PLOS ONE: los niveles urinarios de N-nitroso compuestos en relación con el riesgo de cáncer gástrico: Los resultados de la Cohorte de Shangai Study

Extracto

Antecedentes

N
-Nitroso se cree que los compuestos de jugar un papel significativo en el desarrollo de cáncer gástrico. Los datos epidemiológicos, sin embargo, son escasos en el examen de las asociaciones entre los marcadores biológicos de la exposición a N
-nitroso compuestos y el riesgo de cáncer gástrico.

Métodos

A anidado de casos estudio de control dentro de una cohorte prospectiva de 18.244 hombres de mediana edad y de edad avanzada en Shanghai, china, se llevó a cabo para examinar la asociación entre el nivel urinario de N
-nitroso compuestos y el riesgo de cáncer gástrico. Información sobre la demografía, la ingesta alimentaria habitual, y el uso del alcohol y el tabaco fueron recogidos a través de entrevistas en persona en la inscripción. Los niveles urinarios de nitrato, nitrito, N
-nitroso-2-metil-tiazolidina-4-carboxílico (NMTCA), N
-nitrosoproline (NPRO), N CD - nitrososarcosine (NSAR), N
ácido -nitrosothiazolidine-4-carboxílico (NTCA), así como suero H. pylori anticuerpos
se cuantificaron en 191 casos de cáncer gástrico y 569 controles emparejados de forma individual. Se utilizó el método de regresión logística para evaluar la asociación entre los niveles urinarios de N
compuestos -nitroso y el riesgo de cáncer gástrico.

Resultados

En comparación con los controles, los pacientes con cáncer gástrico tenían los niveles globales comparables de nitrato urinario, nitrito, y N
compuestos -nitroso. Entre las personas seronegativas a anticuerpos contra el H. pylori
, niveles elevados de nitrato urinaria se asociaron con un mayor riesgo de cáncer gástrico. Los odds ratios ajustados multivariados para el segundo y tercer terciles de nitrato fueron 3,27 (intervalo de confianza del 95% = 0,76 a 14,04) y 4,82 (intervalo de confianza del 95% = 1,05 a 22,17), respectivamente, en comparación con el tercil más bajo ( P
para la tendencia = 0,042). No hubo asociación estadísticamente significativa entre los niveles urinarios de nitrito o N
compuestos -nitroso y el riesgo de cáncer gástrico. NMTCA nivel urinaria se asoció significativamente con el consumo de alcohol y conserva de carne y pescado alimentos.

Conclusión

El presente estudio demuestra que la exposición a nitrato, un precursor de N
-nitroso compuestos, pueden aumentar el riesgo de cáncer gástrico entre los individuos sin antecedentes de H. pylori
infección

Visto:. Xu L, Qu Y-H, Chu X-D, Wang R, Nelson HH, Gao Y-T, et al. (2015) los niveles urinarios de N
compuestos -Nitroso en relación con el riesgo de cáncer gástrico: Los resultados del Estudio de Cohorte de Shangai. PLoS ONE 10 (2): e0117326. doi: 10.1371 /journal.pone.0117326

Editor Académico: Jeffrey S. Chang, Institutos de Investigación Nacional de Salud, TAIWAN

Recibido: 30 Julio, 2014; Aceptado 21 de diciembre de 2014; Publicado: 6 Febrero 2015

Derechos de Autor © 2015 Xu et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos de la licencia Creative Commons Attribution License, que permite el uso ilimitado, distribución y reproducción en cualquier medio, siempre que el autor original y la fuente se acreditan

Disponibilidad de datos: Todos los datos relevantes están dentro del papel

Financiación:. las investigaciones realizadas en esta publicación fue apoyada por el Instituto Nacional del cáncer de los Institutos nacionales de Salud, bajo los números de adjudicación R01CA043092, R01CA129534 y R01CA144034. El contenido es responsabilidad exclusiva de los autores y no representa necesariamente la opinión oficial de los Institutos Nacionales de Salud. Los donantes no tenía papel en el diseño del estudio, la recogida y análisis de datos, decisión a publicar, o la preparación del manuscrito

Conflicto de intereses:.. Los autores han declarado que no existen intereses en competencia

