PLOS ONE: níveis urinários de N-nitroso compostos em relação ao risco de câncer gástrico: Resultados do Shanghai Cohort Study

Abstract

Fundo

compostos N
-nitroso estão pensados ​​para desempenhar um papel significativo no desenvolvimento de câncer gástrico. Os dados epidemiológicos, no entanto, são escassos em examinar as associações entre biomarcadores de exposição a N
compostos -nitroso eo risco de câncer gástrico.

Métodos

Um caso- aninhada estudo de controle dentro de uma coorte prospectiva de 18.244 homens de meia-idade e mais velhos em Xangai, China, foi conduzido para examinar a associação entre o nível urinária de N
-nitroso compostos e risco de câncer gástrico. Informações sobre demografia, ingestão habitual e uso de álcool e tabaco foram coletados através de entrevistas pessoais no ato da matrícula. níveis urinários de nitrato, nitrito, N
-nitroso-2-methylthiazolidine-4-carboxílico (NMTCA), N
-nitrosoproline (Npro), N
- nitrososarcosine (NSAr), N
ácido -nitrosothiazolidine-4-carboxílico (NTCA), bem como no soro H. pylori
foram quantificados em 191 casos de câncer gástrico e 569 controles pareados individualmente. método de regressão logística foi utilizada para avaliar a associação entre os níveis urinários de N
compostos -nitroso e risco de câncer gástrico.

Resultados

Em comparação com os controles, pacientes com câncer gástrico tinha níveis globais comparáveis ​​de nitrato urinário, nitrito, e N
compostos -nitroso. Entre os indivíduos seronegativos para anticorpos para H. pylori
, níveis elevados de nitrato urinário foram associados com risco aumentado de câncer gástrico. As odds ratio ajustada-multivariados para o segundo e terceiro tercis de nitrato foram 3,27 (intervalo de confiança de 95% = 0,76-14,04) e 4,82 (95% de intervalo de confiança = 1,05-22,17), respectivamente, em comparação com o tercil inferior ( P Compra de tendência = 0,042). Não houve associação estatisticamente significativa entre os níveis urinários de nitrito ou N
compostos -nitroso e risco de câncer gástrico. nível NMTCA urinário foi significativamente associada com o consumo de álcool e conservas de carne e peixe itens alimentares.

Conclusão

O presente estudo demonstra que a exposição ao nitrato, um precursor da N
compostos -nitroso, pode aumentar o risco de câncer gástrico entre os indivíduos sem história de H. pylori
infecção

citação:. Xu L, Qu Y-H, Chu X-D, Wang R, Nelson HH, Gao Y-T, et al. (2015) níveis urinários de N
-nitroso compostos em relação ao risco de câncer gástrico: Os resultados do Shanghai Cohort Study. PLoS ONE 10 (2): e0117326. doi: 10.1371 /journal.pone.0117326

Editor do Academic: Jeffrey S. Chang, Institutos Nacionais de Pesquisa em Saúde, TAIWAN

Recebido: 30 de julho de 2014; Aceito: 21 de dezembro de 2014; Publicação: 06 de fevereiro de 2015

Direitos de autor: © 2015 Xu et al. Este é um artigo de acesso aberto distribuído sob os termos da Licença Creative Commons Attribution, que permite uso irrestrito, distribuição e reprodução em qualquer meio, desde que o autor original ea fonte sejam creditados

Disponibilidade de dados: Todos os dados relevantes estão dentro do papel

Financiamento:. Research informou nesta publicação foi apoiada pelo National Cancer Institute dos Institutos Nacionais de Saúde com os números de concessão R01CA043092, R01CA129534 e R01CA144034. O conteúdo é da exclusiva responsabilidade dos autores e não representam necessariamente as opiniões oficiais dos Institutos Nacionais de Saúde. Os financiadores não tiveram nenhum papel no desenho do estudo, coleta de dados e análise, decisão de publicar ou preparação do manuscrito

CONFLITO DE INTERESSES:.. Os autores declararam que não existem interesses conflitantes

