Lymfangiogeneze v rakoviny žalúdka regulovať pomocou Akt /mTOR-VEGF-C /VEGF-D axis

Lymfangiogeneze v rakoviny žalúdka regulovaný prostredníctvom Akt /mTOR-VEGF-C /VEGF-D osi
abstraktné
pozadia
Lymfangiogeneze hrá významnú úlohu v metastázy a opätovného výskytu rakoviny žalúdka. Neexistuje žiadna správa, ale so zameraním na moduláciu VEGF dráhy a Lymfangiogeneze rakoviny žalúdka zacielením Akt /mTOR. Táto štúdia si kladie za cieľ demonštrovať vzťah medzi Akt /mTOR a VEGF-C /-D u rakoviny žalúdka.
Metódy
sme zhromaždili chirurgicky operaciindikováni vzoriek adenokarcinóme žalúdka od 55 súhlasil pacientov. Imunohistochémia farbenie p-Akt, p-mTOR, VEGF-C, VEGF-D, boli vykonané a zaznamenal dvoma nezávislými patológov. Výsledky boli prezentované ako farbenie intenzity a rýchlosti pozitívne farbenie buniek. Merali sme tiež lymfatický hustotu nádoby (LVD) o D2-40 farbenie. Rôzne dávky p-Akt inhibítorom LY294002 (12,5 uM, 25 uM, 50 uM) a inhibítora p-mTOR Rapamycín (25 nM, 50 nM, 100 nM) boli dané karcinómu žalúdka bunkové línie SGC-7901 in vitro. Miera inhibície rastu buniek bola testovaná pomocou MTT na 24 h, 48 h a 72 h, v danom poradí a proteínové vyjadrenie Akt, p-Akt, mTOR, p-mTOR, VEGF-C a VEGF-D boli skúmané pomocou Western Blot.
Výsledky
pozitívnych sadzieb farbenie p-Akt, p-mTOR, VEGF-C a VEGF-D v 55 s rakovinou žalúdka klinických vzoriek bolo 74,54%, 85,45%, 72,73% a 58,18%. p-Akt a p-mTOR boli pozitívne koreluje s VEGF-C a VEGF-D (p 0,01). LVD sa zvyšuje s kumulatívne tendenciou farbenie intenzity p-Akt, p-mTOR, VEGF-C a VEGF-D. LY294002 alebo Rapamycin významne potlačená SGC-7901 rast buniek a miera inhibícia bola závislá od dávky a v závislosti na čase (p 0,001). Okrem toho je expresia proteínu p-Akt a p-mTOR boli pozitívna korelácia, že VEGF-C a VEGF-D (p menšie ako 0,05).
Závery
úrovni LVD vo vzorkách žalúdočné rakovina významne vyšší ako v normálnej žalúdočnej tkaniva a v pozitívnej korelácii s p-Akt, p-mTOR, VEGF-C a VEGF-D. Inhibícia p-Akt a p-mTOR, in vitro, zníženie nádorových buniek VEGF-C a VEGF-D významne. Preto sme dospeli k záveru, že lymfangiogeneze rakoviny žalúdka môže byť v súvislosti s Akt /mTOR-VEGF-C /VEGF-D osi.
Kľúčové
Lymfangiogeneze Karcinóm žalúdka Akt /mTOR VEGF pozadí
žalúdočné rakovina je jednou z najbežnejšie zhubné novotvary po celom svete [1-3]. Spoločné stratégie liečba rakoviny žalúdka zahŕňajú chirurgii, rádioterapii, chemoterapii a cielené terapiu [4,5]. Zlyhanie liečby zahŕňajú metastázy a recidívy po operácii. Hlavnými metastatické trasy rakoviny žalúdka sú priame invázie, cievne metastáz, lymfatické metastázy a enterocoelia metastáz [3]. Medzi tými, lymfatické metastázy je stále dôležitejším kritériom pri posudzovaní prognózu karcinómu žalúdka a Lymfangiogeneze je uznávaná ako významný prediktor pre prognózu pacientov s rakovinou žalúdka [1,2]. Okrem toho je rakovina žalúdka lymfatické metastázy sa predpokladá, že skoršie udalosti v porovnaní s cievnou metastáz, sa deje aj v karcinómu žalúdka počiatočnom štádiom [3,4]. Preto Medzinárodná únia proti rakovine vzal mieru Lymfangiogeneze a množstvo metastázy lymfatických uzlín do štádia rakoviny žalúdka pri vyhodnocovaní prognózu [2,5]. Okrem toho, aj keby boli vykonané lymfadenektómia a intraperitoneálnej chemoterapie v priebehu lymfatických uzlín negatívny progresie, ale tiež priniesol pozitívny vplyv na zlepšenie prežitie 5 rokov žalúdočné rakoviny [5].