Introducción

a pesar de la disminución en las tasas de incidencia y mortalidad por cáncer de estómago en todo el mundo durante los últimos tres decenios, el cáncer gástrico es el cuarto cáncer más comúnmente diagnosticado y la tercera causa más común de muerte por cáncer [1]. Incluso si la tendencia actual de disminución de la tasa continúa, esta patología se mantendrá como uno de los cánceres más comunes en todo el mundo debido al envejecimiento de las poblaciones actuales en las regiones de alto riesgo [2]. Una característica distintiva del cáncer gástrico es la notable variación geográfica en las tasas de incidencia y mortalidad en todo el mundo. Asia Oriental tiene la mayor tasa de incidencia de cáncer gástrico con más de 60 por cada 100.000 personas-año, significativamente mayor que las tasas en América del Norte y África que están por debajo del 9 por 100.000 [3]. La considerable disminución de las tasas de incidencia de cáncer gástrico entre los inmigrantes japoneses a los Estados Unidos en relación con sus homólogos de Japón en las últimas décadas sugiere que los factores ambientales juegan un papel importante en el desarrollo de cáncer gástrico [4]. Por lo tanto, la identificación de factores de riesgo ambientales para el cáncer gástrico informaría a las estrategias para la prevención primaria contra este tipo de cáncer.

N
-Nitroso compuestos (NOC) han demostrado efectos cancerígenos en estudios experimentales. Aproximadamente 300 CONs han sido probados en cuanto a carcinogenicidad en experimentos de laboratorio, con un 90% de ellos que demuestren efectos cancerígenos a través de diferentes especies animales, incluyendo primates superiores [5, 6]. Ciertos CONs han sido clasificados como "probablemente cancerígeno para los humanos" por la Agencia Internacional para la Investigación sobre el Cáncer (IARC) [7]. De acuerdo con el Informe de 2010 sobre la IARC, nitrato ingerido o nitrito en condiciones que dan lugar a nitrosación endógena es probablemente carcinógeno para los seres humanos [8]. Los seres humanos están expuestos a los CON de fuentes exógenas y de la síntesis endógena. CON exógenos se derivan directamente de ciertos tipos de alimentos, como la carne procesada, pescado salado o ahumado, y en escabeche y verduras secas [9]. Los datos disponibles sugieren que los CON en los alimentos se encuentran con más frecuencia y en mayor concentración, en Asia que en los países occidentales [10]. CON endógenos se forman a partir de nitrosación de aminas secundarias o amidas por N _{2O 3 y (H 2NO 2) ^{+, ambos de los cuales son agentes de nitrosación de nitrito derivados. El nitrito se puede obtener ya sea directamente de los alimentos, o indirectamente de reducción de nitrato por las bacterias orales y entéricas [11-14]. formación endógena de los CON probablemente está catalizada por el hierro hemo presente en la carne roja [15, 16]. En los seres humanos, nitrosación se lleva a cabo en el ambiente más ácido, tal como el estómago, especialmente cuando el nivel de vitamina C antioxidante es baja, que en medio neutro [17]. reacciones de nitrosación se pueden mejorar por ciertas bacterias, así como en ciertas condiciones inflamatorias tales como la explosión oxidativa [18]. Aproximadamente el 45% -75% CON que los seres humanos están expuestos a la deriva de la síntesis endógena [19]. Los individuos con una alta exposición a los CON son la hipótesis de estar en mayor riesgo de desarrollar cáncer gástrico.}}