Introdução

Apesar da diminuição das taxas de incidência e mortalidade de câncer de estômago em todo o mundo ao longo das últimas três décadas, o câncer gástrico é o quarto câncer mais comumente diagnosticado ea terceira causa mais comum de morte por câncer [1]. Mesmo se a actual tendência de declínio da taxa continua, desta neoplasia permanecerá como um dos cancros mais comuns em todo o mundo devido ao envelhecimento das populações atuais em regiões de alto risco [2]. Uma característica distintiva do câncer gástrico é a variação geográfica notável nas taxas de incidência e mortalidade em todo o mundo. Leste da Ásia tem a maior taxa de incidência de câncer gástrico com mais de 60 por 100.000 pessoas-ano, significativamente maior do que as taxas na América do Norte e da África que são abaixo de 9 por 100.000 [3]. A diminuição considerável nas taxas de incidência de câncer gástrico nos migrantes japoneses para os Estados Unidos em relação aos seus homólogos no Japão nas últimas décadas sugerem que fatores ambientais desempenham um papel importante no desenvolvimento do câncer gástrico [4]. Assim, a identificação de fatores de risco ambientais para o câncer gástrico seria informar as estratégias para a prevenção primária contra esta doença maligna.

N
-nitroso compostos (NOCs) mostraram efeitos carcinogénicos em estudos experimentais. Aproximadamente 300 NOCs foram testados para carcinogenicidade em experimentos de laboratório, com 90% deles demonstrando efeitos cancerígenos através de diferentes espécies de animais, incluindo primatas superiores [5, 6]. Certos NOCs foram classificados como "provavelmente cancerígeno para os seres humanos" pela Agência Internacional de Investigação do Cancro (IARC) [7]. De acordo com o relatório de 2010 IARC, nitrato ingerido ou nitrito sob condições que resultam em nitrosação endógena é provavelmente cancerígeno para os seres humanos [8]. Os seres humanos são expostos a CON de fontes exógenas e de síntese endógena. NOCs exógenos provêm directamente de certos tipos de alimentos, tais como carnes processadas, peixe salgado ou fumado, e em conserva e legumes secos [9]. Os dados disponíveis sugerem que NOCs nos alimentos são encontrados com mais frequência e em maior concentração, na Ásia do que os países ocidentais [10]. CON endógenos são formados a partir de nitrosação de aminas secundárias ou amidas por N _{2O 3 e (H 2NO 2) ^{+, ambos os quais são agentes de nitrosação derivado de nitrito. Nitrito poderia derivar quer directamente a partir de alimentos, ou indiretamente de redução de nitrato por bactérias orais e entéricas [11-14]. formação endógena de NOCs é provavelmente catalisada pelo ferro heme presente na carne vermelha [15, 16]. Nos seres humanos, nitrosação ocorre no ambiente mais acídico, tal como o estômago, especialmente onde o nível de vitamina C antioxidante é baixa, do que em ambiente neutro [17]. reacções de nitrosação pode ser reforçada por certas bactérias, bem como em determinadas condições inflamatórias tais como rebentamento oxidativo [18]. Cerca de 45% -75% NOCs que os seres humanos estão expostos é derivado de síntese endógena [19]. Os indivíduos com alta exposição a NOCs são supor para estar em maior risco de desenvolver câncer gástrico.}}

