačné patológie diagnóza správy boli získané a sú zahrnuté pohlavie, vek, umiestnenie nádoru, veľkosť, stav diferenciácie, rast vzor, ​​a tumor-node-metastázy (TNM) javiska. Kritériá TNM klasifikácie karcinómu žalúdka boli v súlade so 7. 2010 spoločného výboru amerického rakoviny (AJCC) staging príručke [29]. Kritériom pre histopatologické triedenie diferenciácie bola v súlade s 2.000 svetovej klasifikácie zdravotnícka organizácia žalúdočného karcinómu [30]. Kritériom pre vzor rastu nádorov bol v súlade s japonskou klasifikácie karcinómu žalúdka, 3. anglické vydanie. Charakteristika Všetci pacienti "sú zhrnuté v tabuľke 1. Vzorka od pacienta zahŕňal 238 mužských a 91 ženských pacientov s priemerným vekom 57 rokov (rozmedzie 26 až 81 rokov). Všetci pacienti boli sledovaní prostredníctvom telefónnej vyšetrovania alebo dotazníka, a doba následku pohybovala v rozmedzí od 1 do 136 mesiacov (medián 56 mesiacov) .Table 1 patologickým charakteristiky 329 pacientov s karcinóm žalúdka
Variable
hodnoty
veku na chirurgii, y
Stredná
57,0
rozsah
26 až 81
rod, číslo
Male
238
Žena
91
veľkosť nádoru, cm
Stredná
5,0
rozsah 1,0, 15,0 umiestnenie
Tumor, počet
hornom
31
Middle
53
Dolné
245 stavu
diferenciácie, počet
Dobre diferencovaný
47
Stredne diferencovaný
54
zle diferencované
218
nediferencovaných
10
Rast vzor, ​​počet
Rozšírenie
76
Intermediate
81
infiltrative
172
nádor (T) fáza, číslo
T1
44
T2
52
T3
164
T4
69
Node (N) fázu, počet
N0
100
N1
39
N2
76
N3
114
lymfatická invázie, číslo
Záporná
248
pozitívny
fáze 81
nádor, číslo
IA, IB
63
IIA, IIB
86
IIIA, IIIB, IIIC
180
osobné údaje, počet
ALIVE
152
mŕtvy, všetky príčiny
177
mŕtvy, karcinómu žalúdka
143
mŕtvy, ktorá nesúvisí
22
Informácie nedostupné
12
Imunohistochémia
formalínu fixované a parafínu zaliate (FFPE) tkanivové bloky boli nakrájané na 5 um silné oddiely, potom deparafinizovány s xylénu a rehydratovať pomocou odstupňované radu etanolu. Rezy boli inkubované vo vriacom pufri kyseliny citrónovej (pH 6,0) na získanie antigénu v parnej tlakovom hrnci. Rezy boli inkubované cez noc pri 4 ° C s nasledujúcimi primárnych protilátok: anti-Claudin-4 monoklonálna protilátka, riedenie 1: 100, klon 3E2C1, Zymed Laboratories Inc., CA, USA. Imunohistochemické farbenie bolo vykonané s použitím MaxVision TMHRP-Polymer anti-Mouse /Králik IHC Kit (Fuzhou Maixin, Čína) 3 s amino-9-etyl-karbazolu (AEC) ako enzýmového substrátu. Rezy potom boli mierne kontrastné hematoxylínom. Pozitívne kontroly boli sliznice hrubého čreva a vzorky, v ktorých bola primárna protilátka nahradený non-reaktívnych protilátok slúžil ako negatívna kontrola.