Los estudios epidemiológicos que examinaron la asociación entre los CON o inconsistencias en los resultados alimentos que contienen NOC-y el riesgo de cáncer gástrico han producido [20]. Estas inconsistencias probablemente debido a un error de medición en la evaluación de la exposición a los CON en la mayoría, si no todos, los estudios epidemiológicos, así como a la falta de información sobre cofactores que tienen impacto en la nitrosación endógena [8]. Un enfoque biomarcador que evalúa los CON totales (es decir, la suma de ambas fuentes endógenas y exógenas) sería superar algunas de estas limitaciones y aumentar la validez de los resultados. En el presente estudio, hemos cuantificado los niveles urinarios de nitrato y nitrito, dos precursores de los CON, así como N
-nitroso de 2-metil-tiazolidina-4-carboxílico (NMTCA), N
-nitrosoproline (NPRO), N
-nitrososarcosine (NSAR), y N
ácido -nitrosothiazolidine-4-carboxílico (NTCA) 4 grandes NOC no volátiles presentes en la orina humana [19 ]. La vida media de los CON individuales varía de varias horas a varios días. El NPRO y NSAR se excretan en la orina casi sin cambios, y proporcional a la dosis administrada por vía oral en modelo de rata [21]. El in vivo
administración de nitrato y N
precursores -nitrosamine ha demostrado tener una alta eficiencia en la producción de NMTCA, NTCA y NPRO [22, 23]. Por lo tanto el seguimiento NPRO u otras CON excretados en la orina parecían ser un procedimiento adecuado para la estimación de la exposición diaria humana tanto a los CON endógenos y exógenos [21, 22, 24]. Este estudio fue anidado dentro del Estudio de Cohorte de Shangai, una cohorte prospectiva de 18.244 hombres de mediana edad y de edad avanzada, en Shanghai, China. El objetivo principal del presente estudio fue evaluar la asociación entre los niveles urinarios de los CON y sus precursores y el riesgo de cáncer gástrico. El objetivo secundario del presente estudio fue investigar el potencial efecto modificador de la infección por H
. bacteria pylori
, consumo de alcohol, el tabaquismo, y el suero /medición urinaria antioxidante sobre la asociación del cáncer NOC-gástrica. [25]

Materiales y Métodos

Población de estudio

el diseño del estudio de cohorte Shanghai se ha descrito en detalle en otra parte [26, 27]. En pocas palabras, se seleccionaron cuatro comunidades pequeñas en zonas geográficas concretas en una amplia área de la ciudad de Shanghai para una cohorte prospectivo epidemiológico, el cáncer de estudio de la exposición del medio ambiente y el cáncer. las listas completas de todos los residentes en estas comunidades seleccionadas para la identificación de los sujetos elegibles se obtuvieron de las comisarías locales. Los criterios de elegibilidad eran hombres de entre 45 y 64 años de edad que no tenían antecedentes de cáncer. Entre enero de 1986 y septiembre de 1989, 18.244 hombres (~ 80% de los sujetos elegibles) participaron en el estudio. Cada participante fue entrevistado en persona utilizando un cuestionario estructurado obtención de información sobre las características demográficas, el uso de alcohol y tabaco, la dieta habitual de adultos y su historia médica. A la finalización de la entrevista, una muestra de sangre no en ayunas de 10 ml y una sola de huecos (es decir, punto) muestra de orina se recogieron de cada participante. Las muestras de sangre y de orina se recogieron por lo general 17:00-21:00 y se colocaron en un congelador (~ 4 ° C) inmediatamente después de la recolección. Múltiples partes alícuotas de suero y orina de cada sujeto se hicieron y se almacenaron a -70 ° C. De cada sujeto un vial de 25 ml de orina se mezcló con 100 mg de hidróxido de sodio (NaOH) antes de que se almacenó a -70 ° C para el almacenamiento a largo plazo. Todos los participantes dieron su consentimiento por escrito para la participación de este estudio en la inscripción. El formulario de consentimiento para la entrevista y recogida de muestras biológicas al inicio del estudio fue aprobado por el Comité de Ética del Instituto de Cáncer de Shanghai, Shanghai China. Todos los participantes de la cohorte que sobreviven también proporcionaron su consentimiento escrito para continuar participando en el estudio de cohorte durante el seguimiento anual de entrevistas en persona. El formulario de consentimiento para la participación continua de este estudio fue aprobado por las juntas de revisión institucional del Instituto de Cáncer de Shanghai y la Universidad de Pittsburgh. Este estudio ha sido aprobado por las juntas de revisión institucional del Instituto del Cáncer de Shanghai, la Universidad de Minnesota, y la Universidad de Pittsburgh.