Estudos epidemiológicos, examinando a associação entre NOCs ou resultados inconsistentes alimentos contendo NOC eo risco de câncer gástrico têm produzido [20]. Estas inconsistências foram provavelmente devido a erros de medida na avaliação da exposição à CON na maioria, se não todos, os estudos epidemiológicos, bem como à falta de informação sobre co-factores que têm impacto sobre a nitrosação endógena [8]. Uma abordagem biomarcador que avalia CON totais (isto é, a soma de ambos exógeno e fontes endógenas) iria ultrapassar algumas destas limitações e aumentar a validade dos resultados. No presente estudo, nós quantificada níveis urinários de nitrato e nitrito, dois precursores de CON, assim como N
-nitroso-2-methylthiazolidine-4-carboxílico (NMTCA), N
-nitrosoproline (Npro), N
-nitrososarcosine (NSAr), e N
ácido -nitrosothiazolidine-4-carboxílico (NTCA) 4 grandes CON não voláteis presentes na urina humana [19 ]. A meia-vida de CON individuais varia de várias horas a vários dias. O Npro e NSAr são excretados na urina quase inalterada, e proporcional à dose administrada por via oral no modelo de rato [21]. O in vivo
administração de nitrato e N
precursores -nitrosamine tem mostrado alta eficiência na produção de NMTCA, NTCA e Npro [22, 23]. Assim monitoramento Npro ou outras NOCs excretados na urina parecia ser um procedimento adequado para estimar a exposição humana diária para ambos os NOCs endógenos e exógenos [21, 22, 24]. Este estudo foi aninhada dentro da Shanghai Cohort Study, uma coorte prospectiva de 18.244 homens de meia-idade e mais velhos, em Xangai, China. O objetivo principal do presente estudo foi avaliar a associação entre os níveis urinários de NOCs e seus precursores e risco de câncer gástrico. O objectivo secundário do estudo foi investigar o efeito modificador potencial de infecção com o H
. pylori
bactérias, consumo de álcool, tabagismo e soro /medição antioxidante urinária sobre a associação do câncer NOC-gástrica. [25]

Materiais e Métodos

Estudo da População

o design do Xangai Estudo coorte tenha sido descrita em detalhe noutro local [26, 27]. Resumidamente, foram selecionados quatro pequenas comunidades geograficamente definidas por uma vasta área da cidade de Shanghai por um, o câncer de coorte epidemiológico prospectivo para o estudo da exposição ambiental e câncer. elencos completos de todos os residentes nestas comunidades selecionadas para a identificação das pessoas elegíveis foram obtidos a partir de estações de polícia locais. Os critérios de elegibilidade eram homens entre 45 e 64 anos de idade que não tinham histórico de câncer. Entre janeiro de 1986 e setembro de 1989, 18.244 homens (~ 80% dos sujeitos elegíveis) participaram do estudo. Cada participante foi entrevistado na pessoa usando um questionário estruturado extrair informação sobre a demografia, uso de álcool e tabaco, dieta habitual adulto, e história médica. Na conclusão da entrevista, uma amostra de sangue sem jejum de 10 ml e um único vazio (isto é, local) amostra de urina foram recolhidas a partir de cada participante. As amostras de sangue e urina foram colhidas geralmente 17:00-21:00 e colocada num congelador (~ 4 ° C) imediatamente após a colheita. Múltiplas alíquotas de soro e urina de cada sujeito foram preparadas e armazenadas a -70 ° C. A partir de cada objecto um frasco de 25 ml de urina foi misturado com 100 mg de hidróxido de sódio (NaOH), antes de ser armazenado a -70 ° C para armazenamento a longo prazo. Todos os participantes deram seu consentimento por escrito para a participação deste estudo no momento da inscrição. O formulário de consentimento para a entrevista e coleta de biospecimens no início do estudo foi aprovado pelo Institutional Review Board do Instituto do Câncer Shanghai, Xangai, China. Todos os participantes da coorte sobreviventes também desde que o seu consentimento por escrito para continuar a participar no estudo de coorte durante o follow-up anual entrevistas pessoais. O formulário de consentimento para a participação continuada deste estudo foi aprovado pelo Institutional Review Boards do Instituto do Câncer de Xangai e da Universidade de Pittsburgh. Este estudo foi aprovado pelo Institutional Review Boards do Instituto Shanghai Câncer, da Universidade de Minnesota, e da Universidade de Pittsburgh.