Imunologické výsledky boli interpretované nezávisle na sebe dvomi patológmi pomocou semikvantitatívny bodovacieho systému [31]. Tieto imunologické reakcie boli hodnotené farbením intenzitu (0, žiadne škvrny, 1, slabý, 2, stredná, 3, silný) a percento zafarbených epitelových buniek (0, < 5%, 1, 5 až 25%, 2, 26 až 50%, 3, 51 až 75% a 4, > 75%). Percento pozitivita epitelových buniek a farbením intenzity boli potom násobí generovať imunoreaktivitu skóre (IS) pre každý prípad. Vzorky boli rescored v prípade, že sa rozdiely v medzi dvoma patológmi, než sa dosiahne zhody. sme rozdelili vzorky do dvoch skupín na základe výsledkov imunozbarvení v tkanivách: nízku expresiu (je C, 4) a vysoká expresie (IS ≥ 4). Tento systém hodnotenia pre Claudin-4 bol použitý v predchádzajúcich štúdiách [32].
Štatistická analýza
meta-analýza bola vykonaná s cieľom potvrdiť úlohu Claudin-4 v rakoviny žalúdka. Prehľadali sme anglickú literatúru na relevantných štúdií publikovaných pred 1. júna 2013, s použitím PubMed databázu s nasledujúcimi podmienkami: "žalúdok novotvar" a "Claudin-4 'in Medical Subject Headings (mesh). Odkazy v získaných produktoch boli ďalej testované na skorší pôvodných štúdií. Kritériá pre zaradenie boli u pacientov s rakovinou žalúdka, vrátane prognostický porovnanie medzi vysokou a nízkou expresiou Claudin-4. Zodpovedajúce autori boli kontaktovaní na získanie chýbajúcich informácií, a niektoré štúdie boli vylúčené, ak dôležité informácie stále chýba po opakovanej žiadosti.
Ku kvantitatívnemu agregáciu výsledkov prežitie, pozorované očakávané (OE) štatistika a rozptyl boli spojené za vzniku efektívna hodnota. Hodnoty O-E a rozdiely boli odhadnuté z dostupných dát s využitím metód nahlásené Tierney et al
. [33]. Ak štúdie za predpokladu, pomer rizika (HR), hodnoty O-E a rozdiely boli odhadnuté na základe toho. Ak štúdie neposkytla HR, ale bolo hlásených dáta v podobe krivky prežitie, prežitie bolo vyťažených v určitých časoch určených na rekonštrukciu odhadom HR a jeho rozptyl.
Sme použili test chi-kvadrát zhodnotiť vzťah medzi Claudin-4 prejavu a rôznych klinicko-parametrov. Analýza prežitia bola vykonaná s použitím Kaplanove-Meierove metódy, a rozdiely medzi jednotlivými skupinami boli analyzované pomocou log-rank testu. Regresná multivariačný Coxovho modelu bol použitý v doprednom spôsobom postupným pre detekciu nezávislé prediktory prežitia. Dvojstranný P
-hodnoty menšie ako 0,05 boli považované za ukazujú štatisticky významný výsledok. Všetky štatistické analýzy boli vykonané pomocou softwaru SPSS (verzia 17.0; SPSS for Windows, Chicago, IL, USA). A RevMan 5,2 softvér pre analýzu (Cochrane Collaboration)
Výsledky
Claudin-4 imunobarvením došlo v prevažne blanitým vzorom , sa niektoré vzorky zobrazenie nízku úroveň cytoplazmatickej farbenie. Iba 15,9% (7/44) bežné žalúdočnej sliznice vykazovali vysoké hladiny expresie Claudin-4. Na rozdiel od toho 90,5% (19/21), črevné metaplázia lézií a 95,2% (20/21) žalúdočného epitelu dysplázie lézií vykazovali vysoké hladiny expresie Claudin-4. Vzoriek žalúdočnej karcinóm prešetrovaných 53,2% (175/329) prípadoch preukázala vysokú Claudin-4 expresie (obrázok 1). Obrázok 1 Claudin-4 imunobarvení. (A) Normálna žalúdočná muscoma, nie farbenie; (B) črevnej metaplázia, vysoká expresia; (C) mierne diferencované dobre diferencovaným karcinómom žalúdka, vysoký prejavu; (D) zle diferencovaný karcinóm žalúdka, bez zafarbenia. Zväčšenie x 200.