dieta actual se evaluó mediante un cuestionario de frecuencia de alimentos que incluyen 45 artículos los alimentos que constituyen comúnmente consumidos alimentos locales en Shanghai, china, en principios de 1980. Seguimiento anual para los cánceres incidentes y muertes se ha llevado a cabo desde 1986. Se estableció contacto con todos los participantes sobrevivientes en persona al año para el estado vital y el diagnóstico del cáncer. También se realizó el análisis de ligamiento registro con las bases de datos de los Registro de Cáncer de Shanghai y Shanghai Municipal de Estadísticas Vitales. A finales de 2012, sólo 609 (3,3%) participantes de la cohorte originales se perdieron durante la entrevista de seguimiento anual. Además, 573 (3,1%) sujetos se negaron nuestra solicitud de entrevistas de seguimiento anuales, aunque su cáncer y el estado vital han sido comprobada y actualizada a través de la vinculación de registros anuales análisis. Así, el seguimiento de la incidencia de cáncer y muerte entre los participantes de la cohorte estaba casi completa. El presente estudio incluyó a 197 pacientes con cáncer gástrico incidente cuyo diagnóstico inicial fue hecha entre la fecha de inscripción y marzo de 1998. Los diagnósticos de 179 (91%) cánceres se basaron en pruebas histopatológicas. Los 18 (9%) casos restantes fueron diagnosticados en base a imagines radiográficos con pruebas consistentes clínico (n = 14) o certificado de defunción solamente (n = 4). Hubo 45 pacientes con cáncer en el cardias gástrico y 146 a no cardias.

En cada caso, se optó por tres sujetos de control al azar entre todos los participantes elegibles del estudio de cohorte que cumplieron con los criterios de coincidencia. Los tres controles seleccionados fueron agrupados de forma individual para casos índices por edad (± 2 años), mes y año de la recogida de muestras biológicas, y el barrio de residencia al momento del reclutamiento.

Ensayos de laboratorio

Las alícuotas de orina muestras de los sujetos fueron sacados del repositorio de muestras biológicas y luego clasifican en los grupos de casos y controles emparejados. Todas las 4 muestras de orina dentro de un conjunto dado de casos y controles emparejados (es decir, 1 caso y 3 controles) fueron dispuestos en un orden aleatorio y probados en el mismo lote para todas las mediciones de laboratorio. El estado del caso /control de las muestras de orina de prueba era ciego al personal de laboratorio.

NSAR, NPRO, NTCA y NMTCA se analizaron mediante cromatografía de gases acoplada con el analizador de energía térmica (GC-TEA) de acuerdo con el método descrito anteriormente [22]. Brevemente un ml alícuota de orina tratada con NaOH 7.5 se extrajo 3 veces con 20 ml de metanol-diclorometano (1: 9, v /v) después de la adición de 75 ng N
ácido -nitrosopipecolic (NPIC) como internos estándar, 2,0 g de cloruro de sodio (NaCl), y 1,5 ml de solución de sulfamato de amonio 20% en 1,8 M
H _{2SO4. Los extractos combinados se secaron sobre sulfato de sodio anhidro y se concentraron a sequedad por evaporador rotatorio a 30 ° C, y derivatizados en 2 ml de éter con un exceso de diazometano (preparado con 2 g N
-Metil- N
-Nitroso-p-toluenosulfonamida, 60 ml de éter, 12 ml de hidróxido de potasio 60% y 12 ml de metanol) .El éster de metilo de los cinco N
-nitrosamino ácidos en solución etérea se concentró a 0,1 ml y se cuantifica con una alícuota de 10 l mediante GC-TEA. Para la cromatografía de gas, una columna de vidrio (2 m x 3 mm de diámetro interno) rellena con 5% de FFAP sobre Chromosorb WHP (malla 80 a 100) se usó a una temperatura de 180 ° C. La temperatura del puerto de inyección de la cromatografía de gas fue de 200 ° C, y la velocidad de flujo del gas portador de nitrógeno fue 50 ml /min. Para el análisis de la energía térmica, la temperatura de la pirólisis fue de 500 ° C, la interfaz era 200 ° C, y el vacío a 0,9 mm Hg. Las recuperaciones de NSAR, NPRO, NMTCA, y NTCA añadieron a 30 ug /l de cada uno fueron 75%, 79%, 91% y 96%, respectivamente. Los límites de detección varió de 0,1 a 0,5 g /L, dependiendo del compuesto.}