dieta atual foi avaliada através de um questionário de freqüência alimentar que incluía 45 itens alimentos que apresentam comumente consumidos alimentos locais em Xangai, China, no início dos anos 1980. follow-up anual para cânceres incidentes e mortes tem sido realizado desde 1986. Todos os participantes sobreviventes foram contactados em pessoa anualmente para estado vital e diagnóstico do cancro. Também foi realizada a análise de ligação registro com bases de dados de registro de câncer e Xangai Municipal de Estatísticas Vitais Xangai. Até o final de 2012, apenas 609 (3,3%) participantes da coorte originais foram perdidos para a nossa entrevista anual de acompanhamento. Além disso, 573 (3,1%) indivíduos recusou o nosso pedido para entrevistas anuais de acompanhamento, embora o seu câncer e status vital ter sido verificado e atualizado através da ligação recorde anual analisa. Assim, o follow-up para a incidência de câncer e morte entre os participantes da coorte estava quase completa. O presente estudo incluiu 197 pacientes com câncer gástrico incidente cujo diagnóstico inicial foi feito entre a data da inscrição e março de 1998. Os diagnósticos de 179 (91%) cancros foram baseadas em evidência histopatológica. Os restantes 18 (9%) casos foram diagnosticados com base no imagina radiográficos com evidências consistentes clínica (n = 14) ou atestado de óbito somente (n = 4). Havia 45 pacientes com câncer de cárdia gástrica e 146 de não-cárdia.

Para cada caso, escolhemos três indivíduos do grupo controle aleatoriamente entre todos os participantes elegíveis do estudo de coorte que preencheram os critérios de correspondência. Todos os três controles escolhidos foram pareados individualmente para casos referenciados pela idade (± 2 anos), mês e ano de coleta biospecimen e bairro de residência no recrutamento.

Ensaios Laboratoriais

As alíquotas de urina amostras dos pacientes foram retirados do repositório biospecimen e depois divididos em conjuntos de caso-controle pareado. Todas as amostras de urina 4 dentro de um determinado conjunto combinado de caso-controle (ou seja, 1 caso e 3 controles) foram dispostas em uma ordem aleatória e testado no mesmo lote para todas as medições de laboratório. O status das amostras de urina de teste caso /controle estava cego para o pessoal de laboratório.

NSAr, Npro, NTCA e NMTCA foram analisados ​​por cromatografia gasosa acoplada com analisador de energia térmica (GC-TEA), de acordo com o método descrito anteriormente [22]. Resumidamente uma aliquota ml de urina tratado com NaOH 7,5 foi extraída 3 vezes com 20 mL de metanol-diclorometano (1: 9, v /v) após a adição de 75 ng N
ácido -nitrosopipecolic (NPIC) como interna padrão, 2,0 g de cloreto de sódio (NaCl), e 1,5 mL de solução de sulfamato de amónio a 20% em 1,8 H
H _{2SO4. Os extractos combinados foram secos sobre sulfato de sódio anidro e concentrou-se até à secura num evaporador rotativo a 30 ° C, e derivatizado em 2 ml de éter com um excesso de diazometano (preparada com 2 g N-Metil-
N
-nitroso-p-tolueno-sulfonamida, 60 ml de éter, 12 ml de hidróxido de potássio a 60% e 12 ml de metanol) .A éster metílico do cinco N
-nitrosamino ácidos em solução etérea foi concentrada até 0,1 ml e quantificado com uma alíquota de 10 ul por GC-TEA. Para a cromatografia de gás, numa coluna de vidro (2 m mm x 3 mm d.i.) empacotada com 5% de FFAP sobre Chromosorb WHP (80-100 mesh) foi utilizado a uma temperatura de 180 ° C. A temperatura do orifício de injecção da cromatografia gasosa foi de 200 ° C, e a taxa de fluxo do gás azoto transportando foi de 50 ml /min. Para a análise de energia térmica, a temperatura do pirolisador foi de 500 ° C, a interface foi de 200 ° C, e o vácuo a 0,9 mm Hg. As recuperações de NSAr, Npro, NMTCA, e NTCA adicionados a 30 ug /L de cada foram 75%, 79%, 91% e 96%, respectivamente. Os limites de detecção variou de 0,1 a 0,5 g /L, dependendo do composto.}