úroveň expresie Claudin-4 bol významne koreluje s nádorovú diferenciácie (P Hotel &0,001), pohlavia (P
= 0,003), vek (P
= 0,025) a lokalizácia nádoru (P
= 0,033). Podľa mikroskopické kontrole rastu nádoru vzoru, 76 prípadov bolo klasifikované ako typ rozširuje a 172 prípadov, ako je infiltratívny typu, zatiaľ čo 81 prípadov bolo stanovené, že medziproduktu typu. Úroveň expresie Claudin-4 bol tiež významne koreluje s rastu nádoru vzoru (P Hotel &0,001). Vysoká expresia Claudin-4 bola pozorovaná u 69,7% typu rozšírenie a 72,8% medziproduktu typu rakoviny žalúdka, zatiaľ čo iba 36,6% z infiltratívny typu vystaveného vysoká expresie. Naše zistenia však neodhalili žiadnu významnú koreláciu medzi expresiou Claudin-4 a nádorového veľkosti, hĺbkou invázie, lymfatických uzlín, lymfatickou inváziou, a fázu nádoru (obrázok 2, tabuľka 2). Obrázok 2 Vyjadrenie Claudin-4 v normálnom žalúdočnej sliznice, črevnej metaplázia, dysplázia a rakoviny (vrátane rozšírenia, strednej a infiltratívny typov).
Tabuľka 2 Štatistické výsledky vzťahov medzi Claudin-4 prejavu a rôznym patologickým charakteristikám
Variabilný
Celkom pacientov (%)
Pacienti s nízkym Claudin-4 výrazu (%)
Pacienti s vysokým Claudin-4expression (%)
P- hodnota
329
154 (46,8)
175 (53,2)
vek pri operácii , y
0,025
≤ 60
192
100 (52,1)
92 (47,9) Hotel > 60
137
54 (39,4)
83 (60,6)
Pohlavie
0,003
Muž
238
99 (41,6)
139 (58,4)
Žena
91
55 (60,4)
36 (39,6)
patofysiologickým rysy
veľkosť tumoru (cm)
0,055
≤ 5
199
102 (51,3)
97 (48,7) Hotel >
78 (60,0)
lokalizácia nádoru
0,033
Upper <5
130
52 (40,0) br> 31
9 (29,0)
22 (71,0)
Middle
53
31 (58,5)
22 (41,5)
Dolné
245 114
(46.5)
131 (53,5)
Histologické typ Hotel < 0,001
rozlíšené (WD, MD)
101
24 (23,8)
77 (76,2)
nediferencovanej (PD, UD)
228
130 (57,0)
98 (43,0)
štruktúra rastu Hotel < 0,001
Rozšírenie
76
23 (30,3 )
53 (69,7)
Intermediate
81
22 (27,2)
59 (72,8)
infiltrative
172
109 (63,4)
63 ( 36,6)
T etapa
0,147
T1 /2
96
51 (53,1)
45 (46,9)
T3 /4
233
103 ( 44,2)
130 (55,8)
lymfatických uzlín
0,905
negatívny
101
48 (47,5)
53 (52,5)
Pozitívne
228
106 (46,5)
122 (53,5)
Lymfatická invázie
0,898
Negatívne
248
117 (47,2)
131 (52,8)
Pozitívne
81
37 (45,7)
44 (54,3)
štádiu nádoru
0,589
IA, IB
63
33 (52.4)
30 (47,6)
IIA, IIB
86
38 (44,2)
48 (55,8)
IIIA, IIIB, IIIC
180
83 (46,1)
97 (53,9)
WD
, dobre diferencovaný; MD
, stredne diferencovaný; PD
, zle diferencované UD
nediferencované.