El nitrato y el nitrito se analizaron de acuerdo con el método descrito previamente con algunas modificaciones [25]. El cadmio se preparó por la reacción de zinc con sulfato de cadmio 20%. La solución tampón de cloruro de amonio se ajustó a pH 9.6 a 9.7. Las muestras de orina fueron deproteined antes se llevó a cabo la medición de nitritos y nitratos. Muestra de orina se ajustó a pH 8-9, la mezcla se incubó a 50-60 ° C durante 10 min, a continuación, 2 ml 12% se añadió ZnSO <sub>4 solución y se incuba a 50-60 ° C durante otros 10 minutos, y adicional 1 ml 0.5 N
se añadió NaOH antes de que los contenidos se enfriaron a temperatura ambiente. Después de añadir 17,6 ml de agua, la muestra se pasó a través de papel de filtro y se recoge el filtrado después de descartar el primero 10 ml de filtrado. Para la medición de nitrito, 5 ml 0,5% sulfanilamida y 2 ml 0,5% N
- (1-naftil) se añadió dihidrocloruro de etilendiamina al 10 ml alícuota del filtrado descrito anteriormente antes de la absorbancia de la solución final se leyó a 540 nm. Para la determinación de nitrato, 5 ml NH solución tampón 4OH y 18 ml de agua se añadió a 2 ml de filtrado antes de que pasara a través de una columna de Cd en 3-5 ml /min. La columna se lavó con 15 ml de agua y el efluente combinado se recogió. Después de añadir 5 ml 0,5% sulfanilamida y 2 ml 0,5% de N- (1-naftil) etilendiamina, la absorbancia de la solución final se leyó a 540 nm después de reposar durante 20 min. Las concentraciones finales de nitrito y nitrato se calcularon usando la curva estándar. Con fines de control de calidad, dos lotes de muestras de orina con tres duplicados cada uno, que estaban ciegos a personal de laboratorio fueron dispersados ​​entre las muestras de ensayo. Los coeficientes intra e inter-ensayo de variación para todos los CON y sus precursores medidos fueron 4-15% y 12-33 %%, respectivamente.</sub>

Una historia de la infección por H
. pylori
se determinó mediante la detección de anticuerpos en suero de inmunoglobulina G (IgG) a H
. pylori
utilizando una enzima-ensayo inmunoenzimático (ELISA) descrito anteriormente [28]. Este ELISA se desarrolló y validó utilizando H
. pylori
cepas que eran frecuentes en la población de estudio [28]. Los métodos para la cuantificación de antioxidantes incluyendo carotenoides en sangre (es decir, α-caroteno, β-caroteno, β-criptoxantina, licopeno, luteína /zeaxantina, retinol, α-tocoferol, γ-tocoferol, y vitamina C) y catequinas urinario incluyendo epigallocatchin ( EGC) se describe en los informes anteriores de esta población de estudio [29, 30].

Análisis estadístico

de 197 casos y 591 controles, las muestras de orina de 6 casos (18 y sus controles emparejados) y 4 controles adicionales tuvieron que faltan valores de una o más mediciones urinarias. Por lo tanto, el presente estudio se incluyeron 191 casos y 569 controles emparejados después de la exclusión de estos sujetos con valores perdidos en los análisis primarios. Además, hemos añadido ensayo de nitrito urinario tarde en las muestras de estudio y tuvieron valores de nitrito en 104 casos y 308 controles emparejados solamente, en que se basaba la participación de todos los análisis estadísticos nitrito urinario.

Las concentraciones de nitrato urinario, nitrito y 4 cON medidos se expresaron como mg /g de creatinina a tener en cuenta variación del contenido de agua en la orina a través de diferentes individuos. Las distribuciones de las concentraciones de estos analitos urinarios fueron marcadamente sesgada con pocos sujetos que poseen valores elevados, que eran normalizado, en gran parte, por su transformación logarítmica. Por lo tanto, las pruebas estadísticas formales sobre valores continuos de los CON, nitrato y nitrito se llevaron a cabo en los valores transformados logarítmicamente. Se realizó un análisis de correlación de rangos de Spearman para evaluar las relaciones entre los CON urinarios individuales, antioxidantes séricos y EGC urinaria. Se utilizó la χ ^{2 de prueba para comparar las distribuciones de los datos demográficos seleccionados, el hábito de fumar, consumo de alcohol y anticuerpos IgG frente a H
. pylori
entre casos y controles. Se utilizó el método de análisis de covarianza para examinar las diferencias en la media geométrica de nitrato urinario, el nitrito y los CON través de los diferentes niveles de tabaquismo, consumo de alcohol, o el estado serológico de H
. pylori
, la ingesta de verduras frescas de color verde oscuro, la ingesta de verduras saladas /escabeche, o la ingesta de carnes en conserva, pescado o huevos entre los únicos sujetos de control. El se utilizó Wilcoxon
método estadístico para evaluar la diferencia en la distribución de los CON urinario o sus precursores entre los casos y controles.}