nitrato e nitrito foram analisados ​​de acordo com o método descrito anteriormente com algumas modificações [25]. O cádmio foi preparado pela reacção de zinco com sulfato de cádmio de 20%. A solução tampão de cloreto de amónio foi ajustado para pH 9,6-9,7. As amostras de urina foram deproteined antes da medição de nitrito e nitrato foi realizada. Amostra de urina foi ajustado a pH 8-9, a mistura foi incubada a 50-60 ° C durante 10 min, em seguida 2 ml de 12% de ZnSO foi adicionado <sub>4 solução e incubou-se a 50-60 ° C durante mais 10 min, e um adicional de 0,5 ml N
NaOH foi adicionado antes de o conteúdo arrefecida até à temperatura ambiente. Após a adição de 17,6 ml de água, a amostra foi passada através de papel de filtro e o filtrado foi recolhido após descartar o primeiro 10 ml de filtrado. Para a medição de nitrito, 5 ml de 0,5% de sulfanilamida e 2 ml de 0,5% N
- (1-naftil) etilenodiamina di-hidrocloreto foi adicionado a 10 ml de alíquota do filtrado descrito acima, antes de a absorvância da solução final foi lido a 540 nm. Para a determinação do nitrato, 5 ml de NH 4Oh solução tampão e 18 ml de água foi adicionada a 2 ml de filtrado antes de ser passado através de uma coluna de CD em 3-5 ml /min. A coluna foi lavada com 15 ml de água e o efluente combinado recolhido. Após a adição de 5 ml de 0,5% de sulfanilamida e 2 ml de 0,5% de N- (1-naftil) dicloridrato de etilenodiamina, a absorvância da solução final foi lida a 540 nm, depois de repousar durante 20 min. As concentrações finais de nitrito e nitrato foram calculados utilizando a curva padrão. Para fins de controle de qualidade, dois lotes de amostras de urina com três repetições cada, que estavam cegos para o pessoal do laboratório foram dispersos entre as amostras de teste. Os coeficientes inter-ensaio intra e de variação para todos os CONs e seus precursores medidos foram 4-15% e 12-33 %%, respectivamente.</sub>

Uma história de infecção com o H
. pylori
foi determinada por detecção de anticorpos séricos de imunoglobulinas G (IgG) para H
. pylori
-usando um ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA) descrito anteriormente [28]. Este ELISA foi desenvolvido e validado usando H
. pylori
cepas que eram prevalentes na população do estudo [28]. Os métodos para a quantificação de antioxidantes, incluindo os carotenóides séricos (isto é, α-caroteno, β-caroteno, β-criptoxantina, licopeno, luteína /zeaxantina, retinol, α-tocoferol, γ-tocoferol e de vitamina C) e catequinas urinárias incluindo epigallocatchin ( EGC) foram descritos em relatórios anteriores desta população de estudo [29, 30].

Análise estatística

de 197 casos e 591 controles, amostras de urina de 6 casos (18 e seus controles pareados) e adicional de 4 controles tinha faltando valores de uma ou mais medidas urinário. Portanto, o presente estudo incluiu 191 casos e 569 indivíduos controles pareados após a exclusão destes indivíduos com valores em falta nas análises primárias. Além disso, nós adicionamos ensaio de nitritos urinária tardia nas amostras de estudo e apresentaram valores de nitrito em 104 casos e apenas 308 controles pareados, em que se baseia toda a análise estatística envolvendo nitrito urinário.

As concentrações de nitrato urinário, nitritos e 4 CON medidos foram expressos como ug /g de creatinina para ter em conta variando o teor de água na urina em diferentes indivíduos. As distribuições das concentrações destes analitos urinários foram marcadamente enviesada com alguns indivíduos possuindo valores elevados, que foram normalizados, em grande medida, pela sua transformação logarítmica. Portanto, os testes estatísticos formais sobre valores contínuos de NOCs, nitrato e nitrito foram realizados em valores logaritmicamente transformadas. Spearman análise de correlação foi realizada para avaliar as relações entre NOCs urinário individuais, antioxidantes séricos e EGC urinário. A χ ^{2 teste foi utilizado para comparar as distribuições de dados demográficos selecionados, tabagismo, consumo de álcool e de anticorpos IgG para o H
. pylori
entre casos e controles. O método da análise da covariância foi usado para examinar as diferenças na média geométrica de urinária nitrato, nitrito e NOCs em diferentes níveis de tabagismo, consumo de álcool, ou o status sorológico de H
. pylori
, a ingestão de vegetais verde-escuros frescos, consumo de salgados /legumes em conserva, ou ingestão de conservas de carnes, peixes ou ovos entre apenas indivíduos controle. O Wilcoxon
método estatístico foi utilizado para avaliar a diferença nas distribuições de NOCs urinário ou seus precursores entre casos e controles.}