Dvoj zavedených spôsobov vstup nádorových buniek do lymprhatic systém sú invázie do existujúcich lymfatických ciev a indukcie Lymfangiogeneze [3]. Ten je považovaný za hlavný spôsob. Okrem toho Lymfangiogeneze hrá rozhodujúcu úlohu v metastáz, recidívy a prognózy na začiatku rakovinou žalúdka [4]. Tak, štúdie Lymfangiogeneze majú sľubnú vplyv na liečbu. VEGF-C a VEGF-D pozitívne súvisí s pevným nádorom lymfatické metastázy, lymfatická hustoty nádoba (LVD) a hĺbky invázie tumoru a recidívy podľa predchádzajúcich štúdiách [6-8]. Okrem toho Akt /mTOR sa tiež podieľa na regulácii Lymfangiogeneze a lymfatické metastázy [9-11]. Preto je vzťah medzi Akt /mTOR a VEGF dráh je hoden byť objasnený. Pokiaľ je nám známe, neexistuje žiadna správa napriek tomu so zameraním na moduláciu VEGF dráhy a Lymfangiogeneze zacielením Akt /mTOR u karcinómu žalúdka. V tejto štúdii sa snažíme demonštrovať vzťah medzi Akt /mTOR a VEGF-C /-D u rakoviny žalúdka.
Metódy
klinickej vzorky
chirurgickej resekcii vzoriek adenokarcinóme žalúdka boli zozbierané od 55 pacientov s žalúdočných rakovina od apríla 2011 do novembra 2012. Všetky z nich nedostal žiadnu rádioterapia, chemoterapia alebo imunoterapiu pred operáciou. Štúdia bola schválená etickou komisiou prvého Affiliated nemocnici Nanchang University a všetci účastníci dal písomný informovaný súhlas.
Imunohistochémia
Všetky vzorky tkaniva boli fixované 10% formalínu, rutinnom vložené do parafínu, nakrájame na 4-um silné ako sériových rezov, odparafínované xylénom, rehydratácia s gradientom etanolu a premyje sa destilovanou vodou. Antigén vyhľadávania bola vykonaná ponorením časti v antigénne vyhľadávacom pufri (0,5 M EDTA), a v mikrovlnnej rúre po dobu 20 minút. Rezy potom boli ošetrené s roztokom 3% peroxidu vodíka. Vzorky boli blokované 5% normálneho kozieho séra a potom inkubované cez noc pri 4 ° C s primárnou protilátkou: p-Akt (Ser473) (králik, 1: 100, Cell Signaling Technology, USA), p-mTOR (ser2448) ( králik, 1: 200, abca, USA), VEGF-C (koza, 1: 400, R &D, USA), VEGF-D (myš, 01:50, Santa Cruz, USA) a D2-40 (myš, 1: 100, ZSGB-BIO, Čína). Potom sa pridá druhá protilátka, a vzorky boli inkubované po dobu 30 minút pri teplote miestnosti a potom sa vyvinul s DAB. 5% normálnym kozím sére bola použitá ako negatívna kontrola namiesto primárnej protilátky. Imunohistochemické farbenie bola hodnotená dvoma nezávislými patológov. Výsledky vo forme farbenie intenzity boli prezentované (+ /++ /+++) a kladnú mieru zafarbenie buniek.
Lymfoidného hustotu plavidla
Podľa kritérií Masakau, D2-40 pozitívne farbenie (jediné endotelové bunky alebo bunky klastrov) bol označený ako pozitívny microlymphatic nádoby. Cievne bohatých oblastí v para-neoplastické umiestnenie a nádorové centrá boli definované a 5 pole "hot spots" boli náhodne počítané na základe veľkom zväčšení (× 400). Priemerná bola počítaná ako LVD.
Prežitie
tri rôzne dávky (12,5 um, 25 um, 50 um) aktivácia inhibítora Akt LY294002 (Sigma) alebo inhibítora aktivácia mTOR (25 nM, 50 nM, 100 nM ) Rapamycin (Sigma), bola daná do žalúdka bunková línia rakoviny SGC-7901. Miera inhibície rastu buniek bola testovaná testom MTT po 24 hodinách, 48 hodinách a 72 hodinách, v danom poradí.