método de regresión logística condicional se utilizó para evaluar las asociaciones entre los niveles de orina CON, el nitrato y el nitrito y el riesgo de cáncer gástrico [31]. Las asociaciones se midieron mediante la odds ratio (OR) y su correspondiente intervalo de confianza del 95% (IC) y
de P para las tendencias. Los sujetos del estudio fueron agrupados en tres niveles (bajo, intermedio y alto) basado en el tercil o bajas distribuciones altas /de los CON urinarias detectables entre todos los sujetos de control. La prueba de tendencia lineal para las asociaciones de riesgo de exposición a la enfermedad se basa en valores ordinales (0-2) para los tres niveles de exposición. También se examinó la asociación riesgo de cáncer gástrico en NOC-subgrupos estratificados por el consumo de cigarrillos (o nunca), el consumo de alcohol (o nunca), el estado serológico de H
. pylori
(negativa o positiva), los niveles de antioxidantes en suero (por debajo de y igual a o por encima de la mediana), o el nivel de EGC urinaria (por debajo de y igual a o por encima de la mediana), así como por subsitio de cáncer gástrico (cardias y no cardias). Para los análisis de subgrupos, conjuntos emparejados estaban rotas y regresión logística no condicional se utilizó para maximizar el tamaño de la muestra para el análisis estadístico estratificado. Los factores de apareamiento (edad, año de la recogida de muestras biológicas, y de vecindad de residencia al momento del reclutamiento) fueron incluidos en todos los modelos de regresión logística incondicional como covariables. La presencia de H
. riesgo pylori
anticuerpos en el suero, el tabaquismo, el consumo excesivo de alcohol, los niveles séricos de β-caroteno y vitamina C, y el nivel urinario de EGC se identificaron factores de protección /para el cáncer gástrico en esta población de estudio [28-30 , 32]. Estos factores se incluyeron en los modelos de regresión logística multivariable para examinar el efecto independiente de los CON sobre el riesgo de cáncer gástrico.

computación estadístico se realizó utilizando SAS versión 9.2 (SAS Institute Inc., Cary, NC). Todos los P 's
reportados son de dos caras, y los que tenían menos de 0,05 fue considerado estadísticamente significativo.

Resultados

La edad media (desviación estándar) del caso de pacientes con diagnóstico de cáncer fue de 63,4 (5,6) años. El intervalo medio de tiempo entre la recogida de muestras biológicas y diagnóstico de cáncer fue de 5,1 (3,0) años (que van desde 1 mes hasta 12 años). No hubo diferencia significativa en el índice de masa corporal (kg /m ^{2) o el nivel de educación entre los casos y controles. Las personas que desarrollaron cáncer gástrico consumen más cigarrillos y el alcohol, y tenían más probabilidades de ser seropositivos para anticuerpos IgG frente a H
. pylori
que sus controles emparejados (Tabla 1).}

Los coeficientes de correlación entre el nitrato, nitrito y cuatro CON varió entre 0,03 a la 0,70 (Tabla 2). El coeficiente de correlación más alta fue para NPRO con NTCA (r = 0,70), seguido de NPRO con nitrato de (r = 0,50) y por NTCA con NMTCA (r = 0,48). No había ninguna o débil correlación entre los CON urinario o sus precursores y mediciones antioxidantes incluyendo EGC urinaria y suero carotenoides, retinol, tocoferoles y la vitamina C (todos coeficientes de correlación < 0,25) (datos no mostrados)

Tabla 3. muestra medias geométricas de los CON urinario, nitrito y nitrato en los sujetos de control. bebedores regulares de alcohol duplicaron sus niveles de NMTCA urinaria en relación con los no bebedores. La asociación fue dependiente de la dosis; las medias geométricas de NMTCA fueron 1,70 (mg /g creatinina) para los no bebedores, 3,75 para < 2 bebidas /día y 4,21 para ≥2 bebidas /día ( P Opiniones de tendencia < 0,0001). Los fumadores o los positivos para anticuerpos frente a H
. pylori
se asociaron con un aumento significativo estadísticamente en el límite de nitrito urinario. No hubo relación significativa para otras CON urinario o sus precursores con el consumo de alcohol, el tabaquismo o antecedentes de H
. pylori gratis (Tabla 3). También se examinó la asociación entre las frecuencias de consumo de verduras frescas de color verde oscuro o alimentos en conserva y los niveles urinarios de los CON o sus precursores entre los sujetos de control. Alta frecuencia de consumo del total de conservas de carne, pescado y huevos combinados estaba asociado con altos niveles de NMTCA urinario ( P
para la tendencia = 0,032). No hubo asociación estadísticamente significativa entre la ingesta diaria de verduras frescas, en conserva /o conservas de carne /pescado /huevos y los niveles urinarios de nitrito u otros NOC (Tabla 3).