método de regressão logística condicional foi utilizada para avaliar as associações entre os níveis de urinária NOCs, nitrato e nitrito eo risco de câncer gástrico [31]. As associações foram medidas pelo odds ratio (OR) e seus correspondentes de 95% intervalo de confiança (IC) e
de P para as tendências. Os sujeitos do estudo foram agrupados em três níveis (baixo, intermediário e alto) com base na tertile ou altas /baixas distribuições de NOCs urinário detectáveis ​​entre todos os indivíduos do grupo controle. O teste de tendência linear para as associações de risco de exposição à doença foi baseado em valores ordinais (0-2) para os três níveis de exposição. Nós também examinaram a associação do risco de câncer NOC-gástrica em subgrupos estratificados por tabagismo (ou nunca), consumo de álcool (ou nunca), o status sorológico de H
. pylori
(positivo ou negativo), os níveis de antioxidantes no soro (inferior e igual ou superior a mediana), ou o nível de EGC urinária (abaixo e igual ou superior a mediana), bem como por subsítio de cancro gástrico (cárdia e não-cárdia). Para as análises de subgrupo, conjuntos combinados foram quebrados e regressão logística incondicional foi utilizada para maximizar o tamanho da amostra disponível para análise estatística estratificada. Os fatores correspondentes (idade, ano da coleta biospecimen, e de vizinhança de residência no recrutamento) foram incluídos em todos os modelos de regressão logística incondicional como co-variáveis. A presença de H
. risco pylori
anticorpos no soro, tabagismo, consumo excessivo de álcool, os níveis séricos de β-caroteno e vitamina C, eo nível urinária de EGC foram identificados /fatores de proteção para o câncer gástrico na população estudada [28-30 , 32]. Esses fatores foram incluídas nos modelos de regressão logística multivariada ao examinar o efeito independente de NOCs sobre o risco de câncer gástrico.

computação estatística foi realizada utilizando SAS versão 9.2 (SAS Institute Inc., Cary, NC). Todos P '
s relatados são frente e verso, e aqueles que eram menos do que 0,05 foram considerados estatisticamente significativos.

Resultados

A idade média (desvio padrão) dos pacientes de casos no momento do diagnóstico do câncer foi de 63,4 (5,6) anos. O intervalo de tempo médio entre a coleta biospecimen e diagnóstico de câncer foi de 5,1 (3,0) anos (variando de 1 mês a 12 anos). Não houve diferença significativa no índice de massa corporal (kg /m ^{2) ou nível de ensino entre casos e controles. Os indivíduos que desenvolveram câncer gástrico consumido mais cigarros e álcool, e foram mais susceptíveis de serem soropositivos para anticorpos IgG para H
. pylori
do que seus controles (Tabela 1).}

Os coeficientes de correlação entre nitrato, nitrito e quatro NOCs variou 0,03-0,70 (Tabela 2). O coeficiente de correlação mais elevado era de Npro com NTCA (r = 0,70), seguido por com nitrato de Npro (r = 0,50) e por NTCA com NMTCA (r = 0,48). Não havia nenhuma ou fraca correlação entre os CON urinário ou dos seus precursores e as medições antioxidantes incluindo EGC urinária e de soro carotenóides, retinol, tocoferóis e vitamina C (todos os coeficientes de correlação < 0,25) (dados não mostrados)