Celkom 19 štúdií boli pôvodne identifikované. Štrnásť štúdie boli vylúčené, pretože nezahŕňal prognostický porovnanie medzi vysokou a nízkou expresiou Claudin-4. Jeden ďalšie štúdie bola vylúčená, pretože dôležité informácie chýbali [14]. Len jedna štúdia vykonaná prognostickú porovnanie vychádza z príčiny-špecifické prežitie (CSS) [13], preto bol vylúčený a my sme urobili celkovú dobu prežitia (OS) primárny koncový bod našej meta-analýzy. Tri štúdie splnilo kritériá pre zaradenie a boli zahrnuté do konečnej analýze [15, 19, 34]. Spoločná analýza ukázala, že OS pacientov s vysokým Claudin-4 bol lepší ako u pacientov s nízkym Claudin-4 (obrázok 3). Obrázok 3 lesný pozemok o vzťahu medzi celkovým prežitím a expresiou Claudin-4. O-E, pozorovaného sa očakávalo.
Podľa jednorozmerné analýze prežitia, Claudin expresia proteínu nebola spojená s CSS pacientov (P
= 0,637) alebo OS (P
= 0,469). Rozvrstvené podtriedy prežitie analýzy boli vykonané za stavu N T, a lymfatickú inváziu a štádiom nádoru, a žiadny prognostický rozdiel bol zistený (dodatočný súbor 1: Obrázok S1). V porovnaní CSS, len TNM stupeň (P Hotel <0,001) a lymfatické invázie (P Hotel < 0,001) boli významné prognostické faktory. Po Cox viacrozmerné analýzy, iba TNM fáza bola významným prognostickým faktorom (P Hotel &0,001). Žiadny rozdiel prežitie bol pozorovaný medzi týmito tromi typmi nádorového rastu vzoru (P = 0,069
, obrázok 4A). Ďalej vrstevnatý analýzy nepreukázali významný prognostický rozdiel medzi pacientmi, ktorí vystavovali vysoká v porovnaní s nízkou expresiou Claudin-4 v rozširovaní a infiltratívny typ rakoviny žalúdka. Avšak, v medziľahlé raste typ vzoru rakoviny žalúdka, prognóza pacientov vykazujúcich nízke hladiny expresie Claudin-4 bol významne lepší v porovnaní s tými, s vysokou úrovňou expresie (P = 0,023
, Obrázok 4B). Tento výsledok bol potvrdený aj viacrozmerné analýzy Cox (P
= 0,037). Rakovina špecifická miera prežitia päť rokov u pacientov s nízkymi Claudin-4 úrovne expresie v strednom typu rakoviny žalúdka bola 76,4%, čo bola podobná vo všetkých karcinómov žalúdka expanduje typu (64,5%). Naše výsledky ukázali, že päťročná sadzba CSS u pacientov vykazujúcich vysokej úrovne expresie Claudin-4 v strednej typu rakoviny žalúdka bola 46,6%, čo bol podobný karcinómov žalúdka infiltratívny typu (50,7%) (Obrázok 4C). Pomocou farbenie Claudin-4 v medzistanici typu, sme reclassified nízku expresiu Claudin-4 do rozšírenia typ a vysokú expresiu Claudin-4 do infiltratívny typu a skladá sa dva nové podskupiny. Tam bol významný rozdiel v prognóze medzi týmito dvoma novými podskupín (p = 0,003
, Obrázok 4D). Po analýze podtrieda prežitie stratifikácii T stavu, stavu N, lymfatické invázie a štádiom nádoru, sme zistili, že prognostické rozdiely dvoch nových podskupín boli významné v PT3 /4, LN (+), fázy III, lymfatické invázie (-) ( dodatočné súbor 2: Obrázok S2). V viacnásobnej analýzy román klasifikácie bol významný prognostický faktor (P
= 0,007). Obrázok 4 prežitie Kaplan-Meier krivky. (A) Porovnanie prežitia troch typov nádorového rastu vzoru; (B) Porovnanie prežitia u pacientov s nízkymi a vysokými hladinami expresie Claudin-4 v medziproduktu typu štruktúry rastu karcinómu žalúdka; Krivky prežitia (C) Kaplan-Meierove pre rozšírenie typu, nízke hladiny expresie Claudin-4 v prostrednej typu, vysokej úrovne expresie Claudin-4 v prostrednej typu a karcinómov žalúdka infiltratívny typu. (D) Porovnanie prežitia u dvoch nových podskupín.