El alto consumo de verduras en vinagre salados /era inversamente asociado con los niveles de nitrato en orina en una forma dependiente de la dosis ( P
para la tendencia = 0,002), mientras que el alto consumo de verduras verdes frescas se asoció con un aumento estadísticamente no significativa en el nivel de nitrato en general ( P
para la tendencia = 0,248), aunque no hubo correlación entre las frecuencias de consumo de vegetales frescos y en conserva (r = 0,02, P
= 0,58). Se examinó el efecto modificador de verduras saladas /escabeche sobre la asociación entre el consumo de verduras frescas de color verde oscuro y los niveles urinarios de nitrato. Entre los controles que no consumieron salado /verduras en vinagre, las medias geométricas (95% IC) de nitrato urinario para individuos que consumen < 1, 1, y 2 o más veces /día de verduras verdes frescas fueron 206,0 (151,5-280,0) , 201,3 (144,4 a 280,5) y 523,0 (274-995,8) mg /g de creatinina, respectivamente ( P
para la tendencia = 0,069). Entre los controles que consumían una o más veces con vegetales salados o en salmuera por semana, las cifras correspondientes fueron de 141,9 (110-181,7), 154,8 (117,9 a 203,1) y 120,0 (70,9 a 202,6) mg /g de creatinina, respectivamente ( P
para la tendencia = 0,84). Hubo una interacción estadísticamente significativa entre el consumo de verduras de color verde oscuro y verduras frescas saladas /vinagre en el nivel urinaria de nitratos (p para la interacción = 0,037).

En la población de estudio, los niveles medios de nitrato urinario (170 -190 mg /g creatinina) fueron más de 20 veces superiores a las de nitrito (7-8 mg /g creatinina) en ambos casos y controles. Entre cuatro midieron los CON, NTCA estaba en el nivel más alto, seguido por NPRO y NMTCA mientras que NSAR estaba en el nivel más bajo; más de 60% de los sujetos de estudio fueron indetectables para NSAR en la orina. En general, no hubo diferencias significativas en las concentraciones urinarias de nitrato, nitrito o cualquier NOC medidos entre los pacientes con cáncer gástrico y sujetos control (Tabla 4). En comparación con los niveles bajos (es decir, indetectable o tercil inferior), niveles más altos de los CON individuales o sus precursores no se asociaron con un mayor riesgo de cáncer gástrico en todos los sujetos después del ajuste por el consumo de alcohol, el tabaquismo, H
. pylori
estado serológico, las mediciones de antioxidantes que incluían EGC urinaria y suero β-caroteno y vitamina C (Tabla 5).

Dado que la infección por H
. pylori
es una causa subyacente de cáncer gástrico, que también examinó las asociaciones entre los niveles urinarios de nitrato, nitrito y los CON individuales y el riesgo de cáncer gástrico por separado en los individuos positivos o negativos para H
. pylori
anticuerpos (Tabla 6). Entre los individuos negativos a H
. pylori anticuerpos
, nitrato urinaria elevada se asoció con un aumento del riesgo estadísticamente significativo de cáncer gástrico; las RUP multivariados ajustados (95% IC) para el segundo y tercer terciles de nitrato fueron 3,27 (0,76-14,03) y 4,82 (1,05-22,17), respectivamente, en comparación con el tercil más bajo ( P Opiniones de tendencia = 0,042). No hubo evidencia de efecto modificación de H
. pylori
estado serológico sobre la asociación entre el nitrito o cualquier NOC y el riesgo de cáncer gástrico (Tabla 6). También examinamos y encontramos ningún efecto modificador del hábito de fumar, consumo de alcohol, los niveles séricos de β-caroteno y vitamina C, y EGC urinaria sobre la asociación entre los CON o sus precursores y el riesgo de cáncer gástrico (datos no mostrados).

se examinó la asociación entre los niveles urinarios de nitrato, nitrito o los CON y el riesgo de cardias o no cardias cáncer. En general, no se encontró asociación estadísticamente significativa para los CON urinario o sus precursores con riesgo de cáncer, ya sea cardias o no cardias (datos no mostrados).