Tabela 3. mostra médias geométricas de NOCs urinário, nitrito e nitrato entre os indivíduos do grupo controle. bebedores de álcool regulares duplicou os seus níveis de urinária NMTCA relação ao abstêmios. A associação foi dependente da dose; as médias geométricas da NMTCA foram 1,70 (mg /g creatinina) para os não-bebedores, 3,75 para < 2 bebidas /dia e 4,21 para ≥2 bebidas /dia ( P Compra de tendência < 0,0001). Fumantes ou aqueles positivo para anticorpos para H
. pylori
foram associados a elevação estatisticamente significativa limítrofe de nitrito urinário. Não houve relação significativa para outras NOCs urinário ou seus precursores com o consumo de álcool, tabagismo ou história de H
. pylori
(Tabela 3). Nós também examinaram a associação entre as frequências de ingestão de vegetais verde-escuros frescos ou conservas e níveis urinários de NOCs ou seus precursores entre indivíduos controle. frequência elevada ingestão de um total de conservas de carne, peixe e ovos combinada foi associada a altos níveis de NMTCA urinária ( P Compra de tendência = 0,032). Não houve associação estatisticamente significativa entre a ingestão dietética de /legumes frescos, conservados ou conservas de carne /peixe /ovos e níveis urinários de nitrito ou outras NOCs (Tabela 3).

A alta ingestão de salgados /legumes em conserva foi inversamente associados ao nível de nitrato urinário em uma forma dependente da dose ( P Compra de tendência = 0,002), enquanto que o consumo elevado de vegetais verde-escuros frescos foi associado com um aumento estatisticamente não significativa no nível de nitratos em geral ( P
de tendência = 0,248), embora não houve correlação entre as frequências de ingestão de legumes frescos e preservados (r = 0,02, P
= 0,58). Foi examinado o efeito modificador de salgados /legumes em conserva sobre a associação entre a ingestão de vegetais verdes escuros frescos e níveis urinários de nitrato. Entre os controles que não consumiam salgados /legumes em conserva, as médias geométricas (95% IC) de nitrato urinário para os indivíduos consumindo < 1, 1 e 2 ou mais vezes /dia de vegetais verde-escuros frescos foram 206,0 (151,5-280,0) , 201,3 (144,4-280,5) e 523,0 (274-995,8) mg /g de creatinina, respectivamente ( P Compra de tendência = 0,069). Entre os controles que consumiram uma ou mais vezes de legumes salgados ou conservados por semana, os valores correspondentes foram de 141,9 (110-181,7), 154,8 (117,9-203,1) e 120,0 (70,9-202,6) mg /g de creatinina, respectivamente ( P Compra de tendência = 0,84). Houve uma interação estatisticamente significativa entre a ingestão de vegetais verde-escuros frescos e /legumes em conserva salgados em nível urinária de nitrato (P para interação = 0,037).

Na população estudada, os níveis medianos de nitrato urinário (170 -190 mg /g creatinina) tinham mais de 20 vezes superiores aos de nitrito (7-8 mg /g creatinina) em ambos os casos e controles. Entre quatro CON medido, foi NTCA no nível mais elevado, seguida de Npro e NMTCA Considerando NSAr era pelo menor; mais de 60% dos sujeitos do estudo eram indetectáveis ​​para NSAr na urina. No geral, não houve diferença significativa nas concentrações urinárias de nitrato, nitrito ou qualquer NOCs medidos entre pacientes com câncer gástrico e controles (Tabela 4). Em comparação com os níveis baixos (isto é, indetectável ou menor tercil), níveis mais altos de NOCs individuais ou seus precursores não foram associados com o risco aumentado de câncer gástrico em todos os sujeitos após o ajuste para o consumo de álcool, tabagismo, H
. pylori
estado sorológico, medições antioxidantes que incluiu EGC urinária e soro β-caroteno e vitamina C (Tabela 5).

Dado que a infecção com H
. pylori
é uma causa subjacente de câncer gástrico, que também examinou as associações entre os níveis urinários de nitrato, nitrito e NOCs individuais e risco de câncer gástrico separadamente em indivíduos positivos ou negativos para o H
. pylori
anticorpos (Tabela 6). Entre os indivíduos negativos para H
. pylori
, nitrato urinária elevada foi associada a um aumento estatisticamente significativo do cancro gástrico; as RUP-ajustada multivariada (IC95%) para o segundo e terceiro tercis de nitrato foram 3,27 (0,76-14,03) e 4,82 (1,05-22,17), respectivamente, em comparação com o tercil inferior ( P Compra de tendência = 0,042). Não havia nenhuma evidência de modificação do efeito de H
. pylori
estado sorológico sobre a associação entre o nitrito ou qualquer NOCs e risco de câncer gástrico (Tabela 6). Também examinamos e não encontrou nenhum efeito modificador de tabagismo, consumo de álcool, os níveis de soro β-caroteno e vitamina C, e EGC urinária sobre a associação entre NOCs ou seus precursores e risco de câncer gástrico (dados não mostrados).