Diskusia
Claudin rodiny proteínov hrá dôležitú úlohu v udržiavaní funkcie TJ, a hladiny expresie často vykazujú vzor špecifické tkaniva. V poslednej dobe, akumulačné rad štúdií preukázala, ektopickej alebo aberantne expresiu klaudiny v mnohých typov nádorov [25, 32, 35-37]. Medzi Claudin podtypov, expresie Claudin-4 sa často mení v rôznych nádorových tkanivách. Claudin-4 je integrálne membránový proteín, ktorý patrí do rodiny Claudin. Tento proteín je súčasťou TJS, a je rozhodujúci pre utesnenie bunkové listov a riadenie paracelulární tok iónov [10].
Pomerne málo štúdií skúmalo expresných hladín Claudin-4 v prekurzorov lézií. Cunningham et al
. [38] vykázala 15% hladiny expresie Claudin-4 v normálnom žalúdku, zatiaľ čo v oboch črevnej metaplázia a dysplázia bola expresie Claudin-4 dosiahol 100%. Matsuda a kol
. [36], tiež uviedol, že Claudin-4 bola zistená v epitelu črevnej metaplázia, ale nie v normálnom epitelu. Naše výsledky farbenie prekurzorov vzoriek lézií boli v zhode s týmito štúdiami. Vysoká expresia miera Claudin-4 v normálnej žalúdočnej sliznici bola veľmi nízka (iba 15,9%), zatiaľ čo črevné lézie a metaplázia žalúdočnej epiteliálne dysplázia lézie vykazovali vysokú úroveň expresie takmer 100%. Vzhľadom k tomu, CLDN-4
je exprimovaný vo vysokých úrovniach v normálnom tenkého a hrubého čreva [11], pre zvýšenie expresie v intestinálnej metaplázia je ľahko pochopí. Avšak, diferenciálnej expresie Claudin-4 v normálnej sliznice a bunky vykazujúce dysplázia zostáva nejasný. Primárne morfologické rysy epitelu dysplázie sú bunkové atypiu, abnormálne diferenciáciou a neorganizovanú slizničnej architektúry; tieto zmeny môžu byť spojené so zvýšenou Claudin-4 expresie. Konkrétne Mechanizmus je potrebné ďalej objasnený. Celkovo vzaté, naše zistenia naznačujú, že Claudin-4 by mohli slúžiť ako molekulárne marker črevnú metaplázia a dysplázia v žalúdočnej sliznici.
V tejto štúdii sme zistili, že znížená expresia Claudin-4 bola významne spojená s histologickým diferenciáciu rakovina žalúdka. Ohľad na odlišnú situáciu skupina vykazovala vyššiu expresiu mieru Claudin-4 v porovnaní s nediferencovanej skupiny. Lee et al
. [18] uviedli, že znížená expresia Claudin-4 v korelácii s narušením glandulární štruktúry a strate diferenciácie, čo bolo v zhode s našimi výsledkami.
Rolu Claudin-4 pre prognózu zostáva kontroverzné. Resnicket al
. [13] hlásil, že zvýšená Claudin-4 výraz bol zlý prognostický faktor pre CSS v 146 pacientov, a Soini et al
. [14] navrhla Claudin-4 nesdružili s OS. Avšak, výsledky meta-analýzy tejto štúdie ukazujú, že OS pacientov s vysokým Claudin-4 bol lepší ako u pacientov s nízkym Claudin-4. Analýza výsledkov prežitie na základe pacientov v našom zariadení je uvedené, že Claudin-4 nebola spojená s CSS alebo operačného systému, čo je podobné výsledkom Soini et al
., Ale líši sa od iných štúdií.