Western blot
SGC-7901 bunky boli homogenizované v lyzačním pufri RIPA (10 mM Tris-HCl, pH 7,4 , 150 mM NaCl, 600 mM NP-40, 1% Triton X-100, 10% glycerol, 1 mM fenylmetylsulfonyl fluorid, 1 mM fluoridu sodného, ​​a 1 mM orthovanadičnan sodný) a dať na ľade po dobu 2 hodín. koncentrácia proteínu každej vzorky bola stanovená Bio-Rad Protein Assay Kit (Bio-Rad, Laboratories, Hercules, CA, USA) podľa inštrukcií výrobcu. Lyzáty obsahujúce 50 ug proteínu, boli oddelené pomocou SDS-PAGE a potom prenesené na nitrocelulózové membrány. Nešpecifické reakcie boli blokované počas 4 hodín s TBS-T (50 mM tris.HCl, pH 7,4, 150 mM NaCl, 0,1% Tween 20) obsahujúcim 5% netučné sušené mlieko. Potom boli membrány inkubované cez noc pri 4 ° C s primárnou protilátkou: Akt (myš, 1: 2000, Cell Signaling Technology, USA), p-Akt (Ser473) (králik, 1: 2000, Cell Signaling Technology, USA), mTOR ( králik, 1: 1000, Cell Signaling Technology, USA), p-mTOR (ser2448) (králik, 1: 3000, abca, USA), VEGF-C (koza, 1: 1000, R &D, USA) a VEGF- D (myš, 1: 500, Santa Cruz, USA). Po premytí s TBS-T obsahujúci odtučnené sušené mlieko, boli membrány inkubované s konjugátom peroxidázou chrenu sekundárnymi protilátkami. Proteínové škvrny boli vizualizované s použitím chemiluminiscencie ECL (Amersham).
Štatistická analýza
nezávislé vzorky T skúšobné medzi dvoma skupinami a jediné faktorovej analýzy rozptylu (ANOVA) pre viacnásobné porovnávania boli použité, keď sú dáta v súlade s normálnym rozdelením a homogenita rozptylu. V opačnom prípade, Mann-Whitney testu medzi dvoma skupinami a testu Kruskal-Wallis medzi multi-skupiny boli vykonané. Spearman analýza bola použitá na meranie korelácia merania a počet dát. Štatistické analýzy boli vykonané pomocou SPSS17.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). P-hodnota < 0,05 bola považovaná za štatisticky významné.
Výsledky
Expresia p-Akt, p-mTOR, VEGF-C a VEGF-D in situ
imunohistochemické farbenie p-Akt, p-mTOR, VEGF-C a VEGF-D v 55 žalúdočných klinických vzorkách s nádorovým ochorením bolo ukázané (obrázok 1). Pozitívne farbenie prezentované prevažne v cytoplazme a niekoľkých nukleárnej farbené v p-Akt a p-mTOR. Pozitivita miera p-Akt, p-mTOR, VEGF-C a VEGF-D sú 74,54%, 85.45%, 72,73% a 58,18%, resp. Kvantifikácia farbenie intenzity bolo uvedené v tabuľke 1. Obrázok 1 Imunohistochémia farbenie p-Akt, p-mTOR, VEGF-C a VEGF-D v karcinómu žalúdka vzorke (x 400). A: p-Akt, B: p-mTOR, C: VEGF-C, D: VEGF-D, E: Korelácia medzi p-Akt a p-mTOR /VEGF-C /VEGF-D
Tabuľka 1. imunohistochémia farbenie p-Akt, p-mTOR, VEGF-C a VEGF-D vo vzorkách s karcinómom žalúdka
Intensity (n)
Pozitívne sadzba (%)
-
+
++

p-Akt
14
29
12
74.54
p-mTOR
8
21
26
85.45
VEGF-C
15
22
18
72.73
VEGF-D
23
27
5
58.18
Korelácia p-Akt a p-mTOR /VEGF-C /VEGF-D, p-mTOR a VEGF-C /VEGF-D boli ďalej analyzované. p-Akt expresie v pozitívnej korelácii s p-mTOR (p = 0,001), VEGF-C (p = 0,002) a VEGF-D (p = 0,009) (obrázok 1E). Okrem toho, p-mTOR bola tiež významne pozitívne súvisí s VEGF-C (p 0,001). A VEGF-D (p = 0,003), hustotu
lymfatického nádoba