Discusión

A lo mejor de nuestro conocimiento, la Este estudio fue el primero en utilizar un enfoque biomarcador para investigar la asociación entre los cON y sus precursores y el riesgo de desarrollar cáncer gástrico en un estudio de cohorte prospectivo. Se observó una asociación positiva estadísticamente significativa entre el nitrato urinaria y el riesgo de cáncer gástrico entre los individuos negativos para los anticuerpos IgG frente a H
. pylori gratis (es decir, sin antecedentes de infección por H
. pylori
). Además, los niveles elevados de nitrito de orina estaban asociados con la seropositividad a H
. pylori
, lo que sugiere que la infección por H
. pylori
puede mejorar la reducción de nitrato a nitrito in vivo
. Por otra parte, el presente estudio demostró una novela relación dependiente de la dosis entre el consumo de alcohol y los niveles urinarios de NMTCA, lo que sugiere que el consumo de alcohol podría desempeñar un papel en la formación de los CON in vivo
.

La infección con H
. pylori
es un fuerte factor de riesgo para el cáncer gástrico [33]. La presencia de H
. pylori
en el estómago provoca daño inflamatorio en la mucosa del estómago, lo que puede mejorar la formación endógena de los CON en el estómago [18, 34, 35]. Un nivel elevado de nitrito urinaria en individuos seropositivos para anticuerpos frente a H
. pylori
apoya esta hipótesis que H
. pylori
puede contribuir al proceso de nitrificación en el estómago. El papel interactivo de H
. pylori
y N
compuestos -nitroso en el desarrollo de cáncer gástrico requiere más investigación.

Entre los individuos seronegativos para anticuerpos IgG frente a H
. pylori
, los niveles urinarios de nitrato, un precursor de N
compuestos -nitroso, se asocia positivamente con el riesgo de cáncer gástrico. La infección crónica por H
. pylori
es un factor de riesgo para el cáncer gástrico. No es sorprendente que la asociación entre el nitrato y el riesgo de cáncer gástrico fue más evidente entre las personas sin H
. pylori
infección, una población de riesgo relativamente bajo. Los resultados del presente estudio sugieren que el efecto del nitrato a través de la vía de nitrificación podría estar enmascarada por H
. pylori
, especialmente en el actual población de estudio donde H
. pylori
es altamente prevalente. Dado el pequeño tamaño de la muestra y múltiples problemas de comparación, la interpretación de los presentes hallazgos del estudio con una asociación positiva entre el nitrato urinaria y el riesgo de cáncer gástrico entre los individuos con negativo H
. pylori qué debería hacerse con precaución debido al posible hallazgo casual. Los futuros estudios con un mayor tamaño de muestra están garantizados para confirmar estos resultados.

Este estudio muestra que los niveles más altos de NMTCA en la orina de los bebedores de alcohol en comparación con los no bebedores. Los estudios han demostrado que la administración conjunta de acetaldehído (un metabolito de etanol), L-cisteína y nitrito aumentó significativamente la excreción urinaria de NMTCA en el hombre [24]. El presente estudio demostró por primera vez en los individuos que viven en libertad que el consumo de alcohol resultó en un aumento significativo del nivel de NMTCA urinaria. El consumo elevado de carnes conservadas (incluidas las de cerdo salada, carne curada, salchicha y jamón), pescado salado y los huevos conservados también se asoció con niveles elevados de NMTCA ( P
para la tendencia = 0,03). Nuestros resultados fueron consistentes con los resultados de un estudio reciente que muestra que NMTCA se detectaron a menudo en los productos cárnicos elaborados [36, 37]. pylori
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• PLOS ONE: Supervivencia Nomograma para resección curativa del cáncer gástrico coreanos Pacientes: Análisis retrospectivo multicéntrico con validación externa
• PLOS ONE: La sobreexpresión de E2F ARNm asociados con la progresión del cáncer gástrico Identificado por el factor de transcripción de los genes miARN y Co-Reguladora de Análisis de Redes