Niektoré predchádzajúce štúdie navrhli, že up-regulácia niektorých klaudiny potenciálne prispieva k neoplazmy priamo zmenou funkcie TJ [39]. Nadmerná expresia Claudin-3 a 4, môže viesť k zvýšeniu invázie, pohyblivosti a nádorových buniek prežitie [25]. Naopak, v pankrease, zvýšená expresia Claudin-4 bolo spojené s výrazne zníženou invazívne a to ako in vitro a in vivo
[40]. Hoci naše štúdie zahŕňa takmer najväčší počet prípadov, v súčasnej dobe, prognózy úlohu Claudin-4 v rakoviny žalúdka zostáva nejednoznačný (P
= 0,637). Je možné, že rôzne populácie a v rôznych prostrediach prispieť k týmto rôznym výsledkom. Ďalšie štúdie, vrátane väčšieho počtu vzoriek je zaručené.
Histologické Modely rastu sú dôležitými parametrami pre hodnotenie biologickej správanie karcinómu žalúdka. o vzoroch raste a invazívnosti, Ming založené [41] popísali dva typy rakoviny žalúdka, expandujúceho a infiltratívny type.The japonská žalúdočné rakovinové asociácie rozdelená rakovinu žalúdka do troch typov založených na nádorovú infiltrácií (INF) rásť do okolitého tkaniva: v infra, nádorové zobrazuje rozširujúca sa rast s výraznou hranicou od okolitého tkaniva; v INFb, nádor vykazuje medziľahlú vzor medzi infra a INFc; v INFc, nádor zobrazuje infiltratívny rásť bez zreteľné hranice s okolitým tkanivom [42]. Táto konečná typ je bližšie k klinickej praxi, v ktorej existuje medziproduktu typu a je ťažké ho klasifikovať (obrázok 5). V našich výsledkov, boli rozdiely v prežitie medzi tromi typmi, ale nie sú významné (P = 0,069
). Miera prežitia u pacientov s prostrednej typu boli medzi zväčšuje a infiltratívny typov. Je zaujímavé, že v rozvrstvené analýzy sme zistili, že vysoko Claudin-4 expresie bola spojená so zlou prognózou v medzistanici štruktúry rastu, (p = 0,023)
. Miera prežitia päť rokov s nízkou expresiou Claudin-4 v medziproduktu typu (76,4%) bol podobný typu rozširujúcemu (64,5%), zatiaľ čo skupina s vysokou expresiou Claudin-4 (46,6%) bol bližšie k infiltratívny typ (50,7%). Preto sme mohli potenciálne klasifikovať pacientov stredného typu v závislosti na farbenie Claudin-4. reclassified sme pacientov s nízkou expresiou Claudin-4 v prostrednej skupine, ktoré majú podľa typu rozširujú, a pacienti s vysokou expresiou Claudin-4 tak, že má infiltratívny typ nádoru. Obaja jednorozmerné a mnohorozmerné analýzy potvrdili, že existujú významné rozdiely v prežitie medzi týmito dvoma podskupinami. Po analýze rozvrstvené podtriedy prežitie, sme zistili, že prognostické rozdiely v týchto dvoch nových podskupín boli významné v PT3 /4, LN (+), fázy III, lymfatické invázie (-). Hoci žiadny významný rozdiel bol nájdený v iných podtriedach určitý trend stále existuje a my sme toho názoru, že negatívne výsledky štatistickej analýzy boli vzhľadom na relatívne malej veľkosti vzorky. To znamená, že expresia Claudin-4 by mohli byť použité ako základ pre ďalšiu identifikáciu žalúdočné rakoviny medziproduktu typu. Obrázok 5 hematoxylínom-eozín. Tieto tri rôzne modely rastu rakoviny žalúdka: (A) rozširuje typu; (B) medziproduktu typu; (C) infiltratívny typ. Zväčšenie x 100.