sa D2-40 farbenie použitú pre výpočet LVD pre rakovina žalúdka (obrázok 2A) a uzavreté normálne žalúdočné tkaniva (obrázok 2B). Podľa výsledkov, D2-40 morený najmä v lymfatickom endotelu v rozptýleného alebo klastre distribúcie. Tenký lymfatický cievna stena chýbal bazálnej vrstvy. Najvyššia LVD bola pozorovaná na okraji nádoru s hustým klastra-morfológiou. Okrem toho, D2-40 bola vyjadrená v submukóze normálneho tkaniva, sa slabšie expresiou na sliznici alebo svalové vrstvy i. Priemerná LVD žalúdočného karcinómu a normálneho tkaniva boli 94.18 ± 72.965 vs 23,31 ± 21.569 číslo /5 veľké elektrické pole, P < 0,001. Obrázok 2 Imunohistochemické farbenie D2-40 pre LVD (x 400). A: Karcinóm žalúdka tkanivo, B: Uzavreté normálne tkanivo, C: Korelácia medzi LVD a p-Akt /P-mTOR /VEGF-C /VEGF-D. . LVD = lymfatická hustota nádoba
LVD boli pozitívne koreluje s p-Akt, p-mTOR, VEGF-C a VEGF-D vyjadrenie na analýze Spearman (p menšie ako 0,05). LVD zvyšuje s kumulatívnej tendenciou farbenie intenzity p-Akt, p-mTOR, VEGF-C a VEGF-D (obrázok 2C).
Účinky LY294002 a rapamycín na SGC-7901 bunkového rastu
SGC-7901 bunky boli kultivované s tromi rôznymi dávkami LY294002 po dobu 24 hodín, 48 hodín a 72 hodín. Podľa MTT testu, SGC-7901 Rast buniek sa obmedzila a miera inhibícia bola významne koreluje s LY294002 dávkovanie a časovej konštanty (p 0,001) (obrázok 3A). Obrázok 3 Inhibícia p-Akt a p-mTOR v SGC-7901 buniek LY294002 a rapamycín. A: SGC-7901 rast buniek so zásahom rôznych časových bodoch a dávkach LY294002, B: SGC-7901 rast buniek so zásahom rôznych časových bodoch a dávky rapamycínu, C: Vplyv LY294002 (50 uM) a rapamycín (100 nM ) na Akt /mTOR a VEGF-C /-D vo Western blot.
Okrem toho, bunky boli tiež kultivované s rôznymi dávkami rapamycínu po dobu 24 hodín, 48 hodín a 72 hodín, resp. Miera inhibícia SGC-7901 bol tiež významne koreluje buď s rapamycínu dávkovanie alebo časová konštanta (p 0,001) (obrázok 3B). Z tohto dôvodu, a to ako LY294002 a Rapamycín môže inhibovať rast SGC-7901 buď v závislosti na čase alebo na dávke závislým spôsobom.
Vplyv LY294002 na Akt /mTOR a VEGF-C /-D
hladiny proteínu akt, p-akt, mTOR, p-mTOR, VEGF-C a VEGF-D v SGC-7901 s LY294002 (50 pM) inhibícia boli skúmané pomocou Western blot. Medzi nimi, p-Akt, p-mTOR, VEGF-C a VEGF-D boli postupne znižované s predĺžením dobe pôsobenia LY294002 (obrázok 3C). Tam bol významný rozdiel v porovnaní so skupinou bez LY294002 (p menšie ako 0,05). Avšak, neexistuje žiadny štatisticky významný rozdiel na Akt a mTOR (p 0,05). Tým, že ďalej vykonáva dvojaký analýzy varianty vzťah, p-Akt v pozitívnej korelácii s p-mTOR /VEGF-C /VEGF-D (p menšie ako 0,05) a p-mTOR sa tiež pozitívne súvisí s VEGF-C /VEGF-D ( p < 0,05).
Vplyv Rapamycín na mTOR a VEGF-C /-D
úrovni proteínu Akt, p-Akt, mTOR, p-mTOR, VEGF-C a VEGF-D v SGC -7901 s Rapamycin (100 nM) inhibícia boli skúmané pomocou Western blot. Medzi nimi, p-mTOR, VEGF-C a VEGF-D expresie boli znížené s predĺžením dobe pôsobenia rapamycínu (obrázok 3C). Tam bol významný rozdiel v porovnaní so skupinou bez Rapamycín (p menšie ako 0,05). Avšak, neexistuje žiadny štatisticky významný rozdiel pre Akt, p-Akt a mTOR (p 0,05). Tým, že ďalej vykonáva dvojaký analýzy varianty vzťah, p-mTOR v pozitívnej korelácii s VEGF-C a VEGF-D (p menšie ako 0,05).