foi examinada a associação entre os níveis urinários de nitrato, nitrito ou NOCs e risco de cárdia ou não-cárdia câncer. No geral não houve associação estatisticamente significativa foi encontrada para NOCs urinário ou seus precursores com risco de qualquer cárdia ou câncer não-cárdia (dados não mostrados).

Discussão

Para o melhor de nosso conhecimento, a presente estudo foi o primeiro utilizando uma abordagem biomarcador para investigar a associação entre NOCs e seus precursores e o risco de desenvolver câncer gástrico em um estudo prospectivo de coorte. Observou-se uma associação positiva estatisticamente significativa entre o nitrato urinário e risco de câncer gástrico entre indivíduos negativos para anticorpos IgG para o H
. pylori
(isto é, sem história de infecção com o H
. pylori
). Além disso, níveis elevados de nitrito urinário foram associados com a soropositividade para H
. pylori
, sugerindo que a infecção com o H
. pylori
pode aumentar a redução de nitrato em nitrito in vivo
. Além disso, o presente estudo demonstrou uma relação dose-dependente romance entre o consumo de álcool e níveis urinários de NMTCA, sugerindo que a ingestão de álcool pode desempenhar um papel na formação de NOCs in vivo
.

A infecção com H
. pylori
é um forte fator de risco para câncer gástrico [33]. A presença de H
.
pylori no estômago provoca danos inflamatória na mucosa do estômago, o que pode melhorar a formação endógena de CON no estômago [18, 34, 35]. Um nível elevado de nitrito urinário em indivíduos soropositivos para anticorpos para H
. pylori
apoia esta hipótese de que H
. pylori
pode contribuir para o processo de nitrosação no estômago. O papel interativa de H
. pylori
e N
compostos -nitroso no desenvolvimento de câncer gástrico requer uma investigação mais aprofundada.

Entre os indivíduos seronegativos para os anticorpos IgG para o H
. pylori
, os níveis urinários de nitrato, um precursor da N
compostos -nitroso, foram associados positivamente com o risco de câncer gástrico. A infecção crônica com o H
. pylori
é um fator de risco estabelecido para câncer gástrico. Não é de surpreender que a associação entre o nitrato eo risco de câncer gástrico foi mais evidente entre os indivíduos sem H
. pylori
infecção, uma população de risco relativamente baixo. Os resultados do presente estudo sugerem que o efeito de nitrato através da via nitrosation poderia ser mascarada pela H
. pylori
, especialmente na população do presente estudo onde H
. pylori
é altamente prevalente. Dado o pequeno tamanho da amostra e várias questões de comparação, a interpretação dos achados do estudo com uma associação positiva entre o nitrato urinário e risco de câncer gástrico entre os indivíduos com negativo H
. pylori
devem ser feitas com cautela devido à possibilidade de descoberta casual. Os estudos futuros com uma amostra maior são necessários para confirmar estes resultados.

Este estudo mostra que níveis mais elevados de NMTCA na urina de consumidores de álcool em comparação com os não-bebedores. Estudos têm demonstrado que a co-administração de acetaldeído (um metabolito de etanol), L-cisteína e nitrito aumentou significativamente a excreção urinária de NMTCA no homem [24]. O presente estudo demonstrou pela primeira vez em indivíduos de vida livre que o consumo de álcool resultou num aumento significativo do nível de NMTCA urinária. Alta ingestão de conservas de carnes (incluindo carne de porco salgada, carne curada, salsicha e presunto), peixe salgado e ovos conservados também foi associado com níveis elevados de NMTCA ( P Compra de tendência = 0,03). Nossos resultados foram consistentes com o resultado de um estudo recente mostrando que NMTCA foram frequentemente detectadas em produtos de carne processada [36, 37].

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