The biologickú úlohu Claudin-4 v rakoviny žalúdka zostáva nejasný. Už predtým bolo oznámené, že CLDN18
je špecificky exprimovaný v normálnej žalúdočnej sliznici, ale nie CLDN4
[11, 22]. Claudin-4 je up-regulovaná v žalúdočných adenokarcinómov, a zvýšená expresia Claudin-4 je bežne vidieť na črevnú typu, na rozdiel od difúzneho typu nádorov [13, 17]. Avšak, Claudin-18 je downregulated u karcinómu žalúdka intestinálneho typu [22]. Tieto výsledky ukazujú, že hladiny distribúcia a vyjadrenie Claudin proteínov, sa môžu líšiť v rôznych buniek a tkanív v tele [43]. Ektopická expresia z Claudin je potenciálne spojená s progresiou nádoru. Ďalšie štúdie sú oprávnené na objasnenie funkcie Claudin-4 v progresii rakoviny žalúdka.
Závery
Ukázali sme upregulaci Claudin-4 v črevnej metaplázia a žalúdočného epitelu dysplázie, čo naznačuje jeho potenciálne využitie ako biomarkeru v adenokarcinóm žalúdka prekurzory lézie. Expresie Claudin-4 nebola spojená s prežitím, ale to bolo spojené s zlú histologických rozdielov a infiltratívny vzory rastu nádoru. Okrem toho táto štúdia ukázala, že expresia Claudin-4 by mohli byť potenciálne použité ako základ pre ďalšiu identifikáciu žalúdočné rakoviny medziproduktu typu.
Poznámky
Jin-Liang Zhu, Peng Gao prispel tiež k tejto práci.
Skratky
AEC: Sims 3 amino-9-etyl-karbazol
AJCC:
americký Spoločný výbor rakoviny

CLDN:
Claudin génu
CSS:
spôsobiť špecifické prežitie
FFPE:
formalínu -fixed a parafínu zaliate
HR:
pomer rizika
INF:
nádor infiltrujúcej

IS:
imunoreaktivita skóre
Mesh:
lekárskych okruhov, na ktoré
MMP:
matrix metaloproteinázy
OS:
celkového prežitia
TJ:
tesný križovatka
TNM :.
tumor-node-metastasis
deklarácia
Poďakovanie
Ďakujeme oddelení chirurgickej onkológie prvého nemocnice Čínskej lekárskej univerzity pre zabezpečenie ľudského žalúdka tkanivo vzorky. Ďakujeme tiež na College of China lekárskej univerzity pre technickú pomoc pri experimentoch. Táto práca bola podporená National Science Foundation Číny (No. 30972879 No. 81201888 a č 81172370) a Program odboru školstva v provincii Liao-ning (L2011137).
Elektronický doplnkový materiál
12957_2013_1360_MOESM1_ESM.tiff Ďalší súbor 1: Obrázok S1: Podtrieda analýza prežitie rozdelenie podľa T stavu, stavu N, lymfatické invázie a štádiom nádoru v závislosti na farbenie Claudin-4. Porovnanie prežitia medzi pacientmi s nízkou expresiou úrovňou Claudin-4 a vysoká expresie v PT1-PT2 (A), PT3-PT4 (B), LN (-) (C), LN (+) (D), fáza i (E), fáza II (F), fázy III (G), lymfatická invázie (-), (H), a lymfatické invázie (+) (i). (TIFF 678 KB) 12957_2013_1360_MOESM2_ESM.tiff Ďalší súbor 2: Obrázok S2: subclass analýza prežitie rozdelené podľa T stavu, stavu N, lymfatické invázie a štádiom nádoru na základe týchto dvoch nových podskupín. A-B. Porovnanie prežitia medzi infiltrative + medziprodukt (H) vs. rozširujúce + medziprodukt (L) v pT1- PT2 (A), PT3-PT4 (B), LN (-) (C), LN (+) (D), etapa I (E), etapa II (F), javiskové Všetci autori čítať a schválená konečná rukopis.

• Mechanizmus (y) účinku ležiace pod gastroprotektívnymi účinky etylacetát frakcie získané zo surového methanolického Extrakt z listov z Muntingia calabura
• Laparoskopicky asistovanej oproti otvorenej radikálnej D2 gastrektómii pre pokročilou rakovinou žalúdka, bez serózna invázia: kontrolný case study