Diskusia
Akt /mTOR signálne dráhy je dôležitá intracelulárnej dráhu, ktorá zodpovedá na cytokínov signálov, a je preukázané, hrá dôležitú úlohu v bunkovom raste, metabolizmu a apoptózy [12,13]. Akt /mTOR zahŕňa v rôznych patologických mechanizmov kolorektálneho karcinómu, rakoviny žalúdka, rakoviny pečene, rakoviny prsníka a rakoviny maternice a pod [12-14]. Naše predchádzajúce štúdie potvrdila, že p-Akt podieľajú na angiogenézu adenokarcinómu žalúdka a aktivácia Akt môže prispieť k angiogenézy pomocou VEGF-A up-regulácia [15]. V tejto štúdii pozitívnej sadzby Farbenie p-Akt a p-mTOR v 55 prípadov karcinómu žalúdka boli 74,54% a 85,45%, resp. Okrem toho, p-Akt v pozitívnej korelácii s p-mTOR (p 0,01). Tento výsledok je v súlade s predchádzajúcimi štúdiami a potvrdila významnú úlohu Akt /mTOR u karcinómu žalúdka. Klinická prognóza karcinómu žalúdka sa tiež navrhuje, aby byť spájaný s Akt dráhy a VEGF dráhy. Napríklad, Murakami et al.
Navrhol, že prognóza pacientov s karcinómom žalúdka, bez p-Akt expresie bol vždy lepšie ako tie p-Akt pozitívne a miera prežitia 5 rokov bolo 68% a 35% u pacientov s T3 alebo T4 fáza nádory, respektíve [16]. Okrem toho, že gén kódujúci Akt PI3CA
nadväzujúceho proteínu PI3K bola spojená s prežitia bez choroby [17]. Okrem toho, Wang et al.
Ukázali, že VEGF-C, VEGF-D a LVD karcinómu žalúdka bola spojená s veľkosťou nádoru a celkové prežívanie podľa štúdie v 123 prípadoch [18,19]. bol tiež potvrdený vzťah medzi VEGF-C /LVD a prognózy v diferenciácii nádoru, T fáze, lymfatických uzlín a vzdialených metastáz [20]. Ďalšie štúdie ďalej vyplýva, pomocou kombinácie VEGF-C /-D a CA199 predpovedať lymfatický cievny metastáz [21].
Vzhľadom na to, že Akt /mTOR a VEGF-C /-D hrajú dôležitú úlohu v lymfatickej metastázy a prognóza naša štúdia si kladie za cieľ skúmať vzťah medzi dvoma cestami a ďalej podporovať mechanizmus Lymfangiogeneze a metastáz. Podľa výsledkov in situ farbením
, p-Akt a p-mTOR boli pozitívnu koreláciu s VEGF-C a VEGF-D (p 0,01). Pokiaľ ide o nízke napätie, D2-40 úroveň karcinómu žalúdka a normálnych tkanivách boli skúmané v rovnakom čase. LVD u karcinómu žalúdka bol štyrikrát vyššie ako u normálneho tkaniva. Okrem toho, LVD významne koreluje s p-Akt, p-mTOR, VEGF-C a VEGF-D (p menšie ako 0,05). Najmä, LVD rovnako ako VEGF-C /D je u pacientov s negatívnou expresie p-Akt a p-mTOR, než pozitívnych samozrejme nižšia. Je navrhnuté, aby oba Akt /mTOR a VEGF cesta zapojený do Lymfangiogeneze a lymfatické cievy metastáz u rakoviny žalúdka. Podobné výsledky boli tiež potvrdené ďalšími štúdiami. Yu et al.
Navrhnuté, že p-mTOR boli veľmi konzistentné s lymfatických uzlín a mohol by byť nezávislým prediktorom lymfatické metastázy a prognózu rakoviny žalúdka [22]. Okrem toho Onogawa et al.
Naznačila, že VEGF-C bol vysoko koreluje s lymfatickým metastázy podľa štúdie uskutočnenej v 140 prípadov predčasného rakoviny žalúdka [23]. VEGF-C, rovnako ako VEGF-D sa tiež považovaná za prediktor lymfatické metastázy u pacientov s žalúdočnej rakoviny [24]. V tejto štúdii sme sa ďalej potvrdila vzťah Akt /mTOR, VEGF-C /-D a LVD pri karcinóme žalúdka in situ
.
LY294002, ako inhibítor aktivácia Akt, je potvrdiť protinádorového účinku a podporoval apoptózu rakoviny žalúdka in vitro stroje a in vivo
[25]. Rapamycín známy ako inhibítor aktivácia mTOR sa klinicky používa pre jeho protinádorového účinku a imunomoduláciu [26]. Výsledky našej štúdie ďalej overené, že LY294002 a Rapamycín mohli účinne inhibujú rast SGC-7901 bunky. Okrem toho, LY294002 na 50 um) a Rapamycín pri 100 nM mal najefektívnejšie rýchlosť inhibícia (52,53 ± 3,19%) a (48,72 ± 3,06%) na 24 hodín. Pri predĺžení do 72 hodín, miera inhibícia bola (68,76 ± 1,00)% a (68,50 ± 3,77)%, resp. Potom sme pozorovali vplyv inhibícia fosforylácie Akt a mTOR v lymfatických faktorov, VEGF-C a VEGF-D. Vysoká koncentrácia LY294002 (50 pM) a Rapamycín (100 nM) boli použité pre intervenčné štúdie. Podľa výsledkov, Rapamycín potlačil expresiu p-mTOR a LY294002 účinne inhibujú expresiu p-Akt, ako aj p-mTOR. Je potrebné poznamenať, že obaja inhibítory by mohli účinne inhibujú expresiu VEGF-C /-D. Okrem toho, down-regulácia p-Akt /p-mTOR ukázali vysokú súdržnosť s, že VEGF-C /-D. Z tohto dôvodu bolo navrhnuté Akt /mTOR byť úzko súvisí s VEGF-C /-D. Že podobné výsledky boli tiež už skôr uvedené v iných modeloch nádorov. Napríklad, Zhang et al.
Znížila receptor inzulínu krátke vlásočnicové RNA v nádorových bunkových líniách, LCC6 a T47D. Proliferácie buniek, angiogenézy, metastázy lymfangiogeneze a boli tiež inhibovaná vzhľadom k down-reguláciu p-Akt a inaktiváciu VEGF-D [27]. Okrem toho, inhibícia mTOR mohol potlačiť expresiu VEGF-C a účinne znížiť lymfangiogeneze v pankrease modeli karcinómu myší [11]. V inej štúdii, VEGF-D bol degradovaný Honokiol na inhibíciu lymfangiogeneze na rakovinu pľúc štepu [28]. IL-6 by tiež mohla regulovať VEGF-C, na úrovni mRNA pomocou Akt /mTOR signálne dráhy, ktorá účinne znižoval lymfangiogeneze a metastáz v ústnej spinocelulárneho karcinómu [29].
Záver
úroveň LVD vo vzorkách s karcinómom žalúdka bol významne vyšší ako v normálnej žalúdočnej tkaniva a pozitívne koreluje s imunohistochemického farbenia p-Akt, p-mTOR, VEGF-C a VEGF-D. S inhibíciu p-Akt a p-mTOR in vitro, VEGF-C a VEGF-D boli tiež významne znížená. Preto navrhujeme, aby Lymfangiogeneze rakoviny žalúdka by mohlo byť účinne modulovaný osou Akt /mTOR-VEGF-C /VEGF-D.
Poznámky
Hongxia Chen, Runnian Guan Yupeng Lei a Jianyong Chen prispeli tiež pre túto prácu .
Skratka
LVD:
lymfatických ciev hustotu
deklarácia
Potvrdenie
štúdia bola podporená financovania z National Science Foundation granty Číny ( No. 81160307); Jiangxi Science & Technologickým pilierom programu a Nadácia pre vedu mladých bádateľov v provincii Ťiang-si (č 2007GQY1167); . Voyage Projekt Jiangxi provincii vedeckotechnických
protichodnými záujmami
Autori vyhlasujú, že nemajú žiadne protichodné záujmy príspevkov na
autori '
študijné koncepty a dizajn :. XZhou HC; Zber dát: HC, RG, HC; Analýza dát: YL, JC; Rukopis príprava: QG, RD, XZhang; Rukopis revízie: XQ, HL, CC. Všetci autori sa zúčastnili v dostatočnom časovom štúdii a schválila finálnu verziu.

• Bursectomy a non-bursectomy D2 gastrektómii pre pokročilých rakoviny žalúdka, počiatočné skúsenosť z jednej inštitúcie v Číne
• Klinicko význam nukleárneho faktora (erytroidné-2) by teda faktor 2 (Nrf2) expresie v karcinómu žalúdka